LT3626B

JUNGINIAI, TURINTYS KONDENSUOTĄ BICIKLINĮ ŽIEDĄ IR JŲ GAVIMO BŪDAS

COMPOUNDS CONTAINING A FUSED BICYCLE RING AND PROCESSING THEREOF

Referatas

[LT] Pareikšti junginiai, turintys kondensuotą biciklinį žiedą, kurie yra dvigubi inhibitoriai (neutraliai endopeptidazei ir angiotenziną keičiančiam fermentui). Junginiai yra selektyvūs angiotenziną keičiančio fermento inhibitoriai. Aprašyti šių junginių ir jų sintezės tarpinių produktų gavimo būdai.

[EN]

Aprašymas

[0001] Šis išradimas yra skirtas naujiems junginiams, turintiems kondensuotą biciklinį žiedą, naudingiems kaip angiotenziną keičiančio fermento inhibitoriai. Kai kurie iš šių junginių

[0002] pasižymi ir inhibitoriniu aktyvumu neutralios endcpeptidazės atžvilgiu. Šis išradimas taip pat skirtas farmacinėms kompo-zicijoms, į kurias įeina tokie selektyvaus arba dvigubo veiki-

[0003] mo inhibitoriai, ir tokių kompozicijų panaudojimo būdui. Šis išradimas taip pat skirtas šių naujų junginių gavimo būdui, naujiems, tar^piniams junginiams ir tokių tarpinių junginių gavimo būdams-

[0004] Angictenzino antagonistai, aprašyti EP-A-324377, yra imid-azoio dariniai, kurie turi diariltetrazolilo grupą. Panašios struktūros imidazolilkarboninės rūgštys aprašytos EP-Ai-0253310,

[0005] o šių rūgščių acilaliai - Austrijos paraiškoje A 1957/91. Šio tipo angiotenziną b_lokuojantys junginiai aprašomi ir kitoje Austrijos paraiškoje A 203/91. To paties poveikio ir giminin-

[0006] gos struktūros imidazolo darinys (DuP753) aprašytas P.C.Wong ir kt., J. Pharmacol. a'nd Exp. Therapeutics, 1990, vol.225, p.2ii-217. Azolo dariniai su sulfonilkarbamiao, suifoniluretano ir suifoniisulfonamido grupėmis žinomi iš Vokietijos paraiš-

[0007] kos P 4100109.5., Didžiosios Britanijos paraiškoje No.9214690.1 aprašomi angiotenzino antagonistai yra ciklobut-3-en-i,2-diono dariniai.

[0008] Naujieji kondensuoti bicikliniai šio išradimo inhibitoriai apima tokius jungiaius, kurių formulė (I):

[0009] Rg yra vandenilis, žemesnysis alkilas, cikloalkilas arba fenilas;

[0010] Rg yra vandenilis, žemesnysis alkilas, žemesnysis alkoksi-arba fenilas;

[0011] R,„ yra žemesnysis alkilas arba aril-( CH_) - ;

[0012] IU 2 p

[0013] R.., yra vandenilis, alkilas, pakeistas alkilas, cikloalkil-(CH_) aril-(CH_) pakeistas aril-(CH_) hetero-2. p l p 2 p aril-(CH₂)p- arba -S-R... sudaro simetrinį disulfidą, kur R-.-. yra

[0014] m yra nulis arba vienetas;

[0015] Y yra CH_2' S_~^°^_t ar^a 0, su s₄^y₉a_' kad Y yra S-(0) £ arba 0 tik tada, kai m yra vienetas;

[0016] n yra vienas arba du;

[0017] p yra nulis arba sveikas skaičius nuo 1 iki 6;

[0018] q yra nulis arba sveikas skiačius nuo 1 iki 3;

[0019] r yra nulis arba vienas; ir

[0020] t yra nulis, vienas arba du.

[0021] Terminas "alkilas" reiškia tiesios arba šakotos grandinės radikalus, turinčius iki septynių anglies atomų. Terminas "že-mesnysis alkilas" reiškia tiesius arba šakotus radikalus, tu-rinčius iki keturių anglies atomų, ir yra tinkamiausia termi-no "alkilas" pogrupė.

[0022] Terminas "pakeistas alkilas" reiškia tokius tiesios arba šakotos grandinės radikalus iš nuo 1 iki 7 anglies atomų, kuriuose vienas arba daugiau, geriausiai vienas, du arba trys vandeniliai yra pakeisti hidroksilo, amino, ciano grupėmis, halogenu, trifluormetilu, -NH(žemesnysis alkilai), -N(žemes-nysis alkilas)_^, žemesniuoju alkoksi, žemesniuoju alkiltio arba karboksilu.

[0023] Terminai " žemesnysis alkoksi" ir "žemesnysis alkiltio" reiškia aukščiau apibrėžtas žemesniojo alkilo grupes, prijungtas prie deguonies arba sieros.

[0024] Terminas "cikloalkias" reiškia sočius žiedus iš nuo 3 iki 7 anglies atomų, iš kurių tinkamiausi yra ciklopropilas, cik-lobutilas, ciklopentilas ir cikloheksilas, iš kurių tinkamiau-sias yra cikloheksilas.

[0025] Terminas " alkenilas" reiškia tiesios arba šakotos grandinės radikalus iš nuo 3 iki 7 anglies atomų, turinčius vie-ną arba dvi dvigubas jungtis. Tinkamiausios " alkenilo" grupės yra tiesios grandinės radikalai nuo 3 iki 5 anglies atomų, turintys vieną dvigubą jungtį.

[0026] Terminas " pakeistas alkenilas" reiškia tokius tiesios arba šakotos grandinės radikalus iš 3- 7 anglies atomų, turinčius vie-ną arba dvi dvigubas jungtis, kuriuose vandenilis yra pakeistas hidroksilo, amino grupėmis, halogenais, trifluormetilu, cianogru-pe, - NH ( žemesnysis alkilas), - N ( žemesnysis alkilas^, žemesniąja alkoksigrupe, žemesniąja alkiltiogrupe arba karboksilo grupe.

[0027] Terminas " alkilenas" reiškia tiesios arba šakotos grandinės radikalus, turinčius iki 7 anglies atomų, t. y. - CH^-, -( CH_)_-/

[0028] -( CH2) 3-, -( CH2) 4-,

[0029] ir t. t.

[0030] Terminas " arilas" reiškia fenilą, 1- naftilą ir 2- naftilą. Terminas " pakeistas arilas" reiškia fenilą, 1- naftilą ir 2- naf-tilą, turinčius pakaitą, pasirinktą iš žemesniojo alkilo, žemes-niosios alkoksigrupės, žemesniosios alkiltiogrupės, halogeno, hidroksilo, trifluormetilo, aminogrupės, - NH( žemesnysis alkilas) ar-ba - N( žemesnysis alkilas) 2^ ir tripakeistą fenilą, 1- naftilą ar-ba 2- naftilą, kuriuose minėti pakaitai yra pasirinkti iš metilo, metoksigrupės, metiltiogrupės, halogeno, hidroksilo ir aminogru-pės.

[0031] Terminas " heteroarilas" reiškia nesočius žiedus iš 5 arba 6 atomų, turinčių vieną arba du 0 ir S atomų ir/ arba nuo vieno iki keturių N atomų, su sąlyga, kad bendras heteroatomų skaičius žie-de yra 4 arba mažiau. Heteroarilo žiedas yra prijungtas per priei-namą anglies arba azoto atomą. Tinkamiausios heteroarilo grupės yra 2-, 3-, arba 4- piridilas, 4- imidazolilas, 4- tiazolilas, 2-

[0032] ir 3- tienilas, 2- ir 3- furilas. Terminas " heteroarilas" taip pat apima biciklinius žiedus, kuriuse aukščiau nusakytas penkiana-ris arba šešianaris žiedas, turintis 0, S ir N atomus, yra kondensuotas su benzolo arba piridino žiedu. Tinkamiausi bicikliniai žiedai yra 2- ir 3- indolilas ir 4- ir 5- chinolinilas. Mono- arba biciklinis heteroarilo žiedas, be to, gali turėti pakaitus prie

[0033] prieinamo anglies atomo, tokius kaip žemesnysis alkilas, halogenas, hidroksilas, benzilas arba cikloheksilmetilas- Be to, jeigu mono- arba biciklinis žiedas turi prieinamą azoto aromą, prie tokio azoto atomo taip pat gali būti pakaitai, tokie kaip N- apsau-ginė grupė, pvz.,

[0034]

[0035] su kondensuotą biciklinį žiedą turinčiu junginiu, kurio formulė ( III)

[0036] kurioje R? yra vandenilis arba rūgšties apsauginė grupė, tokia kaip metilas, etilas, t- butilas arba benzilas. Aukščiau minėta reakcija gali būti atlikta organiniame tirpiklyje, tokiame kaip metileno chloridas, ir dalyvaujant jungiančiam reagentui, tekiam kaip l- etil- 3-( 3- dimetilaminopropil) karbodiimidas, diciklohek-silkarbodiimidas, benzotriazol- l- iloksitris( dimetilamino) fosfonio heksafluofofosfatas arba karbonildiimidazolas. Kitu būdu, II formulės acilmerkaptokarboksilinė rūgštis, prieš prijungiant, gali būti paverčiama jos aktyvuota forma, tokia kaip chloranhidridas, mišrus anhidridas, simetrinis anhidridas, aktyvuotas esteris ir kt.

[0037] Produktas, kurio formulė yra ( IV), gali būti paverstas į

[0038] I formulės merkaptano produktą, kur R₂ yra vandenilis ir R- yra vandenilis, žinomais būdais. Pavyzdžiui, kai Rg yra metilas, o R_^ yra metilas arba etilas, veikiant metanoliniu natrio hidroksidu, o po to rūgšties vandeniniu tirpalu, gaunami produktai, kuriuose R₂ ir R_^ yra vandenilis.

[0039] I formulės produktai, kuriuose R_^ yra vandenilis, gali būti acilinami acilhalogenidu, kurio formulė ( V) :

[0040]

[0041] I formulės produktai, kuriuose R₂ yra ~ S_ R- įi' o R^ yra alkilas, pakeistas alkilas, cikloalkil-( CH02 ) p aril-( CH2 -) p-, pakeistas aril-( CH2) p- arba heteroaril-( CH2 ) p- t gali buti gaunami, veikiant I formulės produktus, kuriuose R₂ yra vandenilis, sulfonilo junginiu, kurio formulė ( VII) :

[0042] tirpikliu naudojant vandens ir alkoholio mišinį, kur gaunami pa-geidaujami produktai. VII formulės junginiai yra žinomi iš lite-ratūros, arba gali būti gaunami žinomais metodais ( žr., pvz., Smith et al. , Biochemistry, 14_, p. 766- 771, 1975).

[0043] I formulės produktas, kuriame R₂ yra SH, gali būti gaunamas, veikiant I formulės produktą, kuriame R₂ yra vandenilis,

[0044] VII formulės produktu, kuriame R? yra trifenilmetilas arba tri-alkilsililas, po to atskeliant trifenilmetilo arba trialkilsililo grupes rūgštinėse sąlygose.

[0045] I formulės simetrinio disulfido produktai gali būti gaunami, tiesiogiai oksidinant I formulės produktą, kuriame R- yra vandenilis, jodu pagal žinomas metodikas ( žr., pavyzdžiui, Ondett; et al., ' JAV patentas Nr. 4 105 776).

[0046] Šoninės grandinės junginiai, turintys acilmerkapto grupę, kurių formulė II, kurioje R^ 2 yra vandenilis, yra aprašyti lite-ratūroje .( Žr., pavyzdžiui, Ondetti et al. JAV patentai Nr. Nr.

[0047] 4 105 776 ir 4 339 600, Haslanger et al. JAV patentas Nr. 4801609, Delaney et al. JAV patentas 4 722 810, ir t. t.).

[0048] Šoninės grandinės junginiai, turintys acilmerkapto grupę, kurių formulė II, kurioje ir ir R^ Yra kitokie negu vandenilis, o r yra nulis, gali būti gaunami, veikiant pakeistą karboksilo rūgštį, kurios formulė ( VIII) :

[0049] Veikiant junginį, kurio formulė IX, stipria rūgštimi, tokia kaip trifluormetansulforūgštis, atskeliama metoksibenzilo apsauginė grupė, po to acilinama V formulės acilhalogėnidu arba VI formu-lės anhidridu, ir gaunamas II formulės junginys, kuriame ir R_^ ir R-^ 2 yra kitokie negu vandenilis, o r yra nulis.

[0050] Kitu būdu, pakeista karboksilo rūgštis, kurios formulė VIII, gali būti veikiama ličio diizopropilamidu ir siera, susidarant merkaptanui, kurio formulė ( X) :

[0051] Tada X formulės merkaptanas gali būti acilinamas V formulės acilhalogėnidu arba VI formulės anhidridu, susidarant II formu-lės junginiui, kuriame ir R_^ ir R^ yra kitokie negu vandenilis, o r yra nulis.

[0052] II formulės šoninės grandinės junginiai, turintys acilmer-kaptogrupę, kuriuose ir ir R-. Yra kitokie negu vandenilis, o r yra vienetas, gali būti gaunami, veikiant pakeistą karboksilo rūgštį, kurios formulė ( XI) :

[0053] Veikiant XII formulės laktamą cezio tiorūgštimi, kurios formu-lė ( XIII) :

[0054] esant dimetilformamidui, gaunamas norimas šoninės grandinės junginys, turintis acilmerkaptogrupą, kurio formulė II, kurioje ir R_^ ir R^ 2 Yra kitokie negu vandenilis, o r yra vienetas.

[0055] I formulės junginiai, kuriuose A yra

[0056] X yra O arba S, o Y yra 0 arba S, gali būti gaunami sujungiant rūgštį, kurios formulė ( XIV) :

[0057] Kitu būdu, XIV formulės rūgštis gali būti paversta jos aktyvuota forma, tokia kaip chloranhidridas, prieš sujungimo reakciją.

[0058] XIV formulės rūgštis aprašė Warshawsky et al. paraiškose Europos patentui Nr. 534 396 ir 534 492.

[0059] I formulės junginiai, kuriuose A yra

[0060] XVI formulės ketorūgštys ir esteriai yra aprašyti litera-tūroje ( Žr., pavyzdžiui, Ruyle, JAV patentas Nr. 4 584 294 ir Parsons et al., JAV patentas Nr. 4 873 235).

[0061] Kitu būdu, kondensuotą biciklinį žiedą turintis junginys, kurio formulė III, gali būti veikiamas triflatu, kurio formulė

[0062] ( XVIII) :

[0063]

[0064] X yra 0 arba

[0065] S, o Y yra CH- ?, O arba S, gali buti gaunami, sujungiant fosfo-ninės rūgšties chloridatą, kurio formulė ( XIX) :

[0066] Geriausia, kai R- III formulės junginyje yra žemesnysis alkilas arba benzilas. Tada gali būti atskeliamos rūgšties apsauginės grupės R? ir R_^, pavyzdžiui, hidrinant, susidarant atitinkamiems I formulės produktams, kuriuose R_^ ir R<- yra vandenilis.

[0067] XIX formulės fosfoninės rūgšties chloridatai yra žinomi li-teratūroje ( Žr., pavyzdžiui, Karnewsky et al. JAV patentai Nr. 4 432 971 ir 4 432 972 ir Karnewsky, JAV patentas Nr. 4 460 579).

[0068] I formulės produktai, kuriuose arba X, arba Y, arba abi šios grupės yra - S( O) r, o t yra vienetas arba du, gali būti gaunami, oksidinant IV, XV, XVII arba XX formulių junginius žinomais oksidinimo reagentais, tokiais kaip meta- chlorperbenzoinė rūgštis, peracto rūgštis, monoperoksiftalio rūgštis, magnio druskos heksa-hidratas ir 1. 1. Kontroliuojant oksidinimo reagento kiekį ir reakcijos laiką, gaunami produktai, kuriuose t yra vienas arba du.

[0069]

[0070] kur L yra atskylanti grupė, tokia kaip chloras, bromas arba to-luolsulfoniloksigrupė, o po to atskeliant rūgšties apsauginę grupe

[0071] R^ •

[0072] I formulės esterio produktai, kuriuose R, yra

[0073] XXI formulės jungi-

[0074] niu.

[0075] Kondensuotą biciklinį žiedą turintys junginiai, kurių for-mulė III, gali būti gaunami toliau aprašytais būdais, kurie taip pat sudaro dalį šio išradimo. Pavyzdžiui, kai Y yra CE_^, N- blokuota aminorūgštis, kurios formulė ( XXII) :

[0076] gali būti sujungiama su aminorūgšties esteriu, kurio formulė ( XXIII) :

[0077] P_^ apsauginė grupė gali būti selektyviai atskelta nuo XXIV formulės tarpinio junginio, pavyzdžiui, veikiant natrio metoksidu metanolyje, jei P₂ yra acetilas arba benzoilas, arba veikiant rūgštimi, tokia kaip p-toluolsulforūgštis metanolyje, jei P₂ yra acetilas, benzoilas, tritilas, tetrahidropiranilas arba 1,1-dimetiletildimetilsililas . Gautas produktas leidžiamas į rūgščių katalizuojamą ciklizacijos reakciją, geriausia veikiant stipria rūgštimi, tokia kaip trifluoracto rūgštis, para-toluolsulforūg-štis arba iš prekybos gaunama polistirolo sulfonato polimero ti-po jonitine derva, tokia kaip Amberlyst l^^S) Ši ciklizacijos reakcija gali būti atliekama aprotoniniarae tirpiklyje, tokiame kaip metileno chloridas arba chloroformas, ir gaunamas tarpinis junginys, kurio formulė (XXV):

[0078] h I u XXIV formulės junginiai, kuriuose X yra 0, atskėlus apsau-ginę grupę P ir prieš ciklinimą, gali būti paversti atitinka-mais junginiais, kuriuose X yra S. Tą galima atlikti įvairiais metodais. Pavyzdžiui, XXIV formulės junginys, atskėlus P? gru-pę, gali būti veikiamas trifenilfosfinu, diizopropilazodikarboksilatu ir tioacto rūgštimi. Susidaręs tioacetatas apdorojamas natrio metoksidu metanolyje ir gaunamas atitinkamas merkaptanas, kuris gali būti ciklinamas taip, kaip aprašyta aukščiau.

[0079] Pagal kitą metodą, XXIV formulės junginys, atskėlus P_^ grupę, apdorojamas pagal žinomus metodus, ir gaunamas junginys, kurio formulė ( XXVI) :

[0080] kurioje L yra atskylanti grupė, tokia kaip metansulfoniloksigru-pė, para- toluolsulfoniloksigrupė, jodas arba bromas. Pavyzdžiui, veikiant XXIV formulės junginį, nuo kurio atskelta apsauginė gru-pė P^ _, t metansulfonilchloridu, gaunamas XXVI formulės junginys, kuriame L yra metansulfoniloksigrupė.

[0081] Tada XXVI formulės junginys veikiamas cezio tioacetatu ir gaunamas atitinkamas tioacetatas. Apdorojus natrio metoksidu metanolyje, gaunamas atitinkamas merkaptanas, kuris gali būti ciklinamas taip, kaip aprašyta aukščiau.

[0082] Kitu būdu, XXIV formulės junginys, kuriame X yra 0, gali būti tiesiogiai paverstas XXV formulės tarpiniu junginiu, veikiant stipria rūgštimi, tokia kaip trifluoracto rūgštis, para-toluolsulf orūgštis , arba iš prekybos gaunama polistirolo sulfonato polimero tipo jonitine derva, tokia kaip Amberlyst 1^, tinkamame tirpiklyje," tokiame kaip metileno chloridas arba chloroformas .

[0083] Po to, nuo XXV formulės junginio atskeliama N- apsauginė grupė, pavyzdžiui, veikiant hidrazino monohidratu, jeigu P_^ kartu su azoto atomu sudaro ftalimido grupę, veikiant jodtrimetilsilanu- arba paladžiu ant anglies ir amonio formiatu arba vandeniliu, jeigu yra benziloksikarbonilo grupė, arba veikiant druskos rūgštimi dioksane arba kita stipria rūgštimi, jeigu P_^ yra t-butoksikarbonilo grupė, ir gaunamas kondensuotas biciklinis junginys, kurio formulė III.

[0084] Pagal dar kitą metodą, kai Y yra CH_^t N-blokuota aminorūg-štis, kurios formulė XXII, gali būti sujungiama su hidroksiamino-rūgšties esteriu, kurio formulė (XXVII):

[0085] kurioje P_^ ir P₂ yra tokie, kaip aprašyta aukščiau. Geriausia šią sujungimo reakciją atlikti, esant sujungiančiam reagentui, tokiam kaip metansulfoniloksibenzotriazolas arba etil-3-(dimetilamino)propilkarbodiimidas.

[0086] Tada hidroksi-junginys XXVIII oksidinamas iki aldehido, kurio formulė (XXIX):

[0087] veikiant oksalilchloridu/dimetilsulfokside, o po to tretiniu

[0088] aminu aprotoniniame tirpiklyje, tokiame kaip metileno chloridas. XXIX formulės aldehidas apdorojamas aukščiau aprašytu būdu, kad būtų atskelta apsauginė grupė _P^, ir leidžiamas į rūgščių kata-lizuojamą ciklizacijos reakciją, atliekamą pagal aukščiau apra-šytą metodiką, ir gaunamas tarpinis junginys, kurio formulė XXV.

[0089] rnmm m V

[0090] Pradinė medžiaga, kurios formulė XXIII, kurioje m yra vienetas, gali būti gauta, selektyviai blokuojant L-&- hidroksinorleucino N- atomą, susidarant ( XXX) :

[0091] Tada XXXI formulės aldehidas veikiamas ortoformiatu, kurio for-mulė ( XXXII) :

[0092] Atskėlus N- apsauginą grupę P_^/ pavyzdžiui, veikiant hidrazinhid-ratu, jeigu P- ir N- atomas sudaro ftalimido liekaną, gaunama pradinė medžiaga, kurios formulė X_XIII, kurioje m yra vienetas.

[0093] Pradinė XXIII formulės medžiaga, kurioje m yra nulis, ga-li būti gaunama blokuojant ^- benzilglutamato N- atomą, susidarant ( XXXIV) :

[0094] Jeigu R? yra žemesnysis alkilas, hidrinant galima atskelti ben-zilo esterio grupę iš XXXV junginio ir gauti ( XXXVI) :

[0095] Selektyviai redukuojant XX_XVI junginį, pavyzdžiui, veikiant etan-tioliu, etil- 3-( 3- dimetilamino) propilkarbodiimidu ir dimetil-aminopiridinu, o po to trietilsilanu, paladžiu ant anglies ir acetonitrilu, gaunamas aldehidas, kurio formulė ( XXXVII) :

[0096] Tada XXXVII formulės aldehidas veikiamas XXXII formulės ortoformiatu, taip kaip aprašyta aukščiau, pašalinama N- apsauginė gru-pė P_^ taip, kaip aprašyta aukščiau, ir gaunama XXIII formulės

[0097] L. I JUCU o pradinė medžiaga, kurioje m yra nulis.

[0098] Pradinė medžiaga - XXVII formulės hidroksiaminorūgšties esteris - gali būti gaunamas, veikiant dietilacetamidornalonato tir-palą maišoma natrio hidrido suspensija, o po to halogenalkilacetatu, kurio formulė ( XXXVIII) :

[0099] XXXIX formulės dietilo esterio tirpalas veikiamas natrio hidroksidu šildant, po to rūgštinamas ir vėl šildomas, ir gaunama hidroksiaminorūgštis, kurios formulė ( XL) :

[0100] XL formulės hidroksiaminorūgštis yra veikiama kiaulės inks-tų acilaze arba kitokiu tinkamu hidrolizuojančiu fermentu ir gaunama steriškai gryna hidroksiaminorūgštis, kurios formulė ( XLI) :

[0101] Tada XLI formulės _hi_droksiaminorūgštis paverčiama XXVII «— I WV/ £ iU U

[0102] formulės esteriu įprastais būdais. Pavyzdžiui, XLI formulės hidroksiaminorūgštis gali būti veikiama trimetilsililchloridu metanolyje, ir gaunamas XXVII formulės metilo esterio hidro-chloridas .

[0103] XXII formulės pradinė medžiaga gali būti gaunama taip. Kai X yra 0, hidroksi- flt- aminorūgšt is, kurios formulė ( XLII) :

[0104] veikiama taip, kad būtų prijungiamos apsauginės grupės ir P_^• Pavyzdžiui, veikiant XLII formulės rūgštį N- karbetoksiftalimidu, esant natrio karbonatui, o po to, veikiant chlortrifenilmetanu ir trietilaminu, gaunama XXII formulės pradinė medžia-ga, kurioje X yra O, P_^ kartu su azoto atomu sudaro ftalimido grupą, o P^- yra tritilas. Kitu būdu, veikiant XLII formulės rūgštį N-( benziloksikarboniloksi) sukcinimidu vandeniniame natrio karbonato ir acetono tirpale, po to veikiant t- butildimetilsi-lilchloridu arba V arba VI formulės acilinimo agentu, gaunama XXII formulės pradinė medžiaga, kurioje X yra 0, P_^ yra ' benziloksikarbonilas, o P_ ^ , ■ t - . -t 2 yra t-butildimetilsililo arba acilo grupe, tokia kaip acetilas.

[0105] Kai X yra S, o n yra vienetas, N, N'- bis [( fenilmetoksi) karbonil]- L- cistinas gali būti veikiamas cinko dulkėmis ir vandeniniu sieros rūgšties tirpalu ir gaunamas merkaptanas, kurio for-mulė ( XLIII) :

[0106] Tada XLIII formulės merkaptanas veikiamas taip, kad būtų prijungiama apsauginė grupė P^ • Pavyzdžiui, veikiant XLIII for-mulės merkaptaną acto rūgšties anhidridu, gaunama XXII formu-lės pradinė medžiaga, kurioje X yra S, n yra vienetas, P "^ yra acetilas, o P_^ yra benziloksikarbonilas.

[0107] OU £ Q D

[0108] Kai X yra S_f o n yra du, galima blokuoti L- metionino N- ato-mą. Pavyzdžiui, reakcijoje su benzilchlorformiatu arba N-( benziloksikarboniloksi) sukcinimidu gaunamas N-|( fenilmetoksi) karbonil|- L- metioninas, kuris po to esterinamas, veikiant alkoholiu alkil- OH, esant rūgštiniam katalizatoriui, tokiam kaip p- toluolsulforūgštis. Veikiant oksidinimo agentu, tokiu kaip N- chlorsukcinimidas vandeniniame tirpiklyje, gaunamas sulfoksidas, kurio formulė ( XLIV) :

[0109] Tada XLIV formulės sulfoksidas veikiamas rūgšties anhidridu, tokiu kaip acto rūgšties anhidridas, ir gaunamas junginys, kurio formulė ( XL. V) :

[0110] Veikiant šarminio metalo hidroksidu, o po to atskeliant formal-dehidą, pavyzdžiui, veikiant redukuojančiu agentu, pavyzdžiui, natrio borhidridu, po to, veikiant rūgšties anhidridu, tokiu kaip acto rūgšties anhidridas, gaunama XXII formulės pradinė medžia-ga, kurioje X yra S, n yra du, P₂ yra acetilas, o yra benziloksikarbonilas.

[0111] Kondensuotą biciklinį žiedą turintys junginiai, kurių for-mulė III, kurioje Y yra S arba 0, o m yra vienetas, gali būti gaunami, jungiant N- blokuotą aminorūgštį, kurios formulė XXII, su aminorūgšties esteriu, kurio formulė ( XLVI) :

[0112]

[0113] XLVIII formulės tarpinis junginys, kuriame X yra S, o n yra du, taip pat gali būti pagaminti, veikiant XLVII formulės junginį, kuriame X yra O, o n yra du, selektyviai atskeliant P 2 grupę ir .hidroksilo grupę paverčiant merkaptanu, pagal aukš-

[0114] čiau aprašytą metodiką, o po to vykdant rūgščių katalizpojamą ciklizaciją. Tada iš XLVIII formulės junginio atskeliama N-apsauginė grupė, pavyzdžiui, veikiant hidrazino monohidratu, kai R_^ kar-

[0115] tu su N-atomu sudaro ftalimido grupę, arba veikiant jodtrime-

[0116] tilsilanu arba paladžiu ant anglies ir amonio formiatu arba vandeniliu, kai P_^ yra benziloksikarbonilo grupė, ir gaunamas kon-densuotą biciklinį žiedą turintis junginys, kurio formulė III.

[0117] Pradinė XLVI formulės medžiaga, kurioje Y yra O, gali bū-ti gaunama N- ftalimino- blokuotą aminorūgšties esterį, kurio for-mulė ( XLIX) :

[0118]

[0119] Veikiant L formulės junginį ozonu metanolyje, po to dimetilsulfidu ir po to XXXII formulės ortoformiatu, esant p- to-luolsulforugščiai, gaunamas blokuotas junginys, kurio formulė ( LI) :

[0120] Atskėlus N- apsauginę grupę, pavyzdžiui, veikiant hidrazinhidra-tu, gaunama pradinė medžiaga, kurios formulė XLVI, kurioje Y yra O.

[0121] Pradinė XLVI formulės medžiaga, kurioje Y yra S, gali bū-ti gaunama, veikiant cisteino esterį, kurio formulė ( LII) :

[0122]

[0123] I formulės junginiai, kuriuose _R^, R_r ir/arba R? yra vandenilis, gali būti išskirti farmaciškai tinkamos druskos for-moje. Šiam tikslui tinkamos druskos yra šarminių metalų druskos, tokios kaip natrio ir kalio, žemės šarminių metalų druskos, tokios kaip kalcio ir magnio, druskos, sudarytos su ami-norūgštimis, tokiomis kaip argininas, lizinas ir kt. ir druskos, sudarytos su aminais, tokiais kaip alkilaminai, pvz., t-butilaminas, t-amilaminas ir kt., pakeisti alkilaminai, pvz., benzilarainas, dialkilaminai, pakeisti dialkilaminai, pvz., N-metilglukaminas, trialkilaminai, pakeisti trialkilarninai ir ketvirtinės amonio druskos. Tokios druskos gali būti gaunamos, veikiant junginio rūgštiną formą baze, tiekiant norimą joną į terpę, iš kurios krenta druskos nuosėdos, arba vandeninėje ter-pėje, o po to liofilizuojama.

[0124] Pirmenybė teikiams tokiems šio išradimo junginiams, kuriuose :

[0125] arba r;q~S~ >

[0126] R_^ yra vandenilis arba žemesnysis alkilas iš nuo 1 iki 4

[0127] anglies atomų;

[0128] r yra nulis arba vienas;

[0129] R_{11 ^}ra žemesnysis alkilas iš nuo 1 iki 4 anglies atomų;

[0130] R-į yra aril-CH_^-, pakeistas aril-CI^-f heteroaril-C^-, . cikloalkil-CH_^-, kur cikloalkilas yra iš 3-7 anglies atomų ar-ba tiesios arba šakotos grandinės alkilas iš 1-7 anglies atomų, o R₁₂ Yra vandenilis; arba R_^ ir Paimti kartu su anglies atomu, prie kurio jie yra prijungti, sudaro cikloalkilo žiedą

[0131] ■ iš 5-7 anglies atomų;

[0132] Rg yra žemesnysis alkilas iš 1-4 anglies atomų, arba fenilas ;

[0133] n yra vienas arba du;

[0134] m yra nulis arba vienas;

[0135] X yra O arba S; ir

[0136] Y yra O arba S, su sąlyga, kad Y yra O arba S tik tada, kai m yra vienas,

[0137] Labiausiai tinkami yra aukščiau minėti junginiai, kuriuose:

[0138] O

[0139] U

[0140] R₂ yra vandenilis arba H-jC-C-, ypatingai vandenilis;

[0141] R_^ yra vandenilis;

[0142] r yra nulis arba vienas; ypatingai vienas;

[0143] yra benzilas, ciklopropilmetilas arba tiesios arba ša-kotos grandinės alkilas iš 3-5 anglies atomų, ypatingai benzilas ;

[0144] R_^2 Yra vandenilis;

[0145] n yra vienas arba du;

[0146] m yra nulis arba vienas;

[0147] X yra 0 arba S, su sąlyga, kad Y yra 0 arba S tik tada, kai m yra vienas.

[0148] Atskiras, labiausiai tinkamas junginys yra

[0149] [4S- [4<X(R*) , 7a., lOaB] ] -oktahidro-4- [( 2-merkapto-l-okso-3-fenilpropil) amino] -5-okso-7H-pirido [2 ,1-b] -[l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis, t.y. junginys, kurio formulė

[0150]

[0151] yra selektyvūs inhibitoriai, pasižymintys sugebėjimu inhibuoti angiotenziną keičiantį fermentą. Taigi, I formulės jung'iniai, įskaitant jų farmaciškai tinkamas druskas, yra naudingi gydant fiziologines būsenas tais atvejais, kuriais, kaip buvo parodyta, yra naudingi angiotenziną keičiančio fermento inhibitoriai. Tokių būsenų tarpe yra ligos, kurioms charakteringi kraujo spau-dimo, intraokulinio slėgio nenormalumai, ir renino sąlygotos širdies-kraujagyslių ligos, ypatingai hipertenzija ir susijusi su kraujoplūdžiu širdies yda, glaukoma ir inkstų ligos, tokios kaip inkstų nepakankamumas, diabetinė nefropatija ir inkstų pakenkimas, atsiradęs po gydymo ciklosporinu arba kitais imu-nosupresantais. Iš kitų būsenų, kurioms, kaip buvo paskelbta, yra naudotini angiotenziną keičiančio fermento inhibitoriai, pažymėtinos kepenų cirozė, aterosklerozės progresavimo stab-dymas, hipertenzinės arba diabetinės retinopatijos gydymas ar-ba profilaktika, miokardo disfunkcijos miokardo infarkto metu arba po jo gydymui ir restinozės profilaktikai po angioplasti-kos. Dvigubi inhibitoriai yra taip pat naudingi gydant fiziologines būsenas, kurioms, kaip buvo parodyta, yra naudingi neutralios endopeptidazės inhibitoriai. Į tokias būsenas įeina

[0152] širdies-kraujagyslių ligos, ypatingai hipertenzija, hiperaldo-steronemija, inkstų ligos, glaukoma, o taip pat aštraus arba chroniško skausmo pašalinimas. Taigi, I formulės junginiai yra naudingi, mažinant kraujo spaudimą, o I formulės dvigubi inhibitoriai yra naudingi dar ir dėl to, kad turi diuretinių ir natriurinių savybių. Dvigubi inhibitoriai yra ypatingai naudingi, gydant susijusią su kraujoplūdžiu širdies ydą.

[0153] I formulės junginiai, įskaitant jų farmaciškai tinkamas druskas, gali būti naudojami šiems tikslams kiekiais, pana-šiais į kiekius, kurie buvo naudoti kitų angiotenziną keičian-čio fermento inhibitorių atveju anksčiau. Pavyzdžiui, I for-mulės junginiai gali būti skiriami žinduoliams, pavyzdžiui, žmogui, nuo maždaug 0,1 mg iki maždaug 100 mg kilogramui kūno svorio per dieną, geriau nuo maždaug 0,5 mg iki maždaug 25 mg kilogramui kūno svorio per dieną dozėmis. Geriausia I formu-lės junginius naudoti oraliniu būdu, tačiau gali būti naudojami ir parenteriniai būdai, tokie kaip poodinis, intramuskuli-nis ir intraveninis, o taip pat ir vietinis. Dienos dozė gali

[0154] būti vienkartinė, arba gali būti padalinta į 2-4 atskiras do-zes, sunaudojamas per dieną.

[0155] I formulės inhibitoriai gali būti skiriami kombinacijoje su žmogaus ANF 99-126. Tokioje kombinacijoje galėtų būti nuo maždaug 1 iki maždaug 100 mg/kg kūno svorio I formulės inhibi-toriaus ir nuo maždaug 0,001 iki maždaug 0,1 mg/kg kūno svorio žmogaus ANF 99-126.

[0156] I formulės inhibitoriai gali būti skiriami kombinacijoje su kitų klasių farmaciškai aktyviais junginiais. Pavyzdžiui, diuretikais, kalcio kanalo blokatoriumi, kalio kanalo aktyva-toriumi, cholesteriną mažinančiu agentu, B-blokatoriumi ir t.t.

[0157] I formulės inhibitoriai arba jų farmaciškai tinkamos druskos kartu su kitais farmaciškai tinkamais ingredientais gali būti paversti vaistinėmis formomis, skirtomis aukščiau aprašytam panaudojimui. Tinkamos kompozicijos oraliniam vartojimui apima tabletes, kapsules ir eliksyrus, o tinkamos kompozicijos parenteriniam vartojimui apima sterilius tirpalus ir sus-pensijas. Tinkamos kompozicijos glaukomos gydymui taip pat apima vietinio panaudojimo kompozicijas, tokias kaip tirpalai, te-palai ir kieti įdėklai, tokie kaip aprašyta JAV patente Nr. 4 442 089. Maždaug nuo 10 iki 5O0 mg veikliojo ingrediento sujungiama su fiziologiškai priimtinu tirpikliu, nešėju, eksci-pientu, rišikliu, apsaugančiu agentu, stabilizatoriumi, skonį suteikiančia medžiaga it t.t. į vienetinę dozuotą formą pagal priimtą farmacinę praktiką.

[0158] Toliau duodami pavyzdžiai iliustruoja šį išradimą. Tempe-ratūros duotos Celsijaus laipsniais. Jeigu nepažymėta kitaip, plonasluoksnė chromatografija vykdoma per silikagelį.

[0159] 1 pavyzdys

[0160] [ 4S- [ 4cc( R* ) , 7<x» lOafl] ] - Oktahidro- 4- [( 2- merkapto- l- okso- 3- fenil-propilamino] - 5- okso- 7H- pirido [ 2 , 1- b] [ l, 3] oksazepin- 7- karboksilo rūgštis a) ( S)- 2- Ftalimido- 4- hidroksibutano rūgšties trietilamino druska L-homoserino (3,0 g, 25,2 mmol) ir natrio karbonato (2,670 g,

[0161] 25,2 mmol) tirpalas vandenyje (60 ml) veikiamas N-karbetoksiftalimidu (5,570 g, 25,4 mmol). _Pamaišius kambario temperatūroje 2

[0162] valandas, tirpalas rūgštinamas 6 N druskos rūgštimi ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktas plaunamas druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu) ir filtruojamas į trietilamino (4,0 ml) tirpalą metileno chloride (40 ml). Drumstas tirpalas koncentruojamas, trinamas su etilacetatu ir etilo eteriu ir gaunama 5,11 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo junginio;

[0163] *- I D

[0164] lyd. temp. 142-144 °C. Plonasluoksnė chromatografija (5% acto rūgštis etilacetate) Rf = 0,36; [a] = -6,2° (c=0,8, chloroformas ) .

[0165] Analizė: išskaičiuota pagal C. oH-^N_0,-: i. o Z o Z j

[0166] b) ( S)- 2- Ftalimido- 4-( trifenilmetoksi) butano rūgšties trietilamino druska

[0167] Produkto iš (a) stadijos (1,890 g, 5,4 mmol) homogeninis tirpalas chloroforme (20 ml) veikiamas trietilaminu (80 jHl), o po to kietu chlortrifenilmetanu (1,590 g, 5,70 mmol). Pamai-

[0168] šius kambario temperatūroje 2,5 valandos, tirpalas sumaišomas su etilacetatu ir 0,1 N druskos rūgštimi (150 ml). Organinis sluoksnis plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu) ir filtruojamas į trietilamino (1,0 ml) tirpalą metileno chloride (30 ml). Tirpalas koncentruojamas tol,

[0169] kol lieka alyva, ji tirpinama mažame metileno chlorido ir etilacetato kiekyje ir trinama su etilo eteriu, koiįtirpalas pasidaro drumstas. Į mišinį pridedama medžiagos kristalizacijos cent-rų sudarymui ir paliekama stovėti kambario temperatūroje. Susidariusios nuosėdos nufiltruojamos, plaunamos etilacetatu ir etilo eteriu ir džiovinama vakuume. Gaunama 2,538 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo junginio; lyd. temp. = 165-170 °C (skyla). Plonasluoksnė chromatografija (10% metanolis chloroforme) R? = 0,23; [ a] = +7,0° (c = 1,2, chloroformas).

[0170] c) ( S)- 2- Ftalimido- 6- hidroksiheksano rūgštis

[0171] (+)-L- £ -hidroksinorleucino (pagamintas pagal Bodanszky ir kt. , J. Med. Chem. , 1978, _21_, 1030-1035 aprašytą metodiką) (1.030 g, 7,0 mmol) ir natrio karbonato (745 mg, 7,0 mmol) tirpalas vandenyje (12 ml) veikiamas N-karbetoksiftalimidu (1,495 g, 7,0 mmol) ir mišinys maišomas kambario temperatū-roje 2 valandas. Tirpalas nufiltruojamas, atšaldomas iki 0 °C ir rūgštinant 6N druskos rūgštimi, gaunamos baltos nuosėdos. Nuosėdos nufiltruojamos ir džiovinamos vakuume 80 °C tempera-tūroje vieną valandą. Gaunama 1,297 g norimo junginio; lyd. temp. 162-163 °C ; [očj D = -35,7° ( c=l, 3 , metanolis).

[0172] Produkto iš (c) stadijos (3,752 g, 13,5 mmol) ir cezio karbonato (2,173 g, 6,7 mmol) košelė dimetilformamide (44 ml) veikiama metilo jodidu (3,0 ml, 6,84 g, 48,2 mmol). Pamaišius kambario temperatūroje 2 valandas, mišinys praskiedžiamas etilacetatu ir plaunamas iš eilės vandeniu, kuriame yra nedidelis kiekis natrio bisulfito, vandeniu, 50% sočiu natrio bikarbonatu ir druskos tirpalu, po to džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir surenkamos nuosėdos. Gaunamas bespal-vės alyvos pavidalo tarpinis esteris (3,825 g). Pagal plona-sluoksnę chromatografiją (1:1 - acetonas:heksanas) R_^= 0,37, alyva yra homogeninė.

[0173] Į -78 °C temperatūros oksalilo chlorido (1,37 ml, 2,00 g, 15,7 mmol) tirpalą sausame metileno chloride (58 ml) sulašina-mas sauso dimetilsulfoksido (2,24 ml, 2,47 g, 31,6 mmol) tirpalas metileno chloride (2 ml) . Po 10 minučių pridedamas aukš-čiau gauto alkohol.io-esterio (3,825 g, 13,1 mmol) tirpalas metileno chloride (10 ml) . Dar po 15 minučių pridedama trietilamino (8,0 ml), mišinys maišomas 5 minutes -78 °C temperatūroje, tada. sušildomas iki 0 °C. Mišinys praskiedžiamas etilacetatu/ etilo eteriu ir plaunamas iš eilės 1N druskos rūgštimi, vandeniu ir druskos tirpalu, po to džiovinama (natrio sulfatu), filtruojama, ir surinkus nuosėdas,gaunamas nevalytas norimas aldehidas. Pagal plonasluoksnę chromatografiją (1:1 - aceto-nas : heksanas ) R? = 0,48, alyva yra homogeninė.

[0174] Aukščiau minėto aldehido tirpalas metanolyje (17 ml) ir metileno chloride (17 ml) veikiamas trimetilortoformiatu (1,7 ml) , o po to p-toluolsulf orūgš ties monohidratu (180 mg). Mi-šinys maišomas kambario temperatūroje 1,5 valandos, po to iš-pilamas 4 etilacetato ir 50% sotaus natrio bikarbonato mišinį. Organinis sluoksnis plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir apdorojamas. Liekana valoma ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 1:1 - etilacetatas:heksanas) ir švaraus produkto frakcijos kris-talinamos iš etilacetato/heksano. Gaunamas analitiškai švarus norimas produktas (3,452 g - pirmoji frakcija ir 215 mg - antroji frakcija), kuris yra baltos adatos; lyd. temp. 69-70 °C. Plonasluoksnė chromatografija (1:1 - etilacetatas:heksanas) R = 0,35; [ £ Xj D = -27,4° (c = 1,5, chloroformas).

[0175] Analizė: išskaičiuota pagal C]_ 7H21N06:

[0176] e) fs - ( R* , R* ) Į - 2-{ £ ( Ftalimido- 4 - ( trifenilmetoksi ) - 1- oksobu-tilĮamino"]- 6 , 6- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0177] Produkto iš (d) stadijos (2,540 g, 7,57 mmol) suspensija metanolyje (18 ml) veikiama hidrazino monohidratu (378 _/Hl,

[0178] 390 mg, 7,80 mmol). Per 10 minučių mišinys pasidaro homogeninis. Pamaišius kambario temperatūroje 3 dienas, susidariusi suspensija nufiltruojama, apdorojama, suspenduojama metileno chloride, filtruojama, vėl apdorojama ir gaunamas bespalvės alyvos pavidalo nevalytas tarpinis aminas. Tuo pačiu metu trietilamino druskos iš (b) stadijos (4,622 g, 7,80 mmol) tirpalas metileno chloride (50 ml) 0 °C temperatūroje veikiamas benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (3,519 g, 7,95 mmol). Mišinys maišomas 35 minutes ir tada pridedama aukščiau minėto amino tirpalo metileno chlori-

[0179] de (15 ml). Palaikius 10 minučių 0 °C temperatūroje ir 2 valandas kambario temperatūroje, tirpalas išpilamas į etilo eterio ir vandens mišinį. Organinis sluoksnis plaunamas 50% sočiu natrio bikarbonatu ir druskos tirpalu, tada džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir apdorojamas. Liekana valoma ekspres-chromatografijos būdu (Merck silikagelis, 6:4 - etilacetatas : heksanas ) ir gaunama baltų putų pavidalo norimas junginys (3,580 g). Plonasluoksnė chromatografija (6:4 - etilacetatas : heksanas ) R_^ = 0,32; Į_bcT_J = +26,2° (c = 0,6, chloroformas ) .

[0180] f) ts-( R*, R*) Į- 2-[( 2- Ftalimido- 4- hidroksi- l- ok5obutil) aminoĮ-- 6, 6- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0181] Produktas iš (e) stadijos (5,420 g, 8,0 mmol) metanolyje (60 ml) veikiamas p-toluolsulforūgšties monohidratu (520 mg). Pamaišius kambario temperatūroje 1,5 vai., mišinys purtomas su etilacetato ir praskiesto natrio bikarbonato mišiniu. Atskiriami sluoksniai, ir vandeninis sluoksnis vėl ekstrahuojamas etilacetatu. Organiniai ekstraktai sumaišomi, plaunami druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojami ir ap-dorojami. Liekana valoma ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 8:2 - etilacetatas:heksanas, o po to 5% metanolis etilacetate), ir gaunama bespalvės alyvos pavidalo norimas produktas (2,860 g). Plonasluoksnė chromatografija (7:3 - etilacetatas: heksanas ) R? = 0,26; [oCJ D ~~ ⁺¹⁸_,⁷ ^ = ^3, chloroformas).

[0182] g) r4S -( 4QC, 7CX., 10aI3)] - Oktahidro- 4- ftalimido- 5- okso- 7H- pirido [ 2, 1- b] [ 1, 3] oksazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0183] Produkto iš (f) stadijos (2,10 g, 4,95 mmol) tirpalas metileno chloride (100 ml) veikiamas jonitine derva Amberlys ^t® (240 mg, prieš tai perplovus iš eilės 6N druskos rūgštimi, vandeniu, tetrahidrofuranu ir metileno chloridu). Pamaišius kambario temperatūroje 2,5 vai, tirpalas filtruojamas, apdorojamas ir valoma medžiaga ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 6:4 - etilacetatas:heksanas, po to 100%-etilacetatas). Gaunama 1,40 g putų pavidalo norimo junginio.

[0184] Į D-fenilalanino (30,0 g, 181 mmol) ir kalio bromido (73,5 g) tirpalą sieros rūgštyje (2,5N, 365 ml) per vieną valandą, palaikant reakcijos mišinio temperatūrą 0 °C, pridedama natrio nitrito (10,3 g, 280 mmol). Mišinys maišomas dar vieną valandą 0 °C temperatūroje ir po to valandą kambario temperatūroje. Reakcijos tirpalas ekstrahuojamas eteriu, eteris plaunamas vandeniu ir eterio sluoksnis džiovinamas natrio sulfatu. Eteris nugarinamas vakuume, ir nudistiliavus alyvos pavidalo liekaną, gaunama 25,7 g (R)-2-brom-3-benzolpropano rūgšties; vir. temp. 141 c (0,55 mm Hg st-) ; [ot] D = +14,5° (c = 2,4, chloroformas).

[0185] Tioacto rūgšties (7 ml, 97,9 mmol) ir kalio hidroksido (5,48 g, 97,9 mmol) mišinys acetonitrile (180,5 ml) maišomas argono atmosferoje ir kambario temperatūroje 13/4 valandos. Mišinys atšaldomas ledo vonioje ir per 10 minučių pridedama (R)-2-brom-3-benzolpropano rūgšties (20,4 g, 89 mmol) tirpalo acetonitrile (20 ml). _Argono atmosferoje reakcijos mišinys maisomas 5 valandas kambario temperatūroje, filtruojamas ir va-kume nugarinamas acetonitrilas. Alyvos pavidalo liekana iš-tirpinama etilacetate ir plaunama 10 %- niu kalio bisulfato tirpalu vandenyje. Nugarinus etilacetatą vakuume, gaunama 19, 6 g nevalyto produkto. Nevalytas produktas gryninamas per jo dicikloheksilamino druską, kristalinimo tirpikliu naudojant izo-propilo eterį. Analitinis ( S)- 2-( acetiltio) benzolpropano rūg-šties dicikloheksilamino druskos pavyzdys buvo pagamintas, perkristalinus iš etilacetato; lyd. temp. : 146- 147 °C; [ į<] = - 39, 6 °C ( c = 1, 39, chloroformas).

[0186] Analizė: išskaičiuota pagal Cį^ Hį2°3S _" C12^H23^N:

[0187]

[0188] Laisva rūgštis regeneruota, purtant dicikloheksilamino druską su 5% kalio bisulfato ir etilacetato mišiniu; gaunama ( s)- 2-( acetiltio) benzolpropano rūgštis; [ of] d = - 70, 1 °c ( c = 1, 91, chloroformas).

[0189] Analizė: išskaičiuota pagal cnH12°3S:

[0190] i ) f4S - f4CX .( R *), 7oc , lOaflĮ ] - Qktahidro - 4 - C [_ 2 - ( acetiltio ) - 1 - okso -- 3 - fenilpropil ] amino "!- 5 - okso - 7H - pirido f2 , 1 - bĮ fl , 3Į oksazepin - 7 - karboksilo rūgšties metilo esteris

[0191] Produktas iš ( g) stadijos ( 620 mg, 1, 66 mmol) metanolyje ( 10 ml) veikiamas hidrazino monohidratu ( 85 įĄ 1, 88 mg, 1, 75 mmol) ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 44 valandas. Mi-šinys nufiltruojamas, o kieta medžiaga plaunama metanoliu. Filtratas nugarinamas, trinama liekana su metileno chloridu, vėl nufiltruojamas ir nugarinus, gaunamas nevalytas aminas, kaip vietomis susidrumtusi alyva ( apie 400 mg).

[0192] Šaltas ( 0 °C)( S)- 2-( acetiltio) benzolpropano rūgšties ( 410 mg, 1, 83 mmol) ir trietilamino ( 250 yni, 182 mg, 1, 80 mmol) tirpalas metileno chloride ( 10 ml) veikiamas aukščiau minėtu aminu ( tirpalu 8- se ml metileno chlorido), o po to benzotriazol-- 1- iloksitris( dimetilamino) fosfonio heksafluorfosfatu ( 808 mg, 1, 83 mmol). Skaidrus, beveik bespalvis tirpalas maišomas 0 °C temperatūroje 40 minučių ir po to kambario temperatūroje - 2 valandas. Mišinys puromas su etilacetatu/etilo eteriu ir vandeniu. Organinis sluoksnis plaunamas iš eilės 50 % sočiu nat-

[0193] rio bikarbonatu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Išvalius liekaną ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 60-70 % etilaceta-

[0194] tas heksanuose), gaunama 602 mg baltų putų pavidalo gryno norimo produkto; plonasluoksnė chromatografija (6:4 -etilacetatas:heksanai) R- = 0,27.

[0195] j) f 4 S — į 4 C< jC R * ) , 7PC, 10al3]~ f - Oktahidro- 4- f ( 2- merkapto- l- okso- 3-- fenilpropil) amino Į - 5- okso- 7H- pirido Į " 2, l - b~[ [" l, 3] oksazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0196] Produktas iš (i) stadijos (590 mg, 1,32 mmol), ištirpin-tas metanolyje (10 ml, iš kurio pašalintas deguonis, leidžiant argono burbuliukus), veikiamas 1N natrio hidroksidu (7 ml, iš kurio pašalintas deguonis, leidžiant argono burbuliukus) 0 °C temperatūroje. Pamaišius 15 minučių, tirpalas sušildomas iki kambario temperatūros, ir maišoma argono atmosferoje dar 4,5 valandos. Mišinys rūgštinamas 5% kalio bisulfatu, skiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas iki apytikriai 3 ml. Liekana suspenduojama etilacetate ir nedideliame heksano kiekyje, ir gauta kieta medžiaga nufiltruojama ir džiovinama va-kume. Gaunama 413 mg norimo junginio; lyd. temp. 180,5 °C (skyla). Plonasluoksnė chromatografija (2 % acto rūgštis etilacetate) = 0,39; [cC] = -37,6° (c = 0,36, metanolis). HPLC: YMC S3 ODS kolonėlė (6,0x150 mm); eliuuojama 40% A: 90% vandens-10% metanolio-0,2% fosforo rūgšties ir 60% B: 10% vandens-90% metanolio-0,2% fosforo rūgšties; srovės greitis 1,5 ml/min; detekcija kai bangos ilgis yra 220 nm; t_^ = 6,73 min (95,7 %) .

[0197] Analizė: išskaičiuota pagal C__nH__QN_O.S . 0,12 etilacetato: t U £ . O 4. 4

[0198] N,N'-bis|(fenilraetoksi)karbonilĮ-L-cistino (4,658 g, 9,16 mmol) tirpalas metanolyje (35 ml) veikiamas 2 N sieros rūgš-timi (23 ml), o po to dalimis pridedama cinko dulkių (2,442 g, 37,3 mmol). Mišinys šildomas 70 °C temperatūroje 1,5 valandos, šiltas filtruojamas ir koncentruojamas rotoriniu garintuvu. Likąs tirpalas ekstrahuojamas etilo eteriu, eterinis ekstraktas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Liekana (alyva) ištirpinama anglies tetrachloride, atšaldoma iki 0 °C ir su-daromi kristalizacijos centrai, kad lėtai kristų iš tirpalo me-džiaga. Kieta medžiaga nufiltruojama, plaunama šaltu anglies tetrachloridu ir gaunama 2,648 g produkto. Nuovarvų skystis nugarinamas ir valomas, naudojant ekspres-chromatografiją (Merck silikagelis, etilacetatas, po to 4 % acto rūgštis etil- _~ acetate); po perkristalinimo gaunama dar papildoma produkto frakcija (246 mg). Bendra produkto išeiga yra 2,894 g. Plona-sluoksnė chromatografija (5% acto rūgštis etilacetate ) R, = = 0,58.

[0199] Homogeninis (a) stadijos produkto (2,70 g, 10,6 ml) tirpalas vandenyje (30 ml, iš kurio pašalintas deguonis, burbuliuojant argoną), turintis kalio "^karbonato (2,140 g, 21,4 mmol), veikiamas acto rūgšties anhidridu (8,0 ml, 8,66 g, 84,8 mmol). Palaikius 10 minučių kambario temperatūroje, mišinys parūgštinamas 10 % druskos rūgštimi ir ekstrahuojamas etilo eteriu. Etilo eterio ekstraktas plaunamas du kartus vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir garinamas kol gaunama alyva. Liekana, naudojant aceotropus, tris kartus apdorojama toluolu ir du kartus etilo eteriu/heksanu, ir tada alyva išsikristalina. Liekana trinama su etilo eteriu/heksanu, ir nufiltravus kietą medžiagą, gaunama 2,19 g gryno norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (5 % ac-to rūgštis etilacetate) R, = 0,56.

[0200] _c) ( S ) - 2 - Į" ĮN- r( fenilmetoksi) karbonilĮ - S- acetil- L- cisteinil]-amino]- 6, 6- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0201] (S)-2-ftalimido-6,6-dimetoksiheksano rūgšties metilo esterio (gauto pagal l(d) pavyzdyje aprašytą metodiką, 1,158 g, 3,45 mmol) suspensija metanolyje (12 ml) veikiama hidrazino monohidratu (176 į*±, 182 mg, 3,63 mmol). Per 10 minučių mišinys pasidaro homogeninis. Pamaišius kambario temperatūroje 67 valandas, susidariusi suspensija filtruojama, nugarinama, suspenduojama metileno chloride, filtruojama ir dar kartą nugarinus, gaunama bespalvės alyvos pavidalo nevalytas tarpinis aminas. Tuo pačiu metu dalis produkto iš (b) stadijos (1,185 g, 3,98 mmol) suspensijos metileno chloride (14 ml) veikiama trietilaminu (555 1, 403 mg, 3,98 mmol). Šis homogeninis tirpalas atšaldomas iki 0 °C, veikiamas aukščiau aprašyto amino tirpalu metileno chloride (7 ml) , o po to benzotriazol-l-ilok- . sitris (dimetilamino.) f osf onio heksaf luorf osf atu (1,762 g, 3,98 mmol). Mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 2,5 valandos, po to kambario temperatūroje 45 minutes. Tirpiklis nugarinamas, o liekana purtoma su etilacetatu ir vandeniu. Organinis sluoksnis plaunamas 50 % prisotintu natrio bikarbonatu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Išvalius liekaną ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 65:35 - etilacetatas:heksanai), gaunama 1,15 g baltų putų pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (75:25 etilacetatas:heksanai) R? = 0,42. Analizė: išskaičiuota pagal C₂₂H₃₂N₂0gS:

[0202] Produkto iš (c) stadijos (1,040 g, 2,15 mmol) tirpalas metanolyje (12 ml), iš kurio pašalintas deguonis (burbuliuojant argoną), 0 °C temperatūroje veikiamas natrio metoksidu (25 svorio % metanolyje, 490 fū., 463 mg, 2, 14 mmol). Po 20 minu-čių mišinys skaldomas sočiu amonio chloridu, praskiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas ( natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas- Liekana vėl tirpinama metileno chloride ( 200 ml) ir kambario temperatūroje maišoma su jonitine derva Amberlyst © 15 ( 820 mg, prieš tai išplaute iš eilės su 6 N druskos rūgštimi, vandeniu, tetrahidrofuranu, po to metileno chloridu). Po 3 valandų tirpalas filtruojamas, nugarinamas ir, išvalius ekspres- chromatografijos būdu ( Merck silikagelis, 65:35 - etilacetatas:heksanai), gaunama bespal-vės alyvos pavidalo norimas junginys ( 757 mg). Plonasluoksnė chromatografija ( 75:25 etilacetatas:heksanai) R? = 0, 58.

[0203] e ) f ~ 3R - ( 3PC , 6 ( X , 9aB ) ] - Heksahidro - 3 - amino - 4 - okso - 2H , 6H - pirido -

[0204] " 2 , 1 - b J fl , 3 * 1 tia2in - 6 - karboksilo rūgšties metilo esteris

[0205] Produkto iš ( d) stadijos ( 752 mg, 1, 99 mmol) tirpalas sausame metileno chloride ( 15 ml) veikiamas kambario tempera-tūroje jodtrimetilsilanu ( 620 y* tl, 872 mg, 4, 36 mmol). Pamai-šius 3 valandas, mišinys skaldomas vandeniu, veikiamas mažu kiekiu 10 % druskos rūgšties ir ekstrahuojamas etilo eteriu. Atskiriami sluoksniai ir eterinis sluoksnis vėl ekstrahuojamas vandeniu. Sujungti vandeniniai sluoksniai pašarminami

[0206] ( pH 13) 10 %- niu natrio hidroksidu ir du kartus ekstrahuojami metileno chloridu. Sumaišyti metileno chlorido ekstraktai džiovinami ( natrio sulfatu), filtruojama ir nugarinus gaunama bespalvės alyvos pavidalo nevalytas norimas produktas. Plo.- ?. nasluoksnė chromatografija ( 10 % metanolis metileno chloride) Rf = 0, 38.

[0207] f ) [ 3R - [ 3cXl S *), 601 , 9afi ] ] - Heksahidro - 3 - ["^-( acetiltio ) - 1 - okso -- 3 - f enilpropil ] amino ! - 4 - okso - 2H , 6H - pirido [ 2 , 1 - b ] Į ~ 1 , 3 Į tiazin -- 6 - karboksilo rūgšties metilo esteris

[0208] Šaltas ( 0 °C) ( S)- 2-( acetiltio) benzolpropano rūgšties ( 294 mg, 1, 31 mmol) ir trietilamino ( 180 , 131 mg, 1, 29 mmol) tirpalas metileno chloride ( 8 ml) veikiamas ( e) stadijos produkto ( 287 mg, 1, 17 mmol) tirpalu 6 ml metileno chlorido. Tada pridedama benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfato (575 mg, 1,30 mraol). Skaidrus, beveik bespalvis tirpalas maišomas 0 °C temperatūroje 1 valandą ir po to kambario temperatūroje irgi 1 valandą. Tirpiklis nugarinamas rotoriniu garintuvu, o liekana purtoma su etilacetato ir 5 % kalio bisulfato mišiniu. Organinis sluoksnis plaunamas iš eilės vandeniu, 50 % sočiu natrio bikarbonatu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Liekana valoma ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 1:1 - etilacetatas:heksanai) ir gaunama 412 mg gryno, baltų putų pavidalo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (1:1 - etilacetatas: heksanai) R? = 0,27; JflČĮ D -107,0° (c = 0,6, chloroformas).

[0209] g) f3R- Į" 3oC( S* ) , 6q, 9al3] ] - Heksahidro- 3- f ( 2- merkapto- l- okso- 3-- f enilpropil) amino] - 4- okso- 2H, 6H- piridor2, l- b"] ri , 3|- tiazin-- 6- karboksilo rūgštis

[0210] 0 °C temperatūros (f) stadijos produkto (406 mg, 0,90 mmol) tirpalas metanolyje (5 ml, iš kurio pašalintas deguonis, burbuliuojant argoną) veikiamas 1 N natrio hidroksidu (5 ml, iš kurio pašalintas deguonis, burbuliuojant argoną). Pamaišius vieną valandą, tirpalas sušildomas iki kambario temperatūros ir maišomas argono atmosferoje dar 1,25 valandos. Mišinys pa-rūgštinamas 5% kalio bisulfatu, praskiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Liekana valoma du kartus, panaudojant ekspres-chromatografiją (Merck silikagelis, 2% acto rūgštis etilacetate). Produkto frakcijos tikrinamos aukšto slėgio skys-čių chromatografijos (HPLC) metodu. Pageidaujamos frakcijos sumaišomos, nugarinamos ir, panaudojant aceotropo susidarymą, du kartus apdorojamos etilacetatu. Liekana ištirpinama mažame etilacetato kiekyje ir trinama su heksanu. Tirpiklis nugarinamas, liekana suspenduojama heksanuose, nugarinama ir, išdžio-vinus vakuume, gaunama 98,3 mg kietų baltų putų pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (2 % acto rūgštis etilacetate) R? = 0,46; [čc] ^ = -57,0° (c = 0,4, chloroformas). HPLC: YMC S3 ODS kolonėlė (6,0x150 mm); eliuuojama su 40% A: 90% vandens-10% metanolio-0,2% fosforo rūgšties ir 60% B: 10% vandens-90% metanolio-0,2% fosforo rūgšties; sro-vės greitis 1,5 ml/min, detektuojama esant bangos ilgiui 220 nra; tD = 8,33 min (95,0 %).

[0211] Analizė: išskaičiuota pagal c_i8H₂₂N2⁰4S₂.0,2 etilacetato:

[0212] 3 pavyzdys

[0213] £ 4S- [ 40C( R*), VACjlOafi] ] - Oktahidro- 4- £ ( 2- merkapto- l- okso- 3- fenilpropil) amino]- 5- okso- 7H- pirido[ 2, 1- b][ l, 3]- tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0214] a) fs -( R*, R*)"|- 2 -[ r2 - Ftalimido- 4-( acetiltio ) - 1- oksobutilT - amino]- 6, 6- dimetoksiheksano rūgšties me_tilo esteris

[0215] Šaltas (0 °C) trifenilfosfino (1,143 g, 4,36 mmol) tirpalas tetrahidrofurane (20 ml) veikiamas diizopropilazidodikar-boksilatu 860 /Hl, 883 mg, 4,37 mmol). Per 5 minutes pasidaro balta suspensija. Po 30 minučių pridedamas [ s-(R*, R* )- 2- j_( 2--ftalimodo-4-hidroksi-l-oksobutil]amino]-6,6-dimetoksiheksano rūgšties metilo esterio (gauto pagal l(f) pavyzdyje aprašytą metodiką, 928 mg, 2,19 mmol) tirpalas tetrahidrofurane (8 ml),

[0216] o po to grynos tioacto rūgšties (312 ywl, 332 mg, 4,36 mmol). Mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 1,25 valandos, o tada purtomas su 50 % prisotinto natrio bikarbonato ir etilacetato mi-šiniu. Etilacetato ekstraktas plaunamas druskos tirpalu, džio-vinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Liekana vėl ištirpinama etilacetate ir pridedamas nedidelis kiekis heksano, kad nusėstų trifenilfosfino oksidas. Mišinys filtruojamas, ir, išvalius filtratą ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 65:35 - etilacetatas:heksanai), gaunama 894 mg be-spalvės alyvos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija ( 75:25 - etilacetatas:heksanai) R? = 0,43.

[0217] b) f4S-( 4( X, 70C, 10afl)| - Qktahidro- 4- f talimido- 5- okso- 7H- pirido-2 , 1- bĮ [~ 11 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0218] Produkto iš (a) stadijos (814 mg, 1,65 mmol) tirpalas, iš kurio leidžiant argoną, pašalintas deguonis, metanolyje (15 ml) 0 °C temperatūroje veikiamas natrio metoksidu (25 svorio % metanolyje, 1,05 ml, 4,6 mmol). Po 5 minučių mišinys skaldomas sočiu amonio chloridu, praskiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas. Liekana ištirpinama metileno chloride (180 ml) ir kambario temperatūroje maišoma su jonitine derva Amberlyst^Ė) 15 (285 mg, prieš tai perplauta iš eilės 6N druskos rūgštimi, vandeniu, tetrahidrofuranu ir metileno chloridu). Po 46 valan-dų tirpalas filtruojamas, nugarinamas ir, išvalius ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 1:1 - etilacetatas: heksanai), gaunama 314 mg baltų putų pavidalo norimo produkto. Trinant putas su etilo eteriu, gaunamas baltos kietos medžia-gos pavidalo norimas produktas; lyd. temp. = 147-148 °C. Plo-nasluoksnė chromatografija (75:25 - etilacetatas:heksanai) R?= = 0,56; [PSlp = -143,2° (c = 0,6, chloroformas).

[0219] c ) f4S- Į 4( X( R* ) , 7g, lOaBl r ~ Oktahidro - 4 - f f~ 2-( acetiltio )- 1- okso -- 3 - f enilpropilĮaminoĮ - 5 - okso - 7H- pirido [" 2, 1- bĮ [~ l , 3 "] tiazepin - 7-- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0220] Produktas iš (b) stadijos (280 mg, 0,72 mmol) metanolyje (8 ml) veikiamas hidrazino monohidratu (42 _^-jl, 43,3 mg, 0,86 mmol), ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 67 valandas. Mišinys filtruojamas, o kieta medžiaga plaunama metanoliu. Filtratas nugarinamas, trinamas su metileno chloridu, vėl filtruojamas ir nugarinus, gaunama geltonos alyvos pavidalo nevalytas aminas (apie 205 mg).

[0221] Šaltas (0 °C ) ( S )-2-(acetiltio)-benzolpropano rūgšties (178 mg, 0,79 mmol) ir trietilamino (111 _^il, 80 mg, 0,80 mmol) tirpalas metileno chloride (3 ml)veikiamas aukščiau aprašytu aminu (tirpalu 7 ml metileno chlorido), o po to benzotriazol--1-iloksitris (dimetilamino) fosfonio heksaf luorfosf atu ( 353 mg, 0,80 mmol). Tirpalas maišomas 0 °c temperatūroje 1 valandą, po to - kambario temperatūroje 2 valandas. Tirpiklis nugarinamas ir liekana purtoma su etilacetato ir 5% kalio bisulfato mi-šiniu. Organinis sluoksnis plaunamas iš eilės vandeniu, 50 % prisotintu natrio bikarbonatu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas, išvalius lie-kaną ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 1:1 - etilacetatas:heksanai), gaunama 272 mg baltų putų pavidalo gryno norimo produkto.

[0222] d) f4S- [" 4QC( R* ), 7a, 10af3]" T- Qktahidro- 4- {"( 2- merkapto- l- okso- 3-- f enilpropil) amino"]- 5- okso- 7H- piridoT 2 , 1- b fl, 3_ tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0223] Produkto iš (c) stadijos (227 mg, 0,49 mmol) kambario temperatūros tirpalas metanolyje (5 ml, iš kurio, leidžiant argoną, pašalintas deguonis) veikiamas 1 N natrio hidroksidu (8 ml, iš kurio, leidžiant argoną, pašalintas deguonis). Pa-maišius 1 valandą, mišinys rūgštinamas 10 % druskos rūgštimi, praskiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džio-vinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas. Gauta kieta medžiaga suspenduojama etilacetate ir nufiltruojama. Fil-ratas valomas ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 1 % acto rūgštis etilacetate), pageidaujamos frakcijos sumai-šomos, nugarinama ir trinama su etilacetatu/etilo eteriu, no-rint gauti papildomą kietos medžiagos kiekį. Kietos medžiagos sumaišomos ir gaunama iš viso 150 mg norimo produkto; lyd. temp. 216-217 °C (skyla). Plonasluoksnė chromatografija (2 % acto rūgštis etilacetate) R = 0,56; [ct] D = -72,6° (c = 0,28, dime-tilformamidas).

[0224] HPLC: YMC S3 ODS kolonėlė (6,0x150 mm); eliuuojama 40 % A: 90% vandens - 10% metanolio - 0,2% fosforo rūgšties ir 60 % B: 10% vandens - 90% metanolio - 0,2% fosforo rūg-šties; srovės greitis 1,5 ml/min,; detektuojama 220 nm banga; tR = 9,48 min (97,4%).

[0225] Analizė: išskaičiuota pagal C,„H_-.N_0.S₀.0,14 etilacetato: ^ ^ 19 24 2 4 2

[0226] 4 pavyzdys

[0227] [4S- Q}(X( R* ) , 7a, 9 £ B] ] -Oktahidro-4- £ ( 2-merkapto-l-okso-3-fenilpropil)amino] -5-oksopirol [ 2 ,1-b] [l ,3] oksazepin-7-karboksilo rūgštis

[0228] Į J-benzil-L-gliutamato (17,49 g, 73,70 mmol) tirpalą vandeniniame (180 ml) natrio karbonate (7,81 g, 73,70 mrnol) ir dioksane (120 ml) pridedama N-karbetoksiftalimido (16,50 g, 75,27 mmol, 1,02 ekv.). Pamaišius kambario temperatūroje 4,5 valandos, reakcijos mišinys rūgštinamas 6N druskos rūgšti-mi (30 ml) ir ekstrahuojama etilacetatu (2x400 .ml). Sumaišyti etilacetato ekstraktai plaunami 50 % druskos tirpalu (200 ml) , ir druskos tirpalu (200 ml), džiovinami natrio sulfatu, filtruojama, koncentruojama ir, išdžiovinus vakuume, gaunama nevalyta alyva (41,4 g). Į nevalytos liekanos tirpalą etilo eteryje (100 ml) pridedama dicikloheksilamino (14 ml)..Palaikius šaldytuve per naktį, etilo eteris nugarinamas rotoriniu garintuvu, o alyvinga liekana kristalinama iš etilacetato/heksano. Susidariusios nuosėdos nufiltruojamos, plaunamos heksanu ir, išdžiovinus vakuume, gaunama 21,21 g norimo junginio dicikloheksilamino druskos. Šios dicikloheksilamino druskos suspensija etilacetate (200 ml) plaunama 5 % kalio bisulfatu (3x50 ml), druskos tirpalu ir džiovinama magnio sulfatu; nufiltravus ir sukoncentravus, gaunama 13,5 g baltų putų pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija: (3% acto rūgšties 9:1 etilacetato:heptano mišinyje) R? = 0,30.

[0229] b) ( S)- 2- Ftalimido- 5- okso- 5-( fenilmetoksi) pentano rūgšties metilo esteris

[0230] Į (a) stadijos produkto (13,22g, 36,0 mmol) ir cezio karbonato (5,86 g, 18,0 mmol) tirpalą dimetilformamide (100 ml) pridedama jodmetano (8,1 ml, 129,6 mmol, 3,6 ekv.). Geltonas tirpalas maišomas 2,5 valandos, tada suplakamas su etilacetato (300 ml) ir vandens (250 ml) mišiniu- Etilacetato ekstraktas plaunamas 5% natrio bikarbonatu (200 ml) ir druskos tirpalu, džiovinama magnio sulfatu, filtruojama ir sukoncentravus,

[0231] gaunama 13,68 g geltonos alyvos. Liekana valoma chromatografuojant per 5x20 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 30% etilacetato tirpalu heksane. Reikiamos frakcijos sumaišomos ir sukoncentravus, gaunama 10,0 g norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (1:1, etilacetatas:heksanas) R = 0,45. c) ( S)- 2- Ftalimido- 4-( karboksi) butano rūgšties metilo esteris

[0232] Į (b) stadijos produkto (10,0 g, 26,22 mmol) tirpalą etilacetate (115 ml) pridedama 20 % paladžio hidroksidas ant anglies katalizatoriaus (1,90 g) ir gauta suspensija maišoma vandenilio atmosferoje (balionas) 2,5 valandos. Mišinys filtruojamas, kruopščiai perplaunama etilacetatu, koncentruojama ir išdžiovinus vakuume, gaunama 7,29 g baltos kietos medžiagos pavidalo nevalyto norimo produkto; lyd. temp. 137-138 °C. Plo-nasluoksnė chromatografija (10 % metanolis/metileno-chloride) R- = 0,43. d) ( S)- 2- Ftalimido- 5- okso- 5-( etiltio) pentano rūgšties metilo esteris

[0233] Į (c) stadijos produkto (7,27 g, 24,95 mmol) tirpalą metileno chloride (125 ml) 0 °C temperatūroje, argono atmosferoje pridedama etantiolio (4,81 ml, 64,92 mmol, 2,6 ekv.), 4-dimetilaminopiridino (609 mg, 4,99 mmol, 0,2 ekv.) ir etil--3-(3-dimetilamino)propilkarbodiimido hidrochlorido druskos (5,27 g, 27,47 mmol, 1,1 ekv.). Pamaišius 0 °C temperatūroje 2 valandas ir kambario temperatūroje 1 valandą, reakcijos mišinys sukoncentruojamas, praskiedžiamas etilacetatu 400 ml) ir plaunamas 5 % kalio bisulfatu (200 ml), sočiu natrio bikarbonatu (200 ml) ir druskos tirpalu (200 ml), džiovinamas natrio sulfatu, filtruojamas, koncentruojamas ir išdžiovinus vakuume, gaunama nevalytos alyvos pavidalo norimas produktas (8,30 g). Plonasluoksnė chromatografija (1:1, etilacetatas:heksanas) Rf = 0,47.

[0234] e) ( S)- 2- Ftalimido- 5- oksopentano rūgšties metilo esteris Į (d) stadijos produkto (8,30 g, 24,75 mmol) ir 10 %

[0235] paladžio ant anglies (1,24 g) suspensiją acetonitrile (150 ml) argono atmosferoje lašinamas trietilsilanas (7,91 ml, 49,5

[0236] mmol, 2 ekv.). Pamaišius kambario temperatūroje 45 minutes, mišinys filtruojamas, koncentruojamas ir džiovinamas vakuume. Nevalyta liekana gryninama, chromatografuojant per 5x25 cm silikagelio kolonėlą, kuri eliuuojama 25 I etilacetatu/heksane (4 1), po to 35 % etilacetatu/heksane (2 1). Reikia-^-mos frakcijos sumaišomos, ir gaunama 5,60 g norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (1:1, etilacetatas:heksanas) R- = = 0,32.

[0237] f) ( s)- 2- Ptalimido- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris Produkto iš (e) stadijos (5,60 g, 20,34 mmol) tirpalas metanolyje (60 ml) ir metileno chloride (40 ml) veikiamas trimetilortoformiatu (3,8 ml, 34,59 mmol, 1,7 ekv.) ir p-toluol-sulforūgšties monohidratu (280 mg). Pamaišius kambario tempe-ratūroje 1,5 valandos, reakcijos mišinys skaldomas 2 ml sotaus natrio bikarbonato, koncentruojamas ir plakamas su etilacetato (400 ml) ir vandens (100 ml) mišiniu. Etilacetato ekstraktas plaunamas sočiu natrio bikarbonatu (100 ml), druskos tirpalu (100 ml), džiovinamas magnio sulfatu, ir koncentruojamas, susidarant nevalytai alyvai. _Nevalyta liekana gryninama, chromatograf uo jant per silikagelio kolonėlą (5x20 cm), kuri eliuuojama 30% etilacetatu/heksane (2 1). Reikiamos frakcijos su-maišomos, koncentruojarnos ir išdžiovinus vakuume, gaunama 6,20 g norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (1:1, etilacetatas :heksanas) R_^ = 0,40.

[0238] g) ( S)- 2- Amino- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris

[0239] Produkto iš (f) stadijos (6,_'16 g-, 19,18 mmol) tirpalas metanolyje (125 m1} veikiamas hidrazino monohidratu (0,98 ml, 20,14 mmol, 1,05 ekv.). Pamaišius kambario temperatūroje 6 dienas, susidariusi suspensija filtruojama, koncentruojama, trinama metileno chloride, filtruojama, koncentruojama ir iš-džiovinus vakuume, gaunama 3,57 g vietomis drumstos alyvos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (10 % metanolis metileno chloride) R = 0,41.

[0240] h) Ls-( R*, R*)" Į- 2-[ f2- Ftalimido- 4- ( trifenilmetoksi ) - 1- oksobutil. amino į- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris

[0241] (S)-2-ftalimido-4-(trifenilmetoksi)butano rūgšties trietilamino druskos (gautos pagal l(b) pavyzdyje aprašytą meto-diką, 11,62 g, 19,60 mmol, 1,05 ekv.) tirpalas metileno chloride (100 ml) 0 °C temperatūroje veikiamas benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (8,67 g,

[0242] 19,60 mmol, 1,05 ekv.). Mišinys maišomas 45 minutes 0 °C tem-peratūroje, po to veikiamas (g) stadijos produkto (3,57 g,

[0243] 18,67 mmol) tirpalu metileno chloride (50 ml). Palaikius 10 minučių 0 °C temperatūroje ir 2 valandas kambario temperatū-roje, tirpalas suplakamas su etilacetato (300 ml) ir vandens (100 ml) mišiniu. Etilacetato sluoksnis plaunamas 50 % prisotintu natrio bikarbonatu (100 ml) ir druskos tirpalu (100 ml), džiovinamas magnio sulfatu, filtruojamas ir koncentruojamas. Liekana valoma, chromatografuojant per 5x25 cm silikagelio ko-lonėlę, kuri eliuuojama 1:1 etilacetatu/heksanu ir gaunama 8,58 g norimo produkto. Plonasluo.ksnė chromatografija (1:1, etilacetatas:heksanas) R_^ = 0,20.

[0244] i) fs-( R*, R*) l- 2- L( 2- Ftalimido- 4- hidroksi- l- oksobutil) amino!- 5 , 5- diraetoksipentano rūgšties metilo esteris

[0245] Produkto iš (h) stadijos ( 8, 58 gi2,91 mmol) tirpalas metanolyje (100 ml) veikiamas p-toluolsulforūgšties monohidratu (850 mg). Pamaišius kambario temperatūroje 3,5 valandos, mišinys suplakamas su etilacetato (200 ml) ir 10% prisotinto natrio bikarbonato (100 ml) mišiniu. Atskiriami sluoksniai ir vandeninis sluoksnis vėl ekstrahuojamas etilacetatu (100 mlj. Sumaišyti etilacetato ekstraktai plaunami druskos tirpalu, džiovinami magnio sulfatu, filtruojami ir koncentruojami. Liekana gryninama, chromatografuojant per 5x20 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 8:2 etilacetatu:heksanu (1 1), o po to 1%-niu metanoliu etilacetate (2 1). Reikiamos frakcijos su-maišomos, koncentruojamos ir išdžiovinus vakuume, gaunama 4,33

[0246] g norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (8:2 etilacetatas:heksanas) R_^ = 0,21.

[0247] j ) Į~ 4S — ( 4OC / lc< , 9aflĮj - Qktahidro - 4 - f talimido - 5 - oksopirol (" 2 , 1 - b Į - [~ 1 , 3 ~| ok5azepin - 7 - karboksilo rūgšties metilo esteris

[0248] Produkto iš ( i) stadijos ( 1, 89 g, 4, 48 mmol) tirpalas metileno chloride ( 90 ml) veikiamas jonitine derva Amberlyst^ ( 6) 15 ( 400 mg, prieš tai perplauta 6N druskos rūgštimi, vandeniu, tetrahiarofuranu ir metileno chloridu). Pamaišius kambario temperatūroje 3 valandas, tirpalas filtruojamas, koncentruojamas ir medžiaga valoma ekspres- chromatografi jos būdu per 5x15 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 6:4 etilacetatu:heksanu; gaunama 1, 51 g baltų putų pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija ( 8:2 etilacetatas:heksanas) Rf = 0, 32.

[0249] k ) [* 43 - ( 4c< - > 7ot , 9afi ) Į - 4 - Amino - oktahidro - 5 - oksopirol \ 2 , 1 - b ] fl , 3 ]-oksazepin - 7 - karboksilo rūgšties metilo esteris

[0250] Produktas iš ( j) stadijos ( 764 mg, 2, 13 mmol)" metanolyje ( 15 mi) veikiamas hidrazino monohidratu ( 109 | M1, 2, 24 mmol, 1, 05 ekv.) ir kambario temperatūroje tirpalas maišomas 4 dienas. Mišinys filtruojamas, o kieta medžiaga plaunama metanoliu. Filtratas koncentruojamas, liekana trinama su metileno chloridu, vėl filtruojama ir koncentruojama. Liekana gryninama, chromatografuojant per 2x15 cm silikagelio kolonėlę, ku-ri eliuuojama 3% metanoliu metileno chloride ( 3 1), po to 10% metanoliu metileno chloride ( 1 1). Reikiamos frakcijos sumai-šomos, koncentruojamos ir gaunama 451 mg alyvos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija ( 10 % metanolis metileno chloride) R- = 0, 18.

[0251] 1 ) f4S - į 4 ( X ,( R * ) , 7g , 9a0l Į - Oktahidro - 4 - [ T2 -( acetiltio ) - 1 - okso -- 3 - fenilpropilj amino ]- 5 - oksopirolĮ 2 , 1 - b Į [ l , 3joksazepin - 7 -- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0252] ( S)- 2- acetiltio- 3- benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druskos ( pagamintos pagal 1( h) pavyzdyje aprašytą meto-

[0253] diką, 870 mg, 2, 14 mmol, 1, 14 ekv.) suspensija etilacetate ( 70 ml) plaunama 5% kalio bisulfatu ( 5x20 ml), 50 % druskos tirpalu ( 20 ml) ir druskos tirpalu ( 20 ml), džiovinama ( bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, koncentruojama, per naktį džiovinama vakuume ir gaunama ( S)- 2- acetiltio) benzolpropano rūgštis.

[0254] Ši laisva rūgštis tirpinama sausame metileno chloride ( 10 ml), atšaldoma iki 0 °C ( ledo- druskos vonioje) ir veikiama trįetilaminu ( 298 ( Ml, 2, 14 mmol) , o po to ( k) stadijos produktu ( 430 mg, 1, 88 mmol) metileno chloride ( 10 ml) ir benzotriazol- l- iloksitris( dimetilamino) fosfonio heksafluorfosfatu ( 947 mg, 2, 14 mmol, 1, 14 ekv.). Gautas tirpalas mai-šomas 0 °C temperatūroje 50 minučių, po to kambario tempera-tūroje 3 valandas. Reakcijos mišinys koncentruojamas, praskie-džiamas etilacetatu ( 150 ml), plaunamas 0, 5 N druskos rūgšti-mi ( 50 ml), vandeniu ( 50 ml), sočiu natrio bikarbonatu ( 50 ml), vandeniu ( 50 ml) ir druskos tirpalu ( 50 ml) , džiovinamas ( bevandeniu magnio sulfatu), filtruojamas ir sausai nugarinamas. Nevalytas produktas adsorbuojamas ant Celite® ir chromatografuojamas per silikagelio kolonėlę ( 5x10 cm), eliuuojant 60 % etilacetatu/ heksane ( 3 1). Reikiamos frakcijos sumaišomos ir koncentruojamos; gaunama 779 mg gryno norimo produkto. Plona-sluoksnė chromatograma ( 6:4, etilacetatas:heksanas) R? = 0, 17.

[0255] m ) f4S - f4Q (.( R * ) , 7 (%, 9afl ] Į - Oktahidro - 4 - į ~( 2 - merkapto - l - okso - 3 -- fenilpropil ) amino ] - 5 - oksopirol [ 2 , 1 - b Į |_ 1 , 3 j oks . azepin - 7 - kar - boksilo rūgštis

[0256] Produkto iš ( 1) dtadijos ( 754 mg, 1, 74 mmol) tirpalas metanolyje ( 15 ml) valomas - leidžiant argoną 30 minučių, atšal-doma iki 0 °C ( ledo- druskos vonioje) ir tada į jį lašinama išvalytas ( argonas, 30 minučių) 1, 0 N natrio hidroksido ( 12

[0257] ml) tirpalas, leidžiant argono burbuliukus tol, kol sulašina-ma ir kol vykdoma reakcija. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 3 valandas, parūgštinamas iki 0 °C 5 % kalio bisulfatu iki pH 1 ir ekstrahuojamas etilacetatu ( 3x100 ml). Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami 50 % druskos tirpalu ( 100 ml), druskos tirpalu ( 100 ml), džiovinami ( bevandeniu natrio sulfatu), filtruojami, nugarinami iki sausos liekanos ir, išdžiovinus vakuume, gaunama baltos putos. Liekana valoma, chromatografuojant per 2, 5x15 cm silikagelio kolonėlę, eliuuojant etilacetatu ( 500 ml) ir 0, 3 % acto rūgštimi etilacetate ( 1 1). Reikiamos frakcijos koncentruojamos, tirpinama chloroforme ir per naktį džiovinama vakuume virš fosforo pentoksido; gaunamas baltų putų pavidalo norimas pcoduktas; lyd. temp. 88-92 °C; [o<I = -63,8° (c - 1,0, metanolis). Plonasluoksnė chromatografija (1% acto rūgštis etilacetate) R? = 0,24. ^H-B_MR: 400 MHz; CDCl_^rd 1,80-2,31 (m_~ai, 7H), 3,10 (m,lH), 3,27 (m,1H), 3,63 (m, 1H), 4,0 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,49 (m, iH), 4,75 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 7,19-7,30 (m-tai, 5H), 7,52 (d, 1H, J - 6 Hz). ¹³C-B_MR: 100 MHz; CDCl_^: 5 26,4, 32,0, 32,7, 41,2, 44,2, 53,0, 59,4, 70,6, 89,46, 126,9, 128,4, 129,3, 137,4, 171,2, 171,6, 174,8.

[0258]

[0259] 6x150 mm; 30 % B: A - 100 % B:A, 25 min tiesinis gradientas (A = 90% vandens/metanolio + 0,2 % fosforo rūgšties, B = 90% metanolio/vandens +0,2 % fosforo rūgšties), srovės greitis 1,5 ml/min.

[0260] [ j4S- [ 4( X( R*) , 7c*, 9aB] ] - oktahidro- 4- £ ( 2- mer. kapto- l- okso- 3- fenilpropil) amino]- 5- oksopirol[ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis ' a) rs-( R*, R*) Į- 2-[ p2- Ftalimido- 4-( acetiltio)- l- oksobutil")-amino Į- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris

[0261] 0 °C temperatūros trifenilfosfino (1,26 g, 4,79 mmol, 1,5 ekv.) tirpalas sausame tetrahidrofurane (15 ml) veikiamas diizopropilazodikarboksilatu (943 ^-tl, 4,79 mmol). Gauta balta suspensija maišoma 30 minučių, o tada veikiama £ s-(R*,R*)j-2-- ["( 2-f talimido-4-hidroksi-l-oksobutil) amino] -5 , 5-dimetoksipentano. rūgšties metilo esterio (gauto pagal 4(i) pavyzdyje apra-šytą metodiką, 1,35 g, 3,20 ml) tirpalu sausame tetrahidrofurane (15 ml), o po to gryna tioacto rūgštimi (343 jhI, 4,79 mmol). Mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 1,5 valandos ir tada suplakamas su etilacetato (150 ml) ir 50 % natrio bikarbonato (100 ml) mišiniu. Etilacetato sluoksnis plaunamas druskos tirpalu, džiovinamas magnio sulfatu, filtruojamas, koncentruojamas, adsorbuojamas ant Celite® ir džiovinamas vakuume. Nevalyta medžiaga gryninama, chromatografuojant per 2,5x15 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 1:1 etilacetatu:heksanu (1 1), ir 6:4 etilacetatu:heksanu (1 1). Reikiamos frakcijos sumaišo-mos, koncentruojamos ir, išdžiovinus vakuume, gaunama 1,35 g alyvos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (8:2, etilacetatas:heksanas) Rf = 0,42.

[0262] b) fs-( R*, R*)]- 2- Į( 2- Ftalimido- 4- merkapto- l- oksobutil) amino] -- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris

[0263] Produkto iš (a) stadijos (1,33 g, 2,76 mmol) tirpalas metanolyje (25 ml), per kurį burbuliuotas argonas deguonies pa-šalinimui, 0 °C temperatūroje veikiamas natrio metoksidu (25 svorio % metanolyje, 1,52 ml, 6,63 mmol, 2,4 ekv.). Po 3 minu-čių mišinys skaldomas sočiu amonio chloridu (3 ml), praskiedžia-mas vandeniu ir ekstrahuojamas etilacetatu (100 ml). Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu (50 ml) ir druskos tirpalu (50 ml), džiovinamas natrio sulfatu, filtruojamas ir koncentruojamas. Liekana gryninama, chromatografuojant per 5x15 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama iš pradžių 1:1 (3 1), po to 8:2 (2 1) etilacetato:heksano mišiniu. Reikiamos frakcijos, kuriose yra produktas, sumaišomos ir sukoncentravus, gaunama 853 mg alyvos pavidalo norimo junginio. Plonasluoksnė chromatografija (8:2, etilacetatas:heksanas) R_^ = 0,43.

[0264] c) L4S-( 4<*-, 7<x, 9afl) Į - Oktahidro- 4- f talimido- 5- oksopirol f2 , l- b~ f - fl, 3~ Į tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0265] Produkto iš (b) stadijos (847 mg, 1,93 mmol) tirpalas metileno chloride (20 ml) veikiamas jonitine derva Amberlyst(4R^ ) 15 (700 mg, kuri buvo prieš tai išplauta iš eilės 6N druskos rūgš-timi, vandeniu, tetrahidrofuranu ir metileno chloridu). Pamai-šius kambario temperatūroje 17 valandų, tirpalas filtruojamas, koncentruojamas ir valomas, panaudojant ekspres-chromatografi ją per 2,5x15 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 1:1 etilacetato : heksano mišiniu; gaunama baltų putų pavidalo norimas produktas (691 mg). Plonasluoksnė chromatografija (8:2 etilacetatas: heksanas) Rfc = 0,48.

[0266] d) f4S-( 4iX, 7<X, 9aD)] - 4- Aminooktahidro- 5- oksopirol Į 2, 1- b] [~ 1, 3] - tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0267] Produktas iš (c) stadijos (899 mg, 2,40 ramol) metanolyje (17 ml) veikiamas hidrazino monohidratu (122 j_Ml, 2,52 mmol, 1,05 ekv.) ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 3 dienas. Mišinys filtruojamas, o kieta medžiaga plaunama metanoliu. Filtratas koncentruojamas, trinamas su metileno chloridu, vlė filtruojamas, koncentruojamas ir, išdžiovinus vakuume, gaunama 572 mg vietomis drumstos alyvos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (10 % metanolio metileno chloride) R. = 0,13.

[0268] e) f4S- f4QC-( R* ) , 7( X, 9afiĮ] - Oktahidro- 4- ff2-( acetiltio)- l- okso- 3-- fenilpropil] amino]- 5- oksopirolf2, l- b | l, 3j tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0269] ( S)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druskos (gautos pagal l(h) pavyzdyje aprašytą metodiką, 1,045 g, 2,58 mmol, 1,1 ekv.) suspensija etilacetate (100 ml) - plaunama 5 % kalio bisulfatu (5x25 ml) , 50 % druskos tirpalu (25 ml) ir druskos tirpalu (25 ml) , džiovinama (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, koncentruojama ir, padžiovinus vakuume vieną valandą, gaunama (_S)-2-(acetiltio)-benzolpropano • rūgštis .

[0270] Si laisva rūgštis ištirpinama sausame metileno chloride (10 ml), atšaldoma iki 0 °C (ledo-druskos vonioje) ir veikiama trietilaminu (360 1, 2,58 mmol), benzotriazol-1-iloksitris (dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (1,141 g, 2,58 mmol), o po to (d) stadijos produkto (572 mg, 2,34 mmol) tirpalu metileno chloride (10 ml). Gautas tirpalas maišomas 0 °C temperatūroje 30 minučių, tada kambario temperatūroje 2,5 valandos. Reakcijos mišinys koncentruojamas, praskiedžiamas etilacetatu (100 ml) , plaunamas 0,5 N druskos rūgštimi (50 ml), vandeniu (50 ml) ir druskos tirpalu (50 ml), džiovinamas (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojamas ir sausai išgarinamas. Nevalytas produktas adsorbuojamas ant Celite^ ir chromatografuojamas per silikagelio kolonėlę (5x10 cm), eliuuojant 25% (5 1), 30% (2 1), 35% (2 1) ir 40% (2 1) etilacetatu/heksane. Mišrios frakcijos supila-mos kartu ir vėl chromatografuojama, eliuuojant tuo pačiu gra-dientu. Reikiamos frakcijos sumaišomos ir koncentruojamos ir gaunama 490 mg gryno norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (1:1, etilacetatas:heksanas) R_^ = 0,16.

[0271] f) [ 4S- Į_ 4CftJ[ R* ) , 7 ck , 9a fl] Į - Oktahidro- 4- f ( 2- merkapto- l- okso- 3-- f enilpropil) amino] - 5- oksopirol f2 , 1- bĮ [* 1 > 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0272] Produkto iš (e) stadijos (490 mg, 1,09 mmol) tirpalas me-tanoly je : tetrahidrof urane (8 ml:4 ml) valomas, leidžiant ar-goną, 30 min., atšaldomas iki 0 °C (ledo-druskos vonioje) ir tada į jį lašinamas išvalytas (argonas, 30 min.) 1,0 N natrio hidroksido tirpalas (10 ml), burbuliuojant argoną tol, kol su-lašinama ir kol vyksta reakcija. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 3 valandas, parūgštinama 0 °C temperatūro-je 5% kalio bisulfatu iki pH 2, ir ekstrahuojama etilacetatu (3x75 ml). Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami druskos tirpalu (75 ml), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir, išdžiovinus vakuume, gaunama 489 mg baltų putų. Liekana valoma, chromatografuojant per 2,5x15 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 9:1 etilacetatu:heptanu (1 1). Reikiamos frakcijos koncentruojamos, apdorojamos metilenocchloridu/heptanu ir, išdžiovinus vakuume, gaunama 428 mg produkto. Gryna medžiaga perkristalinama iš etilacetato/rnetanolio/heksano mišinio. Kristalai nufiltruoja-mi, kruopščiai perplaunami etilo eteriu ir per naktį džiovi-nami vakuume 40 °C temperatūroje virš fosforo pentoksido; gaunama 305 mg baltų kristalų pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 206-208 °C; [cc] D = -96,3° (c = 1,0, metanolis). Plona-sluoksnė chromatografija (5% acto rūgštis 9:1 etilacetato:heptano mišinyje) R_^ = 0,29.

[0273] ¹H-BMR: 400 MHz; CDC1₃ /2 lašai CD₃O_D: 5"l,94 (m, 1H), 2,02 (d, 1H, J * 9 _Hz), 2,08 (m, 1H), 2,20-2,55 (m-tai, 4H), 2,95 (m, 1H), 3,08 (m, 1H) , 3,23 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,59 (m,lH), 4,54 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 4,60 (m, 1H), 5,23 (m, 1H), 7,18-7,34 (m-tai, 5H), 7,63 (d, 1H, J = 6 Hz).

[0274] ⁱ³_C-B_MR: 100 MHz; CDC1₃ /2 lašai CD₃OD: O 27,6, 31,1, 32,1, 32,9, 41,1, 44,0, 52,8, 60,4, 62,2, 126,77, 128,3, 129,0, 137,4, 170,2, 171,4, 172,6.

[0275] Analizė: išskaičiuota pagal ci3H22N2°4S2 . 0, 08 H-jO:

[0276] HPLC: tD = 13,0 min (98,8%, UV 220); YMC S-3 ODS (C-18) 6x150 mm; 40%B:A -100%B:A, 25 min. tiesinis gradientas (A = 90% vandens/metanolyje + 0,2% fosforo rūgšties; B = 90% metanolio/vandenyje + 0,2% fosforo rūgšties); srovės greitis 1,5 ml/min.

[0277] 6 pavyzdys

[0278] [4S- [4(X( r* ), 7o<, 9aB) 3 ] - Oktahidro-4- f ( 2- raerkapto- l- okso- 3- f e-nilpropil) amino]- 5- oksopirol [ 2, 1- bJ [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0279] Į L-homosėrino (10,24 G, 85,98 mmol) ir natrio bikarbonato (7,95 g, 94, 58 mmol, 1,1 ekv.) tirpalą vandens (100 ml) ic acetono (100 ml) mišinyje pridedama N-(benziloksikarboniloksi)-sukcinimido (23,57 g, 94,58 mmol). Mišinys maišomas kambario temperatūroje per nakt|• Sumažintame slėgyje nugarinamas ace-tonas (rotoriniu garintuvu), o vandeninis tirpalas plaunamas metileno chloridu (2x75 ml). Tada vandeninis sluoksnis parūg-štnamas iki pH 2, pridedant 6N druskos rūgšties, ir ekstrahuojamas etilacetatu (2x250 ml) . Sumaišyti etilacetato sluoksniai plaunami vandeniu (2x100 ml) ir druskos tirpalu, džiovi-nami natrio sulfatu, filtruojama, koncentruojama ir, išdžio-vinus vakuume, gaunama 19,54 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija (etilacetatas:n-butanolis:acto rūgštis:vanduo; 2:1:1:1) R„ r = 0,74.

[0280] Į ( a) stadijos produkto ( 19, 51 g, 77, 04 mmol) suspensiją chloroforme ( 250 rnl) pridedama trietilamino ( 12, 35 ml, 88, 59 mmol, 1, 15 ekv.). Homogeninis mišinys veikiamas trifenilmetil-chloridu ( 24, 70 g, 88, 59 mmol) ir maišoma 3 valandas. Reakcijos mišinys koncentruojamas sumažintame slėgyje ( rotoriniu garintuvu), suplakama su etilacetato ( 400 ml) ir 5 % kalio bisulfato ( 200 ml) mišiniu, etilacetato sluoksnis plaunamas 5% kalio bisulfatu ( 200 ml), vandeniu ( 2x200 ml) ir druskos tirpalu, džiovinamas natrio sulfatu, filtruojamas ir sukoncentravus, gaunama 45. 4 g medžiagos. Liekana chromątografuojama per 10x30 cm silikagelio kolonėlę, eliuuojant 6:4 etilacetatu:heksanu ( 2 1), po to 1 % acto rūgštimi 8:2 etilacetato:heksano mi-šinyje ir gaunama 8, 76 g gryno norimo produkto.

[0281] ( S)- 2- Ftalimido- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris ( pagamintas pagal 4( f) pavyzdyje aprašytą metodiką, 3, 35 g, 10, 43 mmol) metanolyje ( 70 ml) veikiamas- hiarazinc monohidratu ( 531 y\ l, 10, 95 mmol, 1, 05 ekv.) ir tirpalas maišomas kambario temperatūroje 6 dienas. Mišinys nufiltruojamas ir nuosėdos plaunamos metanoliu. Filtratas koncentruojamas, liekana trinama su metileno chloridu, vėl filtruojama, koncentruojama ir išdžio-vinus vakuume, gaunama 1, 89 g vietomis drumstos alyvos pavidalo norimo produkto. Plonasluoksnė chromatografija ( 10 % metanolis metileno chloride) R = 0, 39.

[0282] Produkto iš ( b) stadijos ( 5, 28 g, 10, 65 mmol, 1, 1 ekv. J tirpalas sausame metileno chloride ( 50 ml) 0 °C temperatūroje veikiamas trietilaminu ( 1, 48 ml, 10, 65 mmol), o po to ( c) stadijos produktu ( 1, 85 g, 9, 68 mmol) sausame metileno chloride ( 30 ml) ir benzotriazol- l- iloksitris( dimetilamino) fosfonio heksafluorfosfatu ( 4, 71 g, 10, 65 mmol, 1, 1 ekv.). Mišinys maišomas 1 vai. O °C temperatūroje, po to kambario temperatūroje 2 valandas. Reakcijos mišinys suplakamas su etilacetato (300 ml) ir vandens t i50 ml) mišiniu. Etilacetato sluoksnis plaunamas 50 % prisotintu natrio bikarbonatu (200 ml) ir druskos tirpalu (2 x 200 ml), džiovinamas magnio sulfatu, filtruojamas, koncentruojamas, adsorbuojamas ant Celite^ ir valomas, chromatografuojant per 7x20 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 40% etilacetatu/heksane (3 1), po to 50% etilacetatu/heksane (2 1)

[0283] ir gaunama 4,84 g norimo junginio. TL.C (etilacetatas: heksanas, 1:1) R - 0, 22.

[0284] Produkto iš (d) stadijos (4,80 g, 7,18 mmol) tirpalas metanolyje (70 ml) veikiamas p-toluolsulforūgšties monohidratu (300 mg). Pamaišius kambario temperatūroje 2 valandas, miši-nys suplakamas su etilacetato ( 400 ml) ir 25 % prisotinto natrio bikarbonato (200 ml) mišiniu. Atskiriamos fazės ir vandeninis sluoksnis vėl ekstrahuojamas etilacetatu (100 ml) . Su-maišyti etilacetato ekstraktai plaunami druskos tirpalu, džio-vinami magnio sulfatu, filtruojami ir koncentruojami. Liekana valoma, chromatografuojant per silikagelio kolonėlę (5x20 cm), kuri eliuuojama 7:3 (1 1) etilacetatu:heksanu, 8:2 (1 1) etilacetatu:heksanu ir po to 10 % metanoliu etilacetate (2 1). Reikiamos frakcijos sumaišomos, koncentruojamos ir, išdžio-vinus vakuume, gaunama 2,92 g norimo produkto. TLC (etilacetatas : heksanas , 8:2) R? = 0,09.

[0285] f) | S-( R*, R*)|- 2-["| 2- j"["( Fenilmetoksi ) karbonil] amino] - 4- ące-tiltio)- l- oksobutil] amino]- 5, 5- dimetoksipentano rūgšties metilo esteris

[0286] 0 °C temperatūros trifenilfosfino (3,06 g, 11,65 mmol, 1,7 ekv.) tirpalas sausame tetrahidrofurane (40 ml) veikiamas diizopropilazodikarboksilatu (2,29 ml, 11,65 mmol). Susidariusi balta suspensija maišoma 30 minučių, po to veikiama (e) stadijos produkto (2,92 g, 6,85 mmol) tirpalu sausame tetrahidrofurane ir tada tioacto rūgštimi (833 j^l, 11,65 mmol). Mi-šinys maišomas 0 °C temperatūroje 2 valandas, po to plakamas su etilacetato (300 ml) ir 50 % natrio bikarbonato (200 ml) mi-šiniu. Etilacetato sluoksnis plaunamas druskos tirpalu, džio-vinamas magnio sulfatu, filtruojamas, koncentruojamas, adsorbuojama ant Celite ( K) ir ' džiovinama vakuume. Nevalyta medžiaga gryninama, chromatografuojant per 5x20 cm silikagelio kolonė-lą, kuri eliuuojama 1:1 etilacetatu:heksanu (3 1). Reikiamos frakcijos sumaišomos, koncentruojamos ir, išdžiovinus vakuume, gaunama nebaltos kietos medžiagos pavidalo norimas produktas (2,58 g). TLC (etilacetatas:heksanas, 8:2) R? = 0,40.

[0287] Produkto iš (c) stacijos (2,56 g, 5,28 mmol) tirpalas metanolyje (50 ml), iš kurio, pašalintas deguonis (burbuliuojant azotą), 0 °C temperatūroje veikiamas natrio metoksidu (25 svorio % metanolyje, 3,62 ml, 16,84 mmol, 3 ekv.). Po 10 minučių mišinys skaldomas sočiu amonio chloridu (40 ml), pra-skiedžiamas vandeniu (100 ml) ir ekstrahuojamas etilacetatu (300 ml). Etilacetato ekstraktas plaunamas vandeniu (100 ml)

[0288] ir druskos tirpalu (150 ml), džiovinamas magnio sulfatu, filtruojamas ir koncentruojamas. Liekana valoma, chromatografuojant per 5x20 cm silikagelio kolonėlą, kuri eliuuojama 1:1 etilacetatu:heksanu (3 1). Reikiamos frakcijos sumaišomos ir koncentruojama; susidaro 1,99 g alyvos pavidalo norimo junginio. TLC (etilacetatas:heksanas, 8:2) R_^ = 0,43.

[0289] Produkto iš (g) stadijos 12,16 g, 4,88 mmol) tirpalas metileno chloride (50 ml) veikiamas jonitine derva Amberlyst^® 15 (620 mg, kuri prieš tai buvo išplauta iš eilės 6N druskos rūgštimi, vandeniu, tetrahidrofuranu ir metileno chloridu). Pamaišius kambario temperatūroje 3 valandas, tirpalas filtruojamas, koncentruojamas ir valomas ekspres-chromatografi jos būdu oer 5x20 cm silikaaelio kolonėle, kuri eliuuoiama 6:4 etilacetatu:heksanu ir gaunama 1,34 g baltų putų pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 8:2) R_^ = 0,51.

[0290] i) | 4S-( 4c<-, 7cC, 9af3) 1 - 4- Ą[ ninooktahidro- 5- oksopirol f~ 2 , l- b] fl, 3] - tiazspin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0291] Produkto iš (h) stadijos (1,20 g, 3,17 mmol, tris kartus . apdorotas toluolu ir per naktį išdžiovintas vakuume) tirpalas sausame metileno chloride (40 ml) veikiamas jodtrimetilsilanu ( 632 ^tl, 4,44 mmol, 1,4 ekv.) ir maišoma kambario temperatūro-je ir argono atmosferoje 1,5 valandos. Mišinys skaldomas vandeniu (50 ml), veikiamas 10% druskos rūgštimi (5 ml, pH 1) ir plaunamas etilacetatu (50 ml). Vandeninis sluoksnis veikiamas 10 % natric hidroksidu ir ekstrahuojamas metileno chloridu (tris kartus). Sumaišyti ekstraktai džiovinami natrio sulfatu, filtruojama, koncentruojama ir, išdžiovinus vakuume, gaunama 396 mg skaidrios alyvos pavidalo norimo produkto. TLC (10 % metanolis metileno chloride) R? = 0,10.

[0292] j ) Į 4S- j 4c<.( R* ) , 7<*., 9aOĮ1 - Oktahidro- 4- Į ( 2- merkaūto- l- okso- 3- fenilpropil) amino] - 5- oksopirol[ 2, l- bĮ f 3- ^ 3j tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0293] (S)-2-(acetiltio)ben₂0lpropano rūgšties tirpalas sausame metileno chloride veikiamas trietilaminu. Tada pridedamas (i) stadijos produkto metileno chloride tirpalas, d po to benzotriazol-l-iloksitris(dimeti lamino)fosfonio heksafluorfosfa-

[0294] tas. Apdorojus gautą tirpalą pagal 5(e) pavyzdyje aprašytą me-todiką gaunamas [4S - [_4oc(R* ) , lot, 9aG_~] ] -oktahidro-4 - [ [2- (.acetiltio) -l-okso-3-f enilpropilį amino] - 5-oksopirol"[2,1-b] [l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esteris.

[0295] Sio metilo esterio suspensija metanolio:tetrahidrofurano mišinyje, per kurią buvo leistas argonas, atšaldoma iki 0 °C

[0296] ir veikiama anksčiau išvalytu 1,0 N natrio hidroksido tirpalu. Apdorojus pagal 5{f) pavyzdyje aprašytą metodiką, gaunamas norimas produktas .

[0297] 7 pavyzdys

[0298] [ 4S-[ 40(( R* ) , 7<X, 9afl] J- Oktahidro- 4-[( 3- cikloheksil- 2- merkapto-- 1- oksopropil) amino]- 5- oksopirol [ 2, 1- b][ l, 3}- tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0299] a) f 4S-( 4<*, 9aB ) Į- 4- Amino- oktahidro- 5- oksopirol |~ 2 , 1- b Į [" 1, 3* 1-tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esterio p- toiuolsulfo-rūgšties druska

[0300] [4S-(4pč,7cx,9al3)] -Oktahidro- 4- [ [( f enilmetoksi ) karbonil] - amino]-5-oksopirol[2,l-b]_ [l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio (pagaminto pagal 6(h) pavyzdyje aprašytą metodi-ką, 738 mg, 1,95 mmol, tris kartus apdorotas toluolu ir džio-vintas per naktį) tirpalas sausame metileno chloride (25 ml) veikiamas jodtrimetilsilanu (339 įu1, 2, 13 mmol, 1,4 ekv.) ir

[0301] maišoma kambario temperatūroje argono atmosferoje. Po 2 valandų į reakcijos mišinį pridedamas papildomas jodtrimetilsilano kiekis (40 j*l) ir maišoma 30 minučių. Mišinys skaldomas 0,4 M druskos rūgšties tirpalu metanolio: dioksano mišinyje (9:1, 9,7

[0302] ml) ir maišoma 5 minutes. Lakios medžiagos nugarinamos vakuume (rotoriniu garintuvu), o liekana suplakama su vandens ir etilacetato mišiniu. Atskirtas etilacetato sluoksnis plaunamas vandeniu, o sumaišyti vandeniniai sluoksniai plaunami etilacetatu. Vandeninė fazė atšaldoma iki 0 °C ir su 1,0 N natrio hidroksidu nustatomas pH 10,3 (kontroliuojama pH-metru). Van-deninė fazė ekstrahuojama metileno chloridu (tris kartus), ta-da vandeninė fazė prisotinama druska ir vėl ekstrahuojama metileno chloridu (tris kartus). Sumaišyti ekstraktai džiovina-mi natrio sulfatu, filtruojama, koncentruojama ir išdžiovinus vakuume, gaunama 455 mg skaidrios alyvos pavidalo laisvo amino. T\LC (10 % metanolis metileno chloride) R? = 0,28.

[0303] Šis laisvas aminas ištirpinamas etilacetate (5 ml) ir veikiamas p-toiuolsulforūgšties monohidrato (354 mg, 1 ekv.) tirpaiu etilacetate (1 ml). Tuoj pat susidaro balti kristalai. Kristalai palaikomi šaldytuve (5 °C) 30 minučių, nufiltruoja-mi, gerai perplaunami etilo eteriu ir džiovinami per naktį vakuume; gaunama 639 mg baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto.

[0304] b) ( S)- 2-( Acetiltio)- 3- cikloheksilpropano rūgšties diciklo-neltsilamino druska

[0305] Par D-fenilalanino (5,20 g, 31,5 mmol) tirpalą 2 M druskos rūgštyje, supiltą į Paro hidrinimo kolbą, praleista azoto dujos, po to pridėta platinos oksido (640 mg, 2,82 mmol). Hia-rinimas pradėtas esant Pq = 42,4 psi užlydytoje kolboje, ku-

[0306] ri, esant reikalui, papildoma. Bendras vandenilio sunaudojimas buvo 83,4 psi (teoriškai 83,8 psi) per 6 valandas. Per reakcijos mišinį perleistas dujinis azotas ir filtruojama per Celite @, o nuosėdos ant filtro plaunamos karštu vandeniu. Filtratas koncentruojamas maždaug iki 40 ml ir laikomas per naktį 5 °C temperatūroje. Susidariusios kietos medžiagos surenkamos, plaunama mažu kiekiu šalto vandsns ir išdžiovinus vakuume 60 °C temperatūroje, gaunama 5,46 g (R)-2-amino-3-cikloheks ilpropa-no rūgšties hidrochlorido.

[0307] Į maišomą.šio hidrochlorido (2,81 g, 13,5 mmol) tirpalą 2,5 N sieros rūgštyje (32 ml) kambario temperatūroje pridedama kalio bromido (10,0 g, 84 mmol). Reakcijos mišinys atšaldo-mas iki -4 °C ir, palaikant temperatūrą žemiau 0 °C, per vieną valandą dalimis pridedama kieto natrio nitrito (1,75 g, 25,4 mmol). Iš reakcijos indo rūksta dūmai ir pradeda darytis alyva. Pabaigus dėti natrio nitritą, reakcijos mišinys maišomas 1 va-landą, sušildomas iki kambario temperatūros ir maišoma dar vie-ną valandą. Tada mišinys ekstrahuojamas du kartus eteriu, ekstraktai džiovinami (magnio sulfatu), filtruojama ir nugarinus gaunama 2,3 g bespalvės alyvos pavidalo (R)-2-brom-3-cikloheksilpropano rūgšties.

[0308] Į maišomą kalio tioacetato (1,07 g, 9,36 mmol) suspensiją sausame acetonitrile (15 ml.) 0 °C temperatūroje ir argono atmosferoje per 10 minučių supilamas (_R)-2-brom-3-cikloheksilpropano rūgšties (2,20 g, 9,36 mmol) tirpalas acetonitrile (3 ml) . Reakcijos mišinys sušildomas iki kambario temperatūros ir mai-šoma 16 valandų. Susidariusi suspensija nufiltruojama ir nugarinama. Liekana ištirpinama etilacetate, plaunama vieną sykį

[0309] 5% kalio bisulfato tirpalu, džiovinama (natrio sulfatu) ir nugarinama. Geltona alyvos pavidalo liekana (2,21 g) ištirpina-

[0310] ma eteryje ir veikiama dicikloheksilamino (1,8 ml, 9,0 mmol) tirpalu 5 ml eterio. Trinant kobos paviršių stikline lazde-

[0311] le, gaunama 2,38 g baito kristalinio norimo produkto; lyd. temp. 159-161 °C, [<X] = -41,2° (c = 1,0, chloroformas). Analizė: išskaičiuota pagal C^H^NSO^: C 67,11 H 10,04 N 3,40 S 7,79;

[0312] rasta: C 66,95 H 10,12 N 3,25 S 7,89.

[0313] c) f 4 S — j 4 CX.( R * ) , 7ęx, 9afl~ l~[ - Oktahidro- 4- f r2 -( acetiltio)- 3- ciklp-heksil- l- oksopropil] amino] - 5- oksopiroir2, l- bĮ p., 3] tiazepin- 7-- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0314] (S)-2-(acetiltio)-3-cikloheksilpropano rūgšties dicikloheksilamino druskos (285 mg, 0,69 mraol, 1,05 ekv.) suspensi-

[0315] ja etilacetate (15 ml) plaunama 5% kalio bisulfatu (3x10 ml), 50 % druskos tirpalu (10 ml) ir druskos tirpalu (10 ml), džio-vinama (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojama, koncentruojama, apdorojama metileno chloridu (du kartus) ir padžiovinus vakuume vieną valandą, gaunama alyvos pavidalo (S)-2-acetiltio--3-cikloheksilpropano rūgštis.

[0316] Ši laisva rūgštis tirpinama sausame metileno chloride (5 ml), atšaldoma iki 0 °C (ledo vonia) ir veikiama trietilaminu (96 _^zl, 0,69 mmol, 1,05 ekv.) ir pagaliau benzotriazo 1-1-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (305 mg, 0,69 mmol). Gautas tirpalas maišomas 0 O C temperatū—roje 1 valandą, po to kambario temperatūroje 2 valandas. Reakcijos mišinys koncentruojamas, praskiedžiamas etilacetatu, plaunamas 5% kalio bisulfatu (20 ml), 50 % prisotintu natrio bikarbonatu (20 ml) , druskos tirpalu (20 ml), džiovinamas (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojamas ir sausai nugarinamas. Nevalytas pro-(JO

[0317] dūktas adsorbuojamas ant Celite ir chromatografuojamas per silikagelio kolonėlę (2,5x10 cm), kuri eliuuojama 40% (1 1) etilacetatu/heksane. Reikiamos frakcijos sumaišomos ir sukoncentravus gaunama 246 mg švaraus norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 8:2) R_^ = 0,53.

[0318] d) Į 4S - Į 4cX( R* ) , 1ql , 9aQ~ j J - Oktahidro- 4- f ( 3- cikloheksil- 2- merkapto- l- oksopropil) aminol- 5- oksopirolf2>2~ bl [~ l/ 3~[ tiazepin-- 7- karboksilo rūgštis

[0319] Į (c) stadijos produkto (245 mg, 0,54 mmol) tirpalą metanolyje (6 ml), per kurį.30 min. leistas argonas, atšaldytą iki 0 °C temperatūros,lašinamas 1,0 N natrio hidroksido, per ku-

[0320] rį leistas argonas (30 minučių), tirpalas (5 ml) , burbuliuojant argoną tol, kol baigiama lašinti ir kol vykdoma reakcija. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 2 valandas, pa-rūgštinamas 0 °C temperatūroje 5% kalio bisulfatu iki pH 2 ir ekstrahuojamas etilacetatu (3x20 ml) . Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami 50 % druskos tirpalu (20 ml) ir druskos tirpalu (20 ml), džiovinami (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojama ir sausai nugarinama- Liekana chromatografuojama per 2,5x10 cm silikagelio kolonėlę, eliuuojant 7:3 etilacetatu:hep-tanu (300 ml) ir 1% acto rūgštimi 7:3 etilacetato:heptano mi-šinyje (500 ml). Reikiamos frakcijos koncentruojamos, apdoro-

[0321] jama metileno chloridu ir išdžiovinus vakuume, gaunama 172 mg baltų putų pavidalo norimo produkto; jcx] = -116,9° (c = 0,5, metanolis). ILC (1% acto rūgštis etilacetate) Rc = 0,35.

[0322] L ¹H-BMR: 400 MHz; CDC1₃: O 0,91 (m, 2H), 1,22 (m, 3H), 1,44 (m, 1H), 1,55 (m, 1H), 1,68 (m, 5H), 1,83 (m, 1H), 1,97 (m, 2H), 2,12 (m, 1H), 2,19-2,40 (m-tai, 3_H), 2,53 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 3,33 (m-tai, 2H), 4,62 (t, 1H, _J=₅,_{8 Hz}), 4,70 (m, 1H), 5,25 (m, 1H), 7,55 (d, 1H, J=6,4 Hz).

[0323] 1JC-BMR: 100 MHz; CDC1₃: O 26,0, 25,1, 27,5, 31,5, 32,3, 33,0, 33,3, 35,2, 40,7, 43,0, 52,9, 60,6, 62,5, 170,9, 172,7, 175,3. Analizė: išskaičiuota: pagal C. oH_oNn0.S_: ±o Zo Z 4 Z C 53,98 H 7,05 N 6,99 S 16,01; rasta: C 53,97 H 7,18 N 6,84 S 15,75. HPLC: tR = 16 min ( 99%, UV 217); YMC S-3 ODS (C-18) 6x150

[0324] mm; 50% B:A - 100% B:A, 25 min. tiesinis gradientas (A = 90 %

[0325] vandens/metanolyje + 0,2 % fosforo rūgšties; B = 90 % metanolio/vandenyje + 0,2 % fosforo rūgšties); srovės greitis apie 1,5 ml/min.

[0326] 8 pavyzdys

[0327] [ 4S- [ 4<X( R*) , loC , 9afi] ] - Oktahidro- 4- £ ( 2- merkapto- l- oksoheksil) - amino]- 5- oksopirol[ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0328] Į maišomą D-norleucino (5,0 g, 33 mmol) tirpalą 2,5 N sieros rūgštyje (77 tnl) kambario temperatūroje pridedama kalio bromido (15,9 g, 133 mmol). Reakcijos mišinys atšaldomas iki -10 °C ir, palaikant temperatūrą tarp -10 °C ir -5 °C, dalimis pridedama kieto natrio nitrito (3,94 g, 57 mmol). Bai-gus dėti natrio nitritą, rūkstantis reakcijos mišinys maišo-mas 1 valandą, sušildomas iki kambario temperatūros ir maišo-mas dar vieną valandą. Tada reakcijos mišinys ekstrahuojamas du kartus eteriu, eteriniai ekstraktai vieną kartą plaunami vandeniu, džiovinami (magnio sulfatu), filtruojami ir nugarinus, gaunama 3,3 g nevalyto norimo produkto.

[0329] Į maišomą kalio tioacetato (2,11 g, 18,5 mmol) suspensiją 50 ml sauso acetonitrilo kambario temperatūroje ir argono atmosferoje pridedamas (a) stadijos produkto (3,27 g, 16,8 mmol) tirpalas 26 ml acetonitrilo. Reakcijos mišinys maišomas 5 valandas. Gauta suspensija filtruojama ir nugarinama. Liekana ištirpinama etilo eteryje, vieną kartą plaunama 5% kalio bisulfato tirpalu ir vieną kartą druskos tirpalu, džiovinama (magnio sulfatu) ir nugarinama. Liekana ištirpinama eteryje (64 ml) ir veikiama dicikloheksilaminu (3,4 ml, 16,8 mmol). Eterinis tirpalas koncentruojamas vakuume ir trinant su heksanu gaunama balta kieta medžiaga, kurią perkristalinus iš etilo eterio/heksano, gaunamas norimas produktas. Nuovarvų skystis koncentruojamas ir perkristalinus du kartus, bendra norimo produkto išeiga yra 2,2 g; lyd. temp. 145-146 °C; [c^*-] = = -33,8° (c = 1,08, chloroformas).

[0330] c) f4S- Į 4ft( R*) , 7# ;, 9afl~ lĮ - Oktahidro- 4 - Į" f2- ( acetiltio)- 1- okso-heksilĮ amino] - 5- oksopirol f 2 , 1— bĮ [* 1, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0331] Dicikloheksilamino druskos iš (b) stadijos (255 mg, 0,69 mmol, 1,05 ekv.) suspensija etilacetate (15 ml) plaunama 5% kalio bisulfatu (3x5 ml) ir druskos tirpalu (10 ml), džiovina-ma (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojama, koncentruojama, apdorojama metileno chloridu (du kartus) ir padžiovinus vakuume vieną valandą, gaunama alyvos pavidalo laisva rūgštis.

[0332] Ši alyva tirpinama sausame metileno chloride (6 -ml), at-šaldoma iki 0 °C (ledo vonia) ir veikiama trietilaminu (96 ^nl, 0,69 mraol, 1,05 ekv.), po to [4S-( 40C, 7ot, 9afi ) ]-4-amino-okta'nid-ro-5-oksopirdl |_2 ,1-b] [l, 3^J tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio p-toluolsulforūgšties druska (pagaminta pagal 7(a) pavyzdyje aprašytą metodiką, 275 mg, 0,66 mmol), trietilaminu (92 _Įil, 0,66 mmol) ir galiausiai benzotriazol-l-iloksitris-(dimetilaminofosfonio heksafluorfosfatu (305 mg, 0,69 mmol). Gautas tirpalas maišomas 0 °C temperatūroje vieną valandą, po to kambario temperatūroje - 2 valandas. Reakcijos mišinys koncentruojamas, praskiedžiamas etilacetatu, plaunamas 5% kalio bisulfatu (20 ml), 50 % prisotintu natrio bikarbonatu (20 ml) , druskos tirpalu (20 ml), džiovinamas (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojamas ir sausai nugarinamas. Nevalytas produktas adsorbuojamas ant Celite(^ K) ir chrcmatografuojamas per silikagelio kolonėlę (2,5x10 cm), eliuuojant 40 % etilacetatu/heksane (1 1). Reikiamos frakcijos sumaišomos, koncentruojamos ir gaunama 258 mg gryno norimo produkto. _TLC (etilacetatas:heksanas, 8:2) Rf = 0,54.

[0333] d) |" 4S - Į. 4pc( R* ) > 7cx, 9afi" Į Į - Oktahidro- 4- £ ( 2- merkapto- l- oksoheksil) - amino j- 5- oksopirol f2 , 1- b Į [~ 1, 3~] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0334] Į (c) stadijos produkto (255 mg, 0,54 mmol) tirpalą metanolyje (5 ml), per kurį 30 minučių buvo leistas argonas, at-šaldytą iki 0 °C, lašinamas 1,0 N natrio hidroksido tirpalas (5 ml) , i kurį taip pat buvo leistas argonas (30 minučių), burbuliuojant argoną tol,kol sulašinama ir kol vykdoma reakcija. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 2 valandas, parūgštinamas 0 °C temperatūroje 5 % kalio bisulfatu iki pH 2 ir ekstrahuojamas etilacetatu (3x20 ml) . Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami 50 % prisotintu druskos tirpalu (20 ml) , ir druskos tirpalu (20 ml), džiovinami (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojami ir sausai nugarinami. Liekana valoma chromatografuojant per 2,5x10 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 7:3 etilacetatu:heptanu (300 ml) ir 1 % acto rūgšti-mi 7:3 etilacetato:heptano mišinyje (500 ml). Reikiamos frakcijos koncentruojamos, apdorojama metileno chloridu ir iš-džiovinus vakuume, gaunama 170 mg baltų putų pavidalo norimo

[0335] produkto; [<%] = -135,1° (c = 0,5, metanolis). TLC (1% acto rūgštis etilacetate) R_^ = 0,32.

[0336] ¹H-BMR: 400 MHz, CDC1₃: 5 0,89 (t, 3H, J=7 Hz), 1,32 (m, 4H), 1,73 (m, 1H), 1,96 (m, 2H), 2,00 (d, IK, J=8,6 Hz), 2,11 (m, 1H), 2,32 (ra-tai, 3H), 2,52 (m, 1H), 2,98 (m, 1H), 3,32 (m-tai, 2H), 4,61 (t, 1H, J=7,1 Ha), 4,72 (m, 1H) , 5,25 (m, 1H), 7,63 (d, 1H, J=6,4 Hz).

[0337] ¹³C-BMR: 100 MHz; CDC1₃: S 13,8, 22,2, 27,6, 29,2, 31,4, 32,6, 33,1, 35,3, 43,0, 52,8, 60,5, 62,42, 170,7, 172,5, 174,0.

[0338] Analizė: išskaičiuota pagal C, ,-H_ .0 .N „S-0. 0 , 08 H_~0: r r 15 24 4 4 2 2

[0339] 9 pavyzdys

[0340] [ 4S- [ 40H R * ),!&., 9aflJ] - Oktahidro- 4- [( 2- merkapto-l- okso- 4- metil-pentil] amino] - 5- oksopirol [ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0341] Į maišomą D-leucino (3,0 g, "23 mmol) tirpalą 2,5 N sieros rūgštyje (47 ml) kambario temperatūroje pridedama kalio bromido (9,5 g, 80 mmol). Reakcijos mišinys atšaldomas iki -10 °c ir, palaikant temperatūrą tarp -10 °C ir -5 °C, dalimis pridedama kieto natrio nitrito (2,4 g, 34 mmol). Sudėjus natrio nitritą, reakcijos mišinys maišomas 1 valandą, sušil-domas iki kambario temperatūros ir maišoma dar vieną valandą. Tada reakcijos mišinys ekstrahuojamas du kartus eteriu, eteriniai ekstraktai vieną kartą plaunami vandeniu, džiovinami (magnio sulfatu), filtruojami ir nugarinus, gaunama 2,7 g nevalyto norimo produkto.

[0342] Į maišomą kalio tioacetato (1,7 g, 15,0 mmol) suspensiją 50 ml sauso acetonitrilo kambario temperatūroje ir argono atmosferoje supilamas produkto iš (a) stadijos (2,6 g, 13 mmol) tirpalas 17 ml acetonitrilo. Reakcijos mišinys maišmas 4 valandas. Susidariusi suspensija filtruojama ir nugarinama. Liekana ištirpinama etilo eteryje, plaunama vieną kartą 5% kalio hidrosulfato tirpalu ir vieną kartą druskos tirpalu, džiovina-ma (magnio sulfatu) ir nugarinama. Liekana ištirpinama eteryje (64 ml) ir veikiama cicikloheksilaminu (2,7 ml, 14 mmol). iš tirpalo tuoj pat pradeda kristi balta kieta medžiaga. Tirpalas nufiltruojamas, kieta medžiaga surenkama ir gaunama 2,0 g norimo produkto; lyd. temp. 153-158 °C; = -54,5 °:(c = 0,61, chloroformas).

[0343] c) f4S-| 4cC( R*), 7cx, 9a/ 3] l - Oktahidro- 4- [[ 2-( acetiltio) - 1- okso-- 4- metilpentil] amino] - 5- oksopirol f2, 1 - b fl, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0344] Maišoma (b) stadijos dicikloheksilamino druskos (234 mg, 0,63 mmol) suspensija etilacetate (15 ml) plaunama 5% vandeniniu kalio bisulfatu (3x5 ml). Organinis ekstraktas džiovi-namas (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojamas ir nugarinama du kartus, pridedant heksano. Gauta alyva ištirpinama metileno chloride (6 ml) ir maišoma azoto atmosferoje 0 °C tem-peratūroje. Į šį tirpalą pridedama trietilamino (88 _fil, 0,63 mmol), po to [4S-( 4<x, 7a, 9aB) ] -4-amino-oktahidro-5-oksopirol-[2,l-b]fl,3Jtiaz epin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio p--toluolsulfo rūgšties (pagamintos pagal 7(a) pavyzdyje apra-šytą metodiką, 249 mg, 0,6 mmol), dar papildomas kiekis trietilamino (84 jnJL, 0,60 mmol) ir po 10 minučių, benzotriazol--1-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfato (279 mg, 0,63 mmol). Po valandos, reakcijos mišinys sušildomas iki kambario temperatūros ir maišoma 2 valandas. Gautas bespalvis tirpalas nugarinamas mažesnėje negu 30 °C temperatūroje ir alyvos pavidalo liekana ištirpinama etilacetate. Tirpalas plaunamas vieną kartą 5 % kalio bisulfato tirpalu, vieną kartą sočiu natrio bikarbonato tirpalu ir vieną kartą druskos tirpalu. Organinis sluoksnis džiovinamas (magnio sulfatu), filtruojamas ir nugarinamas ant 5 g silikagelio. Išvalius ekspres-chromatografijos būdu (2,5x15 cm kolonėlė, eliuuojama 1:1 etilacetatu: heksanais), gaunama baltos kietos medžiagos pavidalo norimas produktas ( 203 g); lyd. temp. 101-103 °C ; [oc] ^ =' -157,5° (c = 1,04, chloroformas). TLC (etilacetatas:heksanas, 1:1) Rc = 0,19.

[0345] d) Į 4S- f4cc.( R*) , 7 a , 9aB] "] - Oktahidro- 4- j" ( 2- merkapto- l- okso- 4- me •-. tilpentil) aminoĮ - 5- oksopirol \ 2 , 1- b] Į ~ 1, 3~| tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0346] Į produkto iš (c) stadijos (184 mg, 0,44 mmol) tirpalą 5 ml metanolio 10 minučių leidžiamas azotas ir atšaldoma iki 0 °C. Į šį tirpalą sulašinama 5 ml 1M natrio hidroksido tirpalo, per kurį taip pat buvo leistas azotas. Azotas lėtai burbuliuojamas per visą reakcijos eigą. Po 2 valandų, reakcijas mišinys rūgš-tinamas 2 ml 6M druskos rūgšties, du kartus ekstrahuojamas etilacetatu, o sumaišyti ekstraktai džiovinami (magnio sulfatu) ir nugarinama. Pridedama heksano ir vėl nugarinama, liekana trinama su metanoliu/vandeniu ir gaunama 132 mg kristalinės kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 94-96 °C; (p^_D = = -158,6° (c = 0,42, metanolis). _TLC (etilacetatas:heksanas:acto rūgštis, 4:4:0,1) R = 0,13.

[0347] Analizė: išskaičiuota pagal . 0, 75 f^O

[0348] HPLC: t = 17,6 min; (99,2%); YMC S-3 ODS (C-18); 6x150 mm;

[0349] 0% iki 100 % B:A, 25 min tiesinis gradientas ir 15 min. sulaikymas, 1,5 ml/min;

[0350] A = 90% vandens/metanolyje + 0,2 % fosforo rūgšties;

[0351] B = 90 metanolio/vandenyje + 0,2 % fosforo rūgšties;

[0352] 220 nm.

[0353] 10 pavyzdys

[0354] [4S- [4ot(R*) , 7a, lOafl] J -Oktahidro-4- [( 2-merkapto-I-oksp-3-fenilpropil) amino] -5-okso [l, 4 J oksazino £ 3 , 4-bJ £ l, 3^] oksazepin-7-karboksilo rūgštis

[0355] Į 80% natrio hidrido (945 mg, 31,5 mmol, du kartus

[0356] perplautą 25 ml heksano) suspensiją sausame eteryje (30 ml) lašinamas 2-propen-l-olio (21,4 ml, 18,3 g, 315 mmol) tirpalas sausame eteryje (45 ml), maišoma 20 minučių kambario tem-peratūroje ir argono atmosferoje, po to atšaldoma iki 0 °C (ledc-druskos vonia). Per 15 minučių pridedama trichloraceto-nitrilo (30 ml arba 42,3 g, 0,30 mol) ir rusvas tirpalas mai-šomas 0 °C temperatūroje 40 minučių, 10 °C temperatūroje 10 minučių ir kambario temperatūroje 10 minučių. Reakcijos miši-nys sukoncentruojamas iki sirupo, pridedama metanolio (1,2 ml) tirpalo pehtane (30 ml) ir intensyviai maišoma 5,0 minutes. Šviesiai rudos nuosėdos nufiltruojamos, plaunamos pentanu (2x 30 ml), o sumaišyti filtratai sukoncentruojami iki šviesiai rudo skysčio. Šis skystis ištirpinamas pentane (30 ml), maišo-mas kelias minutes, susidariusi suspensija filtruojama, gautos nuosėdos plaunamos pentanu (30 ml) ir ši procedūra kartojama dar bent vieną kartą. _Sukoncentravus skaidrų filtratą ir išdžiovinus vakuume, gaunama 54,0 g norimo junginio, kuris yra šviesiai raudonas skystis. Ši medžiaga laikoma heksano tirpalo pavidalu 10 °C temperatūroje.

[0357] L-serino metilo esterio hidrochlorido (25 g, 161 mmol)

[0358] suspensija vandenyje (350 ml) praskiedžiama dioksanu (250 ml), ir gautas skaidrus tirpalas veikiamas kietu natrio karbonatu (17 g, 1,0 ekv.), o po to N-karbetoksiftalimidu (37 g, 1,05 ekv.). Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje ir argono atmosferoje 2,5 valandos. Mišinys ekstrahuojamas etilacetatu (3x500 ml), o sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami iš eilės 5% natrio bikarbonatu ( 250 ml) , 5% kalio bisulfatu (250 ml) ir druskos tirpalu (250 ml), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džio-vinama vakuume. Produktų mišinys chromatografuojamas per silikagelio kolonėlą (Merck), kuri eliuuojama etilacetato:heksano mišiniais (1:3, 1:2); norimos frakcijos surenkamos ir supi-lamos kartu, nugarinama iki sausumo ir išdžiovinus vakuume, gaunama tiršto sirupo pavidalo norimas junginys (31 g). TLC (etilacetatas:heksanas, 1:1) R? = 0,52.

[0359] Produkto iš (b) stadijos (7,37 g, 29,5 mmol) tirpalas sausame metileno chloride (30 ml) veikiamas produkto iš (a) stadijos (11,97 g, 59,1 mmol, 2 ekv.) tirpalu cikloheksane (60 ml), o po to trif luormetansulf orūgštimi (0,37 ml), ir argono atmosferoje reakcijos mišinys maišomas 20 valandų kambario temperatūroje. Nuosėdos nufiltruojamos, plaunamos mi-nimaliu kiekiu metileno chlorido, o sumaišyti filtratai plaunami 5% natrio bikarbonatu (30 ml) ir vandeniu (30 ml), džio-vinami (bevandenis natrio sulfatas), filtruojami, sausai nugarinami ir džiovinama vakuume. Nevalytas produktų mišinys chromatograf uo jamas per silikagelio (Merck) kolonėlą, kuri eliuuojama etilacetatu:heksanu (1:9). Reikiamos frakcijos sumaišomos, sausai nugarinama ir išdžiovinus vakuume, gaunama 7,56 g skaidraus tiršto sirupo pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas :heksanas, 1:1) R, = 0,70.

[0360] Produkto iš (c) stadijos tirpalas (2,5 g, 8,54 mmol) sauso metileno chlorido (46,4 ml) ir metanolio (4,6 ml) miši-nyje atšaldomas iki -78 °C (sauso ledo - acetono vonia) ir veikiamas ozonu tol, kol laikosi mėlyna spalva (apie 15 minu-čių). Tada per mišinį, leidžiamas azotas 10 minučių (kol mė-lyna spalva išnyksta), veikiama dimetilsulfidu (14,0 ml, 0,19 mol, 22,1 ekv.), sušildoma iki kambario temperatūros ir mai-šoma azoto atmosferoje 2,5 valandos. Reakcijos mišinys sausai nugarinamas, o likęs sirupas tirpinamas etilacetate (50 ml), plaunamas vandeniu (15 ml) ir druskos tirpalu (15 ml), džiovi-namas (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojamas, sausai nugarinamas ir džiovinamas vakuume.

[0361] Nevalytas produktas chromatografuojamas per silikagelio (iMerck) kolonėlę, kuri eliuuojama etilacetato: heksano mišiniais (1:9, 1:4, 1:2), ir gaunama 1,54 g norimo produkto. TLC (etil-aceta tas : neksanas-, 1:1) R_^ = 0,33.

[0362] e) N- Ftaloil- 0-( 2, 2- dimetoksietil)- L- serino metilo esteris

[0363] Produkto iš (d) stadijos (1,54 g, 5,29 mmol) tirpalas sauso metileno chlorido (8,3 ml) ir sauso metanolio (8,3 ml) mišinyje veikiamas trimetilortoformiatu (0,84 ml, 7,68 mmol, 1,45 ekv.) ir p-toluolsulforūgšties monohiaratu (92 mg). Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje ir argono atmosferoje 2,5 valandos, tada suplakamas su etilacetato (50 ml) ir sotaus natrio bikarbonato (15 ml) mišiniu. Organinė fazė plaunama vandeniu (15 ml) ir druskos tirpalu (15 ml), džiovi-nama (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džiovinama vakuume. Nevalytas produktas chromatografuojamas per silikagelio (Merck) kolonėlę, kuri eliuuojama etilacetatu:heksanu (1:4) ir gaunama 1,35 g tiršto skaidraus sirupo pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 1:1) Rf = 0,58.

[0364] Produkto iš (e) stadijos (2,0 g, 5,93 mmol) tirpalas sausame metanolyje (14 ml) veikiamas hidrazino hidratu (0,30 ml, 6,1 mmol), ir kambario temperatūroje ir argono atmosferoje mai-šoma 4 dienas. Susidariusi suspensija filtruojama, nuosėdos plaunamos metanoliu (2x14 ml), o filtratas nugarinamas iki sausumo. Gautas sirupas tirpinamas metileno chloride ir filtruojamas dar du kartus, kol nebesusidaro nuosėdų. Skaidrus filtratas koncentruojamas, ir gaunama 1,17 g gelsvo sirupo pavidalo norimo produkto. TLC (metileno chlor-idas: metanolis, 9:1) Rp = = 0,54.

[0365] g) N-| l"( Fenilmetoksi) karbonil f- O - f ( 1, 1- dimetiletil jdimetil-sililĮ- L- homoserinas

[0366] N- £ (fenilmetoksi)karbonil]-L-homoserino (pagaminto pagal 6(a) pavyzdyje aprašytą metodiką, 3,0 g, 11,85 mmol) tirpalas sausame dimetilformaraide (65 ml) veikiamas [(1,1-diraetiletil)-dimetilsililĮchloridu (10,72 g, 71,1 mmol) ir imidazolu (9,65 g 0,14 mol) ir maišomas kambario temperatūroje ir argono atmosferoje 24 valandas. Reakcijos mišinys praskiedžiamas metanoliu (207 ml), maišomas dar 24 valandas kambario temperatūroje ir koncentruojamas iki sirupo. Gautas sirupas tirpinamas etilacetate (200 ml), plaunamas 10% citrinos rūgštimi (2x75 ml) ir druskos tirpalu, džiovinamas (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojamas, sausai nugarinamas ir džiovinamas vakuume. Nevalytas produktų mišinys chromatografuojamas per silikagelio (Merck) kolonėlę, kuri eliuuojama etilacetatu:heksanu (1:1), po to etilacetatu:acto rūgštimi (99,5:0,5). Reikiamos frakcijos su-maišomos, koncentruojama ir keletą kartų nugarinus iš toluolo, gaunama 3,56 g panašios į vašką kietos medžiagos, kuri yra norimas junginys. TLC (etilacetatas:acto rūgštis, 95:5) R_^ = 0, 82.

[0367] h) N- fo- Į( 1, 1- Dimetiletil) dimetilsililĮ- N- f( fenilmetoksi)-karbonilĮ- L- homoseril]- 0-( 2, 2- dimetoksietil)- L- serino metilo esteris

[0368] Produkto iš (g) stadijos (2,18 g, 5,93 mmol) tirpalas sausame metileno chloride atšaldomas iki 0 °C (ledo-druskos vonia) ir veikiamas iš eilės produkto iš (f) stadijos (1,71 g, 5,65 mmol) tirpalu sausame metileno chloride (5 ml), trietilaminu (0,77 ml, 5,65 mmol) ir benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (2,63 g, 6,0 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 30 minučių ir kambario temperatūroje - 1 vai. ir 45 min. Reakcijos mišinys suplakamas su etilo eterio (2x100 ml) ir vandens (30 ml) miši-niu, ir sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami 50 % prisotintu natrio bikarbonatu (20 ml) ir druskos tirpalu (25 ml), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojami, sausai nugarinami ir džiovinama vakuume. Nevalytas produktų mišinys chromatografuojamas per silikagelio kolonėlę (Merck), kuri eliuuojama etilacetato:heksano mišiniais (1:4; 1:3; 1:1), ir gaunama 2,38 g norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 1:1) Rf = 0,40.

[0369] i) Į " 4S-( 4c*, 7<x, 10aB)" j- 0ktahidro- 4- n~( fenilmetoksi) karbonil"]-amino] - 5- oksof" l>4" Įoksazini 3, 4- b Į fl * 3~ f - oksazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0370] Produkto iš (h) stadijos (1,0 g, 1,8 mmol) tirpalas sausame metileno chloride (50 ml) veikiamas jonitine derva Araber-lyst® 15 (rūgštine forma) ir metanoliu (0,1 ml) ir gautas mi-šinys maišomas kambario temperatūroje ir argono atmosferoje 3 dienas. Derva nufiltruojama, plaunama nedideliu kiekiu metileno chlorido ir filtratas koncentruojamas iki sirupo. Nevalytas produktų mišinys chromatogcafuojamas per silikagelio kolonėlą, kuri eliuuojama etilacetatu:heksanu (1:1), ir gaunama 335 mg norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 3:1) R = 0,53.

[0371] j) , f* 4 S - ( 4<X , Ipc ., 1 Oafl ) " j - Oktahidro - 4- amino- 5 - oksofl, 4 Į oksazin-3, 4- bĮ fl/ 3 oksazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0372] Produkto, pagaminto pagal (i) stadijoje aprašytą metodi-ką (771 mg, 2,04 mmol) tirpalas sausame metanolyje (25 ml) veikiamas 10 % paladis ant anglies katalizatoriumi (125 mg) ir hidrinama (iš baliono) kambario temperatūroje 16 valandų; Reakcijos mišinys filtruojamas per Celite® sluoksnelį ir šis sluoksnelis plaunamas metanoliu (2x25 ml) . Skaidrus filtratas sausai nugarinamas ir išdžiovinus vakuume, gaunama 448 mg sirupo pavidalo norimo junginio. _TLC (metileno chloridas:metanolis, 9:1) R = 0,22.

[0373] k) | 4S-| 4iX( R*), 7oę, iQal3~ l X- Oktahidro- 4- j ^-( acetitio) - 1 - okso-- 3- fenilpropi lĮ amino"]- 5- oksofl, 4] oksazinį3, 4- bj | l, 3" joksazepin-- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0374] (S)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druska (313 mg, 2,01 mmol) suspenduojama etilacetate (70 ml), plaunama 5% kalio bisulfatu (5x9,3 ml) ir druskos tirpalu (9,3 ml), džiovinama (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džiovinama vakuume.

[0375] Si laisva rūgštis ištirpinama sausame metileno chloride (12 ml), atšaldoma iki 0 °C (ledo-druskos vonia) ir veikiama iš eilės produkto iš (j) stadijos (448 mg, 1,84 mmol) tirpalu sausame metileno chloride (4,0 ml), trietilaminu (0,25 ml, 1,60 mmol) ir benzotriazol-l-iloksitris(dimeti lamino)fosfonio heksafluorfosfatu (823 mg, 1,86 mmol). Reakcijos mišinys mai-šomas 0 °C temperatūroje vieną valandą ir kambario temperatū-roje dvi valandas (argono atmosferoje). Po to reakcijos mi-šinys sausai nugarinamas, ir gautas sirupas tirpinamas etilacetate (60 ml), plaunama 0,5 N druskos rūgštimi (2x11 ml), vandeniu (11 ml) ir druskos tirpalu (11 ml), džiovinamas (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džio-vinama vakuume. Nevalytas produktų mišinys du kartus chromatografuojamas per silikagelio kolonėlą (Merck), kuri eliuuojama etilacetato: heksano mišiniais (1:1; 1:2), ir gaunama 665 mg sirupo pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 3:1) R - 0,30.

[0376] 1) f4S - j 4tx( R* ) , 7<x, lOaBU - Oktahidro- 4- j ( 2- merkapto- l- okso- 3-- f eniipropil) amino] - 5 - oksori , 4loksazinr3, 4- bĮ į 1 , 3 Į oksazepin-- 7- karboksilo rūgštis

[0377] Per produkto iš (k) stadijos (650 mg, 1,44 mmol) tirpa-lą metanolyje (13 ml) leidžiamas argonas 30 minučių, tirpalas atšaldomas iki 0 °C (ledo-druskos vonia) ir į jį lašinama 1,0 N natrio hidroksido tirpalas (5,84 ml),per kurį taip pat buvo leistas argonas 30 minučių,ir argonas burbuliuojamas tol, kol sulašinama ir kol vykdoma reakcija. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 5,0 valandos ir 0 °C temperatūroje skaldomas 5% kalio bisulfatu (25,4 ml). Mišinys sušildomas iki kambario temperatūros, ekstrahuojamas etilacetatu (3x50 ml), ir sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami druskos tirpalu (15 ml), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojami, sausai nugarinami ir džiovinama vakuume. Nevalytas produktas trinamas su heksano:metileno chlorido mišiniu (130:7), o gauta kieta medžiaga chromatografuojama per silikagelio kolonėlą (Merck), kuri eliuuojama etilacetato:heksano mišiniais (1:2, 1:1), o po to metileno chlorido: metanolio:acto rūgšties mišiniu (100:4:0,2). Norimos frakcijos sumaišomos, sausai nugarinamos, keletą kartų nugarinamos pri-dėjus toiuolo,ir gaunama 364 mg norimo produkto, kuris džiovi-namas vakuume 9,0 valandas. Tada gautas produktas apdorojamas mediena chloridu: neksanu (1:10), heksanu (50 ml) ir pentanu (2x50 ml), maišant su pirmąja 50 ml porcija 4 valandas ir kita 50 ml pentano porcija per naktį argono atmosferoje. Tir-

[0378] pi_klis nudekantuojamas ir išdžiovinus kietą medžiagą vakuume 6 valandas, gaunamas kietų amorfinių putų pavidalo norimas produktas; = -49,1° (c = 0,48, metanolis). TLC (toluoias: acto rūgštis, 5:1) = 0,17.

[0379]

[0380] KP_LC: cD = 10,45 min.; (98,3%); YMS S-3 ODS (c = 18) 6x150 mm; 44% (10% vandens-90% metanolio-0,2% fosforo rūgšties) / 56% (90% vandens -10% metanolio-0,2% fosforo rūgšties), izokratinis; 1,5 ml/min.

[0381] 11 pavyzdys

[0382] [ 4S- R* ) > 7oc, lOaif] ] - Oktahidro- 4- £ ( 2- merkapto- l- okso- 3- fenilpropil) amino]] - 5- okso- 7H- pirido £ 2 , 1- bj [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0383] 3 Pavyzdyje aprašytas produktas buvo gautas ir tokiu būdu:

[0384] a) N- i"( Fe. iilrnetoksi ) karbonil] - O- Į ( 1, 1- dimeti letil) dimetilsi-1- ilĮ - L- homoserinas

[0385] Į N-į ( f enilmetoksi ) karbonilj-L-hornoserino (pagaminto pagal 6(a) pavyzdyje aprašytą metodiką, 41,56 nunol) tirpalą di-metilfornamide (125 ml) pridedama [(1,1-dimetileti1)dimetilsi-liljchlorido (37,5 g, 249 rnmol), po to 'imidazolo (33,95 g, 498 mmol). Gautas gelsvas tirpalas maišomas kambario temperatūroje 22 valandas. Po to pridedama metanolio ( 500 ml) , reakcijos mi-šinys maišomas dar 6 valandas ir tada metanolis ir didžioji dalis dimetilformamidc nugarinama vakuume. Liekana tirpinama etilacetate (800 ml), plaunama 10 % citrinos rūgštimi (2x300 ml) ir sumaišytos vandeninės fazės ekstrahuojamos etilacetatu (300 ml). Sumaišytos etilacetato fazės plaunamos vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinama (natrio sulfatu), koncentruojama, liekana nugarinama,pridedant heksano, ir gaunami balti milteliai. Šie milteliai džiovinami vakuume ir gaunama 12,942 g norimo produkto .

[0386] b) fs-( R*, R*)"[- 2-[ f4- TF( l / 1- Dimetiletil) dimetilsililĮoksi Į -- l- okso- 2- TL( fenilmetoksi) karbonilĮ amino] butilĮ amino]- 6, 6-- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0387] Į produkto iš (a) stadijos (22,78 g, 61,97 mmol) tirpalą metileno chloride (100 ml), atšaldytą iki 0 °C temperatūros, pridedama N-metilmorfolino (6,81 ml, 61,97 mmol), po to hidroksibenzotriazolo (8,37 g, 61,97 mmol), (S)-2-amino-6,6-di-metoksineksano rūgšties metilo esterio (pagaminto pagal l(e) pavyzdyje aprašytą metodiką, 10,6 g, 51,64 mmol) metileno chloride (50 ml) ir l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimi-do (11,88 g, 61,97 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C tem-peratūroje 1 valandą, po to kambario temperatūroje per naktį. Reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, liekana praskiedžia-ma etilacetatu (600 ml), plaunam 5% kalio bisulfatu (200 ml), 0,5 N natrio hidroksidu (200 ml), vandeniu ir druskos tirpalu ir džiovinama (natrio sulfatu). Filtratas koncentruojamas,o liekana tirpinama etilo eteryje (150 ml). Susidariusi suspensija filtruojama, ir surinkta kieta medžiaga kruopščiai plaunama etilo eteriu. Filtratas nugarinamas vakuume iki sausumo ir gaunama 30 g alyvos pavidalo nevalyto norimo produkto, kuris tolimesnėje reakcijoje naudojamas nevalytas. TLC (8:2, etilacetatas:heksanas) R_^ = 0,55.

[0388] c) Į S-( R*, R*)" į - 2- f r4- Hidroksi- l- okso- 2- f f ( fenilmetoksi ) karbonil] amino] butilĮ amino"]- 6 , 6- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0389] Į produkto iš (b) stadijos (30 g) tirpalą metanolyje (150 ml), atšaldytą iki 0 °C, pridedama para-toluolsulforūgšties monohiarato (1,96 g). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C tempera-tūroje 2 valandas, po to skaldomas vandeniniu natrio bikarbonatu (1,3 g natrio bikarbonato 100 ml vandens). iMišinys koncentruojamas vakuume ir liekana suplakama su etilacetato (400 ml) ir vandens (150 ml) mišiniu. Atskirtas vandeninis sluoksnis ekstrahuojamas etilacetatu (2x150 ml) . Sumaišyti etilacetato sluoksniai plaunami 10 % natrio bikarbonatu, druskos tirpalu (2 kartus), džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama ir sausai nugarinama. Liekana valoma ekspres-chromatografi jos bū-du per silikagelio kolonėlę (10x25 cm), kuri eliuuojama 80% etilacetatu neksane (5 1), etilacetatu (3 1) ir 2% metanoliu etilacstate (5 i). Reikiamos frakcijos sumaišomos, koncentruojama ir išdžiovinus vakuume, gaunama 17,45 g šiek tiek gels-

[0390] vos alyvos pavidalo norimo produkto. TLC (8:2, etilacetatas: heksanas) _R_ = 0,17.

[0391] d) j S- ( R* , R* )"[ - 2- Į f4- r ( Metansulfonil) oksi1- l- okso- 2-" fr ( fenilmetoksi ) karbonil~| amino] butil~ i amino"! ~ 6 , 6- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0392] Į produkto iš (c) stadijos (17,40 g, 3S,50 mmol, apdoro-to tris kartus toluolu ir per naktį džiovinto vakuume) tirpalą sausame metileno chloride (250 ml), atšaldytą iki -15 °C (ledu/acetonu), pridedama trietilamino (8,26 ml, 5S,28 mmol, tik ką nudistiliuotas), o po to sulašinamas metansulfonilchlo-ridas (3,7.6 ml, 47,4 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 30 mi-nučių -15 °C temperatūroje, po to skaldomas sočiu amonio chlorido tirpalu (100 ml). Pamaišius 5 minutes, mišinys praskiedžia-mas etilacetatu (600 ml) ir plaunamas '5% kalio bisulfatu, druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir sausai nugarinamas. Liekaną išdžiovinus vakuume, gaunama 20,40 g geltonos alyvos pavidalo norimo junginio, kuris tolesnėje reakcijoje vartojamas nevalytas. TLC (8:2, etilacetatas:heksanas) Rf = 0,35.

[0393] e) Į 5-( R *, R*) Į- 2-[ f 4-( Acetiltio)- l- okso- 2- f f( fenilmetoksi)-karbonil Į amino] butil Į amino]- 6 , S- dimetoksiheksano rūgšties metilo esteris

[0394] Į tioacto rūgšties (5,09 ml, 71,10 mmol) tirpalą metanolyje (100 ml) pridedama cezio karbonato -(10,82 g, 33,18 mmol). Gautas tirpalas koncentruojamas vakuume. Kieta medžiaga trinama su sausu acetonu (3 kartus), po to per naktį džiovinama vakuume virš fosforo pentoksido ir gaunamas cezio tioacetatas.

[0395] Į cezic tioacetato (10,576 g, 50,85 mmol) suspensiją dimetilformamide (50 ml) per piltuvėlį, pridedamas produkto iš (d) stadijos (20,40 g, 39,50 mmol) tirpalas sausame dimetilformamide (150 ml). Gautas geltonas tirpalas maišomas argono atmosferoje ir kambario temperatūroje per naktį, ir koncentruojamas giliame vakuume, kad būtų pašalinama didžioji dalis dimetilformamido. Liekana tirpinama etilacetate (1 1) ir plaunama 10% natrio bikarbonatu (200 ml), vandeniu (4x200 ral), druskos tirpalu (400 ml) ir džiovinama (natrio sulfatu). Filtratas koncentruojamas, o liekana, pridėjus toluolo, nugarinama (3 kartus); tada džiovinama vakuume ir gaunama 20 g gelsvos spalvos kietos medžiagos pavidalo norimo junginio, kuris tolimesnėje reakcijoje naudojamas nevalytas. TLC (8:2, etilacetatas:heksanas) R_^ - 0,47.

[0396] Į produkto iš (e) stadijos (20 g, 39,50 mmol) tirpalą metanolyje (250 ml), atšaldytą iki 0 °C, 15 minučių leidžia-mas argonas. Nepertraukiamai leidžiant argoną, sulašinamas 25% (pagal svorį, tankis = 0,945) natrio metoksido tirpalas metanolyje (9,17 ml, 40 mmol). Pamaišius 5 minutes, reakcijos mišinys skaidomas sočiu amonio chlorido tirpalu (200 ml) ir plakama su etilacetato (1 1) ir vandens (200 ml) mišiniu. Vandeninis sluoksnis ekstrahuojamas etilacetatu (200 ml). Sumai-šyti etiiacetato ekstraktai plaunami sočiu amonio chlorido tirpalu (400 ml), druskos tirpalu (400 ml), džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 17,5

[0397] g geltonos alyvos pavidalo norimo produkto, kuris tolimesnėje reakcijoje naudojamas nevalytas. TLC (8:2, etilacetatas:heksanas) R_ = 0,45.

[0398] g) | 4S-( 4c<, 7p-, 10afi)] - Oktahidro- 4 - j" f ( f enilmetoksi ) karbonilĮ - amino"]- 5- okso- 7H- pirido (~ 2 , 1- b] fl, 3"] tia2epin- 7- karboksilo rūg-šties metilo esteris

[0399] Į produkto iš (f) stadijos (17,5 g, 38,3 mmol) tirpalą

[0400] metileno chloride (600 ml) pridedama jonitinės dervos Amberlyst (K) (6 g, prieš tai apdorotos 6N druskos rūgštimi, vandeniu, tetrahidrofuranu, metileno chloridu ir išdžiovintos). Suspensija maišoma argono atmosferoje ir kambario temperatūroje 18 valandų ir filtruojama. Filtratas koncentruojamas, o liekana adsorbuojama ant Celite , gryninama chromatografuojant per 10x30 cm silikagelio kolonėlę, kuri eliuuojama 20-30% etilacetatu heksane. Reikiamos frakcijos sumaišomos ir sausai nugarinus vakuume, gaunama 9,18 g geltonos alyvos pavidalo norimo produkto. TLC (1:1, etilacetatas:heksanas) R. = 0,32.

[0401] h ) j 4S - ( 4cc, 7c*., 1 Oafl )"] - Oktahidro- 4- amino- 5- okso- 7H- pirido f2 , 1- b I - fl, 3" Į tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0402] Į produkto iš (g) stadijos (9,1 g, 23,19 mmol, tris kartus nugarintas, pridedant toluolo, ir džiovintas vaiuume per naktį) tirpalą sausame metileno chloride (150 ml) lašinamas jodtrimetilsilanas (4,95 ml. 43,78 mmol). Gautas geltonas tirpalas maišomas'argono atmosferoje ir kambario temperatūroje 1,5 valandos, tada skaldomas 0,4 N druskos rūgštimi metanolio/ dioksano mišinyje (120 ml). _Lakios medžiagos pašalinamos vakuume, -o liekana purtoma su eterio (500 ml) ir vandens (700 ml> mišiniu. Organinė fazė ekstrahuojama 0,1 N druskos rūgštimi (150 ml)_', sumaišyti rūgštūs vandeniniai ekstraktai atšaldomi iki 0 °C, šarminama 1 N natrio hidroksidu iki pH 10,5 (kontroliuojama pH-metru), ekstrahuojama metileno chloridu (4x400 ml). Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama geltonos alyvos pavidalo produktas (6,45 g), kuris tolimesnėje reakcijoje naudojamas nevalytas. TLC (1:9, metanolis:metileno chloridas) R = 0,20.

[0403] i) f" 4 S — j 4 c*( R* ) , ?tx, 10afl'|" f - Oktahidro- 4 - f ( 2- merkapto- l- okso- 3-- fenilpropil) amino' Į- 5- okso- 7H- piridor2, l- b1 fl, 3] tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0404] Šaltas (0 °c) (_S)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties ir trietilammo tirpalas metileno chloride veikiamas produkto iš

[0405] (h) stadijos tirpalu metileno chloride, o po to benzotriazol--1-iloksi tris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu. Reakcijos mišinys apdorojamas pagal 3(c) pavyzdyje aprašytą meto-diką ir gaunamas [4S-[4cX( R* ) , loL, lOaflj ] -oktahidro-4-[ į_2-( acetiltio)-i-okso-3-fenilpropil]amino]-5-okso-7H-pirido[2,l-b]-[l,3Jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esteris.

[0406] Šio metilo esterio tirpalas metanolyje, iš kurio paša-lintas deguonis, veikiamas 1N natrio hidroksiau pagal 3(d) pavyzdyje aprašytą metodiką ir gaunamas norimas produktas.

[0407] 12 pavyzdys

[0408] [ 4S- [ 4 £ X( R* ) , 7c*., lOafl] 3- Oktahidro- 4- [ [ 2-( merkaptometil )- l- okso-- 3- fenilpropil] amino]- 5- okso- 7H- pirido[ 2, 1- bJ [ l, 3] tiazepin-- 7- karboksilo rūgštis

[0409] a) ( S)- 2- į( Acetiltio) metilĮbenzolpropano rūgšties efedrino druska

[0410] (I_R,2S)-(-)-efedrino (17,3 g, 105 mmol) tirpalas dietilo eteryje (175 ml) supilamas iš karte į 2-[ (acetiltio)iaetil] benzolpropano rūgšties (5Q,0 g, 210 mmol) tirpalą dietilo eteryje (175 ml). Palaikius kambario temperatūroje 16 valandų, kris-talinė efedrino druska nufiltruojama (19,7 g); lyd. temp. 114-125 °C; įt*] q = _~40,6° (c = 1, metanolis). Palaikius kambario temperatūroje 20 valandų, iš filrato išskiriama papildomas kietos medžiagos kiekis (8,9 g, lyd. temp. 121-126 °C;

[0411] [<*iD = _"47,2° (c = 1, metanolis)). Kietos medžiagos sumaišomos ir perkristaiinamos iš acetonitrilo (1500 ml). Palaikius 16 valandų kambario temperatūroje, išskiriama 20,8 g kietos me-džiagos; lyd. temp. 125-130 °C; _[c*] = -^48,9° (c = 1, metanolis) . Dar kartą perkristalinus šią medžiagą iš acetonitrilo (300 ml) , gaunama 18,7 g, lyd. temp. 128-130 °C; jc<[) = -48,9°

[0412] (c = 1, metanolis). Trečią kartą perkristalinus iš acetonitrilo ( 225 ml), gaunama 17,4 g -kietos (S)-2-Į(acetiltio)metilĮ - benzolpropano rūgšties efedrino druskos; lyd. temp. 128-129 °C; q = -50,1° (c = 1, metanolis).

[0413] v ^ 12 14 3 10 15

[0414] b) Į 4S- Į 4 fc( R* ) , 7a., ĮOaBj ] - Oktahidro- 4- | f~ 2- f~( aceti ltio -- I- oksc- 3- fenilpropil1amino|- 5- okso- 7H- piridof2, l- bl j~ l, 3~ Į tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0415] Maišoma efedrino druskos iš (a) stadijos (333,1 mg, 0,322 iiimol) suspensija etilacetate (5 ml) plaunama tris kartus po 5

[0416] ml 1N druskos rūgšties tirpalo. Organiniai ekstraktai sumaišo-mi, plaunami druskos tirpalu, džiovinami (magnio sulfatu), filtruojama, koncentruojama ir džiovinama vakuume 30 minučių. Gauta alyva ištirpinama metileno chloride (2 ml) ir azoto atmosferoje maišoma 0 °C temperatūroje. J šį tirpalą pridedamas [4S-(4a,7oc,10al3)J -oktahidro-4 - amino-5-oks o-7H-pirido [2 ,1-b] -

[0417] [l_/3jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio (200,0 mg, 0,774 mmol, pagaminto pagal 3(c) pavyzdyje aprašytą metodiką) tirpalas metileno chloride (6 ml), po to trietilamino (0,113

[0418] ml, 0,813 mmol) ir ant galo benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfato (360,0 mg, 0,813 mmol). Reak-N, N* O — ~ . cijos nisinys maisomas 0 C temperatūroje, po to leidžiama lė-tai sušilti iki kambario temperatūros. Po 1S valandų reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, ir liekana tirpinama etilacetate. Tirpalas plaunamas vieną kartą 5 % kalio bisulfato tirpalu (20 ml), vieną kartą sočiu natrio bikarbonato tirpalu (20 ml) ir vieną kartą druskos tirpalu. Organinis sluoksnis džio-vinamas (magnio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas, susidarant geltonoms putoms. Gryninama ekspres.-chromatograf i jos būdu (silikagelis, 230-400 mešų, esant azoto slėgiui 10-20 psi); eliuuojama 4:3 etilacetatu/heksanu ir gaunama skaidrios alyvos pavidalo produktas (303 mg).

[0419] c) | 4S- j4oc( R*,), 7oc, 10afl] l - Oktahidro- 4 - [[ 2 - ( merkaptometil) - 1-- okso- 3- f enilpropil j aminoĮ - 5- okso- 7H- pirido f 2 , 1 — b~ Į [" l, 3Įtiaze-pin- 7- karboksilo rūgštis

[0420] Produkto iš (b) stadijos ( 303 ,1 mg, 0,-635 mmol) tirpalas metanolyje (6,5 ml, iš kurio, leidžiant azotą, pašalintas deguonis) atšaldomas iki 0 °C ir veikiamas 1N natrio nidroksidu (6,5 ml, iš kurio, leidžiant azotą, pašalintas deguonis). Pa-maišius 0 °C temperatūroje vieną valandą leidžiant azotą, reakcijos mišinys sušildomas iki kambario temperatūros. Praėjus iš viso trims valandoms, reakcijos mišinys rūgštinamas 5 % kalio bisulfatu iki pH 1 ir ekstrahuojamas etilacetatu. Organiniai sluoksniai sumaišomi, plaunami vandeniu, druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 219 mg baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 200 °C (skyla). TLC (5:0,01:3,59, etilacetatas/acto rūgštis/heksanas) R_^ = 0,15.

[0421] HPLC: tK n = 26,3 min, priemaišos - t K = 27,0 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0x150 mm; 0% iki 100% B:A, 30 min tiesinis gradien-

[0422] tas ir 10 min sulaikymas, 1,5 ml/min.; A = 90% vanduo metanolis + 0,2% fosforo rūgšties, B = 90% matanolis:vanduo + 0,2% fosforo rūgšties; 220 nm.

[0423] Analizė: išskaičiuota pagal C₂₀H₂gO₄N₂S₂.0,11 C^ HgO^. O, 07 CH^ Cl^ :

[0424] 13 pavyzdys

[0425] [ 4S- [ 4a( R* ), 7lOafi] ] - Oktahidro- 4- [( 2- merkapto- 4- metil- l- okso-pentiUaminoJ - 5- okso- 7H- pirido £ 2, 1- b] [ l# 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0426] I maišomą D-leucino (3,0 g, 23 mmol) tirpalą 2,5 N sieros v 4 7 ral) rūgšty jeTVkambario temperatūroje pridedama kalio bromido (9,5 g, 80 mmol). Reakcijos mišinys atšaldomas iki -10 °C ir dalimis dedamas natrio nitritas (2,4 g, 34 mmol), palaikant temperatū-rą tarp -10 °C ir -5 °C. Sudėjus natrio nitritą, reakcijos mi-šinys maišomas 1 valandą, tada sušildomas iki kambario tempe-ratūros ir maišomas dar vieną valandą. Po to reakcijos mišinys du kartus ekstrahuojamas eteriu, etriniai ekstraktai perplaunami vieną kartą vandeniu, džiovinami (magnio sulfatu), filtruojami ir nugarinus, gaunama 2,7 g nevalyto norimo produkto.

[0427] b) ( S)- 2-( acetiltio)- 4- metilpentano rūgšties dicikloheksilamino druska

[0428] Į maišomą kalio tioacetato (1,7 g, 15,0 mmol) suspensiją 50 ml sauso acetonitrilo kambario temperatūroje ir argono atmosferoje pridedama (a) stadijos produkto (2,6 g, 13 mmol) tirpalas acetonitrile (17 ml). Reakcijos mišinys maišomas 4 vai. Gauta suspensija filtruojama ir nugarinama. Liekana ištirpina-ma etilo eteryje, plaunama vieną kartą 5% kalio bisulfato tirpalu ir vieną kartą druskos tirpalu, džiovinama (magnio sulfa-t_u) ir nugarinama. Liekana ištirpinama eteryje (64 ml) ir veikiama dicikloheksilaminu (2,7 ml, 14 mmol). Iš tirpalo tuoj pat pradeda kristi balta kieta medžiaga. Tirpalas nufiltruojamas ir surinkus baltą kietą medžiagą, gaunama 2,0 g norimo produkto; lyd. temp. 153-158 °C; jjx] ^ = -54,5° (c = 0,61, chloroformas).

[0429] c) | 4S-| 4oC( R*), 7gc, 10al3Į| - Oktahidro- 4 - f~ r2-( acetiltio) - 4- meti 1-- l- oksopentilĮ amino] - 5- okso- 7H- pirido(" 2, l- b" l fl, 3| tiazepin- 7-karboksilo rūgšties metilo esteris

[0430] Maišoma produkto iš (b) stadijos (403,3 mg, 1,05 mmol) suspensija etilacetate (5 ml) plaunama tris kartus 5% kalio' bisulfato tirpalo porcijomis po 5 ml. Organiniai ekstraktai sumaišomi, plaunami druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama, koncentruojama ir džiovinama vakuume 30 minučių. Gauta alyva (179,4 mg, 0,943 mmol) tirpinama metileno chloride (2 ml) ir maišoma azoto atmosferoje 0 °C temperatūroje. Į šį tirpalą pridedama [4S-( 4<x, 7«, lOaB )] -oktahidro-4-amino-5-ok-so-7H-pirido [2,1-bj [l,3jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio (232,0 mg, 0,898 mmol, pagaminto pagal 3(c) pavyzdyje aprašytą metodiką) tirpalas metileno chloride (6 ml), trietilaminas (0,131 ml, 0,943 mmol) ir ant galo benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatas (417,1 mg, 0,943 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje vieną va-landą ir kambario temperatūroje 3,5 valandos. Praėjus iš viso 4,5 valandos, reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, o liekana tirpinama etilacetate. Tirpalas plaunamas vieną kartą 5% kalio bisulfato tirpalu (20 ml), vieną kartą prisotintu natrio bikarbonate tirpalu (20 ml) ir vieną kartą druskos tirpalu. Or-. ganinis sluoksnis džiovinamas (magnio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus, gaunamos geltonos putos. Valoma ekspres-chromatografijos būdu (silikagelis, 230-400 mešų, esant azoto slė-giui 10-20 psi); eliuuojant 2:3 etilacetatu/heksanu, gaunama 209,4 mg skaidrios alyvos pavidalo norimo produkto.

[0431] d) f 4S- Į 4oc( R* ) , 7g , lOafl] Į - Oktahidro- 4- f ( 2- merkapto- 4- metil- l-- oksopentil) amino]- 5- okso- 7H- pirido 2, 1- b 1, 3 tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0432] Produkto iš (c) stadijos (209,4 mg, 0,486 mmol) tirpalas metanolyje (5 ml, iš kurio, burbuliuojant azotą, pašalintas

[0433] deguonis) atšaldomas iki 0 °C temperatūros ir veikiamas 1N natrio hidroksidu (5 ml, iš kurio, burbuliuojant azotą, paša-lintas deguonis ) . Pamaišius vieną valandą 0 °C temperatūroje visą laiką burbuliuojant azotą, reakcijos mišinys parūgština-mas 5% kalio bisulfatu iki pH 1 ir ekstrahuojamas etilacetatu. Organiniai sluoksniai sumaišomi, plaunami vandeniu, druskos

[0434] tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama ir koncentruojama vakuume. Valoma ekspres-chromatografijos būdu (silikagelis, 230-400 mešų, esant 10-20 psi azoto slėgiui); eliuuojant

[0435] azotu apdorotu 6:0,01:3,99 etilacetato/acto rūgšties/heksano mišiniu, gaunama baltos kietos medžiagos pavidalo norimas produktas (142,0 mg). TLC (6:0,1:3,9 etilacetatas/acto rūgštis/ heksanas) R. = 0,20. [oc] = -103,0° (c = 0,43, chloroformas). HPLC: tK„ = 26,7 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6x150 mm; 0% iki 100% B:A, 30 min. tiesinis gradientas ir 10 min. sulaikymas, 1,5 ml/min; A = 90% vanduo :metanolis + 0,2% fosforo rūgšties, B 90% metanolis:vanduo + 0,2% fosforo rūgšties; 220 nm.

[0436] Analizė: išskaičiuota pagal C, ,H„ ,0 , N_S_.. 0 ,19 C_.H_o0_.0,18 C^H. r ^ 16 26 422 482 7 16 .0,9 H₂0

[0437] 14 pavyzdys [ 4S- [ 4<x( R*), 7oc, - Oktahidro- 4- [( 2- merkapto- l- oksibutil) amino] - 5- oksopirol[ 2, 1- b][ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0438] Į (R)-2-aminobutano rūgšties (2,0 g, 19,40 mmol) tirpalą

[0439] 2,5 N sieros rūgštyje (25 ml) pridedama kalio bromido (7,85 G, 65,95 mmol) ir atšaldoma iki 0 °C. Lėtai, keliomis dalimis pridedama natrio nitrito (2,06 g, 29,87 mmol). Dedant nitritą, temperatūra palaikoma žemesnė negu 2 °C. Reakcijos mišinys maisomas 0 C C temperatū—roj^e vieną valandą ir kambario temperatū-roje 15 valandų, tada ekstrahuojama trimis 50 ml porcijomis etilacetato. Sumaišyti etilacetaco sluoksniai plaunami dviem 50 ml porcijomis vandens, viena 50 ml porcija druskos tirpalo, džio-vinama (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama 2,36 g nešvarios alyvos pavidalo norimo produkto.

[0440] Į 2,14 g (13,77 mmol) kalio tioacetato suspensiją 15 ml

[0441] acetonicrilc, maišomą kambario temperatūroje, per 15 minučių sulašinamas (R)-2-brombutano rūgšties (2,33 g, 17,07 mmol) tirpalas 15 ml acetonitrilo. Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje 16 valandų, uaaa filtruojamas. Filtratas koncentruojamas vakuume, ir gauta alyva tirpinama 30 ml etilo eterio. Eterinis sluoksnis plaunamas dviem 20 ml porcijomis 5% kalio bisulfato, dviem 20 ml porcijomis vandens, dviem 20 ml porcijomis druskos tirpalo, džiovinamas (magnio sulfatu) ir filtruojamas.

[0442] Į filtratą pridedama 3,4 ml (17,07 mmol) dicikloheksilamino. Pa-maišius kambario temperatūroje 2 valandas, suspensija nufiltruojama ir gaunama 1,24 c dicikloheksilamino druskos. Kita 724 mg dicikloheksilamino druskos porcija gaunama iš filtrato.

[0443] c) j 4 S - į 4<x ( R* ) , 7g, 9aflj Į- Cktahidro- 4- j f2-["( acstiltio)- l- oksobu-ti. l Į amino j - 5- oksopirol Į 2, 1- bĮ |~ 1, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0444] Dicikloheksilamino druska iš (b) stadijos (227 mg, 0,66 mmol) ištirpinama 15 ml etilacetato ir tris kartus plaunama 10 ml porcijomis kalio bisulfatu ir vieną kartą - druskos cirpalu, džiovinama (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama 108 mg skaidrios alyvos pavidalo ( S)-2-(acetiltio)butano rūgš-ti e_s.

[0445] Į šios laisvos rūgšties (108 mg, 0,66 mmol) tirpalą 5 ml sauso metileno chlorido, atšaldytą iki 0 °C, pridedama trietilamino (90 /_^l, 0,66 mmol), o po to j^4S-( 4c^, 7cs, 9aI3)}-4-amino-oktahidro-5-okso^pirol[2,1-b_j[l,3jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio p-toluolsulforūgšties druskos (250,0 mg, 0,66 mmol, pagamintos iš medžiagos, aprašytos 5(d) pavyzdyje) ir antra trietilamino (90 yxl, 0,66 miūol) porcija. Reakcijos mišinys mai-šomas 0 °C temperatūroje 20 minučių, po to iš karto pridedama benzotriazol-I-iioksitris(dimetilamino)fosfonic heksafluorfosfato (292 mg, 0,66 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C tem-peratūroje 1 vaiandą, laikomas šaldytuve 56 valandas, tada mai-šomas kambario temperatūroje 3 valandas. Reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, tirpinamas 30 ml etilacetato ir plaunamas 20 ml 5% kalio bisulfato, 20 ml sotaus natrio bikarbonato, 20 ml druskos tirpalo, džiovinamas (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama nešvari alyva. Ši nešvari alyva valoma ekspres-chromatograf i jos būdu (Merck silikagelis, 25x100 mm, 2:3 etilacetatas/heksanas); ir gaunama 208 mg baltų putų pavidalo norimo produkto.

[0446] d) |" 4S — Į 4cx.( R* ) , 7flę, 9alf] Į - Qktahi5ro- 4- f ( 2- merkapto- l- oksibutil) - aminoĮ- 5- oksopirol j 2 , 1- b Į 1, 3"] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0447] Produkto iš (c) stadijos (225 mg, 0,559 mmol) tirpalas metanolyje (5 ml) valomas, leidžiant argoną 30 minučių, ir at-s„ aldomas iki 0 ^oC. Į sį tirpalą sulasinama 5 ml 1M natrio hidroksido, taip pat išvalyto, leidžiant argoną 30 minučių, ir at-šaldyto iki 0 °C. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatū-roje 3 valandas visą laiką leidžiant argoną, tada rūgštinamas 5% kalio bisulfato tirpalu iki pH 2. Mišinys ekstrahuojamas trimis etilacetato porcijomis po 40 ml ir sumaišyti etilacetato sluoksniai džiovinami (magnio sulfatu), koncentruojama vakuume, ir gaunamos nevalytos putos. _Nevalytas produktas gryninamas ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 25x180 mm,

[0448] 3% acto rūgštis/etilacetate), ir gaunamos baltos putos, kurios tirpinamos metileno chloride ir trinant su heksanu, gaunama 176 mg kompaktinių baltų putų pavidalo norimo produkto; [ pC J d =

[0449] = - 125,4 (c = 1,0, chloroformas). _TLC (metanolis/ metileno chloridas 1:9) R, - 0,16.

[0450] HPLC: tR = 15,5 min. (9? _% bendro ploto, UV 220 nm); YMC S-3 ODS (C-18, 120 A) 6x150 mm; 0% B:A - 100% B:A, tiesinis 25 min. gradientas (A = 90% vandens/metanolyje + 0,2% fosforo rūgšties, B = 50% metanolio/vandenyje + 0,2% fosforo rūgšties); srovės greitis = 1,5 ml/rnin.

[0451] Analizė: išskaičiuota _Dagai C, -,H_nN_S_0, .0,8 H_O.0,2 C,-H, .. ~ U 2U 2 z 4 2 o 14 .0,1 CH₂C1₂:

[0452] 15 pavyzdys

[0453] [ 4S- £ 4ol( R *) , 7a ., 9afiJį- Oktahidro- 4- £ ( 2- merkapto- l- oksopentil) - amino]- 5- oksopirol[ 2, 1- b] fl, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0454] Pagal 14(a) pavyzdyje aprašytą metodiką, tik vietoj (R)--2-aminobutano rūgšties naudojant D-norvaliną, gaunama skaidraus skysčio pavidalo (R)-2-brompentano rūgštis.

[0455] b) ( S)- 2-( Acetiltio) pentano rūgšties dicikloheksilamino druska Veikiant (R)-2-brompentano rūgštį kalio tioacetatu, o po

[0456] to dicikloheksilaminu pagal 14(b) pavyzdyje aprašytą metodiką, gaunama baltos kietos medžiagos pavidalo (S)-2-(acetiltio)pentano rūgšties dicikloheksilamino druska.

[0457] c) | 4S-| 4oc( R*), 7<y/ 9a/ 3' P - Oktahidro- 4- f f" 2- ( acetiltio) - 1- oksopen-t i laminol - 5- oksopirolį2, l- b] f 1, 3" j tiazepin- 7- karboksilo rūgšties

[0458] metilo esteris

[0459] Veikiant (b) stadijos rūgšties dicikloheksilamino druską

[0460] [4S-( 4 £ X, 7(X, 9al3 ) ] -4-amino-oktahidro-5-oksopirol [2 ,1-bj [1/3] tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esteriu pagal 14(c) pavyzdyje aprašytą metodiką gaunamas baltų putų pavidalo nerimas produktas.

[0461] d ) (~ 4S — j 4tX( R* ) , 7 <x , 9 a 13 " į J- Oktahidro- 4- \ ( 2- merkapto- l- oksopentil) - amino]- 5- oksopirol [~ 2 , 1- b I j 1, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0462] Produkto iš (c) stadijos tirpalas metanolyje veikiamas 1M natrio nidroksidu pagal 14{d) pavyzdyje aprašytą metodiką ir gaunamas kompaktinių baltų putų pavidalo norimas produktas; įf*] = -122,3° (c = 1,0, CDC1 ^) - 'TLC (metanolis/metileno chloridas 1:9) R = 0,15. HPLC: t = 20,5 min.; (97% bendro ploto, UV 220 nm); f K YMC S-3 ODS K-18, 120 A) 6x150 mm); 0% B: A - 100% B: A, tiesinis 25 min. gradientas (A = 90% vandens/metanolyje + 0,2% fosforo rūgšties, B = 90% metanolio:vandenyje + 0,2% fosforo rūgšties); srovės greitis = 1,5 ral/min.

[0463] Analizė: išskaičiuota pagal 0^^22^2520^.0,65 ^0.0,20 CgH, :

[0464] 16 pavyzdys

[0465] [ 4S- [ 4cx( R*), 7ct, 9afl] J - Oktahidro- 4- [ ( 2- raerkapto- 4, 4- dimetil- l-- oksopentil) amino]- 5- oksopirol[ 2, 1- b][ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0466] a) ( R)- 2- Bromr4, 4- dimetilpentano rūgštis

[0467] ( R) -2-amino-4., 4-dimetilpentano rūgšties ( 950 mg, 6,55 mmol) tirpalas vandeninėje 2,5 N sieros rūgštyje (13 ml, 33 mmol) at-šaldomas iki -5 °C ir veikiamas kalio bromido (2,72 g, 22,9 mmol) porcija. Į bespalvį tirpalą dalimis dedamas natrio nitritas (580 mg, 9,86 mmol), palaikant reakcijos temperatūrą tarp 0 °C ir 3 °C 25 minutes. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C tempe-ratūroje vieną valandą ir kambario temperatūroje 1,5 valandos. Tada reakcijos mišinys išpilamas į vandenį (10 ml), produktas ekstrahuojamas eteriu (60 ml), ekstraktas plaunamas vandeniu (20 ml) ir druskos tirpalu (20 ml), džiovinamas (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunamas bespalvio skysčio pavidalo nerimas produktas.

[0468] Kalio tioacetato (750 mg, 6,58 mmol) ir acetonitrilo (10

[0469] ml, išdžiovinto molekuliniais tinkleliais) suspensija atšaldoma iki 0 °C ir per 5 minutes į ją pridedamas (R)-2-brom-4,'4-dimetilpentano rūgšties iš (a) stadijos tirpalas acetonitrile (2 ml). Reakcijos mišiniui leidžiama sušilti iki kambario tem-peratūros ir maišoma 2,5 valandos. Suspensija nufiltruojama. Filtratas koncentruojamas vakuume. Liekana praskiedžiama eteriu (50 ml), plaunama dviem porcijomis 5% vandeninio natrio tiosulfaco tirpalo (50 ml) ir druskos tirpalu (25 ml), džio-vinama (magnio sulfatu) ir koncentruojama vakuume. Gelsva alyva valoma ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 12x3 cm, 10% metanolis/rnetileno chloride) ir gaunama gelsvos alyvos pavidalo norimas produktas (575 mg).

[0470] _C) f 4 S — į 4cc( R* ) , 7g, 9afi]]- Oktahidro- 4- f Į 2-( acetiltio)- 4, 4- dimetil- l- oksopentil Į amino] - 5- oksopirol Į" 2 , l- b~| |~ 1, 3 Į tiazepin- 7-- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0471] Skaidrus produkto iš (b) stadijos (148 mg, 0,72 mmol) tirpalas metileno chloride (5 ml, nudistiliuotas nuo kalcio hidrido) atšaldomas iki 0 °C ir veikiamas ["4S~( 4<x, 7<x-/ 9a.i3)] --4-amino-oktahidro-5-oksopirol [2,1-b] [l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio p-toluolsulforūgšties druskos (250,0 mg, 0,60 mmol, pagamintosiš medžiagos, aprašytos. 5(d) pavyzdyje) tirpalu metileno chloride (3 ml, nudistiliuotas nuo kalcio hidroksido) -, trietilaminu (122 mg, 1,2 mmol), o po to benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (319 mg, 0,72 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 24 valandas ir kambario temperatūroje 5 valandas. Nevalytas reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume. Liekana praskiedžiama etilacetatu (50 ml), plaunama 5% vandeniniu kalio bisulfatu (50 ml), 50 % prisotintu vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu (50 ml) ir druskos tirpalu (50 ml), džio-vinama (natrio sulfatu) ir koncentruojama vakuume. Nešvarus produktas gryninamas ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, etilacetatas), ir gaunama 244 mg baltų putų pavidalo norimo produkto.

[0472] d ) Į 4S- Į 4( x( R*) , 7ot, 9aOl]- Oktahidro- 4- f( 2- merkapto- 4 , 4- dimetil-- 1- oksopentil] amino] - 5- oksapiroir2, l- b] fl ^ 3~ j tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0473] Skaidrus produkto iš (c) stadijos (240 mg, 0,56 mmol) tirpalas metanolyje (2 ml, per kurį praleistas azotas) atšaldo-

[0474] mas iki 0 °c ir į jį lašinamas 1N natrio hidroksidas (2,27 ml, 2,24 mmol, per kurį praleistas argonas), visą laiką leidžiant šias dujas 0 °C temperatūroje. Mišinys maišomas 0 °C tempera-tūroje 3 valandas ir kambario temperatūroje 3 valandas. Tada mišinys rūgštinamas 5% vandeniniu kalio bisulfatu (per kurį praleistas argonas) iki pH 1. Produktas ekstrahuojamas metileno chloridu (50 ml, per kurį praleistas azotas), plaunamas druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu) ir koncentruojamas vakuume. Nevalytas produktas perkristalinamas iš metileno chlorido/heksano ir gaunama 75 mg baltos kietos me-džiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 124-126 °C ;

[0475] [btjD = -175° (c = 0,25, metanolis). TLC (acto rūgštis/metanolis/metileno chloridas 1:5:94) R = 0,65.

[0476] HP_LC: t K (YMC, S-3 ODS (C-18) 6,0x150 mm; 1,5 ml/'min tiesinis gradientas 0-100% virš 30 min., buferis A = metanolis/vanduo/ fosforo rūgštis (10:90:0,2), buferis B = metanolis_/vanduo/fosforo rūgštis (90:10:0,2)) = 24,4 min., 95 % bendro piko ploto, kai j = 254 nm.

[0477] ' 3 16 26 2 4 2 6 14

[0478] 17 pavyzdys

[0479] [ 4S-[ 4<x( R*), 7et 19afiJ ] - Oktahidro- 4- [( 2- merkapto- l- oksopropil) - amino]- 5- oksopirol [ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0480] Atliekant reakciją pagal 14(a) pavyzdyje aprašytą meto-diką tik vietoj (R)-aminobutano rūgšties panaudojant D-ala-niną, gaunama gelsvos alyvos pavidalo (R)-2-brompropano rūgš-tis .

[0481] Į šviesiai žalią kalio tioacetato (3,94 g, 34,5 mmol)

[0482] tirpalą acetonitrile (150 ml) kambario temperatūroje ir argono atmosferoje pridedamas (R)-2-brompropano rūgšties (4,8 g, 31 mmol) tirpalas acetonitrile (12 ml) . Susidariusi balta suspensija maišoma kambario temperatūroje 2 valandas ir filtruojama. Filtratas koncentruojamas vakuume. Liekana praskiedžia-ma etilacetatu (100 ml), plaunama 10% vandeniniu kalio bisulfato tirpalu (50 ml) ir druskos tirpalu, džiovinama (natrio sulfatu) ir koncentruojama vakuume. Nešvarus produktas (4,61 g) valomas ekspres-ehromatografi jos būdu (60 g -Merck silikagelio, 1:45:54 acto rūgštis/etilacetatas/heksanas) ir gaunama 3,7 g gelsvos alyvos pavidalo norimo produkto; |" /x— j q = -H4o (c = 0,50, metanolis).

[0483] c) |" 4S- j~ 4<x( R* ) , 7( X , 9afi] Į - Oktahidro- 4- [\ 2 -( acetiltio) - 1- oksopropil j amino] - 5- oksopirol f 2 , 1- bĮ fl, 3~| tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0484] Skaidrus (S)-2-(acetiltio)propano rūgšties (86 mg, 0,58 mmol) tirpalas metileno chloride (5 ml, nudistiliuotas nuo kalcio hidrido) atšaldomas iki 0 °C ir veikiamas [-4S-( 4<x, 7o*>, - 9a B )] - 4 -amino-oktahiar o-5-oksopirol [2,1-b] [l,3]tiazepin-7--karbcksilo rūgšties metilo esterio p-toluolsulforūgšties druskos (200,0 mg, 0,48 mmol, pagamintos iš medžiagos, apra-šytos 5(d) pavyzdyje) tirpalu metileno chloride (5 ml, nudistiliuotas nuo kalcio hidrido), trietilaminu (S3 mg, 0,97 mmol), o >po to benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (255 mg, 0,58 mmol). Reakcijos mišinys maišo-mas 0 °C temperatūroje 22 valandas ir kambario temperatūroje 2 valandas. Neapdorotas reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume. Liekana praskiedžiama etilacetatu (100 ml), plaunama 5% vandeniniu kalio bisulfatu (30 ml), 50 % prisotintu vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu ir druskos tirpalu, džiovi-nama (natrio sulfatu) ir koncentruojama vakuume. Nevalytas produktas gryninamas ekspres-ehromatografi jos metodu (40 g, Merck silikagelis, etilacetatas) ir gaunama 180 mg baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 143-145 °C.

[0485] d) j 4 S — Į 4<X( R*) , 7iX , 9aPl~ j - Oktahidro- 4 - f ( 2- merkapto- l- oksopropil) - amino Į- 5- oksopirol[ 2 , 1- bĮ Į 1, 3Įtiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0486] Skaidrus produkto iš (c) stadijos (180 mg, 0,48 mmol) tirpalas metanolyje (2 ml) argono atmosferoje atšaldomas iki -10 C ir į jį lasinamas argonu prapūstas 1N natrio hidroksido tirpalas (1,95 ml, 1,95 mmol), palaikant temperatūrą že-miau 0 °C. Mišinys maišomas,burbuliuojant argoną_.O °C tempe-ratūroje 3 valandas. Tada argono atmosferoje mišinys parūgš-tinamas 5%-niu kalio bisulfato tirpalu iki pH 1. Produktas eks-^ trahuojamas etilacetatu (100 ml), per kurį praleistas azotas, plaunamas druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu) ir koncentruojamas vakuume. Nešvarus produktas gryninamas ekspres-chromatografi jos būdu (40 g Merck silikagelio, 1:5:94 acto rūg-štis/metanolis/metileno chloridas) ir gaunama 154 mg baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. ternp. 150-152 °C; [oc_j = -156° (c = 0,50, metanolis). TLC (1:5:94 acto rūg-štis/metanoli s/metileno chloridas) Rt , - 0,28. HPLC: tD -K (YMC, S-3 ODS (C-18) 6,0x150 mm; 1,5 ml/min,, tiesinis gradientas 0-100% daugiau negu 30 rainučių; buferis A = metanolis/vanduo/ fosforo rūgštis (10:90:0,2), buferis B = metanolis/vanduo/- fosforo rūgštis (90:10:0,2)) = 14,69 min., daugiau negu 95% bendro piko ploto, kai JI- 254 nm.

[0487] Analizė: išskaičiuota pagal ci2H18N2°4^2 " ^ ^ CH_^CO_^H:

[0488] f4S-[ 4 ( R*), 7 , 9afl]]- Oktahidro- 4-[ 3- ciklopropil- 2- merkapto-- 1- oksopropil) amino] - 5- oksopirol [ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0489] a) ( R)- 2- f f ( Fenilmetoksi) karbonilĮaminoĮ- 4- penteno rūgštis D-alilglicino (2,8 g, 24,3 mmol), 1M vandeninio natrio

[0490] hidroksido tirpalo (25 ml) ir tetrahidrofurano (10 ml, nudis-tiliuoto nuo ketilo) mišinys maišomas kambario temperatūroje tol, kol jis pasidaro homogeninis, o tada atšaldomas ledo vonioje. Į gautą mišinį, greitai maišant, pridedama apie 5 ml 1,0 M vandeninio natrio hidroksido tirpalo ir sulašinama apie 1 g benzilchlorformiato. Ši procedūra kartojama dar 4 kartus, kol pridedama 28 ml 1,0 M vandeninio natrio hidroksido tirpalo ir 4,80 g (95%, 27 mmol) benzilchlorformiato. Reakcijos miši-nys maišomas 15 minučių 0 °C temperatūroje ir 30 minučių kambario temperatūroje, tada ekstrahuojamas 50 ml eterio. Vandeninis sluoksnis rūgštinamas (pH = 1,5), pridedant 6N druskos rūgšties (apie 10 ml) ir ekstrahuojamas trimis porcijomis eterio po 50 ml. Šie trys eteriniai ekstraktai sumaišomi, džiovinami (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama 6,01 g bespalvės alyvos pavidalo norimo produkto.

[0491] b) ( R )- 2- į" f ( Fenilmetoksi ) karbonilĮ amino]- 4- penteno rūgšties feniimetllo esteris

[0492] Į produkto iš (a) stadijos (5,96 g, 23,9 mmol) tirpalą bevandeniame dimetilformamide (25 ml) kambario temperatūroje pridedama cezio karbonato (4,28 g, 13,1 mmol). Reakcijos mi-šinys maišomas 20 minučių, tada greitai pridedama benziio bromido (4,5 g, 2b,3 mmol) (reakcija šiek tiek egzoterminė) . Mi-šinys maišomas 30 minučių, pc to plakamas su 100 ml vandens ir 100 ml eterio mišiniu. Organinis sluoksnis atskiriamas, plaunamas trimis .porcijomis vandens po 100 ml, 50 ml druskos tirpalo, džiovinamas (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama alyva. Nešvari medžiaga valoma ekspres-chromaco-grafijos būdu (Merck silikagelis, 24x5,0 cm, 1:10 etilacetatas/heKsanas, po to 1:4 etilacetatas/heksanas) ir gaunama .6,13 g bespalvės alyvos pavidalo norimo produkto.

[0493] c) ( R)- q- j Į ( Fenilmetoksi) karbonil] aminoĮciklopropanpropano rūgšties fenilmetilo esteris

[0494] Į produkto iš (b) stacijos.(5,78g , 17,1 mmol) tirpalą bevandeniame eteryje (60 ml) pridedama paladžio(II) acetato (65 mg, 0,29 mmol) ir maišoma 10 minučių. Gautas mišinys at-šaldomas iki 0 °C ir per maždaug 15 minučių dalimis pridedamas eterinio diazometano (pagaminto iš 12 g N-metil-N'-nitro-N-nitrozcguanidino/120 ml eterio) perteklius. Reakcijos miši-nys maišomas 15 minučių, po to skaldomas, pridedant 1 ml le-dinės acto rūgšties. Tirpalas supilamas į dalinamąjį, piltuvė-lį, plaunamas 100 ml sotaus vandeninio natrio bikarbonato tirpalo, 50 ml druskos tirpalo, džiovinamas (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama geltona alyva. Nevalyta medžia-ga gryninama ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis, 20x5,0 crn, 1:4 etilacetatas/heksanas), ir gaunama 5,74 g bespalvės alyvos pavidalo norimo produkto. d) ( R)-( <x- Amino) ciklopropanpropano rūgštis

[0495] Į produkte iš (c) stadijos ( 5,71 g, 16,2 mmol) tirpalą metanolyje (75 ml) pridedama paladžio ant anglies katalizatoriaus (±0%, 1,14 g), ir vandenilio atmosferoje (balionas) ir kambario temperatūroje maišoma 48 valandas. Reakcijos mišinys filtruojamas, kad būtų atskirtas katalizatorius, o katalizatorius plaunamas šiltu vandeniu. Filtratas perleidžiamas per 0,4 jttm polikarbonatinį įmembraninį filtrą. Sukoncentravus fil-tratą vakuume, gaunama 2,03 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto.

[0496] Produkto iš (d) stadijos (2,00 g, 15,5 mmol) ir 2,5 N

[0497] sieros rūgšties (30 mi) mišinys maišomas kambario temperatū-roje tol, kol pasidaro homogeninis, c tada atšaldoma iki -S °C. Į šį tirpalą iš karto pridedama kalio bromido (6,50 g, 54,6 mmol). Mišinys maišomas tol, kol pasidaro homogeninis. Tada mažomis porcijomis maždaug per 25 minutes pridedama natrio 'nitrito (1,60 g, 23,2 mmol), palaikant reakcijos temperatūrą žemiau 0 °C. Reakcijos mišinys maišomas dar 1 valandą 0 °C temperatūroje, po to 1,5 valandos - kambario temperatūroje. Susidarąs mišinys praskiedžiamas 30 ml vandens ir ekstrahuojamas trimis porcijomis eterio po 30 ml. Sumaišyti eteriniai ekstraktai plaunami 25 ml druskos tirpalo', džiovinami (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama 2,82 g gelsvos alyvos pavidalo nevalytos ( R )-(OC-brom) ciklopropanpropano rūg-šties .

[0498] Šios nevalytos ( R )-(oC-brom) ciklopropanpropano rūgšties tirpalas acetonitrile (10 ml) per 5 minutes supilamas į mai-šomą kalio tioacetato (1,83 g, 16,1 mmol) suspensiją acetonitrile (20 ml), šaldant ledo vonioje. Reakcijos mišinys maišo-mas 0 °C temperatūroje 1 valandą, po to kambario temperatūro-je - 16 valandų. Reakcijos mišinys nufiltruojamas, ir sukoncentravus filtratą vakuume, gaunama alyva. Alyva suplakama su 50 ml eterio ir 50 ml 5% vandeninio natrio tiosulfato tirpalo mišiniu. Organinis sluoksnis atskiriamas, plaunamas 25 ml druskos tirpalo, džiovinamas (magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama geltona alyva. Nevalyta medžiaga gryninama ekspres-chrcmatografi jos būdu (Merck silikagelis, 12x5,0 cm, 1:19 metanolis/metileno chloridas), ir gaunama 1,52 g geltonos alyvos pavidalo norimo produkto.

[0499] f) |" 4S-| 4cx( R*), 7of, 9af3l] - Oktahidro- 4- Į | 2-( acetiltio)- 3- ciklopropil- l- oksoprcpilĮamino] - 5- oksopirolf 2, 1- b] Į1, 3 Įtiazepin-- 7- karbcksilo rūgšties metilo esteris

[0500] Į j"4S-(4a,7cc, 9 a B) j -ok tahidro-4-amino-5-oksopirol [2, l-'o] - [l,3jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio p-toluol-sulforūgšties druskos (250 mg, 0,60 ramol, pagamintos iš me-džiagos, aprašytos 5(d) pavyzdyje) metile.no chloride (3 ml, nudistiliuotas nuo kalcio hidrido), trietilamino (121 mg, 1,20 mmol) ir produkto iš (e) stadijos (122 mg, 0,65 mmol) metileno chioride (3 ml, nudistiliuotas nuo kalcio hidrido) mišinį iš karto sudedamas benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino) - fosfonio heksafluorfosfatas (292 mg, 0,66 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 1 valandą, po to kambario temperatūroje - 1,5 valandos. Gautas mišinys suplakamas su 20 ml etilacetato ir 20 ml 1M vandeninio kalio bisulfato tirpalo mišiniu. Organinis sluoksnis atskiriamas, plaunamas 20 ml 5% vandeninio natrio bikarbonate tirpalo, 20 ml druskos tirpalo, džiovinamas "(magnio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama alyva. Nevalyta medžiaga gryninama ekspres-chromatografijos būdu (Merck silikagelis, 12x3,0 cm, 1:1 etilacetatas/heksanas), ir gaunama ĮSI mg baltų kietų putų pavidalo norime produkto.

[0501] g) f4S - | 4oc( R* ) , 7cx, 9al3ll - Ok tahidro- 4- f ( 3- ciklopropil- 2- merkapto- l- oksopropil) amino Į - 5- oksopirolf2, l- bį fl / 3~| tiazepin- 7- karbcksilo rūgštis

[0502] J produkto iš (f) stadijos (185 mg, 0,45 mmol) tirpalą metanolyje (3 ml) 10 minučių 0 °C temperatūroje leidžiamas argonas, o po to pridedama 1M vandeninio natrio hidroksido tirpalo (3 ml),per kurį. buvo leistas argonas 10 minučių. Reakcijos mišinys maišomas 2,5 valandos kambario temperatūroje, visą laiką leidžiant argoną, tada rūgštinamas, pridedant 20 ml 1M kalio bisulfato tirpalo ir ekstrahuojamas 20 ml etilacetato. Organinis ekstraktas plaunamas 20 ml druskos tirpalo, džio-vinamas (natrio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama dervinga medžiaga. Ši medžiaga trinama su bevandeniu eteriu, koncentruojama alyvos siurblio vakuume ir gaunama baltų putų pavidalo norimas produktas (121 mg); [<x] ^ - -103° (c - 0,23, metanolis). TLC (1:10:90 acto rūgštis/metanolis/'metileno chloridas) R, = 0,46. HPLC: tR (YMC S-3 ODS 6,0x150 mm; 1,5 ml./min, tiesinis gradientas 0-100% B daugiau negu 30 minučių, buferis A = metanolis/vanduo/fosforo rūgštis (10:90:0,2), buferis B =

[0503] = metanolis/vanduo/fosforo rūgštis (90:10:0,2))= 20,7 min., daugiau negu 97 % bendro piko ploto, esant ^ = 254 nm.

[0504] Analizė: išskaičiuota pagal C^5H22N204S2*®^ _H2°:

[0505] 19 pavyzdys

[0506] f 4S-{ 4( X, lot , 9aS)] - Oktahidro- 4-[ [ ( l- merkaptociklopentil) karbonil] amino] - 5- oksopirol [ 2, 1- bj [ l, 3jtiazepin- 7- karboksilo rūg-štis

[0507] Palaikant temperatūrą tarp -3 °C ir 0 °C, pagaminamas

[0508] ličio diizopropilamiao tirpalas iš diizopropilamino (5,4 ml, 38,5 nuncl) ir n-butilličio (2,5 M heksane, 15,4 ml, 38,5 mmol) tetrahidrofurane (17,6 ml) azoto atmosferoje. Pamaišius 15 minučių, per 25 minutes, esant 0-3 °C temperatūrai, pridedama ciklopentankarboksilo rūgštis (2,0 g, 17,5 mmol) tetrahidrofurane (2 ml). Palaikius 15 minučių 0 °C temperatūroje, šal-dančioji vonia pašalinama, ir reakcijos mišinys maišomas dar 15 minučių, leidžiant temperatūrai pakilti iki 15 °C. Baltas, kaip pienas, tirpalas atsv aldomas iki -78 ^OC ir palaikant sią temperatūrą, pridedama kietos sieros (S0O, 618,0 mg, 19,3 mmol). Reakcijos mišiniui leidžiama sušilti iki kambario temperatū-ros in situ. Po 70 valandų, reakcijos mišinys atšaldomas iki 0 °C, skaldomas vandeniu (pH 8-9) ir greitai parūgštinamas iki pH 1 5N druskos rūgštimi. Vandeninis tirpalas ekstrahuojamas acilacetatu ( 3x30 ml) , plaunamas druskos tirpalu, džio-vinamas ( magnio sulfatu), filtruojamas ir sukoncentravus, gaunama 2, 62 g geltonos alyvos pavidalo norimo produkto.

[0509] Į produkto iš ( a) stadijos ( 1, 44 g, 9, 39 mmol) tirpalą ir ĮN nacrio hidroksido tirpalą ( 20 ml, 15, 7 mmol), per kurį leistas azotas, 0 °C temperatūroje pridedama acto anhid-rido ( 0, 93 ml, 9, 89 mmol). Susidariusiai alyvai ištirpinti pridedama tetrahidrofurano ( 13 ml ) . Pamaišius vieną valandą 0 °C temperatūroje ( pH 7), reakcijos mišinys sušildomas iki kambario temperatūros, dar pridedama acto anhiaridc ( 0, 47 ml, 4, 9 mmol), o taip pat ir kieto kalio karbonato ( 2, 04 g, 14, 8 mmol) iki pH 10, bei tetrahidrofurano ( 4 ml). Pamaišius per naktį kambario temperatūroje, reakcijos mišinys parūgštinamas iki pH 1 1N druskos rūgštimi ir ekstrahuojamas etilacetatu. Etilacetato ekstraktai sumaišomi, plaunami druskos tirpalu, džiovinami ( magnio sulfatu), filtruojami ir sukoncentravus vakuume, gaunama geltona kieta medžiaga ( 1, 61 g). Ši medžiaga perkristalinama du kartus iš etilacetato/ heksano, ir gaunama 614 mg šviesiai rudos spalvos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 119, 5- 121, 5 °C.

[0510] c ) [~ 4S -( 4<x , 7cx , 9aQ ) | - Oktahidro - 4 - j jl - f ( acetiltio ) ciklopentilĮ - karbonil Į amino ] - 5 - oksopirol j " 2 , 1 - b ] j 1 , 3 "] tiazepin - 7 - karboksilo rūgšties metilo esteris

[0511] Į produkto iš ( b) stadijos ( 94, 5 mg, 0, 502 mmol) tirpalą metileno chloride ( 3, 6 ml) 0 °C temperatūroje ir azoto atmos-

[0512] feroje pridedama trietilamino ( 70^. 1, 0, 502 mmol), po to [ 4S-- ( 4 c*, 7<X/ 9afl)] - 4- amino- oktahiaro- 5- oksopirol [ 2 , 1- b j Ql, 3 J tiazepin- 7 - karboksilo rūgšties metilo esterio p- toluolsulforūgšties druskos ( pagamintos iš medžiagos, aprašytos 5( d) pavyzdyje,

[0513] 198, 9 mg, 0, 478 tTumol), pridedant ją visą iš karto, o do t- o dar trietilamino ( 66, 6 jm 1 , 0, 478 mmol). Reakcijos mišinys maišo-

[0514] mas 5 minutes 0 °c temperatūroje. Tada pridedama kieto benzotriazol- l- iloksitris( dimetilamino) fosfonio heksafluorfosfato ( 222, 0 mg, 0, 502 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C tempe-ratūroje 1 valandą, po to kambario temperatūroje - 2, 25 vai. Reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, o liekana suplakama su etilacetato ir 5% kalio bisulfato (20 ml) mišiniu. Organinis sluoksnis plaunamas pusiau prisotintu natrio bikarbonato tirpalu ir druskos tirpalu, džiovinamas (magnio sulfatu), filtruojamas ir sukoncentruojamas iki skaidrios alyvos. Išva-lius ekspres-chromatografi jos būdu, eliuuojant 11:9 etilacetatu/heksanu, gaunama 169,3 mg skaidrios alyvos pavidalo norimo produkto.

[0515] d) | 4S-( 4tf, 7( x, 9alf)" j - Oktahidro- 4- j" f ( 1- merkaptociklopentil) - karbonil į amino j- 5- oksopirolf 2, 1— b į Įl, 3| tiazeoin- 7- karboksilo rūgštis

[0516] Produkto iš (c) stadijos (167,3 mg, 0,404 mmol) tirpalas metanolyje (4 ml, iš kurio, burbuliuojant azotą, pašalintas deguonis) atšaldomas iki .0 °C ir veikiamas lN natrio hiaroksidu (4 ml, iš kurio, burbuliuojant azotą, pašalintas deguonis). Pamaišius 1,5 valandos 0 °C temperatūroje visą lai-ką leidžiant azotą, reakcijos mišinys sušildomas ikį kambario temperatūros. Praėjus iš viso trims valandoms, mišinys rūgštinamas iki pH 1 5%-niu kalio bisulfatu ir ekstrahuojamas etilacetacu. Organiniai sluoksniai sumaišomi, plaunami vandeniu (20 ml), druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama, koncentruojama vakuume ir nugarinus, vis pridedant heksanų, gaunama balta kieta medžiaga. Junginys tirpinamas aioksane (bevandenis) ir liofilizuojamas; gaunama 110 mg baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; [<*] -106,5° (c = 0,63, chloroformas). TLC (7:2,5:0,1, etilacetatas/heksanas/acto rūgštis) RI „ = 0,12. HPLC: t r\ = 21,5 min;

[0517] YMC S-3 ODS (C-18) 5,0x150 mm; 0 % iki 100 % B: A, 30 min. tiesinis gradientas ir 10 min. sulaikymas, 1,5 ml/min.; A = 90% vandens/10% metanolio + 0,2% fosforo.rūgšties, B = 90% metanolio/10% vandens +0,2 % fosforo rūgšties; 220 nm. Analizė: išskaičiuota pagal C]_5H22N2°4S2 • ^ C₄H₈^_2"^_'^ H_-0. .0,08 C,H,„: 6 14

[0518] 20 pavyzdys

[0519] [ 4S-( 4cx, 7c<, 10a6)]- 4-[( 2- Karboksi- l- okso- 3- fenilpropil) amino] — oktahidro- 5- okso- 7H- pirido [ 2 , 1- tT] [ l, 3]] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0520] a) 3-( Fenilmetil) prooandioinės rūgšties monoetilo esteris

[0521] 3-(Feailmeiil)propandioinės rūgšties dietilo esteris (2,5 g, 10 mmol) 10-je rnl tetrahidrofurano maišomas per nak-tį su 10 ml 1N ličio hidroksido. Reakcijos mišinys parūgšti-namas il ml 1N druskos rūgšties ir ekstrahuojamas dviem 50 ml etilacetato porcijomis. Etilacetato ekstraktai plaunami druskos cirpalu, džiovinami (natrio sulfatu) ir koncentruojami vakuume. Koncentratas chromatografuojamas per silikagelį (30 g), naudojant 5% metanolis:chloroformas tirpiklių siste-mą. Atitinkamos frakcijos sumaišomos ir sukoncentravus, gaunama 1,23 g norimo produkto.

[0522] b) j 4 S — ( 4of, 7cx, i0af3 ) Į - 4 - ["( 2 - ( E toksi karbonil) - 1 - ok so- 3- fenii-propi i ) amino"] oktahidro- 5- okso- 7H- oirido f2, i- bĮ i, 3jtiazepin-- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0523] Produktas iš (a) stadijos ( 0 ,222g, i mmol) ir fe S-( 4*, 1<X , - 10aB ) j -oktahidro-4-aminc-5-ckso-7H-pirido [2 ,1-bJ |_1, 3j tiazepin-7-karbcksilo rūgšties metilo esteris (Q,258 g, 1 mmol, pagamintas pagal 3(c) pavyzdyje aprašytą metodiką) ištirpina-

[0524] mi metiieno chloride (5 ml) ir atšv aldoma iki 0 ^oC. Pridedama trietilamino (0,14 ml, 1 mmol), ir reakcijos mišinys maišomas vieną valandą. Pridedama benzotriazcl-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfato (0,442 g, 1 mmol), tirpalas maišomas 0 Q C temperatūroje 1 valandą ir kambario temperatū-

[0525] roje - 2,5 valandos. Reakcijos mišinys praskiedžiamas 50 ml metile:1.© chlorido ir plaunamas vandeniu, 10% natrio bisulfa-

[0526] tu, prisotintu vandeniniu natrio bikarbonatu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir sukoncentruojamas vakuume. Liekana chromatografuojama per silikagelį, naudojant 30 % etilacetatą heksanuose. Atitinkamos frakcijos sumaišomos ir sukoncentravus vakuume, gaunama 0,22 g norimo produkto.

[0527] c) | 4S-( 4tx, 7<y, 10a) 3)~[- 4-[ ( 2- Karboksi- l- ckso- 3- fenilprooil)-aminoĮ oktahidro- 5- okso- 7H- pirido | 2 , i- b~ Į fl r 3 Į t iazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0528] Produktas iš (b) stadijos (0,22 g, 0,476 mmol) maišomas kambario temperatūroje su 1N ličio hidrcksidu (5 ml) tetrahidrofurane (5 ml) 3 valandas. Reakcijos mišinys parūgštinamas iki pH 2 1N druskos rūgštimi ir koncentruojamas vakuume. Liekana ištirpinama etilacetate ir plaunama vandeniu, druskos tirpalu, džiovinama (natrio sulfatu) ir sukoncentruojama vakuume iki 3 ml (prasideda produkto kristalizacija). Palaikius 0 ?C temperatūroje per naktį, kieta medžiaga nufiltruojama ir išdžiovinus, gaunama 0,16 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 159-162 °C; [bcj = -84,92^

[0529] (c = • 0,7, metanolis). TLC (chloroformasrmetanolis, 9:1) R Lp = 0,23, 0,28. HPLC: t„ K =16,15, 16,35 min.? (UV 254 nrn); YMC S-3 ODS (C-13) 6,0x150 mm, 3į* galinė kolonėlė, tiesinis gradientas 50-90% vandeninio metanolio, turinčio 0,2% fosforo rūgš-ties, 20 min., 1,5 ml/min. (44,9% ir 55,1% izomerų mišinys). Analizė: išskaičiuota pagal C_~nH_,_N„SO_-.0,i H_0:

[0530] 20 24 2 b 2

[0531] 21 pavyzdys

[0532] [ 4S- j] 4a( R*), 7oc# 10a/ 3] £ - Oktahidro- 4- £ ( 2- merkapto- l- okso- 3- fenilpropil Jamino^ - 5- okso £ l, 4} oksazin [ 3 , 4- b] [ l, 3] tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0533] a) C - ( 2 , 2- dimetoksietil) - N- f* N- ["( f enilmetoksi ) karbonil Į - L-- homoseril|- L- serino metilo esteris

[0534] N-[0-[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]-N- [(fenilmetoksi)-karbonil]-L-homoseril]-O-(2,2-dimetoksietil)-L-serino metilo esterio (5,56 g, 10 mmol, pagaminto pagal 10(h) pavyzdyje aprašytą metodiką) tirpalas metanolyje (65 ml) atšaldomas iki 0 °C (ledo ir druskos vonioje), pridedama p-toluolsulforūgš-ties monchidrato ( 386 mg, 2,0 nunol) ir maišoma 0 °C tempera-tūroje 1,5 valandos. Reakcijos mišinys skaldomas natrio bikarbonato tiroalu (193 mq 20-je ml vandens), pamaišoma 5 minutes ir nugarinama, kad būtų pašalintas metanolis. Vandeninė fazė ekstrahuojama etilacetatu (2x200 ml), ir sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami vandeniu (110 ml) , 5% natrio bikarbonatu (80 ml) ir druskos tirpalu (80 ml), džiovinami (bevandeniu nat-

[0535] rio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džiovinama vakuume. Nevalytas produktas chromatografuojamas per silikagelio kolonėlą (Merck), kolonėlę eliuuojant etilacetato:heksano (2:1)

[0536] ir etilacetato:metanolio (S8:2) mišiniais, ir gaunama 3,975 g sirupo pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas ,

[0537] 4:1) R = 0,17.

[0538] b) O-( 2, 2- dimetiloksietil)- N- Į O-( metilsulfonil)- N - f ( fenilmetoksi) karbonilĮ- L- homoserill- L- serino metilo esteris

[0539] Produkto iš (a) stadijos (3,975 g, 8,98 mmol") tirpalas sausame metileno chloride (52 ml) atšaldomas iki -15.°C, veikiamas trietilaminu (1,82 ml, 13,1 mmol) ir metansulfochlori-du (0,32 ml, 10,6 mmol), ir -15 °C temperatūroje maišoma 30 mi-nučių. Reakcijos mišinys skaldomas 25% amonio chloridu (19 ml), sušildomas iki kambario temperatūros ir praskiedžiamas etilacetatu ( 750 ml) . Organinė fazė plaunama 5% kalio bisulfatiu (100 ml), 50% prisotintu druskos tirpalu (100 ml) ir prisotintu druskos tirpalu (100 ml), džiovinama (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir išdžiovinus vakuume, gaunama 4,9 g vaško pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas :heksanas, 4:1) Rf = 0,32.

[0540] c) N- įS- acetil- N- f( fenilmetoksi) karbonilĮ- L- homocis teini!-] -- O-( 2 , 2- airnetoksietil)- L- serino metilo esteris

[0541] Į tioacto rūgšties (2,6 ml) tirpalą sausame metanolyje (40 ml) pridedama cezio karbonato (5,56 g, 17,04 mmol), maišo-ma 10 minučių ir sausai nugarinama. Gauta kieta medžiaga trinama acetone (7x8 ml) ir susidariusi nevisai balta kieta me-džiaga džiovinama vakuume; gaunama 4,39 g cezio tioacetato.

[0542] Cezio tioacetato (2,43 g, 1,3 ekv.) suspensija sausame dimetilfcrmamiae (8,0 ml) veikiama produkto iš (b) stadijos (4,9 g, 3,98 mmol) tirpalu sausame diraetilformamide (24 ml) ir maišoma argono atmosferoje ir kambario temperatūroje 16 va-landų. Mišinys praskiedžiamas etilacetatu (1 1), plaunamas iš eilės 5% natrio bikarbonatu (2x150 ml), vandeniu (2x150

[0543] ml) ir druskos tirpalu (150 ml), džiovinamas (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džiovinama vakuume. Nevalytas produktas chromatografuojamas per silikagelio kolonėlę (Merck), kolonėlę eliuuojant etilacetato:heksano mišiniais (1:1, 2:1), ir gaunama 3,93 g vaško pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 4:1) R? = 0,63.

[0544] d) 0-( 2, 2- dimetoksietil)- M- į N- Į( fenilmetoksi) karbonill - L-- homocisteinil]- L- serino metilo esteris

[0545] Į produkto iš (c) stadijos (200 mg, 0,49 mmol) tirpalą metanolyje (8,0 ml) 30 minučių leidžiamas argonas, atšaldoma iki 0 C (ledo ir druskos vonioje) ir veikiama 25% natrio metoksiau metanolyje (0,11 ml, 0,5 mmol), leidžiant argoną

[0546] tol, kol supilamas natrio metoksidas ir kol vykdoma reakcija. Palaikius 5 minutes 0 °C temperatūroje, mišinys skaldomas 25% amonio chloridu (2,3 ml) ir suplakamas su etilacetatu (2x12

[0547] ml) ir vandeniu (2,3 ml) , Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami 25% amonio chloridu (4,6 ml) ir druskos tirpalu (4,6 ml), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir išdžiovinus vakuume, gaunama 183,2 mg baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas :heksanas, 4:1) R = 0,62.

[0548] e) j45-( 4c<-, 7fr, 10a6) 1 - Oktahidro- 5- okso- 4- f f ( f eni lmetoksi ) - karbonill amino] i 1, 4"| oksazin [ 3 , 4- b ) ji, 3 tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0549] Produkto iš (d) stadijos (50 mg, 0,11 mmol) tirpalas sau-šame metileno chloride (2,0 ml) veikiamas derva Amberlyst ( b) 15 (H+ forma; 13 mg), maišoma kambario temperatūroje ir argono atmosferoje 3 dienas, pridedama daugiau Amberlyst^® 15 (13 mg) ir maišoma dar 3 dienas. Tirpalas nudekantuojamas ir chromatograf uo jamas per silikagelio kolonėlę (_Merck), kuri eliuuojama etilacetato:heksano mišiniais (1:3; 1:1), ir gaunama 21,1 mg sirupo pavidalo norimo produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 4:1) Rf = 0,70.

[0550] f) | 4S-( 4a, 7c<, 10aB)' 1 - Q:<tahidro- 4- anuno- 5- oksori ?4icksazin-Į 3 , 4- b~| Į 1 , 3 [ c. iazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0551] Produkto iš (e) stadijos (421 mg, 1,01 mmol) tirpalas sausame metilenc chloride (25 ml) veikiamas triraeti1 si 1 i 1jo-diau (0,72 ml, 5,06 mmol) ir argono atmosferoje ir kambario temperatūroje maišomas 1,75 valandos. Mišinys sausai nugarinamas, c gautas sirupas suplakamas su etilo eteriu (50 ml)

[0552] ir 0,2 N" druskos rūgštimi (2x25 ml) . Vandeninė fazė pašarmi-nama iki pH 10 sočiu natrio bikarbonatu (25 ml), pridedama kieto natrio chlorido (2,0 g) ir išekstrahavus metileno chloridu (3x75 ml), gaunama 219 mg sirupo pavidalo norimo produkto. Dar kartą pridėjus natrio chlorido (2,0 g) į vandeniną fazą ir vėl išekstrahavus metilemo chloridu (2x100 ml), gaunama dar 37 mg norimo produkto. TLC (metileno chloridas:metanolis, 5:1) R_^ = 0,23.

[0553] g) [ 4S- j4oc( R*) 7g, 10a/ 3] Į - Oktahidro- 4 - Į f2-( acetiltio)- l- okso-- 3- fenilorcpii] arui no Į - 5- oksori / 4" joksazinĮ" 3, 4- bĮ fl, 3 jtiazepin-- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0554] (S)-2-(acetiltio)benzoiprcpanc rūgšties dicikloheksilamino druska (515 mg, 1,32 mmol, 1,2 ekv. ) suspenduojama etilacetate (42 rni) , plaunama 5% kalio bisuifatu (5>:6,0 ml) ir druskos tirpalu (6,0 ml), džiovinama (bevandeniu magnio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džiovinama vakuume.

[0555] Laisva rūgštis ištirpinama sausame metileno chloride (9,5 ml), atšaldoma iki 0 °C (ledo ir druskos vonioje) ir veikiama iš eilės produkto iš (f) stadijos (285,5 mg, 1,09 mmol) tirpalu sausame metileno chloride (4,2 ml), _trietilaminu (0,14 ml, 1,15 mmol) ir benzotriazol-i-iioksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (484 mg, 1,09 mmol). Reakcijos mišinys mai-šomas kambario temperatūroje 1,0 valandą ir kambario tempera-tūroje 2,0 valandas, leidžiant argoną, o tada sausai nugarinamas. Likąs sirupas tirpinamas etilacetate (40 ml), plaunamas 0,5 N druskos rūgštimi (2x6,6 ml), vandeniu (6,6 ml) ir druskos tirpalu (6,6 ml), džiovinamas (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džiovinama vakuume. Nešva-rus produktas chromatografuojamas per silikagelio kolonėlę (Merck), eliuuojant etilacetato:neksano mišiniais (1:2; l:i), ir gaunama 382,5 mg sirupo pavidalo norime produkto. TLC (etilacetatas:heksanas, 1:1) Rc = 0,28.

[0556] J.

[0557] h ) {~ 4S-[ 4( R*), 7ĮX, 10al3i" l - Oktahidro- 4- f ( 2- merkapto- l- okso- 3-- feniipropil) aminoĮ- 5- oksoj 1, 4| oksazinf3, 4- b] Į 1, 3 tiazepin-- 7- karbok5ilo rūgštis

[0558] Į produkto iš (g) stadijos ( 332,S mg, 0,82 raraol) tirpa-lą metanolyje (9,0 ml) 30 minučių leidžiamas argonas, atšal-doma iki 0 °C (ledo ir druskos vonioje) ir pridedama 1,0 N natrio hidroksido (3,32 ml, 4,0 ekv.; per tirpalą 30 minučių buvo leistas argonas), leidžiant argoną tol, kol supilamas natrio hidroksidas ir kol vykdoma reakcija. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 5,0 valandas ir kambario tempera-tūroje - 1 valandą, parūgštinamas iki pH 2,0 5% kalio bisulfatu (14,5 ml), sušildomas iki kambario temperatūros ir ekstrahuojamas etilacetatu (2 x 50 ml). Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami druskos tirpalu (10 ml), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojama, sausai nugarinama ir džio-vinama vakuume. Gautas sirupas nugarinamas du kartus pridedant neksano (25 ml), ir gautos kietos putos chromatografuoja-mos per silikagelio kolonėlę (Merck), kuri eliuuojama toluolo: acto rūgšties mišiniais (100:1, 50:1, 20:1), ir gaunama 212 mg kieto norimo produkto; lyd. temp. 224-226 °C; [fc] D = -50,2°

[0559] (c = 0,45, metanolis). TLC (toluolas:acto rūgštis, 5:1) R_ t = 0, 28.

[0560] HPLC: t_ I\. = 5,37 min. (UV 220 nm) (98,9%); YMC S-3 ODS (C-18) 6 150 mm; 60% (10% vandens-90% metanolio-0,2% fosforo rūg-šties) / 40% (90% vandens-10% metanolio-0,2% fosforo rūgšties), izokratškai.

[0561]

[0562] 22 pavyzdys

[0563] [ 4S- [ 4 <X( R* ) , To^ LOaC] :]- Oktahidro- 4- [ ( 2- merkapto- l- okso- fT- f enil-propil) amino]- 5- okso- 7H- pirido[ 2, 1- b] [ 1, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0564] Produktas, aprašytas 3 ir 11 pavyzdžiuose, buvo gautas dar ir taip:

[0565] L4S-( 4cx, 7cx,10aG)J -Oktahidro- 4-amino- 5-okso- 7H-pirido[ 2,l-bj -

[0566] [l,3jtiazepin- 7-karboksilo rūgšties metilo esteris ( 6,lig) iš-tirpinamas etiiacetate (apie 100 ml) ir veikiamas p-toluolsul-forūgšties monohidrato ( 4, 52 g) tirpalu metanolyje (3 ml) ir etiiacetate ( 20 ml). Tuoj pat susidaro nuosėdos. Mišinys skie-džiamas, pridedant etilacetato, ir kieta medžiaga nufiltruojama. Kieta medžiaga plaunama etilo eteriu ir išdžiovinus vakuume, gaunama 7, 908 g gelsvos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto, kurio grynumas yra 58% ; lyd. temp. 179- 181 °C (skyla).

[0567] b) Į4S- j4o(.( R*), 7cct10afl| i - Oktahidro- 4 - j į2-( acetiitio)- l- okso-- 3- f er. ilpropil] arai no] - 5- okso-' 7H- piridoį 2 , i — b į Į 1, 3] tiazepin- 7-- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0568] Produkto iš (a) stadijos (636 mg, 1,48 mmol) suspensija metilenc chloride (5 ml) ir dimetilformamide (1 ml) veikiama N-metilmorfolinu (163 y*11, 150 mg, 1,43 mmol), o po to 1-hidroksi-7-azabenzotriazolu (208 mg, 1,52 mmol). Ryškiai gelto-

[0569] nas tirpalas veikiamas (S)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšti-mi ( 333 mg, 1,48 mmol) metilerro chloride (5 ml) ir šaldomas ledo vonioje. Pridedama etil-3-(dimetilamino)propilkarbodiimido hidrochlorido (2,88 mg, 1,50 mmol), ir mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 1 valandą ir kambario temperatūroje - 1,5 valandos. Tirpiklis nugarinamas rotoriniu garintuvu, o liekana suplakama su etilacetatu ir 0,5 N druskos rūgštimi. Etilacetato ekstraktas plaunamas iš eilės vandeniu (du kartus), 50 % prisotintu natrio bikarbonatu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojama ir nugarinus, gaunama 651,2 mg baltų putų pavidalo norimo produkto.

[0570] c) į4S- j4ęX( R*), 7<3(, 10aG| j - Oktahidro- 4 - Į ( 2- merkapto- l- okso- 3-- fenilprcpil) aminol- 5- ok5Q- 7H- piridor2, l- bį 1/ 3Į tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0571] Produkto iš (b) stadijos metilo esterio tirpalas metanolyje, iš kurio pašalintas deguonis, veikiamas lN natrio hidroksidu pagal 3(d) pavyzdyje aprašytą metodiką ir gaunamas norimas produktas.

[0572] 23 pavyzdys

[0573] [ 4S-[ 4<*( R*), 7a, lOafi] ] - Oktahidro- 4- [( 2- raerkapto- l- okso- 3- fenilpropil) amino)- 5- okso- 7H- pirido[ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0574] Produktas, aprašytas 3, 11 ir 22 pavyzdžiuose, buvo gautas dar ir taip:

[0575] 2 1 talpos kolboje, kurioje įtaisytas mechaninis maišik-lis ir vidinis termometras, ištirpinamas natrio hidroksidas (61,65 g, 1,541 mol) distiliuotame vandenyje (1000 ml). Į šį tirpalą kambario temperatūroje pridedama L-metionino (100,0 g, 0,670 mol). Tirpalas atšaldomas ledo vonioje (mišinio tempe-ratūra kolbos viduje 3 °C) ir per 10 minučių sudedamas ben-zilchlorformiatas (110 ml, 0,737 mol). Po 15 minučių indukci-jos periodo, temperatūra kolbos viduje per 30 minučių pakyla iki 12 °C, o po to vėl nukrenta iki 0 °C per 15 minučių. Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 2 valandas; per šį laiką iš pradžių vietomis drumstas reakcijos mišinys tampa homogeniniu. Ledo vonia pašalinama,ir per i valandą leidžia-ma reakcijos mišiniui sušilti iki kambario temperatūros. Tada mišinys perpilamas į dalinamąjį piltuvą ir plaunamas heksanu (2 x 300 ml). Vandeninis sluoksnis parūgštinamas 6N druskos rūgštimi iki pH 5 ir praskiedžiamas etilacetatu (600 ml). Miši-nys dar parūgštinamas iki pH 2. Organinis sluoksnis atskiriamas , o vandeninis sluoksnis ekstrahuojamas etiiacetatu (3 x 600 ml). Organiniai ekstraktai sumaišomi ir plaunami druskos tirpalu (750 ml), džiovinami (magnio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama gelsva alyva. Nešvarus produktas (alyva) ištirpinama toluole (1500 ml), ir tirpalas sukoncentruojamas iki pusės tūrio. Pridedama kita toluolo porcija (750 ml) ir koncentruojama tol, kol lieka 630 ml toluolo. Šis tirpalas laikomas 5 °C temperatūroje per naktį; per šį laiką iš tirpalo išsikristalina produktas. Kieta medžiaga ištirpinama, sušildant iki kambario temperatūros. Tada pridedama toluolo (134 ml) (lieka keletas kristaliukų kristalizacijos centrų sudarymui). Mechaniškai maišant, kas 10 minučių 30 ml porcijomis pridedama heptano (500 ml) (visas kiekis sudedamas apytikriai per 3 valandas). Praėjus šiam laikui, iš tirpalo pradeda kristalintis produktas. Pridedama dar viena heptano porcija (1020 ml) per 1,5 valandos, ir gauta suspensija maišoma 2 valandas. Produktas surenkamas, filtruojant vakuume, plaunamas 1:2 toluolu:heptanu (3 x 150 ml) ir hepta-nu (3 x 500 ml), ir išdžiovinus ore, gaunama 158,6 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 66 °C; [tfj p = 1,5° (c = 1, 95 % etanolis). 'TLC (etanolis : vanduo, 3:1) = 0,73.

[0576] i3 17 4

[0577] 3 1 talpos kolboje, kurioje įtaisytas mechaninis maišik-lis ir vamzdelis argonui įleisti, ištirpinamas produktas iš (a) stadijos (100,0 g, 0 , 353 mol) metanolyje (2 1) ir pridedama p-toluolsulforūgšties monohidrato (6,71 g, 0,035 mol). Reakcijos mišinys maišomas, leidžiant argoną, 21 valandą. Pridedama crietilamino (4,9 ml, 0,035 mol) ir reakcijos mišinys maišomas dar 15 minučių. _Sukoncentravus reakcijos mišinį vaku-me, gaunama gelsva alyva. Ši alyva ištirpinama etilacetate (900 ml), ir tirpalas plaunamas 1N druskos rūgštimi (740 ml), sočiu natrio bikarbonatu (2 x 740 ml) ir druskos tirpalu (740 ml) . Organinis sluoksnis džiovinamas (magnio sulfatu), filtruojamas ir sukoncentruojamas vakuume iki gelsvos alyvos. Ši alyva koncentruojama, pridedant heksano (2 x 100 ml), ir gaunama 98,22 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto .

[0578] c) N- Į ( Femlmetoksi ) karbonil] - L- metionino sulfoksido metilo esteris

[0579] 3 1 talpos kolboje su mechaniniu maišikliu ištirpinamas (b) stadijos produktas (97,95 g, 0,329 mol) metanolyje (1675 ral) ir distiliuotame vandenyje (215 ml) . Tirpalas atšaldomas ledo vonioje ir pridedama natrio bikarbonato (28,5 g, 0,339 mol). Mažomis porcijomis per 25 minutes, taip,kad temperatūra kolboje neviršytų 7 °C, pridedama N-chlorsukcinimido (44,0 g, 0 , 329 mol). Mišinys maišomas ledo vonioje .1 valandą, po to jam leidžiama sušilti iki kambario temperatūros per 1 valandą. Mišinys koncentruojamas vakuume tol, kol nugarinama apie 7 5 % metanolio, praskiedžiamas etilacetatu (1000 ml) ir plaunamas druskos tirpalu (500 ml). Druskos tirpalo sluoksnis vėl ekstrahuojamas etilacetatu (2 x 200 ml). Organiniai ekstraktai su-maišomi, džiovinami (magnio sulfatu), filtruojami ir koncent-tuojami vakuume, susidarant skaidriai, klampiai alyvai. Alyva koncentruojama, vis pridedant toluolo (3 x 100 ml), o likę tirpikliai pašalinami giliame vakuume; gaunamas nevalytas norimas produktas, kuris yra skaidri alyva, sukietėjanti į baltą kietą medžiagą (131,4 g). Nevalytame produkte, pagal BMR,yra 12 svorio procentų sukcinimido ir 9 svorio procentai toluolo. Produktas yra sulfoksido diastereomerų mišinys.

[0580] d ) S - j ( acetiloksi ) metilĮ - N- ["( fenilmetoksi ) karbonilĮ - L - homocis-teino metilo esteris

[0581] Į 1 1 talpos kolbą, kurioje yra produktas iš (c) stadijos (102,8 g koreguotas svoris, 0,328 mol), pridedama toluolo (480 ml), natrio acetato (32,3 g, 0,394 mol) ir acto rūgšties anhid-rido (1S6 ml, 1,970 mol). Gautas mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu (118 °C) argono atmosferoje 18 valandų. Tamsiai ru-das reakcijos mišinys paliekamas atvėsti iki kambario tempera-tūros. Pastovėjęs valandą kambario temperatūroje, mišinys labai sutirštėja dėl susidariusių kietos medžiagos kristalų. Sie kristalai ištirpinami etilacetate (100 ral), ir mišinys dali-nai sukoncentruojamas vakuume, susidarant rudai liekanai. Liekana koncentruojama, pridėjus toluolo (240 ml), kad būtų pa-šalintas acto rūgšties anhidridas; praskiedžiama etilacetatu (1000 ml) ir kruopščiai plaunama prisotintu'natrio bikarbonatu (4 x 680 ml). Organinis sluoksnis plaunamas druskos tirpalu (450 ml), džiovinamas (magnio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas vakuume. Liką tirpikliai pašalinami giliame vakuume, ir gaunama rusva kieta medžiaga. Nevalytas produktas tirpinamas n-butilacetate (450 ral), šildant (35 ) ir mai-šant. Atšaldžius iki kambario temperatūros, maišant,per 15 mi-nučių į tirpalą lėtai pridedama heksano (200 ml). Šiuo metu iš tirpalo pradeda kristaiintis produktas. Per 30 minučių pridedama dar papildoma heksano porcija (700 ml), ir susidariusi suspensija maišoma 3 valandas. Produktas nufiltruojamas ir plaunamas 1:2 n-butilacetatu:heksanu (200 ml), 1:4 n-butilace-tatu:heksanu (2 x 240 ml) ir heksanu (2 x 250 ml). išdžiovinus produktą ore, o po to giliame vakuume, gaunama 87,7 g rusvos kietos medžiagos pavidalo norimo produkte; lyd. temo. 73 °C; [#] d = -1,6° (c = 1, 95% etanolis). T_LC (5% metanolis/metile-

[0582] no chloride) R? = 0,30. Analizė: išskaičiuota pagal C,,H_,NO,-S:

[0583] 16 21 o

[0584] e) S- acetil- N- f( fenilmetoksi) karbonil]- L- homocis teinąs

[0585] Į produkto iš (d) stadijos (33,0 g, 0,233 mol) tirpalą tetranidrefurane, esantį. ■ 1 1 taipos kolboje, 30 minučių lei-džiamas argonas. Atskiroje 2 1 talpos kolboje su mechaniniu raaišikliu ir vamzdeliu leisti argonui esantis 86,8% kalio hidroksido tirpalas (62,7 g, 0,969 mol) distiliuotame vandenyje taip pat valomas, leidžiant argoną 15 minučių.

[0586] Į kalio hidroksido tirpalą (temperatūra kolboje 20 ^QC) greitai, per piltuvėlį, intensyviai maišant argono atmosferoje pridedamas tetrahidrofurano tirpalas. Kolba, kurioje bu-vo produkto iš (d) stadijos tirpalas, perskalaujama 20 ml tetrahidrofurano (valyto, leidžiant argoną 15 minučių) ir jis supilamas į reakcijos mišinį. Praėjus 30 minučių, reakcijos mi-šinys pasidaro skaidrus ir bifazinis ir įšyla iki 28 °C.

[0587] Praėjus dar 2 valandoms, reakcijos mišinys atšaldomas iki 1 °C (kolbos viduje) ir iš karto sudedamas natrio borhia-ridas (2,75 g, 0,073 mol) (įšv yla iki 6,8 C C). Reakcijos miš*i-nys maišomas 0 °C temperatūroje dar 20 minučių ir tada per 30 minuč„ i. ų leidžiama pakilti temperatūrai iki 11 ^oC. Reakcijos mišinys atšaldomas iki 1 °C ir per 10 minučių supilamas acto rūgšties anhidridas (68,6 ml, 0,727 mol). Pilant anhidridą, temperatūra pakyla iki 10 °C. Prieš baigiant pilti anhidridą temperatūra vėl nukrenta iki 4 °C. Šaldančioji vonia pašali-nama, ir reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje 45 minutes.

[0588] Reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume iki apytikriai pusės jo tūrio, parūgštinamas iki pH 2 6N druskos rūgštimi (175 ml) ir ekstrahuojamas etilacetatu (2 x 1,1 1). Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami druskos tirpalu (560 ml). Organinis sluoksnis apdorojamas aktyvuota anglimi ir bevandeniu magnio sulfatu, filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama geltona alyva. Pridedama n-butilacetato ( 380 ml) ir tirpalas. koncentruojamas vakuume (45 °C) iki pusės jo tūrio. Pridedama antra n-butilacetato porcija (190 ml) ir vėl koncentruojama taip, kad liktų 190 ml n-butilacetato. Maišant, lėtai pridedama heptano (300 ml), kol atsiranda nedidelis drumstumas, ir pridedama kristaliukų kristalizacijos centrams sudaryti. Po 15 minučių iš tirpalo išsikriscalina balta kieta medžiaga. Per 30 minučių lėtai pridedama antroji heptano porcija ( 570 ml), ir susidariusi suspensija maišoma kambario temperatūroje per nak-tį. Produktas nufiltruojamas, plaunamas 1:3 n-butilacetatu:hep-tanu (2 x 275 ml) ir heksanu (2 x 275 ml), džiovinamas ore, po to - giliame vakuume ir gaunama 50,1 g baltos kietos medžia-gos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 73-74 °C; [ «. J Q = -1,3° (c = 1, 55 % etanolis). TLC (etanolis:vanduo, 3:1) R_^ = 0,83. _Analizė: išskaičiuota pagal S :

[0589] _filtratas sukoncentruojamas taip, kad liktų 100 ml butil-acecato. Šis tirpalas apdorojamas 310 ml heptano pagal aukš-

[0590] čiau aprašytą būdą,ir gaunama antroji 8,4 g porcija baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto. Bendra išeiga - 58,5

[0591] 9-£ ) fs-( R*/ R*)- 2- Į į" 4-( acetiltio)- l- okso- 2- r i ( f enilmetoksi ) - karbonil | amino] butil Į amino " j - 6 , 6- dimetoksiheksano rūgšties metilo esreris

[0592] S-acetil-N-į.( f en i 1 mėtok s i )karbonilj -L-homoci s teinąs (0,456 mol) ištirpinamas metileno chlorido (600 ml) ir dimetilformamido (_'90 ml) mišinyje ir pridedama hidroksibenzotriazolo hidra-to (64,72 g, 0,47S mol). Mišinys atšaldomas ledo vonioje, ir pridedamas ( S )-2-amino-6 , 6-dimeto'ksiheksano rūgšties metilo esterio (pagaminto pagal i(e) pavyzdyje aprašytą metodiką, 93,7 g, 0,456 mol) tirpalas metileno chloride (600 ml). Galų gals pridedama etil-3-( dime'tilamino) propilkarbodiimido hidrochlorido (91,83 g, 0,479 mol) ir reakcijos mišinys maišomas 0 C tempe-ratūroje vieną valandą ir kambario temperatūroje - 2 valandas. Po to, reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, o liekana suplakama su etilacetatu (3 1) ir sočiu vandeniniu'natrio bikarbonatu (i i). Organinis ekstraktas plaunamas vandeniu (1 1), 5% kalio bisulfatu (1 1), vandeniu (1 1) ir druskos tirpalu (1 1), džiovinamas (natrio sulfatu) ir sukoncentravus vakuume, gaunama 238 g nevalyto produkto. Nevalytas produktas tirpinamas etilacetate:metileno chloride (1:1, 300 ml) ir užpilamas ant 10x15 cm Merck silikagelio sluoksnio. Eliuuojant jį 8:2 etilacetatu: heksanu (7 1), o po to etilacetatu (4 1), gaunama 205,28 g norimo produkto.

[0593] g) i4S-( 4o<, 7o<, i0aP) l - Oktahidro- 4 - j f ( f enilmetoksi ) karbonil | amino Į -- 5- cksQ- 7H- piridOį2, 1- bJ fl, 3 įtiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esceris

[0594] Produkto iš (f) stadijos (205,28 g, 0,412 mol, išdžiovintas, _nugarinant tirpalą metileno chlorido/toluolo mišinyje) tirpalas metanolyje (2 1) atšaldomas iki 0 °C (ledo vonioje) ir per jį leidžiamas argonas 30 minučių. Leidžiant argoną, greitai pridedama 25 svorio % natrio rnetoksido tirpalo metanolyje (95,1 ml, 1,01 ekv. ), ir reakcijos mišinys maišomas dar 10 mi-nučių, tada skaldomas, pridedant 1 1 sotaus amonio chlorido tirpalo, praskiedžiamas 0,5 1 vandens ir veikiamas 3 1 etilacetato. Gautas mišinys padalinamas į dvi dalis, kurios ats-kirai koncentruojamos vakuume, kad būtų pašalinti organiniai tirpikliai (etilacetatas ir. metanolis). Sukoncentruotos liekanos sumaišomos ir veikiamos 1 1 etilacetato. Organinis sluoksnis atskiriamas ir skalaujamas 0,5 1 prisotinto amonio chlorido. Sumaišyti vandeniniai sluoksniai vėl ekstrahuojami 1 1 et;ilacetato. Organiniai ekstraktai sumaišomi ir plaunami 1 1 vandens ir dviem 1 1 porcijomis druskos tirpalo, džiovinama-, (natrio sulfatu), filtruojama ir koncentruojama. Liekana dar kartą nugarinama, pridėjus metileno chlorido, ir išdžiovinus vakuume, gaunama 182,65 g (f) stadijos produkto, turinčio lais-vą sulfhidrilo grupę.

[0595] Šis tarpinis produktas su laisva sulfhidrilo grupe (0,400 mol) ištirpinamas metileno chloride (4 1) ir veikiamas 30,8 ml (0,400 mol) trifluoracto rūgšties. Reakcijos mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 16 valandų, atšaldomas ir koncentruojamas vakuume. Gauta liekana tirpinama 2 1 etilacetato, plaunama 400 ml 0,1 N druskos rūgšties, 1 1 vandens ir 1 1 druskos tirpalo, džiovinama (natrio sulfatu), filtruojama ir koncentruojama. Liekana nugarinama, pridėjus metileno chlorido, ir išdžiovinus vakuume, gaunama 166,24 g norimo produkto.

[0596] h) f4S-( 4#, 7( X, lQa/ 3)" l - Oktahidro- 4 - amino- 5- okso- 7H- pirido f 2 , lĮ - Į " l, 3" j tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0597] Jodtrimetilsilanas (76,6 ml, 0,538 mol) lašinamas argono atmosferoje į tirpalą, kuriame yra produktas iš (g) stadijos (162,43 g, 0,414 mol), ištirpintas metileno chloride (1,5 1). Pamaišius 1,5 valandos, reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, o liekana suplakama su 1 1 etilacetato ir 700 ml 1N druskos rūgšties (išsiskiria CO_^; pH 1,2). Etilacetato sluoksnis atskiriamas ir ekstrahuojamas 300 ml 1N druskos rūgšties. Sumaišyti rūgštūs vandeniniai ekstraktai plaunami dar 1 1 etilacetato, atšaldomi iki 0 °C ir šarminami. 4N natrio hidroksidu (apie 275 mi) iki pH 10,0. Vandeninis sluoksnis prisotinamas kietu natrio chloridu ir ekstrahuojamas penkiomis porcijomis po 1 1 metileno chlorido. Sumaišyti organiniai ekstraktai džio-vinami (natrio sulfatu), filtruojami ir koncentruojami vakuume. Liekana ištirpinama 1 1 metileno chlorido ir skalaujama 0,5 1 druskos tirpalo, džiovinama (natrio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 58,8 g norimo produkto.

[0598] i) Į 4S- f4oc( R* ) , lcx ., lOaB] Į - Oktahidro- 4 - [ \ 2 -( acetiltio)- 1- okso-- 3- f enilpropil] amino] - 5- okso- 7H- pirido j* 2 , 1- b Į ( l, 3| tiazepin- 7-- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0599] (S)- 2-(acetiltio) benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druska (173,1 g, 0,427 mol) plakama su etilacetatu (1 1) ir 10% kalio bisulfatu (800 ml). Organinis sluoksnis atskiriamas ir plaunamas 5% kalio bisulfatu (1 1), 50 % druskos tirpalu (1 1) ir sočiu druskos tirpalu (1 1), džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojama ir koncentruojama vakuume. Liekana keletą kartų nugarinama, pridedant metileno chlorido, po to džiovinama vakuume per naktį, ir gaunama 97,3 g nevalytos ( S )-2-( acetiltio ) benzolpropano rūgšties.

[0600] Šios (S)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties (0,427 mol) tirpalas metileno chloride (900 ml) atšaldomas ledo vonioje ir veikiamas produkto iš (h) stadijos (100,28 g, 0,388 mol) tirpalu metileno chloride (600 ml), trietilaminu (154,1 ml, 0,388 mol) ir ant galo benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu (188,9 g, 0,427 mol), kuris sudedamas iš karto. Palaikius valandą 0 °C temperatūroje ir 2 valandas kambario "tem-peratūroje, reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume ir ištir-pinamas 2 1 etilacetato. Organinis tirpalas koncentruojamas vakuume ir ištirpinama liekana 2 1 etilacetato. Organinis tirpalas plaunamas 0,5 1 druskos tirpalo, 1 1 0,5 N druskos rūgšties, 1 1 vandens, 2 1 sotaus natrio bikarbonato, 1 1 vandens ir 1 1 druskos tirpalo, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas. Šiuo momentu, perplovimo vandenys, kuriuose yra produkto (pagal plonasluoksnės chromatografijos duomenis), vėl ekstrahuojami etilacetatu. Etilacetato ekstraktai apdoro-jami įprastu būdu,ir viską sumaišius, gaunamas negrynas alyvos pavidalo produktas- Geltona alyva perleidžiama per 15x15

[0601] cm silikagelio sluoksnį, pagamintą 1:1 etilacetate:heksanuose, kuris eliuuojamas 7 1 1:1 etilacetatozheksanų, 4 1 6:4 etilacetato:heksaaų ir ant galo 2 17:3 eti lacetato: heksanų. Filtratai, kuriuose yra norimas produktas, koncentruojami, ir gaunama 123,57 norimo produkto.

[0602] j ) Į 4S- 4ęx( R* ) , 7oc, lOafiĮ ' j - Oktahiaro- 4- f ( 2- merkapto- l- okso- 3-- fenilpropilĮ amino] - 5- okso- 7H- pirido[ 2, l- b"| i" l, 3] tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0603] Į 12 1 talpos trigurklę kolbą su lašinamuoju piltuvėliu ir mechaniniu maišikliu supilamas produkto iš (i) stadijos (96,0 g, 0,207 mol) tirpalas metanolyje (1,1 1). Per tirpalą 30 minučių leidžiamas argonas, tada atšaldomas ledo vonioje, kad temperatūra kolboje būtų +7 °C. Per 1 valandą supilama iš viso 1,45 1 1N natrio hidroksido tirpalo (per tirpalą bu-vo leistas argonas 30 minučių). Dedant natrio hidroksido tir-palą, per reakcijos mišinį visą laiką leidžiamas argonas. Reakcijos temperatūra pakilo iki +12 °C ir per natrio hidroksido pridėjimo laiką išsilaikė ta pati. Reakcijos mišinys maišo-mas dar 30 minučių, tada sušildomas iki kambario temperatūros su paprasto vandens vonia ir, leidžiant argoną, maišoma 2,5 valandos. Per 15-20 minučių sulašinama apie 250 ml 6N druskos rūgšties, kad pH būtų 2. Rūgštinant susidaro dervingos nuosė-dos. Nepertraukiamai pamaišius dar 2 valandas, nuosėdos pasi-keičia į smulkią baltą kietą medžiagą, kurioje yra keletas stambesnių gabalėlių. Produktas filtruojamas per 600 ml talpos sukepinto stiklo piltuvą. Perplovus surinktą kietą medžiagą 1 1 vandens, po to 2 1 bevandenio eterio ir galų gale išdžiovi-nus vakuume, gaunama 70,3 g smulkios baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp. 213-220 C (skyla). TLC (1:99 acto rūgštis/etilacetatas) R_^ = 0,48. HPLC: tD (YMC S-3 ODS 6,0x150 mm; 1,5 ml/min., izokratiškai 60% B, buferis A = metanolis/vanduo/fosforo rūgštis (10:90:0,2), buferis B = metanolis/vanduo/fosforo rūgštis (90:10:0,2)) = - 9,33 min., 93,3% bendro piko ploto, kai 220 nm. Analizė: išskaičiuota pagal c_;l9H₂₄N₂°₄S₂:

[0604] 24 pavyzdys

[0605] Sujungimo reakcija, aprašyta 3(c), ll(i), 22(b) ir 23(i) pavyzdžiuose, buvo atlikta dar ir taip:

[0606] (S)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties (1,83 g, 8,14 mmol) ir [4S-( 4ex, 7<* , lOaB )} -oktahidro-4-amino-5-okso-7H-pirido [2/1-b] [l,3Jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio (2,11 g, 8,17 mmol) tirpalas sausame metileno chloride (20 ml) atšaldomas iki 0 °C ir iš karto pridedama etil-3-(dimetilamino ) propiikarbodiimido hidrochlorido druskos (1,77 g, 9,32 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje 6 valandas, tada sukoncentruojamas, susidarant alyvingoms putoms. Ši liekana suplakama su etilacetatu (100 ml) ir 1N druskos rūgš-timi (50 ml). Organinis sluoksnis plaunamas 1N druskos rūgš-timi (50 ml), sočiu vandeniniu natrio bikarbonatu (2x50 ml) , ir sočiu vandeniniu natrio chloridu (50 ml), džiovinamas (bevandeniu natrio sulfatu), filtruojamas ir sukoncentravus vakuume, gaunama 3,43 g baltų putų pavidalo norimo produkto.

[0607] 25 pavyzdys

[0608] [ 4S- [ 4ct( R* ) »7o<., 10aG] J- Oktahidro- 4- [_( 2- merkąpto- l- okso- 3- f enil-propil) amino] - 5- okso- 7H- pirido [ 2 , 1- bĮĮ £ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgšties 1, 1- dimetiletilamino druska

[0609] Iš 15 ml talpos trigurklės kolbutės su grįžtamu šaldytu-vu tris kartus ištraukiamas oras ir prileidžiama argono. Į kol bu tą sudedama [4S-[4«.(R*) , 7<x, 10afl]]-oktahidro-4 - ["( 2-me r kapt o--l-okso-3-f enilpropil) amino] -5-okso-7H-pirido \_ 2 ,1-b"]. [_1, 3] tiazepin-7-karboksilo rūgšties (0,20 g) ir įpilama degazuoto 1:1 absoliutaus etanolio ir acetonitrilo tirpalo (1,0 ml). Mai-šant heterogeninį mišinį, sulašinamas tret-butilaminas (53,0 ftl, 1,03 ekv.). Sulašinus aminą, per 3 minutes tirpalas tampa homogeniniu. Tirpalas (temperatūra kolbutėje 20 °C) lėtai skiedžiamas, lašinant acetonitrilą iki 10 ml galutinio tūrio. Pamaišius dar 2 valandas, kietos medžiagos nufiltruojamos, plaunamos vieną sykį 100% acetonitrilu (5 ml), džiovinamos ore, po to dvi valandas palaikomos giliame vakuume, kad būtų pašalinti likę tirpikliai, ir gaunama 0,2 g baltos kristali-nės medžiagos pavidalo norimo produkto.

[0610] Aukščiau aprašyta medžiaga sumaišoma su medžiaga, gauta kartojant reakciją, ir perkristalinama taip: iš 25 ml talpos kolbucės su trim gurkliais, sujungtos su grįžtamu šaldytuvu, magnetiniu maišikliu ir lašinamuoju piltuvėliu, tris kartus ištraukiamas oras ir užpildoma argonu. Į kolbutą sudedamos 1,1-dimetiamino druskos produkto porcijos (0,37 g) ir 59% acetonitrilas/etanolyje (2,28 ml) . Kolbutė ir jos turinys pa-šildoma iki 29-32 °C, kad ištirptų kieta medžiaga. Tirpalas skiedžiamas acetonitrilu (27 ml). Šildymo vonia nuimama ir lei-džiama kolbutei atvėsti iki kambario temperatūros (20 °C). Pa-maišius dar vieną valandą, mišinys filtruojamas, kieta medžia-ga plaunama vieną kartą acetonitrilu (10 ml) , džiovinama ore,

[0611] ir palaikius giliame vakuume, kad būtų pašalinti liką tirpikliai, gaunama 0,29 g baltos kristalinės medžiagos pavidalo norimo produkto; lyd. temp.: 160 °C temperatūroje susitraukia ir lėtai lydosi ir skyla, didinant temperatūrą iki 190-191 °C (esant 190-191 °C temperatūrai, likusi blizganti medžiaga lydosi greitai).

[0612] 26 pavyzdys

[0613] [ 4S- ( 4<*, 7<*, 10aB) J- Oktahidro- 4- amino- 5- okso- 7H- pirido [2, 1-bJ - [ l, 3 J tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0614] Ši tarpinė medžiaga, aprašyta 3(c), ll(h) ir 23(h) pavyz-džiuose, buvo pagaminta dar ir taip:

[0615] Maišoma argono atmosferoje 95% natrio hidrido (60,3 g, 2,532 mol) suspensija bevandeniame dimetilformamide ( 500 ml) atšaldoma iki 0 °C (ledo vonioje). Per 45 minutes, reakcijos mišinio temperatūrą palaikant žemiau 18 °C, pridedama aietil-acetamidomalonato ( 500 g, 2,302 mol) tirpalas bevandeniame di-metilf ormamide (1,2 1). Pabaigus dėti šį reagentą, drumstas tirpalas laipsniškai sušildomas iki kambario temperatūros, pa-maišoma vieną valandą kambario temperatūroje ir pridedama 4-brombutilacetatc (471,5 g, 2,417 mol). Tada mišinys maišomas 59-60 °C temperatūroje 18 valandų. Gauta suspensija atvėsina-ma iki kambario temperatūros, skaldoma absoliučiu etanoliu (40 ml) ir ledine acto rūgštimi (4 ml) , pamaišoma apie 15 minučių, išpilama į 10% ličio chlorido tirpalą ir ekstrahuojama etilacetacu (2 x 3 1). Sumaišyti etilacetato ekstraktai plaunami 10% ličio chloridu (3x31), džiovinami (bevandeniu natrio sulfatu) ir nugarinus vakuume, gaunama 750 g alyvos pavidalo norimo produkto.

[0616] Į 5 1 talpos trigurklą kolbą (su termometru, magnetiniu maišikliu ir oru šaldomu šaldytuvu) atsveriamas produktas iš (a) stadijos ( 730 g, 2,2 mol) ir praskiedžiamas absoliučiu etanoliu (300 ml), o po to pridedama 6N natrio hidroksido (1,6 1, 9,6 mol). Reakcijos mišinys šildomas 68-70 °C temperatūroje 5 valandas, ir gaunamas homogeninis tirpalas. Mišinys atvėsi-namas iki kambario temperatūros ir lėtai pridedama 6N druskos rūgšties iki pH 1,3. Prie kolbos prijungiamas trumpaeigis dis-tiliatorius etanoliui nudistiliuoti, lėtai didinant tempera-tūrą iki 87-90 °C ir palaikant ją 8,5 valandos. Stebimas lė-tas anglies dioksido išsiskyrimas. Bendras distiliato tūris yra 600 ml. Galutinio tirpalo pH yra 3,0. Reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume, kol nugarinamas visas vanduo, tada koncentruojamas pridedant toluolo (2 x 500 ml). Pusiau kieta ma-sė trinama su absoliučiu etanoliu (1 1), filtruojama ir skalaujama su papildomu kiekiu absoliutaus etanolio (500 ral). Sukoncentravus filtratą vakuume, gaunama 509 g nešvarios alyvos (82 % grynumo), kurioje yra etanolio ir toluolo.

[0617] Nevalytas produktas ii (b) stadijos (443 g, jame yra toluolo ir etanolio; įvertintas pradinės medžiagos kiekis yra 3S4 g) ištirpinamas vandenyje (3,3 1) ir dedamas 1N ličio hidroksidas, kol pH pasidaro lygus 7,5 (sunaudojama 1,53 1). Mi-šinys pašildomas iki 35 °C, pridedama acilazės (1 švarumo lai-psnio, iš kiaulės inkstų, 0,4 g) ir maišoma 24 valandas. Šio laikotarpio pabaigoje pH buvo 7,33. 1N ličio hidroksidu (apie 2 ml) nustatomas pH 7,5, dar pridedama acilazės (0,4 g) ir reakcijos mišinys maišomas dar 17 valandų (pH 7,3). Panaudojant acto rūgštį, tirpalo pH nustatomas 5,9. Pridedama Celite©

[0618] (20 g) ir aktyvuotos anglies (20 g) , mišinys pašildomas iki 92 °C ir palaikomas 5 minutes. Reakcijos mišinys filtruojamas per Celite^®sluoksnį ir sukoncentruojamas vakuume iki pusiau pastos (441 g). Ši pasta trinama su 900 ml 1:5:10 vandens:etanolio:cimetilformamido mišinio. Kad pradinė sulipusi medžiaga išsiskirstytų, reikia šiek tiek pašildyti. Reakcijos mišinys palaikomas šaldytuve per naktį, filtruojamas, plaunama 200 ml aukščiau minėto tirpiklių mišinio ir gaunama214 g negrynos me-džiagos (N-acetil-medžiagos yra apie 40 %). Ši medžiaga suspenduojama metanolyje (500 ml), pašildoma ant garų vonios, paliekama stovėti 2 valandas ir filtruojama.Pakartojus šią procedū-

[0619] rą antrą kartą, gaunama 108 g norimo produkto; |~oc] = +22° (c= 1,44, 6N druskos rūgštis).

[0620] Kitaip (b) ir (c) stadijos buvo atliktos tokiu būdu:

[0621] b) 2-( Acetilamino)- 6- hidroksiheksano rūgštis

[0622] Į 5 1 talpos trigurklą kolbą su mechaniniu maišikliu ir termomecru su termopora pridedama produkto iš (a) stadijos (631 g, 1,933 mol) ir pripilama tetrahidrofurano (259 ml). Į maišomą tirpalą per 40 minučių pripilama 6N natrio hidroksido tirpalo (1385 ml, 6,31 mol). Dedant natrio hidroksidą, labai smarkiai kyla temperatūra, todėl reikia šaldyti reakcijos mišinį ledo vonioje, kad temperatūra būtų žemiau 60 °C. Tada reakcijos miši-nys lėtai virinamas-su grįžtamu šaldytuvu (vonios temperatūra 67-68 °C) 5,5 valandos.

[0623] iMišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį (16,5 valandos). Tada,laipsniškai dedant 6N druskos rūgšties tirpa-lą (1150ml, 6,9 mol), laikant temperatūrą apie 25 °C,pH pa-keičiamas nuo 12,75 iki 1,30. Mišinys pamažu šildomas, įtai-sius trumpą distiliavimo antgalį, kol prasideda distiliacija ir dujų (anglies dioksido) išsiskyrimas (kolbos temperatūra 72,3 °C, aistiliato garų temperatūra - 70 °C), ir šildymas tę-siamas tol, kol nustoja distiliuotis ir labai sulėtėja dujų išsiskyrimas (kolbos temperatūra - 94,1 °C, garų temperatūra 50 °C). Bendras surinkto distiliato kiekis buvo 410 ml, o li-kučio kolboje pH 3,9. Šildoma dar lfl minučių, nebesiskiriant dujoms. Visas šildymo laikas nuo distiliacijos pradžios buvo 7,5 valandos.

[0624] Pamaišius kambario temperatūroje per naktį, skaidrus reakcijos mišinys (pH 3,50) garinamas rotoriniu garintuvu vakuume, esant vonios temperatūrai 60 °C, ir pastos pavidale liekana maišoma su -absoliučiu etanoliu ( 750 ml) . Gauta kristalinė suspensija garinama rotoriniu garintuvu (siurblio vakuumas, vonios temperatūra 60 °C), ir pastos pavidalo liekana plaunama absoliučiu etanoliu ( 2x750 ml) . Į galutiną liekaną pridedama absoliutaus etanolio (1500 ml) , ir mišinys maišomas esant 60 °C vonios temperatūrai tol, kol pasidaro smulkiakristalinė suspensija (apie 20 minučių), o tada kambario temperatūroje - 20 minučių. Suspensija nufiltruojama ir kristaliukai plaunami absoliučiu etanoliu (2 x 300 ml). Filtratai yra šiek tiek drum-sti; jie skaidrinami filtruojant per Celite^®sluoksnį.Šis nau-jas filtratas garinamas rotoriniu garintuvu, ir gaunama 434,6 g tirštoj gintaro spalvos pavid 2 alo sir Jupo norimos medžiagos. TLC (10:1:1, metanolis:acto rūgštis:vanduo) R- = 0,59.

[0625] Į 5 1 talpos trigurklą kolbą su mechaniniu maišikliu ir termometru supilamas produktas iš (b) stadijos (434 g, 1,93 mol) ir pridedama vandens (3 1). Pridedant 1N ličio hidroksido (705 ml), šiek tiek drumsto tirpalo pH pakeičiamas iš 4,05 į 7,50. Tirpalas pašildomas iki 36 °C ir pridedama kiaulės inkstų acilazės I (0,710 g). Mišinys maišomas 35-36 °C tempe-ratūroje 23,5 valandos. Reakcijos mišinys atšaldomas iki kambario temperatūros ir pridedant ledinės acto rūgšties, pH pa-keičiamas iš 7,0 į 5,9 (4,4 ml) . Pridedama Celite^®(29 g) ir aktyvuotos anglies (29 g) ir maišant temperatūra pakeliama iki 91 °C. Tada nustojama šildyti, ir mišinys paliekamas atvėsti iki kambario temperatūros. Suspensija filtruojama per 18,5 cm filtro popieriaus diską, ir nuosėdos kruopščiai plaunamos vandeniu. Bespalviai filtratai (apie 3,9 1) koncentruojami rotoriniu garintuvu 60 °C temperatūroje ir gaunama 476 g skaidrios tirštos alyvos. Pridedama absoliutaus etanolio ( 7 20 ml), ir mi-šinys maišomas tol, kol pasidaro homogeninė kristalinė suspensija. Vėl nugarinamas tirpiklis ir į baltą kristalinę liekaną pridedama absoliutaus etanolio (1584 ml). Suspensija sukama rotoriniame garintuve kambario temperatūroje per naktį (15 va-landų) ir filtruojama per 18,5 cm popieriaus filtrą. Kristaliukai plaunami absoliučiu etanoliu (7 x 100 ml) ir džiovinami vakuume iki pastovaus svorio; gaunama 85,8 g balto kristalinio norimo produkto. TLC (metanolis:vanduo:acto rūgštis, 10:1:1) Rf = 0,62.

[0626]

[0627] d) fs-( R*, R*)- 2- Į f4-( acetiltio)- l- okso- 2- TT( fenilmetoksi)-karbonilj amino] butil] amino]- 6- hidroksiheksano rūgšties metilo esteris

[0628] (S)-2-amino-6-hidroksiheksano rūgšties suspensija (1,0 g, 6,8 ramol) metanolyje (20 ml) maišoma argono atmosferoje ir kambario temperatūroje ir 4 ją pridedama trimetilsililchlorido (1,9 ml, 15 mmol). Gautas tirpalas maišomas kambario tempera-tūroje 18 valandų. Esant sumažintam slėgiui, tirpiklio tūris sumažinamas iki apie 3,5 ml. Pridedama acetonitrilo (5 ml), ir tirpalas atšaldomas iki -10 °c. Tada pridedama N,N-diizopropil-etilamino (4,15 ml, 23,8 mmol), ir atšaldžius tirpalą iki -40 °C, gaunamas tirpalas, kuriame yra (S)-2-amino-6-hidroksiheksano rūgšties metilo esterio.

[0629] Atskiroje kolboje S-acetil-N- £ ( fenilmetoksi)karbonil] - homocisteino (pagaminto pagal 23(e) pavyzdyje aprašytą meto-diką, 2,117 g, 6,8 mmol) tirpalas acetonitrile (5 ml) 0 °C temperatūroje veikiamas N,N-diizopropiletilaminu (1,20 ml, 6,8 mmol). Kitoje kolboje ištirpinami acetonitrile hidroksi-benzotriazolhidratas (0,104 g, 0,68 mmol) ir metansulfoniloksibenzotriazolas (1,450 g, 6,8 mmol) ir atšaldoma iki -18 °C. Tada į šį tirpalą, palaikant temperatūrą kolbos viduje žemiau -10 °C, sulašinamas anksčiau pagamintas S-acetil-N--Q(fenilmetoksi)karbonil]homocisteinas . Pamaišius -18 - -12 °C temperatūrų intervale tris valandas, gautas tirpalas laši-namas į aukščiau minėtą tirpalą, turintį (S)-2-amino-6-hidroksiheksano rūgšties metilo esterio, -40 ^WC temperatūroje. Per 18 valandų mišiniui leidžiama lėtai sušilti iki 16 °C. Tada reakcijos mišinys išpilamas į etiiacetatą (50 ml) ir 1N druskos rūgštį (50 ml). Mišinys supilamas į dalinamąjį piltuvėlį ir atskiriami sluoksniai. Vandeninis sluoksnis ekstrahuojamas etilacetatu (2 x 50 ml). Organiniai sluoksniai sumaišomi ir plaunami 1N druskos rūgštimi (100 ml) , sočiu natrio bikarbonatu (100 ml) ir sočiu natrio chioridu (100 ml). Tirpalas džiovinamas magnio sulfatu, filtruojamas ir sukoncentruojamas, susidarant baltai kietai medžiagai. Į šią medžiagą pridedama tret.-butilmetilo eterio (20 ml) , susidariusi suspensija mai-šoma kambario temperatūroje 4 valandas ir filtruojama. Produktas plaunamas tret.-butilmetiio eteriu ir išdžiovinus, gaunama 2,087 g nerimo produkto; lyd. temp. 89-90 °C.

[0630] e) j S - ( R* , R* ) |- 2- i" i" 4-( acetiltio)- l- Qkso- 2-["| ( f em lmetoksi ) - karboni1 j amino] butilJ amino Į- 6- oksoheksano rūgšties metilo esteris

[0631] Į cksalilchlorido (546 įąL , 6,27 mmol) tirpalą sausame metileno chloride (₁6 ml) -65 °C temperatūroje (temperatūra kolbos viduje) per 12 minučių, palaikant temperatūrą kolbos viduje tarp -65 °C ir -60 °C, sulašinamas dimetilsulfoksiao (905 /*ll, 12,54 mmol) tirpalas metileno chloride (13 ml ) . Į reakcijos kolbą per 20 minučių sudedamas produkto iš (d) stadijos (1,90 g, 4,18 mmol) tirpalas metileno chloride (7 ml), susidarant drumstam mišiniui. Pridedama dar metileno chlorido (1 ml), kad visas alkoholis patektų į reakcijos kolbą, ir reakcijos mišinys maišomas -65 °C temperatūroje 40 minučių. Po to pridedama N,N-diizopropiletilamino (3,7 ml, 20,90 mmol); susidaro skaidrus tirpalas. Pamaišius dar 30 minučių -65 °C tem-peratūroje, per 2 valandas reakcijos mišiniui leidžiama su-šilti iki -18 °C. Reakcijos mišinys skaldomas 10% vandeniniu kalio bisulfatu (30 ml) ir sušildomas iki kambario temperatū-ros. Tada reakcijos mišinys praskiedžiamas 25 ml vandens, su-maišoma ir atskiriami sluoksniai. Vandeninės frakcijos vėl ekstrahuojamos metileno chloridu (2 x 25 ml). Sumaišyti organiniai ekstraktai plaunami 10 % vandeniniu kalio bisulfatu (25 ml), sočiu vandeniniu natrio bikarbonatu (2 x 25 ml), druskos tirpalu (25 ml), džiovinami (magnio sulfatu), filtruojami ir sukoncentravus vakuume, gaunama 1,84 g baltos kietos medžiagos pavidalo norimo produkto.

[0632] f) | 4S-( 4p<, 7oc, 10a0)| - Oktahidro- 4- f f ( f eni lmetoksi ) karbonil] - amino |- 5- okso- 7H- piridof2, l- b"| f 1, 3 j tiazepin- 7- karboksilo rūg-šties metilo esteris

[0633] Į sausą kolbą argono atmosferoje sudedamas produktas iš (e) stadijos (1,76 g, 3,89 mmol) ir metanolis (17 ml). Tirpą-. las atsaldomas iki 0 o C ir per jį perleidž^iamas argonas 25 minutes. Į šį reakcijos mišinį per maždaug 15 sekundžių supilamas natrio metoksido tirpalas (25 % svorio % metanolyje, 983 yni, 4,28 mmol). Po vienos valandos, reakcijos mišinys skaldomas 1N druskos rūgšties tirpalu (20 ml) ir tada leidžiama jam sušilti iki kambario temperatūros. Pridedama etilacetato (35 ml) ir sumaišius, atskiriami sluoksniai. Vandeninė frakcija vėl ekstrahuojama etilacetatu (2 x 15 ml). Sumaišytos organinės frakcijos plaunamos 1N druskos rūgšties tirpalu (15 ml), druskos tirpalu, džiovinamos (magnio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 1,69 g baltų putų pavidalo [s-(R^*,-R^*)]-2-į[4-merkapto-l-okso-2-[[(fenilmetoksi)karbonil]amino]-butiljamino]-6-oksoheksano rūgšties metilo esterio.

[0634] Šių baitų putų ir trifluoracto rūgšties (305 jA 1, 3,S5 mmol) tirpalas metiler.o chloride (17 ml) virinamas su grįžta-mu šaldytuvu 2,25 valandos. Atšaldžius iki kambario tempera-tūros, reakcijos mišinys koncentruojamas, liekana ištirpinama etilacetate (25 ml), plaunama prisotintu natrio bikarbonato tirpalu (2 x 20 ml) ir druskos tirpalu, džiovinama (magnio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 1,50 g baltų putų pavidalo norimo produkto.

[0635] g) r45-( 4cs7oę, 10aif)' į- Qktahidro- 4- amino- 5- okso- 7H- piriGor2, l- bl-| 1, 3 jtiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0636] Veikiant produktą iš (f) stadijos jodtrimetilsilanu pagal 23(h) arba ll(h) pavyzdžiuose aprašytas metodikas, atskeliama N-apsauginė grupė ir gaunamas norimas 4-amino-produktas .

[0637] 27 pavyzdys

[0638] Ši tarpinė l(c) pavyzdžio medžiaga buvo gauta dar ir taip: Į 2-(acetilamino)-2-[4-(acetiloksi)butil]propandioinės rūgšties dietilo esterio (730 g, 2,2 mol, pagaminto pagal 24(a) pavyzdyje aprašytą metodiką) tirpalą absoliučiame etanolyje (300 ml) pridedama 6N natrio hidroksido tirpalo (1,6 1). Reakcijos mišinys šildomas 70-75 °C temperatūrų intervale 5 valandas, c po to S0-S5 °C intervale, kad būtų nudistiliuojama didžioji dalis etanolio. Reakcijos mišinys atšaldomas ir rūg-štinamas iki pH 1,3, panaudojant 6N druskos rūgštį (apie 1,3 1), tada šildomas 90° - 100 temperatūroje, kad vyktų de-karboksi 1inimas. Pasibaigus reakcijai, nešvarus reakcijos mi-šinys atšaldomas iki kambario temperatūros.

[0639] Aukščiau minėtas nešvarus reakcijos mišinys pašildomas iki 35 °C ir veikiamas maždaug 600 ml 6N natrio hidroksido, po to 1N natrio hidroksidu, kad pH būtų 7,5 (galutinis tūris apie 5,3 1). Į šį mišinį pridedama 0,6 g kiaulės inkstų aci-lazės I. Pamaišius per naktį 35 °C temperatūroje, pH buvo 7,25. Pašarminama iki pH 7,5 ir pridedama dar 300 mg acilazės. Pasi-rodė, kad pamaišius per naktį, reakcija įvyko 50 %. Tada reakcijos mišinys apdorojamas aktyvuota anglimi (20 g) ir Celite^® (20 g), šildomas iki 85 °C, palaikomas šioje temperatū-roje 10 minučių, atvėsinamas iki 50 °C ir filtruojamas. Šiuo metu bendras filtrato tūris buvo apie 4,9 1. Filtratas atšal-domas iki 5 °C ir pridedama kieto natrio karbonato, kad pH būtų 9,3. Sudedamas visas iš karto N-karbetoksiftalimidas (263,04 g, 1,2 mcl) ir pridedama natrio karbonato, kad pH būtų iš-laikomas 9,3. Palaikius 2 valandas 5 °C temperatūroje, po to 3 valandas kambario temperatūroje, pH nukrenta iki 8,5 ir di-džioji dalis reagentų ištirpsta. Reakcijos mišinys nufiltruojamas, atšaldomas iki 5 °C ir rūgštinamas iki pH 2,3 6N druskos rūgštimi, iškritusi į nuosėdas kieta medžiaga filtruojama, plaunama 200 ml šalto vandens, džiovinama vakuume ir gaunama 220 g norimo produkto.

[0640] 28 pavyzdys

[0641] [ 4S-( 4tx, 7a, lOaB)] - Oktahidro- 4- [ [ 2- merkapto- 3- ( 1- nafttalin) - 1-- oksopropil] amino] - 5- ok. so- 7H- pi. rido [ 2, 1- b] [ l, 3 J tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0642] a) ( Acetilamino)( 1- naftalinilmetil) propandioinės rūgšties dietilo esteris

[0643] Į natrio etoksido (21% etanolyje, 4,613 g, 67,8 mmol) tirpalą etanolyje (100 ml) pridedama dietilamidomalonato (14,74 g, 67,8 mmol), po to 1-(brommetil)naftalino (10,0 g, 45,2 nunol). Tirpalas maišomas kambario temperatūroje 1 valandą. Tada reakcijos mišinys koncentruojamas, susidarant oranžinei alyvai. Ši alyva tirpinama etilacetate ir plaunama 50 % prisotintu amonio chloridu, vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinama natrio sulfatu, filtruojama ir sukoncentravus, gaunama oranžinė kieta me-džiaga. Si kieta medžiaga perkristalinama iš etilacetato ir heksano, ir gaunami smėlio spalvos kristalai, užteršti dietilacet-amidomalonatu. Kristalai tirpinami 50% etilacetate heksane ir gryninami ekspres-chromatografi jos būdu per Merck silikagelį, eliuuojant 50/Jetilacetatu heksane. Frakcijos, kuriose yra gry-nas produktas, sumaišomos ir sukoncentravus, gaunama 10,225 g baltos kietos medžiagos pavidalo produkto; lyd. temp. 105-103 °C; Rc = 0,57 ( 50% etilacetatas heksane).

[0644] Produkto iš (a) stadijos (16,182 g, 47,5 mmol) tirpalas suspenduojamas 48% vandenilio bromide (100 ml) ir argono atmosferoje virinama su grįžtamu šaldytuvu 14 valandų. Produkto hidrobromido druska nufiltruojama iš tirpalo (balta kieta ras-džiaga), tada tirpinama karšN* tame (50 ^OC) vandenyje ( 500 rtil), ir tirpalas neutralizuojamas koncentruotu amonio hidroksidu. Iš tirpalo iškrenta produktas smulkių baltų kristaliukų pavidalu. Nufiltravus ir išdžiovinus giliame vakuume per naktį (13 valandų), gaunama 8,335 g baltos purios kietos medžiagos pavidalo produkto; lyd. temp. 264 °C.

[0645] Į produkto iš (b) stadijos (4,000 g, 13,6 mmol) ir kalio bromido (7,63 g, 63,2 mraol) tirpalą 2,5 N sieros rūgštyje (35 ml), laikomą 0 °C temperatūroje, per vieną valandą pridedama natrio nitrito (1,92 g, 27,8 mmol). Mišinys maišomas dar 1 va-landą 0 °C temperatūroje, tada sušildomas iki kambario tempe-ratūros ir maišomas 2,5 valandos. Reakcijos mišinys ekstrahuojamas eteriu (3x). Eteriniai sluoksniai sumaišomi ir plaunami vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinama natrio sulfatu, filtruojama ir sukoncentravus, gaunama oranžinė alyva. Ši alyva valoma ekspres-chromatografi jos būdu per Merck silikagelį, eliuuojant 70% etilacetatu heksane, pridėjus 1% acto rūgšties, kad sumažėtų uodegos susidarymas. Frakcijos, kuriose yra bromidas, sumaišomos ir sukoncentravus, gaunama šiek tiek užterš-tas, oranžinės alyvos pavidalo produktas, kurį palikus per naktį, sukietėja. R = 0,40 (40% etilacetatas heksane su 1% acto rūgšties).

[0646] Į kalio tioacetato (0,912 g, 8,00 mmol) suspensiją acetonitrile (300 ml) 0 °C temperatūroje pridedamas produkto iš (c) stadijos (2,030 g, 7,27 mmol) tirpalas acetonitrile (3 ml). Tirpalas maišomas vieną valandą 0 °C temperatūroje , pašildo-mas iki kambario temperatūros ir maišomas 15 valandų. Tada iš reakcijos mišinio nufiltruojamas kalio bromidas, o sukoncentravus filtratą, gaunama oranžinė alyva. Ši alyva tirpinama etilacetate, plaunama 10% kalio bisulfatu ir druskos tirpalu, džiovinama natrio sulfatu, filtruojama ir koncentruojama, susidarant oranžinei alyvai. Ši alyva valoma ekspres-chromatografijos būdu per Merck silikagelį, eliuuojant 50% etilacetatu heksane su 1% acto rūgšties, kad sumažėtų uodegos susidarymas. Frakcijos, kuriose yra produktas, visos yra užterštos junginiu, kurio R_^ = 0,43. Šios frakcijos sumaišomos ir sukoncentravus gaunama oranžinė alyva. Nešvarus produktas valomas per dicikloheksilamino druską, tirpinant oranžinę alyvą eteryje ir į tirpalą pridedant ekvivalentinį kiekį dicikloheksilamino (1,32 g, 7,27 mmol). Gaunamos 2 frakcijos rudų dicikloheksilamino druskos kristalų (1.450 g), šiek tiek užterštų nešvarumais. Kristalai suspenduojami etilacetate ir plakami su 10% kalio bisulfatu (3x). Organinis sluoksnis plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas natrio sulfatu ir sukoncentravus gaunama 375 mg geltonos alyvos pavidalo produkto; R? = 0,40 (40% etilacetatas heksane su 1% acto rūgšties).

[0647] e ) Į 4 S- ( 4a., 7ę \, 10ai3 )~ į - Oktahidro- 4- | T2-( acetiltio)- 3-( l- nafta-liniP- l- oksopropil] amino - 5- okso- 7H- piridof2, l- b][ rl, 3" itiazė-pin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0648] Raceminės rūgšties iš (d) stadijos tirpalas metileno chloride ir [4S - ( 4(*, 7c*., 10aJ3 ) J -oktahidro-4-amino-5-okso-7H-pirido-je , 1-bj [i, 3 "į tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio tirpalas metileno chloride veikiami trietilaminu ir benzotriazol--1-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfatu pagal 23(i) pavyzdyje aprašytą metodiką ir gaunamas norimas produktas .

[0649] f) | 4S-( 4ot, 7ęx, IPaB) j - Oktahidro- 4 - f f 2- merkapto- 3- ( 1- naf talinil) -- i- oksopropilįamino l - 5- okso- 7H- piridoj2, l- b" lftiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0650] Produkto iš (e) stadijos tirpalas metanolyje veikiamas 1N natrio hidroksidu pagal 23(j) pavyzdyje aprašytą metodiką ir gaunamas norimas produktas.

[0651] 29 pavyzdys

[0652] [ 4S- [ 4<x( R* ) , la. , 10aC] J - Oktahidro- 4- [ [ 2- merkapto- l- okso- 3- ( 2-- tienil) propil] amino] - 5- okso- 7H- pirido [ 2, 1- b] [ l, 3] tiazepin- 7-karboksilo rūgštis

[0653] Į p-(2-tienil)-D-alanino (1,37 g, 8,03 mraol) tirpalą 2,5 N druskos rūgštyje kambario temperatūroje ir argono atmosferoje pridedama kalio chlorido (3,0 g, 40,1 mmol). Pamaišius 10 minučių, gautas mišinys atšaldomas iki 0 °C ir veikiamas natrio nitritu (720 mg, 10,44 mmol). Po 2,5 valandos reakcijos mišinys sušildomas iki kambario temperatūros ir maišomas 1 va-landą. Tada mišinys suplakamas su vandeniu ir etilacetatu ir organinis sluoksnis džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas. Liekana valoma ekspres-chromatografi jos būdu (Merck silikagelis), eliuuojant 1% acto rūgštimi 3:1 heksano/etilacetato mišinyje, ir gaunama 760 g geltonos alyvos pavidalo ( R) - Oč-chlor-2-tiof enkarboksilo rūgšties.

[0654] Į tirpalą, kuriame yra aukščiau minėtas chloridas (750 mg, .4,73 mmol),dimetilformamide (15 ml) kambario temperatūroje ir argono atmosferoje pridedama cazio tioacetato (2,95 g, 14,19 mmol). Pamaišius 2 valandas, reakcijos mišinys suplakamas su 10% kalio bisuifatu ir etilacetatu. Organinis sluoksnis plaunamas druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas, o liekana valoma ekspres-chromato-grafijcs būdu (Merck silikagelis), eliuuojant 1% acto rūgšti-mi 4:1 heksano/etilacetato mišinyje, ir gaunama 500 mg alyvos pavidalo norimo produkto. TLC (2% acto rūgštis 3:1 etilacetato/heksano mišinyje) R, = 0,73.

[0655] b) | 4S-| 4<x( R*), 7o<., I0afi | T- 0ktahidro- 4- Į ^-( acetiltio) - 1- okso-- 3-( 2- tienil) propilf amino] - 5- okso- 7H- piridor2, l- b~" Į f~ l, 3 j tiazepin- 7- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0656] Rūgšties iš (a) stadijos tirpalas metileno chloride veikiamas [4S-(4o«.,7c*,10aJ3)J -oktahidro-4-amino-5-okso-7H-pirido-[2 ,1-b] [l,3Jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio tirpalu metileno chloride, dalyvaujant trietilaminui ir benzotriazol-i-iloksitris(aimetilarnino)fosfonio heksafluorfosfatui, pagal 23(i) pavyzdyje aprašytą metodiką, ir gaunamas norimas produktas.

[0657] c) j4S-| 4cx.( R*), 7<Xfl0aflĮ" i - Oktahidro- 4- Į j 2- merkapto- l- okso- 3--( 2- tienil) propil" i amino i- 5- okso- 7H- pirido| 2, l- b| į 1, 3 į tiazepin-- 7- karboksilo rūgštis

[0658] Produkto iš (b) stadijos tirpalas metanolyje veikiamas 1N "natrio hiaroksidu pagal 2 3(j ) pavyzdyje aprašytą metodiką, ir gaunamas norimas produktas.

[0659] 30 pavyzdys

[0660] [ 4S- [ 4a( S*) f 7oc / 10aB]] - Oktahidro- 4- [( 2- merkapto- l- okso- 3- fenilpropil) amino] - 5- okso- 7H- pirido [ 2,1- b] [ l, 3] tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0661] a) ( R)- 2-( Acetiltio) benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druska

[0662] Atliekant reakciją pagal 1(h) pavyzdyje aprašytą metodiką, tik vietoj L- fenilalanino naudojant D- fenilalaniną, gaunama (R)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druska.

[0663] b) Į4S-| 4tx.( S*), 7o(, 10a0| į - Oktahidro- 4 - į [~ 2-( acetiltio) - 1- okso-- 3- fenilpropil amino Į- 5- okso- 7H- pirido 2, 1- b [ 1, 3 Įtiazepin- 7-- karboksilo rūgšties metilo esteris

[0664] Maišoma (R)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgšties dicikloheksilamino druskos (353,5 mg, 0,872 mmol) suspensija etilacetate (5 ml) plaunama 5% kalio bisulfato tirpalu (3x5 ml). Organiniai ekstraktai sumaišomi, plaunami druskos tirpalu, džio-vinami (magnio sulfatu), filtruojami, koncentruojami, liekana džiovinama vakuume ir pridedant heksanų, nugarinama du kartus. Gaunama alyvos pavidalo (R)-2-(acetiltio)benzolpropano rūgštis.

[0665] Gauta laisva rūgštis (181,4 mg, 0 , 809 mrnol) ištirpinama metileno chloride (2 ml) ir tirpalas maišomas azoto atmosferoje 0 ?C temperatūroje. Į šį tirpalą pridedamas [4S-( 4<*., 7c*, 10 a C ) ] -oktahidro-4-amino-5-okso-7H-pirido į_2 ,1-b] [l,3"jtiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio ( 200 mg, 0,774 mmol) tirpalas metileno chloride (6 ml) , po to trietilaminas (0,113 ml, 0,813 mmol) ir ant galo benzo triazol-1 -iloks i tr is ( dime til-amino)fosfonio heksafluorfosfatas (360 mg, 0,813 mmol). _Reak-cijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje, po to leidžiama lėtai sušilti iki kambario temperatūros. Praėjus iš viso 20 va-landų, reakcijos mišinys koncentruojamas vakuume. Liekana tirpinama etilacetate ir šis tirpalas plaunamas 5% kalio bisulfato tirpalu, prisotintu natrio bikarbonato tirpalu ir druskos tirpalu. Organinis sluoksnis džiovinamas (magnio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas, susidarant geltonai kietai me-džiagai. Išvalius ekspres-chromatografi jos būdu (eliuuojama 2:3 etiiacetatu:heksanu), gaunama 261,7 mg skaidrios alyvos pavidale norimo produkto.

[0666] c) j 4S- j 4cc( S* ) , Ick , lOaO] Į- Oktahidro- 4- ["( 2- merkapto- l- okso- 3-- feniipropil] amino] - 5- okso- 7H- pirido Į 2, 1- b] fl, 3] tiazepin- 7-- karboksilo rūgštis

[0667] Produkto iš (b) stadijos (261,1 mg, 0,562 mmol) tirpalas metanolyje (6 ml, iš tirpiklio, leidžiant azotą, pašalintas deguonis) atšaldomas iki 0 °C ir veikiamas 1N natrio hidroksidu (6 ml, iš tirpalo, leidžiant azotą, pašalintas deguonis). Pamaišius vieną valandą 0 °C temperatūroje visą laiką leidžiant azotą, reakcijos mišinys sušildomas iki kambario temperatūros. Pamaišius 30 minučių kambario temperatūroje, gaunamas skaidrus tirpalas. Po 5,5 valandos reakcijos mišinys rūgštinamas iki pH 1 5%-niu kalio bisulfatu ir ekstrahuojamas etiiacetatu. Organiniai sluoksniai sumaišomi, plaunami vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojami ir koncentruojami vakuume. Išvalius ekspres-chromatografi jos būdu (6: :0,01:3,9S, etilacetatas: acto rūgštis:heksanas), gaunama baltos kietos medžiagos pavidalo norimas produktas (ISO mg); \c<\ = -87,5° (c = 0,51, chloroformas). TLC (6:0,01:3,99, atilace-tatas:acto rūgšti s:heksanas) R l ^ = 0,20. HPLC: t K = 25,3 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 rrun; 0% iki 100% B:A, 30 min tiesinis gradientas ir 10 min. sulaikymas, 1,5 ml/min; A = 90% vandens:metanolyje + 0,2% fosforo rūgšties, B = 90% metanolio : vandeny je + 0,2% fosforo rūgšties; 220 nm.

[0668] Analizė: išskaičiuota pagal C,rH_,O.N„S_ . 0,15 C_^H_-O_- . 0,15 J.S 24 422 4 o 2 _C_H,_^ . 0,39 H_0: / 16 2

[0669] 31 pavyzdys

[0670] [ 4S-( 4c*., 7a, 9aB)] - Oktahidro- 4- [[ 2- merkapto- l- okso- 3-( 4- tiazolil) propib] amino]- 5- oksopirol[ 2, 1- b] [ l, 3^ tiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0671] Į (R)-2-[[(1,1-dimetiletoksi)karbonil]amino]-3-(4-tiazolil)propano rūgšties (2,0 g, 7,3 mmol) tirpalą dioksane (2 inl) pridedama 4N druskos rūgšties tirpalo dioksane (10 ml). Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje 3 valandas, koncentruojamas vakuume, o liekana tirpinama vandenyje (3 ml).lN natrio niaroksidu pašarminama iki pH 6,5, ir šis tirpalas lei-džiamas per 20 ml Dowei^ AG50(H^T). Kolonėlė eliuuojama vandeniu (250 ml), po to - 2% piridino tirpalu vandenyje (300 ml). Frakcijos, kuriose yra produkto, koncentruojamos vakuume ir gaunama 0,94 g nerimo produkto.

[0672] Produkto iš (a) stadijos (0,516 g, 3 mmol) ir kalio bromido (l,i9 g, 10,1 mmol) tirpalas vandenyje (5,94 ml) ir sieros rūgštis (0,43 ml) maišomi -10 °C temperatūroje 5 minutes, po to per iO minučių dalimis sudedamas natrio nitritas (0,318

[0673] g, 4,51 mmol). Reakcijos mišinys maišomas" dar 10 minučių 0 °C temperatūroje ir vieną valandą kambario temperatūroje, po to ekstrahuojamas eteriu (3 x 100 ml). Eteriniai ekstraktai plaunami druskos tirpalu (2 x 20 ml), džiovinami (natrio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 0,37 g norimo produkto; [<*] = +37 , 35° ( c = 0,7, metanolis). Reakcija pa-kartota su 2,67 mmol produkto iš (a) stadijos pradinės medžiagos pagal tą pačią .metodiką, ir gauta dar 0,35 g norimo produkto.

[0674] Produktas iš ( d) stadijos (0,72 g, 3,05 nunol) ir kalio tioacetatas (0,35 g, 3,05 mmol) maišomi acetonitrile (9 ml) per naktį kambario temperatūroje ir vieną valandą - 30 °C tempe-ratūroje. Reakcijos mišinys praskiedžiamas etilacetatu (100 ml) ir filtruojamas. Filtratas koncentruojamas vakuume. Liekana ištirpinama etilacetate (100 ml), plaunama vandeniu (2 x 50 ml) ir druskos tirpalu (20 ml), džiovinama (natrio sulfatu), filtruojama ir sukoncentravus vakuume, gaunama 0,52 g norimo produkto; į— ^C^ j = -15,89 o (c = 0,5, metanolis).

[0675] d) j~ 4 S — ( 4c*., Ick , 9al3 )"[ - Cktanidrc- 4 - f Į 2-( acetiltio )- l- okso- 3--( 4- tiazolil) propilj amino] - 5- oksooirol [ 2, 1- b] j 1, 3 jtiazepin-- 7- karbok5ilo rūgšties metilo esteris

[0676] [4S-(4c<,7cx/SaO)j -4-amino-oktahidro-5-oksopirol [ 2 ,1-b j - į_l, 3] tiazepin-7-karboksilo rūgšties metilo esterio p-toluol-sulforūgšries druska (0,367 g, 0,882 mmol, pagaminta iš medžia-gos, aprašytos 5 (d) pavyzcyje) ištirpinama metilenc chloride (5 ml) 0 °C temperatūroje, o po to pridedama trietilamino (0,12 ml, 0 ,858 rnmol) . Į šį tirpalą pridedama produkto iš (c) stadijos (0,2 g, 0,865 mmol), po to antroji trietilamino porcija (0,12 ml, 0,865 mmol). Tada pridedama benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino)fosfonio heksafluorfosfato (0,383 g, 0,865 mmol); reakcijos mišinys maišomas 0 °C temperatūroje vieną valandą ir kambario temperatūroje 4 valandas. Reakcijos miši-nys koncentruojamas vakuume, o liekana tirpinama etilacetate (60 rr.l). Organinis ekstraktas plaunamas 5% vandeniniu kalio bisulfatu (10 ml) ir druskos tirpalu (2 x 10 ml), džiovinamas (natrio sulfatu), filtruojamas ir koncentruojamas vakuume. Negryna medžiaga cnromatcgrafuojama per 100 g Merck silikagelio, naudojant 0,2% metanolio tirpalą etilacetate. Frakcijos, kuriose yra daugiau Lėtesniojo izomero, koncentruojamos vakuume ir gaunama 0,134 g norimo produkto.

[0677] e) į 4S-( 4c<, 7<x, 9al f)" j - Oktahidro- 4-[ j 2- merkapto- l- okso- 3-( 4- cia-2olil) propii] amino|- 5- oksopirolf2, l- b] j i, 3 ftiazepin- 7- karboksilo rūgštis

[0678] Produktas iš (d) stadijos (0,135 g, 0,29 mmol) ištirpina-mas metanolyje (3 ml) ir 0 °C temperatūroje per tirpalą lei-džiami argono burbuliukai 30 minučių. Į šį tirpalą pridedama lN natrio hidroksido (1,32 ml) , kuris taip pat buvo valytas, leidžiant argoną, ir reakcijos mišinys maišomas 0 °C tempera-tūroje per tirpalą burbuliuojant argoną vieną valandą ir kambario temperatūroje - 2 valandas. Reakcijos mišinys skaldomas pridedant 5% vandeninio kalio bisulfato (20 ml), o organinės medžiagos ekstrahuojamos etilacetatu (3 x 50 ml). Etilacetato tirpalai plaunami druskos tirpalu, džiovinami (natrio sulfatu), filtruojami ir koncentruojami vakuume. Koncentratas chromatc-grafuojamas per 40 g Merck silikagelio, naudojant chloroformą, kuriame yra 5% metanolio ir 0,5 % acto rūgšties. Reikiamos frakcijos sumaišomos, koncentruojamos ir suplakamos su 20 ml etilacetato ir 5% kalio bisulfato. Etilacetato tirpalas plaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, džiovinamas (natrio sulfatu) ir koncentruojamas vakuume. Liekana iiofilizuojama iš dioksano (4 ml) ir gaunama36 mg norimo produkto, kuris yra 70:30 izome-rų mišinys; lyd. temp. 95-115 °C; [c* j D = -iSl,?^ (c = 0,06, chloroformas). TLC (chloroformas:metanolis:acto rūgštis, 8:2:0,2) R „ = 0,59. HPLC: t-. = 3,06 min; YMC S-3 ODS (C-18) 6,0 x 150 r k mm, 3 galinė uždara kolonėlė, izokratiškai, 60% metanolio tirpalas vandenyje, turintis 0,2% fosforo rūgšties, 25 min, 1,5 ml/min. (95,4 % ) .

[0679] Analizė: išskaičiuota pagal C, cH.,7.N-0 ,S, . 0,2 C,H_o0_~ . 0,9 H_0:

[0680] r r 15 19 j 4 3 482 2

[0681] 1000 tablečių, kurių kiekvienoje yra šie ingredientai:

[0682]

[0683] gaminama iš atitinkamų didesnių kiekių, sumaišant 3 pavyzdžio produktą ir kukurūzų krakmolą su vandeniniu želatinos tirpalu. Mišinys džiovinamas ir sumalamas į smulkius miltelius. Granu-liuojant primaišoma Avicel ir magnio stearato, Tada mišinys spaudžiamas tablečių presu, ir gaunama 1000 tablečių; kiekvienoje iš jų yra 100 mg veikliojo ingrediento..

[0684] Panašiai gali būti pagaminamos tabletės, kuriose yra 200 mg 1, 2, 4-23, 25 ir 28-31 pavyzdžiuose aprašyto produkto.

[0685] Panašios metodikos gali būti panaudojamos tabletėms ar-ba kapsulėms, turinčioms nuo 10 mg iki 500 mg veikliojo ingrediento, pagaminti.

Apibrėžtis

1. Junginys, kurio formulė:

2. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jo formulė:

3. Junginys pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad jame:R₂ yra vandenilis arba

4. Junginys pagal 3 punktą, besiskiriantis tuo, kad jame:X yra S;Y yra CH^ ln yra du;m yra vienas;r yra nulis arba vienas;R yra vandenilis;R_^ yra benzilas arba izobutilas; ir^ 12 ^ ra vanc^ en;'-^^ s' ar^ aX yra S;Y yra CH^ ;n yra vienas;m yra vienas;r yra nulis;R₂ yra vandenilis;R_^ yra benzilas; ir_R12 ^ ra van<^ en;'--'- ;'- s' ar^ aX yra S;Y yra CH^ ;n yra du;ra yra nulis;r yra nulis;R₂ yra vandenilis;R yra benzilas, ciklopropilrnetilas, n- butilas, izobutilas, n- propilas arba - CH2C( CH^) 2' ir r_^^ yra vandenilis; arba X yra 0;Y yra CH„ ;n yra du;ra yra vienas;r yra nulis;R_^ yra vandenilis;R_^ yra benzilas; irR₁₂ yra var"^ en^-^-^ s;X yra 0;Y y ra CII2 ;n yra du; m yra nulis;r yra nulis;f*2 yra vandenilis;yra benzilas; irR₁₂ -^ra van^eni Ii-5 »'X yra O;Y yra O;n yra du;m yra vienas;r yra nulis;R? yra vandenilis;yra benzilas; irR_{12 ^}ra van<3en;"-}-i-s iX yra S;Y yra O;n yra du;m yra vienas;r yra nulis;R₂ yra vandenilis? R_^ yra benzilas; irR₁₂ •*'ra van<3enilis-

5. Junginys pagal 4 punktą, besiskiriantis tuo,kad jis yra:■[4S- [4cC(R* ) , 1a , lOafl] ] -oktahidro-4- [ ( 2-merkapto-l-okso-3-fenilpropil)amino]-5-okso-7H-pirido[2,1-b] [l,3]tiazepin-7-kar-boksįlo rūgštis;[4S- [4c*( R*) , 1a , iOaBj ] -oktahidro-4- [ ( 2-merkapto-l-okso-3-f e-nilpropil)amino]-5-okso-7H-pirido[2,1-b] [l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgšties 1,1-dimetiletilamino druska;[4S-[4c<(S*) ,7o(,10aB]] - oktahidro-4 - [ ( 2 -merkapto-l-okso-3-f eni 1-propil)amino]-5-okso-7H-pirido[2,1-b] [1,3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4 S- [4<x(R* ) ,7a,10afi] ]-oktahidro-4- [[2- (merkaptometil )-l-okso--3-fenilpropil]amino]-5-okso-7H-pirido [2,i-b] [l,3j tiazepin--7-karboksilo rūgštis;[4S- L40V(R* ) / 7cę, 10aBlJ-oktahidro-4- £ netil-l-oksopentil)amino}--5-okso-7H-pirido[2,1-b][l»3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[3R- [3(fc(S*) , 6cf,9aB]}-heksahidro-3- l( 2-merkapto-l-okso-3-fenilpropil)amino] -4-okso-2H,6H-pirido [2,1-b][1,3]tiazin-6-karboksilo rūgštis;[4S- [4oc(R*), liit ., 9afl] ]-oktahidro-4-[(2-merkapto-l-akso-3-fenilpropil)amino] -5-oksopirolo [2,1-b][l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S- £ 4*(R*) ,7*, 9aB] ]-oktahidro-4- [(3-ciklopropil-2-merkapto--oksopropil)amino]-5-oksopirolo[2,1-b][l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S-[4cC(R*) ,7* , 9aBj ]-oktahidro-4-[(2-merkapto-l-oksoheksil)-amino]-5-oksopirolo 1,2»1-b^ [l,3] tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S-[4«(R*) ,7*, 9aBj ]-oktahidro-4- [(2-merkapto-l-okso-4-metil-pentil) amino] -5-oksopirolo [2,1-b] [l, 3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S- [4«c(R*),7oc, 9aB] ] -oktahidro-4- [(2-merkapto-l-oksopentil) - amino]-5-oksopirolo[2,1-b][l,3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S- [4oc(R*), 7«c, 9aB] ] -oktahidro-4- [(2-merkapto-4,4-diraetil-l--oksopentil)amino] -5-oksopirolo[2,l-b][1*3]tiazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S- [4«,(R*), 7*, lOafi] ] -oktahidro-4- [( 2-merkapto-l-okso-3-f enil-propil )amino] -5-okso-7H-pirido [2,1-b] [l, 3] oksazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S- [4oc(R*), 7oc, 9afi] ] -oktahidro-4-[(2-merkapto-l-okso-3-fenilpropil)amino]-5-oksopirolo [2,1-b][l,3]oksazepin-7-karboksilo rūgštis;[4S- [4jt(R* ), 7#c, lOafl}]-oktahidro-4- [( 2-merkapto-l-okso-3-f enil-propil lamino] -5-okso[l,4|oksazino [3,4-b][l,3}oksazepin-7-karboksilo rūgštis; arba[4 S - [4c^( R*) , 7<x, lOaG] ] -oktahidro-4- [_( 2-merkapto-l-okso-3-f enil-propil)amino]-5-okso[l,4joksazino[3,4-b][l,3']tiazepin-7-karboksilo rūgštis.

6. Junginys, kurio formulė:

7. Farmacinė kompozicija, tinkama širdies-kraujagyslių ligų, tokių kaip hipertenzija ir susijusi su kraujoplūdžiu širdies yda, gydymui, besiskirianti tuo, kad į ją įeina farmaciškai tinkamas nešiklisir vienas arba daugiau junginių, kurių formulė:

8. Junginys, kurio formulė

9. Junginių, kurių formulė:

10. Junginių, kurių formulė:

11. Būdas pagai 10 punktą, kur:X yra S;n yra vienas arba du;Y yra CH₂;m yra nulis arca vienas;besiskiriantis tuo, kad į jį įeina:a) aminorūgšties, kurios formulė:

?2 yra hidroksilo apsauginė grupė;b) selektyvus apsauginės grupės P? atskėlimas iš (a) stadijos produkto, susidarant atitinkamam hidroksi-junginiui;c) hidroksi-produkto iš (b) stadijos pavertimas merkaptanu, kurio formulė:

13. Junginių, kurių formulė:

14. Junginio, kurio formulė:

15. Junginio, kurio formulė:

16. Junginio, kurio formulė

Brėžiniai