[LT] Deacetil-10 bakatino III gavimo būdas iš įvairių kukmedžio (Taxus sp.) dalių jas apdorojant vandeniu, o po to ekstrahuojant tinkamu organiniu tirpikliu arba absorbuojant iš vandeninio tirpalo ant atitinkamo nešiklio ir tada deacetil-10 bakatiną III, desorbuojant tam tinkančiu tirpikliu, o vėliau selektyviai deacetil-10 bakatiną III iškristalinant.
[EN]
[0001] Šis išradimas nagrinėja gavimo būdą vertingų tarpinių produktų, tinkančių taksolo (taxol), Taksotero (Taxotere) arba jų analogų gamybai pusiau sintetiniais metodais iš augalų įvairių dalių, turinčių šių tarpinių produktų.
[0002] Konkrečiai išradimas nagrinėja selektyvų deacetil-10 bakatino III gavimą iš įvairių rūšių kukmedžio žievės, stiebo, šaknų arba lapų.
[0003] Taksolis, Taksoteras ir jų analogai, turi bendrą for-mulę
[0004]
[0005] pasižymi puikiomis priešvėžinėmis ir priešleukeminėmis savybėmis, yra puikūs cheminės terapijos preparatai, gydant kai kurias vėžio rūšis, tokias kaip krūties, prostatos, gaubiamosios žarnos, skrandžio, inkstų arba gimdos ir ypač kiaušidės vėžys.
[0006] Būtent bendroje formulėje (I) Ar gali būti fenilo radikalas, kartais turintis pavaduotojų, R gali būti vandenilio atomas, acetilo radikalas arba karbamoilo N-pavaduotasis radikalas, R' yra vandenilio atomas arba karbamoilo N-pavaduotasis radikalas ir R, gali būti fenilo radikalas arba R2-0- radikalas, kuriame R2 yra alkanoilo, alkenilo, alkinilo, cikloalkanoilo, cikloal-kenilo, bicikloalkanoilo, fenilo arba heterociklilo radikalas .
[0007] Taksolas (taxol) yra produktas, turintis bendrą formu-lę (I), kurioje Ar ir R: yra fenilo radikalai, R yra acetilo radikalas ir R' yra vandenilio atomas.
[0008] Taksoteras (Taxotere) yra produktas, turintis bendrą formulę (I), kurioje Ar yra fenilo radikalas, R ir R1 yra vandenilio atomai ir Rj yra t.butoksi radikalas.
[0009] Gamtini, taksoli,, kurio maži kiekiai yra įvairių rūšių kukmedžiuose, sunku išskirti visai nesunaikinant augalo. Pavyzdžiui, taksolis gali būti išskirtas C.H.O. HUANG et coli., J. Natl. Prod. 49,665 (1986) metodu, kuri, sudaro tokios operacijos: Taxus brevifolia sutrinta žievė yra apdorojama metanoliu, ekstraktas koncentruojamas, koncentratas esktrahuoj amas dichlormetanu, vėl koncentruojamas, likutis disperguoj amas heksano-acetono mišinyje (tūrio santykis 1:1), tirpstanti dalis valoma chromatografiškai praleidžiant per Florisil koloną, gautas nevalytas taksolis yra valomas iš eilės perkristalinant iš metanolio-vandens ir heksanas-acetonas mišinių, tada vėl chromatografiškai valomas ir vėl kristalinamas. Taip išskirtas taksolo kiekis sudaro nuo 0,005 iki 0,017 % sunaudotos augalo dalies.
[0010] Taksoteras, kuris neegzistuoja gamtoje, gali būti paga-mintas pusiau sintetiniu būdu iš deacetil-10 bakatino III, turinčio formulę
[0011] būdais, kurie aprašyti pavyzdžiui, JAV patentuose Nr. 4 814 470 arba Nr. 4 924 012 arba tarptautinėje paraiškoje PCT W0 92/09589.
[0012] Taksolis taip pat gali būti gaunamas būdais, kuriuose yra panaudojamas deacetil-10 bakatinas III arba pereinant per tarpini, produktą Taksotero, esant są-lygoms, aprašytoms JAV patentuose Nr. 4 857 653 arba esterinant bakatiną III, esant sąlygoms, aprašytoms patentuose EP Nr. 400 971 arba EP Nr. 428 376 arba esterinant deacetil-10 bakatiną III ir ji, acetilinant, esant sąlygoms, aprašytoms JAV patentuose Nr. 4 924 011.
[0013] Įvairios kukmedžio rūšys ( Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cupidata, Taxus floridana, Taxus media, Taxus wallichiana) turi taksano (taxane) darinių, iš kurių svarbiausi iš esmės yra taksolis ir deacetil-10 bakatinas III. Iš kitų darinių ypač pažymėtinas cefalomaninas, deacetil-10 cefalomaninas arba bakatinas III, galimai susijungęs su cuk-rais .
[0014] Be to, deacetil-10 bakatino III kiekis lapuose paprastai yra daug didesnis negu taksolio kiekis, kurio yra žievėje, kamiene arba lapuose.
[0015] Iš to seka, kad ypač svarbu yra turėti deacetil-10 bakatino III, iš kurio galima pagaminti daug didesnius kiekius taksolio, negu jo tiesiogine ekstrakcija iš kukmedžio arba ji, gaminant iš Taksotero.
[0016] Ekstrahuojant deacetil-10 bakatiną III iš kukmedžio lapų, augalas nėra visiškai sunaikinamas, ir jo lapai vėl gali būti panaudoti iš naujo po kiekvieno augimo ciklo.
[0017] Bendrai visi žinomi taksano darinių ekstrakcijos iš įvairių kukmedžio dalių (žievė, kamienas, šaknys, lapai, ...) būdai reikalauja chromatografinės technikos panaudojimo, kuri yra ilga ir brangi ir kuri neleidžia pilnai kiekybiškai išskirti augaluose esanti, taksaną.
[0018] Deacetil-10 bakatinas III gali būti gaunamas su išeiga, artima 300 mg iš 1 kg lapų ( Taxus baccata), panaudojant procesą, kurio metu spygliai mirkomi etanolyje, po to ekstrahuojami organiniu tirpikliu, tokiu kaip metileno chloridas, ir tada chromatografuojama pagal metodą, aprašytą JAV patente Nr. 4 814 470.
[0019] Įvairūs taksano dariniai, esantys įvairiose kukmedžio dalyse, gali būti išskirstyti skysčių chromatografijos atvirkščių fazių metodais, kurie yra aprašyti tarp-tautinėje paraiškoje PCT WO Nr. 92/07842. Šie metodai iš esmės apima kukmedžio nevalyto ekstrakto chroma-tografini, apdorojimą skystoje fazėje atvirkščių fazių principu, praleidžiant pro sorbentą, ant kurio pri-sijungia taksano dariniai, tada jie išskirstomi ir atskiriami. Pagal ši, būdą galima gauti 200 mg deacetil-10 bakatino III iš vieno kg sausų sutrintų lapų.
[0020] Dabar yra rasta, kad deacetil-10 bakatinas III gali būti labai selektyviai ekstrahuotas su puikia išeiga iš įvairių kukmedžio dalių ir ypač iš lapų paprastu būdu nenaudojant chromatografinės technikos, kas ir sudaro šio išradimo objektą. Pavyzdžiui, yra galima eks-trahuoti apie 800 mg deacetil-10 bakatino III iš vieno kilogramo kukmedžio ( Taxus baccata) lapų.
[0021] Pagal ši, išradimą deacetil-10 bakatinas III yra atskiriamas iš kukmedžio lapų vandeninio ekstrakto.
[0022] 1)sutrintų kukmedžio ( Taxus sp. ) dalių apdorojimo vandeniu, 2)deaceti1-10 bakatino III vandeninio tirpalo atskyrimas nuo suspenduotos augalinės masės, 3)deaceti1-10 bakatino III ekstrakcija iš vandeniniotirpalo organiniu tirpikliu, 4)organinio ekstrakto, turinčio deacetil-10 bakatino III, atskyrimas nuo vandens fazės, 5)organinio tirpiklio pašalinimas iš gauto organinioekstrakto, 6)selektyvus deacetil-10 bakatino III kristalinimas išgauto likučio tirpalo organiniame tirpiklyje, 7)išvalyto deacetil-10 bakatino III atskyrimas nuo tirpalo.
[0023] 1)susmu1kintų kukmedžio ( Taxus sp . ) dalių apdorojimasvandeniu, 2) vandeninio deacetil- 10 bakatino III tirpalo atskyrimas nuo suspenduotos augalinės masės, 3) deacetil- 10 bakatino III adsorbavimas iš vandeninio tirpalo ant tinkamo sorbento ( nešiklio), 4) deacetil- 10 bakatino III desorbcija organiniu tirpikliu, 5) organinio tirpiklio pašalinimas iš desorbato, 6) selektyvus deacetil- 10 bakatino III kristalinimas iš gauto likučio tirpalo organiniame tirpiklyje, 7) išvalyto deacetil- 10 bakatino III atskyrimas nuo tirpalo .
[0024] Pagal išradimą procesui gali būti panaudotos visos tu-rimo kukmedžio dalys, tokios kaip žievė, kamienas, šak-nys arba lapai. Pagal išradimą procesui gali būti nau-dojamas i, vairių rūšių kukmedis, bet pirmenybė teikiama Taxus baccata , Taxus brevifolia , Taxus canadensis , Taxus cupidata , Taxus floridana , Taxus media arba Taxus wallichiana. Ypač naudinga vartoti kukmedžio ( Taxus baccata , Taxus brevifolia ) lapus, kurie turi didžiausią deacetil- 10 bakatino kieki,. Panaudojamos augalo dalelės gali būti nuo 0, 5 iki kelių milimetrų dydžio. Patogumo dėlei gali būti naudinga vartoti daleles mažesnes kaip 1 mm dydžio. Susmulkintos kukmedžio dalys, prie progos džiovintos ir ne, gali būti gaunamos smulkinimo ir džiovinimo operacijų pagalba, kurios vykdomos po užšal-dymo ir atšildymo šviežių augalo dalių, prieš užšaldymą ir atšildymą, arba įsiterpti tarp užšaldymo ir atšildymo.
[0025] Susmulkintų kukmedžio dalių apdorojimas vandeniu vykdomas pagal techniką, žinomą šios srities specia-listams. Konkrečiai, vandeninis tirpalas, turintis deacetil- 10 bakatino III, paprastai yra gaunamas maišant susmulkintas kukmedžio dalis vandenyje, esant tempe-ratūrai nuo 20 iki 65 C nuo 30 minučių iki 2 valandų. Naudojamo vandens kieki, galima keisti plačiose ribose, vis dėlto geriau vartoti nuo 2 iki 10 litrų vandens kiekvienam kilogramui išdžiovintų ir susmulkintų augalo dalių ir geriausia 5 litrus vandens 1 kg apdorojamų augalo dalių. Yra naudinga vartoti demineralizuotą vandeni, ir apdorojimą atlikti veikiant ultragarsu.
[0026] Norint padidinti išeigą gali būti naudinga atlikti keletą augalinės masės apdorojimų vandeniu, norint gauti vandeninius tirpalus, iš kurių ekstrahuojamas deacetil-10 bakatinas III, esant toliau aprašytoms są-lygoms .
[0027] Gautas vandeninis tirpalas, turintis deacetil-10 bakatino III, yra atskiriamas nuo augalinės masės panaudojant vieną iš įprastinių būdų, tokių kaip filt-ravimas, centrifugavimas arba dekantavimas. Gautas van-deninis tirpalas atšaldomas ir gali būti apdorojamas vienu iš nurodytų būdų: 1) deacetil-10 bakatinas III per vieną arba kelis kartus yra ekstrahuojamas organiniu tirpikliu. Ypač tinkami šiai operacijai organiniai tirpikliai yra parenkami iš eterių, tokių kaip metil-t.butilo eteris, etil-t.butilo eteris, metil-n.butilo eteris, metil-n.amilo eteris, etil-t.amilo eteris, t.butil izopropilo eteris, etil izobutilo eteris, t.butil-n.propilo eteris ar etil-n.heksilo eteris, arba alifatinių esterių, to-kių kaip etilo acetatas, propilo acetatas, izopropilo acetatas, n.butilo acetatas, t.butilo acetatas, metilo t.butilo acetatas, t.butilo propionatas arba t.amilo acetatas. Ypač tinkami yra metil-t. butilo eteris, etil-t.butilo eteris, etilo acetatas ir n.butilo acetatas .
[0028] Ekstrakcija organiniu tirpikliu vykdoma iš vandeninio tirpalo, kurio pH mažesnis už 7 ir dar geriau kai pH mažesnis už 6.
[0029] Organiniai ekstraktai, turintys deacetil-10 bakatino III, yra atskiriami nuo vandens fazės panaudojant įprastinę techniką, tokią kaip dekantacija.
[0030] Organiniai ekstraktai gali būti plaunami arba vandeniniu silpnos bazės tirpalu (pavyzdžiui, vandeniniu natrio karbonato tirpalu) arba vandeniu. Išdžiovinus ekstraktą, organinis tirpiklis iš jo pašalinamas įpras-tiniais metodais, konkrečiai - distiliavimu, arba distiliavimu prie sumažinto slėgio, ir gaunamos paprastai kietos nuosėdos, iš kurių išskiriamas deacetil-10 bakatinas III. 2) deacetil-10 bakatinas III yra adsorbuojamas iš vandeninio tirpalo ant tinkamo nešiklio. Kaip sorbentas yra naudojama adsorbuojanti derva, kuri parenkama geriausia iš plistiren divinilbenzeno dervų.
[0031] Deacetil-10 bakatino III desorbcija yra vykdoma plaunant nešikli, tinkamu organiniu tirpikliu. Kaip tirpikli, geriausia naudoti alifatini, alkoholi,, turinti, nuo 1 iki 3 anglies atomų, o ypač etanoli,.
[0032] Organinis tirpiklis paprastai yra atskiriamas nuo ne-šiklio filtravimu, paskui koncentruojamas iki sauso bū-vio paprastai distiliavimu arba distiliavimu, esant sumažintam slėgiui, kol gaunamas kietas likutis, iš kurio išskiriamas deacetil-10 bakatinas III.
[0033] Vienu ar kitu būdu gauto nevalyto deacetil-10 bakatino III selektyvus kristalinimas vykdomas iš tirpalo, gaunamo ištirpinus sausą likuti, organiniame tirpiklyje arba jų mišinyje. Kaip tirpikliai, tinkantys deacetil-10 bakatino III selektyviam kristalinimui, gali būti sėkmingai naudojami nitrilai, tokie kaip aceto-nitrilas, propionitrilas, izobutironitrilas, pasirinktinai sumaišyti su alifatiniais alkoholiais, tokiais kaip metanolis, etanolis, propanolis, izopropanolis ar n.butanolis, arba alifatiniu esteriu, tokiu kaip etilo acetatas, izopropilo acetatas, n.butilo acetatas, arba su alifatiniu ketonu, tokiu kaip metiletilketonas, metilpropilketonas, metil-n.butilketonas, ar metilizo-butilketonas. Ypač naudinga vykdyti selektyvų krista-linimą acetonitrile, turinčiame etanolio, arba etilo acetato, arba n.butilacetato, arba acetono.
[0034] Nusėdę deacetil-10 bakatino III kristalai gali būti atskirti filtravimu, dekantavimu arba centrifugavimu.
[0035] Išrastas gavimo būdas leidžia gauti praktiškai gryną deacetil-10 bakatiną III, su išeiga paprastai daug di-desne negu anksčiau žinomų gavimo būdų. Gavimo būdas pagal ši, išradimą leidžia beveik kiekybiškai išskirti praktiškai visą deacetil-10 bakatiną III, esanti, įvai-riose augalo dalyse, o ypač lapuose.
[0036] Deacetil-10 bakatinas III gautas šiame išradime apra-šytu būdu gali būti panaudojamas taksolio. Taksotero ir jų darinių gavimui, esant sąlygoms, aprašytoms išradimų patentuose: EP Nr. 0 253 738, EP Nr. 0 253 739, EP Nr. 0 336 841, EP Nr. 336 840, WO Nr. 92 09589, EP Nr. 0 400 971, EP Nr. 0 428 376.
[0037] Išrasti gavimo būdai gali būti pailiustruoti tokiais pavyzdžiais.
[0038] Į 2,5 litro demineralizuoto ir iki 50°C pašildyto vandens i,dėti 500 g išdžiovintų ir susmulkintų iki dale-lių, mažesnių už 1 mm kukmedžio ( Taxus baccata) lapų, kuriuose deacetil-10 bakatino III kiekis nustatytas didelės skiriamosios galios skysčių chromatografija (HPLC) yra 0,08 % (arba 400 mg deacetil-10 bakatino III 500 g lapų) . Esant 50°C 1 valandą maišyti ir po to nufiltruoti.
[0039] Filtratas (1,8 litro), kurio pH 5,4, yra 3 kartus ekstrahuojamas po 0,9 litro etilo acetato. Sujungta organinė fazė (2,7 litro) yra 2 kartus plaunama 1 litru 0,1 M natrio karbonato tirpalo, po to 2 kartus plaunama 1 litru demineralizuoto vandens ir galiausiai išdžio-vinama ant natrio sulfato. Po filtravimo ir kon-centravimo iki pilno išdžiūvimo gaunama 3,2 g kietos medžiagos, kuri vėl ištirpinama 9 cm3 acetonitrilo, esant temperatūrai artimai 70°C. Tirpalą atšaldžius iki + 4°C ir šioje temperatūroje išlaikius per naktį, susidaro nuosėdos, kurios atskiriamos filtravimu. Jas iš-džiovinus gaunama 245 mg kristalų, HPLC analizės duomenimis, turinčių 75 % gryno deacetil-10 bakatino III.
[0040] Augalinė masė, sugėrusi 0,7 litro vandens, yra 2 kartus ekstrahuojama aukščiau aprašytomis sąlygomis. Vandeni-niai filtratai sujungiami ir apdorojami kaip anksčiau. Gaunama 2,5 g kietos medžiagos, kuri ištirpinama 5 cmJ acetonitrilo, esant 70°C temperatūrai. Atšaldžius iki + 4 C per nakti, susidaro nuosėdos, kurias nufiltravus ir išdžiovinus gaunama 169 mg kristalų, HLPC analizės duomenimis, turinčių 75 % deacetil-10 bakatino III arba 127 mg grynos medžiagos. Po kristalinimo likęs tirpalas HLPC analizės duomenimis turi 47 mg deacetil-10 bakatino III.
[0041] Visas vandeniu ekstrahuotas deacetil-10 bakatino III kiekis yra 183 + 40 + 127 + 47 = 397 mg.
[0042] 3 litrai demineralizuoto vandens pašildomi iki 50°C, tada įdedama 500 g išdžiovintų ir susmulkintų iki 1 mm diametro dalelių kukmedžio lapų, kuriuose deacetil-10 bakatino III kiekis nustatytas didelės skiriamosios galios skysčių chromatografija (HPLC) yra 0,08 % (arba 400 mg deacetil-10 bakatino III 500 g lapų). Esant 50°C 1 valandą maišoma ir tada filtruojama. Filtratas (1,97 litro) , kurio pH 5,15, yra parūgštinamas koncentruota druskos rūgštimi iki pH 4,6 ir filtruojamas per as-bestinio kartono lakštą Seitz'o filtre. Gaunama 1,8 litro filtrato.
[0043] 300 cm 3 filtrato yra ekstrahuojami 2 kartus po 150 cm3 tada 4 kartus po 60 cm metil-tret.butilo eterio (MTBE). Sujungti ekstraktai sukoncentravus duoda 620 mg kietos medžiagos, kuri ištirpinama 3 cm3 acetonitrilo, esant 7 0 C.
[0044] Atšaldžius iki + 4°C ir išlaikius per na k t i,, išfilt-ruojama 28 mg kristalinio deacetil-10 bakatino III, HPLC analizės duomenimis turinčio 90 % grynos medžiagos. Po kristalinimo likęs vandeninis tirpalas turi 12,8 mg deacetil-10 bakatino III, (pagal HPLC).
[0045] 2 litrų talpos mikseryje su demineralizuotu vandeniu sutrinti 1 kg šviežiai nuskintų kukmedžio ( Taxus baccata) lapų, kuriuose yra 69 % vandens ir (pagal HPLC analizės duomenis) 651 mg/kg deacetil-10 bakatino III.
[0046] Trynimas atliekamas per 10 nuoseklių operacijų, kiek-vieną kartą imant po 100 g lapų ir 500 cmJ vandens esant temperatūrai artimai 20°C. Gautas mišinys yra filtruojamas per medvilnini, audini,, paskui per po-pierių, plaunant iš viso 200 cmJ vandens. Surenkama 5000 cm'1 filtrato arba 84,9 % bendro vandens tūrio (panaudotas vanduo ir vanduo buvęs lapuose) . Gautas van-deninis tirpalas turi 72 g sausos medžiagos, kurioje yra 550 mg deacetil-10 bakatino III HPLC analizės duomenimis arba praktiškai teorinis kiekis 552,7 mg (84,9 % nuo 651 mg). Deacetil-10 bakatino III likučiai, esantys vandenyje, įsigėrusiame i, augalinę masę, gali būti išgauti tą masę plaunant vandeniu.
[0047] Vandeninis tirpalas (5000 cm') yra praleidžiamas per 5 cm diametro koloną, kurios 10 cm aukščio yra užpil-dyta polistirendivinilbenzeno derva (Amberchrom CG 161 md1'" (Tosohaas, Suttgart, Vokietija).
[0048] Derva plaunama vandeniu, išdžiovinama, paskui pervedama i, suspensiją metanolyje.
[0049] Nufiltravus ir filtratą sukoncentravus iki sauso būvio gaunama 15,5 g likučio, kuris ištirpinamas 100 cmJ etilo acetato. Filtravimu atskiriama 8,7 g netirpaus produkto, tada filtratas sukoncentruojamas iki 5 cm' tūrio. Įdedama 30 cm acetonitrilo. Gaunamas skaidrus tirpalas, kuriame labai greitai pasirodo balti kristalai. Išlaikius vieną nakti, +4°C temperatūroje, balti kristalai atskiriami filtravimu ir išdžiovinami. Gaunama 548 mg deacetil-10 bakatino III, solvatuoto viena molekule acetonitrilo, išeiga 92 %.
[0050] HPLC su vidine normalizacija analizė rodo, kad šie kristalai turi 82 % deacetil-10 bakatino III.
[0051] Taigi deacetil-10 bakatino III išeiga yra 75,4 %.
1. Deacetil-10 bakatino III gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatiną III gauna iš įvairių kukmedžio ( Taxus sp.) dalių vandeninio ekstrakto.
2. Deacetil-10 bakatino III gavimo būdas pagal 1 api-brėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad:1)sutrintas kukmedžio dalis apdoroja vandeniu,2) nuo augalinės masės suspensijos vandenyje atskiria vandenini, tirpalą, turinti, deacetil-10 bakatino III,3) iš vandeninio tirpalo deacetil-10 bakatiną III ekstrahuoja organiniu tirpikliu,4) deacetil-10 bakatino III organini, ekstraktą atskiria nuo vandens fazės,5) nuo gauto organinio ekstrakto atskiria tirpikli,,6) likuti, tirpina organiniame tirpiklyje ir deacetil-10bakatiną III selektyviai kristalina,7)atskiria išvalytą deacetil-10 bakatiną III.3. Gavimo būdas pagal 1 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad:
1)sutrintas kukmedžio dalis apdoroja vandeniu,2) nuo augalinės masės suspensijos vandenyje atskiria vandenini, tirpalą, turinti, deacetil-10 bakatino III,3) iš vandeninio tirpalo deacetil-10 bakatiną III ekstrahuoja organiniu tirpikliu,4) deacetil-10 bakatino III organini, ekstraktą atskiria nuo vandens fazės,5) nuo gauto organinio ekstrakto atskiria tirpikli,,6) likuti, tirpina organiniame tirpiklyje ir deacetil-10bakatiną III selektyviai kristalina,7)atskiria išvalytą deacetil-10 bakatiną III.3. Gavimo būdas pagal 1 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad:1)sutrintas kukmedžio ( Taxus sp. ) dalis apdoroja vandeniu,
2) nuo augalinės masės suspensijos vandenyje atskiria vandenini, tirpalą, turinti, deacetil-10 bakatino III,
3) iš vandeninio tirpalo deacetil-10 bakatiną III adsorbuoja ant tinkamo nešiklio (sorbento), 4)deaceti 1-10 bakatiną III desorbuoja organiniu tirpikliu,
5) iš desorbato pašalina organini, tirpikli,,6)likutį tirpina organiniame tirpiklyje ir deacetil-10bakatiną III selektyviai kristalina,7)atskiria gryną deacetil-10 bakatiną III.4. Gavimo būdas pagal 2,3 apibrėžties punktus, b e s i-sskiriantis tuo, kad iš anksto išdžiovintas ir sutrintas kukmedio dalis maišo su vandeniu, esant temperatūrai tarp 20 ir 65°C.5. Gavimo būdas pagal 4,5 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad sutrintas ir, jei reikia, išdžiovintas kukmedžio dalis gauna smulkinimo ir džio-vinimo operacijų metu, kurios gali būti atliekamos prieš šviežių augalo dalių užšaldymą ir atšildymą, arba įsiterpti tarp užšaldymo ir atšildymo, arba eiti po užšaldymo ir atšildymo šviežių augalo dalių.6. Gavimo būdas pagal 4 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad naudoja nuo 2 iki 4 litrų vandens kiekvienam kilogramui išdžiovintų ir sutrintų augalo dalių.7. Gavimo būdas pagal 4-6 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad naudoja demineralizuotą vandeni.8. Gavimo būdas pagal 4-6 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad operuojama veikiant ultragarsu.9. Gavimo būdas pagal 2 ar 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatino III vandeninį tirpalą nuo suspenduotos augalinės masės atskiria filtravimu, centrifugavimu arba dekantavimu.10. Gavimo būdas pagal 1 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad iš vandeninio tirpalo deacetil-10 bakatiną III ekstrahuoja organiniu tirpikliu, parinktu iš eterių ir alifatinių esterių tarpo.11. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organinis tirpiklis parenkamas iš metil-t.butilo eterio, etil-t.butilo eterio, metil-n.butilo eterio, metil-n.amilo eterio, etil-t.amilo eterio, t.butilizopropilo eterio, etilizo-butilo eterio, t.butil-n.propilo eterio, etil-n.heksilo eterio, etilo acetato, propilo acetato, izopropilo acetato, n.butilo acetato, t.butilo acetato, metilo t.butilacetato, t.butilo propionato, t.amilo acetato.12. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpikli, parenka iš metil-t.butilo eterio, etil-t.butilo eterio, etil-acetato ir n.butilacetato.13. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad operuojama su vandeniniu tirpalu, kai pH yra mažesnis už 7.14. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad vandeninio tirpalo pH yra mažesnis už 6.15. Gavimo būdas pagal 2 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatino III organini, ekstraktą nuo vandeninio tirpalo atskiria dekantavimu.16. Gavimo būdas pagal 2 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad iš organinio ekstrakto, turinčio deacetil-10 bakatino III, tirpikli, pašalina išplaunant vandeniniu silpnos bazės tirpalu, arba vandeniu, arba distiliavimu.17. Gavimo būdas pagal 16 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad iš organinio ekstrakto tirpikli, pašalina distiliuojant sumažintame slėgyje.18. Gavimo būdas pagal 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad produktą adsorbuoja iš vandeninio tirpalo jį praleidžiant per dervą.19. Gavimo būdas pagal 18 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad derva yra polistirendivi-nilbenzenas.20. Gavimo būdas pagal 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatino III desorbciją nuo dervos vykdo organiniu tirpikliu.21. Gavimo būdas pagal 20 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpikli, parenka iš alifatinių alkoholių, turinčių nuo 1 iki 3 anglies atomų.22. Gavimo būdas pagal 21 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organinis tirpiklis yra metanolis.23. Gavimo būdas pagal 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpalą, turinti, deacetil-10 bakatino III, koncentruoja iki visiško iš-džiūvimo .24. Gavimo būdas pagal 23 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad koncentravimą vykdo distiliuojant, arba distiliuojant sumažintame slėgyje.25. Gavimo būdas pagal 2 arba 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad likutį, gautą pašalinus organini, tirpiklį, ištirpina kitame organiniame tirpiklyje arba jų mišinyje ir deacetil-10 ba-katiną III selektyviai kristalina.26. Gavimo būdas pagal 25 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpikli, parenka iš alifatinių nitrilų, pasirinktinai sumaišytų su alifatiniu alkoholiu, alifatinių esteriu arba alifatinių ketonu.27. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad nitrilai yra parenkami iš acetonitrilo ar propionitrilo.28. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad alifatini, alkoholi, parenka iš metanolio, etanolio, izopropanolio ir n-bu-tanolio.29. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad alifatini, esteri, pasirenka iš etilo acetato, izopropilo acetato, n.butilo acetato ar t.butilo acetato.30. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad alifatini, ketoną pasirenka iš acetono, metiletilketono, metilpropil-ketono, metil-n.butilketono, metilizobutilketono.31. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad selektyvų kristalinimą vykdo acetonitrile, pasirinktinai sumaišytame su eta-noliu arba etilo acetatu, arba n.butilo acetatu, arba acetonu .32. Gavimo būdas pagal 2 ar 6 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakati-ną III atskiria filtravimu, dekantavimu arba centrifugavimu .33. Gavimo būdas pagal 1-32 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakati-ną III išskiria iš kukmedžio žievės, kamieno, šaknų arba iš lapų.34. Gavimo būdas pagal 1-32 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakati-ną III išskiria iš kukmedžio lapų.35. Gavimo būdas pagal 33 arba 34 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad kukmedis priklauso vienai iš rūšių: Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cuspidanta, Taxus floridana, Taxus media arba Taxus wallichiana.36. Deacetil-10 bakatino III, gauto nuo 1 iki 36 api-brėžties punktuose aprašytais būdais, panaudojimas Taksolo (taxol), Taksotero (Taxotere) arba jų dariniams gaut i.37. Deacetil-10 bakatinas III, kuris yra gautas įdiegus vieną iš gavimo būdų, aprašytų 1-35 apibrėžties punktuose .
6)likutį tirpina organiniame tirpiklyje ir deacetil-10bakatiną III selektyviai kristalina,7)atskiria gryną deacetil-10 bakatiną III.4. Gavimo būdas pagal 2,3 apibrėžties punktus, b e s i-sskiriantis tuo, kad iš anksto išdžiovintas ir sutrintas kukmedio dalis maišo su vandeniu, esant temperatūrai tarp 20 ir 65°C.5. Gavimo būdas pagal 4,5 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad sutrintas ir, jei reikia, išdžiovintas kukmedžio dalis gauna smulkinimo ir džio-vinimo operacijų metu, kurios gali būti atliekamos prieš šviežių augalo dalių užšaldymą ir atšildymą, arba įsiterpti tarp užšaldymo ir atšildymo, arba eiti po užšaldymo ir atšildymo šviežių augalo dalių.6. Gavimo būdas pagal 4 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad naudoja nuo 2 iki 4 litrų vandens kiekvienam kilogramui išdžiovintų ir sutrintų augalo dalių.7. Gavimo būdas pagal 4-6 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad naudoja demineralizuotą vandeni.8. Gavimo būdas pagal 4-6 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad operuojama veikiant ultragarsu.9. Gavimo būdas pagal 2 ar 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatino III vandeninį tirpalą nuo suspenduotos augalinės masės atskiria filtravimu, centrifugavimu arba dekantavimu.10. Gavimo būdas pagal 1 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad iš vandeninio tirpalo deacetil-10 bakatiną III ekstrahuoja organiniu tirpikliu, parinktu iš eterių ir alifatinių esterių tarpo.11. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organinis tirpiklis parenkamas iš metil-t.butilo eterio, etil-t.butilo eterio, metil-n.butilo eterio, metil-n.amilo eterio, etil-t.amilo eterio, t.butilizopropilo eterio, etilizo-butilo eterio, t.butil-n.propilo eterio, etil-n.heksilo eterio, etilo acetato, propilo acetato, izopropilo acetato, n.butilo acetato, t.butilo acetato, metilo t.butilacetato, t.butilo propionato, t.amilo acetato.12. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpikli, parenka iš metil-t.butilo eterio, etil-t.butilo eterio, etil-acetato ir n.butilacetato.13. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad operuojama su vandeniniu tirpalu, kai pH yra mažesnis už 7.14. Gavimo būdas pagal 10 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad vandeninio tirpalo pH yra mažesnis už 6.15. Gavimo būdas pagal 2 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatino III organini, ekstraktą nuo vandeninio tirpalo atskiria dekantavimu.16. Gavimo būdas pagal 2 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad iš organinio ekstrakto, turinčio deacetil-10 bakatino III, tirpikli, pašalina išplaunant vandeniniu silpnos bazės tirpalu, arba vandeniu, arba distiliavimu.17. Gavimo būdas pagal 16 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad iš organinio ekstrakto tirpikli, pašalina distiliuojant sumažintame slėgyje.18. Gavimo būdas pagal 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad produktą adsorbuoja iš vandeninio tirpalo jį praleidžiant per dervą.19. Gavimo būdas pagal 18 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad derva yra polistirendivi-nilbenzenas.20. Gavimo būdas pagal 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakatino III desorbciją nuo dervos vykdo organiniu tirpikliu.21. Gavimo būdas pagal 20 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpikli, parenka iš alifatinių alkoholių, turinčių nuo 1 iki 3 anglies atomų.22. Gavimo būdas pagal 21 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organinis tirpiklis yra metanolis.23. Gavimo būdas pagal 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpalą, turinti, deacetil-10 bakatino III, koncentruoja iki visiško iš-džiūvimo .24. Gavimo būdas pagal 23 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad koncentravimą vykdo distiliuojant, arba distiliuojant sumažintame slėgyje.25. Gavimo būdas pagal 2 arba 3 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad likutį, gautą pašalinus organini, tirpiklį, ištirpina kitame organiniame tirpiklyje arba jų mišinyje ir deacetil-10 ba-katiną III selektyviai kristalina.26. Gavimo būdas pagal 25 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad organini, tirpikli, parenka iš alifatinių nitrilų, pasirinktinai sumaišytų su alifatiniu alkoholiu, alifatinių esteriu arba alifatinių ketonu.27. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad nitrilai yra parenkami iš acetonitrilo ar propionitrilo.28. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad alifatini, alkoholi, parenka iš metanolio, etanolio, izopropanolio ir n-bu-tanolio.29. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad alifatini, esteri, pasirenka iš etilo acetato, izopropilo acetato, n.butilo acetato ar t.butilo acetato.30. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad alifatini, ketoną pasirenka iš acetono, metiletilketono, metilpropil-ketono, metil-n.butilketono, metilizobutilketono.31. Gavimo būdas pagal 26 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad selektyvų kristalinimą vykdo acetonitrile, pasirinktinai sumaišytame su eta-noliu arba etilo acetatu, arba n.butilo acetatu, arba acetonu .32. Gavimo būdas pagal 2 ar 6 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakati-ną III atskiria filtravimu, dekantavimu arba centrifugavimu .33. Gavimo būdas pagal 1-32 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakati-ną III išskiria iš kukmedžio žievės, kamieno, šaknų arba iš lapų.34. Gavimo būdas pagal 1-32 apibrėžties punktus, besiskiriantis tuo, kad deacetil-10 bakati-ną III išskiria iš kukmedžio lapų.35. Gavimo būdas pagal 33 arba 34 apibrėžties punktą, besiskiriantis tuo, kad kukmedis priklauso vienai iš rūšių: Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cuspidanta, Taxus floridana, Taxus media arba Taxus wallichiana.36. Deacetil-10 bakatino III, gauto nuo 1 iki 36 api-brėžties punktuose aprašytais būdais, panaudojimas Taksolo (taxol), Taksotero (Taxotere) arba jų dariniams gaut i.37. Deacetil-10 bakatinas III, kuris yra gautas įdiegus vieną iš gavimo būdų, aprašytų 1-35 apibrėžties punktuose .