[LT] Aprašyti žarnyne rezorbuojami I formulės (6R,7R)-7[2(2-aminotiazol-4-il)-2 -(Z)-metoksiimino)acetamido]-3-(metoksimetil)-3-cefem-4-karbiksirūgšties diastereoizomerai @ir jų fiziologiškai tinkamos druskos bei II formulės junginių diastereomeriškai grynos druskos. @HX yra vienbazė arba daugiabazė rūgštis, o X - neorganinis ar organinis fiziologiškai tinkamas anijonas, šių junginių gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad supilant I formulės diastereoizomerų mišinio 1 ekvivalento tirpalą su 0,2-2 ekvivalentais HY rūgšties, pradžioje nusodinamas ir nufiltruojamas mažiau tirpus IV formulės diastereoizomeras, o paskui iš filtrato nusodinamas labiau tirpus IV formulės diasteroizomeras, be to, nurodytose nuosekliose stadijose HY rūgštis gali būti vienoda arba skirtinga, o įvairios HY rūgštys gali būti pridedamos bet kokia tvarka. Gautos druskos esant reikalui papildomai valomos, jas kristalinant.
[EN]
[0001] Išradimas skirtas žarnyne rezorbuojamų (6R,7R)-7-[ 2-aminotiazol-4-il)-2-(Z)-metoksiimino)acetamido] t3-(metoksimetil)-3-cefem-4-karboksirūgšties 1- (izopropoksi-karbonilhidroksi)etilo esterio diastereomerams (I for-mulė)
[0002]
[0003] jų fiziologiškai aktyvioms druskoms ir jų gavimo budui.
[0004] JAV patente Nr. 4 486 425 aprašyti (6R, 7R) -7-[ 2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(Z)-metoksiimino)acetamido] -3-(metoksimetil)-3-cefem-4-karboksirūgšties esteriai. Ypač idomus I formulės esteris, nes ji gerai rezorbuoja įvairių gyvūnų ir žmogaus žarnynas, o po rezorbcijos organizmo fermentai ji vėl greitai ir pilnai suskaldo.
[0005] Kartu susidaro antibiotiškai aktyvus cefalosporinas su laisvomis karboksilo grupėmis. Šis junginys žinomas cefpodoksimproksetilo pavadinimu (Drugs of the Future 14, 73 (1989)).
[0006] I formulės esteris turi 2 asimetrinius (R)-konfigūra-cijos anglies atomus 6-je ir 7-je cefemo konfigūracijos padėtyje bei asimetrini, anglies atomą 1-oje etiloksiesterio grupės -O-CH-(CH3)-O- padėtyje.
[0007] JAV patente 4 486 425 aprašyti junginiai gauti diaste-reomerų mišinių pavidalu 1-etiloksiesterio grupės
[0008] -O-CH-(CH3)-O- asimetrinio anglies atomo atžvilgiu. Analogiški diastereomerų mišiniai susidaro, pavyzdžiui, cef otiam-heksetilo (Drugs of the Future 1J3, 230
[0009] (1988)), cefuroksim-aksetilo (Drugs of the Future 10, 112 (1985)), bakcefuzonamo (N. A. Kuck ir kt. Proc 14th Int. Congr. Chemother 2, 1137 (1985)) ir BMU 28271 (The Journal of Antibiotics 4_3, 1564 (1990)) atvejais.
[0010] Pagal tokio pobūdžio cefemo darinių šiuolaikini, rezorbcijos mechanizmo supratimą esančios 1-oje padėtyje etilesterio -0CH(CH3)0- grupės konfigūracija neturi įtakos žarnyne rezorbuojamo junginio kiekiui. Tai eks-perimentiškai įrodyta esant cefotiam-heksetilo diaste-reomerų atveju (T. Nighimura ir kt., The Journal of Antibiotics 4_0, 81-90 (1987)).
[0011] Cefotiam-heksetilo atveju abu stereoizomerai atskiriami chromatografijos pagalba. Tačiau naudojant ši, būdą di-deli, nuostoliai, todėl jis ne visada priimtinas, nes abu diastereomerai, pvz., cefpodoksimproksetilo atveju savo fizikinėmis savybėmis yra labai artimi ir chroma-tografuojant sunkiai atskiriami. Be to, abu stereoizomerai arba jų mišinys gali suskilti chromatogra-fuojant per kolonėlę.
[0012] Todėl cefpodoksimproksetilo individualūs diastereomerai iki šiol nėra aprašyti. Nėra ir preparatyvinių būdų, kurių pagalba būtų galima kryptingai gauti atskirus ce-falosporino esterių profarmacinių preparatų klasės di-astereomerus, esančius 1-etiloksiesterinės -0-CH/CH3-0-liekanos dariniais, pvzcefpodoksimproksetilas .
[0013] Todėl visiškai netikėtai paaiškėjo, kad individualūs 1 formulės diastereomerai ryškiai skiriasi savo rezorb-cija žarnyne - geriau besirezorbuojantys diastereomerai yra biologiškai aktyvesni, negu cefpodoksimproksetilas, esantis diastereomerų mišiniu.
[0014] Tokiu būdu, šio išradimo objektas yra I formulės dia-stereomeriškai gryni junginiai, kurių =N-0CH3 grupė yra sin-padėtyje. Iš dviejų diastereomerų pirmenybė teik-tina labiau poliariniam, biologiškai aktyvesniam dia-stereomerui.
[0015] Šio išradimo objektas taip pat yra II bendros formulės diastereomeriškai grynos druskos
[0016]
[0017] kur HX yra vienbazė arba daugiabazė rūgštis, o X - neorganinis arba organinis fiziologiškai tinkamas ani-j onas.
[0018] Neorganinės rūgšties atveju HX yra, pvz., HC1, HBr, HJ, HBF4, HN03, HC14, H2S04 arba H3P04 stechiometrinis kiekis. Organinės rūgšties atveju HX yra alifatinės arba aromatinės rūgštys. Tinkamiausios yra neorganinės rūgštys HC1, HBr, ir H2S04, taip pat organinės: metansulfo-, etansulfo-, benzensulfo-, p-toluensulfo ir 4-etilenbenzensulforūgštis.
[0019] Išradimo objektas taip pat yra I formulės diastereo-meriškai grynų junginių gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad gauna III formulės tarpini, jungini,
[0020] grynų diastereomerų pavidalu, paverčiant juos grynais I arba II formulės diastereomerais.
[0021] Tokiu būdu gauti I formulės gryni diastereomerai pa-verčiami II formulės druskomis žinomais analogiškiems junginiams gauti metodais.
[0022] I formulės junginys arba jo IV formulės druskos gaunamos žinomais būdais, aprašytais, pvz., Japonijos pa-raiškoje 60 004 190A. Pagal šioje paraiškoje aprašytą metodą gaunamas diastereoizomerų mišinys.
[0023] Gauti diastereoizomerai atskiriami, kristalinant IV for-mulės druskas frakcinės kristalizacijos pagalba. IV for-mulėje HY reiškia vienbazę arba daugiabazę rūgšti,, kur Y yra neorganinis arba organinis anijonas.
[0024] Neorganinės rūgšties atveju HY yra, pvz., HC1, HBr, HJ, HF, HN03, HC104, HSCN, H2S04 arba H3P04. Organinės rūgš-ties atveju HY yra alifatinės arba aromatinės sul-forūgštys, karboksi ir fosfonio rūgštys. Pavyzdžiui, galima naudoti šias organines rūgštis: benzensulfo-, p-toluensulfo-, 4-etilbenzensulfo-, 4-chlorbenzensulfo-, 4-brombenzensulfo, 2-mezitilensulfo-, 4-difenilsulfo-naftalen-1,5-disulfo-, metansulfo-, etansulfo-, dode-cilsulfo-, kamf orsulf orūgšti, ir oksalo rūgšti,.
[0025] Tinkamiausios yra HC1, HBr, benzensulfo-, p-toluensulfo-, 4-etilbenzensulfo- ir 4-difenilsulforūgštis.
[0026] IV formulės druskos gaunamos sumaišant III formulės di-astereoizomerų ir HY rūgšties tirpalus. Organiniais tirpikliais naudojami esteriai ir eteriai, alkoholiai, ketonai, nitrilai, chlorinti angliavandeniliai, angliavandeniliai ir jų mišiniai. Tinkamiausi tirpikliai yra benzenas, toluenas, etilacetatas, butilacetatas, metanolis, etanolis, n-propanolis, izopropanolis, tretbuta-nolis, diizopropilo eteris, acetonas acetonitrilas ir dichlormetanas bei jų mišiniai.
[0027] Neorganinių rūgščių atveju, jeigu organinis tirpiklis tirpsta vandenyje, tirpikliu naudojamas ir vanduo. HC1 ir HBr tirpalai organiniuose tirpikliuose gaunami, lei-džiant per juos dujini, vandenilio chloridą arba vandenilio bromidą. HC1 ir HBr tirpalai organiniuose tirpikliuose taip pat gaunami iš acetilhalogenidų, fosfor-halogenidų bei fosforoksihalogenidų ir alkoholio (halo-genas = Cl, Br).
[0028] Diastereoizomerų atskyrimui labai svarbu I formulės ba-zės ir rūgštinio komponento santykis. Pageidautina, kad III formulės diastereoizomerų mišinio vienam ekviva-lentui tektų 0,2-2,0, tikslingiausia 0,4-1,5 rūgštinio komponento ekvivalento.
[0029] Siūlomame metode svarbu tai, kad IV formulės gryni diastereoizomerai nusodinami dviem viena po kitos einan-čiomis stadijomis. Pavyzdžiui, sumaišant I formulės di-astereoizomerų mišinio tirpalą su rūgštinio HY komponento tirpalu, iš pradžių nusodinamas ir filtruojant atskiriamas mažiau tirpus IV formulės diastereoizomeras, o iš filtrato nusodinamas daugiau tirpus IV for-mulės diastereoizomeras. Vykdant paeiliui dalines sta-dijas, rūgštinis komponentas HY gali būti vienodas arba skirtingas, be to, skirtingi rūgštiniai HY komponentai gali būti pridedami bet kokia tvarka. Pvz. , kai tei-singai pasirenkamas rūgštinis HY komponentas, iš pra-džių nusodinamas labiau poliarinis mažiau tirpus IV for-mulės diastereoizomeras arba priešingai, - iš pradžių mažiau poliarinis diastereoizomeras.
[0030] Parinkus rūgštini, komponentą, abu IV formulės diastereoizomerai gaunami grynu pavidalu. Pvz., naudojant vandenilio chloridą arba vandenilio bromidą, pradžioje gaunamas labiau poliarinis diastereoizomeras, o panau-dojus benzensulfo-, 4-etilbenzensulfo-, difenilsulfo-arba p-toluoensulforūgštį, gali būti gaunami būtent ma-žiau poliariniai diastereoizomerai.
[0031] Nufiltravus gautas druskas, esant reikalui jos krista-linamos, panaudojant aukščiau išvardintus tirpiklius bei jų mišinius. Optimalus tirpiklis pasirenkamas priklausomai nuo panaudoto rūgštinio komponento. Pavyz-džiui, p-toluensulforūgšties bei hidrochlorido druskai tinkamiausi tirpikliai yra metanolis, etanolis, n-propanolis, izopropanolis, acetonitrilas, etilacetatas ir dichlormetanas.
[0032] Rūgštinis komponentas pridedamas esant -10 - +50°C, geriausia +10°C - +30°C temperatūrai. Priklausomai nuo panaudoto rūgštinio komponento ir tirpiklio rūšies, mi-šinys papildomai maišomas 10 vai, kol pilnai išsiskirs medžiaga. Kai kuriais atvejais pilnam nusodinimui pa-siekti mišinys šaldomas iki -70°C temperatūros.
[0033] Pagal kitą variantą I formulės diastereoizomerų miši-nius galima gauti iš V formulės junginių
[0034] Šioje formulėje R1 grupė yra peptidų chemijoje įprasta amino grupės apsauginė grupė, pvz., formilo, .tret-bu-toksikarbonilo, chloracetilo, fenoksiacetilo, fenilace-t.ilo, aliloksikarbonilo, benziloksikarbonilo ir 4-nitrobenziloksikarbonilo grupė.
[0035] Apsauginės grupės atskėlimas vykdomas žinomais būdais. Pavyzdžiui, formilo ir tretbutoksikarbonilo grupės atskeliamos rūgšties pagalba. Fenoksiacetilo ir fenilacetilo grupės atskeliamos fosforo pentachlorido arba fermento penicilinazės pagalba. Aliloksikarbonilo grupė gali būti atskeliama Pd[ P (C6H5) 3] 4 pagalba. Benziloksikarbonilo ir 4-nitrobenziloksikarbonilo grupės pašali-namos hidrolitiškai.
[0036] Atskeliant fenoksiacetilo arba fenilacetilo grupės fosforo pentachlorido pagalba, nepridedant vandenilio chlorido, gaunami labiau poliariniai diastereoizomerai. Vandenilio chlorido šaltinis yra lėtai ji, išskiriantys perdirbimo metu nepašalinti fosforo rūgšties esteriai - chloranhidridai.
[0037] Naudojant išeigine medžiaga V formulės junginius, I arba IV formulių diastereoizomeriškai grynus junginius galima gauti iš pradžių atskiriant diastereoizomerus, po to atskeliant apsauginę grupę ir HY rūgštinio komponento pertekliumi, nusodinant IV formulės diastereo-izomerų mišinį. V formulės diastereoizomerus galima at-skirti kristalinant arba chromatografiškai, be to, są-lygos pasirenkamos priklausomai nuo apsauginės R1 gru-pės. Pavyzdžiui, jeigu R1 yra fenoksiacetilo grupė, tai diastereoizomerai atskiriami chromatografuoj ant per si-likagelį, eliuentais naudojant organinių tirpiklių mi-šinį .
[0038] Iš IV formulės diastereoizomeriškai grynų druskų žino-mais būdais gaunamos II formulės diastereomeriškai grynos bazės, kurios paverčiamos I formulės grynais diastereoizomerais, kaip tai parašyta, pvz., Japonijos pa-raiškoje 60 004 189A.
[0039] Šiam tikslui I formulės diastereoizomeriškai gryni junginiai gali būti veikiami, pavyzdžiui, VI formulės jun-giniais
[0040]
[0041] kur R1 yra vandenilio atomas arba atitinka V formulės junginių apibrėžimą, o Z yra beta- kaltanų chemijoje įprastinė aktyvinanti grupė, pvz., chloridas, p- to-luensulfonilas, 1- benzotriazololiloksi- arba merkapto-benzotiazolilo grupė.
[0042] Netikėtas teigiamas šio išradimo efektas yra padidinta labiau poliarinio I formulės diastereoizomero rezorb-cija žarnyne, ką iliustruoja 1 lentelės duomenys.
[0043]
[0044] Šiame išradime siūlomi I formulės junginiai įvedami peroraliai įprastų farmacinių preparatų forma, pvz., kapsulėmis, tabletėmis, milteliais, sirupais arba su-spensijomis. Dozė priklauso nuo paciento amžiaus, simp-tomų ir kūno svorio, taip pat nuo gydymo trukmės. Tačiau kaip taisyklė, ji sudaro maždaug nuo 0,2 g iki 5 g, tikslinga maždaug 0,5-3 g per dieną. Geriausia junginius įvesti paskirstytomis dozėmis, pvz., 2-4 kartus per dieną, tad vienkartinė dozė gali sudaryti, pvz., 50-500 mg biologiškai aktyvios medžiagos.
[0045] Peroralinės kompozicijos gali turėti įprastus nešiklius ir (arba) skiediklius. Pavyzdžiui, kapsulėms arba tab-letėms galima naudoti rišiklius, pvz., želatiną, sor-bitolį, polivinilpirolidoną arba karboksimetilceliulio-zą, skiediklius, pvz., laktozę, cukrų, krakmolą, kalcio fosfatą, arba polietilenglikolį, sutepančias medžiagas, pvz., talką arba natrio stearatą. Skystoms kompozici-joms, pvz., vandeninėms arba aliejinėms suspensijoms, tinka sirupai arba kitos analogiškos formos.
[0046] Pateikti pavyzdžiai iliustruoja I ir II formulės dia-stereomeriškai grynų junginių gavimą pagal šį išradimą, plačiau jį paaiškina, tačiau neapriboja jo apimties.
[0047] 1 Pavyzdys
[0048] (6R, 7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esterio p-toluen-sulfonatas (diastereoizomerų mišinys)
[0049] 1,23 g (5 mmol) (6R7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgšties suspenduojama 15-oje ml dichlormetano argono atmosferoje ir pilnai ištirpinama, pridedant 0,7 5 ml (5 mmol) DBU*. Į gautą tirpalą 0°C tempe-ratūroje pridedama 1, 3 g (5,5 mmol) 1-jodetoksi/izo-propoksikarbonilo esterio (The Journal of Antibiotics, 40, 370, (1987)), mišinys maišomas 40 min 0°C tempe-ratūroje bei 30 min 20°C temperatūroje ir tolesniam darbui praskiedžiamas 50 ml etilacetato. Mišinys plaunamas sočiu vandeniniu NaHC03 ir NaCl tirpalu, džio-vinamas MgS04, organinis tirpiklis nugarinamas vakuume. Nevalytas produktas tirpinamas 5-se ml etilacetato, i, gautą tirpalą prie 20°C temperatūros pridedama 1,6 g (5,3 mmol) p-toluensulforūgšties monohidrato tirpalo 5-se ml etilacetato. Pridėjus 10 ml diizopropilo eterio, mišinys atvėsinamas iki 0°C, produkto nuosėdos nufiltruojamos .
[0050] Išeiga: 1,23 g (71 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) .
[0051] 1H-BMR (DMSO - d6, 270 MHz) : d=l,25 (m, 6H, C(CH3)2), 1,50 (d., 3H, CH-CH3), 2,30 (s., 3H, arilas-CH3) , 3,23 (s., 3H, CH2OCH3) , 3,70 (2H, m. S-CH2) , 4,21 (m., CH2OCH3) , 4,81 (m., 1H, 0-CH(CH3)2, 5,25 (m., 2H, H-6, ir H-7), 6,81 ir 6,85 (2xkv., 1H, 0-CH (CH3)-0) , 7,11 ir 7,48 (2xkv., 4H, arilas-H) , 9,05 (pl. s., 2H, NH2) .
[0052] Plonasluoksnė chromatografija (toluenas:etilacetatas = 1:1).
[0053] Rf = 0,34 (A diastereomeras) ir 0,26 (B diastereomeras) .
[0054] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 jjm C18 nukleo-zilas, vanduo (+ 0,1 % NH4OAc) + (metanolis : vanduo = 80:20) + 0,1 % NH4OAc) (45:55, 1 ml/min = 10,8 min (A diastereoizomeras), 9,1 min (B diastereoizomeras).
[0055] 2 Pavyzdys
[0056] (6R, 7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esteris (diaste-reoizomerų mišinys).
[0057] Pagal 1 pavyzdyje aprašytą metodiką 2,53 g (4,8 mmol) diastereoizomerų mišinio ištirpinama etilacetato 5%-nio vandeninio NaHC03 mišinyje ir maišoma 5 min. Sluoksniai atskiriami, organinio tirpiklio sluoksnis plaunamas so-čiu vandeniniu NaCl tirpalu, džiovinamas MgS04 ir nugarinamas vakuume.
[0058] Išeiga: 1,74 g (100 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) .
[0059] I. (6R, 7R) -7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esterio p-toluen-sulfonatas (A diastereoizomeras)
[0060] Pagal 2 pavyzdyje aprašytą metodiką 1,74 g (4,63 mmol) diastereoizomerų mišinio ištirpinama 4-se ml etilacetato ir i, gautą tirpalą pridedama 0, 44 g ( 2, 3 mmol) p- toluensulforūgšties monohidrato 3- se ml etilacetato. Į mišinį pridedama 3 ml diizopropilo eterio, išsikris-talinęs produktas nufiltruojamas. Filtratas apdorojamas pagal šiame pavyzdyje žemiau aprašytą II metodą.
[0061] Išeiga: 0, 904 g ( 36 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) A diastereoizomero p- toluensulfonato.
[0062] 1H- BMR ( DMSO - d6, 270 MHz) : d=l, 25 ( mm., 6H ( C( CH3) 2), I, 50 ( d., 3H, CH- CH3) , 2, 30 ( s., 3H, arilas- CH3) , 3, 23 ( s., 3H, CH2OCH3) , 3, 69 ( 2H, AB kv., S- CH2) , 4, 21 ( m., CH2OCH3), 4, 79 ( m., 1H, 0- CH( CH3) 2), 5, 25 ( m., 2H, H- 6, ir H- 7) , 6, 81 ( kv., 1H, O- CH ( CH3)- O) , 7, 11 ir 7, 48 ( 2xd., 4H, arilas- H) , 8, 9 ( pl. s., 2H, NH2) .
[0063] Plonasluoksnė chromatografija ( toluenas : etilacetatas = 1:1) .
[0064] Rf = 0, 34.
[0065] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 | im C18 nukle-ozilas, vanduo (+ 0, 1 % NH4OAc) + ( metanolis : vanduo = 80:20) + 0, 1 % NH40Ac) ( 45:55, lml/ min = 10, 8 min ( A diastereoizomeras). II. ( 6R, 7R)- 7- amino- 3- metoksimetil- 3- cefem- 4- karboksirūgš-ties 1-( izopropoksikarboniloksi) etilo esterio p- toluen-sulfonatas ( B diastereoizomeras).
[0066] Pagal šio pavyzdžio I metodą gautas filtratas sumai-šomas su 0, 44 g ( 2, 32 mmol) p- toluensulforūgšties monohidrato tirpalo 3- se ml etilacetato ir išsiskyrusios produkto nuosėdos nufiltruojamos.
[0067] Išeiga: 0, 534 g ( 21 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) B diastereoizomero p- toluensulfonato.
[0068] 1H-BMR (DMSO - d6, 270 MHz) : d=l,25 (m., 6H, C(CH3)2), 1,50 (d., 3H, CH-CH3) , 2,30 (s., 3H, arilas-CH3) , 3,23 (s., 3H, CH2OCH3) , 3,69 (2H, m. S-CH2) , 4,21 (m., CH2OCH3) , 4,79 (m., 1H, 0-CH(CH3)2), 5,25 (m., 2H, H-6, ir H-7) , 6,84 (kv., 1H, O-CH (CH3) -O) , 7,11 ir 7,48 (2 zd., 4H, arilas-H), 89 (pl. s., 2H, NH2) .
[0069] Plonasluoksnė chromatografija (toluenas : etilacetatas - 1:1) .
[0070] Rf = 0,26.
[0071] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 ^m vanduo +
[0072] (0,1 % NH40Ac) + (metanolis : vanduo = 80:20) + 0, 1 % NH4OAc) (45:55, 1 ml/min = 9,1 min (B diastereoizomeras) .
[0073] 4 Pavyzdys
[0074] (6R,7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarbonil)etilo esterio hidrochlori-das (B diastereoizomeras)
[0075] Pagal 2 pavyzdyje aprašytą metodą 1,71 g (4,57 mmol) diastereoizomerų mišinio ištirpinama 4-se ml etilacetato ir X gautą tirpalą pridedama 0,914 ml (2,28 mmol) 2,45 ml izopropanolinio druskos rūgšties tirpalo. Išsi-skyrusios nuosėdos nufiltruojamos, o filtratas panau-dojamas tolesniam darbui pagal šio pavyzdžio II metodą.
[0076] Išeiga: 0,628 g (41 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) B diastereoizomero hidrochlorido.
[0077] :H-BMR (DMSO - d6, 270 MHz): d=l,25 (m., 6H, C(CH3)2), 1,48 (d., 3H, CH-CH3), 3,23 (s., 3H, CH2OCH3) , 3,68 (2H, m. S-CH2), 4,21 (s., CH2OCH3) , 4,81 (m., 1H, 0-CH(CH3)2),
[0078] 5,21 (kv., 2H, H-6 ir H-7) , 6,85 (kv., 1H, O-CH (CH3) -O) , 9,2 (pl. s . , 2H, NH2) .
[0079] Plonasluoksnė chromatografija (toluenas : etilacetatas = 1:1) .
[0080] Rf = 0,26.
[0081] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 jim C18 nukle-ozilas, vanduo (+ 0,1 % NH4OAc) + (metanolis: vanduo = 80:20) + 0, 1 %NH4OAc) (45:55, 1 ml/min = 9,1 min (B diastereoizomeras).
[0082] II. (6R, 7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksi rūgšties 1-(izopropoksikarbonil)etilo esterio p-to-luensulfonatas (A diastereoizomeras) 4 Pavyzdyje pagal I metodą gautas filtratas sumaišomas su 0,573 g (3,0 mmol) p-toluensulforūgšties monohidrato tirpalo 3-se ml etilacetato ir išsiskyrusios produkto nuosėdos nufiltruojamos.
[0083] Išeiga: 0,902 (36 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) A diastereoizomero p-toluensulfonato, identiško 3 pa-vyzdžio I metodo produktui.
[0084] 5 Pavyzdys
[0085] (6R, 7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esteris (A diastereoizomeras )
[0086] Pagal 4 pavyzdžio II metodą 4,33 g (8,8 mmol) diastereoizomero ištirpinama 80-je ml etilacetato bei 155 ml vandens, pridedama 0,96 g (11,45 mmol) NaHC03 ir mai-šoma 5 min. Sluoksniai atskiriami, organinis tirpiklis plaunamas sočiu NaCl tirpalu, džiovinamas MgS04 ir su-koncentruojamas vakuume.
[0087] Išeiga: 3,29 g (100 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) .
[0088] 6 Pavyzdys
[0089] (6R,7R)-7-amino-3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esteris (B diastereoizomeras) .
[0090] Pagal 4 pavyzdžio I metodą 4,99 g (12,0 mmol) B diastereoizomero ištirpinama 110 ml etilacetato bei 219 ml vandens, pridedant 1,36 g (16,28 mmol) NaC03, ir tir-palas maišomas 5 min. Sluoksniai atskiriami, organinis tirpiklis plaunamas sočiu NaCl tirpalu, džiovinamas MgS04 ir koncentruojamas vakuume.
[0091] Išeiga: 4,49 g (100 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) .
[0092] 7 Pavyzdys
[0093] (6R,7R)-7-[ 2-(2-aminotiazol-4-il)-2- (Z)-metoksiimino) acetamido] -3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgšties 1-(izopropoksikarboniloksi) etilo esteris (A diastereoizomeras)
[0094] Pagal 5 pavyzdį 3,29 g (8,8 mmol) A diastereoizmero ištirpinama 22 ml sauso dichlormetano argono atmosferoje ir i, gautą tirpalą pridedama 3,19 g (9,11 mmol) 2- (2-aminotiazol-4-il) -2- (Z) - (metoksiimino) -merkaptoben-zotiazolilacetato. Suspensija maišoma 1 vai 20°C tem-peratūroje, praskiedžiama 200 ml etilacetato, du kartus ekstrahuojama vandeniu, džiovinama MgS04, tirpiklis nugarinamas vakuume. Gauta liekana valoma chromatogra-fuojant per Si02 kolonėlę, eliuentas toluenas/etilacetatas.
[0095] Išeiga: 1,1 g (22 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) A diastereoizmero.
[0096] XH BMR (DMSO - d6, 270 MHz) : d=l,23 (dv.d., 6H(C(CH3)2), 1,49 (d., 3H, CH-CH3), 3,21 (s., 3H, CH2OCH3) , 3,48 (2H, AB kv., S-CH2), 3,83 (s., 3H, N-0CH3) , 4,14 (s., CH2OCH3) , 4,80 (m., O-CH (CH3) 2) , 5, 21 (d., 1H, H-6) , 5,82 (dv. d., 1H, H-7) , 6,72 (s., 1H, tiazolas-H) , 6,80 (kv., 1H, O-CH (CH3) -O) , 7,2 (pl. s., 2H, NH2) , 9,59 (d., 1H, CONH.
[0097] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 (a.m C18 nu-kleozilas, vanduo + 1,2 dimetoksietanas (+EDTA 10 mg/l, +0,2 % n-metilmorfolinas, + HC104, pH=3,34) 68 : 32, 1,5 ml/min, 12,6 min (A diastereoizomeras) .
[0098] 8 Pavyzdys
[0099] (6R,7R)-7-[ 2- (2-aminotiazol-4-il)-2-(Z)-metoksiimino) acetamido] -3-metoksimetil-3-cefem-4-karboksirūgšties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esteris (B diastereoizomeras)
[0100] Pagal 6 pavyzdį 4,59 g (12,0 mmol) diastereoizomero ištirpinama 30 ml sauso dichlormetano argono atmosferoje ir į gautą tirpalą pridedama 4,39 g (12,42 mmol) 2-(2-aminotiazol-4-il) -2- (Z)-(metoksiimino)merkaptoben-zotiazolilacetato. Suspensija maišoma 1 vai. 20°C tem-peratūroje, praskiedžiama 200 ml etilacetato, dukart ekstrahuojama vandeniu, džiovinama MgS04, tirpiklis nugarinamas vakuume. Liekana valoma chromatografuoj ant per Si02 kolonėlę, eliuentas toluenas/etilo acetatas. Išeiga: 4, 6 g ( 69 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) B diastereoizomero.
[0101] 1H- BMR ( DMSO - d6, 270 MHz) : d=l, 25 ( dv. d., 6H, C( CH3) 2), 1, 50 ( d., 3H, CH- CH3) , 3, 21 ( s., 3H, CH2OCH3) , 3, 53 ( 2H, AB kv., S- CH2) , 3, 85 ( s., 3H, N- OCH3) , 4, 14 ( s., CH2OCH3), 4, 81 ( m., 1H, 0- CH( CH3) 2), 5, 19 ( d., 1H, H- 6) , 5, 81 ( dv. d., 1H, H- 7) , 6, 72 ( s., 1H, tiazolas-H) , 6, 83 ( kv., 1H, O- CH ( CH3)- 0) , 7, 2 ( pl. s., 2H, NH2) , 9, 59 ( d., 1H, CONH).
[0102] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 p. m C18 nu-kleozilas, vanduo + 1, 2 dimetoksietanas (+ EDTA 10 mg/ l, + 0, 2 % n- metilmorfolinas, + HC104, pH=3, 34) 68:32, 1, 5 ml/ min, 9, 7 min ( B diastereoizomeras).
[0103] 9 Pavyzdys
[0104] ( 6R, 7R)- l-{ 2-) 2- aminotiazol- 4- il) - 2-( Z) - metoksiimino) acetamido] - 3- metoksimetil- 3- cefem- 4- karboksirūgšties 1-( izopropoksikarboniloksi) etilo esteris ( diastereoizome-rų mišinys, cefpodoksimproksetilas)
[0105] 4, 26 g ( 17, 5 mmol) ( 6R, 7R)- 7- amino- 3- metoksimetil- 3- cefem- 4- karboksirūgšties suspenduojama 40- je ml dichlormetano argono atmosferoje ir pilnai ištirpinama, pridedant 2, 65 g ( 17, 5 mmol) DBU. Į gautą tirpalą 0°C tem-peratūroje pridedama 4, 96 g ( 19, 2 mmol) 1- jodetiloksi-izopropoksikarbonilo esterio ( The Journal of Antibiotics 40 , 370 ( 1987)) ir mišinys maišomas 60 min 0°C tempe-ratūroje, bei 20 min 20°C temperatūroje. Pridedama 6, 4 g ( 18, 3 mmol) 2-( 2- aminotiazol- 4- il)- 2-( Z)-( metoksiimino) merkaptobenzolilacetato, suspensija maišoma dar 2 vai 20°C temperatūroje, praskiedžiama 200 ml etilacetato, du kartus ekstrahuojama vandeniu, išdžiovinama, tirpiklis nugarinamas vakuume. Liekana valoma chromato-
[0106] grafuojant per kolonėlę, eliuentas toluenas/ etilo acetatas .
[0107] Išeiga: 3, 42 g ( 35 % nuo teoriškai apskaičiuoto kiekio) A + BC diastereoizomerų mišinių.
[0108] 1H- BMR ( DMSO - d6, 270 MHz) : d=l, 25 ( m., 6H, C( CH3) 2), 1, 49 ( m., 3H, CH- CH3) , 3, 21 ( s., 3H, CH2OCH3) , 3, 54 ( 2H, AB kv., S- CH2), 3, 85 ( s., 3H, N- OCH3) , 4, 14 ( s., CH2OCH3), 4, 80 ( m., 1H, 0- CH( CH3) 2), 5, 21 ( m., 1H, H- 6) , 5. 82 ( m., 1H, H- 7), 6, 72 ( s., 1H, tiazolas- H) , 6, 80 ir 6. 83 ( dv. kv., 1H, 0- CH ( CH3)- O) , 7, 2 ( pl. s., 2H NH2) , 9, 60 ( m., 1H, CONH).
[0109] Aukšto slėgio skystinė chromatografija, 7 } jm C18 nu-kleozilas, vanduo + 1, 2 dimetoksietanas (+ EDTA 10 mg/ l, + 0, 2 % n- metilmorfolinas, + HC104, pH=3, 34) 68:32, 1, 5 ml/ min, 12, 6 min ( A diastereozimeras), 9, 7 min ( B diastereoizomeras) .
1. (6R,7R)-7-[ 2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(Z)-metoksiimino)acetamido] -3-(metoksimetil)-3-cefem-4-karboksirūgš-ties 1-(izopropoksikarboniloksi)etilo esterio I formu-lės diastereoizomerai
2. Diastereomeriškai grynos II formulės junginių druskos
3. Diastereomeriškai grynos II formulės junginių druskos pagal 2 punktą, besiskiriančios tuo, kad HX yra HC1, HBr, H2S04, metansulfo-, etansulfo-, benzensulfo-, p-toluensulfo- ir 4-etilbenzensulforūgš-tis.
4. Diastereomeriškai grynų I arba II formulės junginių pagal 1-3 punktus gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad diastereomeriškai gryna forma gaunamąIII formulės tarpini, produktą
5. I arba II formulės diastereomeriškai grynų junginių gavimo būdas pagal 4 punktą, besiskiriantis tuo, kad supilant I formulės diastereoizomerų mišinio 1 ekvivalento tirpalą su 0,2-2 ekvivalentais HY rūgšties tirpalo, pradžioje nusodina ir nufiltruoja mažiau tirpų IV formulės diasteroizomerą, o po to iš filtrato nusodina labiau tirpų IV formulės diatereo-izomerą, be to minėtose nuosekliose atskyrimo stadijose HY rūgštis gali būti vienoda arba skirtinga, o įvai-riose HY rūgštys gali būti pridedamos bet kokia eile, ir gautas druskas, esant reikalui, papildomai valomo kristalinant.
6. Antibakteriniai farmaciniai preparatai, turintys inertinį nešikli, ir aktyvų ingredientą, besiskiriantys tuo, kad aktyviu ingredientu naudojamas I arba II formulės diastereomeriškai gryno junginio pagal 1-3 punktus efektyvus kiekis.
7. Antibakterinių farmacinių preparatų gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kad diastereomeriškai gryną I arba II formulės pagal 1-3 punktus junginį de-riniuose su farmacijoje naudojamais nešikliais ir (ar-ba) skiedikliais paverčia tinkama naudoti vaisto forma.
8. I ir II formulės diastereomeriškai gryni junginiai pagal 1-3 punktus, skirti panaudoti kovai su bakteri-nėmis infekcijomis.