[LT] Žemės ūkio gyvulių ir paukščių atsparumą didinantis preparatas priklauso veterinarijos sričiai. Tikslas - naujo mikroorganizmo panaudojimas žemės ūkio gyvulių ir paukščių atsparumui didinti. Imunomoduliatoriumi panaudotas grybas Geotrichum candidum. Šio grybo natūralios arba išgarintos kultūrinės terpės 0,5 + 1,0% įmaišoma į žemės ūkio gyvulių ir paukščių pašarus. Toks pašaras pagerina rezistentiškumą ir padidina priesvorį vištų, kiaulių ir veršiukų.
[EN]
[0001] Išradimas priklauso veterinarijos sričiai ir gali buti taikomas žemės ūkio gyvulių ir paukščių auginime.
[0002] Žinomas lipoarabinomananas, turintis priešvėžini, akty-vumą (JAV patentas Nr. 1232125, 1980).
[0003] Žinomas polisacharidas, turintis priešvėžini, aktyvumą
[0004] Žinomi polisacharidai išskirti iš mikroorganizmų, kurie turi imunomoduliatorinių savybių (J. Kraus Biopolymere mit antitumoraler und immunomodulierend Wirkung. Phar-mazie in unserer Zeit, 19 Jahrg. 1990, Nr. 4).
[0005] Žinomas polisacharidas imunostimuliatorius jau naudojamas medicinoje (Prancūzijos patentas Nr. 592333, 1972).
[0006] Prototipas - zimozanas, išskirtas iš Sacharomyces cere-visae biomasės (buv. TSRS aut. liud. Nr. 293386, A61K 27/14, 1966).
[0007] Žinomų preparatų trūkumas tas, kad jie brangūs, gavimo būdai sudėtingi.
[0008] Šio išradimo tikslas - naujo mikroorganizmo panaudojimas pagaminimui preparato, padidinančio gyvų organizmų atsparumą infekcinėms ligoms.
[0009] Tikslas pasiekiamas panaudojant mikroskopini grybą Geotrichum candidum. Į Geotrichum candidum kultūrinę terpę pridedame 0,5 h- 5,0% bazinio infrofurfurol-diace-tato tirpalo. Natūrali arba išgarinta grybo Geotrichum candidum kultūrinė terpe arba polisacharidinis kompleksas, išskirtas iš šio skysčio, įmaišomas i, žemės ūkio gyvulių pašarus. Mikroskopini grybą Geotrichum candidum kultivuoja aerobinėse sąlygose fermentatoriuose nuo 1 iki 100 m' tūrio talpoje. Mitybine terpe naudoja kviečių kapojus ir runkelių išspaudas. Biomasė atski-riama separatoriumi, o gautą kultūrinę terpę imaišo i pašarus.
[0010] Buvo nustatyta praktiškai, kad kultūrinė terpė laikoma natūraliose sąlygose greitai užsikrečia pašaliniais mikroorganizmais ir praranda savo savybes (1-a lente-lė) . Gauti duomenys parodė, kad pašalinių mikro-organizmų kiekis kultūrines terpės 1 ml per vieną mėnesi padidėja 6 kartus ir viršija leistiną mikro-organizmų kieki pašare (500.000 ląstelių 1 ml).
[0011] Kultūrinė terpė konservuojama rūgštinimu. Kaip pigų rūgšties šaltini panaudoja bazini infrofurfuroldiace-tato tirpalą, gaunamą kaip pašalini, produktą infro-furano preparato gamyboje. Iš 1 lentelės duomenų matome, kad 1, 0 4- 2 % konservanto leidžia apsaugoti kultūrinę terpę nuo pašalinių mikroorganizmų 1 mėnesi,.
[0012] Polisacharidinio komplekso, išskirto iš Grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės, biologinio aktyvumo nustatymas.
[0013] Gauto polisacharidinio komplekso kaip imunostimu-liatoriaus aktyvumas patikrintas bandyme su žiurkėmis. Bandymas buvo atliktas Latvijos eksperimentinės ir klinikinės medicinos mokslinio tyrimo institute. Sterili polisacharido komplekso suspensija fiziolo-giniame tirpale 1 mg/ml buvo ^švirkščiama i, žiurkių pilvo ertmę įvairiomis dozėmis (10, 25 ir 50 mg/kg). 72 h iki ir po minėto preparato įšvirkštimo nustati-nėtas leukocitų kiekis žiurkių kraujyje (2 lentelė). Esant 25 mg/kg polisacharidinio komplekso dozei gaunasi 43% žiurkių leukopoezės stimuliavimas. Tokiu būdu, galima teigti, kad, lyginant su zimozanu, išskirtas iš kultūrinės terpės grybo Geotrichum candidum polisacharido kompleksas yra aktyvus imunostimuliatorius.
[0014] Grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės, įeinančios i, pagrindini, racioną, įtaka viščiukų organizmo imunolo-giniams rodikliams.
[0015] Buvo atliktas bandymas su 5-45 dienų amžiaus viš-čiukais, i, kurių pagrindini, racioną buvo įmaišoma nor-mali ir išgarinta grybo Geotrichum candidum mitybinė terpė. Bandymo pabaigoje viščiukų kraujo serume buvo nustatyta tokie rodikliai: 1. lizocimo aktyvumas, vnt/ml-9; 2. baltymines frakcijos, %-10; 3. cirkuliaciniai imuniniai kompleksai CIK lg UK, %-ll; 4. T-limfocitai-12; 5. B-limfocitai-12;
[0016] Bandymo schema ir rezultatai parodyti 3 lentelėje.
[0017] Iš 3 lentelės duomenų matyti, kad preparatas, gautas iš grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės ir naudotas kaip priedas prie pagrindinio viščiukų raciono padidino kraujo serume koncentraciją ir atskiras globulinų frakeij as.
[0018] Taip pat padidėjo cirkuliuojančių imuninių kompleksų koncentracija nuo 2 sąlyginių vienetų kontrolinėje grupėje iki 3 sąlyginių vienetų bamdomojoje grupėje, kur viščiukai gavo prie pagrindinio raciono išgarintą grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės priedą. Albuminų koncentracijos padidėjimas sąlygoja abejose bandomosiose grupėse anabolizmo procesus, kurių dydi, nulemia specifinis ir nespecifinis organizmo imuni-tetas .
[0019] alr a2 ir /?- globulinų padidėjimas bandomosiose grupėse susijęs su imunoreaktyvinės sistemos pasikeitimu. Tai ypač ryškiai parodo f}- globulinų frakcija. /3 - globu-linų koncentracijos padidėjimas parodo, kad bandomosiose grupėse padidėja vienas iš pagrindinių ryšių oganizmo imunosistemos, o taip pat ir CIK padidėjimas viščiukų kraujo serume.
[0020] Grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės (natūralios ir išgarintos) priedai \ pašarą viščiukams padidino sistemos aktyvumą ir tuo pačiu viščiukų rezisten-tiškumą.
[0021] Grybo Geotrichum candidum kultūrinio skysčio, konser-vuotu baziniu nitrofurfuroldiacetato tirpalu 5-NFA, įtaka viščiukų organizmo imunitetui.
[0022] Bandymo sąlygos ir analizės metodai buvo analogiški kaip ir bandymo 2. Schema ir bandymo rezultatai parodyti 4 lentelėje. Primaišius i, gaidžiukų pagrindini, racioną grybo Goetrichum candidum, išskirto iš kultūrinės terpės skysčio, ir 5-HFA koncervanto padi-dėjo kraujo serume globulininės frakcijos koncentracija. Taip pat nustatytas padidėjimas CIK, T- ir B-lim-focitų bei lizocimo aktyvumo padidėjimas.
[0023] Analogiški rezultatai gauti bandyme su vištaitėmis. Gauti rezultatai parodo, kad tirti priedai padidino imunogumoralini, aktyvumą T- ir B- limfocitų, kaip gaidžiukų taip ir vištaičių organizme.
[0024] Gauti duomenys parodė, kad priedas prie pagrindinio raciono polisacharido išskirto iš grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės veikia ir gaidžiukus ir vištaites kaip imunomoduliatorius.
[0025] Grybo Geotrichum candidum, išskirto iš kultūrinės terpės, priedo prie pagrindinio paršiukų raciono įtaka paršiukų gyvos masės prieaugliui ir imuniteto rodikliams bei organizmo atsparumui.
[0026] Bandymas atliktas fermoje "Strauti" A/0 "Uzvara" Latvi-joje Bauskės rajone. Kiekvienoje grupėje buvo po 30 paršelių. Bandomoji grupė prie pagrindinio raciono gavo 1 % grybo Geotrichum candidum kultūrinės terpės priedą. Bandymo pradžioje ir pabaigoje buvo atlikti imuniteto rodiklių ir gyvūno svorio tyrimai (5 lentelė).
[0027] Gauti duomenys parodė, kad bandymo pradžioje bandomųjų grupių paršeliuose tirti rodikliai buvo blogesni kaip kontrolinėje grupėje. Po mėnesio paršelių bandomojoje grupėje, kurie gavo minėtus priedus, tirti rodikliai skyrėsi nuo kontrolinės grupės šiais rodikliais (5 lentelė). 1) santykinai, lyginant su albuminais, padidėjo globulino kiekis, tai rodo imunosistemos aktyvumo padi-dėj imą; 2) padidėjo bendras globulinų kiekis, ypatingai pa-didėjo y globulinų; 3) lizocimo aktyvumas padidėjo nuo 10,05 vnt/ml iki 17,5 vnt/ml; 4) žymiai padidėjo aktyviųjų limfocitų - nuo 15,0%
[0028] kontroliniame bandyme iki 34,0 eksperimentiniame bandyme, o taip pat padidėjo limfocitų kiekis nuo 11% iki 15 %.
[0029] Kraujo serumo baltymų frakcijos pakitimai, o taip pat T ir B limfocitų koncentracijos padidėjimas bandomojoje grupėje rodo bandomojo preparato imunostimuliuoj antį veikimą.
[0030] Gauti gvyvūnų imuniteto duomenys rodo, kad eksperi-mentinių grupių gyvūnų sveikata žymiai geresnė, negu bandomųjų grupių. 6 lentelėje pateiktas vidutinis paršelių svoris bandymo pradžioje ir pabaigoje. Eksperimentinės grupės paršelių paros priesvoris 776 g, o kontrolinės grupės - 562 g. Bandymo pabaigoje vidutinis paršelių paros priesvoris bandomojoje grupėje buvo 54,19 kg, o kontrolinėje 47,14 kg.
[0031] Grybo Geotrichum candidum grynos kultūros veršelių ra-cione i,taka kraujo serumo imuninės sistemos rodikliams.
[0032] Bandymas atliktas Bauskės rajono akcinės bendrovės "Uzvara" fermoje. Buvo sukomplektuota po 15 veršelių. Kontrolinė ir bandomoji grupės gavo vienodą, subalan-suotą pagrindini, racioną. Bandomajai grupei i, pagrindini, racioną buvo įmaišoma 1 % grybo Geotrichum candidum grynos kultūrinės terpės priedas. Bandymo pradžioje ir pabaigoje veršelių kraujo serume tirti organizmo imunosistemos pagrindiniai rodikliai.
[0033] Gauti duomenys rodo (7 lentelė), kad po mėnesio šėrimo bendras globulinų kiekis padidėjo abiejose grupėse, bet bandomojoje grupėje CIK patikimai padidėjo nuo 4,7 vnt iki 8,0 vnt, o tai reiškia B-limfocitinės sistemos imuniteto stimuliuojanti, efektą. Lizociminis aktyvumas kontrolinėje grupėje padidėjo iki 5,9 vnt/ml, o bandomojoje iki 13,3 vnt/ml. Bandomojoje grupėje kraujo serume žymiai padidė]o T ir B limfocitų kiekis, o taip pat imunoregulįuoj ančių T limfocitų.
[0034] Gauti duomenys rodo, kad grynos kultūros, o taip pat inaktyvuotos kultūros grybo Geotrichum candidum priedas viščiukų, paršelių ir veršelių racionuose žymiai padidino gyvūnų organizmo atsparumą.
[0035] Šio išradimo teigiamas efektas tas, kad biosintezės būdu iš grybo Geotrichum candidum gautas naujas imunomoduliatorius, kuri galima naudoti kaip efektyvią priemonę gyvūnų gydymui ir ligų profilaktikai.
[0036]
1. Žemės ūkio gyvulių ir paukščių atsparumą didinantis preparatas, gaunamas kultivuojant mikroorganizmus, besiskiriantis tuo, kad panaudojamas grybas Geotrichum candidum.
2. Žemės ūkio gyvulių ir paukščių atsparumą didinantis preparatas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad i, grybo Geotrichum candidum kultūrinę terpę pridedama 0,5-5% bazinio nitrofurfuroldiacetato tirpalo.
3. Žemės ūkio gyvulių ir paukščių atsparumą didinančio preparato naudojimo būdas, besiskiriantis tuo, kad natūralią arba išgarintą grybo Geotrichum candidum kultūrinę terpę arba polisacharidų kompleksą, išskirtą iš šio skysčio, įmaišo i, žemės ūkio gyvulių ir paukščių pašarus.