[LT] Išradimas skirtas fermentinių substratų detekuojančių grupių, kuriomis yra 5-aminonaftalen-1-sulfamidai, gavimo būdui.@Išradimo tikslas - supaprastinimas ir jo selektyvumo padidinimas, galutinių produktų išeigų ir asortimento padidinimas.@Tikslas pasiekiamas aminonaftalensulforūgšties piridino druskų betarpišku gavimu acilinimo proceso metu, t.y. acilinant ftalio anhidridu verdančiame piridine, iškritusio produkto filtravimu, sulfonilchloridų gavimu naudojant chlordezoksigeninį reagentą fosforo pentachloridą organiniame tirpiklyje, gauto sulfochlorido reagavimu su aminu arba jo vandens tirpalu acetone dalyvaujant bazei, surišančiai reakcijos eigoje susidarantį vandenilio chloridą, tolesniu tirpiklio nugarinimu, gauto reakcijos mišinio apdorojimo vandeniu, galutinio produkto išskyrimu, apsauginės grupės nuėmimu hidrazinhidratu verdančiame organiniame tirpiklyje.@Išradime siūlomas būdas pranašesnis už žinomą tuo, kad sumažinamas stadijų skaičius, atpiginamas galutinių produktų gavimas, atsisakant brangaus reagento trifluoracto rūgšties anhidrido, išplečiamas reagentų, skirtų proteazių analizei, asortimentas.
[EN]
[0001] Išradimas skirtas aminonaftalensulfo rūgščių darinių gavimui, būtent, 5-aminonaftalen-l-sulfamidų, kurie yra naudojami kaip detektuojančios grupės proteazių fermentinio aktyvumo nustatymui ir jų sudėtingų mišinių analizei, gavimo būdo patobulinimui.
[0002] SU patente Nr. 1648055 pažymėta, kad 5-aminonaftalen-l-sulfamidai naudo jami sintetinant įvairius , dažniausiai peptidinius, aminonaftalensulfamidinius darinius, skirtus proteazių analizei. Sutinkamai su šiuo patentu, protezių analizė paremta tuo, kad išeiginiai peptidilamidonaftalensulfamidai daugiakomponentinių proteazių mišinių poveikyje selektyviai atskelia 5-aminonaftalen-l-sulfamidines grupes, kurios lengvai detektuojamos chromotografiniais metodais. Toks analizės metodas, skirtingai nuo yprastinių, įgalina kokybiškai įvertinti sudėtingas proteazių daugiakomponentines sistemas, charakterizuoti kiekvieną proteazę atskirai, neišskiriant jos iš mišinio.
[0003] Todėl patogaus ir paprasto detektuojančių grupių - 5-aminonaftalen-l-sulfamidų gavimo būdo sukūrimas, išplėstų gaunamų 5-aminonaftalen-l-sulfamidų spektrą, o aprašytas fermentinės analizės metodas būtų labiau prieinamas .
[0004] SU patente Nr. 1419107 aprašyta - 5-(N-karbobenzoksi)-aminonaftalen-l-sulfonato natrio druska esanti tarpiniu produktu 5-aminonaftalen-l-sulfamidų gavimui. Šiame išradime aprašomas gavimo būdas susideda iš acilintos 5-(N-karbobenzoksi)-aminonaftalen-l-sulfo rūgšties gavimo, šios rūgšties natrio druskos išskyrimo, atitinkamo sulfochlorido gavimo, kuriam reaguojant su piridinu susidaro 5-(N-karbobenzoksi)aminonaftalen-l- (N^N^pentametilen)-
[0005] sulfamidas, gauto sulfamido deacilinimo reakcijos, dalyvaujant hidrobromidui, atitinkamo aminonaftalensulfamido hidrobromido išskyrimo ir, veikiant šarminių reagentų pertekliuimi, galutinio produkto: 5-aminonaftalen-l-(NI,Nn-pentametilen)sulfamido gavimo.
[0006] Šis būdas yra nepatogus naudoti gamyboje dėl sunkiai prieinamų, nestabilių ir pramonėje negaminamų reagentų (karbobenzoksichlorido, hidrobromido) naudojimo.
[0007] Produkto gavimo eiga sudėtinga, apima daug stadijų. Šalinant acilinę N-karbobenzoksi grupę hidrobromido poveikyje galimos pašalinės reakcijos, dėl to piridine, gaunami atitinkami 5-ftalimidonaftalen-l-sulfamidai ir galutiniai produktai gaunami, nuskeliant ftalimidinę grupę hidrazinhidratu metanolyje.
[0008] Išradime siūlomas būdas pranašesnis už žinomą tuo, kad sumažinamas stadijų skaičius, atpiginamas galutinių produktų gavimas, atsisakant brangaus reagento trifluoracto rūgšties anhidrido, o taip pat išplečiamas reagentų, skirtų proteazių analizei, asortimentas. Patogaus ir paprasto detektuojančių grupių 5-aminonaftalen-l-sulfamidų gavimo būdo sukūrimas sudaro sąlygas prieinamai naudotis, SU patente Nr 1648055 aprašytu, proteazių fermentinio aktyvumo nustatymo metodu.
[0009] /
[0010] 223 g(l molis) techninės 5-aminonaftalen-l-sulforūgšties ir 148 g(l molis) ftalio anhidrido virinama 1 1 piridino. Po valandos pradeda kristi nuosėdos. Virinama dar 3 valandas, paliekama kambario temperatūroje 20 valandų. Iškritusios nuosėdos filtruojamos, perplaunamos piridinu, po to vandeniu, džiovinamos 110 °C temperatūroje ir kristalinama iš vandens. Gaunama 335 g analitiškai ir chromatografiškai gryno produkto (išeiga 82 %), lyd.t. 280-282°C, Rf = 0,50 (alufolas, butanolis-acto rūgštis-vanduo 4:1).
[0011] Rasta, %: C 63,96 H 3,74 N 6,68 S 6,96.
[0012] Apskaičiuota, %: 63,88 3,73 6,48 7,41. C23H16N2SO5.
[0013] Pagal 1 pavyzdį iš 323 g trietilamonio 5-aminonaftalen-l-sulfonato gaunama 280 g galutinio produkto (išeiga 65 %).
[0014] Į 86,5 g(0,2 molio) 5-ftalimidonaftalen-l-sulforūgšties piridinio druską ir 120 g fosforo pentachlorido supilama 800 ml anglies tetrachlorido ir virinama 5 valandas. Pirmiausiai esant sumažintam slėgiui, nugarinamas tirpiklis, po to reakcijos eigoje susidaręs fosforo oksichloridas. Kolboje esantis turinys sumaišomas su 5 litrais ledinio vandens ir po valandos nufiltruojamas produktas . Jis perplaunamas vandeniu, džiovinamas ore 20 valandų, po to iki pastovaus svorio - vakuminiame eksikatoriuje. Gaunama 71 g (išeiga 95 %) analitiškai ir chromatografiškai gryno produkto (esant reikalui kristalinama iš tolueno), lyd.t. 227-231°C, Rf = 0,42 (alufolas, benzenas).
[0015] Rasta, %: C 57,98 H 2,69 N 3,80 S 8,18 C1 9,05.
[0016] Apskaičiuota, %: 58,15 2,71 3,77 8,62 9,53. C18H10CINO4S.
[0017] Gaunamas pagal 3 pavyzdį, vietoje anglies tetrachlorido naudojama 800 ml chloroformo (išeiga 96 %).
[0018] 11 ml (0,11 molio) piperidino ir 14 ml trietilamino ištirpinama 500 ml acetone, per 10 minučių sudedama 37,1 g(0,l molio) 5-ftalimidonaftalen-l-sulfonilchlorido ir maišoma 4 valandas 20°C temperatūroje. Acetonas nugarinamas sumažintame slėgyje, nuosėdos užpilamos 1 1 vandens, po 20 valandų produktas filtruojamas vandeniu, džiovinamas, kristalinamas iš metanolio, gaunama 38,5 g (išeiga 92 %) chromatografiškai ir analitiškai gryno produkto, lyd.t. 298-300°C, Rf = 0,71 (alufolas, dietilo eteris-benzenas 1:1).
[0019] Rasta, %: C 65,51 H 4,86 N 6,40 S 7,09.
[0020] Apskaičiuota, %: 65,70 4,79 6,66 7,62. C23H20N2SO4.
[0021] 15 ml (0,11 molio) 25 % metilamino tirpalo vandenyje ir 14 ml (0,1 molio) trietilamino ištirpinama 500 ml acetono, per 10 minučių sudedama 37,1 g(0,l molio) 5-ftalimidonaftalen-l-sulfonilchlorido, maišoma 4 valandas 20°C temperatūroje. Toliau apdorojama pagal 5 pavyzdyje aprašytą metodiką. Gaunama 3,4 g (išeiga 93 %) chromatografiškai ir analitiškai gryno produkto, kurio lyd.t. 194-196°C, Rf = 0,58 (silufolas, dietilo eteris, benzenas 1:1).
[0022] Rasta, %: C 62,28 H 3,98 N 6,80 S 8,25.
[0023] Apskaičiuota, % : 62, 29 3,85 7,64 8,75. C19H14N2SO4.
[0024] Likusių junginių, gautų pagal metodikas, aprašytas 5 ir 6 pavyzdžiuose, charakteristikos pateiktos 1 ir 2 lentelėse.
[0025] Į 4,20 g (0,01 molio) 5-ftalimidonaftalen-l-pentametilensulfamido pripilama 50 ml metanolio, sulašinama 0,5 ml (0,01 molio) hidrazinhidrato ir virinama 4,5 valandos. Metanolis nugarinamas, liekana ekstrahuojama verdančiu chloroformu du kartus po 20 ml, ekstraktas nugarinamas, liekana kristalinama iš metanolio. Gaunama 2,85 g (išeiga 98 %) chromatografiškai ir analitiškai gryno produkto, kurio lyd.t. 155-159°C, Rf = 0,63 (alufolas, chloroformas, etilacetatas 1:1).
[0026] Likusių aminonaftalensulfamidų gavimo pavyzdžiai pateikti 3 lentelėje, o jų charakteristikos - 4 lentelėj e.
[0027]
Pavaduotų 5-aminonaftalen-l-sulfamidų, kurių bendra formulė: