[LT] Šis išradimas liečia kai kuriuos naujus arilpropilus, pasižyminčius insekticidiniu, akaricidiniu ir nematocidiniu poveikiu, ir vabzdžių, nematodų ir erkių naikinimo būdą, naudojant nurodytus darinius. Išradimas taip pat liečia augalų apsaugos nuo vabzdžių, erkių ir nematodų būdą, užnešant ant minėtų augalų ar įterpiant į dirvą, kurioje jie auga naują arilpirolo darinį pakankamu kiekiu jo insekticidiniam, akaricidiniam ir nematocidiniam poveikiui. Šis išradimas taip pat numato arilpirolo darinių gavimo būdą.
[EN]
[0001] Išradimas skirtas naujiems arilpirolo dariniams, pa-sižymintiems stipriu insekticidiniu, akaricidi-niu bei nematocidiniu veikimu, kurie gali būti panaudojami vabzdžiams, erkėms ir nematodoms naikinti bei vertingų augalų apsaugai nuo minėtų kenkėjų tiek augimo stadijoje, tiek ir derliaus surinkimo metu. Išradimas taip pat skirtas minėtų arilpirolo darinių gavimo būdams.
[0002] Didžiosios Britanijos patente GB 2166436 ir JAV patente 4916154 aprašyti makrocikliniai junginiai, naudojami kaip priešnematodiniai, akaricidiniai, insekticidiniai bei priešhelmintiniai agentai. Panašiu veikimu pasižymi cipermetrinas, turintis ciklopropano žiedą, aprašytas EP 205010 ir EP 208758.
[0003]
[0004] kurioje X yra vandenilis, fluoras, chloras, bromas, jodas arba CF;
[0005] Y yra vandenilis, fluoras, chloras, bromas, jodas CF arba CN;
[0006] W yra CN arba N02;
[0007] A yra alkilas su 1-4 anglies atomais, pakeistas 4 halogeno atomais, viena ciano grupe, viena alkoksigrupe su 1-4 anglies atomais, pakeista 1-3 halogeno atomais arba dviem alkoksigrupėmis, galimai papildomai pakeistais 1-3 halogeno atomais, viena karbalkoksigrupe su 1-4 anglies atomais, viena alkilkarboniloksigrupe su 1-6 anglies atomais, viena alkenilkarboniloksigrupe su 2-6 anglies atomais, viena benzolkarboniloksigrupe arba chloro-, dichloro-, ar metilpakeista benzolkarboniloksigrupe;
[0008] L yra vandenilis, fluoras, chloras arba bromas;
[0009] M ir R yra kiekvienas nepriklausomai vienas nuo kito vandenilis, alkilo grupė su 1-3 anglies atomais, alkoksilo grupė su 1-3 anglies atomais, alkilsulfinilo grupė su 1-3 anglies atomais, alkilsulfonilo grupė su 1-3 anglies atomais, ciano grupė, fluoras, chloras, bromas, jodas, nitrogrupė, CF3, R1CF2Z, R2CO, arba NR3R4 grupė, kur M ir R užima gretimą padėti ir kartu su juos jungiančiu anglies atomu gali sudaryti žiedą, kuriame MR sudaro struktūrą:
[0010] Z yra S(0)n arba 0;
[0011] Rx yra vandenilis, fluoras, CHF2, CHFC1, CF3;
[0012] R2 yra alkilo grupė su 1-3 anglies atomais, alkoksilo grupė su 1-3 anglies atomais arba NR3R4;
[0013] R3 yra alkilo grupė su 1-3 anglies atomais;
[0014] R4 yra vandenilio atomas, alkilo grupė su 1-3 anglies atomais, arba R5C0;
[0015] R5 yra vandenilio atomas arba alkilo grupė su 1-3 anglies atomais, ir n yra sveikas skaičius, lygus 0,1 arba 2 su sąlyga, kad kai X ir Y yra vandenilis, o A yra alkilo grupė su 1-3 anglies atomais, pakeista viena ciano grupe, tai pakaitalas
[0016] privalo buti fiksuotas vienoje iš dviejų pirolo žiedo azotui gretimų padėčių.
[0017] Pagal šį išradimą naujų, turinčių pirmenybę, arilpirolo darinių grupę sudaro II formulės junginiai:
[0018] kurioje A, L, M, R, W, X ir Y atitinka aukščiau nurodytas reikšmes.
[0019] Pagal šį išradimą kitą naujų, turinčių pirmenybę, arilpirolo darinių grupę sudaro III formulės junginiai:
[0020] kur A, L, M, R, W, X ir Y atitinka aukščiau nurodytas reikšmes.
[0021] Pagal ši, išradimą dar vieną naujų, turinčių pirmenybę, pirolo darinių grupę sudaro IV formulės junginiai:
[0022] kurioje A, L, M, R, W, X ir Y atitinka aukščiau nurodytas reikšmes.
[0023] Pagal ši, išradimą dar vieną naujų, turinčių pirmenybę, pirolo darinių grupę sudaro V formulės junginiai:
[0024] kur A, L, M, R, W, X ir Y atitinka aukščiau nurodytas reikšmes.
[0025] Pagal šį išradimą turi pirmenybę I formulės arilpirolo dariniai, kuriuose:
[0026] Pagal ši, išradimą turi pirmenybę ypač efektyvūs insekticidiniu, akaricidiniu ir/arba nematocidiniu poveikiu II formulės arilpirolo dariniai, kuriuose: L yra vandenilio atomas, fluoras, chloras arba bromas,
[0027] X ir Y nepriklausomai kiekvienas nuo kito yra chloras, bromas arba CF3.
[0028] Pagal ši, išradimą turi pirmenybę kiti ypač efektyvūs insekticidiniu, akaricidiniu ir/arba nematocidiniu poveikiu II formulės arilpirolo dariniai, kuriuose:
[0029] Kaip pavyzdi,, iliustruojanti kai kuriuos insekticidi-nius, akaricidinius ir nematocidinius arilpirolo darinius galima nurodyti šiuos junginius: [ 2, 3-dichlor-4-ciano-5-(3,4-dichlorfenil)pirol-l-il] - trimetilacto rūgštis, metilo esteris, lyd. temp. 143-14 5°C; 4, 5-dichlor-l- (oksimetil) -2- ( a, a, a-trif luor-p-tolil) pirol-3-karbonitrilas, acetatas (esteris);4-brom-2-(p-chlorfenil-l-oksimetil)-5-(trifluormetil) pirol-3-karbonitrilas, trimetilacto rūgšties esteris, lyd. temp. 127,5°C; 4-brom-3-(3, 4-chlorfenil-l-oksimetil)-5-(trifluormetil) pirol-2-karbonitrilas, trimetilacto rūgšties esteris, lyd. temp. 93-94°C; 3, 4-dibrom-5-(p-chlorfenil-l-oksimetil)pirol-2-karbo-nitrilas, trimetilacto rūgšties esteris, lyd. temp. 130-132°C; [ 2, 3-dichlor-4-ciano-5- (a,a,a-trif luor-p-tolil) pirol-l-il] -trimetilacto rūgštis, metilo esteris, lyd. temp. 15 3 -15 7 °C ;
[0030] 3-brom-5-ciano-4- (3, 4-dichlorfenil) -2- (trifluormetil) pirol-l-acetonitrilas, lyd. temp. 95-97°C;
[0031] 2, 3-dichlor-4-ciano-5- ( a, a, a-trifluor-p-tolil) -pirol-1-acetonitrilas, lyd. temp. 137,5-139°C;
[0032] 2, 3-dichlor-4-ciano- (3,4-dichlorfenil)pirol-l-acetonitrilas, lyd. temp. 197-199°C;
[0033] [ 2-(3, 4-dichlorfenil)-3-nitro-5-(trifluormetil)pirol-1-il] benzoinė rūgštis, metilo esteris;
[0034] benzoinė rūgštis, metilo esteris;
[0035] 3-brom-5-(p-bromfenil)-4-ciano-2-(trifluormetil) pirol-1-acetonitrilas, lyd. temp. 110,5-113°C;
[0036] trimetilacto rūgštis, metilo esteris, lyd. temp. 119-12 2 °C ;
[0037] [ 2, 3-dichlor-4-ciano-5- (a,a,a-trifluor-p-tolil) pirol-l-il] -1-p-chlorbenzoinė rūgštis, metilo esteris;
[0038] 4-brom-2-(p-chlorfenil-l-oksimetil)-5-(trifluormetil) pirol-3-karbonitrilas, p-chlorbenzoatas (esteris);
[0039] 2,3-dichlor-5-(p-chlorfenil)-4-cianopirol-l-acetonitrilas, lyd. temp. 175-177°C;
[0040] [ 2-(3, 4-dichlorfenil)-3-nitro-5-(trifluormetil)pirol-l-il] trimetilacto rūgštis, metilo esteris, lyd. temp. 116-119°C ;
[0041] 3-brom-2-(p-chlorfenil)-l-[2,2,2-(trifluoretoksi)me-til] -5-(trifluormetil)pirol-3-karbonitrilas ir
[0042] 3-brom-5-chlor-(p-chlorfenil)-4-cianopirol-3-karbonit-rilas, lyd. temp. 144-150°C.
[0043] I Formulės arilpirolo darinių, kur A yra vandenilio atomas, gavimo būdai aprašyti bendroje Europos pa-tentinėje publikacijoje Nr. 0303863.
[0044] I Formulės pakeisti prie azoto arilpirolo dariniai gaunami, atitinkamai pakeistą I formulės arilpirolą, kur A yra vandenilio atomas, o L, M, R, W, X ir Y atitinka aukščiau išvardintas reikšmes, veikiant ati-tinkamu alkilinimo agentu ir tinkama baze, pvz., chlor-metiliniu halogenalkilo ( su 1- 4 anglies atomais alki-linėje dalyje) eteriu ir kalio hidridu. Šios reakcijos dėka gaunamas arilpirolas, turintis tokius pat pakai-talus, kaip ir išeiginis produktas, be to pakeistą prie azoto halogenalkoksimetilo radikalu ( su 1- 4 anglies atomais alkilo grupėje). Analoginės reakcijos pagalba chlormetilinis halogenalkilo eteris su 1- 4 anglies atomais alkilo grupėje pakeičiamas a- bromacetonitrilu ir gaunami I formulės arilpirolo dariniai, turintys acetonitrilo pakaitalą prie azoto atomo. Reakciją iliustruoja ši schema:
[0045] kurioje L, M, R, W, X ir Y atitinka I formulės aprašytas reikšmes, o A yra 1) halogenalkiloksimetilo radikalas su 1- 4 anglies atomais alkilo grupėje ir 2) CH2CN grupė.
[0046] Žemiau pateikiami pavyzdžiai, iliustruojantys aukščiau pateiktą reakcijos schemą, kuriuose aprašomi kitų jun-ginių pagal ši, išradimą gavimo būdai, kurie konkrečiai neaprašomi.
[0047] Arilpirolo dariniai pagal šį išradimą yra efektyvūs, naikinant vabzdžius, erkes ir nematodas. Minėti junginiai taip pat yra efektyvūs prieš šiuos kenkėjus tiek augalų vegetacijos, tiek brandos stadijose.
[0048] Praktikoje maždaug nuo 10 sv. d. iki 10 000 sv. d., op-timaliausia nuo 100 iki maždaug 5000 sv. d., I formulės arilpirolo darinių (ši kiekį sudaro II, III, IV, V, VI ir VII formulių visi arilpirolo izomerai) disperguojama vandenyje arba kitame lengvai prieinamame skystame ne-šiklyje, o toks panaudotas kiekis yra efektyvus augalų vegetacijos metu, subrendusiems augalams bei dirvai, kurioje auginami augalai, jų apsaugai nuo vabzdžių, erkių ir/arba nematodų. Minėti junginiai taip pat yra tinkami durpių apsaugai nuo vabzdžių lėlyčių, žemės blakių ir jų grupės vabzdžių.
[0049] Pagal šį išradimą I formulės arilpirolo dariniai yra efektyvūs vabzdžiams, nematodoms ir erkėms naikinti, panaudojant juos ant augalų lapų, ir/arba dirvoje bei vandenyje, kuriuose šie augalai yra auginami, imant to-kį jų kiekį, kuris užtikrina aktyvaus komponento kiekį nuo maždaug 0,100 iki maždaug 4,0 kg/ha dozėmis. Aki-vaizdu, kad augalų apsaugai nuo vabzdžių, nematodų ir erkių galima naudoti ir didesnius I formulės arilpirolo darinių kiekius, tačiau didesnės dozės paprastai yra nereikalingos.
[0050] Nors arilpirolo dariniai pagal šį išradimą yra efekty-vūs vabzdžiams, nematodoms ir erkėms naikinti, naudojant tik juos vienus, tačiau juos galima panaudoti taip pat su kitais biologiškai aktyviais, tame tarpe ir su kitais insekticidais, nematocidais bei akaricidiniais cheminiais junginiais. Pavyzdžiui, arilpirolo dariniai pagal šį išradimą gali būti efektyviai panaudojami, de-rinant juos ar kombinacijose su fosfatais, karbamatais, piretroidais, formamidinais, chlorintais angliavandeni-liais, halogenbenzoilkarbamidais bei panašiais reagen-tais .
[0051] Aukščiau pažymėti kaip turintys pirmenybę arilpirolo dariniai gali būti paruošiami sausų forminių granulių, birių kompozicijų, granuliuotų receptūrų, miltelių iš-tirpinimui ir apdulkinimui, koncentruotų dulkių, mikro-emulsijų bei kitų panašių receptūrų pavidalu, kurios įterpiamos d, dirvą, vandenį, ir/arba per lapiją ir už-tikrina reikiamą augalų apsaugos laipsni,. Į panašias receptūras įeina junginiai pagal ši, išradimą, sumaišyti su inertiniais, farmaciniam naudojimui tinkamais kie-tais arba skystais skiedikliais.
[0052] Pavyzdžiui, tirpūs milteliai, dulkės ir dulkių koncent-ratai pagal ši, išradimą gaunami, sumaišant maždaug nuo 3 sv. % iki maždaug 20 sv. % I formulės arilpirolo da-rinių su kieto anijoninio aktyvaus paviršiaus agento maždaug nuo 3 sv. % iki maždaug 20 sv. %. Vienas iš tinkamų aktyvių ant paviršiaus anijoninių agentų yra sulfogintaro rūgšties natrio druskos dioktilo esteris, būtent aktyvus paviršiaus agentas "Aerozolis OTB" (firmos "American Cyanamid Company" pramoninis produktas). Panašiose kompozicijose taip pat naudojama maždaug nuo 60% iki maždaug 94 sv. % inertinio kieto skiediklio, pvz., montmerilonito, atapulgito, kreidos, talko, kao-lino, diatomitinės žemės, klinties, silikatų ir panašių nešiklių.
[0053] Ypač tinkamos naudoti dirvoje ir vandenyje forminės granulės gaunamos, sumaišant maždaug vienodomis pro-porcijomis, paprastai nuo 3 iki 20 dalių, arilpirolo darinių ir aktyvaus paviršiaus kieto agento su maždaug 60-94 dalimis gipso. Po to mišinys formuojamas ne-didelėmis dalelėmis - granulėmis 24/48 mešų dydžio ar didesnėmis.
[0054] Kitų aktyvių paviršiaus tinkamų kompozicijoms pagal ši, išradimą agentų tarpe yra ne tik anijoninis_ sulfogintaro rūgšties natrio druskos dioktilo esteris, bet ir nejoniniai etileno oksido bei propileno oksido blokkopolimerai. Panašūs blokkopolimerai yra firmos "BASF Wiandott Corporation" pramoniniai produktai, turintys firminius pavadinimus " Plewronic 10R8, 17R8, 25R8, F38, F68, F77 ar F87"; jie yra ypač aktyvūs for-muotoms granulėms gauti.
[0055] Be aukščiau aprašytų kompozicijų miltelių ir koncent-ratų pavidalu taip pat naudojami birūs ir tirpūs milteliai, nes jie gerai disperguojami vandenyje. Tokie milteliai turi pirmenybę, juos naudojant zonose, kur atliekamas vandeninių kompozicijų išpurškimas ant apsaugos reikalingų augalų lapijos. Tokius tirpalus iš-purškimui galima naudoti ant grunto su daiginamais žel-menimis, maisto produktams arba naikintinų vabzdžių ir erkių susikaupimo vietose.
[0056] Tuo atveju, kai junginių kompozicijos pagal šį išradimą naudojamos kartu su kitais pesticidais, jos gali būti panaudotos mišiniuose su kitais komponentais arba įve-damos paeiliui.
[0057] Analogiškai skystos arilpirolų kompozicijos kombinacijose su kitais pesticidais gali būti gaunamos, sumai-šant induose arba panaudojamos atskirai, skysčius iš-purškiant paeiliui. Junginių kompozicijos pagal ši, iš-radimą skysčių išpurškimui pavidalu gali turėti maždaug nuo 0,001 sv. % iki maždaug 0,1 sv. % aktyvaus komponento .
[0058] 1 Pavyzdys
[0059] 3-brom-2-(p-chlorfenil)-l-[ 2,2,2-trifluoretoksi)-me-ti 1] -5-(trifluormetil)pirol-3-karbonitrilas
[0060]
[0061] 1,0 g (0,003 mol) 3-brom-2-(p-chlorfenil)-5-(trifluormetil)pirol-3-karbonitrilo tirpinama sausame tetrahidrofurane ir prie dispersijos tetrahidrofurane pridedama 1,25 ekvivalento kalio hidrido. Reakcijos mi-šinys maišomas 10 min, veikiamas chlormetilo (tri-fluormetilo) eteriu (0,54 g, 0,0036 mol), maišomas kambario temperatūroje maždaug 48 vai, išpilamas i, di-deli, vandens kieki, ir ekstrahuojamas eteriu. Ekstraktas plaunamas druskos tirpalu, džiovinamas magnio sulfatu ir koncentruojamas vakuume. Gauta liekana chromatogra-fuojama per silikageli, (metileno chloridas ir heksanas 1:1) ir gaunamas baltos spalvos kietas produktas (0,90 g, išeiga 68%); lyd. temp. 124, 6-125, 3°C.
[0062] Pagal aukščiau aprašytą būdą, tačiau naudojant ati-tinkamą pakeistą fenilpirol-3-karbonitrilą arba 3-nit-ro-2-(pakeistą)fenilpirolą ir atitinkamą alkilinimo agentą, gaunami žemiau išvardinti junginiai:
[0063] Visi bandymai atliekami, naudojant technines medžiagas. Visos koncentracijos nurodytos aktyviam komponentui. Visi bandymai atliekami 27°C temperatūroje.
[0064] 7-8 cm ilgio Limo pupelių lapai 3 sekundėms maišant panardinami i, tiriamos kompozicijos suspensiją, po to
[0065] džiovinami. Lapai patalpinami i, 100x10 mm dydžio Petri lėkštelę, išklotą filtro popieriumi, ant kurio sudedama 10 vikšrų 3 išsivystymo stadijoje. Petri lėkštelę iš-laikius 5 paras, nustatomas vikšrų mirtingumas, lapų graužimo sumažėjimas ir bet kurie kiti normalios vikšrų egzistencijos nukrypimai.
[0066] Spodoptera eridania , liekamasis poveikis po 7 parų
[0067] Pagal aukščiau aprašytą testą apdoroti augalai laikomi šiltnamyje 7 paras didelio galingumo lempų šviesoje. Nurodytos lempos padvigubina birželio mėnesio ryškios saulės efektą Niu Džersio valstijos platumoje, kas atitinka šviesios dienos laikotarpį 14 vai per parą. Po 7 parų atrenkami lapijos pavyzdžiai ir tiriami pagal aukščiau aprašytą metodiką.
[0068] Aphis fabae , mišri vystymosi stadija, pupų amaras
[0069] Puodeliai su pavieniais 5 cm aukščio nasturcijų auga-lais ( Tropaeolum sp.) 1 parą prieš bandymus užkrečiami 100-200 amarų. Kiekvienas puodelis purškiamas bandoma kompozicija 2 kartus, esant užmovos sukimosi greičiui 4 aps/min, su purkštuvu Nr. 154 "Devilbiss". Purkštuvo antgalis nuo augalo laikomas 15 cm atstumu, srautas nu-kreipiamas taip, kad būtų pilnai padengti augalai ir amarai. Apdoroti puodeliai sustatomi ant baltų ema-liuotų padėklų ir išlaikomi 2 paras. Po to nustatomas žuvusių vikšrų skaičius.
[0070] Tetranychus urticae , P- rezistentinis štamas, vorinė erkė
[0071] Atrenkami Limo pupelių augalai su 7-8 cm ilgio pagrindiniais lapais. Nereikalingi augalai išpjaunami, pa-liekant 1 augalą puodelyje. Iš pagrindinės kolonijos išpjaunamas nedidelis lapo gabaliukas ir talpinamas ant kievieno tiriamo augalo lapo. Ši operacija atliekama 2 vai prieš bandymo pradžią, kad erkės galėtų išplisti po visą tiriamą augalą ir sudėti kiaušinėlius. Nupjau-namo lapo dydis parenkamas taip, kad jame būtų maždaug 100 erkių. Lapų gabalėliai, panaudoti erkėms pernešti, apdorojant pašalinami ir išmetami. Užkrėsti erkėmis augalai 3 sekundėms panardinami \ tiriamą kompoziciją, ją pamaišant, po to sudedami ant dangtelio džiovinti. Augalai išlaikomi 2 paras, po to nustatomas žuvusių suaugusių erkių skaičius, tam tikslui panaudojant pirmą lapą. Antras lapas išlaikomas ant augalo dar 5 paras, nustatoma sunaikintų kiaušinėlių skaičius ir/arba vėl pasirodžiusių erkių nimfų skaičius.
[0072] Diabrotic undecimpunctate havardi , ilgaūsio vabalo-blakutės 3 vystymosi stadija 1 ml susmulkinto talko patalpinama \ stiklinį plačia-kakli, užsukamu dangčiu 30 ml talpos indą. Į talką pipete sulašinama 1 ml atitinkamos acetoninės suspensijos tokiu būdu, kad aktyvaus komponento tektų 1,25 ir 0,25 mg vienam indui. Indai išlaikomi po silpna oro srove iki išgaruojant acetonui. Į išdžiovintą talką pridedama 1 ml sorų sėklų vabzdžių mitybai ir po to - 25 ml su-drėkintos dirvos. Indai uždaromi dangčiu, ir jų turinys kruopščiai maišomas maišikliu "Vortex". Gerai sumai-šius, i, kiekvieną indą pridedama po 10 ilgaūsio vabalo-blakutės lervų 3 vystymosi stadijoje ir indai uždaromi dangteliais nehermetiškai, kad laisvai praeitų oras, reikalingas lervų gyvybinei veiklai. Apdorojama 6 paras prieš skaičiuojant vabzdžių mirtingumą. Nerastos lervos laikomos sunaikintomis, nes jos greitai suyra ir jų negalima aptikti. Bandymams naudojamos koncentracijos atitinka maždaug 50 ir 10 kg/ha aktyvaus komponento.
[0073] Vertinimų skalė: O=efekto nėra;
[0074] 1=10-25 % mirtingumo; 2=26-35 % mirtingumo;
[0075] 3=36-45 % mirtingumo; 4=46-55 % mirtingumo;
[0076] 5=56-65 % mirtingumo; 6=66-75 % mirtingumo;
[0077] 7=76-85 % mirtingumo; 8=86-99 % mirtingumo;
[0078] 9=100 % mirtingumo; R=maisto suvartojimo sumažėjimas.
[0079] Duomenys, gauti panaudojus aukščiau aprašytą vertinimų skalę, pateikti 1 lentelėje.
[0080] Heliothis virescens , 3 vystymosi stadija, purpurinis tabako lapsukis
[0081] Medvilnės sėklos panardinamos i, tiriamą kompoziciją ir džiovinamos ant dangčio. Išdžiovinus kiekviena sėkla išskirstomą ketvirčiais ir 10 dalių patalpinama indivi-dualiai i, medicininius plastmasinius 30 ml talpos inde-lius, su dantų tampono 5-7 cm ilgio drėgna atkarpa. Į kiekvieną indeli, įdedama po vieną 3 stadijos vikšrą, ir indelis uždengiamas kartoniniu dangteliu. Apdoroti pa-vyzdžiai išlaikomi 3 paras, nustatomas mirtingumas ir įvertinamas maisto suvartojimo sumažėjimas.
[0082] Maždaug 5 cm ilgio Limo pupelių lapai 3 sekundėms mai-šant panardinami i, tiriamą kompoziciją, vėliau džiovi-nami ant dangčio. Lapas talpinamas i, 100x10 mm dydžio Petri lėkštelę, išklotą drėgnu filtro popieriumi. Į kiekvieną Petri lėkštelę įdedama po 10 suaugusių kupriuko individų ir apdoroti pavyzdžiai išlaikomi tris paras, po ko nustatomas mirtingumas.
[0083] Blattella germanica , j auko bandymas , rudoj o tarakono patino suaugę individai
[0084] 0, 1% jaukas gaunamas pridedant pipete 1 ml tirpalo, tu-rinčio 1000 m. d. tiriamojo junginio acetone 1 g kvie-tinės duonos, patalpintos 30 ml inde su plačia anga. Jaukas džiovinamas lengvu oro srautu. Jaukas patal-pinamas i, 1 pintos talpos plačiakakld, Masono indą ir ten pat pridedama 10 suaugusių rudojo tarakono patinų. Indas uždengiamas tinkleliu, ant jo viršaus padedamas nedidelis vatos gabalėlis, suvilgytas 10% medaus tirpalu. Mirtingumas nustatomas po 3 parų.
[0085] Blattella germanica , liekamoj o veikimo testas , rudojo tarakono patino suaugę individai
[0086] Tiriamo junginio 1 ml 1000 m. d. acetoninio tirpalo lėtai lašinama pipete i, 150x15 mm dydžio Petri lėkš-telę, siekiant, kad jos dugnas būtų kiek galint to-lygiau padengtas. Tirpalą išdžiovinus, i, kiekvieną Petri lėkštelę patalpinama po 10 suaugusių tarakonų patinų ir uždengiama dangčiu. Po trijų parų nustatomas mirtingumas .
[0087] Spodoptera eridania , sisteminis tyrimas, 3 stadijos lervos, pelėdgalvis
[0088] Junginys gaunamas emulsijos pavidalu ir susideda iš 0,1 g tiriamojo junginio, 0,2 g emulgatoriaus "Emulfor EL-620", 10 ml acetono ir 90 ml vandens. Gauta emulsija atskiedžiama dešimteriopu vandens kiekiu; tiriamo junginio koncentracija gaunama 100 m. d. Esant reikalui galima dar 10 kartų atskiesti vandeniu. Limo pupelės su 7-8 cm ilgio pagrindiniais lapais nupjaunamos ne žemiau 3 cm nuo dirvos paviršiaus, kad būtų išvengta užteršimo dirvos bakterijomis, kurios tyrimo metu galėtų sukelti stiebo puvini,. Nupjauti stiebai patalpinami i tiriamą emulsiją, ir kiekvienas iš jų prilaikomas vatos tam-ponu, kad nesiektų dugno ir kad būtų apribotas junginio garavimas. Bandymas atliekamas 3 paras 27°C tempera-tūroje, kas sudaro sąlygas junginiui pilnai patekti i, augalą. Po to nupjaunamas vienas augalo lapelis ir pa-talpinamas i, 100x10 mm dydžio Petri lėkštelę, su 10 pe-lėdgalvio individų. Mirtingumas ir suvartojamo maisto sumažėjimas nustatomi po 3 ir 5 parų.
[0089] Empoasca abrupta , kupriuko suaugę individai, sisteminis tyrimas
[0090] Junginys gaunamas emulsijos pavidalu ir susideda iš 0,1 g tiriamojo junginio, 0,2 g emulgatoriaus "Emulfor EL-620", 10 ml acetono ir 90 ml vandens. Gauta emulsija atskiedžiama dešimteriopu vandens kiekiu; tiriamo junginio koncentracija gaunama 100 m. d. Esant reikalui galima dar 10 kartų atskiesti vandeniu. Limo pupelės su 7-8 cm ilgio pagrindiniais lapais nupjaunamos ne mažiau 3 cm nuo dirvos paviršiaus, kad būtų išvengta užteršimo dirvos bakterijomis, kurios tyrimo metu galėtų sukelti stiebo puvini,. Nupjauti stiebai patalpinami i, tiriamą emulsiją, ir kiekvienas iš jų prilaikomas vatos tam-ponu, kad nesiektų dugno ir kad būtų apribotas junginio garavimas. Bandymas atliekamas 3 paras 27°C tempera-tūroje, kas sudaro sąlygas junginiui pilnai patekti į augalą. Po to nupjaunamas vienas augalo lapelis ir pa-talpinamas i, 100x10 mm dydžio Petri lėkštelę, su 10 kupriuko individų. Mirtingumas nustatomas po 3 parų. Ver-tinimui naudojama empirinė skalė, aprašyta 2 pavyz-dyje. Gauti duomenys pateikti 2 lentelėje.
[0091] Junginių pagal ši, išradimą nematocidinio aktyvumo nustatymas
[0092] Kultūros: Naudojama C. elegans (Dž. Liuiso Bristolio štamas) kultūra ant E. coli, auginama 20°C tempera-tūroje ant agar-agaro NG plokštelių. Naujos kultūros gaunamos kas savaitę.
[0093] Bandymams reikalingas nematodas nuplauna nuo 4-5 parų amžiaus kultūrų šviežiu FARS tirpalu. Lervos vėl per-plaunamos FARS tirpalu su gentamicinu bakteriniam už-terštumui sumažinti ir centrifūguojamos nuo tirpiklio. Procedūra pakartojama tris kartus. Perplautos lervos pridedamos terpėn, kuri palaiko C. briggsae (iš GIBCOa), ir pridedama gentamicino (600 v.v./ml) ir mik-rostatino (0,5 mg/ml).
[0094] Po to ruošiami mėginiai bandymams trijų junginių miši-niu, nenaudojant tobulesnių bandymų programų, dėl ko sutaupoma darbo jėgos sąnaudų ir junginių.
[0095] Junginiai tirpinami acetone, iki reikiamo tūrio pridedant vienodą vandens dalių skaičių. Kiekvieno tiriamojo junginio galutinė koncentracija mišinyje sudaro 150 m.d. Tiriama medžiaga mikropipete (25 fil) pernešama i, 96 vietų sterilios plokštelės audinių kultūroms tirti (COSTAR) pavienę gardelę ir leidžiama išgaruoti tirpikliui. Taip "apdorotos" plokštelės naudojamos tuoj pat arba saugomos šaldytuve be jokio poveikio junginiams pagal šį išradimą.
[0096] Šviežia C. elegans kultūra C. briggsae palaikančioje terpėje mikropipete (50 įj.1) pernešama i, kiekvieną ap-dorotą gardelę ir d, keletą kontrolinių gardelių kiek-vienoje plokštelėje. Plokštelės su kultūromis laikomos 20°C temperatūroje.
[0097] Efektas stebimas mikroskopiškai praėjus 4, 24 ir 48 vai po apdorojimo. Prieš pat plokštelės apžiūrą ji lengvai sukrečiama lervų judrumui paskatinti. Aktyvumas įver-tinamas subjektyviai, tačiau pusiau kiekybiškai, re-miantis lėlyčių ir suaugusių nematodų judrumą įta-kojančių priemonių efektyvumu. Tam tikslui naudojami šie vertinimai: B = judrumo nėra, 7 = pastebimas judrumo sumažėjimas pas apytikriai 95% lervų, 6 = su-mažėjęs judrumas, 5 = šiek tiek sumažėjęs judrumas, 0 = normalus judrumas, vienodas su kontroliniu pavyzdžių judrumu. Lengvai nustatomi ir kiti faktoriai, nuro-dantys junginių aktyvumą, pvz., mirtingumas, priešmir-tinė koma, traukuliai, raitymasis, paralyžius, neįpras-ti trūkčiojimai, lėlyčių populiacijos sumažėjimas per 48 vai ir kiti pokyčiai, palyginus su normalia elgsena.
[0098] 0 Diena: Petri lėkštučių inokuliavimas su agar-agaru 30-50 C. elegans, inkubacija 20°C tempera-tūroje . 4 Diena: C. elegans naujos populiacijos išauginimas, praplovimas antibiotikais, perkėlimas i, C. briggsae palaikančią aplinką, C. elegans įterpimas (25-100 VL) i, "apdorotas"* garde-les, aktyvumo stebėjimas, praėjus 4 vai po panardinimo.
[0099] * Apdorotos gardelės gali būti paruoštos šviežiai arba anksčiau, jas laikant šaldytuve.
[0100] Išvardintų bandymų rezultatai pateikti 3 lentelėje.
1. Junginiai, aprašomi bendra formule:
2. Junginiai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad L yra vandenilio arba fluoro atomas,M yra vandenilis, fluoras, chloras arba bromas,R yra fluoras, chloras, bromas, CF3 arba OCF3,W yra ciano- arba nitrogrupė,X ir Y kiekvienas yra chloras, bromas arba CF3.
3. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis atitinka II formulę
4. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis atitinka III formulę
5. Kovos būdas su vabzdžiais, nematodomis ir erkėmis, besiskiriantis tuo, kad atliekamas minėtų vabzdžių, nematodų ir erkių grunto, kuriame yra jų buvimo vieta, jų maisto arba apgyvendintų vietų kontak-tavimas su efektyviu insekticidiniu, nematocidiniu arba akaricidiniu aspektu junginio pagal I formulę kiekiu, kur A, L, M, R, W, X ir Y turi tokią pačią reikšmę, kaip ir 1 punkte.
6. Būdas pagal 5 punktą, besiskiriantis tuo, kad nurodytas I formulės junginys yra struktūros, aprašytos 2 punkte.
7. Augalų apsaugos nuo vabzdžių, nematodų ir erkių būdas, besiskiriantis tuo, kad ant nurodytų augalų lapijos užnešama arba įterpiama i, dirvą ar vandeni,, kur jie auga, efektyvus insekticidiniu, nematocidiniu arba akaricidiniu aspektu junginio pagal I formulę kiekis, kur A, L, M, R, W, X ir Y turi tokią pačią reikšmę, kaip ir 1 punkte.
8. Būdas pagal 7 punktą, besiskiriantis tuo, kad nurodytas junginys užnešamas ant minėtų augalų arba įterpiamas i, dirvą, kurioje jie auga, kiekiu nuo 0, 125 kg/ ha iki 4, 0 kg/ ha ribose.
9. Būdas pagal 7 punktą, besiskiriantis tuo, kad nurodytas junginys pagal I formulę užnešamas ant nurodytų augalų lapijos arba įterpiamas į dirvą ar vandenį, kur jie auga, skystos kompozicijos forma, su-darančios nuo 10 m. d. iki 10000 m. d. nurodyto junginio pagal 1 formulę.
10. Junginių pagal 1 formulę gavimo būdas: