[LT] Šis išradimas susijęs su pieno pramone, konkrečiai, su inhibitorių pieno produktuose nustatymo būdais.@Išradimo tikslas -padidinti pieno kontrolės tikslumą.@Būdas numato bandinio paruošimą, pasterizavimą, mikrobitestų, turinčių jautrios test - kultūros Bacillus subtilis sporų, sumirkymą, hermetišką įpakavimą, termostatavimą ir mikrobitestų spalvos įvertinimą.@Nauja šiame būde tai, kad prieš pasterizavimą sauso pieno produkto svėrinį praskiedžia distiliuotu vandeniu, o pradinio produkto ir distiliuoto vandens santykis atitinkamai turi būti 1:2,5 ± 0,5.
[EN]
[0001] Šis išradimas susijęs su pieno pramone, o būtent, su inhibitorių pieno produktuose nustatymo būdais.
[0002] Žinomas inhibitorių pieno produktuose nustatymo būdas (buv. TSRS autorinis liudijimas Nr. 857866, TPK G01 N 33/04), pavyzdžiui, sūriuose ir varškėje, tačiau jis nėra jautrus: juo galima nustatyti apie 0,05 TV penicilino grame, apie 0,02 % formalino ir apie 0,05 % vandenilio peroksido. Toks jautrumas nepakankamas, kadangi pagal medicininius - biologinius reikalavimus ir sanitarines maisto žaliavų ir produktų kokybės normas (Mediko - biologičeskije trebovanija i sanitarnyje normy kačestva prodovolstvennogo syrja i piščevych produktov. Utv. ministerstvom zdravoochranenija SSSR 01 08 1989, Nr. 5061-89, rus.) piene ir pieno produktuose leidžiama mažiau kaip 0,01 TV penicilino grame.
[0003] Artimiausias šiam išradimui yra buv. TSRS autorinis liudijimas Nr. 1682926, TPK G01 N 33/04, kuriame aprašomas inhibitorių piene nustatymo būdas, numatantis bandinio paruošimą, pasterizavimą, mikrobitesto, turinčio jautrios test - kultūros Bacillus subtilis sporų, sumirkymą jame, hermetišką įpakavimą, termostatavimą ir mikrobitesto spalvos įvertinimą. Šio būdo rtūkumas toks, kad būdo jautrumas pienui yra daugiau kaip 0,01 TV penicilino 1 cm3, ~ 0,005 % formalino ir daugiau kaip 0,01 % vandenilio peroksido. Sausiems pieno produktams, skirtiems eksportui į užsienį leidžiami dar mažesni inhibitorių kiekiai, pvz., 0,004-0,005 TV penicilino 1 cm3 atstatyto pieno.
[0004] Išradimo tikslas- kontrolės tikslumo padidinimas pieno produktuse.
[0005] Šis tikslas pasiekiamas inhibitorių pieno produkte nustatymo būdu, numatančiu bandinio paruošimą, pasterizavimą, mikrobitesto, turinčio jautrios test - kultūros Bacillus subtilis sporų, sumirkymą jame, hermetišką įpakavimą, termostatavimą ir mikrobitesto spalvos įvertinimą. Pagal šį išradimą prieš pasterizavimą sauso pieno produkto svėrinys praskiedžiamas distiliuotu vandeniu, o pradinio produkto ir ir distiliuoto vandens santykis turi būti 1:2,5 ± 0,5.
[0006] Kiekvienas šio išradimo skiriamasis požymis susijęs su jo tikslu.
[0007] Pradinio produkto svėrinio praskiedimas distiliuotu vandeniu 1:2,5 ± 0,5 leidžia nustatyti 3-4 kartus didesnę inhibitorių koncentraciją atstatytame produkte, negu praskiedus santykiu 1:9 (pagal GOST 9225-84. Moloko i moločnyje produkty. Metody mikrobiologičeskogo issledovanija, rus.), kai prie 10 g sausų pieno produktų pridedama 90 cm3 sterilaus fiziologinio tirpalo. Vietoje fiziologinio tirpalo naudojamas distiliuotas vanduo, kaip ir sausų pieno produktų atstatymui cheminių analizių atlikimui (GOST 8764-73. Konservy moločnyje. Metody ispytanij, rus.). Distiliuoto vandens panaudojimas sausų pieno produktų atstatymui nepadidina druskų koncentracijos, kuri ir šiaip padidėja, mažesniu laipsniu praskiedus produktą
[0008] (vietoje santykiol:9 -1:2,5± 0,5). Vadinasi, jei, pavyzdžiui, atstatytuose pagal minėtą GOST 8764-73 lieso pieno milteliuose nustatome daugiau kaip 0,01 TV/cm3 penicilino, pvz., 0,02 TV/cm3, —0,005 % formalino ir daugiau kaip 0,01 % vandenilio peroksido, tai atstatytuose pagal šį išradimą lieso pieno milteliuose, nustatydami tas pačias inhibitorių koncentracijas, faktiškai nustatome 3-4 mažesnes inhibitorių koncentracijas, negu įprastiniu būdu atstatytame sausame piene, t. y. ~ 0,004-0,005 TV/cm3 penicilino, ~ 0,001-0,002 % formalino ir ~ 0,004-0,005 % vandenilio peroksido.
[0009] Mažinant sauso pieno praskiedimo laipsnį, didėja baltymų, riebalų, laktozės ir mineralinių medžiagų kiekis, o tai gali paveikti kultūros augimą. Ištyrėme, kaip produkto praskiedimo laipsnis veikia kultūros Bacillus subtilis augimą.
[0010] Mažesnis negu 2 kartus, pvz., 1,8, praskiedimo laipsnis netinka todėl, kad kai kuriais atvejais slopina test - kultūros Bacillus subtilis augimą. Tokiu laipsniu praskiestame bandinyje sunku sumirkyti mikrobitestą dėl jo tirštumo, be to, produkto praskiedimo 2 kartus pakanka pasiekti norimą metodo tikslumą. Didesnis negu 3 kartus praskiedimo laipsnis, pvz., 3,5 karto neturi neigiamo poveikio Bacillus subtilis augimui, bet jis nėra tinkamas norint pasiekti pageidaujamą metodo tikslumą. Taigi , kiekvienas skiriamasis išradimo požymis būtinas, esminis, kartu ir visumoje su bendrais esminiais prototipo požymiais pakankami tikslui pasiekti.
[0011] 1 dalis nerūgštaus sauso pieno produkto ištirpinama 2,5 ±0,5 dalyse pašildyto iki 40-45 °C distiliuoto vandens. Gautas tirpalas, pvz., 10 cm3, įpilamas į mėgintuvėlį ir naudojamas analizei. Lygegrečiai ruošiamas kontrolinis bandinys iš sausojo preparato inhibitoriams piene nustatyti ir į mėgintuvėlį įpilama 10 cm3 kontrolinio bandinio. Abu mėgintuvėliai užkemšami steriliais guminiais kamščiais. Vandens vonelėje mėgintuvėliai šildomi 87±2 °C temperatūroje 10 minučių. Po to ataušinama iki 60±5 °C temperatūros.
[0012] Liepsnoje apdegintu pincetu už peforuotos dalies išimti iš prakirpto polietileninio maišelio mikrobitestai, turintys jautrios test - kultūros Bacillus subtilis sporų, nuo 2 iki 5 sekundžių mirkomi iškaitintuose tiriamo produkto ir kontrolinio bandinio mėgintuvėliuose. Kiekviename mėgintuvėlyje sumirkoma po 2 mikrobitestus.
[0013] Sumirkyti mikrobitestai hermetiškai užlydomi polietileno maišeliuose, nutraukus jų perforuotas dalis. Užlydyti polietileno maišeliai sudedami į neperšviečiamus popierinius maišelius, kurie išlaikomi temostate 37 °C temperatūroje 12-18 valandų padėti gulsčiai. Po to vizualiai įvertinama mikrobitestų splava.
[0014] —0,004-0,005 TV/cm3 penicilino atstatyto produkto;
[0015] Inhibitoriai nustatomi penkiuose sauso lieso pieno bandiniuose. 1 dalis (3g) kiekvieno sauso lieso pieno bandinio ištirpinama 3 dalyse (9g) pašildyto iki 45 °C distiliuoto vandens. Lygegrečiai ruošiamas kontrolinis bandinys iš sausojo preparato inhibitoriams piene nustatyti. Kiekvieno tiriamo bandinio gautas tirpalas supilamas į atskirą mėgintuvėlį (viso 5 mėgintuvėliai), į šeštą mėgintuvėlį supilama 10 cm3 kontrolinio bandinio. Visi mėgintuvėliai užkemšami steriliais guminiais kamščiais ir šildomi vandens vonelėje 87 °C temperatūroje 10 minučių. Po to ataušinama iki 60 °C temperatūros.
[0016] Liepsnoje apdegintu pincetu už perforuotos dalies išimti iš prakirpto polietileno maišelio mikrobitestai nuo 2 iki 5 sekundžių mirkomi iškaitintuose tiriamo pieno ir kontrolinio bandinio mėgintuvėliuose. Kiekviename mėgintuvėlyje sumirkoma po du mikrobitestus.
[0017] Sumirkyti mikrobitestai hermetiškai užlydomi polietileno maišeliuose nutraukus jų perforuotas dalis. Užlydyti polietileno maišeliai sudedami j neperšviečiamus popierinius maišelius, kurie išlaikomi termostate 37 °C temperatūroje 16 valandų padėti gulsčiai.
[0018]
[0019] Antrame ir penktame sauso lieso pieno bandinyje rasta inhibitorių, atitinkančių ~ 0,004-0,005 TV penicilino 1 cm3. Pirmame, trečiame ir ketvirtame bandiniuose inhibitorių nerasta.
[0020] Inhibitoriai nustatomi trijuose sauso riebaus pieno bandiniuose. 1 dalis (30g) kiekvieno sauso riebaus pieno bandinio ištirpinama 2,5 dalyse (75g) pašildyto iki 42 °C distiliuoto vandens. Lygegrečiai ruošiamas kontrolinis bandinys iš sausojo preparato inhibitoriams piene nustatyti. Kiekvieno tiriamo bandinio tirpalas (po 10 cm3) įpilamas į atskirą mėgintuvėlį (iš viso į 3 mėgintuvėlius), o į ketvirtą įpilama 10 cm3 kontrolinio bandinio. Visi mėgintuvėliai užkemšami steriliais guminiais kamščias. Vandens vonelėje mėgintuvėliai šildomi 86 °C temperatūroje 10 minučių. Po to ataušinama iki 65 " C temperatūros. Toliau viskas vykdoma kaip 1 pavyzdyje.
[0021]
[0022] Trečiame riebaus pieno bandinyje rasta inhibitorių, atitikančių ~ 0,004-0,005 TV penicilino 1 cm3. Pirmame ir antrame bandiniuose inhibitorių nerasta.
[0023] Inhibitoriai nustatomi trijuose sausos grietinėlės bandiniuose. 1 dalis (lOg) kiekvieno sausos grietinėlės bandinio ištirpinama 2 dalyse (20g) pašildyto iki 43 °C distiliuoto vandens. Lygegrečiai ruošiamas kontrolinis bandinys iš sausojo preparato inhibitoriams piene nustatyti. Kiekvieno tiriamo bandinio tirpalas (po 10 cm3) įpilamas į atskirą mėgintuvėlį (iš viso gaunami 3 mėgintuvėliai), o į ketvirtą įpilama 10 cm3 kontrolinio bandinio. Visi mėgintuvėliai užkemšami steriliais guminiais kamščiais. Vandens vonelėje mėgintuvėliai šildomi 87 °C temperatūroje 10 minučių. Po to ataušinama iki 58 °C temperatūros. Toliau viskas vykdoma kaip ir 1 pavyzdyje.
[0024]
[0025] Siūlomas būdas leidžia padidinti metodo tikslumą. Inhibitorių nustatymo piene metodu (pagal žinomą technikos lygį) galima nustatyti inhibitorių koncentraciją, atitinkančią daugiau kaip 0,01 TV/cm3 penicilino, o siūlomu metodu galima nustatyti žymiai mažesnes inhibitorių koncentracijas, atitinkančias ~ 0,004-0,005 TV/l cm3 penicilino atstatytame piene. Tai ypač svarbu eksportuojant sausus pieno produktus į užsienį, kur reikalavimai inhibitoriams žymiai griežtesni negu Lietuvoje.
[0026] Siūlomas būdas inhibitorių nustaymui sausuose puieno produktuose atitinka užsienyje naudojamų inhibitorių nustatymo būdų tikslumą. Be to , būdo jautrumas pakankamas nustatyti inhibitorių (antibiotikų) koncentracijas, atitinkančias medicininius - biologinius reikalavimus ir sanitarines normas , keliamas pieno produktams.
[0027] Mūsų siūlomas būdas leidžia nustatyti inhibitorius sausame pieno produkte.
Inhibitorių pieno produkte nustatymo būdas, apimantis bandinio paruošimą, pasterizavimą, mikrobitestų, turinčių jautrios test-kultūros Bacillus subtilis sporų, sumirkytų jame, hermetišką įpakavimą, termostatavimą ir mikrobitestų spalvos įvertinimą, besiskiriantis tuo, kad prieš pasterizavimą sauso pieno produkto svėrinį praskiedžia distiliuotu vandeniu, o pradinio produkto ir distiliuoto vandens santykis atitinkamai turi būti 1: 2 ± 0,5.