[LT] Išradimas priskiriamas farmacinėms kompozicijoms, tinkančioms neurodegeneraciniams susirgimams gydyti, turinčioms aktyvius ingredientus, sąlygojančius adekvačias koncentracijas laike ir lygyje tiek kraujyje, tiek ir smegenyse ir jų paruošimo būdai.
[EN]
[0001] Išradimas yra farmacinė kompozicija, skirta neurodegeneratyv.inių ligų gydymui, turinti atitinkamų koncentracijų aktyvius igriedientus', priklausomai nuo laiko ir lygio, tiek kraujyje, tiek ir smegenyse, bei jos paruošimo būdas...
[0002] Žinoma, kad . monoamino oksidazė /MAO/ yra vienai iš pagrindinių biogeninių aminų apyskaitos, vykstančios žmogaus nervinėse ląstelėse, fermentas (Blaschko H., Pharmacol. Rev.4, 415 (1951;). Dėl savo aktyvumo biologiniai aminai, turintys esminę paskirti, pernešti nervini, impulsą, virsta neefektyviais metabolitais. Pastebėta, kad kai kurių ligų atvejais, biogeninių aminų lygis smegenyse būna sumažėjęs.
[0003] Agentai, slopinantys metabolizuojanti, fermentą (fer-mentus) gali atstatyti normalų šių fermentų lygi,. Tai ir yra ta priežastis, dėl ko MAO slopinto-jai buvo pradėti naudoti žmogaus terapijoje. Pastebėta, kad MAO slopintojai gali sukelti eilę pašalinių .efektų, kurie susiję su tiramino (struktūriškai tai biogeninis aminas) suaktyvinimu ("sūrio reakcija"), kuris gaunamas iš maisto ir gali sukelti kraujo spaudimo padidėjimą, bei gali būti mirties priežastimi /Piackar ir kt., Psychopharmacology 73, 3087, (1981)/.
[0004] MAO egzistuoja dviejose formose, pavadintose MAO-A ir MAO-B. Selektyviai slopinant B formą, A-forma gali suskaldyti tir^miną,- kuris yra mišraus substrato tipas ir pavojingo pašalinio efekto galima išvengti. Tai galėtų pasireikšti (-)-deprenilo, /(-)-N-(-1-fenil-izopropil)-N-metil-propilamino hidrochlorido)/ atveju, kuris selektyviai ir negrįžtamai slopina MAO-B fferrnentą
[0005] (Elsworth ir kt., Psychopharmacology bl_, 33, /1978/) . Fermento aktyvumo regeneracija galėtų įvykti dėl negrįžtamo slopinimo naujai resintezuoj ant fermentą. Fermento negrįžtamo slopinimo vystymasis apima dvi
[0006] stadijas. Pirmoji yra grįžtama, ir tik kita stadija yra slopinančio komplekso susidarymas, kuris tampa negrįžtamu. Fermento regeneracijos pusperiodis yra 7- 8 dienos ( Greland ir kt., J. Neutral. Transm. Suppl. 32, l' 5- 59, / 1990/) .
[0007] Fermentų substrato specifiškumai ir geriausiai žinomų inhibitorių selektyvumas yra apžvelgtas Dostert ir jo bendradarbių ( Medicinai Research Reviews, t- 9, Nr. 1. . 45- 89, / 1989/) . Balard ( Science 219, 979- 980, / 1980/) ir Bruns ( Proc, Natl. Acad. Sci . 8C), 4546- 4550, / 1983/) aprašė, kad t- iPTP ( l- rr. etil- 4- fenil- l, 2, 3, 6- tetrahidro-piridinas), dėl savo neurotoksinio aktyvumo sukelia žmonėms parkinsoninj, sindromą ir panašūs simptomai gali būti pastebimi bandymuose su gyvūnais. MPTP sukelia selektyvų smerenų dryžuotojo . kūno dopaminėrginiu neuronų pažeidimą. Histologini s. i pakitimai yra panašūs i, tuos, kurie stebimi parkinsoninio lavono smegenyse. Yra žinoma, kad šio MPTP efekto galima išvengti su MAO clopintojais, ypatingai su deprinilu. Prevencinis (-) - aeprinilo vaidmuo . atsiranda dėl MPTP virtimo i, MPP + slopinimc. ( Nature, 311 , 467, / 1984/) . MPTP sukelti neuroną. 1 iniai pažeidimai gali būti atitolinti taip pat su dopaajio absorbcijos inhibitoriais ( Proc. Natl. Acad.. USA, 82, 2175, 1985), kaip mazindolu, slopinam". MPP+ ( metil- fenil- piridino jono) aktyvią abscrbciją i, dopaminerginius neuronus.
[0008] Funkcionuojant MAO, susidaro laisvi vandenilio perok-sido ir deguonies radikalai, kurie gali sukelti oksidacinius neuronų pažeidimus. Dėl MAO taip pat . gali susidaryti amoniakas ir kai kurie heterocikliniai izochinolinai, kurie iaikomi neurotoksiikais. ( Mas ter ir kt., Drug metabolism. Revicws, Z2_, 291- 332, / 1S90/ ; P Riederer ir kt., Actą Neurol. Scand., 3 2 6 , 41, / 1989/ ; Benedetti ir Dostert, Biochem. Pharm. t. _ 3C, 555, / 1989/).
[0009] Žinoma, kad DSP-4(N-(2-chloretil)N-etil-2-brom-benzil-aminas), neurotoksinis agentas, sukelia selektyvų noradrenalino (NA) pašalinimą nuo centrinių ir periferinių noradrenerginių neuronų (Grzanna ir kt., J. Hist'ochem. Cytochem., 1435-1442, 1989).
[0010] - resorbcijos inhibitoriai, tokie kaip deziprami-nas (10,ll-dihidro-N-metil-5-H-dibenz(6,7)azepin-5-propanaminas) slopina DSP-4 NA-pašalinimo efektą
[0011] (Jor.sson ir kt., Neuroscience, 7, 2895, /1982/;
[0012] -MDL 72974A/(E)-4-fluor-beca-fluor-etilenfenilo butanaminas) didelio selektyvumo MAO-B inhibitorius, stokoja katecholaminerginio resorbcijos
[0013] blokavimo savybių, ir todėl . nepavyksta, užkirsti kelio DSP-4 sukeltam toksiškumui (Finnegen ir kt.,
[0014] Eur. J. of Pharmacol., 184, 119-126, /1990/) .
[0015] Tampa aišku, kad (-)-deprenilas negali būti apibū-dinamas tik kaip paprastas .selektyvus MAO-B negrįžtamas inhibitorius. Buvo nustatyta, kad jis slopina dopamino, noradrenalino ir tiramino absorbcija galiniuose nervuose ir periferinių nervų mazguose, bet tik ypatingai didelėmis dorėmis (Knoll, Advances in Biochem. Psychopharmacology; t. 5, 393, 1972). Reikia atkreipti dėmėsi, v tai, kad kartu su MAO slopinimo efektu, deprenilas pasižymi absorbcijos slopinimo aktyvumu.
[0016] Mūsų' tikslas yra paruošti optimalių savybių farmacinę kompoziciją, skirtą neurodegeneratyvių ligų gydymui. Atliekant bandymus, 'mes ištyrėme, kad 1.) Ilgalaikis MAO slopinimas gali būLi pasiektas tik tuo atveju, jei inhibitoriaus koncentracija smegenyse ir kraujyje siekia pakankamai didelę (15-40 pmol/mg audinio) koncentraciją. Kada inhibitoriaus koncentracija yra per didelė (30 mg/dieną) metabolitų koncentracija būna taip pat pakankamai didelė ir sukelia nepageidaujamą psichostimuliuojant j, efektą ir/arba sumažėja inhibitoriaus selektyvumas (MAO-A taip ' pat slopinamas). 1.) Deprenilas ir p-fluor-deprenilas (N-(4-fluor-fenil)--izoprop-l-il)-N-metil-propinilaminas) pasižymi aktyvumu, kaip pradinis (nepakitęs) junginys ir kaip metabolitas.
[0017] Po alternatyviai ir poziciškai pažymėto deprenilo ir p-fluor-deprenilo (žiedas-3H ir propargilas-HC (1.5, 10 mg/kg, atitinkamai) skyrimo per- burną žiurkėms, junginių pasiskirstymas buvo tiriamas 15-oje smegenų sričių (visos susijungusių smegenų dalys buvo tiriamos nepriklausomai, kartu 25 smegenų plotuose ir plazmoje) 96 h bėgyje, kaip laiko funkcija. Buvo nustatyta, kad nepakitęs junginys greitai absorbavosi (per 15 minučių) ir isiskverbė i centrinę nervų sistemą. Nepakitusi deprenilo molekulė neilgai išsilaiko smegenyse, bet metabolitai audiniuose gali būti randami ilgesni, laiką.
[0018] Vienalaikiai ir tokie patys pažymėti kiekiai • rodo nepakitusią molekulę (duomenys priklauso molinėms koncentracijoms, apskaičiuotoms pagal dvi pažymėtas). Dėl greitų pasikeitimų, pastebėtų H/ C santykio, įšvirkšto i audinius, mūsų eksperimentas rodo žymų metabolitų formavimąsi (amfetamino, metilamfetamino, p-fluor-metilamfetamino ir p-fluoramfetamino) ir jų buvimą smegenyse. 3.) Potencialūs deprenilo ir p- fluor- deprenilo metabolitai ( metilamfetaminas, amfetaminas ir p- fluor-met^ lamfetaminas, p- f luor-'- amfetaminas, atitinkamai) pasižymi ryškiu absorbcijos slopinimo efektyvumu; jie gali užkirsti kelią MPTP neurotoksiškumui in vivo be ryškaus MAO slopinimo laipsnio išsivystymo. Rezultatai parodyti 1, 2 ir 3 lentelėse. Bandymai buvo atlikti pagal Heikillo metodiką ( Nature, 311 , 467- 469, / 1984/). 4.) Potencialūs deprenilo ir p- fluordeprenilo metabolitai ( metilamfetaminas, amfetaminas ir p- fluor-amfetaminas, atitinkamai) gali užkirsti k lią DSP- 4 sukeltam neurotoksiškumui 1- 5 mg/ kg ( p. d.) doze in vivo be MAO slopinimo išsivystymo.
[0019] Bandymai atlikti pagal Finnegan metodiką ( Finnegan ir kt., Eur. J. Pharmacol., 184; 119- 126, / 1990/).
[0020] Naudojant metabolitus didele koncentracija in vivo ( 10 mg/ kg; p. t.), jie padidina DSP- 4 toksiškumo efektą, kuris pasireiškė gyvūnų mirtimi. 5.) Ilgalaikis metabolitų buvimas reikalingas neuro-toksiškumo prevencijai, arba tinkamai aukštai nepakeisto junginio koncentracijai per trumpesni, periodą ( koncentraciją, . būtina negrįžtamo MAO- B slopinimo užbaigimui), arba dėl absorbcijos slopinime grįžtamumo.
[0021] Nustatyta, kad' maksimalus efektas gali būti pasiektas išpildžius abi sąlygas.
[0022] Išradimas apima dviejų fazių vaistinę kompoziciją, susidedančią iš aktyvaus ingrediento- junginio, pasižy-minčio MAO slopinimo efektu, ir junginio, pasižyminčio absorbciją slopinančiu efektu, kartu su įprastomis pagalbinėmis medžiagomis.
[0023] Pagal išradimą, kompozicijos aktyvus ingredientas turi 5>-95 masės % grįžtamo ar negrįžtamo MAO inhibitoriaus, 5-95 raasės % absorbcijos inhibitoriaus, geriausiai prailginto veikimo 1-19:1-19 santykiu, geriausiai 1:1, i -, 7. ar li 3 santykiu. . Kompozicija skiriama priklausomai nuo paciento stovio, klinikinio vaizdo rimtumo ir nuo individualaus paciento jautrumo, 5 -20 mg, geriausiai 10 mg/per' dieną doze.
[0024] Dažniausiai absorbcijos inhibitorius nėra ilgo veikimo, todėl inhibitorius geriausiai naudojamas prailginto veikimo formoje. Geriausiais .MAO inhibitoriais gali būti panaudoti pasirinktinai deprenilas, p-fluor-deprenilas.. jų druskos, bei optiškai aktyvūs izomerai.
[0025] Absorbcijgs inhibitoriais geriausiai gali būti naudojamas deprenilas,-, p-fluor-deprenilas arba • kai kurie bendros 1 formulės junginiai
[0026]
[0027] kurioje R1 yra tiesi arba šakota alkilo grupė, C7.10 fenilalkilo grupė, arba fenilo grupė, C3_į cikloalkilo grupė, R' yra tiesi arba šakota C^g alkilo grupg arba C^a alkilo grupė, pakeista halogeno atomu, hidroksi-Cj alkoksi grupe arba viena ar dviem fenilo (grupėmis, fenilo grupė arba C3.8 cikloalkilo grupė, su sąlyga, kad R1 ir R2 kartu turi mažiausiai 3 anglies atomus arba kai
[0028] kurias druskas, gautas pridėjus rūgšties arba jų metabolitai.
[0029] Bendroj formulės I junginiu geriausiai gali būti panaudoti: N-propiĮ-l-fenil-2-pentiJaminas arba jo draska, gauta pridėjus rūgšties,
[0030] N-propil-1-fenil-2-butilaminas arba jo druska, gauta pridėjus rūgšties arba
[0031] N-propil-1-fenil-2-heksilaminas arba jo druska, gauta pridėjus rūgšties.
[0032] Dviejų fazi* kompozicijos, pagal išradimą, gali būti paruoštos iš esmės žinomais metodais, piliulių,
[0033] tablečių, padengtų tablečių, transkutaninių. kompozi-cijų, dražė, mikrokapsulių su suspensijomis, kapsulių, padengtų kapsulių, suspensijų per os, suspensinių injekcijų formoje, naudojant žinomus priedus.
[0034] Priedais geriausiai gali būti panaudotos sekančios medžiagos: a) Užpildais: sacharoi.ė, laktozė, manitoliš, krakmolas, krakmolas-talkas-sacharozė, kalcio fosfatas, hidroalko-nolinis polividono tirpalas (polivinilpirolidonas) ir t. t.
[0035] lipofilinė bazė (stearino rūgštis, stearino rūgšties palmitatas, glicerinas-ditripalmitatas-stearatas ir t .'t. - kiti priedai, žinomi farmacinėje technologijoje: Eudragito dariniai, ir 1. 1. ; celiuliozės dariniai: HPMČ, CMC, ES ir jų druskos. c) Granuliacinis tirpalas: vanduo, etanolis, etanolis-vanduo, izopropanolis- vandūo. d) Rišamosios medžiagos: PVP/ VA, Eudragit dariniai, celiuliozės dariniai ir jų druskos.
[0036] Tam tikra prasme galima teigti, kad farmacinė kompozicija paruošiama in situ, tai yra pacientas vienu metu gydomas tinkamai MA. 0 inhibitoriaus doze, reikalinga galutinio 98% MAO slopinimo pasiekimui, ir tinkama absorbcijos inhibitoriaus doze, reikalinga pasiekti pastovų absorbcijos slopinimą.
[0037] Deprenilo, p- fluor- deprenilo, junginių, kurių bendra formulė I, gavimas yra aprašytas OS patente Nr. 4 564 706, Europos patento Nr. 186 680 aprašyme ir Portugalijos patento Nr. 85 799 aprašyme.
[0038] 1. Dviejų fazių tabletė paruošiama iš esmės žinomu būdu:
[0039] a) Deprenilas : 5 mg Metilceliuliozė k 4 M kokybė : 50 mg
[0040] Pakankamas izopropanolio kiekis granulių pagaminimui.
[0041] Pakankamas izopropanolio kiekis granulių pagaminimui ( taip pat gali būti panaudotas distiliuotas vanduo).
[0042] Talkas : 15 mg Aerosilas- 200 : 2 mg
[0043] 2 . Prailginto veikimo veikimo tablečių , turinčių 15 mg deprenilo , paruošimas
[0044]
[0045] 1. Granulių paruošimai sausu granuliavimu, iš esmės gerai žinomu būdu.
[0046] Collidon VA 64, Carbopol 940, stearino rūgštis, steroteks ( susmulkintas) ( hidrogenizuotas medvil-nės aliejusJ, Eudragitas RSPM ( akrilinės-metakrilinės rūgšties esterio kopolimeras), deprenilas. 2. Pudros mišinys tabletuojamas ekscentrine tabletavimo mašina, kai yra maži apsis./ min.
[0047] a) 316, 5 cg/ 15 dalių b) 316, 0 cg/ 15 dalių c) 319, 0 cg/ 15 dalių
[0048] Tirpinimo terpe buvo naudotas dirbtinis skrandžio
[0049] skystis be pepsino ( Ph. Hg. VII.) - '•
[0050] d=l cm;
[0051]
[0052] - su šiomis kompozicijomis paruošiamos " greitos" ir " lėtos" piliules:
[0053] - Deprenilas 16, 3 mg
[0054] - Etilceliuliozė ' apie 8, 4 mg - Talkas apie 16, 9 mg - Ricinos aliejus apie 1, 7 mg
[0055] Sacharozės kristalai padengiami krakmolo- talka-sacharozės mišiniu ir hidroalkoholiniu polividono ir sacharozės tirpalu ( cukraus apvalkalas).
[0056] Deprenilo hidrochlorido ir laktozės mišinys pritvir-tinamas prie mikrogranulių, naudojant alkoholini, polividono tirpalą. " Lėtų" piliulių atveju, ant mikrogranulių pritaikoma alkoholinės etilceliuliozės ( plastifikuota su ricinos aliejumi) ir talko glazūra.
[0057] Norint gauti reikalingą " greitą", arba " lėtą" piliulę, norimi " greitų" ir " lėtų" piliulių kiekiai i, maišomi i, kapsulę iš esmės žinomu būdu.
[0058] 4 . Dviejų fazių transkutaninės kompozicijos paruošimas ( UG - 191 )
[0059]
[0060] Karbovaško komponentai išlydyti ir mišinys išpiltas i, Erweka tipo maišymo indą prie 50°C ir sumaišytas 6 faze. Deprenilas ištirpintas ir suspenduotas i, propileno glikolio ir Cremofor EL mišini, prie 50°C ir mišinys porcijomis ( 50 g kiekviena) pridėtas i, maišymo indą. Po kiekvienos porcijos, mišinys maišomas 1 minutę. Pagaliau, Ksantano guma- pridėta porcijomis ( 5 g kiekviena), kai yra didesnis greitis ( 9 faze). Po kiekvienos pridėtos porcijos, mišinys maišomas 1 minutę. Po to maišymo greitis sumažintas iki 3, 5 fazės ir maišymas tęsiamas, kol atšąla ( apytiksliai, 1, 5 valandos). Aktyvios medžiagos kiekis yra 6,84 %, o stabilumas atitinkamas.
[0061] Skystai kristalinis būvis: 100%, su persišviečiančiais kietais 8-10 mikronų kristalais. /Cremofor EL: glicerin-poli-etilenglikol-ricinoleatas,_ Ksantano guma: polisacharidas/.
[0062] Farmakologiniai duomenys: Planuojant eksperimentines sąlygas, turi būti atsižvel-gta i sekančius duomenis. Tiesioginis metabolitų absorbcijos inhibitoriaus efektyvumo matavimas in vivo nelavo įmanomas dėl jų grižtamos prigimties.
[0063] MAO-B inhibitoriaus efektyvumas - naudojant 'trombocito
[0064] ■MAO-B aktyvumą indikatoriumi - periferiškai išma-tuojamas kiaulėse (trobocitai, gaunami iš kitų rūšių, neturi gerai išmatuojamo MAO-B fermento aktyvumo).
[0065] Matuojant DSP-4 neurotoksiškumo priklausomybę nuo laiko žiurkėse (indikatoriumi naudojant Amonio rago noradrenalino tūri,) paveikus skirtingomis deprenilo dozės formomis, gali. būti įvedamas tarpusavio rysis tarp DSP neurotoksiškumo trūkumų ir atitinkamo, bet ne ypatingai aukšto deprenilo metabolitiį -lygio lygio kraujyje.
[0066] Eksperimentų serijose analitine technika buvo matuojamas pastovus naminių kiaulių deprenilo metabolitų lygis kraujujt, o MAO aktyvumas buvo taip pat nustatomas trombocituose, smegenyse ir kepenyse.
[0067] Eksperimentai buvo atliekami su vyriškos lyties (didelėmis baltomis) naminėmis kiaulėmis, sveriančiomis 20-25 kg. Eksperimentų metu kiaulės laikomos narveliuose atskirai, ir duodamas ts.3 pats maistas-, kuris buvo naudotas anksčiau. Gyvūnams per burną skiriamos 5; 7,5; 10; 15 mg (-) -deprenilo piliulės ir 10 mg injekcijos. Kraujo pavyzdžiai (5 ml) paimti po 0; 0', 08; 0,25; 0,5; 0,75; 1; 1,5; 2; 3; 4; 6; 12; 24 ir 48 h i, centrifugavimo vamzdelius su 500 TV heparino analitiniams matavimams.
[0068] <
[0069] Pavyzdžiai centrifuguojami 1500 apsis./min. greičiu 10 .min. plazmos atskyrimui. Metabolitai nustatomi dujų chromatografijos metodu, naudojant Hp-5890 dujų chromąlografą, eliuavimo laikas metilamfetaminui: 21,4 min-.
[0070] DSP-4 neurotoksiškumo slopinirnas išmatuotas žiurkėse. Dirbant su žiurkėmis, sekama Finnegan schema (E'innegan ir kt., EUR. J. Pharmacol., 184; 119-126; /1990/).
[0071] Buvo naudojamos • Wistar vyriškos lyties' žiurkės, sveriančios 170-200 g. Gyvūnai patalpinami po šešis i, narveli,, esant pastoviai temperatūrai (22°C) apšvies-tame 12 h per dieną kambaryje. Maistas ir vanduo buvo laisvai prieinami. Žiurkės buvo paveikiamos per burną 3 mg/kg 3 pavyzdžio kompozicija (1 mg/kg "greita" <F)+2 mg/kg "lėta" (S)), 1, 2, 4 ir 8 valandas prieš DSP-4 poveiki, (50 mg/kg intraperitoniškai) . Prieš (-)-deprenilo poveiki,, gyvūnai neėdė 24 valandas. Žiurkių Amonio ragas išskrostas ir noradrenalino kiekis buvo matuojamas aukšto slėgio skysčio chromatogra.fi jos (ASSC) technika.
[0072] Iš fig. 4. matyti, kad 3 mg/kg deprenilo per os gali užkirsti kelią 50 mg/kg DSP-4 p. d. neurotoksiškumui žiurkėse. Kontrole naudojant ("greitą") sudėti,, pirmame periode trukdymas aukštas (86,1 %), bet jis krenta eksponentiškai, ir po 8 valandų siękia D3P-4 poveikio kontrolei (19,6 %) lygi,. Apibrėžta kompozitija pasirei-škia 58,8 % slopinimu, slopinimas praktiškai identiškas (54,5 %), palyginus su kontroline sudėtimi (51,5 %) po dviejų valandų, bet yra žymiai aukštesnis (43,3.1 %) negu kontrolės (16 %) ir praktiškai nepasikeičia aštuonių valandų bėgyje. Paveikus 4 mg/kg deprenilu nustatyta, kad kontrolinė ("greita") sudėtis sušvelnino DSP-4-neurotoksiškumo priklausomybę nuo laiko, skir-tingai nuo apibrėžtos ("greitos" ir "lėtos") sudėties.
[0073] (Žiūr. fig. 5). Tai reiškia, kad "greitos" komponentės dozės negalima didinti neribotai, nekreipiant dėmesio i, nepageidautinus pašalinius efektus.
[0074] Priešingai, pritaikant apibrėžtos kompozicijos su didėjančiu kiekiu "lėtos" dalies, MAO-slopinimas didės, •tai reiškia, kad bus prarastas deprenilo selektyvumas.
[0075] 4 lentelė
[0076]
[0077] Transkutaninių preparatų atveju kontrolinė grupė veikiama per burną 10 mg deprenilo želatininc-je kapsulėje. MAO-B aktyvumo nustatymui kraujo pavyzdžiai imami po 0, 3, 6, 24, 48, 72 ir 96 h. Paėmus krauro pavyzdi, po 96 h, kiaulės buvo užmušamos, o MAO- B ir MAO- A aktyvumas nustatomas išskrostose smegenyse.
[0078] K' ita grupė buvo veikiama, kaip ir kontrolinė, su UG- 111 transkutaniniu preparatu, turinčiu 10 mg (-)- deprenilo. Kraajo pavyzdžiai imami po 0, 3, 6, 24 ir 48 h. Transkutaniniai preparatai buvo nuimti po 24 h. Likusio (-)- deprenilo preparatų kiekio nustatymui panaudotas • pleistras ir jo nailoninis ' apvalkalas. Oda plaunama etanoline medvilne- vilna, kuri^ taip pat buvo naudojama ( ASSC) nustatymui. Kiaulės buvo užmuštos 48- ą valandą, o MAO- A ir MAO- B aktyvumas nustatytas smegenyse.
[0079] Trečia kiaulių grupė buvo veikiama, kaip ir kontrolė UG- 167, turinčiu 90 mg (-)- deprenilo.
[0080] Kraujo pavyzdžiai paimti po 0, 3, 6, 24, 48 ir 72 h. Pleistrai buvo nuiir. ti 48- ą h ir procedūra, aprašyta 2-ai grupei,, buvo užbaigiama.
[0081] Ketvirta kiaulių grupė buvo veikiama UG- 191, turinčiu 30 mg (-)- deprenilo. Kraujo pavyzdžiai, paimti po 0, 3, 6, 24, 48, 72 ir 96 h. Pleistrai buvo nuimti 48- ą h ir visa procedūra, aprašyta 2- ai grupei, buvo užbaigiama.
[0082] Kraujas buvo paimtas iš tuščios venos 20 ml plast-masiniu švirkštu, turinčiu 1, 5 ml 7, 6 % Na- citrato tirpalo. Kiekvienu kraujo pavyzdžio ėmimo metu buvo paimta 18, 5 ml kraujo. Mao aktyvumas matuojamas radiometriškai pagal Wurtman ir Axelrod metodiką
[0083] ( Biochem. Pharmacol, 12. 1414- 19; 1963) su nedidele modifikacija ( K. Magyar in: Monoamine Ok. sidases and their Selective Inhibition. Ed. : K. Magyar, Pergamon Press, Akademiai Kiado, Budapest 11- 21; 1980).
[0084] Trombocitai preparatuose buvo sekami metodu, aprašytų Willberg ir Oreland (Med. Biol., 54:137-44; 1976).
[0085] ■%
[0086] 5 lentelė{-)-Deprenilo absorbcija nuo transkutan-inių preparatų, kaip laiko funkcija, kiaulėse. (Likusio pleistre (-)-deprenilo kiekis buvo nustatinėjamas ASSC technika).
[0087] MAO-B aktyvumo slopinimo rezultatai trombocituose po naudojimo per os ir transkutaliai parodyti 6 lentelėje. 6 lentelė (-)-Deprenilo efektyvumas, slopinant trombocitų (%) MAO-B aktyvumą, palyginus su kontrole. Matavimai buvo atlikti su 14C-££A substratu. + S.D. (n=3).
[0088] MAO aktyvumo nustatymo smegenyse rezultatai parodyti 7 lentelėje. 7 lentelė . (-)- Deprenilo efektyvumas slopinant MAO-aktyvumą (%) , palyginus su kontrole. Matavimai atlikti naminių kiaulių smegenų nerviniuose centruose be homogenatų ir kepenyse su l4C-PEA; 14C-5-HT substratas. + S.D. (n=3).
[0089] Kompozicija, dalelių dydis, skirtingų kontrolės prepa-ratų skysto kristalinio būvio procentas sekantis:
[0090] Vidutinis dalelių dydis: . 72. 7 mikronai; skystas kristalinis būvis: 20%.
[0091] Vidutinis dalelių dydis: 91- 109 mikronai; skystas kristalinis būvis: 70- 80%.
[0092]
1- Dviejų fazių farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš aktyvaus ingrediento monoamino oksidazės inhibitoriaus ir absorbcijos inhibitoriaus, kartu su įprastais farmaciniais priedais.
2 . Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti.tuo, kad ji susideda iš nepertraukiamo veikimo grįžtamo ar negrįžtamo monoamino.oksidazės inhibitoriaus.
.tuo, kad ji susideda iš nepertraukiamo veikimo grįžtamo ar negrįžtamo monoamino.oksidazės inhibitoriaus.3. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš nepertraukiamo veikimo absorbcijos inhibitoriaus.
4. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš 5-95 masės % absorbcijos inhibitoriaus.
5. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš momoamino oksidazės^ inhibitoriaus ir absorbcijos inhibitoriaus 1-19:1-19 santykiu.
6. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad absorbcijos inhibitorius naudojamas prailginto veikimo forma.
7. Kompozicija pagal' 1 punktą, besiskirianti tuor kad ji susideda iš monoamino oksidazės inhibitoriaus N-/l-fenil-izopropil/-N-metil-propinilamino hidrochlorido arba jo optiškai aktyvaus -izomero.
8. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš monoamino oksidazės inhibitoriaus N-/4-fluor-fenil/-izoprop-l-H-N-metil-propinilamino arba jo optiškai aktyvaus izomero.
9. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji.susideda _š prailginto veikimo absorbcijos inhibitoriaus N-/l-fenil-izopropil/- N-metil-propinilamino hidrochloriao arba jo metabolito, arba jo optiškai aktyvių izomerų arba metabolitų.
10. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš prailginto veikimo absorbcijos inhibitoriaus N-/4-fluor-fenil/-izoprop-l-il-N-metil-propilamino arba jo metabolito, arba jo optiškai aktyvių~~Tzomerų arba metabolitų.
11. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš absorbcijos inhibitoriaus bendros formulės I
12. Kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad susideda iš aktyvaus ingrediento, bendros formulės I junginio, kurioje R1 reiškia etilo, propilo, butilo, heksilo, fenilo ar fenilmetilo grupę.
13. Kompozicija pagal 12 punktą, besiskirianti tuo, kad ji susideda iš bendros formulės I junginio N-piopil-l-fenil-2-pentilamino ar jo, druskos, pridėjus rūgštieŽ, N-propil-l-fenil-2-butilamino ar jo druskos, pridėjus . rūgšties, arba N-propil-l-fenil-2-heksilamino arba jo druskos, piidėjus rūgšties.
14. Kompozicijos pagal 1 punktą paruošimo būdas besiskiriantis tuo, kad monoamino oksidazės inhibitorių ir absorbcijos inhibitorių sumaišo su įprastais farmaciniais priedais ir sukomplektuoja i, terapinę kompoziciją, tinkamą klinikinių vaizdų, atsiradusių dėl neurodegeneratyvių procesų, gydymui.
15. Būdas pagal 14 punktą, besiskiriantis tuo, kad kompoziciją suformuoja i, dviejų fazių piliules, tabletes ar transkutanines kompozicijos formas.