[LT] 4.13-Dioksabiciklo[8.2.1]tridekanono dariniai jų gavimo būdas, tarpiniai produktai jiems gauti ir juos turinčios farmacinės kompozicijos.@Aprašyti ciklu susiaurinti N-demetil-N-izopropil-eritromicinoA dariniai, pasižymintys virškinimo traktui efektyviomis motilin-agonistinėmis savybėmis, ir jų gavimas.
[EN]
[0001] Išradimas apima naujus N-pavaduotus ['2R,' 3R (2R',3R'), 6R_, 7S 8S, 9R, 10R] -3- (2 ', 3' -dihidrošksipent-2' -il) -7-
[0002] [ (2f. 6-didezoksi-3-C-metil-3-0-metil-a-L-ribo-. hekso'pirahozil) - oksi] -9r [ (3, 4, 6-tridežoksi-3-amino-p-D-ksilo-heksopirąnozil -o'ksi] - 2, 6, 8, 10, 12-pentamentil-4, 13-diok.sabiciklo[ 8 .2.1] ' tridec-12-en--5-ono junginius, turinčius motilin-'-agonįst.ines savybes, šių- junginių rūgštinąs druskas,* šiuos 'junginius turinčias farmacines kompozicijas, jų gavimo būdą bei šių junginių tarpinius produktus. Sutinkamai su .šiuo išradimu, junginiai yra iš eritromicino A gauti ' ciklu susiaurinti N-dėmeti'l-N-izopropilo dariniai.
[0003] Antibiotikas, eritromicinas A be savo antibiotinio poveikio taip pat. turį nepageidaujamų antibiotikams pašalinių'poveikių į skrandžio-žarnyno sistemą, be to, sąlygoja dideli, skrandžio-žarnyno sistemos susitraukimo suaktyvėjimą,, pasireiškianti skrandžio ir žarnyno spa-zmomis, šleikštuliu, vėmimu ir viduriavimu-
[0004] Čia pateikta keletas 'mėginimų- modifikuoti-eritromiciną • A,* norint gauti darinius, kurių antibiotinis poveikis, faktiškai ■ nėra ilgesnis už nemodifikuoto eritromicino A,- .bet kurie turi įtaką virškinimo trakto peristaltikai . Europos * patentas 0 34 9 100 A2 atskleidžia farmacines kompozicijas, kurios* kaip ,. gastroprokinetiškai veiklią medžiagą turi ciklu susiaurintą eritromicino A darinį arba jo ketvirtines druskas, kurios cholfnergiskai stiprina skrandžio peristaltikai...
[0005] Šio išradimo . esmė yra naujų, ciklu, susiaurintų, eritromicino darinių, neturinčių antibiotinio poveikio, bet su naudingu efektu'virškinimo trakto peristaltikai, sukūrimas.
[0006] Atrasta, jog nauji eritromicino A ciklu susiaurinti N-demetil-N-izopropilo junginiai pasižymi geriausiomis motilinagonistinėmis savybėmis, -palankiai stimuliuoja virškinimo trakto^ peristaltiką ir stiprina stemplės • apatinio sfink'terio ■ tonusą. Sutinkamai su išradimu medžiagos ,dėl savo veikimo profilio yra tinkamos gydyti .virškinimo trakto peristaltikos sutrikimus ir,' be to,-yra gerai toleru'otinos.
[0007] Taigi, šis išradimas apima naujus [ 2R, ^ 3R (2R',3R'), 6R, 7S, ~8S, 9R, ' --1"0R] -3- (2 ', 3 ' -dihidroksipent-2 '-il) -2, 6 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabiciklo[ 8.2.1] tridec-12-en-5-ono darinius,išreikštus bendra ' I formule (žiūrėti I formulę), kur R1 žymi metilą ar vandenili, taip pat stabilias ir■ fiziologiškai toleruotinas jų rūgštinei druskas.
[0008] I formulės junginys, kur R1 žymi metilą, yra ypač tinkamas.
[0009] I formulės junginiai gali būti gaunami žinomu metodu, įvedant izopropilo radikalą i [ 2R, 3R (2R',3R'), 6R, 7S,8S, 9R, 10R] -3-(2'31-dihidroksipent-2'-il)-2, 6, 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabiciklo [ 8.2.1] tridec-12-en-5-ono darinius, išreikštus bendra II formule (žiūrėti II formulę), kur R1 turi anksčiau minėtą 'reikšmę ir, jei ' pageidaujama, įvedant metilo radikalą R1 į gaunamą I formulės junginį, kur R1 žymi vandenilį, arba eliminuojant metilo radikalą R1 gaunamame - J formulės junginyje, kur R1 •žymi metilą • ir, jei ' pageidaujama, " konvertuojant laisvus I formulės junginius į jų stabilias rūgštines druskas, arba konvertuojant rūgštines druskas į laisvus I formulės junginius.
[0010] Kad. įvesti izopropilo radikalą, II formulės'junginiai gali būti, alkilinami žinomu būdu. Alkilinimas yra geriau atliekamas kaip redukcinis alkilinimas žinomu būdu, .veikiant II formulės • j. unginius f4 acetonu, esant redukcinėms sąlygoms. Pav.r II formulės -junginiai gali-būti veikiami acetonu, dalyvaujant redukciniam agentui, pav.., borhidrido korrtplekso junginiams: natrio cianoborhidridui, natrio triacetoksiborhidridui ar natrio borhidridui. Pageidaujant ,alkilinimas, ypač II" formulės junginių, kur .R1 žymi . metilą, gali būCi taip pat atliktas, veikiant izopropilo "halogenidu,., ypač izopropilo jodidu, ' arba izopropilo sulfatu, arba • izopropilo sulfonatu. Alkilinimas ' atliekamas organiniame tirpiklyje, kuris reakcijos. sąlygęmiš yra inertiškas. Redukciniam alkilinimui kaip tirpiklis,', pav., gali. būti naudojamas acetono perteklius..Taip pat kaip tirpikliai, be' t'o,3 tinka cikliniai eteriai, tokie kaip tetrahidrofuranas ar dioksanas, aromatiniai angliavandeniliai, tokie kaip toluolaš arba kiti žemesnieji akoholiai. Alkilinimas gali būti atliekamas prie temperatūrų, kurios' yra 'tarpinės tarp kambario temperatūros ir tirpiklio virimo temperatūros. Alkilinimas izopropilo dariniu," pav.," izopropilo ha»logenidu, tokiu kaip izopropilo jodidas, yra* atliekamas esant bazei, kaip, pav., šarminio metalo karbonatui ar tretiniam organiniam aminui.
[0011] Pageidaujant, gaunamas I formulės junginys, kur R1 žymi vandenilį, gali būti vėliau alkilinamas žinomu būdu, kad gauti atitinkamą' N-'metilo jungini,. Alkilinimas gali būti atliekamas žinomu būdu, veikiant metilo halogenidu, arba kaip redukcinis alkilinimas; veikiant formaldehidu, esant redukcinėms sąlygoms, ir gal-i būti vykdomas, . pav.",_ sąlygomis, nurodytomis II formulės junginių alkilinimui.
[0012] Vėliau, pageidaujant, metilo radikalas gali būti eliminuotas iš I formulės junginio, kur R1 žymi metilą. Demetilinimas gali būti atliekamas žinomu būdu, jungini, veikiant halogenu, ypač jodu ' ir / ; arįa bromu inertiniame tirpiklyje, esant atitinkamai bazei. Atitinkamos bazės yra šarminių- metalų hidroksidai ir šarminių metalų ^ silpnų organinių rūgščių druskos. Demetilinimas geriau- yra. atliekamas, esant silpnam šarminiam pH - geriau žemiau 9, kad nevyktų pašalinės ^ hidrolizės reakcijos.-
[0013] I formulės " junginiai iš reakcijos mišinio gali būti išskirti ir išvalyti - žiiiomu būdu. Rūgštinės druskos gali būti standartiniu būdu' konvertuojamos - i, laisvas bazes, o pastarosios, pageidaujant, žinomu būdu gali būti konvertuojamos „ i farmakologiškai toleruotinas . rūgštines druskas. Kad išvengti pašalinių hidrolizės reakcijų, tikslinga naudoti tiktai ekvivalentinius rūgščių kiekius," būtinus druskos sudarymui.
[0014] Atitinkamų farmakologiškai " priimtinų I formulės junginių rūgštinių druskų pavyzdžiai yra jų neorganinių rūgščių druskos, ■ pav., angliarūgšties, hidrohal' ogeninių rūgščių, ypač druskos rūgšties, ar organinių rūgščių, pav., žemesniųjų - alifatinių mono- ar dikarboksilinių rūgščių, takių, kaip maleino rūgšties, fumaro rūgšties, pieno rūgšties, vyno rūgšties, druskos.
[0015] Pradiniai II formulės junginiai literatūroje* iki šiol
[0016] ■ dar nebuvo aprašyti. Pagal ši, išradimą II formulės junginiai yra vertingi tarpiniai produktai, gaunant farmakologiškai aktyvius junginius, pav., J formulės junginius.
[0017] II formulės junginiai gali būti gauti iš III formulės eritromicino A ( žiūrėti III formulę) žinomu būdu. Tuo būdu, eritromicinas A pradžio' je gali loūti mono- ar di-, demetilinamas, veikiant halogenu, pageidautina jodu, inertiniame tirpiklyje, esant atitinkamai bazei, žinomu būdu, pav.., būdu, aprašytu DE- A - 21 54 032. Atitinkamų bazių pavyzdžiai: šarminių .metalų hidroksida-i, šarminių metalų karbonatai ir šarminių •' metalų silpnų karboksilinių rūgščių druskos, tokios kaip, pav.,šarminių metalų acetatai ar propionatai. Atitinkamai nuo'- i -1 iki ' 5 halogeno ekvivalentų eritromicino kiekiui pageidautina naudoti demetilinant. Bazės kieki, pageidautina taip parinkti, kad pH būtų 5-9 . ribose, norint 'išvengti pašalinių hidrolizės -a-r alkoholizės reakcijų. Tinkami tirpikliai": metanolis, cikliniai eteriai, kaip, pav., dioksanas ar tetrahidrofuranas, dimetilformamidas . arba aukščiau minėtų tirpiklių mi iniai su vandeniu." Atitinkamai demetilinimas atliekamas prie temperatūrų,, esančių tarp kambario temperatūros ir 50°C.* Reakcja gili būti pagreitinta, apšvitinus šviesa, pav., šviesa, kurios bangos ilgis virš 290 nm, gaunama žemo slėgimo gyvsidabrio lempos' su kvarco ar karščiui atsparaus stiklo (pav., PyrexR) filtru' pagalba. Priklausomai' nuo panaudoto halogeno. -.kiekio reakcijos metu" gaunamas - monodemetilintas arba , didemetilintas produktas. Monodemetilintas produktas dažniausiai- gaunamas, kada naudojamas vienas halogeno ekvivalentas, o didemetilintas produktas - kada naudojama 2 ar daugiau, halogeno ekvivalentų. Pageidaujant, didemetilintą produktą galima gauti iš prieš tai gauto monodemetilinto produkto.
[0018] Mono- ar didemetilintas eritromicinas gali būti konvertuojamas žinomu būdu, veikiant silpna rūgštimi, i, atitinkamą mono- ar didemetilintą - 8,9-anhidroeritromicino A 6,9-hemiketalį, išreikštą bendra IV formule (žiūrėti IV formulę), kur R1 žymi vandenilį ar metilą. Hemiketalis - gali susidaryti, pav., veikiant ledine acto rūgštimi ar praskiesta neorganine rūgštimi prie temperatūrų, esančių tarp kambario- temperatūros ir apytiksliai 50°C.
[0019] IV formulės eritromicino struktūros junginiuose 14-os narių laktcno žiedo ciklo susiaurinimas gali būti. atliktas žinomu būdu intramolekulinės translaktonizacijos metodu, gaunant 12-os narių laktono žiedą 'su II formulės junginius atitinkančiu išsidėstymu. Kad tai atlikti, IV formulės junginiai yra
[0020] .kaitinami žinomu būdu, esant temperatūrai • 40-70°C. ribose, geriausia, prie reakcijos mišinio virimo taško. Ypatingai ■ tinkamos bazės yra šarminių metalų karbonatai, nors organinės bazės, kaip antai, tretiniai aminai, ypač tretiniai žemesnieji alkilaminai yra taip pat tinkami. Chįrališkumo centrų konfigūracija
[0021] Nauji I formulės junginiai ir jų fiziologiškai toleruotinos rūgštinės druskos pasižymi įdomiomis farmakologinėmis savybėmis, ypač motinil-agonistinėmis savybėmis, stimuliuojančiomis virškinimo trakto peristaltiką. - Jie nepasižymi antibiotiniu poveikiu ir turi aukštą " .selektyvinį giminingumą 'motilino receptoriams, tada kai dozės ribose su motilin-agonistiniu efektyvumu jie rodo iš esmės netinkamą giminingumą kitiems virškinimo trakto receptoriams, kaip antai, adrenalino, acetilcholino, histamino, dofamino bei s-eretonino receptoriams.
[0022] "Sveikame būvyje autonominė nervų sistema ir hormonai virškinimo trakte veikia sutartinai, užtikrindami reguliuojamą suvartoto maisto virškinimą ir sukeldami kontroliuojamą .virškinimo trakto susitraukinėj imą ne tiktai netrukus po maisto įsiurbimo, bet ir tada, kai virškinimo traktas yra tuščias. Motilinas yra žinomas virškinimo trakto peptidinis hormonas, , kuris stimuliuoja virškinimo trakto perstaltiką ir "indukuoja koordinuojamą peristaltiką visame virškinimo trakte nevalgius ir po maisto įsiurbimo.
[0023] I formulės junginiai rodo fiziologinius efektus, panašįus i, motilino sąlygotinus, kadangi jie vekia kaip agon' istai motilino receptoriams. Tačiau' I formulės, junginiai rodo ' ryškius stimuliuojančius efektus virškinimo trakte ' ir esant silpnesniam stemplės šfinkteriui. Ypač jie padidina skrandžio išsituštinimo greiti, ir ilgai trunkančią stemplės sfin' kterio tonuso ramybės būklę. Dėl ' savo i, motiliną panašių efektų • profilio medžiagos yra tinkamos gydyti pataloginius būvius, - susijusius su virškinimo trakto, peristaltikos sutrikimais ir / arba chimuso atpylimu iš skrandžio' - i, stemplę. Todėl I formulės' junginiai, yra ' skiriami dauguma atvejų: skrandžio išsituštinimo sutrikimai,-skrandžio- stemplės atpylimai, dispepsija, pasitaikantys storosios žarnos peristaltikos nenormalumai, pav., storosios žarnos dirglumas ( = dirglių žarnų sindromas, sutrumpintai DŽS) bei pooperaciniai " peristaltikos sutrikimai, pav., žarnų užkietėjimas ( žarnų nepraeinamumas). •
[0024] I formulės junginių efektyvios ' savybės" virškinimui re' guliuoti gali būti parodytos standartiniais farmakologiniais tyrimų metodais in vivo ir in vitro.
[0025] 1. Tiriamųjų medžiagų - jungimosi su . motilino receptoriais galios :nustatymas.
[0026] I formulės junginių giminingumas motilino . receptoriams yra nustatomas in vitro, naudojant - triušio - ertmės audinių homogenato frakciją. Yra nustatomas radioaktyviai pažymėto' jodinto motilino, . išskirto iš motilino receptoriaus, susijungusio su- tiriamomis medžiagomis, išstūmimas.
[0027] Receptoriaus jungimosi tyrimai yra - atliekami, naudojantis Borman ir kt. metodo modifikacija (Regulatory' Peptides 15 (1986),- 143-153). Norint gauti jodu 125 žymėtą motiliną, motilinas fermento
[0028] V * •
[0029] laktoperoksidazės pagalba žinomu būdu jodinamas, pav., metodu, analogišku aprašytam Bloom ir kt. (Scand. J. Gastroenterol. 11 (1976), 47-52).
[0030] Norint gauti naudojamą bandyme audinių homogenato frakciją iš • triušio ertmės, ertmė, iš kurios ' yra pašalinta- gleivinė,-- yra susmulkinama .ir homogenizuojama 1'0-kartiniame atšaldyto homogeni žavimo buferio tūryje (50 mM tris - HCl buferis, 250 mM sacharozės, 25 mM KC1, 10 mMCl2, pH 7.4), pridėjus inhibitorių (1 mM, jodaceta.mido, 1 įiM . pepstatino, 0.1 mM metilsulfonilfluorido, 0.1 g/l tripsino inhibitoriaus, 0.25 g/l bačitracino) homogenizatoriuje 15 sek., esant 1500 aps./min. greičiui. Tada homogenizatas 15 min. yra centrifuguojamas prie.1000' g, gautos nuosėdos 4 "kartus plaunamos su homogenizavimo buferiu ir resuspenduojamos 0.9 % koncentracijos natrio chlorido ti-rpale (tūryje, attikančiame 5-kartihį ertmės kiekį pagal svord,) . Šiuo būdu gauta - audinių frakcija, vadinama "žaliu membranų preparatu", yra naudojama bandymams.
[0031] Jungimosi .bandymui 200 pi žalios membranų - frakcijos
[0032] -(0.5-1 mg proteino), ištirpintos 400 ųl A buferio (50 mM tris - HCl buferis, 1.5 % BSA, 10 mM MgCl2, pH 8.0),' yra inkubuojama su 100 pl jodinto motilino, _ ištirpinto B buferyje .(10 mM tris - HCl. buferis, 1 % BSA, pH
[0033] ■8) (galutinė koncentracija 50 mM), 60 min. prie 30°C. Reakcija yra sustabdoma, pridėjus 3.2 ml atšaldyto B buferio, ir susijungęs bei nesusijungęs motilinai vienas nuo kito yra atskiriami centrifuguojant■(1000^g,.
[0034] 15 min.). Nuosėdos, gautos nucentri'fugavus, yra
[0035] perplaunamos B buferiu ir įvertinamos gama indikatoriaus, pagalba. Išstūmimo tyrimai yra atliekami,
[0036] į inkubacinę terpę dedant didėjančius tiriamos „ medžiagos kiekius.. Naudojami tiriamųjų medžiagų tirpalai yra atitinkamų koncentracijų vandeniniai" tirpalai, paruošti iš pradinių 60xl0-4 M koncentracijos tirpalų.. Tiriamosios .. medžiagos, kurių tirpumas vandenyje yra ribotas, iš pradžių yra -tirpinamos. 60' % koncentracijos etanolyje, ir šis tirpalas yra tol skiedžiamas , vandeniu, kol .etanolio koncentracija tirpale neviršija 1.6 % pagal -tūri,.: Atskiros bandomosios medžiagos . IK50 yra nustatoma iš gautų duomenų ir atitinka koncentraciją', kuri sukelia jodinto motilino specifinio jungimosi su motilino receptoriais apytiksliai 50 % inhibiciją. Iš įo yra išskaičiuojama atitinkama pIK50 reikšmė. Šiuo metodu nustatyta.' I pavyzdžio medžiagai-pIK50 lygi 8.32.
[0037] 2, Medžiagų poveikio į -srandžio išsituštinimo greiti, nustatymas in vivo.
[0038] Skrandžio.išsituštinimo greičio nustatymas yra atliekamas naudojant skalikus, kurie prieš bandymą
[0039] t
[0040] patyrė chirurginį stemplės fistulos įvedimą bei 12-ės žarnos kanulės implantavimą. Praėjus 15 min. po bandomųjų medžiagų įvedimo į 12-ę žarną, alkani, turintys sąmonę šunys gavo 285 g pusiau kieto kaloringo maisto per stemplės fistulą. Atlaisvinti iš skrandžio' mėginiai per 12-ės žarnos kanulę buvo surinkti 15 min. intervalais. Iš surinktų , skrandžio mėginių' yra išskaičiuojamas laikas, per kurį išsituština 50% skrandžio, laikas pateikiamas .kaip ■ ' skrandžio išsituštinimo matas.
[0041] Šiame bandymo modelyje I Pavyzdžio junginys parodė ryškų skrandžio išsituštinimo stimuliavimą,' esant' 0.46 pmol/kg dozei. Laikas, reikalingas ištuštinti 50 % skrandžio, sumažėjo nuo 46 rnin. kontrolinės grupės
[0042] gyvuliams iki 27 min. gyvuliams, gavusiems tiriamąją medžiagą. 3. Medžiagų poveikio i, stemplės sfinkterio ramybės būklės .tonusą nustatymas in vivo.Šis nustatymas, yra atliekamas "su paruoštais, alkanais, turinčiais sąmonę skalikais, kurięms- prieš bandymą buvcįstatyta stemplės fistula ir 12-ės žarnos kanulė. Apatinio 'stemplės sfinkterio įtempimas .yra matuojamas perfuzuoto kateterio sistemos pagalba, kuri turi šoninę angą ir yra sujungta * su Įtempimo davikliu ir automatinio užrašymo prietaisu. Kateteris yra įvestas per stemplės fistulą i, skrandį ir tada lėtai išimamas rankiniu būdu . (= traukimas per manometrą) . Pikas yraužfiksuojamas, kada kateterio dalis iš šoninės angos praeina pro apatinio stemplės sfinkterio aukšto įtempimo zoną. Įtempimas, išreikštas Hg/mm yra nustatomas iš šio piko. Pradžioje kaip kontrolinis dydis šiuo būdu yra nustatomas stemplės sfinkterio bazinis įtempimas. Vėliau tiriamoji medžiaga yra įvedama' į 12-ę žarną ir, po 15 min. 2'min., intervalais 4 6 min. laikotarpyje yra matuojamas apatinio stemplės sfinkterio įtempima'sYra išskaičiuojamas įtempimo padidėjimas po tiriamosios .medžiagos įvedimo, lyginant su pirma nustatytu baziniu įtempimu.Šiame bandyme bazinis stemplės sfinkterio tonusas buvo padvigubėjęs, davus I Pavyzdžio medžiagos 0.251 jimol/kgdozę. Šis efe"ktas išliko bandymo metu 45 min. Dėl savo poveikių į virškinimo .traktą I formulės • • i junginiai kaip farmacinės kompozicijos yra tinkami gastroenterologijoje daugumai žinduolių, ypač žmonėms.,
[0043] juos naudojant virškinimo' trakto peristaltikos sutrikimams gydyti.
[0044] Naudojamos individualios dozės -gali. būti' skirtingos ir natūraliai varijuoti priklausomai nuo gydymo aplinkybių ir nuo vaistų skyrimo formos. Pav., parenteralinės formuluotės bendrai turės mažiau aktyvi'os medžiagos, negu oraliniu būdu vartojami preparatai.' Nežiūrint, to, . daugumai žinduolių, ypač žmonėms, yra tinkamos bendros vaistų .formos, turinčios nuo 5 iki 200 mg aktyvios medžiagos vienai dozei. '
[0045] I formulės junginiai, kaip medicininiai • " agentai, gali talpinti savyje standartines farmacijoje pagalbines medžiagas, sudarant farmacines kompozicijas tablečių, kapsulių,' šupozito.ri jų ar tirpalų pavidalu. Šios farmacinės kompozicijos gali būti gaminamos žinomais metodais, naudojant standartinius- kietus nešėjus, tokius kaip, pav., •• laktozė, . krakmol- as, talkas arba . praskiedžiančius skysčius,,, kaip pav., vandeni,, sočius aliejus ar' skystus parafinus, ir '-naudojant farmacijoje įprastas pagalbines medžiagas: tablečių dezintegrantus, soliubilizantus bei apsaugines medžiagas.
[0046] Sekantys pavyzdžiai yra skirti detaliam išradimo aiškinimui, jokiu būdu nesiaurinant jo apimties. •
[0047] [ 2R, 3R (2R' , 3R1 ) , 6R, 7S, 8S, 9R/ 1.0R]-3-(2\ 3'-dihidroksipent-2f-il)-7-[ (2, 6-didezoksi-3-C-metil~3-0-metil-a-L-riboheksopiranozil} -oksi] ~ 9-[ (3, 4, .. 6-tridezoksi-3-(N-metil-N-izopropilamino)~P~D-ksiio-heksopiranozi1)-oksi] -2, 6, 8, 10, 12- pentametil- 4, 13-dioksabiciklo [ 8.2.1] tridec- 12- en- 5- onas (=• I formų lęs junginys, R1= metilas).
[0048] 200 ml metanolio/vandens 8:2 mišinyje buvo ištirpinta 20 g eritromicino A ( = 27.2 mmol) ir 11.2 g ( = 136.2 mmol) natrio acetato. Tirpalas buvo pašildytas- iki 47°C. Tadą' buvo pridėta "6.9'g ( = 136.2 mmol) jodo.
[0049] .Praskiesto vandeninio- natrio hidroksido tirpalo' pagalba-pH buvo palaikomas 8-9 ribose. Praėjus 3 vai., reakcijos mišinys buvo apdorotas, jį supilant' i, mišinį, kuri, sudarė 1 1 . vandens ir 20 ml amonio hidroksido
[0050] <tirpalo. Reakcij'as- mišinys 'buvo ekstrahuojamas etilo acetatu, gautas organinis ekstraktas buvo plaunamas
[0051] vandeniu, turinčiu, amonio hidroksido, ir
[0052] . koncentruojamas. Neapdorotas produktas,. likęs po tirpiklio pašalinimo, buvo perkristalinamas iš acetono/amonio hidroksido 50:3 tirpalo. Produkto lydymosi taškas 143-148°C. B) N-demetil-8, 9-anhidroer'itromicino A 6, 9-hemiketalio ( = IV formulės junginys,' R1 = metilas) paruošimas. 21 g produkto,- gauto A) pozicijoje, buvo ištirpinta 110 ^ ml ledinės- acto rūgšties ir tirpalas buvo maišomas kambario temperatūroje 1 valandą. Po to reakcijos mišinys buvo apdorotas, ji, lašinant i, leduose 400 ml atšaldyto • koncentruoto amonio hidroksido* tirpalą.■Reakcijos mišinys buvo ekstrahuojamas etilo acetatu, organinis ekstraktas buvo plaunamas vandeniu, o tirpiklis buvo pašalinamas. Neapdorotas' produktas,likęs nuosėdų pavidal.u, buvo perkristalinamas pradžioje iš eterio, po to -iš metanolio. Buvo gauta 14 g švaraus produkto, kurio lydymosi taškas 145°C. C)[ 2R, 3R <2R\ 3R') , 6R, 7S,8S, 9R, _10R] -3-(2', 3!-dihidroksipent-2'-ii)-7-[ 2, 6-didezoksi-3-C- . met-il-3-O-metil-a-L-ribo-heksopiranozil) -oksi] -9~[ 3, 4-, 6-tridezoksi-3-metilamino-Į3-D-ksilo-heksopiranozil) - oksi] -2, 6, 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabici klo[ 8 . 2 .1] tridec-12-en-5-ono ( = II formulės junginys, R1 =metilas) paruošimas. 9 . 4 g ( =13 .4.. mmol.)" B) pozicijoje ' gauto produkto kartu su 1.9 g ( = 13.4 mmol) natrio karbonato metanolyje šu pertraukomis buvo virinama 2.5 vai. Reakcijos mišinys' buvo koncentruojamas,^ skiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilo acetatu. Neapdorotas .produktas, likęs po- tirpiklio pašalinimo, b'uvo perkristalinamas iš izopropanolio. Gauta 7.1 g "švaraus produkto, kurio lydymosi taškas 199~200°C, optinio sukimo, kampas [ a] D20:-31. 6° (C=l, metanolis).
[0053] 2 g { = 2.8 .mmol) C) pozicijoje gauto produkto buvo tirpinamą metanolyje, nustatant tirpalo pH, lygų 4 , -praskiestos druskos "rūgšties pagalba. Į tirpalą- buvo - ' dedama' 2 -g molekulinio* sieto • (kalcio aliuminio silikato, • porų diametras 4 A'), acetono perteklius ir 0.% g' { = 6.4 mmol) natrio cianoborhidrido. Reakcijos-mišinys buvo maišomas 12 vai. Molekulinis sietas buvo nufiltruojamas, filtratas koncentruojama.^, sumaišomas su vandeniu ir ekstrahuojamas etilo acetatu. Neapdorotas produktas,, likęs kaip nuosėdos po etilo * acetato ekstrakto koncentravimo, buvo. valomas silikagelio chromatografijos pagalba (eliuentas - etilo acetatas ■/ metanolis. 95:5). Gauta 1*4 g pagrindinio produkto, kurio lydymosi taškas l3Q~134°C; optinio sukimo kampas [ a] D20 :-32 . 8°.
[0054] [ 2R, 3R, (2R\ 3R') , 6R, 7S, 8S, 9R, 10R]-3-(2\ 3'-dihi.droksipent-2 ' -il) -7-[ 2 , 6--didezcksi-3-C-inetil-3-0-metil- -L-ribo-heksopiranozil)-oksi]-9-[ (3, 4, G-tridezoksi-3- (N-metil-N-izop'ropilamino) -p-D-ksilo-heksopiranozil)-oksi] -2, 6, 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabicįklo [ 8.2.1] tridec-;12-en-5-onas ( = Į formulės junginys, R1 = metilas).
[0055] 5 g eritromicino, ir 4.7 g natrio acetato (x 3 H20) buvo
[0056] ištirpinama-200 ml metanolio / vandens 8:2 įhišinio. Į tirpalą buvo.pridedama l,75g jodo ir reakcijos mišinys 20 * rnin.- buvo -^š.vitinamas kvarco lempa kambario temperatūroje. Po to buvo išgarinama pusė tirpiklio kiekio ir likęs mišinys buvo supilamas i, 140 ml vandens ir lOml amoniako mišinį. Reakcijos mišinys buvo 3 kartus ekstrahuojamas su 20 ml metilo t-butilo eteriu. Eterio .'ękstraktas buvo atskiriamas ir dalis eterio išgarinama. Reakcijos produktas buvo ' paliekamas kristalintis ir buvo perkristalinamas iš acetono. Gauta 2 g N-demetileritromicino A.
[0057] B) N-demėtil-8,9-anhidroeritromicino A 6,9-hemiketalio ( IV formulės junginys, R1 =metilas) paruošimui 2 g A) pozicijoje gauto produkto buvo' apdorojama kaip aprašyta'1B) Pavyzdyje. Gauta 2.3 g hemiketalio kietos amorfinės medžiagos pavidalu. .C) [ 2R, 3R (2R1, • 3R1), 6R, 7S, 8S, 9R, 10R] -3- (2 », ' 3' - dihidroksipent-21-il)-7-[ ( 2, 6-didezoksi-3-C-metil-3-O-metil-o^T-L-ribo-heksopiranozil) -oksi] -9~[ (3, 4, 6-tridezoks*i-3-metil-amino~p-D-ksilo-heksopiranozil).-..oksi] -2, 6, 8,. 10, 12-pentometil-4, 13-dioksabicklo [8.2.1] trided-12-en-5-ono ( =11 formulės junginys,- R1 = metilas) paruošimui 2.3 g produkto, gauto kaip aukščiau minėta, buvo apdorojama kaip aprašyta 1C) • * i Pavyzdyje. Gautas neapdorotas produktas buvo' rekrištalinamas iš etilo acetato. Gauta 1.3 g švaraus produkto, kurio lydymosi taškas 199-202°C. D). 1.3 g produkto, gauto kaip aukščiau minėta, buvo dedaftia d, 26 ml acetono ir 0.11 ml acto rūgšties mišinį.-J reakcijos mišinį azoto atmosferoje dalimis' buvo dedama 0.6 g natrio' triacetoksiborhidrido ir mišinys 4 vai. buvo maišomas kambario temperatūroje. Po tc buvo išgarinama 2/3 tirpiklio ir -nuosėdos buvo praskiedžiamos 40 ml' etilo acetato. Stipriai maišant • buvo pridedama 65 ml sotaus natrio bikarbonato tirpalo. Iš susidariusio skaidraus tirpalo buvo atskiriama organinė fazė, o vandeninė fazė buvo plaunama dar4, karką su 20 ml etilo acetato. Sujungtos organinės fazės buvo plaunamos su 13 ml vandens ir džiovinamos virš natrio sulfato. Tirpiklis buvo išgarinamas, _ nuosėdos apdorojamos 20 ml ,toluolo, o pastarasis tada išgarinamas. Gautas neapdorotas produktas buvo valomas, filtruojant per aliuminio oksido kolonėlę (25 g A1203, aktyvumo, lygis II/.III), kaip eliueritą naudojant etilo acetatą. : Tirpiklis"'., buvo išgarinamas, nuosėdos - ištirpinamos verdančiame -etilo acetate. Po to buvo dedamas -n-heksanas tol, kol' mišinys ' tapo drumstas. Produktas buvo paliekamas kristalintis šaltyje, Susidarę kristalai vakuumo pagalba buvo nufiltruojami ir „perplaunami n-heksanu. Gauta 0.8 g pagrindinio junginio, kurio lydymosi taškas 128-135°C.
[0058] 1 g ( = 1.3 mmol) pagrindinio junginio buvo ištirpinama metanolyje ir- į tirpalą pridedama 0.081' ml ( = 1.3 mmol) ledinės acto rūgšties. , Po to ' tirpiklis buvo nusiurbiamas vakuumo pagalba, o susidaręs pagrindinio junginio acetatas džiovinamas. Pagrindinio junginio acetato lydymosi taškas 145-150°C. Optinio -sukimo kampas [ a] 20:-30 . 8° (C=l, metanolis).
[0059] Buvo gaminamos tabletės su sekančia kompozicija (tabletei) :• f 2R, 3R (2R\ 3R1), 6R, 7S,*8S, 9R, 10R] -3-(2', 3'-dihidroksipėnt-2'-il)-7-[ (2, 6-didezoksi-3-C-metil-3-0-metil-a-L-ribo-heksopiranozil)-oksi] -9-[ (3,. 4, 6-tridezoksį-3- (N-metil-N-izopropilamino)'-J}-D-ksilo-heksopiranozil)-oksi] -2, 6, 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabicikLo [ 8.2.1] tridec-12-en-5-onas (= I formulės
1. [ 2R, 3R'-{ 2R', 3R*) f 6R, 7S, . 8S,- 9R, 10R] - 3- ( 2', 3' r Dihidroksipent-2'-il)-2, 6, 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabiciklo ■[ 8.2.1} tridec-12-en-5-ono dariniai, išreikšti, bendra I formule,
2.. Junginiai pagal 1 punktą, kur R1 žvmi metilą.
3. Farmacinė kompozicija, turinti standartines farmacines pagalbines medžiagas ir/arba nešėjus, b e's i s k i r i a n t i tuo, kad turi efektyvų jungnio•pagal 1 punktą kieki,.
•pagal 1 punktą kieki,. 4. [ 2R, 3R (2R\ 3R1), 6R,* 7S, -8S, 9R, 10R] '-3-(2' , 3'-dihidroksipent-2'-il)-2, 6, 8,10, 12-pentametil--4, 13-dioksabiciklo [8.2.1] tridec-12-en-5-ono darinių,-išreikštų bendra I formule,
5. [ 2R; 3R (2R', 3R'),. 6R, 7Sf 8S, 9R, 10R] -3~ (2' 35-dihidroksipent-2-2., ' 6, 8, 10, 12-pentametil-4, 13-dioksabiciklo [8.2.1] tridec-12-en--5--ono dariniai, išreikšti bendra II formule,