[LT] Išradimas skirtas naujų tieno(3',4',-4,5)-imidazo(2,1-b)-tiazolo darinių, kurių formulė I, kurioje R1 yra vandenilis, halogenas arba CF3, ir R2 yra vandenilis arba C1-C4-alkilas, ir tuo atvėju, kai R2 yra vandenilis, ir jų farmaciškai tinkamų druskų gavimo būdui, kurio esmė ta, kad junginį, kurio formulė II, kurioje R1 turi aukščiau nurodytas reikšmes, o R2 yra C1-C4-alkilas, arba šio junginio aktyvi druska su rūgštimi, ciklizuoja esant vandenį atimantiems reagentams, po to gautą esterį hidrolizuoja šarmais žinomomis sąlygomis ir, jeigu pageidaujama, gautą rūgštį panaudojant neorganines arba organines bazes paverčia farmaciškai tinkama druska. Naujieji junginiai gali būti panaudojami vėžio arba reumatinių artritų gydymui, kuriuos sukelia defektinė imunosistema.
[EN]
[0001] Išradimas skirtas naujų tieno(3',4'-4,5)-imidazo(2,1-b)-tiazolo darinių gavimo būdui ir jų, kaip medikamentų imuncsis-temos stimuliavimui, panaudojimui.
[0002] S.C. Gilman ir kt., Agents and Actions, 17_, 1 (1985 ) ap-rašo 3-(p-chiorfenil)tiazo(3,2- b)-benzimidazol-2-acto rūgštį, kaip priešuždegiminę ir imunomoduliuojančią medžiagą.
[0003] Šiuo metu rasta, kad tieno(3',4'-4,5)-imidazo(2,i-b)tiazc-lo dariniai pasižymi geresniu, negu šiuo metu šioje srityje yra žinoma, farmakologiniu poveikiu.
[0004] Todėl šio išradimo objektas yra naujų junginių, kurių for-mulė I:
[0005] R^ yra vandenilis, halogenas arba trifluorrnstiias ir R? yra vandenilis arba C--C^-alkilas, ir tuo atveju, kai R? yra vandenilis, jų farmakologiškai tinkamų druskų gavimo būdas. Pagal šį išradimą, tienc(3',4'-4,5)-imidazo(2,1-b)-tiazolo dariniai ir jų druskos gaunami
[0006]
[0007] kurioje R^ turi aukščiau nurodytas reikšmes, o R^ Yra C-.-C.-ai-kilas, arba jo adityvią druską su rūgštimi, esant vandenį atske-liantiems reagentams, po to
[0008] b) caio gautą I formulės junginį, kuriame R_ yra C,-C,-al-£ X fr
[0009] kilas, muilinant žinomose sąlygose iki I formulės junginio, kuriame R^ yra vandenilis, ir
[0010] c) jeigu pageidaujama, b) stadijoje gauta I formulės rūg-štis, kurioje R0 yra vandenilis, veikiant neorganinėmis arba
[0011] organinėmis bazėmis, paverčiama farmaciškai tinkama druska.
[0012] Aprašyme naudojamas terminas "C^-C^-alkilas" reiškia lini-jinės arba šakotos grandinės angliavandenilio liekanas su 1-4 C-atomais, kaip pavyzdžiui, metilas, etilas, propilas, izopro-pilas, butilas, izobutilas, tret.-butilas. Terminas "halogenas" raiškia chlorą, bromą arba fluorą.
[0013] Tinkamiausia I formulės junginių klasė yra tokia, kurioje R^ yra chloras, c R^ yra vandenilis arba metilas.
[0014] Ypatingai tinkami individualūs junginiai yra tokie: 3-(4-chlorfenil)-tieno(3',4'-4,5)-imidazc(2,l-b)-tiazol--2-acto rūgšties metilo esteris,
[0015] 3-(4-chlorfenil)-tieno(3',4'-4,5)-imidazo(2,l-b)-tiazol--2-acto rūgštis.
[0016] Vandenį atimančiais reagentais, ciklizuojant II formulės junginius, gali būti naudojami visi paprastai naudojami vande-
[0017] nį atimantys reagentai. Tinkamiausiais reagentais laikoma polifosforo rūgštis arba fosforo oksichloridas, kuriuos galima naudoti taip pat ir kaip tirpiklį. Ypatingai tinkamas yra fosforo oksichloridas. Ciklizacijos temperatūra turi būti apie 60-110 °C. Ęosforo oksichloridc atveju geriausia ciklizuoti virimo temperatūroje su grįžtamu šaldytuvu. Reakcijos laikas, priklausomai nuo temperatūros ir ciklizacijos agento, yra apytikriai nuo 5 minučių iki 4 valandų, geriausia 5-30 minučių.
[0018] Reakcijos mišinys apdorojamas, panaudojant įprastus valymo metodus, tokius kaip perkristalinimas, ekstrakcija, kolonėlių chromatografija ir kt. Geriausia naudoti ekstrakciją etilacetatu, nudistiliavus fosforo oksichlorido perteklių ir neutraliza-vus gautą tirpalą.
[0019] I formulės esterius žinomose sąlygose virinant su bazėmis, geriausia su ekvivalentiniais kiekiais šarminių metalų hidrck-sidų, nuo 5 minučių iki 1 valandos, geriausia pridėjus tirpiklio, tokio kaip, pavyzdžiui, metanolio arba etanolio, galima hid-rolizuoti su beveik kiekybine išeiga į I formulės junginius, kuriuose yra vandenilis. Ypatingai gerai vyksta hidrolizė, kai esteris suspenduojamas metanolyje ir sumaišomas su ekvivalenti-niu kiekiu natrio hidroksido praskiesto tirpalo ir virinamas su grįžtamu šaldytuvu apytikriai 5-25 minutes.
[0020] Gauti pagal gavimo būdo b) stadiją I formulės junginiai, kuriuose yra laisva karboksilo grupė, įprastu būdu, panaudojant neorganines arba organines bazes, gali būti paverčiami jų farma-kologiškai tinkamomis druskomis. Druskas galirna pagaminti, pa-vyzdžiui, nurodytus I formulės junginius, kuriuose R2 yra vandenilis, tirpinant tinkamame tirpiklyje, tokiame kaip, pavyzdžiui, vanduo arba žemesnysis alifatinis alkoholis ir pridedant ekvi-valentinį kiekį norimos bazės (reikia gerai maišyti) , ir pa-sibaigus druskos susidarymo reakcijai, tirpiklį nugarinant va-kuume. Išskirtas druskas galima perkristalinti žinomose sąlygo-se .
[0021] Farmaciškai tinkamos druskos gali būti metalų, ypatingai šarminių arba žemės šarminių metalų, druskos, tokios kaip natrio, kalio, magnio arba kalcio druskos. Kitos farmaciškai tinkamos druskos yra, pavyzdžiui, taip pat lengvai iskristalinamcs amo-nio druskos. Pastarosios gali būti amoniako arba organinių ami-nų, pavyzdžiui, mono-, di- arba tri-žemesniojo alkilo, cikloal-kil- arba -oksiaikilaminų druskos, žemesniųjų alkilendiaminų arba oksi-(žemesnysis alkilas)- arba aril-(žemesnysis alkilas)-(žemesnysis alkilas)-amonio bazių druskos, pavyzdžiui, metilamino, dietilamino, trietilamino, dicikloheksilamino, tri-etanolamino, etiiendianino , tris ( oksimetil) arnino-metano, ben-ziltrimetilamonic chlorido ir pan.
[0022] Junginiai, kurių formulė II, gali būti sintezuojami, išeinant iš literatūroje žinomų junginių, kurių formulė III (F.Ontergnon ir C. Paulmier, Sull. Soc. chim. Fr., Nr.5-6 , 159-163 ( 1983 ) ,-ir C.F.H. Allen, J.B. Houningtcn ir C.V. Wilson,Can. J. Research, 11, 382 C L?84) ) įprastais kiekvienam specialistui cheminiais me-todais pagal reakcijos schemą:
[0023] Naujieji I formulės junginiai ir jų farmaciškai tinkamos druskos in vitro modeliuose puikiai stimuliuoja imunosistemą.
[0024] Ši imunosistemos stimuliavimą galima matyti, pavyzdžiui, ma-tuojant testuojamų junginių priešuždegiminį, aktyvumą bandymuo-se su papildomai indukuctomis žiurkėmis, sergančiomis poliartritu.
[0025] Šioje test-sistemoje lyginamas šios paraiškos 2 pavyzdžio medžiagos (junginys A) ir 3-(4-chlorfenil)-tiazol(3,2-a)-benz-imidazci-2-acto rūgšies '(tilomizolas) , (3 pavyzdys) priešužde-giminis poveikis. Iš šio palyginimo matyti, kad šio išradimo junginys aiškiai pralenkia tilomidazolą.
[0026] Remiantis šiomis farmakologinėmis savybėmis, naujuosius junginius galima naudoti kaip vaistus, tiek atskirai paimtus, tiek ir mišiniuose su kitomis biologiškai aktyviomis medžiagomis įprastų gaieninių kompozicijų formoje, esant susirgimams, kuriuos sukelia defektinė imuncsistema, tokiems kaip, pavyzdžiui, vėžys
[0027] Junginiai, kurių formulė I, skirti naudoti žmonėms ir ga-li būti vartojami, pavyzdžiui, oraliniu arba parenteriniu bū-du. Geriausia juos naudoti oraliniu būdu; šiuo atveju paros dozė yra apytikriai 0,1-100 mg/kg kūno svorio, geriausia 0,2-20 mg/kg kūno svorio. Tačiau gydantis gydytojas, priklausomai nuo bendro stovio ir paciento amžiaus, ligos prigimties ir vaisti-nės formos, gali paskirti didesnes arba mažesnes I formulės junginio dczes.
[0028] Tais atvejais, kai išradime siūlomos medžiagos naudojamos profilaktikai, dozių parinkimas yra kintamas apytikriai tose pačiose ribose, kaip ir gydymo atveju. Profilaktikos atveju tin-kamiausias yra oralinis vaisto vartojimas.
[0029] tu su kitomis farmaciškai veikliomis medžiagomis, kur I formu-lės junginio kiekis yra 0,1- 95 % ribose. Bendrai paėmus, far-maciškai aktyvūs junginiai yra mišinyje su tinkamomis inerti-nėmis pagalbinėmis medžiagomis ir/arba nešėjais arba skiedikliais, tokiais kaip pavyzdžiui, farmakologiškai nekenksmingi tirpikliai, želatina, gumiarabikas, pieno cukrus, krakmolai, magnio stearatas, talkas, augaliniai aliejai, pclialkilengliko-lis, vazelinai ir pan. Farmaciniai preparatai gali būti kietoje formoje, pavyzdžiui, tabletės, dražė, žvakutės, kapsulės ir pan., pusiau kietoje formoje, pavyzdžiui, tepalai, arba skystoje formoje, pavyzdžiui, tirpalų, suspensijų arba emulsijų pavidalu. Jie sterilizuojami žinomose sąlygose ir į. juos įeina pagalbinės me-džiagos, tokios kaip konservantai, stabilizatoriai arba emulga-toriai, druskos osmoso slėgio pakeitimui ir pan.
[0030] Atskirais atvejais į farmacinius preparatus gali įeiti iš-radime siūlomi junginiai derinyje su kitomis terapiškai vertin-gomis medžiagomis. Ir kombinuotuose preparatuose išradime siūlo-mi junginiai gali būti kartu su, pavyzdžiui, aukščiau minėtomis pagalbinėmis medžiagomis ir/arba nešėjais arba skiedikliais.
[0031] 1 pavyzdys
[0032] 3-( 4- chlorfenil)- tieno( 3', 4'- 4, 5)- imidažo( 2, 1- b)- tiazol- 2- acto rūgšties metilo esteris
[0033] 3,00 g (17,3 inmoi) 4-(4-chlorfenil)-4-okso-3-/lH-tieno(3,4-b) -imidazol-2-il/tiobutano rūgšties metilo esterio nidrobromido suspenduojama 75 ml fosforo oksitrichlorido ir virinama 10 mi-nučių. Fosforo oksitrichlorido perteklius nugarinamas ir liekana neutralizuojama sočiu natrio hidrckarbonato tirpalu. Po to tris kartus ekstrahuojama etilacetatu (iš viso 500 ml). Sumaišy-tos organinės fazės džiovinamos natrio sulfatu, nufiltruojama ir nugarinama. Liekana perkristalinama iš acetono.
[0034] išeiga: 2,00 g (31,8 %). Lyd. temp.: 138-190 °C (acetonas).
[0035] 1H-BMR (DMSO),S\ m.d.: 7,68 (singlstas, 4H, Ph-H); 7,22, 7,19, 6,54, 6,51 (AB, 2H, Ph-H); 3,81 (singletas, 2H, C^COO); 3,67 (gingletas, 3H, COOCH^).
[0036] Pradines medžiagas galima gauti tokiu būdu:
[0037] 50,0 g (0,221 mol) 4-(4-chlorfenil)-4-oksobutano rūgšties metilo esterio (C.F.H. Allen, J.B. Normington, C.V. Wilson, Can. J. Research, Ll, 382 (1934)) ištirpinama 250 ml ledinės acto rūgšties ir pridedami trys lašai bromo vandenilio tirpalo ledi-nėje acto rūgštyje . Maišant, lašinamas bromas (35,3 g, 0,221 mol)
[0038] taip, kad reakcijos mišinys pastebimai nenusidažytų ruda spal-va. Pabaigus lašinimą, maišoma dar 15 minučių. Po to ledinė acto rūgštis nudistiiiuojama.
[0039] Liekana neutralizuojama sočiu natrio hidrokarbonato tirpalu ir tris kartus ekstrahuojama metileno chloridu (iš viso 600 ml). Sumaišytos organinės fazės džiovinamos natrio sulfatu, nufiltruojama ir nugarinama (67,2 g geltonos alyvos). Aly-va trinama su metanoliu ir perkristalinama iš metanolio. Išei-ga: 65,2 g (57 %) bespalvių kristalų. Lyd. temp.: 48-4S C
[0040] (iš metanolio).
[0041] 4-( 4- chlorf enil) - 4- okso- 3-( lH- t. ien{ 3, 4- b) - imidazol- 2- il) - tio-butano rūgšties metilo esterio hidrobromidas
[0042] A,00 g (25,6 mmol) 1,3-dihidtotien(3,4-b)-imidazol-2-tieno ir 7,11 g (23,3 mmol). 3-brom-4-(4-chlorfenil)-4-cksobutano rūgšties metile esterio ištirpinama 100 ml absoliutaus metanolio ir virinama su grįžtamu šaldytuvu 1,5 valandos. Po to į tirpalą pridedama apie 1 g aktyvuotos anglies, nufiltruojama ir nugarinamas tirpiklis. Gauta liekana išlaikoma su dietilo eteriu, išeiga: 9,10 g smėlio spalvos kristalų (84,6 %). Lyd. temp.: 130-185 °C, skyla (iš acetono).
[0043] 2 pavyzdys
[0044] 3-( 4- chlorfenil)- tien( 3', 4'- 4, 5)- imidazo( 2, 2- b)- tiazol- 2- acto rūgštis
[0045] 2,00 g (5,51 mmol) 3-(4-chlorfenil)-tien(3',4'-4,5)-imidazo(2,1-b)-tiazol-2-acto rūgšties metilo esterio suspenduojama 20 ml metanolio, sumaišoma su 3 ml 2N natrio hidroksido vandeninio tirpalo ir virinama su grįžtamu šaldytuvu 15 minučių. Reakcijos mišinys koncentruojamas maždaug iki 10 ml tūrio
[0046] ir parūgštinamas 2N druskos rūgštimi. Išsi.-kyręs produktas nu-siurbiamas, perplaunamas tris kartus distiliuotu vandeniu ir perkristalinamas iš metanolio.
[0047] Išeiga: 1,50 g (78 %) bespalvių kristalų. Lyd. temp.: 200-210 °C, skyla (iš metanolio).
[0048] "'"H-BMR (DMSO),5", m.d.: 8,87 (singletas, platus, 1H, COOH) , 7,72 (singletas, 4H, Ph-H), 7,42, 7,39, 6,77, 6,74 (AS, 2H, Ph-H), 3,83 (singletas, 2H, Cr^-COO-).
[0049] Imunomoduliuojančio poveikio tyrimas bandyme su papildomai indukuotomis, poliartritu sergančiomis žiurkėmis
[0050] 3-(4-chlorfenil)-tien(3',4'-4,5)-imidažo(2,l-b)-tiazol-2--acto rūgšties (junginys A, šios paraiškos 2 pavyzdžio junginys) farmakologinis poveikis matuojamas, lyginant su 3-(4-chlorfe-nil)-tiazol(3,2-a)-benzimidazil-2-acto rūgštimi (tilomizolas, junginys B) bandyme su papildomai indukuotomis, poliartritu sergančiomis žiurkėmis.
[0051] Siame teste žiurkių Levis patelėms, kurios pasižymi įgimtu imuniniu defektu, leidžiami į. pilvo ruimą tiriamieji junginiai 16 dienų laikotarpyje kasdien 10 mg/kg kūno svorio dozėmis.
[0052] Imama po 6 gyvuliukus kiekvienai medžiagai. Kontrolei naudojami gyvuliukai, kurie gauna 0,5 % karboksimetilceliuliozą vietoj biologiškai aktyvios medžiagos. Nulinę dieną (t.y. dieną prieš pradedant leisti tiriamąsias medžiagas) į kiekvieno bandomojo gyvuliuko dešinąją letenėlę po padu suleidžiama 0,75 mg Myco-bacterium butyricum 0,1 ml creundschen priedo. 11-tą - 14-tą dieną kairiojoje letenėlėje, į kurią nieko nebuvo leista, pa-sireiškia antrinė reakcija, kuri išreiškiama letenėlės ištinimu. Kadangi šį išcinimą sukelia imuninė reakcija, tai medžiagos, kurios slopina šią genetiškai sąlygotą ir patologinę imuniną reak-ciją, laikomos imunomoduliatoriais. Istinimo dydis matuojamas kasdien pletizmometriniu (pagal išstumto skysčio tūrį) būdu ir išreiškiamas rr.l. Šių bandymų rezultatai ducti 1 lentelėje ir 1 pav.
[0053] Kaip matyti iš 1 lentelės ir 1 paveikslo, tik junginys A visais tirtais laiko momentais slopina mažėjančią iki imuninės reakcijos antriną reakciją.
1. Tisno(3',4'-4,5)-imidazo(2,I-b)-tiazolc darinių, ku-rių formulė I:
2. Būdas pagal 1 p. , besiskiriantis tuo, kad ciklizacij^ vykdo vandenį, atimančiais reagentais/ naudo-jant polifosforo rūgštį arba fosforo oksichloridą, 60-110 °C temperatūrų intervale nuo 5 minučių iki 4 valandų, kur vandenį atimantis reagentas tuo pačiu metu yra ir tirpiklis.
3. Būdas pagal oet kurį iš 1 arba 2 p.p., besiskiriantis tuo, kad ciklizacij^ vykdo panaudojant fosforo oksichloridą,virinant su grįžtamu šaldytuvu 5-30 minučių.
4. Būdas pagal bet kurį iš 1-3 p.p., besiskiriantis tuo, kad šarminę hidrolize vykdo , virinant nuo 5 minu-čių iki 1 valandos su ekvivalentiniais kiekiais praskiestų šar-minių metalų hiaroksidų tirpalų, pridėjus tirpiklio.
5. Būdas pagal bet kurį iš 1-4 p.p., besiskiriantis tuo, kad šarminę hidrolizę atlieka metanolio tirpale, panaudojant praskiestą natrio hidroksido tirpalą, virinant su grįžtamu šaldytuvu 5-25 minutes.