LT3284B

FIBRINOGENO RECEPTORIAUS ANTAGONISTAI

FIBRINOGEN RECEPTOR ANTAGONISTS

Referatas

[LT] Nagrinėjami fibrongeno receptoriaus antagonistai, kurių formulė:@@@@@@@kurie naudojami fibrinogeno susirišimo su trombocitais inhibavimui ir trombocitų agregacijos inhibavimui.

[EN]

Aprašymas

[0001] Šis išradimas yra susijęs su fibrinogeno receptoriaus antagonistų, kurių formulė I, atradimu ir panaudojimu fibrinogeno susirišimo su trombocitais inhibavimui ir trombocitų agregacijos inhibavimui, taikant žinduoliams, dažniausiai žmonėms.

[0002] Trombocitų sąveika su koaguliacine ir fibrinolitine sistema palaikant hemostazę gali tapti patogenine ir gali būti tikslinga jos išvengti arba reikalinga gydyti. Fibrinogeno receptoriaus antagonistai, aprašomi I formule, yra naudingi gydant įvairias ligas, susi-jusias su trombocitų agregacija ir fibrino susidarymu.

[0003] Susidomėjimas trombocitų inhibitoriais vėl išaugo ryšium su geresniu trombocitų ir trombozės rolės supra-timu kraujagyslių patogenezės procesuose, įskaitant nestabilią stenokardiją, aštrų miokardo infarktą ir insultą.

[0004] Trombocitai yra panašios i, ląsteles, neturinčias branduolio dalelės, aptinkamos visų žinduolių kraujyje, kurios dalyvauja_' kraujo koaguliacijoje. Fibrinogenas yra glikoproteinas, kuris įeina į kraujo plazmos sudėtį. Fibrinogenas dalyvauja trombocitų agregacijoje ir fibrino susidaryme kraujo krešėjimo metu. Trombocitai nusėda ant kraujagyslių mikropažeidimų, kur veikia daug fiziologinių antagonistų, inicijuojančių trombocitų agregaciją, užsibaigiančią trombocitinio kamščio susiformavimu, kuris apriboja kraujo praradimą. Jeigu trombocitinis kamštis susidaro kraujagyslių viduje, pažeidžiama normali kraujo cirkuliacija.

[0005] Trombocitų membranų receptoriai vaidina svarbiausią vaidmenį trombocitų adhezijos ir agregacijos procesų metu. Yra žinoma, kad fibrinogeno sąveika su trombocitų membranos komplekso Ilb/IIIa receptoriumi yra esminė normaliai trombocitų veiklai.

[0006] Zimmerman ir kt., JAV patente Nr. 4 683 2 91 aprašo peptidus, naudojamus fibrinogeno-trombocitų, trombo-citų-trombocitų ir tarpląstelinės sąveikos tyrime. Aprašomi peptidai buvo naudingi, norint sustabdyti arba išvengti trombo arba krešulio susidarymą kraujyje.

[0007] Piershabache ir kt., JAV patente Nr. 4 589 881 pateikia seką 11.5 kDa polipeptidinio fibronektino fragmento, kuris suteikia fibronektinui aktyvumą.

[0008] Ruoslahti JAV patente Nr. 4 614 517 aprašo tetra-peptidą, kuris pakeičia ląstelių adhezini, aktyvumą įvairiems substratams, ir Fig. 1 pateikia polipeptidus, kurie susintetinti Ruoslahti ir kt., siekiant nustatyti mažiausią peptidą, pasižyminti, poveikiu i, ląstelių adhezini, aktyvumą. Ruoslahti ir kt. JAV patente Nr. 4 578 078 aprašo analogiškus tetrapeptidus.

[0009] Piershabacher ir kt., Proc. Natl. Acad. Sci USA, vol. 81, pp. 5985-5988, October, 1984, aprašo fibronektino ląstelių atpažinimo centro variantus, kurie išlaiko prisijungimą skatinanti, aktyvumą. Piershabacher ir kt. tolesniuose tyrimuose nustatė ląstelių adheziją skatinanti, aktyvumą eilėje struktūrų, artimų Arg-Gly-Asp-Ser peptidui ir parodė, kad arginino, glicino ir aspartato amino rūgščių liekanos negali būti pakeistos netgi i, panašias amino rūgštis, tačiau serinas gali būti pakeistas i, keletą amino rūgščių neprarandant aktyvumo.

[0010] Ruoslahti ir kt., Science, Vol. 238, pp., 491-497, October 23, 1987, aptaria ląstelių adhezijos baltymus. Jie atskirai pabrėžia, kad "fibronektino prisijungimo prie ląstelių domeno amino rūgščių sekos nustatymas ir jo dublikacija su sintetiniais peptidais leidžia išskirti seką Arg-Gly-Asp (GRD) kaip esminę struktūrą, kurią ląstelės atpažįsta fibronektine".

[0011] Cheresh, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 84, pp. 6471-6475, September 1987, aprašo Arg-Gly-Asp specifini, adhezijos receptorių, kuris dalyvauja prisijungiant fibrinogenui ir fon Willebrandt faktoriui.

[0012] Adams ir kt. JAV patente Nr. 4 857 508 aprašo tetrapeptidus, kurie inhibuoja trombocitų agregaciją ir trombų susidarymą.

[0013] Todėl šio patento tikslas yra pasiūlyti fibrinogeno receptoriaus antagonistus, kurie būtų naudingi inhibuojant fibrinogeno susirišimą su trombocitais ir inhibuojant trombocitų agregaciją. Kitu aspektu šis patentas yra susijęs su naujų junginių - fibrinogeno receptoriaus antagonistų pateikimu. Kiti šio patento tikslai apima fibrinogeno susirišimo su trombocitais ir trombocitų agregacijos metodų pateikimą, naudojant naujas medžiagas kaip fibrinogeno receptoriaus antagonistus. Šie ir kiti tikslai yra pasiekiami būdais, aprašytais žemiau.

[0014] Šiame išradime pateikiami junginiai - fibrinogeno receptoriaus antagonistai, kurių formulė:

[0015]

[0016] naudojami fibrinogeno susirišimo su trombocitais ir trombocitų agregacijos inhibavimui. Aukščiau paminėtos medžiagos gali būti naudojamos, siekiant paveikti fibrinogeno receptorių, panaudojant metodą, kuris apima terapiškai efektyvaus, bet netoksinio tokio junginio kiekio įvedimą žinduoliams, dažniausiai, žmonėms.

[0017] Vaistinė kompozicija, susidedanti iš tinkamo farmacinio užpildo ir disperguoto jame efektyvaus, bet netoksiško tokios medžiagos kiekio, yra kitas šio išradimo požymis.

[0018] Junginiai - fibrinogeno receptoriaus antagonistai, aprašomi I formule yra naudojami metode, paremtame fibrinogeno ir trombocitų susirišimo ir trombocitų agregacijos inhibicija. Fibrinogeno receptoriaus antagonistai, pateikti šiame išradime yra iliustruojami junginiais, kurių formulė:

[0019]

[0020] kuriose R^1Q yra C₁.₈ alkilas, arilas, aril alkilas;

[0021] u yra -CH-, -C-, arba -N-;

[0022] v yra -CH-, -C-, arba -N-;

[0023] vandenilis, arilas, kur arilas yra apibrėžiamas kaip mono- arba policiklinė aromatinė sistema, susidedanti iš 5 arba 6 narių žiedo, turinčio 0, 1, 2, 3 arba 4 heteroatomus, pasirinktus iš azoto, deguonies ir sieros; ir fenilo, pakeisto arba nepakeisto viena arba daugiau grupių, pasirinktų iš vandenilio, fluoro, chloro, bromo, jodo, ciano, trifluormetilo, C_L.₃ alkoksilo, alkilkarboniloksilo, alkoksikarboksilo, C₁.₅ alkilo, amino alkilo, hidroksikarbonil C₀_₅ alkilo, arba hidroksikarbonil alkoksilo, C₀_€ alkilo-, pakeistu arba nepakeistų viena arba daugiau grupių, pasirinktų iš fluoro, chloro, bromo, jodo, hidroksilo, alkilkarbonil (C₀_₈ alkil) amino, aril C_į.₅ alkilkarbonil (C0_8alkil) amino, ariloksilo, C₁.₁₀al-

[0024] koksilo, C^salkoksikarbonilo, C₀_₅ alkilaminokarbonilo, C^alkil-karboniloksilo, C₃_₈cikloalkilo, aril, okso, amino, C_^galkilo, C^alkilamino, aminoC₁.₃alkilo, arilC₀-₅ alkilaminokarbinilo, fenile^ alkilamino, aminokarbonilC₀-₄alkilo, C1.8alkil-sulfonil (C0.8alkil) amino, arilC0_10alkilsulfonil- (C0_8alkil) alkilsulfonilo, Co_0alkilosulf onilo, hidroksikarbonil-C₀_₅alkilo, C_1.8al-kiloksikarbonil (C0.8alkil) amino, arilC₀.₁₀alkiloksi-karbonil (C0.8alkil) amino, C_0-8alkilamino-karbonil (C0_8alkil) amino, arilC₀.₈alkilaminokarbonil (C₀.₈alkil) amino, C₀.₈alkilaminokarboniloksilo, arilC₀.₁₀alkil-aminokarboniloksilo, C₀_₈alkilaminosulfonil (C₀.₈alkil) amino, arilC₀_₈alkilaminosulfonil (C0.8alkil) amino, C₀_₈alkilaminosulfonilo, arba arilC0_8alkilaminosulf onilo, su sąlyga, kad prijungti prie anglies atomo R arba R¹ turi tik vieną hetero atomą;

[0025] R 2 vandenili• s, C1.12alki «las, pakeistas arba nepakeistas viena arba keliomis C_j.g alkilo grupėmis,

[0026]

[0027] k yra 1-4;

[0028] m yra 1-4;

[0029] p yra 1 - 6;

[0030] q yra 0-2;

[0031] arba famacijoje priimtinos jų druskos, arba jų optiniai izomerai.

[0032] Tinkamiausi pateikto išradimo junginiai turi šias formules:

[0033] X is -NR7R3.

[0034]

[0035] Z yra C0₂R²

[0036] Y yra

[0037]

[0038] kuriose R⁹ = šakotas arba nešakotas C^alkilas, arba fenilas ir kuriose R 9, kada yra daugiau negu vienas, gali būti tas pats arba skirtingas;

[0039] R⁷, R³ ir R⁴ yra nepriklausomai vandenilis, arba C^alkilas, pakeistas arba nepakeistas viena arba daugiau C_x_₆ alkilo grupėmis;

[0040] k yra 1-4;

[0041] m yra 1- 4;

[0042] q yra O arba 2;

[0043] p yra 1- 3;

[0044] arba farmacijoje priimtinos jų druskos, arba jų optiniai izomerai.

[0045] Tinkamiausi pateikto išradimo junginiai turi šias formules:

[0046]

[0047] Z yra C0₂R²

[0048]

[0049] kur n yra 1, 2 arba 3;

[0050] R ir R¹ yra nepriklausomai parinkti iš fenilo, tiofeno, imidazolo, naftilo, indolo, indazolo, tionafteno iš pakeistų arba nepakeistų hidroksilu, halogenu, hidroksikarbonil C₀_₅ alkilu, C₁.₃alkilu_/ pakeistu arba nepakeistu viena arba keliomis grupėmis, parinktomis iš arilo, ariloksilo, C₁.₁₀alkoksilo, C₀_₅alkilaminokarbonilo, arilC₀_₅alkilaminokarbonil, vandeniliu, C₀-₆alkilu, pakeistu arba nepakeistu viena arba keliomis grupėmis, parinktomis iš halogeno, hidroksilo, C1.5alkilsulf onilamino, arilC₁.₅alkilkarbonilamino, ariloksilo, C₁_₁₀ alkoksilo, C_^alkoksikarbonilo, C₀_₅alkilaminokarbonilo, C_^alkilkarboniloksilo, C₃_₈ciklo-alkilo, arilo, okso, amino, C^galkil, C_1.3alkilamino, aminoC₁_₃alkil, arilC₀_₅ alkilaminokarbonil, fenil C₁.₃alkilamino, aminokarbonilC₀.₄alkilo, arba hidroksikarbonilC₀_₅alkilo, su sąlyga, kad anglies atomas, prie kurio prijungtas R arba R¹, turi tik vieną hetero atomą,

[0051] R 2 yra vandenilis;

[0052] R⁷, R3 ir R⁴ yra vandenilis;

[0053] m yra 1-4;

[0054] p yra 2-4;

[0055] arba farmacijoje priimtinos jų druskos, arba jų optiniai izomerai.

[0056] Bn, benzilas; MMM, N-metilmorfolinas; HOBt, 1-hidroksibenzotriazolas; EDC, 1-(3-dimetilaminopropil) - 3-etilkarbodiimidohidrochloridas; DMF, dimetilformami-das; BOC, t-butiloksikarbonilas; pTSA, p-toluolsulfo-ninė rūgštis; DMS, dimetilsulfidas; TFA, trifluoacto rūgštis; THF, tetrahidrofuranas; TBDMS, t-butildime-tilsililas.

[0057] Junginio, pažymėto I formule, farmacijoje priimtinos druskos apima junginio, pažymėto I formule, įprastas nenuodingas druskas arba ketvirtines amonio druskas, sudarytas, pavyzdžiui, iš nenuodingų neorganinių ir organinių rūgščių. Pavyzdžiui, tokios įprastos nenuodingos druskos apima tuos junginius, kurie gauti iš neorganinių rūgščių, tokių, kaip druskos, bromo, sieros, sulfamino, fosforo, azoto ir panašių; ir druskas gautas iš organinių rūgščių, tokių, kaip acto, propano, gintaro, glikolio, stearino, pieno, obuolių, vyno, citrinos, askorbino, pamoinė, maleino, hidro-maleino, fenilacto, glutamino, benzoinė, salicinė, sulfanilinė, 2-acetoksibenzoinė, fumaro, toluensul-foninė, metansulfoninė, etano disulfoninė, oksalo, izetioninė ir panašių.

[0058] Farmacijoje taikomos druskos, aprašytos šiame išradime, gali būti susintetintos iš junginio, pažymėto I formule, turinčio bazinę arba rūgštinę liekaną, žinomais cheminiais metodais. Pagrindinai, druskos buvo gautos reaguojant laisvoms bazėms arba rūgštims su stechiometriniais kiekiais arba pertekliumi neorganinės arba organinės rūgšties arba bazės, kurios druską norima gauti, tinkamame tirpiklyje arba įvairių tirpiklių mišinyje.

[0059] Farmacijoje naudojamos I formule pažymėtų rūgščių druskos lengvai gaunamos įprastu būdu, veikiant I formule, pažymėtas rūgštis atitinkamu kiekiu bazės, tokios, kaip šarminių arba žemės šarminių metalų hidroksidai, pvz., natrio, kalio, ličio, kalcio arba magnio, arba organinės bazės, tokios kaip aminas, pvz., dibenziletilendiaminas, trietilaminas, piperidinas, pirolidinas, benzilaminas ir panašiomis, arba ketvir-tiniu amonio hidroksidu, tokiu kaip tetrametilamonio hidroksidu ir pan.

[0060] Junginiai, aprašomi I formule, yra naudojami fibrinogeno susirišimo su tromibocitais inhibavimui, trombocitų agregacijos inhibavimu, besiformuojančių trombų arba embolių gydymui ir kaip preventyvinė priemonė prieš trombų arba embolių susidarymą bei kaip ląstelių susiliejimo proceso, tokio kaip spermatozoido ir kiaušaląstės susiliejimas, mediatoriai, sukeliantys žinduolių apvaisinimo inhibiciją. Šie junginiai yra naudingi kaip farmaciniai agentai žinduoliams, ypatin-gai žmonėms. Junginiai, aprašyti šiame išradime, gali būti taikomi pacientams, kuriems yra pageidautina apsaugoti nuo trombozės, inhibuojant fibrinogeno susirišimą su trombocitų membranos glikoproteinų komplekso Ilb/IIIa receptoriumi. Junginiai, aprašyti šiame išradime taip pat gali būti naudojami siekiant išvengti arba moduliuoti miokardo infarkto, nestabilios stenokardijos ir trombolitinio insulto vystymąsi aštrioje arba chroniškoje formoje. Be to, jie gali būti naudingi periferinių arterijų chirurgijoje (arterijų transplantacija, miego arterijos endarterektomija) ir širdies kraujagyslių chirurgijoje, kada išorinis poveikis arterijoms ir organams ir/arba trombocitų sąveika su dirbtiniais paviršiais sukelia trombocitų agregaciją ir suardymą. Agreguoti trombocitai gali sudaryti trombus arba tromboemboles. Junginiai, aprašyti šiame išradime, gali būti taikomi chirurgi-niams pacientams, siekiant išvengti trombų arba tromboembolių susidarymo.

[0061] Širdies kraujagyslių chirurgijoje, siekiant prisotinti kraują deguonimi, paprastai naudojama ekstrakorporalinė kraujo apytaka. Trombocitai limpa prie ekstra-

[0062] korporalinio šunto sienelių. Adhezija priklauso nuo sąveikos tarp GPIIb/IIIa, esančio ant trombocito membranos ir fibrinogeno, absorbuoto ant šunto paviršiaus. (Gluszko et al., Amer.J. Physiol., 1987, 252:H, pp 615-621). Trombocitai, atsipalaidavę nuo dirbtinių paviršių pasižymi blogesnėmis hemostatinėmis funkcijomis. Junginiai, aprašyti šiame išradime gali būti taikomi siekiant išvengti adhezijos.

[0063] Kitos šių junginių taikymo sritys apima apsaugojimą nuo trombocitų trombozės, etromboembolijos, reokliuzijos ir restenozės trombolitinės terapijos metu arba po jos, ir apsaugojimą nuo trombocitų trombozės, tromboembolijos, reokliuzijos ir restenozės po koronarinių ir kitų arterijų angioplastijos bei po koronarinių arterijų aplinkinio šuntavimo procedūrų.

[0064] Junginiai, aprašomi I formule, gali būti taikomi žinduoliams kaip vaistinė kompozicija, kuri yra netoksinė ir turi terapiškai efektyvų veikliosios medžiagos kieki,, sutinkamai su standartine farmacine praktika, dažniausiai kartu su farmaciškai tinkamais nešikliais arba atskiedikliais, kartais su žinomais adjuvantais, tokiais, kaip alūnas. Junginiai gali būti vartojami oraliniu arba parenteraliniu būdu, įskaitant įvedimą d, veną, i, raumenis, i, kūno ertmes, i, odą, po oda ir vietini, taikymą.

[0065] Oralinio fibrinogeno antagonistų naudojimo atveju, sutinkamai su šiuo išradimu, pasirinkti junginiai gali būti naudojami, pavyzdžiui, tablečių arba kapsulių formoje, arba vandeninio tirpalo arba suspenzijos, formoje. Oralinio vartojimo tablečių atveju, paprastai pridedami įprastiniai užpildai, įskaitant laktozę ir kukurūzų krakmolą bei sutepantys agentai, tokie kaip magnio stearatas. Oralinio vartojimo kapsulių forma atveju, naudingi atskiedikliai apima laktozę ir sausą kukurūzų krakmolą. Kada oraliniam naudojimui yra reika-lingos vandeninės suspenzijos, aktyvus ingradientas yra maišomas su emulguojančiais ir suspenduojančiais agentais. Jeigu norima, pridedama saldumą, ir/arba aromatą suteikiančių medžiagų.

[0066] Tuo vartojimo atveju, kada preparatas įvedamas i, raumenis, kūno ertmes, i, veną ir po oda, paprastai yra paruošiami sterilios aktyvaus ingradiento buferiniai tirpalai, kurie turi turėti atitinkamą pH reikšmę. Intraveninio vartojimo atveju turi būti kontroliuojama bendra ištirpusių medžiagų koncentracija, siekiant gauti izotonini, preparato tirpalą.

[0067] Šis išradimas taip pat apima vaistines kompozicijas, susidedančias iš terapiškai efektyvaus, bet netoksiško veikliojo junginio I formule kiekio kartu su farmaciškai tinkamu užpildu arba atskiedikliu (arba be jų) , naudojamas susirgimų, susijusių su trombocitų agregacija, fibrino susidarymu, trombų ir embolių susidarymu, gydymui ir išvengimui.

[0068] Kompozicijos, aprašytos šiame išradime apima fibrinogeno receptoriaus antagonisto junginius, aprašytus šiame išradime, kartu su farmaciškai tinkamais užpildais, pvz., druskos tirpalu prie pH 7.4, taikomus siekiant gauti trombocitų agregacijos inhibiciją. Šios kompozicijos taip pat gali būti naudojamos kartu su antikoaguliantais, tokiais, kaip heparinas arba varfarinas (warfarin) . Šios kompozicijos taip pat gali būti naudojamos kartu su trombolitiniais agentais, tokiais kaip plazminogeno aktyvatoriai arba streptokinazė, siekiant išvengti trombocitų agregacijos aštresnėje formoje. Kompozicijos taip pat gali būti naudojamos kartu su antitromboziniais agentais, tokiais kaip aspirinas. Kompozicijos yra tirpios vandeniniuose tirpaluose, todėl gali būti efektyviai taikomos tirpalų forma.

[0069] Naudojant junginius, aprašomus I formule, kaip fibrinogeno antagonistus, žmonių gydymui, dienos norma paprastai yra nustatoma gydančiojo gydytojo, atsižvelgiant i, amžių, svori, ir individualaus paciento reakciją bei i, paciento ligos požymių aštrumą.

[0070] Viename iš taikymo pavyzdžių, atitinkamas junginio kiekis yra įvedamas oralinių būdu infarktiniam pacientui prieš angioplastiją arba po jos. Įvedimas atliekamas prieš angioplastiją arba po jos ir atitinka kiekį, kuris yra pakankamas, kad būtų galima išvengti trombocitų agregacijos, pvz., toki, kieki,, kuris leidžia pasiekti pastovią koncentraciją plazmoje, apytikriai 0.01-100 |iM, dažniausiai, apytikriai, 0.01-10 (iM.

[0071] Šis išradimas taip pat apima vaistinę kompoziciją, i, kurią įeina junginiai, aprašyti šiame išradime, kartu su audinių plazminogeno faktoriaus aktyvatoriumi arba streptokinaze. Šis išradimas taip pat apima metodą trombų lizavimo pagreitinimui ir reokliuzijos išvengimui, i, kuri, įeina efektyvaus kiekio kompozicijų, aprašytų šiame išradime, paskyrimas pacientui.

[0072] Šis išradimas pateikia metodą fibrinogeno susirišimo su kraujo trombocitais inhibavimui, trombocitų agregacijos inhibavimui, trombų arba embolių susidarymo gydymui, ir trombų arba embolių susidarymo išvengimui, tinkamą žinduoliams, ir apimanti, terapiškai efektyvaus, bet netoksiško junginių, aprašytų šiame išradime, kiekio, kartu su farmaciškai tinkamais užpildais arba skiedikliais (arba be jų), taikymą.

[0073] Šis išradimas, be to, taip pat pateikia metodą fibrinogeno susirišimo su kraujo trombocitais

[0074] inhibavimui, trombocitų agregacijos inhibavimui, trombų arba embolių susidarymo gydymui, ir trombų arba embolių susidarymo išvengimui, tinkamą žinduoliams, apimanti, terapiškai efektyvaus, bet netoksiško junginių, aprašytų šiame išradime, kiekio taikymą, kartu su trombolitiniais agentais, tokiais kaip audinių plazminogeno aktyvatorius arba streptokinazė, antikoaguliantais, tokiais kaip heparinas arba varfarinas ( Warfarin), arba antitromboziniais agentais, tokiais kaip aspirinas, kartu su farmaciškai tinkamais nešikliais arba skiedikliais ( arba be jų).

[0075] Toliau pateikti junginiai ir atitinkamos IK₅₀ reikšmės ( koncentracijos, kurios inhibuoja agregaciją 50%, palyginti su kontrole be šių junginių) iliustruoja šį išradimą.

[0076]

[0077] Junginiai, aprašyti šiame išradime gali būti gauti pagal vieną iš toliau pateiktų bendrų metodikų:

[0078] Arilo arba alkilo alkoholis yra apsaugomas, jeigu tai yra reikalinga, ir oksiduojamas iki atitinkamo aldehido, naudojant oksalilo chloridą/DMSO, piridino chlorochromatą arba panašius reagentus. Paprastai oksidacija yra atliekama 0.5-6 vai. halogeną turinčių angliavandenilių tirpikliuose, tokiuose, kaip CH₂C1₂, nuo -78°C iki kambario temperatūros. Gautam aldehidui reaguojant su karboalkoksimetileno fosforanu gaunamas reikalingas nesotus esteris. Paprastai reakcija yra atliekama 1-18 vai. halogeną turinčiuose angliavandeniliniuose tirpikliuose, tokiuose, kaip CH₂C1₂, 0-60°C temperatūroje. Veikiant ši, esteri, chiraliniu aminu, tokiu, kaip R-(+)- -metilbenzilaminas, gaunamas dia-steromerinis aminų mišinys, kuris paprastai gali būti atskiriamas chromatografijos pagalba.

[0079] Amino alkoholis yra apsaugojamas per N, naudojant BOC arba panašias tinkamas grupes, tokias, kaip CBZ, FMOC ir pan. ir veikiant jodu, gaunamas alkilhalogenidas. Paprastai šiam tikslui naudojamas jodas ir Ph₃P, o reakcija yra atliekama nuo 5 min. iki 10 vai. aromatiniuose tirpikliuose, tokiuose, kaip benzenas arba toluenas kartu su halogeną turinčiais angliavandeniliais, 0-50°C temperatūroje, veikiant NaN₃ arba panašiais azidą pernešančiais reagentais, gaunamas alkilazidas, kuri, katalitiškai redukuojant 0. 5- 1 vai. alkoholiuose ( EtOH, CH₃0H) kambario temperatūroje gaunamas atitinkamas aminas.

[0080] Ciklinių amidų arba karbamido tarpinių junginių alkilinimas vykdomas esant tinkamoms bazėms, tokioms, kaip LiN( TMS) 2 arba paprastiems aminams, tokiems, kaip EtN( i- Pr) 2 ir atitinkamiems alkilinantiems agentams, tokiems, kaip alkilas alkilo jodide arba bromidas etilo bromacetate. Dviejų pakaitų įvedimas tarpiniame junginyje gaunamas pakartojant deprotonavimo/ alkilinimo procedūrą. Naudojant alkilinimui alkilo reagentus ir toliau oksiduojant RuCl3/ Na04 arba KMn0₄ arba kitais tinkamais reagentais gaunama galinė karboksilinė rūgštis. Ši rūgštis toliau gali būti sujungta amidine jungtimi su C- galiniais chiraliniais ar nechiraliniais aminais ir taip gaunami sekantys tarpiniai junginiai. Paprastai prijungimo reakcija atliekama DMF arba halogeną turinčiuose angliavandeniliniuose tirpikliuose, tokiuose, kaip CH₂C1₂, panaudojant standartinius reagentus, tokius, kaip DCC, EDC, izobutilo chloroformiatą ir pan. Galutinis tarpinių junginių deblokavimas paprastai susideda iš katalizuojamos bazėmis esterių hidrolizės ir N- deblokavimo, katalizuojamo rūgštimis.

[0081] Junginiai, aprašomi I formule, yra gaunami pagal reakcijų schemas, pateiktas žemiau. 1 junginys, 3- indolpropanolis, yra komercinis Aldrich Chemical produktas.

[0082]

[0083] N-Acetil-3(Indol-3-il)propanol-tret-butil-dimetilsililo eterio (3) gavimas

[0084] Tirpalas, susidedantis iš indolo 2 (29 g, 86 mmol), CH₂C1₂ (450 ml), 1, 8-diazobiciklo[ 5 .4 . 0] undek-7-eno (38 ml, 0.26 mol), 4-dimetilaminopiridino (1 g, 8.5 mol) ir acto anhidrido (32 ml, 0.34 mol) 1 savaitę maišomas kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys sukoncentruojamas ir po to praskiedžiamas eteriu. Eterinis tirpalas plaunamas H₂0, 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu, džiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Greitaeigės chromatografijos pagalba (silicio oksidas, 5% etilacetatas/heksanas) gaunamas produktas 3 (27 g) geltonos alyvos pavidalu. PSC R_f=0.54 (20% etilacetatas/heksanas) .

[0085] Į sililo eterio 3 (27 g, 81 mmol) suspensiją THF (270 ml) , maišant kambario temperatūroje, supilamas santykiu 1:1 sumaišytas 1M n-Bu₄NF tirpalas THF (244 ml, 0,24 mmol) ir AcOH (14 ml, 0,24 mmol). Po 20 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas eteriu ir po to 2 kartus praplaunamas H₂0, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunama geltona kristalinė medžiaga - alkoholis 4 (19 g) . PSC R_f=0.35 (60% etilacetatas/ heksanas);

[0086] 1H BMR (CDC1₃) 8 8.42 (m, 1H) , 7.36 d, J=7Hz, 1H) , 7.36 (t, J=7Hz, 1H) , 7.29 (t, J=7Hz, 1H) 7.27 (7d, t, J=7Hz, 1H), 7.22 (s, 1H) , 3.76 (t, J=7Hz, 2H) , 2.82 (t, J=7Hz, 2H), 2.61 (s, 3H), 2.00 (m, 2H).

[0087] 5-(N-Acetil-indol-3-il)pent-2-enoinės rūgšties etilo esterio gavimas (5)

[0088] Į maišomą oksalio chlorido (11.3 ml, 0.13 mmol) tirpalą CH₂CL₂ (400 ml) -78° C temperatūroje sulašinamas sausas DMSO (12.4 ml, 0.17 mol). Po 5 minučių dujos nustojo skirtis ir buvo supiltas alkoholio 4 (19 g, 87 mmol) tirpalas THF (40 ml) . Po 30 min., pridedamas NEt₃, siekiant gauti tirštą masę. Prieš sudedant (karbetoksi-metilen) trifenilforaną (33.3 g, 96 mmol), šaldymo vonia yra atjungiama ir maišoma 15 min. Po 2 vai., reakcijos mišinys praskiedžiamas eteriu ir po to 2 kartus praplaunamas H₂0, 5% KHS0₄, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgSO_^ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (20% etilacetato/heksanas) gaunama balta kieta medžiaga (14 g) - olefinas 5.

[0089] PSC R_f=0.54 (60 % etilacetatas/heksanas);

[0090] 1H BMR (CDCI₃) 8 8.42 (m, 1H) , 7.50 d, J=7Hz, 1H) , 7.34 (t, J=7Hz, 1H) , 7.28 (t, J=7Hz, 1H) 7.19 (pls, 1H) , 7.03 (dt, J=18 ir 7Hz, 1H), 5.88 (d, J=18Hz, 1H), 4.19 (kv, J=7Hz, 2H) , 2.87 (t, J=7Hz, 2H) , 2.63 (m, 2H) , 2.61 (s, 3H), 1.28 (t, J=7Hz, 3H).

[0091] N-(R)-alpha-metil-3(R)-[ 2-indol-3-il)etilp-alanino etilo esterio (6a) ir N-(R)-alpha-metilbenzil-3 (S)-[ 2-indol-3-il)P_~alanino etilo esterio (6b) gavimas

[0092] _Olefino 5 (2.77 g, 9.7 mmol) ir R-(O-alpha-metil-benzilamino mišinys (95.03 ml, 39 mmol) šildomas šaldymo įrenginiu 110°C temperatūroje 40 valandų. Atšaldytas reakcijos mišinys užnešamas ant greitaeigės chromatografijos kolonėlės (silicio oksidas, 40:2:1 heksanas:etilacetatas:2-propanolis). (R,R) izomeras (1.19 g) eliuojasi pirmas kaip klampi geltona alyva, kuri sukietėja laikant. Perkristalinus iš heksano buvo gauta kristalinė medžiaga. (R,S) izomeras 6b (1.55 g) eliuojasi vėliau kaip geltona alyva, turinti, apytikriai, 10% (R,R) izomero 6a. 6a: R_f=0.52 (60% etilacetatas/heksanas);

[0093] LH BMR (400 MHz, CDC1₃) S 7.84 (pls, 1H) , 7.52 (dd, J=7.9, 0.7 Hz, 1H), 7.20-7.35 (m, 6H) , 7.16 (tm, J=7.1, 1.3 Hz, 1H), 7.08 (tm, J=7.3, 1.1 Hz, 1H), 6.70 (pl d, J=2.4, 1H) , 4.10 (kv, J=7.1 Hz, 2H) , 3.90 (kv, J=6.6 Hz, 1H), 2.80-2.90 (m, 2H), 2.68 (ABX dt, J=16, 7.9 Hz, 1H) , 2.53 (ABX dd, J=14.5, 5.9 Hz, 1H) , 2.42 (ABX dd, J=14,6, 5.3 Hz, 1H), 1.79 (kv, J=7.5 Hz, 2H) , 1.33(d, J=6.4 Hz, 3H), 1.22 (t, J=7.1 Hz, 3H).

[0094] 6b:R_f=0.42 (60% etilacetatas/heksanas);

[0095] LH BMR (400 MHz, CDC1₃) 8 7.95 (pls, 1H) , 7.57 (dd, J=7.5, 0.7 Hz, 1H), 7.34 (dm, J=8.1, 0.7 Hz, 1H) , 7.17-7.30 (m), 7.11 (tm, J=7.9, 0.9 Hz, 1H) , 6.89 (pl d, J=2.2, 1H), 4.02-4.15 (ABX m, 2H), 3.89 (kv, J=6.6 Hz, 1H) , 2.95 (m, 1H) , 2.82 (ABX ddd, J=15, 9.7, 5.9 Hz, 1H) , 2.69 (ABX ddd, J=15, 9.7, 6.0 Hz, 1H) , 2.47 (ABX dd, J=15.0,

[0096] 5.1 Hz, 1H) , 2.40 (ABX dd, J=15.0, 7.7, 1H) , 1.96 (m, 1H), 1.83 (m, 1H), 1.30 (d, J=6.6 Hz, 3H) , 1.21 (t, J=7.1, 0.7 Hz, 3H).

[0097] 3 (R)-[ 2-indol-3-il) etil|3-alanino etilo esterio (7a) gavimas

[0098] Aminas 6a (996 mg, 2.74 mmol) ištirpinamas 10 ml etanolio.Pridėjus Pearlmano katalizatoriaus (20% PdOH₂C, 128 mg) kolba pripildoma vandenilio ir palaikomas baliono slėgis. Po 16 valandų pridedama papildoma katalizatoriaus porcija (122 mg) ir prilei-džiama vandenilio. Po 4 valandų pavyzdys filtruojamas per celitą ir sukoncentravus gaunamas aminas 7a (707 mg, 99%, 95% grynumo). :R_f=0.22 (10:1 NH₃ prisotintas CHCl₃:EtOAC) etilacetatas/heksanas);

[0099] ^XH BMR (400 MHz, CDC1₃) 5 8.01 (pl s, 1H) , 7.60 dt,J(8.9,04H₂,1H), 7,35 (dt, J=8.1, 0.9 Hz, 1H) , 7.19 (td, J=7.1, 1.3 Hz, 1H) , 7.11 (td, J=7.1, 1.2 Hz, 1H) , 6.99 (pl d, J=2.2 Hz, 1H) , 4.15 (kv, J=7.1, 2H) , 3.72 (kv, J=7.0, 1H) , 3.29 (m, 1H), 2.92-2.78 (m, 2H), 2.53 (ABX dd, J=15.6, 4.0 Hz, 1H), 2.33 (ABX dd, J=15.6, 8.8 Hz, 1H), 1.92-1.73 (m, 2H), 1.25 (kv, J=7.1 Hz, 3H).

[0100] Į maišomą 4-piperidinetanolio 8 (18.7 g, 0.14 mol) tirpalą DMF (200 ml) prie) 0°C pridedama N-tret-butoksikarbonilo anhidrido (31 g, 0.14 mol) . Po 1 vai. atjungiama šaldymo vonia ir reakcijos mišinys maišomas 20 vai. Reakcijos mišinys praskiedžiamas eteriu ir po to 2 kartus praplaunamas H₂0, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunamas 9 (26 g, 62) bespalvės alyvos pavidalu. PSC R_f=0.25 (40% etilacetatas/heksanas);

[0101] ¹H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 4.09 (pls, 2H),3.72 (t, J=7Hz, 2H), 2.70(m,2H), 1.75-1.10 (m, 7H) , 1.46(s,9H).

[0102] Tirpalas, susidedantis iš 10 (5.0 g, 14.7 mmol), DMSO (75 ml) ir NaN₃ (1.9 g, 29.4 mmol) šildomas 2 vai. prie 70°C. Atšaldytas reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas 2x vandeniu ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunamas 11 (3.6 g, (96%) bespalvės alyvos pavidalu. PSC R_f=0.75 (30% etil-acetatas/heksanas);

[0103] :H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 4.11 (m, 2H) , 3.36 (t, J=7Hz, 2H), 2.73 (m, 2H), 1.73 (m, 3H), 1.49 (s, 9H) , 1.15 (m, 2H) .

[0104] Mišinys, susidedantis iš 11 (1.1 g, 4.3 mmol), 10% Pd/C (0.16 g) ir etanolio maišomas vandenilio atmosferoje (1 atm) 1.5 vai. Po to reakcijos mišinys perfiltruojamas per celito filtrą ir sukoncentravus filtratą gaunamas negrynas 12 alyvos pavidalu. PSC Rf=0 .18 ((9:1:1 CH2CH2/CH3OH/HOAc) ;

[0105] ?H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 4.10 (m, 2H) , 2.78 (t, J=7Hz,2H), 2.70 (m, 2H), 1.80 (m, 2H) , 1.67 (m, 2H), 1.52 (m,1H), 1.47 (s, 9H), 1.17 (m, 2H).

[0106] l-[ 2-(N-BOC-4-piperidin-4-il) etil] -3-propen-2-il-(2-imidazolidinono) (14) gavimas

[0107] Į 13 (1.5 g, 17 mmol) tirpalą DMF (75 ml) kambario temperatūroje maišant dedamas LiN-(TMS)₂ (1M 17 ml heksano), kol susidaro nuosėdos. Tada į reakcijos mišini, pridedamas alilo bromidas (1.6 ml, 19 mmol). Po 15 min. i, reakcijos mišini, vėl pridedama LiN-(TMS)₂ (14 ml), po to, po 5 min. pridedama jodido 10 (5.9 g, 17 mmol). Reakcijos mišinys maišomas 20 vai. ir praskiedžiamas eteriu. Eterinis sluoksnis 2 kartus praplaunamas vandeniu ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (40% etilacetatas/heksanas) gaunamas 14 (0.8 g, 15%) bespal-vės alyvos pavidalu.

[0108] PSC R_f=0.75 (70% etil-heksanas);

[0109] ?H BMR (300 MHz, CDCl₃) 8 5.80 (m, 1H) , 5.23 (m, 2H) , 4.10 (m, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.30 (m, 6H), 2.72 (m, 2H), 1.70 (m, 3H), 1.50 (m, 2H), 1.70 (m, 3H), 1.50 (m, 2H), 1.46(s,9H), 1.15 (m, 2H).

[0110] l-[ 2-(N-BOC-4-piperidin-4-il) etil] -3-acetil-(2-imidazolidinono) (15) gavimas

[0111] Į stipriai maišomą 14 tirpalą (450 mg, 1.4 mmol) CC1₄, acetonitrile ir vandenyje, kambario temperatūroje pridedama RuCl₃ (12 mg, 4.4 mol) ir NaI0₄. Po 60 vai. reakcijos mišinys nufiltruojamas per celito filtrą ir praplaunamas etilo acetatu. Filtratas ekstrahuojamas sočiu NaHC0₃, vandeninė fazė parūgštinama iki pH 3 su 5% KHS0₄. Parūgštinta vandeninė fazė toliau 2 kartus ekstrahuojama etilo acetatu, organinis sluoksnis išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greita-eigės chromatografijos (silikagelis, CH₂C_12/CH₃OH/HOAc) gaunamas 15 (60 mg, 12%) bespalvės alyvos pavidalu.

[0112] PSC Rf=0 . 2 9 (9.5:0.5:0.5 CH2C12/CH3OH/HOAc) ;

[0113] ^*H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 4.05 (m, 2H) , 3.90 (m, 2H) , 3.45 (m, 2H) , 3.40 (m, 2H) , 3.24 (m, 2H) , 2.69 (m, 2H) , 1.72 (m, 2H), 1.46 (m, 3H) , 1.46 (s, 9H) , 1.15 (m, 2H).

[0114] l-[ 2-(N-BOC-4-piperidin-4-il) etil] -3-acetil-(2-imidazolidinon)-3-acetil-39(R)-[ 2-(indol-3-il)-etil] (}-alanino etilo esterio (16) gavimas

[0115] Į mišinį, susidedanti, iš 15 (60 mg, 0.17 minol), 7a (66 mg, 0.25 mmol) , HOBT (30 mg, 0.22 mmol) ir DMF (1.1 ml) 0°C temperatūroje maišant pridedama ESD (0.42 mg, 0.22 mmol), po to atjungiama šaldanti vonia. Po 20 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu, praplaunamas vandeniu, 5% KHS0₄ tirpalu, druskos tirpalu, organinis sluoksnis išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, etilo acetatas) gaunamas 16 (35 mg, 35%) bespalvės alyvos pavidalu.

[0116] PSC R_f=0.20 (etilo acetatas);

[0117] ^:H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 8 .07 (pls, 1H) , 7.57 (d, J=8 Hz, 1H), 7.37 (d, J=8 Hz, 1H), 7.18 (t, J=8 Hz, 1H), 7.11 (t, J=8 Hz, 1H), 7.05 (pls, 1H) , 6.89 (d, J=9 Hz, 1H),4.37 (m, 1H) , 4.13 (m, 1H), 4.13 (kv, J=7 Hz, 2H), 4.07 (m, 2H), 3.83 (dd, J=18 Hz, 2H), 3.43-3.20 (m, 6H) , 2.80 (m, 2H) , 2.56 (d, J=5 Hz, 2H) , 2.00-1.05 (m, 9H), 1.47 (s, 9H), 1.25 (t, J=7 Hz, 3H.

[0118] l-[ 2-(N-BOC-4-piperidin-4-il) etil] -3-acetil-(2-imidazolidinon) -3-acetil-39 (R) -[ 2- (indol-3-il) -etil] P~ alanino (17) gavimas

[0119] Mišinys, susidedantis iš 16 (30 mg, 5.0 |j. mol) , 1N NaOH (0.2 ml) ir etanolio maišomas kambario temperatūroje 1 vai. Reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir 5% KHS0₄ tirpalu, organinis sluoksnis praplaunamas vandeniu, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunamas 17 (30 mg, 100%) bespalvės alyvos pavidalu.

[0120] PSC Rf=0 . 74 (9:1:1 CH2C12/CH3OH/HOAc) .

[0121] l-[ 2-piperidin-4-il) etil] -3-acetil-(2-imidazolidinon) - 3-acetil-39 (R) -[ 2- (indol-3-il) -etil] p-alanino (18) gavimas

[0122] Į tirpalą, susidedanti, iš 17 (30 mg, 50 jimol) , dichlormetano (300 įj.1 ) ir anizolo (15 |4.1, 100 jomol) -15° temperatūroje maišant pridedama TFA (0.3 ml) . Po 20 min. reakcijos mišinys sukoncentruojamas ir likusi TFA pašalinama destiliuo j ant aceotropini, mišini, su toluolu. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.8:0.8 metanolis/NH_4/vanduo) gaunamas 18 (15 mg, 66%) baltos kietos medžiagos pavidalu.

[0123] PSC R_f=0.16 (10:0.8:0.8 metanolis/NH₄OH/vanduo);

[0124] ^:H BMR (300 MHz, CD₃0D) 5 7.44 (d, J= Hz, 1H) , 7.20 (d, J=8 Hz, 1H) , 6.95 (t, J=8 Hz, 1H) , 6.94 (s, 1H) , 6.88 (t, J=8 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.50-3.10 (m, 8H) 2.86 (m, 2H) , 2.70 (d, J=6 Hz, 2H) , 2.32 (m, 1H), 1.90 (m, 4H), 1.55 (m, l.H), 1.43 (m, 2H), 1.28 (m, 2H).

[0125] l-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] - (2-pirolidinono) (19) gavimas

[0126] Į tirpalą, susidedanti, iš 12 (2.7 g, 11.8 mmol) , aceto-nitrolio (60 ml) ir diizopropiletilamino (4.1 ml,

[0127] 23.6 mmol) maišant 0° temperatūroje pridedama 4-chlorbutirilo chlorido (2.6 ml_f 23.6 mmol), po to nuimama šaldymo vonia. Po 5 min. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu, 2 kartus praplaunamas vandeniu, druskos tirpalu, organinis sluoksnis išdžio-vinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Nevalytas amidas ištirpinamas (60 ml), atšaldytame iki 0°C ir pridedama NaN(TMS)₂(lM THF, 11.8 ml). Po 5 min. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu, praplaunamas vandeniu, ir druskos tirpalu, organinis sluoksnis išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 70% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 19 (0.4 g, 12%) bespalvės alyvos pavidalu.

[0128] PSC R_f=0.29 (70% etilo acetatas/heksanas);

[0129] ^:H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 4.10 (m, 2H) , 3.39 (t, J=7 Hz, 2H), 2.70 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.05 (m, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.46 (m, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.13 (m, 2H).

[0130] l-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -3-propen-2-il (2-pirolidinono) (20) gavimas

[0131] Į 19 (325 mg, 1.1 mmol) tirpalą THF (5 ml) maišant -78°C temperatūroje sulašinamas LDA (0.5 M 2.4 ml THF). Po 15 min. pridedamas alilo bromidas (0.16 ml, 2.2 mmol), reakcijos mišinys mašomas 78°C temperatūroje 1 vai. ir reakcija sustabdoma pridedant HOAc (0.1 ml). Reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu, praplaunamas vandeniu, ir druskos tirpalu, organinis sluoksnis išdžiovinamas (MgS0₄) ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 50% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 20 (160 mg, 45%) alyvos pavidalu.

[0132] PSC R_f=0.23 (50% etilo acetatas/heksanas);

[0133] ^*H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 5.80 (m, 1H) , 5.10 (m, 2H) , 4.1 (m, 2H) , 3.32 (m, 4H) , 2.70 (m, 2H) , 2.56 (m, 2H) , 2.20 (m, 3H), 1.73 (m, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.13 (m, 2H).

[0134] l-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il)etil] -3-acetil-2-pirolidinono (21) gavimas

[0135] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 14 konversijos i, 15 atveju iš 20 (130 mg, 0.4 mmol) buvo gautas po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 9:0.2:0.2 CH₂C₁₂/CH₃OH/HOAc) 21 (80 mg, 48) alyvos pavidalu;

[0136] ^XH BMR (300 MHz, CDCl₃) 8 4.05 (m, 1H) , 3.40 (m, 4H) , 2.96 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 2.70 (m, 2H), 2.55 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.90-1.10 (m, 7H) , 1.48 (s, 9H) .

[0137] [ l-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidon-3] -acetil-(2-(indol-3-il)-etil]p-alanino etilo esterio gavimas

[0138] ( 22)

[0139] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 15 konversijos i, 16 atveju, iš 21 (120 mg, 0.35 mmol) buvo gautas po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, etilo acetatas) 22 (90 mg, 48) alyvos pavidalu;

[0140] ^XH BMR (400 MHz, CDCl₃) 5 8.09 (bd, 1H) , 7.58 (d, J=8 Hz, 1H), 7.36 (d, J=8 Hz, 1H), 7.17 (t, J=8Hz, 1H), 7.10 (t, J=8 Hz, 1H), 7.07 (pls, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.12 (kv, J=7 Hz, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.30 (m, 4H), 2.90-2.25 (m, 8H), 2.00-1 .00 (m, 8H) , 1.48 (s, 9H) , 1.23 (t, J=7 Hz, 3H) . [ l-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidon-3] -acetil-(2-(indol-3-il)-etil]p-alanino gavimas (23) Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 16 konversijos i, 17 atveju, iš 22 (80 mg, 0.14 mmol) buvo gautas 23 (80 mg) analogiškai kaip sekančios reakcijos atveju.

[0141] PSC Rf=0 .5 (9:1:1 CH2Cl2/CH3OH/HOAc) ;

[0142] [ l-[ 2-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidon-3] -acetil-(2-(indol-3-il)-etil] (3-alanino gavimas (24)

[0143] Panaudojant tą pačią metodiką kaip 17 konversijos i, 18 atveju, iš 23 (80 mg, 0.14 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.65:0.65 metanolis/ NH₄OH/vanduo) buvo gautas 24 (15 mg, 23%).

[0144] 1H BMR (300 MHz, CDC1₃) 6 7.47 (d, J=7Hz, 1H) , 7.25 (d, J=7 Hz, 1H), 6.99 (m, 2H) , 6.88 (t, J=7Hz, 1H) , 4.19 (m, 1H), 3.49 (m, 0.5 H), 3.40 (m, 0.5 H), 3.34-2.95 (m, 6H), 2.90-2.60(m,4H), 2.48 (m, 1H), 2.40-2.20 (m, 4H), 2.13 (m, 1H), 2.00-1.05 (m, 11 H).

[0145] Į mišinį, susidedanti, iš alilamino 25 (2.0 g, 27 mmol), NMM (8.9 ml, 81 mmol) ir acetonitrilo (140 ml) maišant kambario temperatūroje sudedamas 4-chlor-butirilo chloridas (3.4 ml, 27 mmol) . Po 20 vai. reakcijos mišinys sukoncentruojamas. Liekana ištirpinama etilo acetate, tirpalas praplaunamas vandeniu, 5% KHS0₄ tirpalu, druskos tirpalu, organinis sluoksnis išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunamas 26 (4.1 g, 87%) geltonos alyvos pavidalu.

[0146] PSC R_f=0.170 (40% etilo acetatas/heksanas).

[0147] X 26 (2.0 g, 11 mmol) tirpalą THF (110 ml) maišant -78°C temperatūroje srove supilamas NaN(TMS)₂(lM THF, 11 ml) ir nuimama šaldymo vonia. Po 1.5 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu, praplaunamas vandeniu, 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu, organinis sluoksnis išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 60% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 27 (1.1 g, 72%) alyvos pavidalu.

[0148] PSC R_f=0.15 (60% etilo acetatas/heksanas);

[0149] ^:H BMR (300 MHz, CDCl₃) 5 5.78 (m, 1H) , 5.15, 4.00 (t, J=7 Hz, 2H) , 3.24 (m, 2H) , 2.41 (m, 2H) , 2.07 (m, 2H) , 1.80 (m, 4H).

[0150] 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -l-pirolidon-3] -1-acetil-2-piperidono gavimas (28)

[0151] Į 27 (1.0 g, 7.2 mmol) tirpalą THF (70 ml) maišant -78°C temperatūroje sulašinamas LDA (0.5 M, 15.8 ml). Po 15 min. pridedamas jodido 10 (2.7 g, 7.9 mmol) tirpalas THF (5 ml) ir reakcijos mišinio temperatūra lėtai pakeliama 1 valandos bėgyje iki -30°C. Reakcija sustabdoma pridedant acto rūgšties (0.2 ml) ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 40% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 28 (1.5 g, 59%) alyvos pavidalu.

[0152] PSC R_f=0.58 (etilo acetatas);

[0153] ^XH BMR (300 MHZ, CDC1₃) 5 5.77 (m, 1H) , 5.15 (m, 1H) , 4.06 (m, 2H), 4.00 (m, 2H), 3.23 (m, 2H), 2.59 (m, 2H), 2.19 (m, 1H), 2.05-1.25 (m, 11H), 1.48 (s, 9H), 1.10 (m, 2H).

[0154] 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -l-pirolidon-3] -3-acetil-2-piperidono (29) gavimas

[0155] Į stipriai maišomą mišinį, susidedanti, iš 28 (0.84 g, 2.4 mmol), CC1₄ (5 ml), acetonitrilo (5 ml), NaI0₄ (2.1 g, 9.8 mmol) ir vandens (7.5 ml) kambario tempera-tūroje pridedama RuC1₃ (50 mg, 0.2 mmol). Po 20 vai. papildomai pridedama dar viena porcija RuC1₃ (50 mg) . Po 4 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir pusiau sočiu NaHC0₃. Po sumaišymo ir sluoksnių atskyrimo, vandeninė fazė parūgštinama 5% KHS0₄ ir ekstrahuojama etilo acetatu. Organinis sluoksnis praplaunamas druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 9:0.2:0.2 CH₂C1₂/CH₃OH/HOAc) gaunamas 29 (280 mg, 30%) alyvos pavidalu.

[0156] PSC Rf=0 . 36 (9.5:0.5:0.5 CH2C12/CH3OH/HOAc) .

[0157] [ 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-imidazolidinon-l] - acetil-[ 3 (R)-[ (2-(indol-3-il) -etil] f3-alanino etilo esterio gavimas (30)

[0158] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 15 konversijos i, 16 atveju, iš 29 (280 mg, 0.76 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 85% etilo acetatas/ heksanas) buvo gautas 22 (300 mg, 64%) alyvos pavidalu;

[0159] PSC R_f=0.18 (85% etilo acetatas/heksanas);

[0160] ^*H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 8.14 (m, 1H) , 7.60 (d, J=8 Hz, 1H) , 7.39 (d, J=8 Hz, 1H) , 7.20 (t, J=8 Hz, 1H) , 7.13 (t, J=8 Hz, 1H) , 7.05 (pls, 1H) , 6.90 (d, J=9 Hz, 1H) , 4.35 (m, 1H) , 4.11 (q, J=7 Hz, 2H), 4.05 (m, 2H) ,

[0161] 3.98 (s, 2H), 3.40 (m, 4H), 2.90-2.50 (m, 6H), 2.33 (m, 1H) , 2 .00-1 .00 (m, 15H), 1.48 (s, 9H), 1.29 (9t, J=7 Hz, 3H) .

[0162] [ 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-imidazolidinon-l] - acetil-[ 3 (R)-[ (2-(indol-3-il)-etil] 0-alanino gavimas

[0163] (30)

[0164] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 16 konversijos d, 17 atveju, iš 30 (160 mg, 0.26 mmol) buvo gautas

[0165] PSC R_f=0.59 (9:1:1 CH2Cl2/metanolis/HOAc) .

[0166] [ 3-[ 2-piperidin-4-il) etil] -2-imidazolidinon-l] -acetil-[ 3 (R)-[ (2-(indol-3-il) -etil] 0-alanino gavimas (32)

[0167] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 17 konversijos i, 18 atveju, iš 31 (140 mg, 0.24 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.4:0.4 metanolis/ NH₄OH/vanduo) buvo gautas 32 (55 mg, 47%) baltos kietos medžiagos pavidalu.

[0168] PSC R_f=0.46 (10:1:1 metanolis/NH₄OH/vanduo);

[0169] ¹H BMR (300 MHz, CD₃OD) 5 7.54 (d, J=8 Hz, 1H) , 7.30 (d, J=8 Hz, 1H), 7.03 (t, J=8 Hz, 1H), 7.02 (pls, 1H), 6.976 (m, 1H), 4.28 (m, 1H) , 4.20 (d, J=16 Hz, 0.5H), 4.12 (d, J=16 Hz, 0.5H), 3.80 (d, J=16 Hz, 0.5H), 3.75 (d, J=16 Hz, 0.5H), (s, 2H) , 3.50-3.15 (m, 4H) , 2.80 (m, 4H) , 2.70 (d, J=6 Hz, 2H), 2.50-2.30 (m, 3H), 2.00-1.20 (m, 15H) .

[0170] 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il)etil] -3-acetil-2-pirolidinono (36a) gavimas

[0171] I benzilamino 35a (0.8 g, 2.2 mmol) tirpalą THF (20 ml) -78°C temperatūroje per 2 kartus sudedamas šviežiai paruoštas ličio di-tret-butilbifenilatas (0.5 M 10.8 ml) . Po lval. reakcija sustabdoma HOAc (0.1 ml) ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (5% metanolis/etilacetatas) gaunamas 36a (470 mg, 72%) baltos kietos medžiagos pavidalu. PSC R_f=0.27 (10% metanolis/etilacetatas); ^:H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 6.03 (m, 1H) , 4.10 (m, 1H) , 3.35 (m, 2H), 2.70 (m, 2H), 2.33 (m, 2H), 2.70 (m, 2H), 1.92 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.70 (m, 2H), 1.50-1.30 (m, 4H), 1.48 (s, 9H), 1.12 (m, 1H). Metil-l-acetat-3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il)etil] -3-acetil-2-pirolidinono (37a) gavimasĮ 36a (340 mg, 1.1 mmol) tirpalą THF (10 ml) maišant -78°C temperatūroje srove supilamas NaN(TMS)₂(lM 11 ml THF) ir nuimama šaldymo vonia. Po 15 min. pridedama etilo bromacetato (250 ml, 2.2 mmol) ir reakcijos mišinys pašildomas iki -20°C. Po 2 vai. reakcija sustabdoma HOAc (0.1 ml) ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 50% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 37a (380 mg, 90%) alyvos pavidalu.

[0172] PSC R_f=0.66 (10% metanolio/etilo acetatas);

[0173] LH BMR (300 MHz, CDCl₃) 5 4.22 (q, J=7Hz, 2H) , 4.1 (m, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.24 (m, 2H), 2.70 (m, 2H), 2.44 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 2.00-1.65 (m, 4H), 1.48 (s, 9H), 1.50-1.30 (m, 4H), 1.31 (t, J=7Hz, 3H), 1.12 (m, 2H).

[0174] 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il)etil] -3-acetil-2-pirolidinon-1-acto rūgšties (38a) gavimas

[0175] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 16 konversijos i, 17 atveju, iš 37 (390 mg, 1.1 mmol) buvo gautas 38a (340 mg, 91%) baltų putų pavidalu.

[0176] PSC R_f=0.39 (9:0.5:0.5 CH2Cl2/metanolis/HOAc) .

[0177] 3-[ 2-(N-BOC-4-piperidin-4-il) etil] -3-acetil-(2-pirolidinon-1) acetil-[ 3 (R) -[ 2-(indol-3-il) -etil] (3-alanino etilo esterio (39a) gavimas

[0178] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 15 konversijos į 16 atveju, iš 38a (310 mg, 0.92 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 85% etilo acetatas/ heksanas) buvo gautas 39a (460 mg, 86%) geltonos alyvos pavidalu.

[0179] PSC R_f=0.16 (85% etilo acetatas/heksanas);

[0180] lH BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 8.21 (pls, 1H) , 7.58 (d, J=8 Hz, 1H), 7.38 (d, J=8 Hz, 1H), 7.20 (t, J=8 Hz, 1H), 7.13 (t, J=8 Hz, 1H), 7.05 (pls, 1H), 6.72 (d, J=10 Hz, 1H), 4.35 (m, 1H) , 4.13 (q, J=7 Hz, 2H), 4.09 (m, 2H) , 3.97 (d, J=15 Hz, 1H) , 3.86 (d, J=15 Hz, 1H), 3.41 (m, 2H), 2.80 (m, 2H), 2.65 (m, 2H), 2.55 (dd, J=1.5 Hz, 2H) , 2.45 (m, 1H) , 2.24 (m, 1H) , 2.00-1.20 (m, 10H), 1.48 (s, 9H) , 1.26 (t, J=7 Hz, 3H) , 1.04 (m, 1H).

[0181] 3-[ 2-(N-BOC-4-piperidin-4-il) etil] -3-acetil-(2-pirolidinon-1) acetil-[ 3 (R) -[ 2- (indol-3-il) -etil] 0-alanino gavimas (40a)

[0182] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir 16 konversijos i, 17 atveju, iš 39a (460 mg, 0.79 mmol) buvo gautas 40a (360 mg, 86%) putų pavidalu.

[0183] PSC Rf=0 . 57 (9:1:1 CH2Cl2/metanolis/HOAc) ;

[0184] [ 3-[ 2-(piperidin-4-il) etil-1] -acetil-[ 3 (R)-[ 2-(indol-il)etil]p-alanino (41a) gavimas

[0185] Panaudojant 18 gavimo iš 17 procedūrą, iš 40a (360 mg, 0.65 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.4:0.4 metanolis/NH₄OH/vanduo) gaunamas kietos baltos medžiagos pavidalu 41a (180 mg, 59%) .

[0186] TLC R_f=0.21 (10:0.4:0.4 metanolis/NH₄OH/vanduo);

[0187] ?H BMR (300 MHz, CD₃OD) 7.36 (d, J=8 Hz, 1H) , 7.13 (d, J=8 Hz, 1H), 6.87 (t, J=8 Hz, 1H) , 6.86 (s, 1H) , 6.78 (t, J=8 Hz, 1H) , 4.09 (m, 1H) , 3.82 (d, J=16 Hz, 1H), 3.70 (d, J=16 Hz, 1H), 3.33 (m, 2H) , 3.07 (m, 2H), 2.63 (m, 4H), 2.30 (m, 1H), 2.25 (m, 2H), 2.05 (m, 1H), 1.90-1.50 (m, 6H), 1.40-1.05 (m, 6H).

[0188] [ 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il)etil] -2-pirolidinono (36b) gavimas

[0189] Panaudojant 36a gavimo iš 35a procedūrą, iš 35b (0.7 g, 1.7 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 5% metanolis/etilo acetatas) gaunamas kietos baltos medžiagos pavidalu 36b (260 mg, 62%).

[0190] Etil 3-[ 2-N-BOC-piperidin-4-il)etil] -2-pirolidinono-l-acetato (37b) gavimas

[0191] Panaudojant 37a gavimo iš 36a procedūrą, iš 36b (260 mg, 0.88 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 50% etilo acetatas/heksanas) gaunamas alyvos pavidalu 37b (300 mg, 89%).

[0192] TLC R_f=0.66 (10% metanolis/etilo acetatas).

[0193] 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il)etil] -2-pirolidinono-l-acto rūgšties (38b) gavimas

[0194] Panaudojant 17 gavimo iš 16 procedūrą, iš 37b (300 mg, 0.78 mmol) gaunamas kristalinės medžiagos pavidalu 38b (260 mg, 98%).

[0195] TLC R_f=0.38 (9:0.5:0.5 CH₂Cl/metanolis/HOAc).

[0196] [ 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il)etil] -2-pirolidinono-l] - acetil-[ 3 (R)-[ 2-pirolidinono-l] -acetil-[ 3 (R)-[ 2-(indol-3-il)-etil] p-alanino etilo esterio (39b) gavimas

[0197] Panaudojant 16 gavimo iš 15 procedūrą, iš 38b (260 mg, 0.73 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 85% etilo acetatas/heksanas) gaunamas alyvos pavidalu 39b (360 mg, 83%).

[0198] PSC R_f=0.16 (85% metanolis/etilo acetatas);

[0199] !H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8.29 (pls, 1H) , 7.57 (d, J=8 Hz, 1H), 7.38 (d, J=8 Hz, 1H) , 7.19 (t, J=8 Hz, 1H) , 7.12 (t, J=8 Hz, 1H), 7.04 (d, J=1 Hz, 1H), 6.67 (d, J=10 Hz, 1H), 4.33 (m, 1H) , 4.13 (kv, J=7 Hz, 2H), 4.07 (m, 2H) , 3.99 (d, J=16 Hz, 1H) , 3.82 (d, J=16 Hz, 1H), 3.40 (m, 2H), 2.80 (m, 2H) , 2.68 (m, 3H) , 2.55 (dd, J=5,2 Hz, 2H) , 2.43 (m, 1H) , 2.22 (m, 1H) , 2.00-1.00 (m, 11H), 1.47 (s, 9H) , 1.28 (t, J=7 Hz, 3H) .

[0200] [ 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinono-l] -

[0201] acetil-[ 3(R)-[ 2-(indol-3-il)-etil] p-alanino (40b) gavimas

[0202] Panaudojant 17 gavimo iš 16 procedūrą, iš 39b (280 mg, 0.47 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 9:1:1 CH₂Cl₂/metanolis/HOAc) gaunamas kietos baltos medžiagos pavidalu 40b (250 mg, 94%).

[0203] PSC R_f=0.21 (9:1:1 CH₂Cl_2/metanolis/HOAc).

[0204] [ 3-[ 2-(N-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinono-l] -acetil-[ 3 (R)-[ 2-(indol-3-il)-etil] p-alanino (41b) gavimas

[0205] Panaudojant 18 gavimo iš 17 procedūrą, iš 40b (250 mg, 0.44 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.4:0.4 metanolis/NH₄OH/vanduo) gaunamas kietos baltos medžiagos pavidalu 40b (100 mg, 49%).

[0206] PSC Rf=0.4 6 (10:0.4:0.4 CH2Cl2/metanolis/HOAc) ;

[0207] ^XH BMR (300 MHz, CD₃OD) 7.25 (d, J=8 Hz, 1H) , 7.29 (d, J=8 Hz, H), 7.03 (t, J=8 Hz, 1H) , 7.02 (s, 1H) , 6.95 (t, J=8 Hz, 1H), 4.27 (m, 1H) , 4.05 (d, J=16 Hz, 1H) , 3.81 (d, J=16 Hz, 1H), 3.42 (m, 2H) , 3.26 (m, 2H), 2.90-2.70 (m, 4H) , 2.49 (m, 1H) , 2.40 (d, J=6 Hz, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.05-1.70 (m, 5H), 1.60-1.25 (m, 5H).

[0208] Į maišomą oksalilo chlorido (0.43 ml, 5.0 mmol) tirpalą CH₂C1₂ (20 ml) -78°C sulašinamas DMSO (0.52 ml, 7.0 mmol). Kai nustoja skirtis dujos (_~5 minutės) srovele supilamas alkoholis 9 (0.8 g, 3.5 mmol) ištirpintas CH₂C1₂ (20 ml) . Po 20 minučių sulašinamas trietilaminas (1.7 ml, 12 mmol) ir po to nuimama šaldymo vonia. Po 20 minučių per vieną kartą sudedamas karbetoksimetilenotrifenil-fosforanas (1.4 g, 4.0 mmol). Po 2.0 valandų reakcijos mišinys praskiedžiamas petrolio eteriu ir po to praplaunamas H₂0, 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu, džiovinamas MgS0₄, ir sukoncentruojamas.

[0209] Greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 15% etilo acetatas/heksanas) pagalba gaunamas bespalvės alyvos pavidalu 42 esteris.

[0210] TLC R_f=0.79 (50% etilo acetatas/heksanas);

[0211] ¹H BMR (300 MHz, CDC1₃) 6 6.91 (dt, J=16 ir 7 Hz, 1H) , 5.81 (pld, J=17 Hz, 1H), 4.18 (kv, J=7 Hz, 2H), 4.08 (m, 2H), 2.67 (m, 2H), 2.14 (t, J=7 Hz, 2H), 1.07-1.05 (m, 5H), 1.44 (s, 9H) , 1.28 (t, J=7 Hz, 3H).

[0212] Etil 4-(N-BOC-piperidin-4-il) butirato (43) gavimas

[0213] Olefinas 42 (26 g, 87 mmol) etilo acetate (500 ml) per naktį hidrinamas kambario temperatūroje vandenilio atmosferoje (1 atm), dalyvaujant 10% Pd/C (5.0 g). Reakcijos mišinys prapučiamas argonu ir filtruojamas per celito sluoksnį. Sukoncentravus filtratą, greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10% etilo acetatas heksanas) pagalba gaunamas kristalinės medžiagos pavidalu esteris 43.

[0214] PSC R_f=0.42 (20% etilo acetatas/heksanas);

[0215] LH BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 4.16 (kv, J=7 Hz, 2H) , 4.10 (m, 2H), 2.69 (m, 2HO, 2.31 (t, J=7 Hz, 2H), 1.26 (m, 4H), 1.38 (s, 9H) , 1.40 (m, 1H) , 1.11 (m, 2H) .

[0216] 4-(N-BOC-Piperin-4-il) butanoinės rūgšties (44) gavimas

[0217] Esterio 43 (19 g, 63 mmol) , etanolio (300 ml) ir 1 N NaOH (100 ml, 100 mmol) tirpalas kambario temperatūroje maišomas 2.5 valandas. Po to reakcijos mišinys sukoncentruojamas. Liekana praskiedžiama 5% KHSO,, ir etilo acetatu ir supilama i, dalinamąjį piltuvą. Fazės yra sumaišomos, atskiriamos ir po to organinė dalis praplaunama vandeniu, išdžiovinama MgS0₄ ir sukoncentravus gaunama bespalvės alyvos pavidalu rūgštis 44, kuri stovėdama išsikristalina.

[0218] mp=80-81°C, PSC R_f=0.68 (etilo acetatas);

[0219] ^XH BMR (300 MHz, CDCl₃) 5 4.10 (m, 2H) , 2.71 (m, 2H) , 2.38 (t, J₌7 Hz, 2H), 1.70 (ra, 4H), 1.60-1.30 (m, 3H), 1.48 (s, 9H), 1.12 (m, 2H).

[0220] 4(S)-Benzil-oksazolidinono-4-(BOC-piperidin-4-il) butirato (45) gavimas

[0221] Į tirpalą, susidedantį iš 44 (15.3 g, 56 mmol), NEt₃ (9.4 ml, 67 mmol) ir sauso THF (240 ML) -78°C temperatūroje maišant srovele supilamas trimetilacetilo chloridas (7.6 ml, 61 mmol). Po 10 min. šaldymo vonia nuimama ir pakeičiama ledo vonia. Po 1.0 valandos heterogeninis mišinys vėl atšaldomas iki -78°C, po to per vamzdeli, supilamas atšaldytas iki -78°C (S) — ( —) —4 — benzil-2-oksazolidonas (62 mmol) sausame THF (150 ml) su n-BuLi (38.8 ml, 62 mmol, 1.6M/heksane). Supylus, 1.0 valandos bėgyje reakcijos mišinio temperatūra pakeliama iki 0°C, ir reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0, praskiestu NaHC0₃, 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 30% etilo acetatas/heksanas) pagalba gaunamas 45 bespalvės alyvos pavidalu.

[0222] PSC R_f=0.45 (30% etilo acetatas/heksanas);

[0223] ¹H BMR (400 MHz, CDC1₃) 7.36-7.20 (m, 5H) , 4.67 (m, 1H), 4.18 (m, 2H), 4.08 (m, 2H), 3.30 (dd, J=13 ir 3Hz, 1H), 2.93 (m, 2H) , 2.77 (dd, J=13 ir 10 Hz, 1H) , 2.69 (m, 2H), 1.70 (m, 4H), 1.50-1.30 (m, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.11 (m, 2H).

[0224] 4(S)-Benzil-2-oksazolidono-4-(BOC-piperidin-4-il)-2(R)-(2-cianoetil) butirato (46) gavimas

[0225] Į tirpalą, susidedanti, iš TiCl₄ (42 ml, 42 mmol, 1M/CH₂C1₂) ir CH₂C1₂ (250 ml) , 0°C temperatūroje maišant sudedamas titano (IV) izopropoksidas (42 ml, 14 mmol). Po 15 min. sudedamas diizopropiletilaminas (11.0 ml) , ištirpintas CH₂C1₂ (75 ml) . Reakcijos mišinys maišomas 0°C kol tirpalas pasidaro tamsiai raudonos spalvos. Po 10 minučių pridedama 45 (21.8 g, 51 mmol), ištirpinto CH₂C1₂ (75 ml) ir 0°C temperatūroje maišoma 1.0 valandą. Prie 0°C i, tamsiai raudonos spalvos tirpalą sudedamas akrilonitrilas (33.4 ml, 0.50 mol) . Po 4.0 valandų reakcija sustabdoma praskiestu NH₄C1 (150 ml) prie 0°C, po to ekstrahuojama CH₂C1₂ (3x250 ml) . Apjungtas organinis ekstraktas plaunamas praskiestu NaHOC₃ ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 25% etilo acetatas/heksanas) pagalba gaunamas nevalytas 4 6 geltonos alyvos pavidale. Nevalytas 46 chromatografuojamas (silicio oksidas, 2.5% acetonas/CH2Cl2) , ir kartu su mišriomis frakcijomis (1.6 g), gaunamas 46 alyvos pavidalu, kuri yra 97% švarumo pagal HPLC.

[0226] PSC Rf=0 . 35 (2.5% acetonas/CH2Cl2) ;

[0227] ^XH BMR (400 MHz, CDC13) , 8 7.50-7.30 (m, 5H) , 4.68 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 4.07 (m, 2H), 3.80 (m, 1H), 3.33 (dd, J=13 ir 4 Hz, 1H) , 2.77 (dd, J=13 ir 10 Hz, 1H), 2.65 (m, 2H), 2.38 (m, 2H), 2.13 (m, 1H), 1.89 (m, 1H), 1.75 (m, 1H), 1.63 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.35 (m, 1H), 1.25 (m, 2H), 1.08 (m, 2H).

[0228] 4(S)-Cikloheksilmetil-2-oksazolidin-one-4-(BOC-piperidin-4-il)-2(R)-(2-aminopropil) butirato-HCl (47) gavimas

[0229] Mišinys, susidedantis iš 46 (19.2 g, 40 mmol), Pt0₂ (2.0 g), CH₃OH (70 ml) ir CHC1₃ (7.0 ml) , kratomas Parr aparate vandenilio atmosferoje (60 PSI) kambario temperatūroje 3.0 valandas. Reakcijos mišinys filtruojamas per celito filtrą ir sukoncentravus gaunamas nevalytas 47 amino-HCl kietos baltos medžiagos pavidalu. Ši medžiaga tiesiogiai naudojama sekančioje stadijoje.

[0230] TLC Rf=0 . 50 (10:1:1 CH2Cl2/CH3OH/HOAc) ;

[0231] ?H BMR (400 MHz, CDCl₃) 8 8.28 (bs, 2H) , 4.50 (m, 1H) , 4.35 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.36 (m, 1H), 3.02 (m, 2H), 2.63 (m, 2H), 2.00-1.00 (m, 24H), 1 .45 (s, 9H) .

[0232] 3- (R) -[ N-BOC-2- (piperidin-4-il) etil] -2-piperidono (48) gavimas

[0233] Nevalytas 47 amino.HC1 (16.6 g, 31 mmol), acetonit-rilas, (750 ml) ir NaHC0₃ (10.0 g) kambario tempera-tūroje maišomi 20 valandų. Siekiant užblokuoti nedidelį piperidino kiekį, kuris susidarė ankstesnės reakcijos metu, heterogeninis mišinys paveikiamas di-tret-butildikarbonatu (3.0 g) ir maišomas dar 1.0 h. NaHC0₃ pašalinamas filtruojant ir filtratas sukoncentruojamas. Greitaeigės chromatografijos (kvarcas, 5% CH₃OH/etilo acetatas) pagalba gaunamas laktamas 48 bespalvės kristalinės medžiagos pavidalu.

[0234] mp=110-lll°C; PSC R_f=0.65 (20% CH₃OH/etilo acetatas;

[0235] ^XH BMR (400 MHz, CDC1₃) 5 6.31 (pls, 1H) , 4.06 (m, 2H) , 3.31 (m,2H), 2.67 (m,3H), 2.28 (m,1H) , 2.00-1.20 (m, 11H0, 1.45 (s,9H), 1,10 (m,2H).

[0236] Etil [ 3 (R)-[ N-BOC-2-(piperidin-4-il) etil] -2-piperido-nas-1] acetato (49) gavimas

[0237] Į maišomą 48 (6.7 g, 22 mmol) tirpalą sausame THF (150 ml), -78°C sulašinamas NaN(TMS)₂ (24.5 ml, 24.5 mmol, lM/heksanas). Po 15 min. pridedama bromoacetato (5.2 ml, 45 mmol) ir po to reakcijos mišinio temperatūra pakeliama iki 0°C ir palaikoma 1 vai. bėgyje. Po to reakcija sustabdoma AcOH (1.0 ml) , praskiedžiama etilo acetatu, praplaunama H₂0 ir druskos tirpalu, išdžiovinama MgS0₄ ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (kvarcas, 40% etilo acetatas/heksanas) gaunamas esteris 49 geltonos alyvos pavidalu.

[0238] PSC R_f=0.26 (40% etilo acetatas/heksanas);

[0239] ^*H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 4.20 (kv, J=7 Hz, 2H) , 4.17 (d, J=18 Hz, 1H) , 4.08 (m, 2H) , 3.98 (d, J=18 Hz, 1H) , 3.37 (m, 2H) , 2.68 (m, 2H) , 2.32 (m, 1H) , 2.00-1.25 (m, 11H), 1.45 (s, 9H), 1.30 (t, J=7 Hz, 3H), 1.11 (m, 2H).

[0240] 3-(R)-[ N-BOC-2-(Piperidin-4-il) etil] -2-piperidonas-l] acto rūgšties (50) gavimas

[0241] Tirpalas, susidedantis iš 49 (6.0 g, 15 mmol), 1N NaOH (50 ml, 50 mmol), ir CH₃OH (75 ml) maišomas 1 vai. kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys parūgštinamas 5% vandeniniu KHS0₄ tirpalu ir ekstrahuojamas etilo acetatu. Organinė dalis praplaunama druskos tirpalu, išdžiovinama MgS0₄ ir sukoncentravus gaunama karbok-silinė rūgštis 50 geltonos alyvos pavidalu. Pridėjus i, alyvą, susidaro puri balta medžiaga.

[0242] PSC Rf=0 . 31 (9:0.5:0.5 CH2Cl2/CH3OH/AcOH) ;

[0243] LH BMR ( 400 MHz, CDCI₃) 8 4. 13 ( d, J- 17 Hz, 1H) , 4. 07 ( m, 2H), 4. 06 ( d, J =17 Hz, 1H) , 3. 39 ( m, 1H), 2. 33 ( m, 1H), 1. 95 ( m, 3H), 1. 81 ( m, 1H), 1. 70- 1. 25 ( m, 7H), 1. 45 ( s, 9H), 1. 08 ( m, 2H).

[0244] Į maišomą tirpalą, susidedanti, iš 51 ( 3. 8 g, 20 mmol), 4- metilmorfolino ( 2. 2 ml, 20 mmol) ir etilo acetato ( 200 ml), - 15°C temperatūroje pridedama izobutil-chlorformiato ( 2. 6 ml, 20 mmol). Po 1. 0 vai. reakcijos mišins praplaunamas H₂0 ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir perfiltruojamas i apvaliadugnę kolbą. Atšaldžius iki 0°C, į mišrų anhidridą dalimis supilamas eterinis diazometano ( 80 ml, 40 mmol, 0. 5 M tirpalas) tirpalas. Po 2 vai. nuimama šaldymo vonia ir diazometano perteklius pašalinamas prapučiant tirpalą 30 min. bėgyje argonu. Sukoncentravus gaunamas nevalytas diazoketonas 52, kuris tiesiogiai naudojamas sekančioje stadijoje.

[0245] Nevalytas diazoketonas 52 ( 4. 3 g, ~ 20. 0 mmol) ištirpi-namas etanolyje ( 250 ml) ir pridedama NEt₃ ( 3. 4 ml, 24 mmol) ir sidabro benzoato ( 1. 4 g, 6. 0 mmol), ko pasekoje aktyviai skiriasi dujos ir susidaro juodos nuosėdos. Po 1 vai. reakcijos mišinys koncentruojamas ir išvalius liekana greitaeigės chromatografijos metodu ( kvarcas, 10% etilo acetatas/ heksanas) gaunamas etilo esteris 52 bespalvės alyvos pavidalu.

[0246] TLC Rf=0. 42 ( 30% etilo acetatas/ heksanas) ;

[0247] XH BMR (400 MHz, CDC1₃) 8 4 . 96 (m, 1H) , 4.19 (q, J=7 Hz, 2H) , 4.04 (m, 1H) , 2.52 (dd, J=15 ir 6 Hz, 1H) , 2.46 (dd, J=15 ir 6 Hz, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.26 (t, J₌7 Hz, 3H), 1.21 (t, J=7 Hz, 3H).

[0248] Į mechaniškai maišomą 53 (2.2 mg, 9.7 mmol) tirpalą etilo acetate (180 ml) -15°C temperatūroje 30 min. aktyviai leidžiamas dujinis HCl. Po to nuimama šaldymo vonia ir tirpalas 1 vai. prapučiamas argonu, kad pašalinti HCl perteklių. Sukoncentravus gautas amino hidrochloridas 54 geltonos alyvos pavidalu.

[0249] *H BMR (400 MHz, D₂0) 8 4.21 (q, H=7 Hz, 2H) , 3.78 (m, 1H), 2.79 (m, 2H), 1.38 (d, J=7 Hz, 1.29 (t, J=Hz, 3H).

[0250] 3 (R)-[ (N-BOC-2-(piperidin-4-il) etil] -2-piperidon-1] acetil-[ 3 (R)-metil-p-alanino etilo esteris (55a)

[0251] Į tirpalą, susidedanti, iš 50 (l.Og, 2.7 mmol), 54 (0.48 g, 2.8 mmol), HOBT, (0.39 g, 2.8 mmol), N(i-pr)₂Et (1.5 ml, 8.5 mmol) ir sauso DMF (100 ml) -15°C temperatūroje maišant sudedama EDC (0.95, 2.8 mmol), po to nuimama šaldymo vonia. Po 20 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas vandeniu, sočiu NaHC0₃, 5% vandeniniu KHS0₄, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po gretaeigės chromatografijos (silicio oksidas, etilo acetatas) gaunamas 55 bespalvės alyvos pavidalu.

[0252] PSC R_f=0.35 (etilo acetatas);

[0253] ^:H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 6.82 (bd, 1H) , 4.32 (m, 1H) , 4.13 (kv, J=7 Hz, 2H) , 4.10 (d, J=15 Hz, 1H) , 4.08 (m, 2H), 4.82 (q, J=15 Hz, 1H), 3.36 (m, 2H) , 2.67 (m, 2H) ,

[0254] 2.48 (dd, J=5 ir 1 Hz, 2H), 2.33 (m, 1H), 2.00-1.20 (m, 11H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (t, J=7 Hz, 3H), 1.21 (d, J=7 Hz, 3H), 1.10 (m, 2H).

[0255] 3 (R)-[ (N-BOC-2-(piperidin-4-il) etil] -2-piperidon-1] acetil-[ 3 (R)-metil-p-alanino (56) gavimas

[0256] Tirpalas, susidedantis iš 55 (1.2 g, 2.5 mmol), 1N NaOH (10 ml, 10 mmol) ir CH₃OH (18 ml) maišomas 1 vai. kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys parūgštinamas 5% vandeniniu KHS0₄ ir ekstrahuojamas etilo acetatu. Organinis sluoksnis praplaunamas druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greita-eigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.5:0.5 CH₂C1_2/ CH₃OH/AcOH) pašalinus likusią AcOH aceotropinės destiliacijos su toluolu pagalba, gaunama bespalvės alyvos pavidalu karboksilinė rūgštis 56.

[0257] TLC Rf=0 . 40 (10:0_.5:0_.5 CH2Cl2/CH3OH/AcOH) ;

[0258] ^XH BMR (300 MHz, CDC1₃) 6 7.02 (bd, 1H) , 4.35 (m, 1H) , 4.12 (d, J₌7 Hz, 1H) , 4.08 (m, 2H) , 3.87 (d, J=16 Hz, 1H), 3.32 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.56 (m, 2H) , 2.36 (m, 1H), 2.00-1.25 (m, 11H), 1.45 (s, 9H), 1.03 (m, 2H).

[0259] 3 (R)-[ 2-(piperidin-4-il) etil] -2-piperidon-l] acetil-[ 3(R)-metil-p-alanino (57) gavimas

[0260] Tirpalas, susidedantis iš 57 (0.74 g, 1.6 mmol), trifluoracto rūgšties (10 ml) ir CH₂C1₂ (10 ml) maišomas 1 vai. kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys sukoncentruojamas ir likusi trifluoracto rūgštis pašalinama aceotropinės destiliacijos su toluolu pagalba. Po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 10:0.5:0.5 CH30H/NH40H/H20) , gaunamas 57 baltos amorfinės medžiagos pavidalu. Perkristalinus 57 (100 mg) iš etanolio (4 ml) ir nufiltravus kambario temperatūroje gaunamas 57 (45 mg) kristalinėje formoje. m.p. =24 0° (s) PSC Rf=0 . 48 (10:1:1 CH30H/NH40H/H20) ;^ BMR (400 Hz, D₂0) 5 4.18 (m, 1H) , 4.06 (d, J=7 Hz, 1H), 3.95 (d, J=16 Hz, 1H) , 3.41 (m, 4H), 2.99 (m, 2H) , 2.45 (m, 1H), 2.42 (dd, J=18 ir 6 Hz, 1H), 2.33 (dd, J=18 ir 7 Hz, 1H), 1.97 (m, 4H), 1.90-1.55 (m, 5H), 1.38 (m, 4H), 1.19 (d, J=7 Hz, 3H). l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -3-propen-2-il- (1H-tetrahidropirimidin-2-ono) (59) gavimasĮ maišomą lH-tetrahidropirimidin-2-ono (1.0 g, 10 mmol) tirpalą DMF (50 ml) pridedamas 1 M ličio bis(trime-tilsilil)amido (10 ml, 10 mM) tirpalas. Po 0.5 vai. pridedamas alilo bromidas (1.0 ml, 1.17 mM) ir maišoma dar 1 vai. Tada pridedama antra ličio bis(trime-tilsilil) amido (10 ml, 10 mM) porcija ir po 0.5 vai. pridedama (N-BOC-piperidin-4-il)etil jodido (10). Reakcijos mišinys maišomas 25°C temperatūroje per naktd,. Reakcijos mišinys išpilamas ant ledo ir 15% KHS0₄ (50 ml), ekstrahuojamas etilo eteriu (2x100 ml), praplaunamas H₂0 (2x100 ml), druskos tirpalu, išdžio-vinamas Na₂S0₄ ir išgarinamas vakuume. Po greitaeigės chromatografijos Si0₂ (etilacetatas-heksanas 1:1) gaunamas grynas 59.^*H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 1.14 (2H, m), 1.46 (9H, s), 1.74 (3H, m), 1.95 (2H, m), 2.68 (2H, t), 3.22 (4H, m), 3.38 (2H, m), 3.95 (2H, m), 4.06 (2H, m), 5.13 (2H, dd) . l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -3-acetaldehid-(1H-tetrahidropirimidin-2-ono) (60) gavimas Į 59 (430 mg, 1.27 mM) tirpalą THF (7 ml), H₂0 (5 ml), kuriame yra natrio perjodato (0.68 g, 3.19 mM) , pridedama 2.5% osmio tetroksido tirpalo 2-metil-2-propanole (4.13 ul, 1.28 mM). Reakcijos mišinys maišomas 4 vai., pridedama etilacetato (70 ml) ir praplaunama 50% natrio chlorido ir 10% natrio sulfato tirpalų mišiniu (1:1) ir natrio chlorido tirpalu. Tirpalas išdžiovinamas Na₂S0₄ ir išgarinus vakuume gaunamas 60. l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -3-acto rūgšties-(1H-tetrahidropirimidin-2-ono) (61) gavimasĮ 60 (374 mg) tirpalą acetone (7 ml), atšaldytą iki -15°C sulašinamas Jonės reagentas, kol oranžinė spalva išsilaiko 5 min. Pridedama etilacetato (60 ml), tirpalas praplaunamas H₂0, druskos tirpalu, išdžiovinamas NaS0₄ ir išgarinus vakuume gaunamas 61.

[0261] ^:H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 1.12 (2H, m), 1.45 (9H, s), 1.70 (2H, pld), 2.03 (2H, m), 2.70 (2H, plt), 3.37 (4H, m), 3.95 (2H, m), 4.05 (2H, m).

[0262] l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -(1H-tetrahidropirimidin-2-ono)-3-acetil-3(R)-(2-feniletil)p-alanino metilo esterio (63) gavimas

[0263] Mišinys, susidedantis iš 61 (125 mg, 0.34 mM) , (R)-3-(2-feniletil)3-alanino metilo esterio (83 mg, 0.34 mM), 1-hidroksibenzotriazolo hidrato (48.3 mg, 0.35 mM) , 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-karbodiimido hidrochlorido (70 mg, 0.37 mM) ir trietilamino (107 ul, 0.77 mM) sausame DMF (1.6 ml) maišomas 18 vai. 25°C tempera-tūroje. Reakcijos mišinys išpilamas ant ledo, ekstrahuojamas etilo esteriu (2x50 ml) , praplaunamas 10% citrinos rūgštimi, druskos tirpalu, išdžiovinamas Na₂S0₄ ir išgarinus vakuume gaunamas 63.

[0264] ^XH BMR (300 MHz, CDCl₃) 8 1.14 (2H, m), 1.46 (9H, s), 1.7 (2H, m), 1.86 (2H, m), 2.02 (2H, m), 2.58 (2H, d), 2.66 (3H, m), 3.36 (5H, m), 3.68 (2H, m), 3.93 (1H, d), 4.07 (2H, m), 7.02 (1H, m), 7.20 (2H, m), 7.29 (2H, m).

[0265] l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -(1H-tetrahidropirimidin-2-ono)-3-acetil-3(R)-(2-feniletil)p-alanino (64) gavimas

[0266] 63 (168 mg, 0.31 mM) tirpalas vandenyje (15 ml) atšaldomas iki 0°C, pridedama 1N LiOH (1.2 ml) ir maišoma per naktį 25°C temperatūroje. Po to vakuume nugarinamas THF, liekana parūgštinama 10% citrinos rūgštimi, ekstrahuojama etilo acetatu (2x50 ml) , praplaunama druskos tirpalu, išdžiovinama Na₂S0₄ ir išgarinus vakuume gaunamas 64. l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -[ (1H-tetrahidropirimidin-2-ono)-3] -acetil-3(R)-(2-feniletil) (3-alanino (65) gavimas 64 (128 mg) tirpalas metileno chloride (8 ml) ir anizole (1.5 ml) atšaldomas iki -20°C ir 5 min. bėgyje sudedama trifluoracto rūgštis (8 ml). Reakcijos mišinys maišomas 1 vai. -5°C temperatūroje, po to nugarinamas vakuume. Liekana chromatografuojama ant Si0₂ (etanolis-H₂0 NH₂OH) ir gaunamas 65. Analizės duomenys apskaičiuti C₂₄H₃₆N₄0₄^*2.5H₂0: C, 57.84; H, 8.65, N, 11.73

[0267] Rasta: C, 57.94; H, 8.39, N, 11.47

[0268] l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -[ (1H-tetrahidropirimidin-2-ono)-3] -acetil-3(R)-(2-indol-3-il)-etil] 0-alanino (66) gavimas

[0269] Iš esmės pagal metodiką, aprašytą 63 gavimui, išskyrus tai, kad vietoje 3 (R) - (2-feniletil) (3-alanino metilo esterio hidrochlorido buvo naudojamas ekvivalentinis kiekis 3(R)-(2-indol-3etil) p-alanino etilo esterio ir pagal metodikas, aprašytas 64 ir 65 gavimui, buvo gautas 66.

[0270] C, 56.3; H, 8.0, N, 12.6

[0271] Rasta: C, 56.3; H, 7.9, N, 12.2

[0272] l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -[ (1H-tetrahidropirimidin-2-ono)-3] -acetil-3( R)-metil- p-alanino (66) gavimas

[0273] Iš esmės pagal metodiką, aprašytą 63 gavimui, išskyrus tai, kad vietoje 3 (R) - (2-feniletil) P~alanino metilo esterio hidrochlorido buvo naudojamas ekvivalentinis kiekis 3 (R) -metill- p-alanino hidrochlorido ir pagal metodikas, aprašytas 64 ir 65 gavimui, buvo gautas 67. l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -[ (1 H—

[0274] tetrahidropirimidin-2-ono) -3] -acetil-2 (R) -[ butil-sulfonilamino] -p-alanino (66) gavimas

[0275] Iš esmės pagal metodiką, aprašytą 63 gavimui, išskyrus tai, kad vietoje 3(R)-(2-feniletil)P_~alanino metilo esterio hidrochlorido buvo naudojamas ekvivalentinis kiekis 2(S)-butilsulfonilamino-p^-alanino hidrochlorido ir pagal metodikas, aprašytas 64 ir 65 gavimui, buvo gautas 68.

[0276] Metil-4(R)-benzil-2-oxazolidinono sukcinato (70) gavimas Į tirpalą, susidedanti, iš mono-metilsukcinato 69 (3.7 g, 28.2 mmol) , NEt₃ (4.0 ml, 28.2 mmol) ir THF (160 ml) maišant - 78°C C temperatūroje sulašinamas trimetilacetilchloridas (3.6 ml, 28.2 mmol). Po lū min. nuimama šaldymo vonia ir pakeičiama į ledo vonią. Po 1 vai. heterogeninis mišinys dar kartą atšaldomas iki -78°C ir per vamzdeli, supylamas ličio (R) - ( + )-4-benzil-2-oksazolidinono (28.2 mmol) tirpalas sausame THF (43 ml), gautas veikiant (R) -( + )-4-benzil-2-oksazoli-dinoną (5.0 g, 28.2 mmol) sausame THF (43 ml) -78°C temperatūroje n-BuLi (17.8 ml, 28.2 mmol, 1.6 M/heksane). Sudėjus medžiagas, reakcijos mišinys pašildomas per nakti, iki kambario temperatūros. Po to reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0, sočiu NaHC0₃, 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir išgarinamas vakuume. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, etilacetatas-heksanas 1:1) gaunamas grynas 70 baltos kristalinės medžiagos pavidalu.

[0277] PSC R_f=0.48 (30% etilacetatas/heksanas);

[0278] ^XH BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 7.30 (m, 2H) , 4.68 (m, 1H) , 4.21 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.28 (m, 2H) , 2.80 (dd, J=13 Hz ir 4 Hz, 1H), 2.73 (m, 2H)

[0279] Metil-4(R)-benzil-2-oxazolidinono-2(R)-(2-cianetil) sukcinato (71) gavimas

[0280] Į TiCl₄ (12.3 ml, 12.3 mmol, 1M CH₂C1₂) sausame CH₂C1₂ (83 ml) 0°C temperatūroje sudedamas Ti(IV) isopropoksidas (1.2 ml, 4.1 mmol). Po 15 min., sula-šinus diizopropiletilaminą (3 ml, 17.3 mmol) gaunamas tamsiai rudas tirpalas. Po 10 min., pridedamas 70 (4.8 ml, 16.5 mmol) ir maišoma 1 vai 0°C temperatūroje. Po to i, tamsų tirpalą sulašinamas

[0281] akrilonitrilo (4.3 ml, 66 mmol) tirpalas ir maišoma 72 vai. 0°C temperatūroje. Reakcija sustabdoma pridėjus sotaus NH₄C1 tirpalo 0°C ir ekstrahuojama CH₂C1₂. Sujungti organiniai sluoksniai praplaunami sočiu NaHC0₃, ir druskos tirpalu, išdžiovinama MgS0₄ ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 25% etilacetatas/heksanas) gaunamas 71 kristalinės medžiagos pavidalu.

[0282] PSC R_f=0.22 (20% etilacetatas/heksanas);

[0283] lH BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 7 .40-7 .20 (m, 5H) , 4.70 (m, 1H), 4.25 (m, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.30 (dd, J=13 Hz ir 4 Hz, 1H) , 2.93 (dd, J=17 ir 10 Hz, 1H), 2.80 (dd, J=17 ir 10 Hz, 1H) , 2.55 (dd, J=13 ir 4 Hz, 1H), 2.43 (t, J=7 Hz, 2H) , 2.10 (m, 1H), 1.90 (m, 1H) .

[0284] Metil-4(R)-benzil-2-oxazolidinono-2(R)-(3-aminopropil-) sukcinato (72) gavimas

[0285] Mišinys, susidedantis iš 71 (2.0 g, 5.8 mmol), Pt0₂ (0.8 g), CH₃OH (50 ml), ir CHC1₃ (5 ml) kratomi Parr aparate kambario temperatūroje vandenilio atmosferoje (60 PSI), 3 valandas. Reakcijos mišinys filtruojamas per celito sluoksnį ir sukoncentravus gaunamas nevalytas 72 amino^*HC1 geltonos alyvos pavidalu.

[0286] PSC Rf=0 .50 (CH₂Cl₂/CH₃OH/AcOH 9:1:1).

[0287] Nevalytas 72 amino^*HC1 (2.0 g, _~5.8 mmol), acetonit-rilas (250 ml) ir NaHC0₃ (5 g) per naktj, maišomi kambario temperatūroje. Po to reakcijos mišinys filtruojamas ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagėlis, etilacetatas) gaunamas laktamas 73 bespalvės kristalinės medžiagos pavidalu. PSC R_f=0.22 (etilacetatas);

[0288] ¹H BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 5.82 (bs, 1H) , 3.70 (s, 3H) , 3.33 (m, 2H), 2.88 (dd, J=16 ir 4 Hz, 1H), 2.75 (m, 1H) , 2.58 (dd, J=16 Hz ir 7 Hz, 1H) , 2.10- 1.60 (m, 4H) .

[0289] Metil [ l-N-BOC-2-(Piperidin-4-il)-etil] -2-piperidono-3(R)] acetato (74) gavimas

[0290] Į maišomą 73 (1.1 g, 6.4 mmol) tirpalą bevandeniame DMF (60 ml) , -15°C temperatūroje sulašinamas NaN(TMS)₂ (6.4 ml, 6.4 mmol, lM/heksanas), po to nuimama šaldymo vonia. Po 10 minučių sudedamas jodidas (2.3 g, 7.0 mmol) ir kambario temperatūroje maišoma 4 valandas. Po to reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0 (2x) ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silikagėlis, 40% etilacetatas/heksanas) gaunamas 74 alyvos pavidalu.

[0291] PSC R_f=0.29 (40% etilacetatas/heksanas).

[0292] [ l-N-BOC-2-(Piperidin-4-il)-etil] -2-piperidono-3(R)] acto rūgšties (75) gavimas

[0293] Panaudojant 50 gavimo iš 4 9 procedūrą, iš 7 4 (0.44 g, 1.1 mmol) gaunamas 75 alyvos pavidalu.

[0294] PSC Rf=0 .52 (CH₂Cl_2/CH₃OH/AcOH 9:0.5:0.5).

[0295] [ l-[ N-Boc-2-(Piperidin-4-il)-etil] -2-piperidono-3 (R)] acetil-3(R)-metil-p-alanino etilo esterio (76) gavimas

[0296] Panaudojant 55 gavimo iš 50 procedūrą, 75 (0.40 g, 1.1 mmol) prijungtas prie 54 (0.27 g, 1.6 mmol) ir po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, etilo acetatas) gautas (76) alyvos pavidalu.

[0297] PSC R_f=0.20 (etilo acetatas).

[0298] l-[ N- (Boc-2- (piperidin-4-il) etil] -2-piperidono-3 (R)] - acetil-3(R)-etil-3-alanino (77) gavimas

[0299] Panaudojant 56 gavimo iš 55 procedūrą, iš 76 (0.30 g, 0.64 mmol) gaunamas 77 alyvos pavidalu.

[0300] PSC Rf=0 .24 (CH₂Cl_2/CH₃OH/HOAc 9:0.5:0.5);

[0301] ^:H BMR (400 NHz, CDC1₃) 8 6.93 (m, 1H) , 4.32 (m, 1H) , 4.06 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 3.29 (m, 2H) , 2.70-2.50 (m, 6H), 2.38 (m, 1H) , 2.00-1.20 (m, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (d, J=6Hz, 3H), 1.06 (m, 2H).

[0302] [ l-[ 2- (piperidin-4-il) etil] -2-piperidono-3(R)-metil-3-alanino (78) gavimas

[0303] Panaudojant 57 gavimo iš 56 procedūrą, iš 77 (0.24 g, 0.53 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10 :1: l/etanolis/H20/NH40H) gaunamas 78 amorfi-nės medžiagos pavidalu.

[0304] BMR (400 MHz, D₂0) 5 4.19 (m, 1H) , 3.40 (m, 6H) , 3.00 (m, 2H), 2.70 (m, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.47 (m, 2H), 2.30 (dd, J=14 ir 8Hz, 1H), 2.00 (m, 2H), 1.92 (m, 2H), 1.79 (m, 1H), 1.61 (m, 4H), 1.45 (m, 2H), 1.18 (d, J=7Hz, 3H).

[0305] N-Cbz-Gly-3(R)-metil-p-alanino etilo esterio (79) gavimas Į tirpalą, susidedanti iš Cbz-Gly (0.94 g, 4.5 mmol) , 4-metilmorfolino (1.1 ml, 4.9 mmol), ir etilo acetato (50 ml) , -15°C temperatūroje pridedama izobutilo chlo-roformiato (0.61 ml, 4.7 mmol) (sudedamas iš karto visas kiekis). Po 15 min pridedama 54 (0.75g, 4.5 mmol) tirpalo etilo acetate (1 ml) ir per nakti, laikoma kambario temperatūroje. Po to, reakcijos mišinys plaunamas 1M NaHS0₄, druskos_^- tirpalu, praskiestu NaHC0₃ ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄, ir sukoncentravus gaunamas 7 9 geltonos alyvos pavidalu.

[0306] ^XH BMR (300 MHz, CDCL₃) 8 7.48 (m, 5H) , 6.73 (m, 1H) , 5.58 (m, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.48 (m, 1H), 4.30 (q, J=7 hz, 2H), 2.62 (m, 2H), 1.37 (t, J=7 Hz, 3H).

[0307] Gly-3(R)-metil-p-alanino etilo esterio acto rūgšties druskos (80) gavimas

[0308] Mišinys, susidedantis iš 79 (1.4 g, 435 mmol), 10% AcOH/CH₃OH (50 ml) ir 20 % Pd (OH) 2 per nakti, kratomas Parr aparate vandenilio atmosferoje (60 PSI) . Po 24 vai. reakcijos mišinys nufiltruojamas per celito sluoksnį, o gautas filtratas sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 5:3:1 CH₂Cl₂/etanolis/HOAc) gaunama 80 amorfinės medžiagos pavidalu.

[0309] 4(S)-Benzil-2-oksazolidono-4-(N-BOC-piperidin-4-il)-2(R)-(prop-2-en) butirato (81) gavimas

[0310] Į maišomą 45 (2.5 g, 5.8 mmol) tirpalą THF (50 ml),

[0311] -78°C, temperatūroje pridedama ličio bis(trimetil-silil) amino (7.0 ml, 7.0 mmol, lM/heksanas) , o po to, pridedama alilo bromido (2.5 ml, 29 mmol). Sudėjus aukščiau paminėtas medžiagas, nuimama šaldymo vonia ir maišoma 0°C 1.5 valandos. Reakcija sustabdoma praskiestu NH₄C1, praskiedžiama EtOAc, praplaunama

[0312] praskiestu NaHC0₃, 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu, išdžiovinama MgS0₄ ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 15% EtOAc/heksanas) gaunamas 81 bespalvės alyvos pavidalu.

[0313] PSC R_f=0.53 (30% ETOAc/heksanas);

[0314] ^XH BMR (300 NHz, CDCL₃) 8 7.40-7.20 (m, 5H) , 5.82 (m, 1H), 5.10 (m, 2H), 4.80 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 4.07 (m, 2H) , 3.90 (m, 1H) , 3.31 (dd, J=13 ir 3 Hz, 1H) , 2.68 (m, 2H), 2.48 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 1.90-1.20 (m, 7H), 1.47 (s, 9H), 1.10 (m, 2H).

[0315] 4-(N-Bocpiperidin-4-il)-2(R)-(prop-2-en) sviesto rūgšties (82) gavimas

[0316] Į tirpalą, susidedanti, iš 81 (1.8 g, 3.8 mmol), 30% H₂0₂ (8.5 ml, 83 mmol), THF (41 ml) ir H₂0 (12 ml) kambario temperatūroje sudedamas LiOH tirpalas (14 ml, 14 mmol, 1N). Po 2 vai, LiOH perteklius neutrali-zuojamas sulašinant 0°C temperatūroje 10% NaHS0₄ tirpalą. Po to reakcijos mišinys parūgštinamas 5% KHS0₄ ir ekstrahuojamas EtOAc. Organinis EtOAc sluoksnis praplaunamas druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunamas 82 bespalvės alyvos pavidalu.

[0317] PSC Rf=0 . 7 9 (10% CH30H/Et0Ac) .

[0318] 4- (N-B0C-piperidin-4-il)-2(R)-(prop-2-enas)butirat] - Gly-3(R)-metil-p-alanino etilo esterio (83) gavimas

[0319] Panaudojant analogišką metodiką, kaip ir 50 konversijos i, 55 atveju, 82 (1.3 g, 2.5 mmol) buvo prijungtas prie 80 (0.62 g, 2.5 mmol) ir po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10% izopropanolis/heksanas) gautas 83.

[0320] PSC Rf=0. 50 ( 20% izopropanolis/ heksanas) ;

[0321] ^XH BMR ( 300 NHz, CDCl₃) 6 6. 67 ( bd, J=8 Hz, 1H) , 6. 37 ( m, 1H) 5. 72 ( m, 1H) , 5. 02 ( m, 1H) , 4. 35 ( m, 1H) ,

[0322] 4. 13 ( q, J=7 Hz, 2H), 4. 03 ( m, 1H), 3. 88 ( m, 2H), 2. 63 ( m, 2H), 2. 51 ( m, 2H), 2. 51 ( m, 2H), 2. 35 ( m, 1H), 2. 20 ( m, 2H), 1. 70- 1. 20 ( m, 7H), 1. 44 ( s, 9H), 1. 26 ( t, J=15 Hz, 3H), 1. 07 ( m, 2H).

[0323] [ 3-[ 2-( N-( BOC- Piperidin- 4- il) etil] - 50hidroksi- 2-pirolidinonon- 1] acetylpiperidono- 3( R)- metil- p- alanino etilo esterio ( 84) gavimas

[0324] Į tirpalą, susidedanti, iš 83 ( 0. 74 g, 1. 5 mmol), THF ( 12. 2 ml), H₂0 ( 9. 2 ml) ir NaI0₄ ( 0. 82 g, 3. 8 mmol) kambario temperatūroje pridedamas 0s0₄ ( 0. 96 ml, 80 ( įmol; 2. 5% tretbutanolis) . Po 2 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas eteriu ir praplaunamas H₂0, 10% Na_2S203, druskos tirpalu, išdžiovinamas ( MgS04) ir sukoncentravus gaunamas 84 geltonos alyvos pavidalu. PSC Rf=0. 26 ( 20% izopropanolis/ heksanas)

[0325] [ 3-[ 2-( N-( BOC- Piperidin- 4- il) etil] - 5- hidroksi- 2-pirodinonon- 1] acetylpiperidono- 3( R)- metil- p- alanino

[0326] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir gaunant 56 iš 55, iš 84 ( 0. 73 g, 1./ 5 mmol) buvo gautas 85 blyškiai geltonos spalvos putų pavidalu.

[0327] * H BMR ( 300 MHz, CDC1₃) 5 5. 23 ( d, J=5 Hz, 1H) , 4. 58 ( d, J=16 Hz, 1H) 4. 32 ( m, 1H), 4. 05 ( m, 2H), 3. 70 ( d, J=16 Hz, 1H), 2. 80- 2. 40 ( m, 6H), 2. 22 ( m, 1H), 2. 00-1. 00 ( m, 9H), 1. 45 ( s, 9H), 1. 27 ( t, J=15 Hz, 3H)

[0328] [ 3-[ 2-( N-( Piperidin- 4- il) etil] - 2- pirolidinonon-1] acetyl- 3( R)- metil- 3- alanino ( 8 6) gavimas

[0329] Į maišomą 85 tirpalą (0.61 g, 1.3 miriol) CH₂C1₂ kambario temperatūroje supilami CF₃COOH (5.8 ml) ir trietil-silano (0.8 ml, 5.2 mmol) tirpalai. Po 2 vai. reakcijos mišiny^ sukoncentruojamas ir likusi CF₃COOH pašalinama aceotropinės distiliacijos su toluolu pagalba. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10:1:1 etanolis/H₂0/NH₄0H) gaunamas 86 bespalvės kietos medžiagos pavidalu.

[0330] PSC Rf=0 .17 (9:1:1 etanolis/H20/NH40H) ;

[0331] l H BMR (300 MHz, CD₃OD) 8 4.20 (m, 1H) , 3.97 (d, J=17 Hz, 1H), 3.85 (d, J=17 Hz, 1H), 3.40 (m, 4H), 2.95 (m, 2H) , 2.52 (m, 1H), 2.30 (m, 2H), 2.00-1.30 (m, 11H), 1.20 (d, J=7 Hz, 3H).

[0332] 2 - (2,3,4,5,6-tetrahidro-l,l-diokso-2H-l,2-tiazin-2-il)prop-2-eno (88) gavimas

[0333] Į 87 (J.O.C. 52, p. 2162 (1987) E.H.White, H. M.Lim)

[0334] (0.35 g, 2.6 mmol) tirpalą DMF 0°C temperatūroje sulašinamas NaN(TMS)₂ (3.9 ml, 3.9 mmol); 1M tirpalas heksane. Po 30 min, supilamas alilo bromidas (0.45 ml, 5.2 mmol) ir maišoma 30 min. Reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu, praplaunamas sočiu NH₄C1 ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 30% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 88 bespalvės alyvos pavidalu.

[0335] :H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 5.80 (m, 1H) , 5.25 (m, 2H) , 3.78 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.02 (m, 2H), 2.21 (m, 2H), 1.68 (m, 2H).

[0336] 2-[ 6-[ 2- (N-BOC-Piperidin-4-il) etil] -(3,4,5,6-tetrahidro-1,l-diokso-2H-l,2-tiazin-2-il)prop-2-eno (89) gavimas

[0337] Į maišomą 88 (0.34 g, 1.93 mmol) tirpalą THF (10 ml) -78°C temperatūroje sulašinamas n-BuLi (1.45 ml, 2.3 mmol; 1.6 M/heksane) tirpalas. Po 30 min. i, reakcijos mišinį paeiliui _^sudedamas l-metil-2-pirolidonas (1 ml) ir 10 (0.86 ml, 2.7 mmol) THF (10 ml) ir temperatūra pakeliama iki -23°C. Reakcijos mišinys laikomas 2 vai. -23°C temperatūroje ir reakcija sustabdoma pridedant sotaus NH₄C1 tirpalo. Po to reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0 ir druskos tirpalu, išdžiovinamas ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 30% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 89 kristalinės medžiagos pavidalu.

[0338] PSC R_f=0.27 (30% etilo acetatas/heksanas);

[0339] ^XH BMR (400 MHz, CDC1₃) 6 5.80 (m, 1H), 5.25 (m, 2H) , 4.07 (m, 2H), 3.78 (m, 2H), 3.34 (m, 2H) , 3.17 (m, 1H), 3.02 (m, 1H), 2.82 (m, 2H), 2.66 (m, 2H), 2.24-2.04 (m, 3H), 1.89 (m, 2H), 1.70-1.35 (m, 7H), 1.08 (m, 2H).

[0340] 2-[ 6-[ 2- (N-BOC-Piperidin-4-il) etil] - (3, 4,5,6-tetrahidro-1,l-diokso-2H-l,2-tiazin-2-il)acetaldehido (90) gavimas

[0341] Į tirpalą, susidedanti, iš 89 (0.50 g, 1.29 mmol), THF (16 ml) , H₂0 (12 ml) ir NaI0₄ (0.69 g, 3.2 mmol) pridedamas 0S0₄ (1.0 ml, 0.1 mmol; 2.5% tretbutanolis). Po 3 vai. reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0, 5% KHS0₄, sočiu NaHC0₃, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentravus gaunamas aldehidas 90 alyvos pavidalu.

[0342] lH BMR (400 MHz, CDCI₃) 5 9.64 (s, 9H) , 4.07 (m, 2H) , 4.00 (d, J=17 Hz, 1H), 3.89 (d, J=17 Hz, 1H) , 3.62 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.66 (m, 2H) , 2.20 (m, 1H), 2.00-1.35 (m, 9H), 1.1 (m, 2H).

[0343] 2-[ 6-[ 2- (N-BOC-Piperidin-4-il) etil] - (3, 4,5,6-tetrahidro-1,l-diokso-2H-l,2-tiazin-2-il)acto rūgšties (91) gavimas

[0344] Į maišomą 89 (0.44 g, 1.13 mmol) tirpalą acetone (10 ml) 0°C temperatūroje per tris kartus sudedamas Jonės reagentas (1 ml) . Po 5 min. Jonės reagento perteklius pašalinamas pridedant izopropanolio ir reakcijos mišinys praskiedžiamas H₂0. Reakcijos mišinys ekstrahuojamas etilo acetatu, organinis sluoksnis praplaunamas druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 20:1:1 CH₂Cl₂/CH₃OH/AcOH) gaunamas 91 šviesiai geltonos alyvos pavidalu.

[0345] 2-[ 6-[ 2-(N-BOC-Piperidin-4-il) etil] -(3,4,5,6-tetrahidro-1,l-diokso-2H-l,2-tiazin-2-il)acetil-3-(R)-metil-p-alanino etilo esterio (92) gavimas

[0346] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir gaunant 55 iš 50, prie 91 (98 mg, 0.24 mmol) buvo prijungtas 54 (120 mg, 0.71 mmol), ir po greitaeigės chromatografijos (silicio dioksidas, etilo acetatas) buvo gautas 92 geltonos alyvos pavidalu.

[0347] PSC R_f=0.28 (etilo acetatas);

[0348] LH BMR (300 NHz, COCl₃) 5 7 .08 (m, 2H) , 4.37 (m, 1H) , 4.08 (m, 2H) , 3.89 (d, J=17 Hz, 1H) , 3.77 (d, J=17 Hz, 1H), 3.60 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 2.88 (m, 1H) , 2.68 (m, 2H), 2.52 (m, 2H), 2.20-1.00 (m, 13H), 1.27 (t, J=7 Hz, 3H), 1.25 (t, J=7 Hz, 3H).

[0349] 2-[ 6-[ 2-(N-BOC-Piperidin-4-il) etil] -(3,4,5,6-tetrahidro-1,l-diokso-2H-l,2-tiazin-2-il)acetil-3-(R)-metil-p-alanino (93) gavimas

[0350] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir gaunant 56 iš 55, iš 92 (76 mg, 0.15 mmol) buvo gautas 93 geltonos alyvos pavidalu.

[0351] ^XH BMR (300 MHz, CDC1₃) 6 7.20 (m, ĮH) , 4.379 (m, 1H) , , 4.10 (q, J=7 Hz, 2H) , 4.08 (m, 2H) , 3.92 (d, J=17 Hz, 1H), 3.74 (m, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.77 (m, 2H) , 2.59 (m, 2H) , 2.10 (m, 1H), 2.10-1.10 (m, 12H) , 1.27 (t, J=7 Hz, 3H) , 1.25 (t, J=7 Hz, 3H) .

[0352] 2-[ 6-[ 2- (Piperidin-4-il) etil] -(3,4,5, 6-tetrahidro-l, 1-diokso-2H-l, 2-tiazin-2-il)acetil-3-(R)-metil- P-alanino (94) gavimas

[0353] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir gaunant 57 iš 56, iš 93 (61 mg, 0.12 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10:1:1 etanolis/NH₄0H/H₂0) buvo gautas 94 kietos, baltos medžiagos pavidalu.

[0354] PSC Rf=0 .2 6 (10:1:1 etanolis/NH40H/H20) ;

[0355] ^XH BMR (300 MHz, D₂0) 5 4.08 (m, 1H) , 3.71 (m, 2H) , , 3.40 (m, 1H), 3.29 (m, 2H), 3.14 (m, 2H), 2.83 (m, 2H), 2.25 (m, 2H), 2.12 (m, 1H) , 1.90-1.20 (m, 12H), 1.05 (t, J=7 Hz, 3H) .

[0356] l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -3-propanol-2-pirolidinono (95) gavimas

[0357] 20 (1.20 g, 3.6 mmol) tirpalas THF (3 ml) supilamas i, borano-dimetil sulfido (3.6 mmol) tirpalą 3 ml THF 0°C temperatūroje ir maišomas 2.5 vai. prie 0°C. Po to, 0°C temperatūroje, supilamas H₂0 (0.15 ml) , 10N vandeninis NaOH tirpalas (0.65 ml) , THF (1 ml) ir C₂H₅OH (0.36 ml) , maišant reakcijos mišinio temperatūra pakeliama iki 23°C, ir pridedamas 30% H₂0₂ (0.36 ml) . Šis tirpalas pašildomas iki 55°C ir maišomas 2 valandas. Po to, reakcijos mišinys atšaldomas, praskiedžiamas K₂C0₃ ir atskiriamas organinis sluoksnis. Išdžiovinus MgS0₄, pašalinamas tirpiklis. Gauta liekana valoma greitaeigės chromatografijos pagalba ant silikagelio, eliuojant 10% MeOH/EtOAc, ir gaunamas 95. Rf 0.3 (silikagelis, 10% MeOH/EtOAc). 1-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il)etil] -3-propanoinė-rūgštis-2-pirolidinonas (96) 95 (1.14 mmol) tirpalas acetone (5 ml) atšaldomas iki -15°C ir veikiamas Jonės reagentu, kol gintarinė spalva pasikeičia i, rudą. Reakcijos mišinys praskiedžiamas sočiu NaHC0₃ tirpalu iki pH 9 ir ekstrahuojamas EtOAc. Vandeninė fazė KHS0₄ tirpalu parūgštinama iki pH 3 ir ekstrahuojama keliomis EtOAc porcijomis. Apjungtas organinis ekstraktas išdžiovinamas MgSO_^ ir, pašalinus tirpiklį, gaunamas 96. Rf 0.3 (silikagelis, 9/1/1 CH2Cl2/MeOH/HOAc) .

[0358] [ l-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinonas-3] - propanoil-(3-alanino etilo esteris (97)

[0359] Tirpalas, susidedantis iš 96 (0.55 mmol), {3-alanino etilo esterio HC1 (0.825 mmol), N-metilmorfolino (1.65 mmol), CH₃CH (5 ml) 23°C veikiamas BOP

[0360] (0.825 mmol) ir gautas tirpalas maišomas 48 valandas. Reakcijos mišinys praskiedžiamas EtOAC, praplaunamas 10% KHS0₄, druskos tirpalu, H₂0, druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir pašalinamas tirpiklis. Gauta liekana valoma greitaeigės chromatografijos pagalba ant silikagėlio, eliuojant 30% acetono/heksano mišiniu ir gaunamas 97 skaidrios alyvos pavidalu.

[0361] Rf 0.25 (silikagelis, 30% acetonas/heksanas).

[0362] [ Cl-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinonas-3] - propanoil- p-alaninas (98)

[0363] Tirpalas, susidedantis iš 97 (0.29 mmol), LiOH.H_zO (1.45 mmol), THF/Me0H/H₂0 (1:1:1, 3 ml) maišomas 2 valandas, po to praskiedžiamas EtOAc ir praplaunamas 10% KHS0₄, H₂0, druskos tirpalu ir išdžiovinamas MgS0₄. Pašalinus tirpiklį, gaunamas 98 alyvos pavidalu. Rf 0.5 (silikagelis, 9/1/1 CH2Cl2/MeOH/HOAc) .

[0364] [ l-[ 2-(Piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinonas-3] - propanoil-p-alaninas.HCl (99)

[0365] 98 (0.18 mmol) tirpalas EtOAc (2 ml) atšaldomas iki -78°C ir veikiamas dujiniu HC1. Po 0.5 valandos, pašalinus tirpikli,, kietos baltos medžiagos pavidalu gaunamas 99.Rf 0.22 (silikagelis, 10/1/1 EtOH, NH₄OH, H20) .

[0366] N-BOC-4-piperidino metilo jodido (101) gavimas

[0367] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 10 iš 9, iš 100 (12.3 g, 57 mmol) (Carr ir kt., EP Nr. 317997, Gegužės 31, 1989) po greitaeigės chromatografijos (silikagelis, 15% EtOAc/heksanas) buvo gautas 101. R_f=0.38 (10% EtOAc/heksanas).

[0368] ¹R BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 1.15 (m, 2H) , 1.48 (s, 9H) , 1.62 (m, 1H), 1.84 (m, 2H), 2.70 (m, 2H), 3.11 (m, 2H), 4.12 (m, 2H) .

[0369] N-BOC-piperidinometiltrifenilfosfonio jodido (102) gavimas

[0370] Tirpalas, susidedantis iš 101 (5.1 g, 15.7 mmol), CH₃CN (75 ml) ir trifenilfosfino (4.5 g, 17.32 mmol) 60 valandų šildomas 80°C temperatūroje. Atšaldytas reakcijos mišinys sukoncentruojamas, likusi alyva sumaišoma su eteriu ir, nugarinus eteri, vakuume, gaunamas 102 geltonų putų pavidalu.

[0371] ^XH BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 7.31 (m, 15H) , 4.10 (m, 2H) , 3.97 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.00-110 (m, 5H), 1.48 (s, 9H) .

[0372] 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il)etileno] -2-(metoksi)piridino

[0373] (104) gavimas

[0374] Į 102 (5.0 g, 8.5 mmol) suspenziją THF 0°C sulašinamas NaN(TMS)₂ (9.4 ml, 9.4 mmol) tirpalas. Po 15 min. 103 (0.97 g, 7.0 mmol) (Tetrahedron Letters (1988) 29, 773), ištirpintas THF (3 ml), sulašinamas i, geltonai/ oranžini, homogenini, reakcijos mišinį. Po 1 vai. nuimama šaldymo vonia ir maišoma 30 min. Reakcija sustabdoma pridedant H₂0 ir eterio. Vandeninis sluoksnis reekstrahuojamas eteriu. Organiniai sluoksniai apjun-giami ir praplaunami druskos tirpalu, išdžiovinami Na₂S0₄ ir sukoncentruojami. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 15% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 104 bespalvės alyvos pavidalu.

[0375] ^XH BMR ( 300 MHz, CDC1₃) 5 8. 09 ( dd, J=5 ir 2 Hz, 1H) , 7. 42 ( dd, J=7 ir 2 Hz, 1H), 6. 87 ( dd, J=7 ir 5 Hz, 1H),

[0376] 6. 37 ( d, J=12 Hz, 1H) , 5. 58 ( dd, J=12 ir 10 Hz, 1H) , 4. 10 ( m, 2H), 3. 95 ( s, 3H) , 2. 70 ( m, 2H), 2. 50 ( m, 1H), 1. 80- 1. 20 ( m, 4H), 1. 47 ( s, 9H).

[0377] 3-[ 2-( N- BOC- piperidin- 4- il) etil] - 2- metoksi- piridino ( 105) gavimas

[0378] Tirpalas, susidedantis iš 104 ( 1. 4 g, 4. 3 mmol) , etilo acetato ( 22 ml) ir 10% Pd/ C ( 0. 27 g, 20% pagal svorį) vandenilio atmosferoje ( 1 atm) 4 valandas maišomas kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys filtruojamas per celito sluoksnį ir, sukoncentravus filtratą, gaunamas 105 bespalvės neskaidrios alyvos pavidalu.

[0379] LH BMR ( 300 MHz, CDC1₃) 6 8. 02 ( dd, J=5 ir 2 Hz, 1H) , 7. 36 ( dd, J=7 ir 2 Hz, 1H) , 6. 80 ( dd, J=7 ir 5 Hz, 1H) , 4. 10 ( m, 2H), 3. 94 ( s, 3H), 2. 69 ( s, 3H), 2. 58 ( m, 2H), 1. 72 ( m, 2H), 1. 55- 1. 35 ( m, 3H) , 1. 48 ( s, 9H), 1. 13 ( m, 2H) .

[0380] 3-[ 2-( N- BOC- piperidin- 4- il) etil] - 2- piridon- l- ilo ( 106) gavimas

[0381] Į 105 ( 0. 81 g, 2. 5 mmol) tirpalą sausame CH₃CN ( 13 ml) sudedamas NaI ( 0. 94 g, 6. 3 mmol), po to, chlormetil-silanas ( 0. 80 ml, 6, 3 mmol susidaręs nepermatomas geltonas tirpalas kaitinamas 60°C temperatūroje 2 valandas. Atšaldžius reakcijos mišinį, reakcija sustabdoma metanoliu ( 50 ml), pamaišoma 10 min. ir sukoncentruojama. Liekana ištirpinama dioksano/ H20 ( 6. 7 ml/ 3. 3 ml) mišinyje ir veikiama 1N NaOH ( 5. 0 ml, 5. 0 mmol). Tirpalas atšaldomas iki 0°C, pridedama B0C₂0 ( 1. 1 g, 5. 0 mmol) ir nuimama šaldymo vonia. Reakcijos

[0382] turinys maišomas per nakti, ir liekana, gauta nugarinus dioksaną praskiedžiama H₂0 (10 ml) ir etilo acetatu (50 ml) ir parūgštinama 20% KHS0₄ iki pH_~1.0. Organinis sluoksnis atskiriamas, praplaunamas H₂0 ir druskos tirpalu, išdžiovinamas (MgS0₄) ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 2:1 CH₂Cl_2/acetonas) gaunamas 106 blyškiai geltonos kietos medžiagos pavidalu.

[0383] PSC R_f=0.19 (2:1 CH₂Cl_2/acetonas);

[0384] XH BMR (400 MHz, CDC1₃) 5 7.30 (m, 3H) , 6.23 (t, J=7 Hz, 1H), 4.04 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 1.74 (m, 2H) , 1.56 (m, 2H), 1.48 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.16 (m, 2H) .

[0385] (3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-piridon-l-il} aceto

[0386] (107) gavimas

[0387] Į maišomą 106 (0.44 g, 1.4 mmol) tirpalą sausame DMF (7.2 ml) 0°C sulašinamas NaN(TMS)₂ (2.1 ml, 2.1 mmol), lM/heksanas) . Po 30 minučių i, reakcijos mišini, sulašinamas etilo bromacetatas (0.79 ml, 7.2 mmol). Dar po valandos reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0.5% KHS0₄, sočiu NaHC0₃ ir druskos tirpalu, džiovinama MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 45% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 107 bespalvės alyvos pavidalu.

[0388] PSC R_f=0.33 (60% etilo acetatas/heksanas); 5 7.20 (dd, J=6 ir 1 Hz, 1H), 7.11 (dd, J=7 ir 2 Hz, 1H) , 6.15 (t, J=7 Hz, 1H) , 4.62 (s, 2H), 4.24 (q, J=7 Hz, 2H) , 4.04 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.52 (m, 2H), 1.78 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.13 (m, 2H).

[0389] (3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-piridon-l-il} acto rūgšties (108) gavimas

[0390] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 56 iš 55, iš 107 (0.51 g, 1.3 mmol) bespalvių putų pavidalu gaunamas 10 8.

[0391] PSC Rf=0 .58 (9:1:1 CH2Cl2/CH3OH/HQAc) .

[0392] { 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-piridon-l-il} acetil-3(R)-metil-|3-alanino etilo esterio (109) gavimas

[0393] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 16 iš 15, iš 108 (0.15 g, 0.41 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, etilo acetatas) gaunamas 109 vaško konsistencijos pavidalu.

[0394] ^XH BMR (400 MHz, CDC1₃) 6 7.24 (dd, J=7 ir 2 Hz, 1H) , 7.21 (dd, J=7 ir 2 Hz, 1H), 7.07 (pld, J=8 Hz, 1H), 6.19 (t, J=7 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H) , 4.30 (m, 1H), 4.08 (q, J=7 Hz, 2H), 4.08 (m, 2H) , 2.69 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.51 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.43 (m, 1H), 1.23 (t, J=7Hz, 3H) , 1.22 (d, J=7 Hz, 3H) , 1.13 (m, 2H) .

[0395] { 3-[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-piridon-l-il} acetil-3 (R)-metil- jB-alanino (110) gavimas

[0396] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 56 iš 55, iš 109 (0,19 g, 0.41 mmol) gaunamas 110 bespalvės alyvos pavidalu. PSCR_f=0,59 (9.5:0.5:0.5) CH2Cl2/CHpH/HOAc) .

[0397] (3-[ 2-(Piperidin-4-il) etil] -2-piridon-l-il] acetil-3 (R)-metil-p-alanino, (111) gavimas

[0398] Tirpalas, susidedantis iš (0.18 g, 0.40 mmol), CH₂C1₂ (2.0 ml), anizolo (86 įo.1, 0.80 mmol) ir trifluoracto rūgšties (2.0 ml) -15°C temperatūroje maišomas 15 min. Geltonos spalvos reakcijos mišinys sukoncentruojamas ir likusi trifluoracto rūgštis pašalinama aceotropinės distiliacijos su toluolu pagalba. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10/1.3/1.3 etanolis NH₄0H/H₂0) gaunamas 111 baltos amorfinės medžiagos pavidalu.

[0399] PSC Rf=0 .17 (10:1:1 etanolis NH40H/H20) ;

[0400] ^*H BMR (400 MHz, D₂0) 8 7.57 (dd, J=7 ir 1 Hz, 1H) , 7.49 (dd, J=7 ir 1 Hz, 1H), 6.51 (t, J=7 Hz, 1H), 4.66 (m, 2H), 4.20 (m, 1H), 3.42 (m, 2H), 2.97 (m, 2H), 2.59 (m, 2H), 2.46 (d, J=14 ir 6 Hz, 1H) , 2.32 (dd, J=14 ir 7 Hz, 1H), 2.00 (m, 3H) , 1.42 (m, 2H).

[0401] Į maišomą tirpalą, susidedanti, iš 4-piperidinetanolio 8 (15 g, 0.12 mmol), THF (500 ml) ir diizopropil-etilenamino, 0°C, supilamas benzilo chloroformiatas (16.5 ml, 0.12 mmol) ir inkubuojamas 1 vai. 0°C temperatūroje. Po to reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0 (2 kartus, 10% KHS0₄, ir druskos tirpalu, išdžiovinamas MgS0₄ ir, sukoncentravus, gaunamas 112 bespalvės alyvos pavidalu.

[0402] PSC R_f=0.60 (etilo acetatas);

[0403] ^XH BMR (300 MHz, CDC1₃) 6 7.35 (m, 5H) , 5.13 (s, 2H) , 4.18 (m, 2H), 3.70 (kv, J=7 Hz, 2H) , 2.80 (m, 2H), 1.80-1.50 (m, 5H), 1.19 (m, 2H).

[0404] N-Cbz-4-piperidino etilo jodido (113) gavimas

[0405] Panaudojant ta pačią metodiką, kaip ir gaunant 10 iš 9, iš 112 (30.6 g, 0.12 mol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 10% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 113 bespalvės alyvos pavidalu.

[0406] l-[ 2-(N-Cbz-piperidin-4-il) etil] - (2-pirolidinono) (114) gavimas

[0407] Į maišomą kambario temperatūroje 2-pirolidinono (11.0 g, 0.13 mmol) tirpalą sausame DMF (500 ml) sulašinamas NaN(TMS)₂ (129 ml, 129 mmol, 1M/THF). Po 10 min. \ reakcijos indą supilamas jodido 113 (24.1 g, 64.6 mmol) tirpalas DMF (50 ml). Po 1 valandos reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas H₂0, sočiu NaHC0₃ ir druskos tirpalu, išdžiovinamas (MgS0₄) ir sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, etilo acetatas) gaunamas 113 bespalvės alyvos pavidalu.

[0408] PSC R_f=0.16 (etilo acetatas);

[0409] ¹R BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 7.40-7.20 (m, 5H) , 5.12 (s, 2H), 4.19 (m, 2H), 3.34 (m, 2H), 2.77 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.04 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 1.47 (m, 3H), 1.15 (m, 2H) .

[0410] l-[ 2-(N-Cbz-piperidin-4-il) etil] -3-propen-2-il- (2-pirolidinono) (115) gavimas

[0411] Į maišomą tirpalą, susidedanti, iš 114 (8.0 g, 24.2 mmol) ir THF (180 ml), -78°C temperatūroje sulašinamas LDA (50 ml, 25 mmol, 0.5M/THF) . Po 15 min. sipilamas alilo bromidas (2.3 ml, 26.6 mmol). Po 1 valandos reakcijos mišinys 10 min. bėgyje pašildomas iki 0°C. Po to, reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir praplaunamas 5% KHS0₄ ir druskos tirpalu . išdžiovinamas MgS0₄ ir sukoncentruojamas. Po greita-

[0412] eigės chromatografijos (silicio oksidas, 50% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 115.

[0413] PSC R_f=0.65 (etilo acetatas);

[0414] ?H BMR (300 MHz, CDC1₃) 8 7.35 (m, 5H) , 5.80 (m, 1H) , 5.12 (m, 2H), 4.18 (m, 2H) , 3.33 (m, 4H), 2.80 (m, 2H) , 2.56 (m, 2H), 2.20 (m, 2H), 1.78 (m, 2H), 1.48 (m, 3H), 1.20 (m, 2H).

[0415] l-[ 2-(N-Cbz-piperidin-4-il) etil] -3-acto rūgšties-2-pirolidinono) (116) gavimas

[0416] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 15 iš 14, iš 115 (4.7 g, 12.7 mol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 9.5:0.5:0.5 CH₂C1₂/ CH₃OH/HOAc) gaunamas 116 šviesiai rudos spalvos alyvos pavidalu.

[0417] PSC Rf=0 . 63 (9.5:0.5:0.5 CH2Cl2/CH3OH/HOAc) ;

[0418] ^XH BMR (300 MHz, CDC1₃) 5 7.37 (m, 5H) , 5.15 (s, 2H) , 4.18 (m, 2H), 3.37 (m, 4H), 3.00-2.30 (m, 5H) , 1.77 (m, 2H), 1.46 (m, 3H), 1.18 (m, 2H).

[0419] l-[ 2-(N-Cbz-piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinonas-3]acetil-2-aminoetilfosfoninės rūgšties (117) gavimas

[0420] Tirpalas, susidedantis iš 116 (388 mg, 1.0 mmol), Et₃N (0.14 ml, 1.0 mmol) ir sauso dioksano (5 ml) , 0°C temperatūroje veikiamas izobutilo chloroformiatu (0.13 ml, 1.0 mmol). Reakcijos mišinys pašildomas kol išsilydo dioksanas. Į reakcijos indą kambario temperatūroje supilamas tirpalas, susidedantis iš 2-aminoetilfosfoninės rūgšties (125 mg, 1.0 mmol), Na₂C0₃ (106 mg) ir H₂0 (2 ml) . Po 4 valandų dioksanas nugarinamas, o liekana parūgštinama 1N HC1. Mišinys praplaunamas etilo acetatu (3x).

[0421] Vandeninis sluoksnis sukoncentruojamas iki sausumo ir gaunamas nevalytas 117.

[0422] PSC Rf=0 .15 (9:1:1 CH2C12/CH3OH/HOA c) .

[0423] l-[ 2-(piperidin-4-il) etil] -2-pirolidinonas-3] acetil-2-aminoetilfosfoninės rūgšties (117) gavimas

[0424] Nevalyta fosfoninė rūgštis 117 (464 mg) ištirpinama 10% HOAc/CH₃OH (20 ml) , po to pridedama Pd(OH)₂ (50 mg) ir mišinys per naktd, hidrinamas Parr aparate (50PSI) . Po 20 valandų reakcijos mišinys nufiltruojamas per celito sluoksnį filtratas sukoncentruojamas. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 8:1:1 CH₃0H/H₂0/ NH₄OH) gaunamas 117 amorfinės medžiagos pavidale.

[0425] PSC Rf=0 .14 (8:1:1 CH30H/H20/NH40H) ;

[0426] ^:H BMR (300 MHz, D₂0 8 3.40 (m, 8H) , 3.18 (m, 1H) , 2.92 (m, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.38 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 1.97 (m, 2H), 1.79 (m, 3H), 1.56 (m, 2H), 1.40 (m, 2H).

[0427] (4-N-Cbz-amino)cikloheksano karbociklinės rūgšties metilo esterio (121) gavimas

[0428] Į 120 (17.5 g, 0.12 mol) suspensiją (150 ml) CH₃OH,

[0429] -10°C temperatūroje 5 min. bėgyje dalimis supilamas tionilo chloridas (13.4 ml, 0.18 mol) ir nuimama šaldymo vonia. Po 16 valandų gautas tirpalas sukoncentruojamas, liekana ištirpinama DMF (150 ml), atšaldoma

[0430] iki 0°C ir veikiama pradžioje N(i-Pr)₂Et (52 ml, 0.3 mol), o po to, benzilo chloroformiatu (18.6 ml,

[0431] 0.13 mol). Šaldymo vonia nuimama, reakcijos mišinys inkubuojamas 24 valandas ir sukoncentruojamas. Liekana

[0432] praskiedžiama etilo acetatu ir praplaunama praskiestu NaHC0₃, 5% KHSO₄ ir druskos tirpalu išdžiovinama MgS0₄ ir sukoncentruojama. Po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 20% etilo acetatas/heksanas) gaunama kristališka vaško pavidalo medžiaga 121.

[0433] PSC R_f=0.34 (30% etilo acetatas/heksanas);

[0434] lH BMR (400 MHz, CDCI₃) 8 7.38 (m, 5H) , 5.09 (pls, 2H) , 4.68 (m, 0.5H), 4.59 (m, 0.5H), 3.72 (m, 0.5H), 3.68 (s, 1.5H), 3.50 (m, 0.5H), 2.45 (m, 1H) , 2.13-1.50 (m, 8H) .

[0435] (4-N-Cbz-amino)[ 1-(propen-3-il)] cikloheksano karbociklinės rūgšties metilo esterio (122) gavimas

[0436] Į maišomą 121 (1.0 g, 3.4 mmol) tirpalą sausame THF (17.2 ml), -78°C temperatūroje sulašinamas LDA (4.3 ml, 8.6 mmol, 2.0M). Šaldymo vonios temperatūra pakeliama iki -40°C. Pamaišius 15 min. -40°C temperatūroje, reakcijos mišinys vėl atšaldomas iki -78°C ir veikiama (eilės tvarka) 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2-(1H-pirimidinonu) (2.0 ml, 17 mmol) ir alilo bromidu (0.44 ml, 5.1 mmol). Po 2 valandų reakcijos turinys praskiedžiamas etilo acetatu, praplaunamas H₂0), sočiu NaHC0₃ ir druskos tirpalu . išdžiovinamas MgS0₄ ir, sukoncentravus gaunama geltona alyva, kurią išvalius greitaeigės chromatografijos pagalba (silicio oksidas, 20% etilo acetatas/heksanas) gaunama kristalinė vaško pavidalo medžiaga 122.

[0437] PSC R_f=0.31 (20% etilo acetatas/heksanas);

[0438] ¹n BMR (400 MHz, CDC1₃) 5 7 .34 (m, 5H) , 5.67 (m, 1H) , 5.10 (s, 2H), 5.05 (m, 2H), 4.54 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.48 (m, 1H), 2.21 (m, 2H), 2.00-1.00 (m, 8H) .

[0439] 4-Amino,1-(propen-3-il)] cikloheksano karbociklinės rūgšties metilo esterio (123) gavimas

[0440] Trifluoracto rūgštis (19 ml) 0°C temperatūroje supilama i, mišinį, susidedanti, iš 122 (0.63 g, 1.9 mmol) ir anizolo (0.41 ml, 3.8 mmol). Po 5 min. reakcijos mišinys tampa homogeniškas ir, nuėmus šaldymo vonią, paliekamas maišytis per naktį. —

[0441] Sukoncentravus, po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 17:1:1 etanolis/NH₄0H/H₂0) gaunamas 123 geltonos alyvos pavidalu.

[0442] PSC R_f=0.53 (30% etilo acetatas/heksanas).

[0443] [ 2-Aza-3-okso-[ 2.2.2] biciklookt-4-il] prop-3-eno (124) gavimas

[0444] 123 (0.39g, 1.97 mmol) tirpalas toluene (10 ml) užlydy-toje ampulėje per naktį kaitinamas 170°C temperatūroje. Atšaldytas tamsus reakcijos mišinys gryninamas greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 85% etilo acetatas/heksanas) pagalba ir gaunamas 124 rudos spalvos alyvos pavidalu.

[0445] PSC R_f=0.30 (85% etilo acetatas/heksanas);

[0446] ^*H BMR (400 MHz, CDC1₃) 8 6.08 (m, 1H) , 5.88 (m, 1H) , 5.04 (m, 2H), 3.61 (m, 1H) , 2.35 (d, J=7 Hz, 2H), 1.80-1.50 (m, 8H).

[0447] ([ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-aza-3-okso-[ 2 . 2 .2] biciklookt-4-il] prop-3-eno (125) gavimas

[0448] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 37a iš 36a, iš 124 (0.18 g, 1.1 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 40% etilo acetatas/heksanas) gaunamas 125 (0.45 g, 100%).

[0449] PSC R_f=0.36 (40% etilo acetatas/heksanas);

[0450] LH BMR (400 MHz, CDC1₃) 5 5.87 (m, 1H) , 5.05 (m, 2H) , 4.08 (m, 2H), 3561 (m, 1H), 3.40 (t, J=8 Hz, 2H) , 2.67 (m, 2H), 2.34 (d, J=7 Hz, 2H), 1.75-1.35 (m, 13H), 1.47 (s, 9H), 1.12 (m, 2H).

[0451] 3 — (1—[ 2-(N-BOC-piperidin-4-il)etil] -2-aza-3-okso-[ 2 .2 . 2] biciklook t-4-il] acto rūgšties (126) gavimas

[0452] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir gaunant 15 iš 14, iš 125 (0.42 g, 1.1 mmol) gaunamas 126 (0.34 g, 76%) baltų lipnių putų pavidalu.

[0453] ([ 2-(N-BOC-piperidin-4-il) etil] -2-aza-3-okso-[ 2, 2, 2] biciklookt-4-il] acetil] -p~alanino (127) gavimas

[0454] Panaudojant tą pačią metodiką kaip ir gaunant 16 iš 15, iš 126 (0.14 g, 0.35 mmol) po greitaeigės chromatografijos (silicio oksidas, 6:1 CH₂Cl₂/acetonas) gaunamas 127 (0.10 g, 55%).

[0455] PSC R_f=0.52 (CH₂Cl₂/acetonas);

[0456] l H BMR (400 MHz, CDCl₃) 5 7.90 (m, 1H) , 4.04 (m, 2H) , 3.56 (m, 1H), 3.42 (m, 4H) 2.67 (m, 2H), 2.42 (d, J=7 Hz, 2H), 1.76-1.34 (m, 13H), 1.46 (s, 18H), 1.12 (m, 2H).

[0457] ([ 2-Piperidin-4-il) etil] -2-aza-3-okso-[ 2 . 2 . 2] biciklookt-4-il] acetil-(3-alanino (128) gavimas

[0458] Panaudojant tą pačią metodiką, kaip ir gaunant 41a iš 40a, iš 127 (0.10 g, 0.19 mmol) po greitaeigės chromą-tografijos (silicio oksidas, 10:1.2:1.2 etanolis/ NH₄0H/H₂0) gaunamas 128 (29 mg, 39%) purios kietos medžiagos pavidalu.

[0459] PSC Rf=0 .17 (10:1:1 etanolis/NH₄0H/H₂0;

[0460] lH BMR (400 MHz, D₂0) 5 3.78 (m, 1H) , 3.50-3.35 (m, 6H) , 2.97 (m, 2H) 2.48 (s, 2H) , -2.38 (t, J=7 Hz, 2H) , 2.02 (m, 2H), 1.78 (m, 6H), 1.58 (m, 5H), 1.42 (m, 2H).

[0461] Šiame išradime pateikti metodai, apima žinomas iš literatūros metodikas, kurios naudojamos gauti išradime aprašytiems junginiams, sintetinant guanidino darinius iš aminų ir amidinus iš atitinkamų nitrilų. Guanidino junginiai gali būti gaunami iš aminų specialistams prieinamu būdu, panaudojant reakciją su 3,5-dimetilpirazol-l-karboksamidino nitratu (Meth. Enzymol., 25b, 558, 1972). Amidinai gali būti gaunami iš atitinkamų nitrilų, specialistams prieinamu būdu, panaudojant metodikas, pateiktas Boere, R. T, et al. J.Organoment.Chem., 331 (2), 161-7, 1987; ir Fuks, R., Tetrahedron, 29 (14), 2147-51, 1973.

[0462] Medžiagos, kurios yra pateiktos 1 lentelėje, yra pavyzdžiai junginių, kurie gali būti gauti, panaudojant metodologiją, pateiktą šiame išradime.

[0463] Toliau pateikiami eksperimentiniai protokolai buvo naudojami šiame išradime fibrinogeno receptorių anta-gonistų aktyvumo nustatymui in vivo, panaudojant šunis.

[0464] Negrynakraujis bet kurios veislės šuo (sveriantis nuo 7.5 iki 11.5 kg) patogiai įtvirtinamas nailoninėse kilpose, kurios atidengia galūnes ir stacionariai užfiksuoja šunį. Plastmasinio švirkšto pagalba, kuriame yra 0.5 ml 3.8 citrato, per 19-o dydžio įleidžiamąjį klapaną, paimama 5 ml kraujo iš poodinės kojos arba galvos venos. Papildomai paimamas 1 ml kraujo su citratu, kuriame nustatomas bendras trombocitų skaičius. Ex vivo trombocitų agregacija yra atliekama panaudojant kaip agonistus ADP (10 įiM) ir kolageną

[0465] (10 Įjg/ml), turinčius 1 fiM epinefrino. Trombocitais praturtinta plazma (TPP) yra gaunama centrifuguoj ant kraują prie 150xg 5 min. Trombocitų skaičius standartizuojamas iki 200 000/mm³, skiedžiant plazma su mažu trombocitų kiekiu.

[0466] Oralinis vaisto įvedimas atliekamas arba želatinos kapsulės pavidalu arba skrandžio praplovimo metodu. Naudojant skrandžio praplovimo metodą, šuniui per maitinamąjį vamzdelį supilami 5 ml vaisto tirpalo. Kraujo pavyzdžiai ex vivo trombocitų agregacijai imami tokiais laiko intervalais: 0, 20, 40, 70, 90, 150, 200, 250, 300, 350, 480 min., 24 vai., 30 vai., 48 vai. Mažai trombocitų turinti plazma paliekama (kiekvienam laiko momentui) ir užšaldoma vaistų kiekio nustatymui. Trys papildomi kraujo pavyzdžiai paimami po 30, 55 ir 110 min. po įvedimo, vaistų kiekio plazmoje nustatymui.

[0467] Intraveninės infuzijos atveju, kraujo pavyzdžiai ex vivo trombocitų agregacijai imami tokiais laiko intervalais: 0, 30, 45, 60, 90 ir 120 min. infuzijos metu ir 2,5, 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 360 ir 420 min. po infuzijos. Mažai trombocitų turinti plazma paliekama (kiekvienam laiko momentui) ir užšaldoma vaistų kiekio nustatymui. Vaistai infuzijos metu įvedami pastoviu 0.1 ml/min. greičiu.

[0468] Greitos intraveninės infuzijos atveju, greitai įvedami 5 ml vaisto tirpalo. Kraujo pavyzdžiai ex vivo trombocitų agregacijai imami tokiais laiko intervalais: 0, 1, 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180 ir 240 min. po boliuso. Mažai trombocitų turinti plazma paliekama (kiekvienam laiko momentui) ir užšaldoma vaistų kiekio nustatymui.

[0469] Tiek oralinėje, tiek intraveninėje grupėje, registruoj-ami kraujo paėmimo laikai kiekvienam laiko momentui, siekiant nustatyti vaistų kieki, plazmoje.

[0470] Junginys, turintis formulę

[0471]

[0472] buvo nustatinėjamas pagal metodiką, pateiktą aukščiau.

[0473] Buvo nustatyta trombocitų agregacijos inhibicija (% nuo kontrolės) indukuota intravenine infuzija 10 Įig/kg/min ir 25 Įig/kg/min greičiu. Inhibicija buvo praktiškai pilna infuzijos metu ir dalinė inhibicija buvo stebima keletos valandų bėgyje po infuzijos pabaigos.

[0474] Buvo nustatyta trombocitų agregacijos inhibicija (% nuo kontrolės) indukuota vienkartinio (2 mg/kg) oralinio įvedimo. Trombocitų agregacijos inhibicijos % buvo didesnis negu 50% 8 vai. laiko bėgyje.

Apibrėžtis

1. Fibrinogeno receptoriaus antagonistas, aprašomas I formule:

2. Fibrinogeno receptoriaus antagonistas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad I formulėje, kurioje:X yra

3. Fibrinogeno receptoriaus antagonistas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad I formulėjeX yra

4. Junginys pagal 1 punktą, skirtas naudoti fibrinogeno susirišimo su trombocitais inhibavimui, trombocitų agregacijos inhibavimui, trombų arba embolių susidarymo gydymui arba siekiant išvengti trombų arba embolių susidarymo žinduoliuose.

5. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis parenkamas iš grupės, susidedančios iš:

Brėžiniai