[LT] Piramidin-4'-tionukleozidas, atitinkantis formulę:@@@@@@@@@@@@@@@@kurioje Y reiškia hidroksilą arba amino grupę, X reiškia chlorą, bromą, jodą, trifluormetilą, C2-C6-alkilą, C2-C6-alkenilą, C2-C6-halogenalkenilą, arba jų fiziologiškai funkcionalūs dariniai. Šie junginiai naudingi kaip antivirusiniai agentai.
[EN]
[0001] Šis išradimas liečia pirimidinius nukleozidus bei jų praktini, pritaikymą medicinoje, o jei konkrečiau, tai jis pateikia junginius, skirtus virusinių infekcijų gydymui bei profilaktikai.
[0002] Virusai iš DNR virusų tarpo, priklausantys herpeso grupei, yra labiausiai įprastų virusinių žmogaus susirgimų šaltinis. Nurodytą grupę sudaro: paprastojo herpeso virusas (PHV), juostinio herpeso virusas (JHV), citomegalovirusas (CMV), Einšteino - Baro virusas (EBV) ir žmogaus herpeso 6 virusas (ŽHV6) . PHVI ir PHV2 yra vieni iš dažniausiai pasitaikančių žmogaus infekcinių ligų sukėlėjų. Dauguma nurodytų virusų sugeba išlikti sergančiojo nervų ląstelėse; kartą užsikrėtus, indi-vidui pastoviai iškyla pavojus recidyviniam klinikiniam infekcijos pasireiškimui ir tai gali pasireikšti tiek fiziniu, tiek fiziologiniu negalavimu.
[0003] PHV infekcija dažniausiai charakterizuojama intensyviu ir sekinančiu odos, burnos ir/arba genitalijų pa-žeidimu. Pirminės infekcijos gali būti sublinikinės, nors turi tendenciją žymiai sunkesnei eigai, jei ją palyginsime su individų, anksčiau persirgusių infek-ciniu virusu, eiga.
[0004] PHV akių infekcija gali iššaukti keratitą arba kata-raktą, o tai pavojinga užsikrėtusiajam. Naujagimio, imunokompromisinių ligonių užkrečiamumas bei infekcijos prasiskverbimas i, centrinę nervų sistemą gali būti fa-talinis.
[0005] Viruso perdavimas vyksta, fiziškai kontaktuojant šei-mininkui su recipientu; su tuo susietas PHV infekcijos plitimas yra labai svarbi socialinė problema, ypač todėl kad iki šių dienų nesukurta efektyvi vakcina. Juostinio herpeso virusas (JHV) priklauso tiems herpeso virusams, kurie sukelia vėjaraupius ir juostinę pūs-lelinę. Vėjaraupiai priklauso pirminiams susirgimams, kuriais suserga neturintys tam imuniteto. Kūdikiai jais perserga lengva forma, kuri charakterizuojama veziku-liariniu bėrimu bei karštine. Juostinis herpesas arba juostinė pūslelinė priklauso recidyvinių formų susirgimams, pažeidžiantiems suaugusius, anksčiau infekuotus juostiniu herpeso virusu. Juostinės pūslelinės klinikinius pasireiškimus charakterizuoja neurologija ir vezikuliarinis bėrimas odoje, kuris savo pasiskirstymu būna vienpusis arba dermatoidinis. Uždegimo išplitimas gali sukelti paralyžių arba konvulsiją. Pažeidus sme-genų žievę, gali prasidėti koma. Ligoniams su imu-nodeficitu JHV gali diseminuoti, iššaukdamas sunkius arba netgi fatalinius susirgimus.
[0006] Ligoniams, vartojantiems transplantaciniais tikslais imunoslopinančius vaistus, JHV yra rimta problema ir sukelia rimtas komplikacijas sergantiems Spidu, nes jų pažeista imuninė sistema.
[0007] CMV infekcija, kaip ir kiti herpeso virusai, iki gy-venimo pabaigos susijungia su infekcijos nešiotoju ir, atlikus pirmini, infiltravimą, virusas daugeli, metu gali išlikti šešėlyje. Įgimta infekcija, i,gyta infekuojant motiną nėštumo metu, gali sukelti klinikinius efektus: mirti, arba gimdymo susirgimus (mikrocef ali j ą, hepto-splenomegal i j ą, geltą, protini, atsilikimą), retinitą, sukeliančius aklumą arba mažiau sunkiose formose augimo sustojimą ir polinki, krūtinės ląstos bei ausų infekcijai. CMV infekcijos ligonių su imunokompromisu, pavyzdžiui, esant piktybiškumui, gydymas imunoslo-pinančiais vaistais po transplantacijos arba žmogaus infekavimas imunodeficitiniu virusu gali sukelti reti-nitą, pultonitą, skrandžio žarnų trakto sutrikimus ir neurologinius susirgimus. Dažniausia mirties priežastis tarp sergančiųjų Spidu yra CMV infekcija, nes 50 - 80 % suaugusiųjų virusą nešioja latentinėje formoje, kuri gali reaktyvuoti imuno - pažeidžiamuose ligoniuose.
[0008] Einšteino - Baro virusas (EBV) gali sukelti infekcinę mononukleozę ir be to, laikoma, kad yra nosiaryklės vėžio, imunosritinės limfomos, Burkitt limfomos ir plaukuotos leikoplakijos priežastis.
[0009] VHB yra pasaulinio mąsto virusinis patogenas. Virusas etiologiškai surištas su pirmine hepatoceliuliarine karcinoma, ir, todėl 80 % atvejų yra kepenų vėžio priežastis. JAV kasmet hospitalizuojama daugiau nei dešimt tūkstančių žmonių, nes suserga VHB hepatitu ir, esant žaibiškai ligos eigai, vidutiniškai 250 miršta. Šiuo metu Jungtinėse Valstijose iš viso priskaičiuojama 500000 - 1000000 išaiškintų infekcijos nešiotojų. Chro-niškai aktyvus hepatitas paprastai išsivysto pas 25 % nešiotojų ir dažnai pereina i kepenų cirozę. VHB in-fekavimo klinikiniai pasireiškimai yra tokie: galvos skausmas, karštinė, negalavimas, sloga, pykinimas, ape-tito nebuvimas ir skausmai pilvo srityje. Viruso rep-likacija paprastai kontroliuojama imunine reakcija,' vykstant atsistatymui, trunkančiam pas žmogų savaitėmis arba mėnesiais, bet infekcija gali įgyti žymiai sun-kesnes formas, tuo sukeldama pastovius chroniškus ke-penų susirgimus, aprašytus anksčiau.
[0010] Mes aptikome, kad tam tikri pirimidin-4'-tionukleozidai herpeso virusų atžvilgiu pasižymi galingu aktyvumu. Panašūs junginiai sudaryti iš pirimidin-4'-tionuk-leozidų, kurių bendra formulė tokia:
[0011] Čia Y reiškia hidroksilą arbab amino grupę, o X reiškia halogeną trifluormetilą, metilą, C2 - C6 -alkilą, C2 - C* - alkenilą, C2 - C6 -halogenalkenilą, tame skaičiuje 2-brom-vinilą arba C2 - C6 alkinilą, ir jų fiziologiškai funk-cionalūs dariniai.
[0012] Tokiu būdu, išradime pateikiami pirimidin-4'-tionuk-leozidai, aprašyti formule (I):
[0013] Čia Y reiškia hidroksilą arba amino grupę, o X reiškia chlorą, bromą, jodą, trifluormetilą, C2 - C6 -alkilą, C2 - C6 -alkenilą, C2 - C6 -halogenalkenilą arba C2 - C6 al-kinilą, ir jų fiziologiškai funkcionalūs dariniai.
[0014] Iš Y grupės apibrėžimo seka, kad (I) formulės junginiai yra arba uracilo dariniai, arba citozino dariniai.
[0015] Be to, akivaizdu, kad (I) formulės junginiai gali egzis-tuoti įvairiose tautomerinėse formose.
[0016] ( I) formulės junginiai gali būti a - arba P - anomerų pavidalu, geriau, jei P -anomerų pavidalu.
[0017] Nuoroda, esanti (I) formulės apibrėžime ir skirta alki-linėms grupėms, įskaito grupes, i, kurių sudėti, įeinant mažiausiai trims anglies atomams, jos gali būti išsi-šakojusios arba ciklinės, bet geriau, jei jos yra normalios sandaros (konkrečiai, etilas įeina į alkilinęs grupes); nuoroda į alkenilo grupes įtraukia grupes, kurios gali būti E- arba Z- formoje arba jų mišinyje ir kurios, būdamos sudarytos mažiausiai iš trijų anglies atomų, gali būti išsišakojusios, bet geriau, jei yra normalios sandaros; nuoroda į alkinilo grupes įtraukia grupes, kurios, būdamos sudarytos mažiausiai iš keturių anglies atomų, gali būti išsišakojusios, bet geriau, jei jos yra normalios sandaros; į alkenilines grupes ypač gerai tinka vinilas ir E-(1-propenilas), o į alkinilo grupes ypač gerai tinka etinilas ir prop-1-inilas. Nuoroda į halogenpakeistas grupes įtraukia chloru, bromu, jodu ir fluoru pakeistas grupes ir grupes, pakeistas dviem arba daugiau halogeno atomais, kurie gali būti tie patys arba skirtingi, pavyzdžiui, perhalogenpakeistos grupės (ypač halogenalkenilinės grupės, tame skaičiuje E-(2-bromvinilas)). (I) formulės rekomenduojami junginiai yra sudaryti iš tų junginių, kuriuose X grupė pateikta kaip C2 - CĄ -alkilas arba halogenalkenilas, arba C3 - C4 -alkenilas arba -alkinilas. Rekomenduojamoms halogenalkenilinėms grupėms priklauso normalios sandaros halogenalkenilai, turintys vieninteli, halogeno atomą, esanti, prie galinės anglies. Be to, rekomenduojamos halogenalkenilinės gru-pės su dvigubu ryšiu 1-padėtyje. Iš panašių junginių yra rekomenduojami junginiai su E-konfigūracijos 2-ha-logenvinilo grupėmis.
[0018] Konkretiems išradimo junginiams priklauso (I) formulės junginiai ir jų fiziologiškai priimtini dariniai, kurių pirimidino bazė parenkama iš sekančių:
[0019] ir kuriems 4-tiokarbohidrato fragmentas yra 2-dezoksi-4-tio-D-ribofuranoze.
[0020] (I) formulės junginiai su (3 - konfigūracija, įdomūs kaip antivirusinės priemonės, yra: E-5-(2-bromvinilas)-2'-dezoksi-4'-ti>uridinąs, 2'-dezoksi-5-jod-41-tiouridinas, 2'-dezoksi-5-etil-4'-tiouridinas,
[0021] 5-brom-2 ' -dezoksi-4 ' -tiouridinas,
[0022] 2'-dezoksi-5-propinil-4'-tiouridinas, 5-chlor-2'-dezoksi-4'-tiouridinas,
[0023] 2'-dezoksi-5-etinil-4'-tiouridinas,
[0024] 2'-dezoksi-5-trifluormetil-41-tiouridinas, 2'-dezoksi-5-E-(2-bromvinil)-4'-tiocitidinas, 2'-dezoksi-5-propil-4'-tiouridinas,
[0025] (I) formulės rekomenduojamiems junginiams priklauso E-5-(2-bromvinil)-2'-dezoksi-4'-tio- p-uridinas ir 2'-dezoksi-5-etil-4'-tio- p-uridinas. Šie junginiai ypač efek-tyvūs prieš PHV1 ir 2 ir JHV sukeliamą infekciją.
[0026] Taip pat rekomenduotinas 2'-dezoksi-5-halogen-4'-tiouridinas, kuris ypač efektyvus prieš sukeliamą CMV infekcij ą. 1 anksčiau paminėtų darinių tarpą įeina farmaciškai priimtinos druskos. Esteriai ir esterių druskos, kurios, įvestos žmogui, gali sukurti (tiesiogiai arba netie-siogiai) antivirusini aktyvų metabolitą arba jo likuti.
[0027] Į išradime rekomenduojamų mono- ir diesterių sudėtį įeina karboksi 1inių rūgščių esteriai, kuriuose este-rinės grupės nekarboninį fragmentą parenka iš: nor-malaus arba šakoto alkilo (pvz. tret-butilo), ciklinio alkilo (pvz. cikloheksilo), alkoksialkilo (pvz. metok-simetilo), karboksialkilo (pvz. karboksietilo), aril-alkilo (pvz. benzilo), ariloksialkilo (pvz. fenoksi-metilo), arilo (pvz. fenilo, galbūt pakeisto halogenu C, - C,, -alkilu arba C- - C4 -alkoksigrupe) ; sulforūgš-ties esteriai tokių kaip: alkil - arba arilalkil-sulfonilas (pvz. metansulfonilas), fosforo rūgšties, mono-, di- arba tri- esteriai, kurie gali būti, bet
[0028] gali ir nebūti blokuoti; amino rūgščių esteriai ir azoto rūgšties esteriais. Ryšium su anksčiau aprašytais esteriais, jei nenurodyta, tai bet kuris alkilinis fragmentas, esantis tokiame esteryje, geriau jei turi 1-18 anglies atomų, o ypač, normalios sandaros alki-linėms grupėms turi 1-4 anglies atomus arba išsiša-kojusioms arba ciklinėms alkilinėms grupėms turi 3-7 anglies atomus. Bet koks arilinis fragmentas, esantis tokiuose esteriuose, pirmiausia turi fenilą. Bet kuri nuoroda bet kuriam anksčiau paminėtam junginiui nurodo ir fiziologiškai tinkamą šio junginio druską.
[0029] Išradime esančios druskos, kurios gali būti panaudotos gydymo tikslams, yra fiziologiškai tinkamų bazių druskos, t. y., sudarytos iš tinkamos bazės, pvz.: šarminio metalo (pvz., natrio), šarminio žemės metalo (pvz., magnio), amonio ir NR4 (kur R-C-C,, -alkilas) druskos. Jei Y reiškia aminogrupę, tai tuo atveju druskos yra sudarytos iš fiziologiškai tinkamų rūgščių druskos, tame tarpe hidrochloridas ir acetatas.
[0030] Tokie nukleozidai ir jų dariniai toliau bus vadinami išradimo junginiais. Čia panaudoto termino "aktyvus komponentas" reikšmė, jei kontekstas nereikalauja kitos prasmės, yra suprantama kaip išradimo junginys.
[0031] a) išradimo junginys, skirtas virusinių infekcijų pro-filaktikos ir gydymo panaudojimui, o konkrečiai, nuo tokių herpeso viruso sukeliamų infekcijų, kaip anksčiau paminėtos, o dar konkrečiau, tai nuo PHV, JHV, CMV su-keliamų infekcijų. b) išradimo junginio pritaikymas, gaminant vaistus, skirtus gydymui ir profilaktikai prieš herpeso virusą
[0032] sukeltą infekciją, tokią, kaip anksčiau paminėtoji, o konkrečiai, prieš PHV, JHV arba CMV infekcijas.
[0033] Klinikinių simptomų pavyzdžiams, kurie remiantis išra-dimu turi būti gydomi, priklauso anksčiau aprašytos PHV1 ir 2, JHV, CMV arba VHB sukeltos infekcijos.
[0034] Mūsų aptikta, kad išradimo junginiai pasižymi pero-raliniu bioprieinamumu ir žemu toksiškumu. To pasekoje gaunami junginiai pasižymi palankiu gydymo indeksu.
[0035] Nustatyta,kad (I) formulės junginiai, kuriame X-metilas ir Y-hidroksilas, pasižymi geru aktyvumu prieš PHV1 ir 2, bet yra toksiškas.
[0036] Išradimo junginiai gali būti taikomi žinduoliams, tame tarpe ir žmogui, bet kokiu būdu, kuri, apsprendžia gy-dytini simptomai; tinkami i, vedimo būdai yra šie: pe-roralinis, rektalinis, nasalinis, vietinis (tame tarpe: transbukalinis ir poliežuvinis) , vaginalinis ir paren-teralinis (tame tarpe: po oda, d, raumenis, i veną, i odą, \ trachėją, epiduralinis). Suprantama, kad geriau-sias ivedimo būdas gali keistis, priklausomai, pavyz-džiui nuo recipiento būsenos.
[0037] Reikalingas atskiras aktyviojo komponento kiekis, skirtas kiekvienam iš anksčiau nurodytų panaudojimų ir pa-rodymų, kuris priklauso nuo eilės faktorių, tame tarpe: simptomų sunkumo, skirtų gydyti, ir nuo konkretaus ob-jekto, ir visiškai priklauso nuo gydančio gydytojo kom-petencijos. Betgi, kaip taisyklė, iš nurodytų panau-dojimų ir parodymų tinkama dozė bus intervale 0,1 - 250 mg kiekvienam recipiento kūno masės kg i dieną, geriau, jei intervale 1 - 100 mg kiekvienam recipiento kūno ma-sės kg kiekvieną dieną ir labiausiai tinkama 5 - 30 mg kiekvienam kūno masės kg kiekvieną dieną, optimalią dozę sudaro apytiksliai 15 mg kiekvienam kūno masės kg kiekvieną dieną (jei nėra ypatingų nurodymų, tai visos aktyvaus komponento masės duodamos perskaičiuotos gimi-ningam junginiui, junginio druskų ir eterių skaičiai turi būti proporcingai padidinti). Tikslinė dozė norint gali būti pateikta dviejų, trijų, keturių arba daugiau subdozių pavidale duodamų dienos eigoje su būtinais laiko tarpais. Tokios subdozės gali būti įvedamos vie-netinėmis dozuotomis formomis, pavyzdžiui, sudarytomis iš 10-1000 mg, geriau jei iš 20-500 mg ir geriausia, jei iš 100-400 mg aktyviojo komponento skirto vie-netinei dozuotai formai.
[0038] Nežiūrint i, tai, kad jungini, galima i,vesti gryname pavidale, rekomenduojama ji turėti vaistinės formos pavidale. Šio išradimo formos sudarytos mažiausiai iš vieno aktyviojo komponento, atitinkamai pagal anksčiau pa-teiktą nurodymą sumaišyto su vienu arba daugiau tinkamų nešiklių ir, galbūt, kitais gydymo priedais. Nešik-lio (ų) "tinkamumas" suprantamas kaip suderinamumas su kitais sudėties komponentais, nekenksmingais reci-pientui .
[0039] Formos sudėtis yra tinkama peroraliniam, rektaliniam nasaliniam, vietiniam (tame tarpe: transbukaliniam ir poliežuviniam), vaginaliniam ir parenteraliniam (tame tarpe; poodiniam, i, raumenis, i, veną, d, odą, i trachėją ir epiduraliniam) įvedimui. Tam, kad būtų patogiau, vaistinės formos gali būti pateikiami vienetinėje do-zuotoje formoje, kuri gali būti paruošta bet kuriuo, gerai žinomu farmacijoje, būdu. Panašūs būdai yra sudaryti iš aktyviojo komponento ir nešiklio, sudaryto iš vieno arba kelių pagalbinių komponentų sumaišymo sta-dijos. Vaistines formas paprastai ruošia tolygiai ir kruopščiai sumaišydami aktyvų komponentą su skystais nešikliais arba su labai susmulkintais kietais ne-šikliais, arba su abiejų šių tipų nešikliais su po to sekančiu produkto formavimu.
[0040] Šio išradimo vaistinės formos, tinkamos peroraliniam įvedimui, gali būti pateiktos diskretinių vienetų pa-vidalais, tokiais kaip: kapsulės, krakmolinės oblatės ir tabletės, kurių kiekviena sudaryta iš reikiamo aktyviojo komponento kiekio, granulių ar miltelių pavidalu, tirpalo arba suspencijos vandeniniame arba nevan-deniniame skystyje, arba skystos emulsijos aliejus-vandenyje, arba skystos emulsijos vanduo-aliejuje pavidalu. Aktyvusis komponentas gali būti pateiktas bo-liuso, elektuarilo arba pastos pavidale. Tabletės gali būti pagamintos presavimo arba formavimo būdu, galbūt, pridedant vieną arba keletą papildomų komponentų. Presuotos tabletės gali būti pagamintos presavimo mašina iš aktyviojo komponento birioje formoje, tokioje kaip: milteliai arba granulės, pasirinktinai sumaišytos su surišančiomis medžiagomis (pvz.: povidonu, želatina, hidroksipropilmetilceliu-lioze), tepalu, inertiniu atskiedikliu, konservantu, susmulkintoju (pvz.: krakmolo glikoliato natrio druska, susiūtu povidonu, susiūta natrio karboksimetilce-liulioze), paviršiaus aktyvia medžiaga arba disper-guojančia priemone. Formuotos tabletės gali būti pagamintos tinkama mašina, formuojant miltelių pavidalo junginio, ir inertinio skysto atskiediklio mišinį. Tabletės, pagal pageidavimą, gali turėti apvalkalą arba gali būti rifliuotos, ir gali būti pagamintos taip, kad užtikrintų iš jų lėtą arba kontroliuojamą aktyviojo komponento išsiskyrimą, panaudojant, pavyzdžiui, hid-roksipropilmetilceliuliozę, įvairiu santykiu, kad būtų užtikrintas išsiskyrimo norimas profilis.
[0041] Esant akių ar kitų išorinių audinių infekcijai, pvz. burnos ir odos, mišinius rekomenduojama naudoti vie-tinių tepalų arba kremų pavidalu, i, kurių sudėti, aktyvusis komponentas įeina tokiame kiekyje, pa-vyzdžiui, 0,075 - 20 % mas./mas., geriau, jei 0,2 - 15 % mas./mas. ir geriausiai, jei 0,5 - 10 % mas./mas. Tepalo paruošimui aktyvieji komponentai gali būti panaudoti arba su parafininiu, arba su vandenyje tirpiu tepalo pagrindu. Arba i, kremo sudėti, aktyvusis komponentas gali būti įtrauktas kartu su kremo pagrindu aliej us-vandenyj e.
[0042] Norint galima, kad kremo pagrindo vandeninė fazė būtų sudaryta, pavyzdžiui, mažiausiai iš 30 % mas/mas. poli-hidroksilio alkoholio, t. y., alkoholio su dviem arba daugiau hidroksilais, tokiais kaip: propilenglikolis, butan-1,3-diolis, manitas, sorbitas, glicerinas, poli-etilenglikolis ir jų mišiniai. Vietinės vaistinės formos gali būti sudarytos iš junginių, sustiprinančių absorbciją arba aktyvaus komponento prasiskverbimą i, odą arba kitas pažeistas sritis. Medžiagų, stiprinančių prasiskverbimą per odą pavyzdžiai yra dimetil-sulfoksidas ir gim:ningi analogai.
[0043] Šio išradimo emulsijų aliejinė fazė gali būti sudaryta iš žinomų komponentų ir paruošta žinomais būdais. Nors tokia fazė gali būti sudaryta iš emulsiklio (žinoma, kaip emulsuojanti priemonė), pageidautina, kad ji būtų sudaryta iš mažiausiai vieno emulsiklio su riebalais arba aliejumi, arba ir su riebalais, ir su aliejum. Rekomenduojama įtraukti hidrofilinio emulsiklio ir li-pofilinio emulsiklio mišinį, veikianti, kaip stabi-lizatorių. Taip pat rekomenduojama įtraukti ir aliejų, ir riebalus. Atitinkamai emulsiklis(ai), esant arba nesant stabilizatoriui(iams), sudaro taip vadinamą emulsini, vašką, kuris kartu su aliejum ir/arba riebalais sudaro tepalo emulsini, pagrindą, sudaranti, kreminių mišinių tepalinę dispersinę fazę.
[0044] Emulsikliai ir emulsijos stabilizatoriai, tinkami panaudojimui šio išradimo vaistinėse formose, yra tokios sudėties: Tween60, Span80, cetostearilo alkoholis, mi-ristilo alkoholis, glicerino monostearatas ir natrio laurisulfatas.
[0045] Aliejų arba riebalų, tinkamų mišiniui, parinkimas grindžiamas tikslinių kosmetinių savybių pasiekimais, nes aktyviojo junginio tirpumas daugelyje aliejų, kurie gali būti su didžiausia tikimybe panaudoti emulsinėse vaistinėse formose yra labai žemas. Taip, geriau, jei kremas yra neriebus, nelipnus ir nuplaunamas produktas, pasižymintis reikiama konsistencij a, užtikrinantis jo neištekėjimą iš tūtelių arba kitų konteinerių. Gali būti panaudoti mono- arba di- alkiliniai esteriai su tiesia arba išsišakojančia grandine, tokie kaip: diizoadipatas, izocetilstearatas, kokoso, riebių rūgš-čių propilenglikolio diesteris, izopropilmiris-tatas, deciloleatas, izopropilpalmitatas, butilstae-ratas,2-etilheksilpalmitatas arba šakotos grandinės esterių mišinys, žinomas pavadinimu Crodamol CAP, iš kurių trys paskutiniai yra geresni. Priklausomai nuo reikiamų savybių išvardinti esteriai gali būti panaudoti atski-rai arba kartu. Arba gali būti panaudoti aukštos lydy-mosi temperatūros lipidai, tokie kaip baltas minkštas parafinas ir/arba skystas parafinas arba kiti mine-raliniai aliejai.
[0046] Vaistinė forma, tinka vietiniam vartojimui i, akis, taipogi yra akims skirti lašai, kuriuose aktyvusis komponentas ištirpintas arba suspenduotas tinkamame ne-šiklyje, ypač vandeniniame tirpiklyje, skirtame akty-viajam komponentui. Rekomenduojamo aktyviojo komponento tokiose vaistinėse formose koncentracijos 0,5 - 20 %, geriau, jei 0,5 - 10 %, ypač apytiksliai 1,5 % mas./mas.
[0047] Vaistinės formos, tinkamos vietiniam įvedimui i, burną, yra pastilės, kuriose aktyvusis komponentas įeina d, aromatizuotą pagrindą, paprastai sacharozę ir akaciją arba tragakante kamedes; pastilės turinčios aktyvųjį komponentą inertiniame pagrinde, tokiame kaip: žela-tinoje arba glicerine arba sukrozėje ir akacijoje burnos skalavimo skysčiai, kur aktyvusis komponentas yra tinkamas skystame nešiklyje.
[0048] Vaistinės formos, tinkančios rektaliniam įvedimui, gali būti pateikiamos žvakių pavidale su tinkamu pagrindu, pavyzdžiui, kakao sviestu arba salicatu.
[0049] Mišiniai, tinkantys nasaliniam įvedimui, kur nešiklis yra kieta medžiaga, yra sudaryti iš rupių miltų, kur dalelės matmenys, pavyzdžiui, yra intervale 20 - 500 mik-ronų, kurios įvedamos uostomojo tabako maniera, t. y. greita inhaliacija per nosies ertmę iš prinešto prie pat nosies konteinerio su milteliais.
[0050] Tinkami mišiniai, kuriuose nešiklis yra skystis, skirtas įvedimui, pavyzdžiui, nasalinių įpurškimų pavidalu arba nasalinių lašų pavidalu yra sudaryta iš vandeninių arba tepalinių aktyviojo komponento tirpalų.
[0051] Mišiniai, tinkantys vaginaliniam įvedimui, gali būti pateikti pesarijų, tamponų, kremo, gelio, pastų, putų arba įpurškiamų mišinių, sudarytų iš aktyviųjų kom-ponentų ir iš neabejotinai priimtinų nešiklių pavidalu.
[0052] Mišiniai, tinkantys parenteraliniam įvedimui, yra sudaryti iš vandeninių ir sterilių nevandeninių tirpalų, skirtų injekcijoms, kurie gali būti sudaryti iš an-tioksidatorių, buferinių mišinių, bakteriostatinių me-džiagų ir tirpių medžiagų, suteikiančių mišiniui izotoniškumą su siūlomo recipiento krauju; vandeninių ir nevandeninių sterilių suspensijų, kurių sudėtyje gali būti suspenduojančios priemonės ir tirštikliai, liposomos ir kitos mikrodalelių sistemos, sugebančios įnešti tikslinį junginį į vieno ar kelių organų kraują. Mišiniai gali būti pateikti vienetinėse dozėse arba konteineriuose su keletu dozių, pavyzdžiui, užlituoti ampulėse arba indeliuose ir gali būti laikomi iš-džiovintame šaldant (liofilizuotame) pavidale, kuris reikalauja injekcijos metu tik skysto sterilaus ne-šiklio priedo, pavyzdžiui, vandens tiesiog prieš pat injekciją. Tirpalai ir suspensijos, skirti injekcijai, gali būti paruošti nesvarbu kokiu būdu iš anksčiau aprašytų sterilių miltelių, granulių ir tablečių.
[0053] Rekomenduojamos vienetinės dozuotos vaistinės formos - tai formos, turinčios dienos dozę arba vienkartinę dienos subdozę, charakterizuotą anksčiau, arba ati-tinkamą aktyviojo komponento dali,.
[0054] Suprantama, be komponentų, konkrečiai nurodytų anks-čiau, šio išradimo mišiniai gali būti sudaryti iš kitų priemonių, paprastai taikomų farmacijoje, atsižvelgiant i, mišinio tipą, pavyzdžiui, mišiniai, tinkami peroraliniam įvedimui, gali turėti savo sudėtyje aroma-tizuojančius priedus.
[0055] Bendrai paėmus, junginiai, atitinkantys (I) formulę, gali būti sintetinami įvairiais organinės chemijos metodais, ir konkrečiai, nukleozidų sintezės metodais. Pradinės medžiagos arba žinomos ir gali būti lengvai gautos iš pramoninių šaltinių, arba gali būti gautos pagal žinomas ir paprastas metodikas.
[0056] Be to, šis išradimas pateikia junginio, atitinkančio (I) formulę, gavimo būdą, aprašytą anksčiau ir sudarytą iš: A) reakcijos junginio, atitinkančio (II) formulę:
[0057] kurioje X ir Y įgyja reikšmes, duotas anksčiau, ryšium su (I) formule, arba jo saugotos formos su cukraus 4-tiodariniu arba jo apsaugota forma, įvedant 4-tio-cukraus fragmentą i, junginio, atitinkančio (III) for-mulę, 1-padėt i,; ir esant būtinumui arba norui, įvyk-dymas bet kurios vienos arba kelių, toliau esančių papildomų stadijų, bet kokioje norimoje ar būtinoje eilėj e:
[0058] b) junginio, atitinkančio (I) formulę, arba jo apsaugotos formos pakeitimas d, kitą junginį, atitinkantį
[0059] c) junginio, atitinkančio (I) formulę, arba jo apsaugotos formos pavertimas į junginio, atitinkančio (I) for-mulę, fiziologiškai funkcionalų darinį, arba jo ap-saugotą formą, d) junginio, atitinkančio (I) formulę, fiziologiškai funkcionalaus darinio arba jo apsaugotos formos pavertimas į junginį, atitinkantį (I) formulę, arba jo apsaugotą formą, e) junginio, atitinkančio (I) formulę, fiziologiškai funkcionalaus darinio arba jo apsaugotos formos pavertimas į kitą junginio, atitinkančio (I) formulę, fi-ziologiškai priimtiną darinį, arba jo apsaugotą formą, f) junginio, atitinkančio (I) formulę, arba jo apsaugoto darinio, arba junginio, atitinkančio (I) formulę,
[0060] fiziologiškai funkcionalaus darinio arba jo darinio a - ir 3 - anomerų atskyrimas.
[0061] Terminas "4-tiocukraus darinys" čia taikomas įvardijant junginį, turintį 2-dezoksi-4-tio-D-ribofuranozės ciklą, kuriame vienas arba keli hidroksilai pasirinktinai apsaugoti ir kuriame 1-padėtis pasirinktinai pakeista atskylančia grupe.
[0062] a) vykstant reakcijai tarp junginio, atitinkančio (III) formulę, ir 4-tiocukraus darinio, atitinkančio
[0063]
[0064] čia Z3 ir Z5 įgyja anksčiau minėtas reikšmes ir L reiškia atskylančią grupę, tokią kaip halogenas (pvz., chloras), aciloksigrupę (pvz., C^-Cg -alkanoiloksi- arba acetoksigrupę) arba S -benzilą. (IV) formulėje grupėms
[0065] 3.5 .
[0066] Z ir Z geriausiai atstovauja hidro apsaugotos grupės, konkrečiai: benzilo ar toluilo grupės. Reakcija gali būti įvykdyta pagal standartines sąlygas, tame tarpe panaudojant kaip katalizatorių Liuiso rūgšti,, tokią, kaip: gyvsidabrio chloridas (II), gyvsidabrio bromidas (II), alavo chloridas (IV), arba trimetilsililtrifluormetansulfonatas, tirpikliuose, tokiuose kaip: acetonitrilas, 1,2-dichloretanas, dichlormetanas, chloroformas arba toluenas, esant žemesnei, kambario arba aukštesnei temperatūrai, pavyzdžiui, nuo -78°C iki virimo temperatūros;
[0067] b) vykstant reakcijai tarp junginio, atitinkančio (III) formulę, arba jo apsaugotos formos ir junginio, ati-tinkančio (V) formulę:
[0068] "Sintezės metodai nukleininių rūgščių chemijoje" red. W.W. Zorbach, R.S. Timpson, t.l, Interscience, 1973; "Nukleininių rūgščių chemija. Naujos ir patobulintos sintezės metodikos, būdai ir technologijos", red. L.B. Townsend ir R.S. Timpson, 1 ir 2 dalys, Wiley-Interscience, 1978 ir 3 dalis, Wiley-Interscience., 1986; "Nukleozidų analogai. Chemija, biologija ir tai-kymas medicinoje", red. R.T. Walker, E.De Clercg, F. Eckstein, NATO praobleminių tyrimų institutas, darbai, 1979; "Pagrindiniai principai nukleozidinių rūgščių chemijoje", red. P.O. P. Ts'O, Academis Precc, 1974 .
[0069] Kas liečia apsaugotų grupių taikymą, apie tai kalbėta anksčiau, akivaizdu, kad konkretus tokių grupių cha-rakteris priklausys nuo konkrečios grupės, kurią būtina apsaugoti, identiškumo ir prigimties ir jos parinkimas gali būti atliktas remiantis paprastais principais. Ap-saugotų grupių pavyzdžiai, kurie, bendrai paėmus, gali būti panaudoti, yra sekantys: acilogrupės, pavyzdžiui, C], -C6 -alkanoilas (pvz., acetilas) arba aroilas (pvz., benzoilas arba toluoilas), paprastos eterinės grupės, tokios kaip: tri-Cį -C6 -alkilsililas (pvz., tri-metilsililas) arba tret-butildifenilsililas, arba aril-metilogrupės, tokios kaip: benzilas arba trifenil-metilas.
[0070] Anksčiau išvardintos grupės gali būti pašalintos įprastu būdu, pavyzdžiui, acilogrupės puikiausiai pasi-šalina šarminėje aplinkoje (pvz., panaudojant natrio metoksidą), sililo eteriai puikiausiai pasišalina vandens arba rūgšties terpėje (pvz., norint pašalinti trimetilsililą, naudojamas vandeninis metanolas) ir arilmetilo grupės puikiausiai pasišalina redukcinėse sąlygose.
[0071] Pirimidino ciklo hidroksilų apsauga įvykdoma trial-kilsililu, pvz., trimetilsililui reaguojant su (a) chlor-trimetilsilano ir trietilamino mišiniu arba (b) heksametildisilazano pasirinktinai kartu su chlortri-metilsilano ir/arba amonio sulfato mišiniu.
[0072] 5-halogenpirimidinai yra pramonės išleidžiami, ir gali būti Įprastu metodu prijungti prie 4-tiocukraus dariniu, pavyzdžiui, apsaugoto 5-halogenpirimidino su apsaugotu 4-tiocukraus dariniu, turinčiu 1-padėtyje atskylančią grupę, reakcija.
[0073] Reakcija tarp apsaugoto 4-tiocukraus darinio ir apsaugoto 5-halogenpirimidino atliekama įprastinėse sąly-gose, kaip katalizatorių panaudojant Liuiso rūgšti,, pavyzdžiui, paveikus gyvsidabrio chloridu (II) arba gyvsidabrio dibromidu su kadmio karbonatu arba alavo chloridu (IV), arba geriau, jei trimetilsililtri-fluormetansulfonatu toluene, acetonitrile, dichlormetane arba 1,2-dichloretane, kurie čia kaip atskiedėjai ir po to, kaip iprasta, apdorojant vandeniniu metanoliu (kuris taipogi skirtas apsauginių grupių pašalinimui nuo pirimidino ciklo hidroksilų).
[0074] Apsaugotos grupės gali būti pašalintos įprastais metodais, pavyzdžiui, trimetilsililo grupės nuo pirimidino ciklo hidroksilo grupių, gali būti pašalintos, paveikus vandeniniu metanoliu, benzilo grupes nuo 4-tio-cukraus darinio hidroksilo grupių pašalina, paveikus natrio metoksidu metanolyje, esant kambario tempe-ratūrai .
[0075] Arba i iš anksto sudarytą 5-nepakeistą 4'-tiopiri-midinonukleozidą su apsaugotomis arba neapsaugotomis hidroksilo grupėmis gali būti įvestas 5-halogeno pa-kaitas .
[0076] Tuo atveju, jei 4-tiocukraus darinio hidroksilo grupės apsaugotos (pavyzdžiui, eterio grupėmis, tokiomis kaip sililo eteriai arba esterio grupėmis, tokiomis kaip: acetonas, benzoatas, arba p-toluatas), reakcija su N-chlorsukcinimidu ledinėje acto rūgštyje arba su chloru ir jodbenzenu ledinėje acto rūgštyje galima -įvesti chlorą į 5 padėti,, o reakciją su jodo monosacharidu dichlormetane pasiseka įvesti jodą i, 5 padėtį, tuo tarpu neapsaugoto 4-tio-cukraus pirimidino nukleozido reakcija su chloru anglies tetrachloride ir acto rūgš-tyje taip pat įvedamas chloras į 5 padėtį; reakcija su jodu ir azoto rūgštimi taip pat įvedamas jodas į 5 pa-dėtį. Neapsaugota nukleozido reakcija su bromu ir acto rūgštimi įvedamas bromas į 5 padėtį. Apsauginės grupės pašalinamos, esant būtinybei, pagal įprastą metodiką ir paskutinėje stadijoje. (II) formulės 5-nepakeistas 4'-tionukleozidas, naudojamas kaip pradinis produktas, gali būti sintetinamas anksčiau pateiktu būdu, 5-nepakeistą pirimidiną su-jungiant su 4-tiocukraus dariniu. 4-tiocukraus fragmento hidroksilo grupių apsauga gali būti įvykdyta bet kuriame patogiame etape.
[0077] 5-alkinildariniai gali būti sintetinami reaguojant (II) formulę atitinkančiam 5-jodnukleozidui, kurio 4-tiocukraus hidroksido grupės pasirinktinai apsaugotos (pa-vyzdžiui, neapsaugoto nukleozido reakcija su p-toluo-ilchloridu piridine, įvedant p-toluoilines esterio grupes prie 4-tiocukraus hidroksilo grupės), su atitinkamu alkinilinančiu agentu, pavyzdžiui, trimetilsililacetilenu arba alkinu su galiniu trigubu ryšiu, dalyvaujant paladžio katalizatoriui, tokiam kaip bis (trifenilfosfin)paladžio dichloridui ir vario katalizatoriui, tokiam kaip vario jodidui, ir trietilaminui ir, jei būtina, pašalinant apsaugines grupes natrio
[0078] metoksidu metanolyje /žiur. M. J. Robinson ir kt. Can. J. Chem., 60:554 (1982)/.
[0079] Arba 5-alkilinė grupė gali būti įvesta reaguojant 5-jodpirimidinui su trimetilsililacetilenu arba alkinu, turinčiu galini, trigubą ryši,, dalyvaujant bis(tri-fenilfosfin) paladžio dichloridui, vario jodidui, trietilaminui ir dimetilformamidui su po to sekančiu, jei būtina, apsauginių grupių pašalinimu ir, pagal anksčiau duotą metodiką, (III) formulę atitinkančiam 5-alki-nilpirimidinui, esančiam atitinkamoje apsaugotoje formoje (pavyzdžiui, trimetilsililapsaugotoj e formoje) reaguojant su 4-tiocukraus apsaugotu dariniu ir su po to sekančiu, esant būtinybei, apsauginių grupių paša-linimu iš pirimidino ir cukraus fragmentų.
[0080] 5-alkenildariniai gali būti sintetinami daliniu (III) for-mulę atitinkančio 5-alkenilpirimidino arba (II) formulę atitinkančio nukleozido hidrinimu, pavyzdžiui, panaudojant Lindlaro katalizatorių, užnuodytą chinolinu, su po to sekančiu pagal anksčiau pateiktą būdą (pirimidino atveju) susijungimu su 4-tiocukraus dariniu.
[0081] Arba 5-jodnukleozidas, atitinkantis (II) formulę gali reaguoti su atitinkamu alkenilinančiu agentu, pavyz-džiui, 2-alkenilo rūgšties esteriu (pavyzdžiui, metilo esteriu) dalyvaujant paladžio (II) acetatui ir trifenilfosfinui, sudarydamas 5-(2-metoksikarbonilalke-nil) darinį. Po to esterio grupę pašalina hidrolize, dalyvaujant natrio hidroksidui ir gauna 2-karboksi-alkenildarin i,, kurį savo ruožtu apdoroja trietilaminu dimetilformamide 100°C temperatūroje ir gauna 5-vinil-analogą /žiūr. S.G. Rahim ir kt. Nucleic Acids Research, 10(17): 5285 (1982)/.
[0082] Ir dar vienas 5-alkenildarinių gavimo būdas apima alkeno su galine neprisotinta jungtimi prisijungiama prie 5-jod- arba 5-chlorgyvsidabrio nukleozido, ati-tinkančio (II) formulę (gauto, pavyzdžiui, 5-nepa-keistam nukleozidui reaguojant su gyvsidabrio (II) acetatu ir natrio chloridu) dalyvaujant paladžio katalizatoriui, tokiam kaip paladžio (II) acetatas ir vario druskai tokia kaip vario (I) chloridas arba geriau paladžio tetrachlorličiui kaip paladžio katalizatoriui .
[0083] 5-jod- arba 5-chlorgyvsidabrio nukleozidui, atitin-kančiam (II) formulę, reaguojant su alilhalogenidais, tokiais kaip: chloridas arba bromidas, dalyvaujant pa-ladžio tetrachloridiličiui, gaunamas atitinkamas 5-(alk-2-enil) darinys, kuris gali būti pergrupuotas i, 5-(alk-1-enil) darini, paveikus tris (trifenilfosf in) rodžio chloridu. Duotas būdas gali būti taikomas ir laisvai pirimidino bazei su toliau einančiu jos ir 4-tiocukraus darinio kondensavimu.
[0084] Anksčiau nurodytų įvykdymo būdų pavyzdžiai pateikiami darbuose: I.L.. Ruth, D.E. Bergstrom, I. Org. Chem, 43(14) :2870 (1978), J. Goodchild ir kt., I.Med. Chem, 26: (1983), D.E.Bergstrom, I.L.Ruth, I.Am.Chem.Soc., 98:1587 (1976), D.E.Bergstrom, M.K.Ogawa, I.Am.Chem. Soc., 100:8106 (1978).
[0085] 5-(halogenalkenil) pakaitai gali būti įvesti i, nu-kleozidą, atitinkanti, (II) formulę įprastais metodais. Pavyzdžiui, tam, kad gauti 5-(2-halogenvinil)darinius, atitinkamas 5-(2-karboksilvinil)nukleozidas paveikiamas atitinkamu halogeninimo agentu, pavyzdžiui, N-halogensukcinimidu vandeniniam kalio acetate arba kalio karbonatu dimetilformamide, jeigu halogenas yra bromas
[0086] arba jodas 5-(2-chlorvinil)nukleozidas gali būti gautas iš atitinkamo 5-(2-karboksivinil)nukleozido, panaudojant dujinės būsenos chlorą, pavyzdžiui, dimetilformamide (DMFA).
[0087] Arba 5-halogenalkenilo grupė gali būti įvesta i, ati-tinkamą laisvą pirimidino bazę, susidarant junginiui, atitinkančiam (III) formulę, kuris po to sujungiamas su 4-tiodariniu pagal anksčiau pateiktą metodiką, o tai gali būti pasiekta, pavyzdžiui, paveikus 2,4-dime-toksiapsaugotą 5-jodpirimidiną 2-alkeno rūgšties esteriu, dalyvaujant paladžio (II) acetatui, trifenilfosfinui ir dioksanui su toliau sekančiu metaoksi-apsaugotų grupių pašalinimu, esterio hidrolize, veikiant natrio hidroksidui ir reaguojant gautam 5-(2-kar-boksivinil) dariniui su N-halogensukcinimidu (čia halogenas yra bromas arba jodas) arba dujinės būsenos chloru (kada halogenu yra chloras, dalyvaujant šarmui, tokiam kaip, natrio hidrokarbonatas dimetilformamide. 5-(2-karboksivinil)darinys taip pat gali būti gautas paveikus neapsaugota 5-(hidroksimetil) pirimidiną, atitinkanti, (III) formulę, oksidatoriumi, pavyzdžiui, persulfatu arba magnio dioksidu, susidarant atitinkamam* aldehidui, ir aldehidas paveikiamas malono rūgštimi.
[0088] Pavyzdžiai, kaip įvykdomi prieš tai nurodyti būdai, pateikiami darbuose: A.S. Jonės ir kt. Tetrahedon Letts, 45; 4415 (1979) ir P.I. Barr ir kt. J. Chem. Soc. Perkin Trans 1, 1981, 1665.
[0089] 5-(2-halogenalkenilinė bazė gali būti susintetinta nauju alternatyviu keliu 2,4-dimetoksiapsaugotu 5-brom-pirimidino, kuris gali būti pervestas d, 5-ličio darini, paveikus ličio organiniu reagentu, geriau, jei n-butil-ličiu žemoje temperatūroje, pavyzdžiui, -70°C, eteri-niame tirpiklyje, tokiame kaip dietilo eteris. Ličio darinio reakcija insusitu tinkamu skruzdžių rūgšties
[0090] esteriu, tokiu kaip etilformiatu žemoje temperatūroje, pavyzdžiui, -70°C, duoda atitinkamą 5-formildarini,. Pagal anksčiau nurodytą metodiką paveikus f ormildarini, malono rūgštimi, gaunamas 5-(2-karboksivinil) darinys. Aprašytu helogeninimu gaunamas tikslinis 5 -(2-halogen-alkenil) darinys, esantis 2,4-dimetoksiapsaugotoj e formoje. Po to apsauginės grupės gali būti pašalintos įprastu būdu.
[0091] 5-halogenviniljunginiai, turintys daugiau nei vieną halogeną, gali būti gauti iš 5-halogenpakeisto 2,4-di-metoksiapsaugoto pirimidino, atitinkančio (III) for-mulę, jam reaguojant su stipria baze, tokia kaip butillitis ir po to gautą ličio darini, apdorojant atitinkamu halogenalkenu, po to pašalinant apsaugines grupes ir pagal anksčiau nurodytą metodiką prijungiant prie 4-tiocukraus darinio /žiūr. P.L. Coe ir kt. , I. Med. Chem. 25:1329 (1982)/.
[0092] Arba halogeno atomai, vienas paskui kitą, gali būti įveti i, pirimidino bazės 5-pakaitą. Taip, pavyzdžiui, paveikus 5-acetiluracilą chlorinančiu reagentu, tokiu kaip fosforo oksichloridu gaunamos 5-(1-chlorvini lo grupės su tuo pačiu metu vykstančiu pirimidino bazės hidroksilinių grupių chlorinimu. Veikiant kalio etok-sidui, po to hidrochloridui ir pagaliau bromui, vyksta 5-neprisotintos šalutinės grandinės brominimas, tuo pačiu metu keičiantis pirimidino ciklo 2,4-dichlor-grupėms ir susidarant atitinkamam uracilo dariniui. Pagal anksčiau nurodytą metodiką gauta pirimidino bazė vėliau gali būti prijungta prie 4-tiocukraus darinio /žiūr. P.I.Barr ir kt. Nucleic Acids Res. 3:2845 (1976) ir P.I.Barr ir kt. I.Chem. Soc. Perkin Trans 1, 1981:1665/.
[0093] 5-C2 -C6 -alkilu, pvz., 5-etilu pakeisti nukleozidai gali būti gauti hidrinant atitinkamą 5-alkinil- arba 5-alkenil- pirimidino bazę ir po to prijungiant prie 4-tiocukraus darinio. Gali būti panaudotos įprastinės hidrinimo sąlygos, pavyzdžiui, hidrinimas vandeniliu virš paladžio ant anglies katalizatoriaus vaidmenyje.
[0094] 5-trifluormetiluracilas yra išleidžiamas pramonės, ir jis gali būti pagal anksčiau pateiktą metodą sukonden-suotas su 4-tiocukraus dariniu. 5-trifluormetilcitozino analogas gali būti gautas iš uracilo darinio pasinaudojant metodika, kuri analogiška toliau pateiktai Sung metodikai.
[0095] Visos anksčiau išvardintos reakcijos yra taikomos uracilo nukleozidų gavimui; didžioji šių reakcijų dalis gali būti pritaikyta ir citozino nukleozidų sintezei. Kada tai nelabai patogu ir neįmanoma, citozino analogai gali bu_ ti ypač paprastai gauti iš uracilo junginių,T pasinaudojant metodika, analogiška pateikiamai darbuose: W. L. Sung, Chem. Soc. Chem. Commun., 1981, 1089. Pavyzdžiui, acetilintą uracilo nukleozidą (susin-tetintą, pavyzdžiui, pagal anksčiau nurodytą būdą, ir acetilintą acto anhidridu piridine) paveikus p-chlor-fenilfosforodichloridu, 1,2,4-triazolu ir piridinu, gaunamas 4-(1,2,4-triazol-l-il) darinys, kuris po to apdorojamas amoniaku dioksane (kuris, be to, ap-sauginę (es) grupę(es) iš 4-tiocukraus fragmento) ir susidaro atitinkamas citozino 4' -tionukleozidas.
[0096] Išvestiniai dariniai, atitinkantys (1) formulę gali būti gauti įprastu būdu. Pavyzdžiui, esteriai gali būti gauti paveikus junginius, atitinkančius (1) formulę, atitinkamu eterinančiu reagentu, pavyzdžiui, acil-halogenidu arba anhidridu. Druskos gali būti gautos paveikus junginius, atitinkančius (1) formulę tinkamą bazę, pavyzdžiui, šarminio metalo, šarminio žemės metalo arba amonio hidroksidu arba, jei būtina, tinkama rūgštimi, tokia kaip chloro vandenilio rūgštimi arba acetatu, pvz., natrio acetatu.
[0097] Junginio, atitinkančio (1) formulę, anomerai gali būti atskirti įprastomis priemonėmis, pavyzdžiui: chromatografija arba frakciniu kristalinimu.
[0098] Be to, išradimas yra skirtas tarpiniams junginiams, atitinkantiems (IV') formulę:
[0099] kurioje Z3 ir Z5 reiškia hidroksiapsauginę grupę ir Ar - pasirinktinai pakeistą arilą.
[0100] Junginiai, atitinkantys (IV') formulę, yra gaunami reaguojant junginiams, atitinkantiems (IV A) formulę su tam tinkamais acilinančiais reagentais, tokiais kaip acto anhidridas (galbūt, dalyvaujant acto rūgščiai) dalyvaujant mineralinei rūgščiai, tokiai kaip sieros rūgštis.
[0101] Junginiai, atitinkantys (IV A) formulę, gali būti gaunami uždarant ciklą iš junginio, atitinkančio (VI) for-mulę:
[0102] Junginiai, atitinkantys (VI) formulę, gali būti gaunami, paveikus junginius, atitinkančius (VII) formulę:
[0103] kurioje Z3 ir Z5 reiškia hidroksiapsauginę grupę ir Ar - pasirinktinai pakeistą arilą, pasirinktinai pakeistą alkil- arba arilsulfonilhalogenidu.
[0104] Junginiai, atitinkantys (VII) formulę, gali būti gaunami reaguojant junginiams, atitinkantiems (VIII) for-mulę :
[0105]
[0106] kurioje ZJ ir ZJ įgyja anksčiau nurodytas reikšmes ir R reiškia angliavandenilinę C: - CĄ -grupę su junginiu,
[0107] atitinkančiu formulę: Ar -CH2 -SH, kur Ar reiškia anksčiau nurodytas reikšmes, esant aukštesnei tem-peratūrai ir rūgštinėmis sąlygomis. Junginiai, ati-
[0108] tinkantys ( X) formulę, gali buti gauti reaguojant junginiams, atitinkantiems ( XI) formulę:
[0109] kurioje R reiškia anksčiau nurodytas reikšmes su reaguoti galinčiais organiniame tirpiklyje ZJ ir Z5 grupės dariniais, dalyvaujant tinkamai bazei, kartu junginys, atitinkantis ( XI) formulę, yra sintetinamas reaguojant 2- dezoksi- D- ribozei su alkoholiu atitin-kančiu R- OH formulę, dalyvaujant rūgščiai.
[0110] Dar iš vienos išradimo pusės pažvelgus, junginiai, atitinkantys ( VI) formulę, gali būti gaunami uždarius ciklą, skirtą junginiams, atitinkantiems ( VI) formulę:
[0111] kurioje ZJ ir Z5 reiškia hidroksiapsaugines grupes, tokias kaip benzilas, pasirinktinai pakeistas fenilo žiede vienu arba keliais halogeno atomais, Ci - C? -alkilas, pvz., Cl - CA - halogenalkilas, Cl - C„ - alkok-
[0112] sigrupė, nitrogrupė arba aminogrupė. Grupė A reiškia atskylančią grupę, pavyzdžiui, organini, sulfonilą, toki, kaip pasirinktinai pakeistą alkil- arba aril-sulfonilą, pavyzdžiui: metansulfonilą, halogenalkilsulfonilą
[0113] (pvz., trifluormetilsulfonilą) ir pasirinktinai pa-keistą fenilsulfonilą (pvz., toluilsulfonilą arba brombenzensulfonilą) ir Ar reiškia pasirinktinai pa-keistą arilą, pavyzdžiui, galbūt pakeistą fenilą arba toluilą. Galimi arilinių grupių pakaitai turi vieną arba kelis halogeno atomus, Cx -C4 -alkilo, pvz., metilo, Cx -C4 -halogenalkilo, C: -C4 -alkoksi-, nitro-arba aminogrupės. Ciklo uždarymas gali būti įvykdytas atitinkamose šarminėse sąlygose. Tam tinkamos sąlygos aprašytos darbe: I. Harness, N.A.Hughes (Chem. Comm. 1971, 811), tame tarpe ir natrio jodido bei bario karbonato panaudojimas.
[0114] Junginiai, atitinkantys (VI) formulę, gali būti gauti iš junginio, atitinkančio (VII) formulę:
[0115] kurioje Ar, Z 3 ir Z 5 reiškia anksčiau nurodytas reikšmes. Junginio atitinkančio (VII) formulę virtimas i, jungini,, atitinkanti (VI) formulę, gali būti įvyk-dytas pagal standartines metodikas, pavyzdžiui, paveikus atitinkamu, pasirinktinai pakeistu alkil- arba
[0116] arilsulfonilhalogenidu, pvz. , metansulfonilchloridu ba-ziniame tirpiklyje, tokiame kaip piridinas.
[0117] Junginys, atitinkantis (VII) formulę, gali būti gautas iš junginio, atitinkančio (VIII) formulę:
[0118] kurioje Ar, Z 3 ir Z 5 i,gyja anksčiau nurodytas reikšmes ir M reiškia hidroksiapsauginę grupę, kuri gali būti pašalinta sąlygose, kuriose -S-CH2-Ar grupė atskyla, o Z3 ir Z5 grupės lieka nepaliestos. Rekomenduojama, kad M atitiktų formulę: Arx-CO-, kurioje ArX - fenilas, pasirinktinai pakeistas vienu iš pakaitalų, duotų grupei Ar anksčiau. M grupės pašalinimas gali būti įvykdytas standartinėse sąlygose, pavyzdžiui, paveikus baze, tokia kaip šarminio metalo alkoksidas, pavyzdžiui, natrio metoksidas metanolyje.
[0119] Junginiai, atitinkantys (VIII) formulę gali būti gauti atitinkama junginio, atitinkančio (IX) formulę, 4-hid-roksigrupės inversija ir derivatizacija:
[0120] kurioje Ar, Z3 ir Z5 reiškia anksčiau nurodytas reikšmes. Inversija ir derivatizacij a gali būti at-liktos reaguojant junginiui, atitinkančiam (IX) formulę su M grupės dariniu, tokiu, kaip rūgštis, atitinkanti formulę A^-COOH, pavyzdžiui, benzoine rūgštimi (arba jos reaguoti galinčiu dariniu), kur Arx įgyja anksčiau nurodytą reikšmę. Paprastai reakcija vykdoma kambario temperatūroje, neutraliose sąlygose tinkamame poliniame tirpiklyje, pavyzdžiui, tetrahidrofurane. Inversijai ir derivatizacij ai rekomenduojama panaudoti Mitcunobu reakciją, kaip reagentai kartu su rūgštimi Arl -COOH naudojami dietilazodikarboksilatas (DEAD) ir trifenil- T fosfinas .
[0121] Junginys, atitinkantis (IX) formulę, gali būti gautas iš glikozidinio darinio, atitinkančio (X) formulę:
[0122] kurioje Z3 ir Z5 įgyja anksčiau nurodytas reikšmes ir R atitinka angliavandenilinę CL -C4 -grupę, pvz., C^-C^ -al-kilą, geriau, jei metilą. Esant rūgštinėms sąlygoms ir aukštesnei temperatūrai, junginiai, atitinkantys (IX) formulę, priverčiami reaguoti su junginiais, atitinkan-čiais formulę: Ar -CH2 -SH, čia Ar įgyja anksčiau nurodytą reikšmę. Pageidautina, kad rūgštimi būtų naudojama chlorvandenilio rūgštis, kuri gali būti van-deninė arba bevandenė. Rekomenduotina aukštesnė tempe-ratūra randasi intervale 30-60°C, pavyzdžiui, 40°C. Kai Ar - fenilas, tai junginys Ar -CH2 -SH yra benzil-tiolas.
[0123] Junginys, atitinkantis (X) formulę, gali būti gautas iš junginio, atitinkančio (XI) formulę:
[0124] kurioje R reiškia anksčiau nurodytas reikšmes. Junginio, atitinkančio (XI) formulę, hidroksilinės grupės apsaugomos įprastinėmis sąlygomis reaguoti sugebančiais Z3 ir Z5 grupių dariniais.
[0125] Pavyzdžiui, gali būti panaudotas bromo darinys. Taigi, jei Z3 ir Z' reiškia benzilą, tai yra naudojamas benzilbromidas. Reakcija gali būti įvykdyta organiniame tirpiklyje, tokiame kaip tetrahidrofuranas dalyvaujant tinkamai bazei, tokiai kaip natrio hidridui ir fazių pernešimo katalizatoriui, tokiam kaip tetrabutilamonio j odidui.
[0126] Junginiai, atitinkantys (XI) formulę, gali būti su-sintetinti remiantis standartiniais metodais paėmus pagrindu 2-dezoksi-D-ribozę, kuris yra parduodamas produktas. 2-dezoksi-D-ribozė gali reaguoti su alko-holiu atitinkančiu formulę: R-OH (R i,gyja anksčiau nurodytą reikšmę), dalyvaujant rūgščiai. Tinkama chloro vandenilio rūgštis. Kai R - metilas, alkoholis R-OH yra metanolis .
[0127] 2-dezoksi-D-ribozės virtimas i, jungini,, atitinkanti, (XI) formulę, yra lydimas nedideliu santykiu atitinkamo piranozidinio junginio, pakeisto 1-padėtyje OR grupe, susidarymu.
[0128] Šis šalutinis junginys gali pasilikti reaguojančiame mišinyje virsmo (XI) i (X) , (X) i (XI) ir po to se-kančių reakcijų, duotų anksčiau, eigoje, ir jis patirs analogiškus virsmus. Šis šalutinis junginys gali būti atskirtas įprastomis priemonėmis bet kuriame patogiu būdu pvz., chromatografija.
[0129] Junginys, atitinkantis (VII) formulę, gali būti taip pat gautas tiesiogiai iš junginio, atitinkančio (IX) formulę, padedant Mitcunobu reakcijai, tenkinant sąly-gas, nurodytas darbe: D. R. Williams ir kt. JACS (1990) 112,4552.
[0130] Išradimas iliustruojamas šiais jo neapribojančiais pa-vyzdžiais .
[0131] Į 2-dezoksi-D-ribozės tirpalą (50 g, 373 mmol) sausame metanolyje (900 ml) prideda 1 % sauso vandenilio chlo-rido metanolyje (100 ml) tirpalą. Mišini 30 minučių išlaiko uždarytoje kamščiu kolboje, po to reakcija nutraukiama, pridėjus, intensyviai maišant, sidabro
[0132] karbonatą (10 g). Mišinys filtruojamas, veikiant sunkio jėgai, ir bespalvis filtratas išgarinamas rotoriniame garintuve iki pasiekiama sirupo būsena. Po to liekantis metanolis pašalinamas pakartotinai garinant su sausu THF. Po to sirupas ištirpinamas sausame THF (470 ml) ir tirpalą azoto atmosferoje, 0°C temperatūroje lėtai maišant pridedamas natrio hidridas, 50 % dispersijos alyvoje pavidalu (39,4 g, 821 irimo 1) . Po to pridedamas sausas tetrabutilamonio jodidas (30,3 g, 82,1 mmol), toliau valandos bėgyje pridedamas benzilbromidas (140 g, 821 mmol). Po maišymo, trunkančio 60 valandų kambario temperatūroje, pašalinant drėgmę, PSCh /heksanas etilacetatas (4:1)/ rodė beveik visišką virtimą i, du greičiau judančius komponentus (Rf 0,47 ir 0,36). THF pašalinamas vakuume, ištirpinamas dichlormetane ir paskui išpilamas i, ledini, vandeni,. Dichlormetano tirpalą ekstrahuoja iš gauto mišinio ir po to džiovina virš magnio sulfato. Dichlormetanas išgarinamas, esant sumažintam slėgiui, gautą likuti, išskirsto kolonėlėje su silikageliu, eliuojant heksano-etilacetato mišiniu (4:1). Sujungus atitinkamas frakcijas gauna antraštinio junginio a(Rf0,36) ir (3(Rf0,47) izomerus skaidraus bespalvio sirupo pavidalu.
[0133] (LH) 5 (d6 DMSO) :7,56-7,17 (10H, d, aromatika),5.12-5 . 00 (1H, k v; H -1) , 4.60-4.45 (4H, m, Ph, CH20) , 4 . 4 0-3 . 8 6 (2H,m, H-3,H-4) , 3.58-3.42 (2H,d,H-50), 3 . 40(3H,s, CH3), 2.40-1.80 (2H,m,H-2);
[0134] (13C) 5 (CDC13) : 128.3-127.6 (aromatika), 105.2(C-1), 82.1 (C-3 arba C-4), 78.6 (C-3 arba C-4), 73.4- (PhCH2 O), 71.5 (PhCH2 0), 70.2 (C-5), 55.1(OMe), 38.9 (C-2).
[0135] (lH) 5 (d6 DMSO) : 7.50-7.20 (10H,d,aromatika), 5.18-5.02 (1H,kv,H-l), 4.65-4.43, (4H,d,PhCH2 O), 4.43-4.00 (2H,m,H-3,H-4), 3.60-3.42 (2H,m,H-5), 3.30 (3H,s,CH3), 2.45-2.05 (2H,m,H-2).
[0136] (13C) 5 (CDC13) : 128.3-127.6 (aromatika), 105.4 (C-l), 82.8 (C-3 arba C-4), 80.0 (C-3 arba C-4), 73.3 (PhCH2 O), 72.0 (PhCH2 O) , 70.2 (C-5), 54.9 (OMe), 39.3 (C-2).
[0137] 3, 5- di- Q- benzil- 2- dezoksi- D- eritro- pentozės dibenzilditioacetalio gavimas
[0138] Į maišomą metil-3,5-di-0-bezil-2-dezoksi-D-eritropento-zido (77,5 g, 236 mmol) ir benziltiolo (147 g, 1,19 mmol) mišinį, kambario temperatūroje sulašinama koncentruota druskos rūgštis (150 ml). Po to temperatūra didinama iki 40°C ir mišinys maišomas 18 valandų. Baigiantis nurodytam periodui PSCh (heksanas-etilacetatas (4:1) rodė dviejų greičiau judančių komponentų (Rf 0,58 ir 0,53), mažus kiekius, pagrindinio komponento (Rf 0.29) ir dalyvaujančio mažesniais kiekiais žymiai lėtesnio komponento (Rf 0,22) buvimą. Mišinys ištirpinamas chloroforme, išpilamas į ledini, vandeni,, natrio hidrokarbonatu neutralizuojamas ir chloroformu ekstrahuojamas. Chloroformo ekstraktai džiovinami virš magnio sulfato ir chloroformas išgarinamas prie sumažinto slėgio. Likutis išskirstomas kolonėlėje su silikageliu, eliuojant heksano - etilacetato mišiniu (4:1). Pirmas komponentas, eliuotas iš kolonėlės skaidraus bespalvio sirupo pavidalu, yra benzil- 3, 5- di- 0- benzil- 2- dezoksi-1- tio- D- eritro- pentafuranozido a, P - anomerai
[0139] ( 1H) 8 ( d6 DMSO) : 7. 43- 7. 15 ( 15H, m, aromatika), 5. 12- 4. 94 ( 1H, m, H- l), 4. 59- 4. 36 ( 4H, m, PhCH2 0) , 4. 12- 3. 30 . ( 6H, m, H- 3, H- 4, H- 5, PhCH2 S), 2. 35- 1. 35 ( 2H, m, H- 2).
[0140] Elementų analizė
[0141] Rasta: C, 74. 4; H, 6. 5. Apskaičiuota dėl C26H2803S :C, 74, 3; H, 6. 7 %.
[0142] Antraštinis junginys iš kolonėlės eliuojamas kaip ant-ras komponentas skaidraus sirupo ( 109 g, 85 %) pavidalu .
[0143] ( 1H) 8 ( d6DMSO) :7. 35- 7. 05 ( 20H, m, aromatika) , 4. 97- 4. 95 ( 1H, d, OH- 4), 4. 47- 3. 95 ( 4H, m, PhCH2 O), 3. 81- 3. 66 ( 7H, m, H- l, H- 3, H- 4, PhCH2 S), 3. 44- 3. 32 ( 2H, d, H- 5), 2. 10- 1. 83 ( 2H, m, H- 2) .
[0144] Elementų analizė
[0145] Rasta: C, 73. 0; H, 6. 5. Apskaičiuota dėl C 33H3603S2: C, 72 . 8; H, 6. 7 %.
[0146] / a/ l5 = - 101. 8° ( cl. 2, EtoH) .
[0147] 4- O- benzoil- 3, 5- di- 0- benzil- 2- dezoksi- L- treo- pentozės dibenzil- ditioacetalio gavimas
[0148] Į 3, 5-di-0-benzil-2-dezoksi-D-eritropentozės dibenzilditioacetalio (54,1 g, 99,3 mmol), trifenilfosfino (39,1 g, 149 mmol) ir benzoinės rūgšties (18,2 g, 149 mniol) tirpalą sausame THF (800 ml) maišant kambario temperatūroje pridedama po lašą DEAO (26 g, 149 mmol) tirpalo sausame THF (200 ml). Po 18 valandų maišymo, kambario temperatūroje PSCh (heksanas-etilacetatas (4:1)) rodė žymiai greičiau judanti, produktą (Rf 0,56) ir lėčiau judančią pradinę medžiagą (Rf 0,36). THF pa-šalinamas vakuume, likutis išskirstomas kolonėlėje su silikageliu, eliuuojant heksano-etilacetato mišiniu (85:15). Sujungus atitinkamas frakcijas baltos kietos medžiagos pavidalu gaunamas antraštinis junginys. Pradinis produktas taip pat gali būti išskirtas.
[0149] (lH) 5 (d6 DMSO): 7.99-6.98 (25H,m,aromatika), 5.39-5.22 (1H,m,H-4), 4.54-4.04 (4H, m, PhCH20) , 4.01-3.62 (8H,m, H-l, H-3,H-5,PhCH2 5), 2.17-1.84 (2H,m,H-2).
[0150] Elementų analizė
[0151] Rasta C,74.3; H,6.4. Apskaičiuota dėl C40H4004S2 : C, 74 . 0 ; H, 6.2 %.
[0152] m/z 525 /M-SBn/+, 435 /M-2.SBn/+, glicerino matrica.
[0153] /a/D2 5 = 51.6° (CO . 7, CH2C12) .
[0154] 3, 5- di- 0- benzil- 2- dezoksi- L- treo- pentozės dibenzilditioacetalio gavimas
[0155] Į 4-0-benzoil-3,5-di-0-benzil-2-dezoksi-L-treo-pentozės dibenzilditioacetalio (88,8 g, 137 mmol) dichlormetane (500 ml) tirpalą įlašinamas natrio metoksido (11,1 g, 206 mmol) metanolyje (205 ml) tirpalas pastoviai maišant 0°C temperatūroje . Po to reaguojantis mišinys paliekamas 3-4 valandų laikotarpyje tam kad įšiltų. Nurodyto periodo pabaigoje PSCh /heksanas - etilacetatas (4:1)/parodė pilną virtimą i, žymiai lėčiau judanti, komponentą (Rf 0,31) . Po to mišinys išpilamas i, 5 % NaH2POi] tirpalą ir ekstrahuojamas dichlormetanu. Dichlormetano ekstraktai yra praplaunami 5 % natrio karbonatu ir vandeniu, džiovinami (magnio sulfatas) ir išgarinami. Neapdorotas antraštinis produktas valomas kolonėlėje su silikageliu, eliuuojant heksano - etilacetato mišiniu (4:1). Sujungus atitinkamas frakcijas, gaunamas skaidraus bespalvio tirpalo pavidalu antraš-tinis junginys.
[0156] (XH) 5 (d6 DMSO) : 7.34-7.06 (20H,m, aromatika) , 4.88-4.86 (1H,d,OH-4), 4.55-4.00 (4H, m, PhCH20) , 4.83-3, 32 (9H,m,H-l, H-3, H-4, H-5, PhCH2 5), 2.08-1.84 (2H,m,H-2).
[0157] Elementų analizė
[0158] Rasta: C, 72.6; H, 6.9. Apskaičiuota dėl C33H3f.01S2; C,72.8; H,6.7 %.
[0159] /ot/D2 5 = -75, 6° (cl.9, EtoH) .
[0160] 3, 5- di- 0- benzil- 2- dezoksi- 4- 0- metansulfonil- L- treo-pentozės dibenzilditioacetalio gavimas
[0161] Į 3,5-di-0-benzil-2-dezoksi-L-treo-pentozės dibenzilditioacetalio (61,4 g, 113 mmol) tirpalą sausame piridine (700 ml) maišant ir esant 0°C įlašinamas metansul-fonilchloridas (19,4 g, 169, mmol) sausame piridine (200 ml) . Mišinio temperatūra pakeliama iki kambario temperatūros ir maišymas trunka 18valandų. Po to vakuume piridinas pašalinamas ir likutis ištirpinamas dichlormetane. Dichlormetaniniai ekstraktai iš eilės praplaunami 2M druskos rūgštimi; IM natrio karbonatu ir vandeniu, džiovinami (magnio sulfatas) ir išgarinus gaunamas tiršto klampaus sirupo pavidalu antraštinis junginys. Iš heksano - etilacetato mišinio perkristalinus gauto sirupo pavyzdi, gaunamas baltų kristalų pavidalu antraštinis junginys su lyd. t. 82-83°C.
[0162] BMR spektras
[0163] (XH) 5 (d6 DMSO): 7.64-6.89 (20H,m,aromatika), 4.88-4.64 (1H, m, H-4) , 4.60-4.09 (4H,m,PhCH2 O), 4.05-3.43 (8H,m, H-l, H-3, H-5, PhCH2 S), 3.11 (3H, S, CH3) , 2.12-1.80 (2H, m, H-2).
[0164] Elementų analizė
[0165] Rasta: C, 65.5; H, 6.1; Apskaičiuota dėl C34H3g05S3: C,65.6; H, 6.2 %.
[0166] m/z 499 /M-SBn/+, 393 /M-SBn-OBn+H/ + , glicerininė matrica .
[0167] /a/p 5 = -58.4°. (c2 . 4, CH2C12) .
[0168] Benzil- 3, 5- di- 0- benzil- 2- dezoksi- l, 4- ditio- D- eritro-pentafuranozido gavimas
[0169] 3, 5-Di-0-benzil-2-dezoksi-4-0-metansulfonil-L-treo-pen-tozės, dibenzilditioacetalio (29,4 g, 47,4 mmol), natrio jodido (74 g, 494 mmol), bario karbonato (148 g, 750 mmol) ir sauso acetono (1 1) suspensija virinama 42 valandas. Pasibaigus nurodytam periodui suspensija filtruojama ir kieta medžiaga praplaunama vandeniu. Filtratą paeiliui praplauna vandeniu, 5 % natrio tio-sulfato tirpalu ir vandeniu, džiovina (magnio sulfatas) ir išgarina. Gautą likuti, valo kolonėlėje su silikageliu eliuuojant heksano - etilacetato (9:1) mišiniu. Sujungus atitinkamas frakcijas, gaunamas skaidraus gelsvo sirupo pavidalu antraštinis junginys ir išgau-namas pradinis produktas.
[0170] ^H) 5 (d6 DMSO) : 7.50-7.12 (1SH,m,aromatika) ; 4.66-4.13 (6H,m,H-l, H-4, PhCH20) , 4.09-3.35 (SH,m,H-3, H-5, PhCH2S), 2.44-1.94 (2H,m,H-2).
[0171] (13C) 5 (CDC13) : 129.0-127.1 (aromatika) , 83.04 (C-l), 73.1 (PhCH20), 71.0 (C-3), 53.2 (PhCH2S), 49.9 (C-4), 41.3 (C-5), 37.0 (C-2).
[0172] (13C) 5 (CDCI3) : 129.0-127.1(aromatika), 82.7 (C-l) , 72.9 (PhCH20) , 71,6 (C-3) , 53.0 (PhCH2S), 49.0 (C-4) , 41.0 (C-5), 37.0 (C-2).
[0173] Elementų analizė
[0174] Rasta: C, 71.8; H, 6.7; S 14.4. Apskaičiuota dėl C26H2802S2: C,71.5; H, 6.5; S 14.7 %.
[0175] m/z 437 /M+H/\ 345 M-Bn/+, 329 /M-OBn/\ 313 /M-SBn/\ 223 /M-SBn-Bn+H/+, glicerininė matrica.
[0176] 3', 5' - Di- O- benzil- 4'- tiotimidino ir jo a - anomero gavimas
[0177] Benzil-3,5-di-0-benzil-2-dizoksi-l, 4-ditio-D-eritro-pentafuranozido (22,5 g, 51,6 mmol),bis TMS-timino (46 g, 170 iranol) gyvsidabrio (II) bromido (20,5 g, 56,7 mmol), kadmio karbonato (29,3 g, 170 mmol) ir sauso tolueno (1 1) suspensija virinama ilgiau nei 24 valandas. Karštas mišinys filtruojamas ir kietas produktas perplaunamas toluenu. Filtratas paeiliui perplaunamas 30 % kalio jodido tirpalu ir vandeniu, o po to išgarinamas. Likutis išpilamas i, metanolio - vandens mišini, (4:1), maišomas 30 min., suspensija ir filtratas filtruojami ir išgarinami. Likutis valomas kolonėlėje su silikageliu /heksanas-etilacetatas (4:1)/ ir iš sujungtų atitinkamų frakcijų gaunamas skaidraus sirupo pavidalu antraštinis junginys. '"H-BMR nustatytas santykis tarp a- ir (3 -amomerų yra 2,8:1. Atskiri anomerai gaunami tolimesne kolonine chromatografija. Pirmas junginys, išplaunamas iš kolonėlės yra bespalvio sirupo pavidalu 3 ' , 5 ' -di-O-benzil-4 '-tiotimidinas . Ji, perkris-talizuo-jant iš matanolio gaunami bespalviai kristalai su lyd. t. 140- 142°C.
[0178] ( XH) 6 ( d6 DMSO) : 11. 36 ( lH, s, NH), 7. 69 ( lH, s, H- 6), 7. 48- 7. 22 ( 1OH, m, aromatika), 6. 33- 6. 27 ( lH, t, H- l'), 4. 61- 4. 51 ( 4H, m, PhCH2 O), 4. 30 ( lH, s, H- 3'), 3. 76- 3. 66 ( 3H, m, H- 4 ', H- 5') 2. 42- 2. 32 ( 2Hrm, H- 2), 1. 66 ( 3H, s, CH3) .
[0179] max 269. 1 nm ( e , 14, 300).
[0180] Elementų analizė
[0181] Rasta: C, 66. 0; H, 6. 0; N, 6. 3. Apskaičiuota dėl C24H26N204S: C, 65. 7; H, 6. 0; N, 6, 4 %.
[0182] m/ z 439 / M+ H/ + , 347 / M- Bn/+, 331 / M- OBn/+, 3- noba matrica.
[0183] Sekantis komponentas, išplaunamas iš kolonėlės, buvo a- anomeras ( bespalvis sirupas).
[0184] rH) 5 ( d6 DMSO) : 11. 28 ( 1H, s, NH), 7. 95 ( 1H, s, H- 6), 7. 43- 7. 20 ( 10H, m, aromatika) , 6, 25- 6. 21 ( lH, d, H- l'), 4. 66- 4. 47 ( 7H, m, PhCH2 O), 4. 25 ( lH, s, H- 3'), 4. 10- 4. 06 ( lH, m, H- 4'), 3. 57- 3. 42 ( 2H, m, H- 5f), 2. 68- 2. 26 ( 2H, m, H- 2'), 1. 55 ( 3H, s, CH3) .
[0185] max 268.1 nm (e, 10,900) .
[0186] Elementų analizė
[0187] Rasta: C,65.4; H, 6.1; N, 6.7; S, 7.4. Apskaičiuota dėl C24H26N204 S: C, 65.7; H, 6.0; N 6.4; S, 7.3 %.
[0188] m/z 439 /M+H/ + , 461 /M+Na/+, 3-noba matrica.
[0189] Į boro trichlorido sausame dichlormetane (55 ml) 2M tirpalą, atvėsintą iki -78°C, įdedamas p -3', 5' -di-O-benzil-4' tiotimido (1,6 g, 3,7 mmol) sausame dichlormetane (30 ml) tirpalas. Maišymas, esant -78°C, trunka 5 valandas. Po to 40 min. bėgyje įlašinamas metanolis - dichlormetanas (1:1, 200 ml). Reikalingas mišinys 1 valandos bėgyje paliekamas, kad įšiltų iki kambario temperatūros, tirpiklis pašalinamas vakuume ir išga-rinamas kartu su sausu metanoliu (3x30 ml) . Likutis valomas kolonėlėje su silikageliu eliuuojant chloroformo - metanolio mišiniu (85:15) gaunamas antraštinis junginys, kuri, perkris tai inus iš metanolio gali būti gauti bespalviai kristalai su lyd. t. 208-209°C.
[0190] (XH) 5 (d 6 DMSO) : 11.34 (1H, m, NH) , 7.81 (lH,s,H-6), 6.32-6.26 (1H,t,H-l'), 5.26-5.25 (1H,d,OH-3'), 5.20-5.16 (1H,t,OH-S'), 4.40-4.35 (lH,m,H-3'), 3.18-3.16 (3H, m,H-4 ' , H-5), 2.25-2.13 (2H,m,H-2'), 1-80 (3H, s, CH-,) .
[0191] max 27 0. 5 nm ( e, 10, 300) .
[0192] Elementų analizė
[0193] Rasta: C, 46. 2; H, 5. 3; N, 10. 6. Apskaičiuota dėl C10Hi4N2O4S : C, 46. 5; H, 5. 5; N, 10. 9 %.
[0194] m/ z 259 / M+ H/+, 3- noba matrica.
[0195] Benzil - 2 - dezoksi - l , 4 - ditio - 3 , 5 - di - O - toluoil - D - eritro - pentafuranozido gavimas
[0196] Į atšaldytą iki - 78°C boro trichlorido sausame dichlormetane ( 150 ml) 2M tirpalą 30 min. bėgyje įlašinamas benzil - 3, 5- di- 0- benzil- 2- dezoksi- l, 4- ditio- D- eritro-pentafuranozido tirpalas ir maišomas 5 valandas esant - 78°C. Po to 40 min. laikotarpyje įlašinamas metanolio - dichlormetano mišinys ( 1:1, 200 ml) . Reakcijos mišinį 1 valandos laikotarpyje palieka, kad jis įšiltų iki kambario temperatūros, tirpiklis pašalinamas vakuume išgarinant kartu su sausu metanoliu ( 3x30 ml) . Neap-dorotą likutį ištirpina sausame piridine ( 25 ml) , at-šaldo iki 0°C ir maišydami įlašina p- toluenchlorido ( 4, 6 g, 30 mmol) tirpalą, sausame piridine ( 25 ml) . Piridinas pašalinamas vakuume, likutis ekstrahuojamas chloroformu, ekstraktai iš eilės perplaunami 2M druskos rūgštimi, 1M natrio karbonatu ir vandeniu, džiovinami ( magnio sulfatas) ir išgarinami. Likutis valomas kolo-nėlėje su silikageliu eliuuojant heksanetilacetato mi-šiniu ( 9:1) gaunamas skaidraus gelsvo sirupo pavidalu antraštinis junginys (1, 5 g, 53 %).
[0197] ^ H) 8 ( d5DMSO) : 7. 94- 7. 25 ( 13H, m, aromatika), 5. 68- 5. 62 ( 1H, m, H- l') , 4. 74- 4. 66 ( lH, m, H- 3'), 4. 39- 3. 83 ( 6H, m, H-3', H- 4' , H- 51, PhCH2 S), 2. 51- 2. 25 ( 2H, m, H- 2»), 2. 39 ( 6H, s, CH3) .
[0198] Elementų analizė
[0199] Rasta: C, 67. 2; H, 5. 7. Apskaičiuota dėl C2gH2804S2 . 1/ 2 H20: C, 67. 0; H, 5. 8 %.
[0200] m/ z 515 / M+ Na/+, 401 / M- Bn/\ 369 / M- SBn/+, 357 / M-OpTol/ + , 3- noba matrica. E - 5 -( 2 - bromvinil - 2 '- dezoksi - 4 '- tio - 3 ', 5 '- di - O - p - toluoiluridino ir jo g - anomero gavimasĮ benzil- 2- dezoksi- l, 4- ditio- 3, 5- di-O- toluoil-D- eritro-pentafuranozido ( 1, 4 g, 2, 8 mmol) tirpalą anglies tetrachloride ( 15 ml) maišant ir esant kambario tempe-ratūrai įdedamas bromo ( 0, 49 g, 3, 1 mmol) tirpalas anglies tetrachloride ( 15 ml) . Po 5 minučių mišinys prie pažeminto slėgio koncentruojamas, pridedama anglies tetrachlorido ( 5 ml) ir mišinys, pašalinant bromo perteklių, išgarinamas. Garinimo procesas pakartojamas keturis kartus. Gautas i sirupą panašus bromidas nepastovus, ir jis tiesiogiai naudojamas sekančioje stadij oje. I bromido tirpalą ( 10 ml) anglies tetrachloride pridedama E- 5-( 2- bromvinil) uracilo ( 1, 7 g, 4, 7 mmol) bis- TMS darinio anglies tetrachloride ( 10 ml) . Mišinys maišomas kol tampa homogeniniu, išgarinamas, o likutis 1 valandą šildomas 90- 100^' C temperatūroje. Atšaldytą
[0201] tamsų likuti, ištirpina metanolio - vandens (4:1, 30 ml) mišinyje, tirpalą 15 minučių virina ir po to išgarina. Likuti, ištirpina chloroformu (40 ml) ir 5-(2-bromvinil)uracilo nuosėdas nufiltruoja. Filtratas iš eilės plaunamas natrio hidrokarbonatu ir vandeniu, džio-vinamas (natrio sulfatas) ir garinamas. Likutis valomas kolonėlėje su silikageliu, eliuuojant heksano-etilacetato (3:2) mišiniu. Atitinkamas frakcijas sujungus, gaunamas antraštinis junginys kietos baltos medžiagos pavidalu. 1H BMR parodo, kad a- ir (3- anomerų santykis yra 1,8:1. Papildoma kolonėlės chromatografija /chloroformas-propan-2-olis (98:1)/ pasiekiamas tolimesnis anomerų atskyrimas. Pirmas junginys, kuris eliuuojamas iš kolonėlės, yra E-5-(2-bromvinil)-2'-dezoksi-4'-tio-31,5'-;di-0-benzil-p-toluiluridinas, kuris gali būti iškristalintas iš metanolio bespalvių kristalų su lyd. t. 182-184°C pavidale.
[0202] (XH) 6 (d6 DMSO) : 11.73 (lH,s,NH), 8.10 (lH,s,H-6), 7 .94-7.86 (4H,m,aromatika), 7.39-7.19 (SH, m,aromatika ir vinilo H), 6.89 (1H,d,vinilo H,J=5Hz), 6.45-6.40 (1H, t,H-l ' ), 5.85-5.80 (lH,m,H-3'), 4.71-4.53 (2H,m,H-5'), 4.00-3.92 (1H,m,H-4'), 2.83-2.50 (2H,m,H-2'), 2.39 ( 6H, s, CH3) .
[0203] Max 241.6 nm (e, 34,960) 296.9 nm (e, 10,100).
[0204] Min 271.4 nm (e, 7,700)
[0205] Sekantis komponentas, eliuuojamas iš kolonėlės, yra a-anomeras, kuris iš metanolio gali būti iškristalintas bespalvių kristalų su lyd. t. 176-172°C pavidale.
[0206] (;H) 5 (d6 DMSO) : 11.64 (lH,s,NH), 8.36 (lH,s,H-6), 7.91-7.77 (4H,m,aromatika), 7.36-7.22 (5H,m,aromatika,vinilo H) 6.80 (1H,d,vinilo H,J=5Hz), 6.29—6.27 (1H,d,H-l'), 5.75-5.62 (lH,m,H-3'), 4.48-4.39 (3H,m,H-4', H-5' ) , 2.94-2.85 (2H,m,H-2'), 2.37 (6H,s,CH3).
[0207] Max 241.6 nm (e, 47,000) 296.1 nm (e, 12,500).
[0208] Min 27 3.1 nm (e, 10,000)
[0209] Elementų analizė
[0210] Rasta: C, 54.4; H, 4, 4; N, 4.5. C27H25Br N206S /2H20 apskaičiuota C,54.6; H,4.2; N,4.7 %.
[0211] E- 5-( 2- bromvinil) 2'- dezoksi- 4'- tiouridinas ir jo a- anomero gavimas
[0212] Natrio metoksido metanolyje (7,5 ml, 0,1 ml) tirpale ištirpinamas E-5-(2-bromvinil)-2'-dezoksi-4'-tio-3',5'-di-O-p-toluiluridinas (200 mg, 0,34 mmol) ir mišinys 22°C temperatūroje paliekamas 2 valandas. Atsargiai pridedant jonų mainų dervą wex 50 (H4 forma) tirpalas neutralizuojamas iki pH 6. Derva nufiltruojama ir per-plaunama metanoliu, filtratas ir plaunamieji tirpalai išgarinami ir gaunama kieta medžiaga, kuri valoma kolo-nėlėje su silikageliu, eliuuojant chloroformo-metanolio (9:1) mišiniu. Atitinkamas frakcijas sujungus, gaunamas E-5-(2-bromvinil)-2'-dezoksi-4'-tiouridinas (90 mg, 75 %) , kurį perkristalinus iš metanolio vandens mišinio, gaunami bespalviai kristalai su lyd.t. 190-191°C.
[0213] (1H) 5 (d6 DMSO) : 11.63 (lH,s,NH), 8.20 (lH,s,H-6), 7.30 (1H, d, vinilo H, J=5Hz), 6.97 (1H,d,vinilo H, J=5Hz) 6.27-6.22 (1H, t,H-l1), 5.29-5.28 (1H,d,OH-3 • ), 5.24-5.20 (1H,t,OH-S1) 4.40-4.32 (lH,m,H-3'), 3.69-3.16 (3H,m,H-4', H-5 ' ), 2.30-2.15 (2H,m,H-2').
[0214] Max 249.7 nm (e, 16,000) 297 nm (e, 14,300).
[0215] Min 271.2 nm (e, 7,700).
[0216] Elementų analizė
[0217] Rasta: C, 37.42; H,3.72; N, 7.76 %; CuH13BrN204S apskaičiuota C,37.42; H,3.72; N,8.02 %.
[0218] Pagal panašią metodiką deblokuojant a-anomerą, gali būti gautas E-5-(2-bromvinil)-1-(2-dezoksi-4'-tio- a - D-eritro-pentafuranozil)-uracilas, perkristalintas iš metanolio, lyd.t. 186-187°C.
[0219] (1H) 6 (d6 DMSO) : 11.56 (lH,s,NH), 8.44 (lH,s,H-6), 7.24 (1H,d,vinilo,H,J=5Hz) , 6.86 (1H,d,vinilo, H,J=5Hz) 6.13-6.09 (1H,kv,H-l1) , 5.46-5.45 (1H,d,OH-3'), 5.06-5.45 (1H,t,OH-3') 5.06-5.02 (1H,t,OH-5'), 4.3-4.24 (1H,m,H-31), 3.63-3.16 (3H,m,H-4', H-5'), 2.17-2.09 (2H, m,H-21) .
[0220] Max 250.9 nm (e, 16,500) 296.2 nm (e, 14,300).
[0221] Min 271.7 nm (e, 8,600).
[0222] r Į apsaugotą nuo drėgmės ir maišomą benzil-3,5-di-O-benzil-2-dezoksi-l,4-ditio-D-eritro-pentafuranozido (436 mg, 1 mmol) sausame MeCN (3 ml) tirpalą įdedamas gyvsidabrio (II) bromidas (370 mg, 1,03 mmol) ir kadmio karbonatas (480 mg, 2,8 mmol) ir po to švirkštu įvedamas 5-jod-bis-O-trimetilsililuracilo (3 mmol) tirpalas. Reakcijos eiga kontroliuojama analitinės AESCh pagalba tuo pačiu metu 1 valandą virinant mišinį. Atšaldžius iki kambario temperatūros, įpilamas vanduo (200 |_il) , 30 min. maišoma ir po to suspensija filtruojama, filtratas garinamas ir vėl tirpinama sausame MeCN, nusėdęs 5-joduracilas nufiltruojamas. Filtratas išvalomas preparatyvine 2,5 cm (1 colis) AESCh Zorbax C8 atvirkščių fazių kolonėlėje eliuuojant 20 ml/min.
[0223] greičiu gradientu /0-95 % MeCN - vanduo su pastoviu trifluoracto rūgšties 0,2 % kiekiu 20 minučių bėgyje frakcijas surenkant kas pusė minutės. Apjungus frakcijas, turinčias švarų produktą ir išgarinus, gauta 330 mg produkto dervos. Santykis tarp a- ir p-anomerų 2,8:1. kuris nustatytas ^-BMR (200 MHz, CDC13) 5 :8,72 (s,0.2 6H, p-6-H); 8.55 (s,0.74, a-6-H); 6.35 (t, 0.26H, p-l'-H); 6.24 (dd,, 0.74H, a-l'-H).
[0224] Į maišomą BC13, esančio CH2, Cl2 (18 ml, 18 mmolių) , 1M tirpalą N2 atmosferoje -78°C temperatūroje 30 min. laikotarpyje įdedamas anksčiau aprašytu būdu gauto produkto (240 mg, 0.44 mmol), esančio sausame CH2C12 (10 ml + 2 ml, skirti perploviiriui, tirpalas. Reakcijos eiga kontroliuojama analitine AESCh. Praėjus 6 valandoms - 78°C temperatūroje lėtai įdedamas MeOH-CH2Cl2 (1:1, 18 ml) ir mišinys paliekamas įšilimui iki kambario tempera-tūros, po to išgarinamas. Likutis kartu su MeOH (3X) pakartotinai garinamas, ko pasekoje įvyksta dalinė kristalizacija. Likutis užpilamas MeOH-CHCl3 (1:1, 15 ml) ir filtruojant nuosėdas gaunami 7,7 mg tikslinio P-anomero junginio. Mas-spektras (m/z): 370 (10 %) dėl C9HnIN204S; 200 MHz ^-BMR 8: 11.2 (pl,s,lH,NH) 8.48 (s, 1H, 6-H) ; 6.2 (t, 1H, l'-H); 5.23 (m, 2H, 2xOH) ; 4.35 (m,1H,3'-H) ; 3.60 (t,2H,5'-H2) ; 3.2 (4'-H, dalinai perdengtas DOH); 2.20 (m,2H, 2'-H2). Papildomai iš filtrato gauna 40 mg a, P -anomerų mišinio iš kurio preparatyvine AESCh gali būti išskirtas švarus P~anomeras.
[0225] 30 ml CC14 ištirpinamas benzil-3,5-di-0-benzil-2-dezoksi-1,4-ditio-D-eritro-pentafuranozidas (5,6 mmoliai) ir i, gautą tirpalą įdedamas bromas (6,2 mmoliai) esantis CC14 (30 ml) . Po penkių minučių maišymo esant kambario temperatūrai tirpiklis išgarinamas, o likutis vėl išga-rinamas iš CCI4 (10 ml) tam, kad būtų pašalintas bromo perteklius. Į neapdorotą 1-bromtiocukraus, esančio CC1,, (15 ml), tirpalą įdedamas bis-O-trimetilsilil-5-etiluracilas (gautas 2 valandų bėgyje pavirinus 5-etilura-cilą (16,6 mmoliai) heksametildisilazano (50 ml) ir chlormetilsilano (5 ml) mišinyje ir išgarinus tirpik-lius) , HgBr2 (1,99 g, 5,5 mmoliai) ir CdC03 (2.36 g; 16.6 mmol). Tirpiklis išgarinamas, o likutis šildomas 1 va-landą 100°C. Likutis apdorojamas pagal aprašymą, skirtą timidiniam analogui, ir produktas išvalomas kolonėlės chromatografija. Pagal metodiką, skirtą 5-jodanalogui, paveikus BC13, pašalinamos apsauginės benziloksigrupės.
[0226] 3b pavyzdys
[0227] 2'- dezoksi- 5- etil- 4'- tiouridino anomerų atskyrimas
[0228] 5-etildarinio a, P-anomerų mišinio pavyzdi, suskaido preparatyvine atvirkščių fazių AESCh Zorbax C8 2,5 centimetrų (1 colis) kolonėlėje eliuuojant MeCN-H20 (1:9 tūr. /tūr.) ir surenkant frakcijas kas pusė minu-tės. Frakcijos, apjungiančios atskirus anomerus, džio-vinamos šaldant.
[0229] 3-anomeras. Išeiga 23 mg, išlaikymo laikas - 6,2 min., mas spektras (m/z): 272,apsk. dėl CnH16N204S .0. 3H20 : C,47.47; H, 6.03; N,10.06; rasta, C,47.48; H,5.71; N, 9. 96 %; 200 MHz, 1H-BMR, DMSd6, 8: 11.28 (pl s, 1H,
[0230] NH) ; 7.8 (s, 1H,6-H) ; 6.3 (t,lH, 11-H); 5.24(d, 1H,3»-0H); 5.16 (t, 1H,5'0H) ; 4.37 (m,1H,3'-H); 3,62 (m, 2H, 5 1 -H2) 3.3 (4'-H, dalinai perdengtas DOH); 2.25-2.4(q+m, 4H, CH2CH3+ 2' -H2) ; 1.05 (t,3H, CH2CH3) .
[0231] g- Anomeras. Išeiga 15,8 mg, išlaikymo laikas - 7,5 min. mas spektras (m/z) : 272, apsk. dėl C11H16N204S .0 . H20: C,45.51; H,6.25; N,9.65; rasta, C, 45.54 ; H,5.75; N, 9.33 %; 200 MHz, 1H-BMR, DMS0-d6, 5: 11.1 (pl s,lH, NH) ; 8.12 (s, 1H, 6-H); 6.2 (q, 1H, 1' -H); 5.50 (d,1H,31-OH); 5.00 (t,lH, 5'-OH); 4.34 (m,1H,3' -H); 3.45-3.70(m,3H4' -H+5'-H2); 2.55 (m,1H,2' -H, dalinai perdengti tirpiklio); 2.25 (kv, 2H, CH2CH3); 2.05 (dt, 1H, 2' -H) 1.05 (t, 3H, CH2CH3) .
[0232] C pavyzdys
[0233] 3', 5'- Di- 0- benzil- 5- brom- 2'- dezoksi- 3~ 4'- tiouridinas
[0234] Antraštinis junginys susintetintas būdu, analogišku būdui, kuriuo gaunamas jodo darinys, su sekančiomis modifikacijomis: 1.Reakcijai skirtas bendras tirpiklio (MeCN) tūris buvo 3 ml. 2.CdC03 nebuvo naudotas.
[0235] 3.5-Brom-bis-O-trimetilsililuracilo perteklius suma-žintas iki 1,5 molio-ekvivalento.
[0236] Išvalyto AESCh junginio išeiga 193 mg;mas-spektras yra m/z 502, o tai atitinka tikėtiną formulę C2 ,H2:,BrN204S .
[0237] Apsauginių grupių pašalinimas atliktas taip pat, kaip ir jodo darinyje, padedant BC13.
[0238] Po išvalymo AESCh būdu gautas bromdarinys (3,3 mg) su (3,a-anomerų santykiu 3,6:1. Mas spektras parodė tikėtinus molekulinius jonus, esant 322 (1%) ir 324(0,8%); ^-BMR-spektras (200 MHz,DMSO-d6) atitinka struktūrą: 8,72 (0, 22H, s, a-H6) , 8.48 (0 . 78H, s, (3-H6) .
[0239] D pavyzdys
[0240] l- Acetoksi- 3, 5- di- p- toluil- 2- dezoksi- 4- tio- D- eritro-pentafuranozidas
[0241] Į maišomą BC13 sausame CH2C12 (125 ml, 0.125 ml, 0.125 mol) 1M tirpalą N2 atmosferoje, esant -78°C įlašinamas benzil-3,5 - di -O-benzil-2-dezoksi-l,4-ditio-D-eritro-pentofuranozido (3,68 g, 8,76 mmoliai) sausame CH2C12 tirpalas. Mišinys maišomas 4,5 valandas, esant -78°C, po to lėtai pridedamas MeOH-CH2Cl2 (1: ltūr ./tūr .) . pa-šildžius iki kambario temperatūros ir išgarinus tir-piklius, gaunamas neapdorotas O-dibenzilintas tio-cukrus. Derva ištirpinama piridine (sausame) esant N2 atmosferai ir 0"C, ir i, tirpalą lėtai įdedamas p-toluilchloridas (3,47 ml, 26.3 mmoliai). Mišinys mai-šomas 3 valandas 0°C temperatūroje ir po to tirpikliai išgarinami. Likutis ištirpinamas CH2C12 perplaunamas 2M HC1, 1M Na2C03 ir vandeniu, džiovinamas virš MgS04 ir išgarinamas. Likutis išvalomas "flash" (staigia) chromatografija ant Si02, eliuuojant EtOAc - heksanu (1:9 tūr./tūr.) ir gaunant bis-toluilcukraus darini, (2.18 g, apytiksliai 50 %) , mas spektras (m/z) : 492. Gautas produktas ištirpinamas acto rūgšties anhidride
[0242] (16 ml) ir maišomas 0"C temperatūroje. Įdedama kone. H2S04 (8 (.ii) , praėjus 10 min., įdedama sekanti porcija (8 jiil) , reakcijos eiga kontroliuojama PSCh. Per se-kančias 55 maišymo minutes įdedamas NaHCO-< (100 mg) ir praėjus 20 min. mišinys atsargiai išpilamas i, ledinį vandenį, kurio sudėtyje yra NaHC03. Produktą ekstrahuoja CH2C12, džiovina ir išgarina. Likutis išvalomas "flash" (staigia) chromatografija ant Si02 eliuuojant 20-25 % EtOAc heksane (išeiga 0,97 g) . LH-BMR (200 MHz, DMS0-d6) , : 7.7-8.1 (m,4H,ArH); 7.1-7.4 (m,4H+tirpiklis ArH); 6.35 (dd,0.55H); 6.27 (kv,0.45H, 1-H) ; 5.7-5.9 (m,1H,3-H); 3.7-4.7 (m,3H,5-H2 + 4-H) ; 2.2-2.7 (m+2.2-2.7 (m+2xs, 8H,2xArCH3+2-H2) ; 2.0-2.1 (2XS,3H, CH3C0 -a,p).
[0243] Apytikslis santykis tarp anomerų 1,1:1. Tolimesniam pritaikymui produktas pakankamai švarus.
[0244] 5-propiniluracilas (0,112 g, 0,75 mmoliai) heksametil-disilazane (3 ml) ir trimetilsililchloride (1 ml) įšildomas iki kietos medžiagos (4 vai.) ištirpimo mo-mento. Tirpikliai išgarinami, o likutis ištirpinamas sausame MeCN (6 ml). N2 atmosferoje 0UC temperatūroje paruoštą tirpalą įdeda į maišomą anksčiau pažymėto tioeukraus esterio (0,2 g, 0,5 mmoliai) tirpalą MeCN (10 ml) . Po to prideda trimetilsililtriflatą (0, 096 ml 0,5 mmol) ir mišinį 15 min. maišo. Mišinį atskiedžia CH2C12 (20 ml) , išpila į prisotintą vandeninį NaHC05 ir organinį sluoksnį atskiria. Padedant CH2C12, vandeninis sluoksnis papildomai ekstrahuojamas, sujungtos orga-ninės fazės džiovinamos ir išgarinamos. "Flash" (staigios) chromatografijos ant Si02 būdu, eliuuojant EtOAc -heksano (3:2 tūr./tūr.) mišiniu gaunamas apsaugotas anomerų mišinio (a/p 1.47:1), užteršto nedideliu kiekiu propiniluracilo, pavidalu tionukleozidas. Išeiga 0,21 g.
[0245] Gautas produktas (0,206 g, 0.397 mmoliai) ištirpinamas MeOH (15 ml) turinčiame MeONa (0,21 g, 0,397 mmolius) ir mišinys apytiksliai parą laikomas kambario tempe-ratūroje. Tirpalas neutralizuojamas jonų mainų derva owex 50 (H+) , filtruojamas ir iki sausumo išgarinamas. Kietas likutis perplaunamas eteriu (3x4 ml) ir hidrolize karštu acetonu gaunamas tikslinis produktas baltos kietos medžiagos pavidalu. Išeiga 100 mg. Į mi-šinį įdedamas metanolis ir filtruojant nuosėdas gaunamas švarus p-anomeras (30 mg). Vadovaujantis anksčiau nurodytu būdu, filtratas išskirstomas AESCh ir papildomai gaunami 6 mg ( 3 -anomero bei tam tikras a-anomero kiekis.
[0246] P- Anomeras: mas-spektras m/z 282; 200 MHz 1H-BMR, DMSO-d6, 6: 11.55 (pl s, 1H, NH) ; 8.7 (s, 1H, 6-H) ; 6.25 (t, 1H, l'-H); 5.2 (m, 2H, 2xOH); 4.3 (m, 1H,3'-H); 3.6 (m,2H,5'-H); 3.3 (4'-H, dalinai perdengtas DOH); 2,15 (m,2H,2'-H); 2.0 (s,3H, CsCCH3) .
[0247] Pagal metodiką, analogišką metodikai M.I.Robins ir kt.
[0248] (žiūr. anksčiau), gali būti gautas 5-propiniluracilas iš 5-joduracilo.
[0249] Pagal 5 pavyzdžio metodiką antraštinis junginys sintetinamas iš 5-chloruracilo. 5-chloruracilas yra parduodamas produktas. Pagal anksčiau nurodytą būdą, junginys išvalomas AESCh ir gaunamas anomerų mišinio ( P/ a apytiksliai 3:1) pavidalu.
[0250] 1H-BMR (200 MHz, DMSO-d6) 5: 11.8 (pl s, 1H, NH) ; 8.65 (s,0.25H, a-6-H); 8.4 (s,0.75H,0-6-H); 6.1-6.3 (t+m,1H, l'-H); 5.55 (d, 0.25H, a-3' -OH); 5.2-5.3 (m,1.5H, p-3' -OH+ p-5'-OH); 5.05 (t, 025H, a-5'-OH); 4.3-4.45(m,1H,3' -H);
[0251] 3.6-3.7 (m, 2H, 5 ' -H2) 2.1-2.4 (m, 2H, 2 ' -H2) ; 4 '-H perdengta tirpikliu. Mas spektras stebimas m/z 278 ir 280 dėl C9HnCIN204S .
[0252] Antraštinis junginys susintetintas pagal 5 pavyzdžio metodiką iš 5-trifluormetiluracilo. 5-trifluormetiluracilas išleidžiamas pramonės. Antraštinio junginio pavyzdys su apytiksliu p/ a anomerų santykiu 8:1 gaunamas neapdorotą deblokiruotą nukleozidą ištrinant acetonu, filtruojant ir išgarinant.
[0253] 1H-2 0 0 MHz BMR-d6, 5: 11.8 (pl s, 1H, NH) ; 8.83 (s,lH,(3-6-H) ; 6.2 (t,lH, p-l'-) ; 5.2-5.4 (m,2H, p-3'+5'-OH); 4.25-4.45 (m,lH, p-3'-H); 4.15 (s,lH=CH); 3.5-3.8 (m,2H, P-5'-H); 3.0-3.5 (m,4'H,perdengta DOH); 2.2-2.4 (m,2H, P-5'-H2) ; taipogi stebimi nedideli signalai, parodantys a-anomero buvimą.
[0254] Antraštinis junginys sintetinamas pagal 5 pavyzdžio me-todiką iš 5-etiniloracilo. 5-etiniluracilas gali būti gautas būdu, analogišku M.I. Robins ir kt. (žiūr. anks-čiau) duotam būdui.
[0255] Švaraus P-anomero pavyzdys gaunamas virinant neapdorotą anomerų mišini, MeOH ir filtruojant produktą.
[0256] lH-200 MHz BMR DMSO-d„, 6:11.6 (pl s, 1H, NH) : 8.42 (s,1H, p-6-H); 6.23 t,lH, p -l'-H); 5.1-5.35 (m,2H, p-3'+51-OH); 4.25-4.45 (m,1H, p-3'-H); 4.15 (s,lHsCH); 3.55-3.75 (m, 2H, (3-5' -H) ; 3.1-3.5 ( p- 4*-H, perdengta DOH); 2.1-2.4 (m,2H,P~5'-H); Mas spektras: stebimas m/z 268 dėl CnHnN204S.
[0257] Į benzil-3,5-di-0-benzil-2-dezoksi-l, 4-ditio-D-eritro-pentafuranozės (4 g, 9,5 mmoliai) acto rūgštyje (50 ml) ir acto rūgšties anhidride (50 ml) tirpalą įdedama kone. sieros rūgštis ir mišinys 30 min., esant kambario temperatūrai, maišomas, kol visiškai pavirsta, atitinkamai pagal PSCh (EtOAc-heksanas, 1:4) žymiai po-liškesniu cukrumi. Mišinys išpilamas i, natrio bikar-bonato (Na2HC03) perteklių, ekstrahuojamas CHC13, ekstraktai džiovinami virš MgS04 ir išgarinami. Likutis išvalomas kolonėlės chromatogfafij a ant Si02 eliuuojant tirpikliu, skirtu PSCh, ir gaunamas 1'-acetoksi-di-O-benziltiocukraus darinys (1,84 g, 54%), kuris naudojamas tolimesniame etape. Tai, kas gauta (0,33 g, 0.89 mmoliai) sausame CH2C12 (3ml) sumaišoma 0°C tem-peratūroje su SnCl4 (0.33 g, 0.89 mmoliai) sausame CH2C12 (3 ml) ir E-5-(2-bromvinil)-2,4-dimetoksipiri-midinu (0.218 g, 0.89 mmoliai) sausame CH2C12) (3 ml) . Maišomas mišinys paliekamas įšilti iki kambario tem-peratūros , po to maišoma dar 4 valandas. Po to mišinys išpilamas i, vandeni,, plaunamas prisotintu NaHC03 ir džiovinamas virš MgS04. Išgarinus likutis chroma-tografuoj amas Si02 (toluenas-acetonas,9 :1 tūr./tūr.) ir gaunamas apsaugoto tionukleozido, kristalinto iš MeOH , švarus P-anomeras (pvz. 40 mg).
[0258] BMR DMSO-d6, 5: 8.31 (s,lH,H-6); 7.39-7.28 (s, 10H, 2Ph) ; 7.0 (d,1H,vinilo H,J=14Hz); 6.855 (d,1H,vinilo, H, J=14Hz);6.27 (t,lH,l'-H); 4,56 (s,4H,2PhCH2) ; 4.33 (m, 1H, 3'-H); 3.90 (s,3H,OCH3); 3.77 (m, 2H, 5 '-H2) ; 3.65 (m, 1H,4'-H), 2.50 (m,1H,21-H2) .
[0259] Gautą apsaugoto tionukleozido metoksidarini, išlaikydami dvi dienas kambario temperatūroje NH3/MeOH tirpale paverčia į citidini, analogą. Gautas produktas išski-riamas kolonine chromatografija Si02, eliuuojant CHC13-MeOH (9:1 tūr./tūr.) ir po to sekančiu pagal anksčiau pateiktą būdą apsauginių grupių pašalinimu, tiesiogiai paveikus BC13. Produktas pakankamai švarus ir yra ano-merų mišinio HC1 druska, kur anomerų (3/a apytikslis santykis 95:5 po AESCh Zorbax C8 kolonėlėje eliuuojant 15 minučių 0-95 % MeCN vandenyje ir po to 95 % MeCN: išlaikymo laikas p-anomero 16.3 min., a-anomero 18.11 min. ^-BMR (200 MHz, DMS0-d6, 5: 8.55 (s,lH,6-H); 7.25 (d,1H, Jtrans 13.8Hz, vinilo H); 6.95 (d,1H. Jtrans 13.8, vinilo,H); 6.18 (t, 1H, 1 '-HP) . Mas spektras (EI): nestebimas joks molekulinis jonas, išskyrus charakteringus jonus bazei 215,217 dėl C6H6BrN30, 136 dėl C6H6N30 (iš tiocukraus) , 85 dėl C5H3S/.
[0260] Pagal anksčiau nurodytą metodiką, preparatyvine AESCh gauta laisvos bazės (3-anomero švarus pavyzdys. lH-BMR (200MHz, DMSO-d6, 8: 8.18 (s, 1H, 6-H) ; 7.1-7.4 (pl s, 2H,NH2); 7.05 (d,lH,J trans 14.5 Hz, vinilo H); 6.85 (d,1H, Jtrans 14.5 Hz, vinilo H); 6.30 (t,lH,l'-H); 5.1-5.25 (m,2H,2xOH); 4.3-4.45 (m,lH,3'-H); 3.55-3.7 (m, 2H,5'-H2) ; 3.0-3.4 (4'-H perdengta DOH); 2.1-2,35 (m, 2H, 2 ' -H2) .
[0261] Vandenilio atmosferoje 2'-dezoksi-5-propinil-4'-tiouridinas, p-anomeras (26 mg) ir 5% Pd-C (40 mg) esantis MeOH (80 ml) 45 min. maišomas. AESCh - analizė parodė visišką virtimą i, lipofiliškesnį jungini,. Mišinį filtruojant ir išgarinant, gaunami 25 mg dervos. Ištry-nus eterio-heksano mišiniu gaunamas produktas baltos kietos medžiagos pavidalu. ^-BMR (200 MHz, DMSO-d6) , 5: 11.25 (pl s, 1H, NH) ; 7.8 (s, 1H, 0-6-H) ; 6.27 (t,lH,p-1'H) ; 5.22 (d, lH, p-3'-OH) ; 5.14 (m, 1H,0-5'-OH) ; 4.3-4.45 (m,lH, p-3'-H); 3.55-3.75 (m,2H, p-5•-H) ; 3.2-3.4 ( P~4'-H, perdengta DOH); 2.1-2.35 (m,4H',p-5'-H2+CH2CH2Me) ; 1. 45 (m, 2H, CH2CH2Me) ; 0.88 (t,3H, CH3) .
[0262] Į uracilo (lg, 9 mmoliai) vandenyje (200 ml) tirpalą, 70UC temperatūroje įdedamas Hg(0Ac)2 (2.9 g, 9.1 mmoliai) ir mišinys 1 savaitę maišomas 70l*'C temperatūroje. Atšaldžius iki kambario temperatūros į mišinį įdedama NaCl (1,5 g) ir maišoma 4 valandas. Gauta 5-chlorgyv-sidabriouracilo tanki suspensija filtruojama, nuosėdos plaunamos 0. 1M NaCl tirpalu ir 2 dienas vakuume esant 85°C džiovinamos (2.27 g) . Į neapdorotą kietą produktą
[0263] (1 g, 2.9 mmoliai) MeCN (25 ml) įdedamas Li2PdCl4 (0.76 g) ir alilchloridas (2.9 ml) , po to mišinys 1 savaitę maišomas kambario temperatūroje. Suspensija filtruojama ir filtratas sausai išgarinamas. Nuosėdos ištirpinamos
[0264] MeOH (75 ml) ir paveikiamos dujiniu H2S, juodos HgS nuosėdos nufiltruojamos ir išgarinus filtratą gaunama balta kieta medžiaga. Tikslinis produktas išskiriamas Si02 kolonėlėje "flash" (staigios) chromatografijos būdu eliuuojant 8 % MeOH CH2C12 (tūr./tūr). Išeiga 85 mg (20 %) . Mas spektras duoda m/z 152 dėl C7H8N202 (M+) . 1H-BMR (200 MHz, DMSO-d6) , 8: 10.9(pl s,lH,NH); s,lH,6-H); 5.7-6.0 (m,1H, -CH=); 4.95-5.15 (m,2H=CH2); 4.33 (pl s, 1H,NH); 2.92 (d,2H,CH2).
[0265] Į 5-aliluracilo (80 mg, 0.5 mmoliai) 95 % vand. EtOH (50 mililitruose) tirpalą įdedama (Ph3P)3 RhCl (90 mg, 0.1 mmoliai) ir mišinys 3 dienas virinamas. Tirpiklis išgarinamas ir produktas Si02 kolonėlėje "flash" (staigios) chromatografijos būdu išskiriamas eliuuojant 5 % MeOH, esančiu CH2C12. Išeiga 56 mg (70 %) . ^-BMR (200 MHz, DMSO-d5) ,5:11.01 (pl s, 1H, NH) ; 7.42 (s,lH,6-H); 6.35-6.55 (qq,1H=CH-Me); 5.95-6.1 (dd,1H,-CH=); 1.74 (dd, 3H, CH3) .
[0266] ( c) E- 2'- Dezoksi- 5-( propen- 1- il)- 4'- tiouridinas
[0267] 5-(E-Propen-l-il)uracilą (110 mg, 0.78 mmoliai) pa-verčia i, jo bis-TMS-eteri,, sujungia su apsaugotu tio-cukrumi ir deblokuoja metoksidu taip, kaip tai aprašyta 5-propinilanalogui. Neapdorotas produktas chromatografija išvalomas Si02 eliuuojant 5 % MeOH CH2C12. Esant anomerų santykiui a/p 1.2:1, anomerų mišinio išeiga 11.8 mg. ^-BMR (200 MHz, DMSO-d6) , 5:11 .35 (pl s, 1H, NH) ; 8 . 35 (s, 0 .55H, oc-6-H) ; 8.05 (s,0.45H, P~6-H); 6.0-6.6 (m,3H,11-H+-CH=CH-); 5.5-(d,055H,a-31-OH); 5.1-5.3(d+t,0.9H,p-5'-0H+ P-3 ' -0H) ; 5.0 (t,0.55H, a-5'-OH); 4.38 (m, 1H, 31-H); 3.1-3.7 (m,5'-H2+41-H, dalinai perdengta DOH); 2.0-2.6 (m, 2'-H2), dalinai perdengtas tirpikliu); 1.75 (d,3H,CH3).
[0268] E pavyzdys
[0269] E- 5- ( 2- bromvinil) uracilo- 5- brom- 2, 4- dimetoksipirimidino gavimas
[0270] Į maišomą natrio (3,23 g, 140.4 mmoliai) , esančio MeOH (55 ml) tirpalą 0UC temperatūroje per lėtai pridedamas 5-brom-2,4-dichlorpirimidino (16 g, 70.2 mmoliai) /M.Malvey ir kt., I.Het. Chem., 1973, p.79/ sausame MeOH (55 ml) tirpalas. Vonelė su ledu pašalinama ir, esant kambario temperatūrai, reakcijos mišinys 18 va-landų maišomas. Nusėdusi druska nufiltruojama ir filt-ratą išgarinus gaunama alyva , kuri sudedama i, vande-nini, NaOH tirpalą (30 ml, 30 % mas./tūr.), produktas atskiriamas viršutinio sluoksnio pavidalu ir ekstrahuojamas Et20. Organiniai ekstraktai džiovinami virš MgSO,, ir išgarinami. Likučio kristalinimas iš etanolio duoda produktą (išeiga 14.3 g, 93 %) oespalvių plokš-telių pavidalu su lyd.t. 62-63°C. Mas spektras el (m/z): 219 (M+, 11%). Analizė, rasta: C,33.2 0; H, 3,2 6; Br, 36.90; N, 12.7 %; apskaičiuota dėl C6H7BrN202 : C,32.90; H,3.33; Br,36.50; N,12.80 %.
[0271] Į maišomą 5-brom-2,4-dimetoksipirimidino (16 g, 72.9 mmoliai) sausame Et20 (240 ml) suspensiją sauso N2 atmosferoje, -70JC temperatūroje 5 min. bėgyje pridedamas 1,6 M n-Buli tirpalas heksane (48 ml, 73.6 mmoliai) . Po to pridedamas sausas etilformiatas (28 g, 377 mmoliai) , oranžinis tirpalas maišomas 1 valandą - 10' JC tem-peratūroje ir po to paliekama lėtai šilti iki kambario temperatūros. Įpilama vandens (400 mi), vandeninis sluoksnis atskiriamas ir ekstrahuojamas EOt2 (3x200 ml) . Eterinis sluoksnis sujungiamas su ekstraktais,
[0272] džiovinamas virš MgS04, filtruojamas ir išgarinamas. Likutis išvalomas Si02 kolonėlės chromatografija eliuuojant EtOAc - heksano (3:7 tūr./tūr.) mišiniu. Frakcijas, turinčias produktą, sujungia ir jas išgarinus gaunamos 6,89 (56 %) baltos smulkios adatos. Mas spektras (m/z): 169 (M+H)+. Analizė, rasta: C,50.1; H,4.5; N,16.9 %; apskaičiuota dėl C7H8N205:C, 50.00; H,4.79; N,16.6 %.
[0273] Į 5-formyl-2,4-dimetoksipirimidino (10.52 g, 6.26 mmol) sausame piridine (60 ml) tirpalą įdedama malono rūgštis (13.03 g, 126.2 mmoliai) ir šviežiai distiliuotas piperidinas (2 ml). Mišinys 10 valandų šildomas vandens vonioje po to, esant sumažintam slėgiui, tirpiklis distiliavimu pašalinamas, liekanti alyva nevienąkart iš vandens (3x25 ml) išgarinama ir to pasekoje gautas kietas produktas perkristalinamas iš pradžių iš vandens ir po to iš sauso metanolio, gaunant 645 g antraštinio produkto baltų adatų pavidalu. Iš filtrato išskiriama antra produkto partija (1.08), bendra išeiga 7.53 g (57 %).
[0274] Mas spektras (EI,m/z): 210 (M+). Analizė, rasta: C, 52.1; H, 4.8; N, 13.1 %; apskaičiuota dėl C9H10N?O4: C,52.43; H,4.79; N,13.33 %.
[0275] Į E-5-(2-karboksivinil)-2,4-dimetoksipirimidino (0.3 g, I.43 mmoliai) sausame DMFA (5 ml) tirpalą įdedama K2CO;, (0.45 g 5.25 mmoliai) ir po 15 min. maišymo, esant kambario temperatūrai, 10 min. laikotarpyje įlašinamas N-bromosukcinimidas (0.258 g 1.45 mmoliai) sausame DMFA (4 ml) . Suspensija tuoj pat filtruojama, kietas produktas išplaunamas DMFA ir filtratas išgarinamas gili-ame vakuume. Kietas likutis išvalomas kolonėlės chromą-
[0276] tografija eliuuojant mišiniu EtOAc - heksanas (7:3 tūr./tūr.) . Frakcijos, i, kurių sudėti, įeina produktas, sujungiamos ir, jas išgarinus, gaunami 0,561 g (45 %) balti smulkūs kristalai. FAB mas-spektras (m/z): 245 ir 247 (M+H)+. Analizė, rasta: C,39.9; H,3.6; N,11.5 %; apskaičiuota dėl C0H9BrN2O2: C,40.20; H,3.70; N,11.43 %.
[0277] Į E-5-(2-bromvinil)2,4-dimetoksipirimidino (2.45 g, 10 mmoliai), esančio AcOH (10 ml) įdedama NaI (3.3 g, 2.2 ekv., 22 mmoliai) ir tirpalas 3 valandas virinamas. Karštas mišinys filtruojamas, skiedžiamas vandeniu (15 ml) ir atšaldžius nusodintas produktas nufiltruojamas, acetonu (50 ml) ir eteriu (20 ml) perplaunamas, ir išdžiovinus gaunami 1,4 g (65 %) blyškiai geltonų miltelių su lyd.t. >320°C. 1H-BMR (60 MHz, DMSO-d6) 5: 7.60 (s, 1H, H-6); 7.30 (d, 1H,J=13Hz, vinilo H); 6.80 (d,1H,J=13Hz, vinilo H).
[0278] 1(PHV1) ir 2 (PHV2) tipų paprastojo herpeso viruso mėgi-nimai atliekami jo ląstelių V monosluoksniuose daugiaakytose planšetėse. Naudojami virusiniai štampai SC16 ir 186, kurie atitinkamai skirti PHV1 ir PHV2. Bandymuose junginių aktyvumas nustatomas pagal plokš-telių skaičiaus sumažėjimą, kuriose ląstelinis monosluoksnis infekuojamas atitinkamu PVH ir po to padengiamas maitinančia agaroze gelio formoje, tam, kad būtų garantuotas viruso išplitimo iš terpės nebuvimas. Į dengiamąja, maitinančios agarozės sluoskni, įvedamas žinomo moliaringumo (tam tikrame koncentracijų intervale) junginys. Kiekvienai koncentracijai plokštelių skaičius išreiškiamas procentais nuo kontrolės ir tuo
[0279] remiantis gaunama kreivė, nusakanti atsako priklau-somybę nuo dozės. Remiantis gauta kreive išaiškinama 50 %-inė inhibuojanti koncentracija (IC50), kuri junginiui, atitinkančiam (I) formulę, kurioje X reiškia 2-bromvinilą, yra lygi 0.66 (im.
[0280] Žmogaus citomegalovirusas (2CMV) išmėginamas MRC5 ląs-telių monosluoksniuose (žmogaus embriono plautis) daugiaakytose planšetėse. Naudojamas CMV standartinis AD 169 štampas. Junginių aktyvumas bandymuose nustatomas pagal plokštelių skaičiaus sumažėjimą, kuriose ląs-telinis monosluoksnis infekuojamas 2CMV suspensija ir po to padengiamas maitinančia agaroze gelio formoje tam, kad garantuoti viruso išplitimo iš terpės ne-buvimą. Į dengiantįjį agarozės sluoksnį įvedama žinomo moliaringumo junginys, tam tikrame koncentracijų intervale. Kiekvienai koncentracijai plokštelių skaičius išreiškiamas procentais nuo kontrolės ir remiantis tuo gaunama kreivė, nusakanti atsako priklausomybę nuo dozės.
[0281] Juostinio herpeso viruso (JHV) klinikiniai izoliatai
[0282] išmėginami MRS-5 ląstelių monosluoksniuose. MRS-5 ląs-telių šaltinis yra žmogaus embriono plaučių audinys. Naudojami bandymai, skirti plokštelių skaičiaus suma-žinimui, kuriuose ląstelinių monosluoksnių infekavimui daugiaakytose planšetėse naudojama virusinio šaltinio suspensija. Į akutes įdedamos žinomo moliaringumo ban-domasis junginys, tam tikrame koncentracijų intervale. Kiekvienai koncentracijai plokštelių skaičius išreiš-kiamas procentais nuo kontrolės ir remiantis tuo gaunama kreivė, nusakanti atsako priklausomybę nuo
[0283] dozės. Remiantis gautomis kreivėmis nustatoma 50 %-inė inhibuojanti koncentracija kiekvienam vaistui.
[0284] 1 lentelėje pateikiami išradimo junginių aktyvumai.
[0285] Toliau pateikti pavyzdžiai iliustruoja šio išradimo vaistų formas, kuriuose aktyvusis komponentas yra junginys, atitinkantis (I) formulę.
[0286] Prieš tai nurodytus komponentus drėgnai sugranuliavus, o po to supresavus, gaunamos tabletės.
[0287] Formos C pavyzdys Tabletės formos
[0288] Komponentus drėgnai sugranuliavus su povidono tirpalu, po to pridėjus magnio stearatą ir supresavus, gaunami tolimesni a ir b mišiniai. (B.P. - Didžiosios Brita-nijos Farmakopėja)
[0289] Sekančios d ir e formos gautos tiesiogiai presuojant komponentų mišini,. Laktozė, naudojama e formoje priklauso tiesioginio presavimo tipui.
[0290] Vaisto išsiskyrimas užtrunka apytiksliai 6-8 valandas, užsibaigia po 12 valandų.
[0291] Sumaišius anksčiau pateikto C pavyzdžio d komponentus ir mišiniu užpildžius iš dviejų dalių sudarytas tvirtas želatinines kapsules, gaunama kapsulės forma. B forma (žiūr. toliau) gaunama analogišku būdu.
[0292] Kapsulės gaunamos, išlydant Makrogolą 4000 BP, disper-guojant aktyvųjį komponentą lydinyje ir lydiniu užpil-dant iš dviejų dalių sudarytas kietas želatinines kapsules .
[0293] Kapsulės gaunamos disperguo j ant aktyvų j i, komponentą lecitine ir arachisiniame aliejuje, dispersija užpil-dant minkštas elastines želatinos kapsules.
[0294] Kapsulės e forma ( kapsulės su reguliuojamu išsiskyrimu)
[0295] Sekantis kapsulinis mišinys su reguliuojamu išsiskyrimu gaunamas a, b ir c komponentus ekstruduoj ant ir panaudojant ekstruderi, su vėlesne ekstrudato sferoniza-cija ir džiovinimu. Po to išdžiovintą dalelių paviršių padengia aktyvios medžiagos išsiskyrimą kontroliuo-jančia membrana (d) ir patalpina i, sudarytas iš dviejų dalių kietas želatino kapsules.
[0296] Sterilus apirogeninis fosfatinis buferis (pH 7) iki 10 ml
[0297] Aktyvusis komponentas ištirpinamas pagrindinėje fos-fatinio buferio dalyje (35-40°C) , po to užpildoma iki tūrio ir filtruojamas per sterilų mikroporini, filtrą i, 10 ml geltono stiklo indelius (1 tipas) ir uždaromas steriliais kamščiais ir gaubtuvėliais.
[0298] Formos F pavyzdys. Injekcijos, skirtos i, raumenis
[0299]
[0300] Aktyvusis komponentas ištirpinamas glikofurole, po to įdedamas ir ištirpinamas benzilo alkoholis ir papildoma vandeniu iki 3 ml. Mišinys filtruojamas per sterilų mikroporini, filtrą ir juo užpildomi sterilūs 3 ml inde-liai (1 tipas).
[0301] Išvalyto vandens dalyje ištirpinamas natrio benzoatas ir papildoma sorbito tirpalu. Papildoma aktyviuoju kom-ponentu ir jis disperguoj amas. Glicerine disperguoja sutirštintojas (disperguojanti celiuliozė). Abi disper-sijas sumaišo, ir iki reikiamo tūrio papildo išvalytu vandeniu. Didesnis tirštumas pasiekiamas, jeigu būtina, stipriais suartinimo veiksmais, skirtais suspensijai.
[0302] * Aktyvųjį komponentą naudoja miltelių pavidalu, kuriuose mažų mažiausiai 90 % ji, sudarančių dalelių skersmuo yra 63 |.im arba mažiau.
[0303] Penktadali, Witepsol H15 lydo garais šildomame inde, esant maksimaliai temperatūrai, 45'JC. Aktyvusis komponentas persijojamas per sietą su 200 Į.im skylutėmis ir, maišant Silversono maišikliu su pjaunančiaja galvute, įdedamas i, išlydytą pagrindą iki vienalytės dispersijos gavimo. Esant mišinio temperatūrai 45°C, i, suspensiją dedama likusi Witepsolo H15 dalis ir maišoma iki homogeninio mišinio gavimo. Visa suspensija perlei-džiama per nerūdijančio plieno sietą su 250 Į.im skylu-tėmis, ir esant pastoviam maišymui, atšaldoma iki 40'JC. Esant mišinio temperatūrai 38-40°C (2.02 g), užpildomos atitinkamos plastikinės formos. Gautos žvakės paliekamos atvėsti iki kambario temperatūros.
[0304] Prieš tai paminėti komponentai sumaišomi vienas su kitu ir, tiesiogiai presuojant gautą mišini,, gaunamos pesa-rij os.
1. Pirimidin-4'-tionukleozidas, atitinkantis (I) for-mulę:
2. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad X yra C2 -C-< -alkilas, C3 -C^ -alkenilas, halogenvinilas arba C-< -C^ -alkinilas.
3 . Junginys pagal 1 arba 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad pirimidin-4'-tionukleozidas yra:E-5-(2-bromvini1)-2'-dezoksi-4'-tiouridinas, 2'-dezoksi-5-jod-4'-tiouridinas,2'-dezoksi-5-etil-4'-tiouridinas,5-brom-2'-dezoksi-4'-tiouridinas,21-dezoksi-5-propinil-4'-tiouridinas, 5-chlor-2'-dezoksi-4'-tiouridinas,2'-dezoksi-5-trifluormetil-4'-tiouridiną, 2'-dezoksi-5-etinil-41-tiouridiną,E-5-(2-bromvinil)-2'-dezoksi-41-tiocitidinas,2'-dezoksi-5-propil-4'-tiouridinas arba E-21-dezoksi-5-(propen-l-il)-4'-tiouridinas.
E-5-(2-bromvini1)-2'-dezoksi-4'-tiouridinas, 2'-dezoksi-5-jod-4'-tiouridinas,2'-dezoksi-5-etil-4'-tiouridinas,5-brom-2'-dezoksi-4'-tiouridinas,21-dezoksi-5-propinil-4'-tiouridinas, 5-chlor-2'-dezoksi-4'-tiouridinas,2'-dezoksi-5-trifluormetil-4'-tiouridiną, 2'-dezoksi-5-etinil-41-tiouridiną,E-5-(2-bromvinil)-2'-dezoksi-41-tiocitidinas,2'-dezoksi-5-propil-4'-tiouridinas arba E-21-dezoksi-5-(propen-l-il)-4'-tiouridinas.4 . Junginys pagal bet kuri, iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad pirimidin-4'-tionukleozidas yra p-anomeras.
5 . E-5 - (2-Bromvini 1) - 2 ' -dezoksi-4 ' - tio-(3-uridinas .
6. 2'-Dezoksi-5-etil-4'-tio-p-uridinas.
7. Pirimidin -nukleozido, atitinkančio (I) formulę, darinys pagal bet kuri, iš 1-6 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra fiziologiškai funkcionalus darinys.
8. Darinys pagal 7 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra šarminio metalo, šarminio žemės metalo, amonio, tetra (C:-C4-alkil)amonio druska, hidrochloridas ar acetatas, arba mono- arba di-karboksi-rūgšties esteris, arba jo šarminio metalo, šarminio žemės metalo, amonio arba tetra (Ci-C/.-al kil) amonio druska.
9. Kompozicija, besiskirianti tuo, kad turi jungini, pagal bet kuri, iš 1-8 punktų mišinyje su farmaciškai priimtinu nešikliu arba atskiedikliu.
10. Junginys pagal bet kurį iš 1-8 punktų arba kompozicija pagal 9 punktą, skirti panaudoti virusinių infekcijų gydymui arba profilaktikai.