[LT] Šio išradimo tikslas yra farmaciniu požiūriu naudingi bispilokarpino rūgšties esteriai, o taip pat minimų junginių druskos, sudarytos su rūgštimis.
[EN]
[0001] Šiame išradime aprašomi nauji pilokarpino tipo vaistiniai junginiai, kurie naudingi gydant glaukomą: kalbant konkrečiau, šiame išradime aprašomi bispilokarpino rūgšties esteriai, jų gavimo būdai ir aukščiau minėti nauji junginiai, farmacinės kompozicijos, kurių sudė-tyje yra šie nauji junginiai, ir jų panaudojimas.
[0002] (+)-Pilokarpinas, (3S-cis)-3-etildihidro-4-[ (1-met.il-lH-imidazol-5-il)metil] -2-(3H)-furanonas yra vaistas, naudojamas glaukomos gydymui, kuris mažina akispūdį, didindamas kameros skysčių nutekėjimą iš akies. Akispū-
[0003] di, mažinantis pilokarpino efektas remiasi tokiu vaisto poveikiu: sutraukiamas ciliarinis raumuo, dėl to pa-didėja priešakinės kameros kampas, sąlygojantis kameros skysčių nutekėjimą, ir palengvėja skysčių nutekėjimas.
[0004] Akispūdžio sumažinimas, deja, nėra vienintelis pilokarpino poveikis akiai. Esant pakankamai didelei vaisto koncentracijai, padidėja pilokarpino poveikis, sutrau-kiantis ciliarini, raumenį, ir akies lęšiukas prisitaiko matyti artimus daiktus. Pacientui sunku prisitaikyti matyti tolimesnius daiktus, tai sukelia nepatogumus. Pilokarpinas taip pat sukelia akies rainelės susi-traukimą ir be to gerokai sumažėja akies lėlytė. Be šių reiškinių, kurie medicininiu požiūriu nepageidautini ir pacientui nemalonūs, pilokarpinas gali sukelti ir kitus šalutinius efektus, nesusijusius su akimis. Pavyzdžiui, gali padidėti seilėtekis ir atsirasti bradikardija.
[0005] Paprastai glaukoma sergantys pacientai vartoja pilo-karpiną vietiškai akių lašų pavidalu. Tuomet akis absorbuoja tik apie 1% pilokarpino dozės, o apie 70% pilokarpino patenka i, kraują. Tokią menką pilokarpino absorbciją akyje sąlygoja trys faktoriai:
[0006] 2) greita pilokarpino absorbcija į kraują per akies vidinio paviršiaus konjunkty\/ą 3) mažas pilokarpino skvarbumas per rageną.
[0007] Pilokarpinas absorbuojamas i akį per rageną. Patekęs į rageną, jis yra pirma absorbuojamas į tankų akies paviršiaus epitelio sluoksnį, kuriame gausu ląstelės membranos lipidų. Tačiau pilokarpinas menkai tirpsta riebaluose, todėl tik maža jo dalis prasiskverbia i, ragenos epiteli,. Ragenos epitelis vienu metu atlieka plėvelės, ribojančios pilokarpino absorbciją, vaidmenį ir sandėlio, iš kurio tiekiamas pilokarpinas per van-deninę stromą ir ragenos epitelį į priekinės kameros skysčius. Patekęs į kameros skysčius, pilokarpinas lengvai pasiekia veikimo vietą - ciliarinį raumenį. Pilokarpino poveikio akiai trukmė labai sumažėja dėl jo dalinės konversijos į neaktyvią pilokarpino rūgštį ir dėl greito pilokarpino pašalinimo iš akies, cirkuliuojant kameros skysčiams bei cirkuliuojant kraujui rainelėje.
[0008] Menka absorbcija į vidines akies dalis ir trumpalaikis pilokarpino, skiriamo į akį, poveikis sukelia sunkumus, gydant šiuo preparatu. Siekiant pagerinti ir prailginti vaisto veikimą, pilokarpinas turi būti naudojamas santykinai didelėmis dozėmis. Dėl to atsiranda didelė pilokarpino koncentracija kameros skysčiuose, rainelėje ir ciliariniame raumenyje, kuri sukelia didelį lėlytės susitraukimą ir akis prisitaiko matyti artimus daiktus. Be to, pilokarpino dozės padidinimas yra gana neefek-tyvus vaisto veikimo prailginimo būdas, nes šio tipo vaistas greitai pašalinamas iš akies, todėl pilokarpino akių lašai skiriami 3-8 kartus per dieną, priklausomai nuo paciento būklės. Toks dažnas akių lašų vartojimas yra nepatogus pacientui dar ir dėl to, kad lašų sky-rimas visada susijęs su šalutiniu poveikiu akiai. Naudojant dideles dozes, padidėja pilokarpino kiekis, absorbuojamas i, kraują ir kitų šalutinių efektų pa-vojus .
[0009] Siekiant įveikti aukščiau minėtus trūkumus, susijusius su menka pilokarpino absorbcija, buvo padėta pastangų, kuriant pilokarpino tipo vaistų pirmtakus, kuriuos geriau absorbuoja ragenos epitelis. Norint pagerinti absorbciją, šie dariniai turėtų būti labiau tirpūs riebaluose. Be to, kuo didesnė jų dalis turėtų suskilti ragenos epitelyje ir atpalaiduoti farmaciškai aktyvų pilokarpiną ir neveiklią struktūrinę dali,. Skilimo laipsnis ragenoje priklauso nuo darinio buvimo laiko ir nuo jo skilimo greičio ragenos epitelyje. Darinio buvimo laikas epitelyje padidėja, didinant lipcfi-1iškurną ir mažinant difuzijos koeficientą.
[0010] Iki šiol aprašyti dviejų tipų pilokarpino pirmtakų dariniai, skirti vaistiniam naudojimui. JAV patente Nr. 4,061,722 Bodor aprašo pilokarpino darinius - vais-tų pirmtakus ketvirtinių amonio junginių pagrindu. Bundgaard ir kt. paraiškoje EP patentui gauti 0 106 541 aprašo pilokarpino rūgšties diesterius, kuriuos naudojant pasiekiama geresnė absorbcija akyje. Minėti pilokarpino rūgšties diesteriai turi kai kurių trūkumų, pavyzdžiui, prastai tirpsta vandenyje ir erzina aki,. Be to, diesteriai, lyginant su pačiu pilokarpinu, atpa-laiduoja daug nepageidaujamų šalutinių produktų.
[0011] Šiame išradime aprašomi nauji bispilokarpino rūgšties esteriai, t. y. bispilokarpatai, kuriuos naudojant galima išvengti aukščiau minėtų trūkumų ar bent juos žymiai sumažinti. Tokie šiame išradime aprašyti vaistų pirmtakai skyla taip pat greitai kaip ir pilokarpinas, jų struktūros lipofiliškumas atitinka Bundgaard ir kt. aprašytų junginių lipofiliškumą, o pilokarpino skvarbumas per rageną nėra mažesnis. Be to, bispilokarpatų
[0012] dariniai atgabena į rageną vieną struktūrinę dali, atitinkančią dvi pilokarpino molekules, tuo tarpu Bundgaard ir kt. išradime viena struktūrinė dalis atitinka vieną pilokarpino molekulę. Bispilokarpatų difuzijos koeficientas ragenos epitelyje yra mažesnis bei Bundgaard junginių, o dar nesuskilę bispilokarpatų dariniai ilgiau išlieka ragenos epitelyje. Todėl iki visiško vaisto pirmtako suskilimo praeina daugiau laiko. Be to, nauji šio išradimo junginiai pasižymi geresniu tirpumu ir todėl geriau tinka vaistinių recep-tūrų ruošimui.
[0013] Taigi išradimas leidžia realizuoti lėtą, ilgalaikį vaistų atpalaidavimą iš ragenos i akies vidines dalis ir įmanoma žymiai prailginti pilokarpino veikimą bei sumažinti pikines pilokarpino koncentracijas akyje, o tai yra svarbu, turint omenyje aukščiau minėtus paša-linius efektus.
[0014] Nauji šio išradimo pilokarpino vaistiniai pirmtakai, konkrečiai, bispilokarpino rūgšties esteriai, t. y. bispilokarpatai, turi bendrą formulę I
[0015] A) Y yra -C(=0)-R, kai R yra vandenilis, C^-Cg-alkilas, C2-C18-alkenilas, C2-C18-alkinilas, pakeistas arba nepakeistas C3-C7-cikloalkilas arba C3-C7-cikloalkenilas, pakeistas arba nepakeistas ariias arba žemesnysis alkilarilas, ir W yra radikalas
[0016] kai Y' yra vandenilis arba -C(=0)-R' grupėje, kurioje R' turi R reikšmes, apibrėžtas aukščiai!, be to R' ir R gali turėti tas pačias arba skirtingas reikšmes, A gali būti hidroksiradikalu arba apsaugotu hidroksiradikalu, pakeistas Cį-Cįg-alkilenas, C2-C18-alkenilenas, C2-C18-alkinilenas, kurie gali būti pakeisti pakeistais arba nepakeistais C3-C7-cikloalkilu, C3-C7-cikloalkenilu, arilu arba žemesniuoju alkilarilu, arba yra pakeistas arba nepakeistas C3-C7-cikloalkilenas arba C3-C7~ciklo-alkenilenas arba arilenas, arba A yra aukščiau api-brėžtas alkilenas, alkenilenas arba alkinilenas, turintis savo grandinėje aukščiau apibrėžtus cikloal-kileną, cikloalkenileną arba arileną.
[0017] ir
[0018]
[0019] arba
[0020] E) W yra- OR, kai R turi aukščiau apibrėžtas reikšmes, Y yra
[0021] kai R' turi aukščiau apibrėžtas reikšmes, tai B turi aukščiau apibrėžtas A reikšmes, ir
[0022]
[0023] arba
[0024] kai A ir B turi aukščiau apibrėžtas reikšmes, o Z turi tą pačią reikšmę kaip grupė - Z- Y1, kuri minėta aukš-čiau, o taip pat minimų junginių druskos, sudarytos su rūgštimis.
[0025] Ci-C18-alkilas yra tiesus arba šakotas, labiau tinka žemesnieji alkilai, turintys 1-10 C atomų, ypač tinka 1-4 C atomus turintys alkilai, pavyzdžiui, metilas, etilas, propilas,- izopropilas arba butilas, izobutilas, s-butilas arba tret-butilas, arba pentilas, heksilas, heptilas, oktilas, nonilas ir decilas.
[0026] Ci-CJ8-Alkenilai gali būti tiesūs arba šakoti, labiau tinka žemesnieji alkenilai, turintys 2-10 C atomų, ypač tinka 2-4 C atomus turintys alkenilai, pavyzdžiui, ete-nilas, 1-metiletenilas, 1-propenilas, alilas arba 1-, 2-, arba 3-butenilas, 2-metil-2-propenilas arba 1-, 2-, 3-, arba 4-pentenilas, izopentenilas, 3-metil-2-butenilas, heksenilas, heptenilas, oktenilas, nonenilas ar decenilas. Minėti alkenilai gali būti E- arba Z-formos, gali būti konjuguoti arba nekonjuguoti dienilai, pavyz-džiui, 3,7-dimetil-2,6-oktadienas, trienilai, pavyz-džiui, farnezilas, arba polienilai.
[0027] Ci-C18-Alkinilai gali būti tiesūs arba šakoti, labiau tinka žemesnieji alkinilai, turintys 2-10 C atomų, ypač tinka 2-4 C atomus turintys alkinilai, pavyzdžiui, eti-nilas, 1-propinilas, propargilas arba butinilas, taip pat pentinilas, heksinilas, heptinilas, oktinilas, no-ninilas arba decinilas. Taip pat čia turimi galvoje konjuguoti arba nekonjuguoti di-, tri- ir poliinilai ir alkeninilai.
[0028] Cikloalkilai, cikloalkenilai, cikloalkilenai ir ciklo-alkenilenai turi grandinėje atitinkamai 3-7 C atomus ir gali būti nepakeisti arba pakeisti žemesniaisiais alki-lais, kurių tarpe labiau tinka alkilai, turintys 1-4 C atomus.
[0029] Arilas reiškia pakeistą arba nepakeistą karbociklinį žiedą, pavyzdžiui, fenilą, arba biciklinę nesočią arba iš dalies sočią žiedinę sistemą, pavyzdžiui, naftilą, idenilą, indanilą, tetrahidronaftilą arba bifenilą ir pan. Pakaitais gali būti žemesnieji alkilai, žemesnieji alkoksiradikalai, nitrogrupė arba halogenai, labiau tinka žemesnieji alkilai ir žemesnieji alkoksiradikalai, turintys 1-4 C atomus.
[0030] Monocikliniais arilais ir aralkilais gali būti junginiai, turintys tokią formulę:
[0031] grupės Q nepriklausomai viena nuo kitos gali būti Cj-C^j-alkilas, C.-C^-alkoksigrupė, halogenas arba nitrogrupė, n yra sveikas skaičius nuo 0 iki 3, m yra sveikas skai-čius nuo 0 iki 1, D yra tiesus arba šakotas Cį-Cg-alkilenas arba konjuguotas ar nekonjuguotas C2-C6-alkenilenas arba -alki nilenas. Halogenu gali. būti chlo-ras, bromas, fluoras arba jodas,
[0032] A yra bivalentinis alkiienas, alkenilenas, arba alkinilenas, pavyzdžiui, tiesus arba šakotas bivalentinis radikalas, turintis 1-18 arba 2-18 C atomų atitinkamai, la-biau tinka radikalai, turintys 1-10 arba 2-10 C atomų atitinkamai, pavyzdžiui, metilenas, etilenas, propilenas, butilenas, taip pat pentilenas, heksilenas, heptilenas, oktilenas, nonilenas ir decilenas, bei atitinkamos nesočios bivalentinės grupės, kurių grandinėje gali būti tokie aukščiau apibrėžti pakaitai, kaip cik-loalkilas, cikloalkeniias, arilas arba aralkilas, arba kurie gali būti pakeisti apsaugotu arba neapsaugotu hidroksilu. Apsaugota hidroksilo grupė gali būti -OR" arba -OCOR", kur R" yra C.-Cą-alkilas, arilas arba aril-C1-C4-alkilas, kai arilas turi aukščiau apibrėžtas reikšmes.
[0033] A gali būti atitinkamai cikloalkilenas arba cikl-oalkenilenas, pavyzdžiui, ciklopropilenas, ciklobu-tilenas, ciklopentilenas, cikloheksilenas arba ciklo-heptilenas, bei atitinkamos nesočios grupės. Čia pami-nėtos bivalentinės žiedinės sistemos gali sudaryti dali, minėtų alkileninių, alkenileninių ir alkinileninių gru-pių.
[0034] Arilenas kaip toks arba kaip grandinės dalis gali būti pavaizduotas tokia formule: -(D)m-Ar-(D')m."
[0035] bivalentinis Ar turi aukščiau apibrėžtas reikšmes pakeistai arba nepakeistai arilo grupei, D ir D' gali būti tokios pačios arba skirtingos grupės ir turi aukščiau grupei D apibrėžtas reikšmes, tarp jų ypač tinka metilenas ir etilenas, ir m ir m' yra nepriklausomai vienas nuo kito sveiki skaičiai. Labiau tinkami arilenai yra fenilenas ir naftilenas.
[0036] Junginių, turinčių formulę (I) , labiau tinkamos druskos, sudarytos su rūgštimis, yra farmaciniu požiūriu priimtinos druskos su netoksiškomis neorganinėmis arba organinėmis rūgštimis. Tinkamų rūgščių pavyzdžiu gali būti jau minėtos chloro vandenilio rūgštis, bromo vandenilio rūgštis, sieros rūgštis, azoto rūgštis, fosforo rūgštis ir pan., bei organinės rūgštys, pavyzdžiui, acto, propiono, stearino, oksalo, malono, gintaro, glu-taro, adipino, maleino, fumaro, malo, vyno, citrinos, askorbino, benzoinė, pamoinė arba sulfoninė rūgštis, pavyzdžiui, mezilo arba tozilo rūgštis.
[0037] Šio išradimo junginiai yra pilokarpino rūgšties di-merinių esterių dariniai, t. y. bispilokarpatai, kuriuos galima suskirstyti i tris pagrindinius tipus nuo A) iki C) atitinkamai pagal aukščiau pateiktą bendrą formulę. Bispilokarpatai, atitinkantys pogrupį A), gali būti pavaizduoti formule I':
[0038]
[0039] Bispilokarpatai, atitinkantys pogrupi, B} , gali būti pavaizduoti formule I":
[0040] Bispilokarpatiniai makrolidai, atitinkantys pogrupi, C) , gali būti pavaizduoti formule I" 1:
[0041] Aukščiau pateiktose formulėse I1, I", I"' simboliai tu-ri aukščiau apibrėžtas reikšmes pagal formulę ( I).
[0042] Ypač tinkami junginiai, turintys formulę ( I'), kurioje Y ir Y' yra vandenilis, konkrečiai 0, 0'- dihidro( 1, 4-, 1, 3-, 1, 2- ksililen)- ir ( 1, 3- propilen) bispilokarpatai.
[0043] Labiau tinkami diacilbispilokarpatai, turintys formulę
[0044] ( I1), yra 0, 0'- dipropionil-, 0, 0'- dibutiril- ir 0, 0'- diciklopropilkarbonil ( 1, 4- ksililen) bispilokarpatas.
[0045] Taip pat tinka 0. 01- dipropionil-( etilen)- ir 0, 0'- dipropionil-( 2- hidroksi- l, 3- propilen) bispilokarpatas bei . 0, 0'- diciklopropilkarbonil( 1, 5- pentilen) bispilokarpatas ir - ( 1, 6- heksilen) bispilokarpatas.
[0046] Labiau tinkami junginiai, turintys formulę ( I"), yra ( dibenzil) bispilokarpatai, ypač 0, 0'- glutaril ( dibenzil) bispilokarpatas. Taip pat labai tinkamas yra 0, 0'-sukcinil( dietil) bispilokarpatas.
[0047] Išradime taip pat aprašomas junginių, turinčių formu-lę ( I), gavimo būdas.
[0048] a) junginius, turinčius formulę !!'), pilokarpino rūgš-t i s, kurios f o rm uI ė
[0049] A ir Z turi aukščiau apibrėžtas reikšmes, veikiamas dikarboksiline rūgštimi, kurios formulė yra (IV)
[0050]
[0051] Aukščiau minėtose reakcijose naudojami funkciniai rūgš-čių dariniai, labiau tinkami yra halogenidai, anhidri-dai, alkil- arba ariisulfonatai. Kaip reakcijos terpė naudojami tokie tirpikliai kaip angliavandeniliai, ha-logeninti angliavandeniliai, eteriai, ketonai ir pan., kurie yra inertiški reagentų atžvilgiu. Tinkami angliavandeniliai yra pavyzdžiui, aromatiniai angliavandeniliai, tokie kaip benzolas ir alkilinti benzolai, toKie kaip toiuolas ir ksi.i olas - Tinkami halogeniriti angliavandeniliai yra, pavyzdžiui, dichlormetanas, chloroformas ir chlorbenzolas. Iš ketonų galima paminėti acetoną, eti lmetilketoną ir izobutilrnet ilketoną, iš eterių - dietilo eterį, diizopropilo eterį, dibutile eterį ir 1,4-dioksaną. Tarp kitų tinkamų tirpiklių paminėtini dimetilsulfoksidas, dimetiIformamidas ir acetonitrilas.
[0052] Reakcijos temperatūra nėra kritinis parametras, tačiau ji gali kisti, pavyzdžiui, nuo -10°C iki tirpiklio vi-rimo temperatūros. Paprasta.! naudojama kambario tem-peratūra .
[0053] Reakcijos laikas gali kisti plačiu intervalu ir paprastai yra 12-72 valandos, dažniau - apie 24 valandas. Reakcijose tinka naudoti rūgštį surišančius agentus, pavyzdžiui, šarminius metalus ir žemės šarminių metalų karbonatus arba organines bazes. Tinkami metalų kar-bonatai yra natrio karbonatas ir kalio karbonatas, o tinkamos organinės bazės yra piridinas ir jo homologai, 4-(dimetilamino)piridinas, chinolinas ir jo homologai, N,N-dimetilanilinas ir trialkilaminai, ypač tinka tri-etilaminas. Minėtos reakcijos gali vykti homogeniniame tirpale arba heterogeninėje sistemoje,^ pavyzdžiui, PTC sąlygomis.
[0054] Šio išradimo junginiuose esterinė jungtis gali susi-daryti naudojant žinomus vandenį atskeliančius rea-gentus, pavyzdžiui, karbodiimidus. Kai kuriais atvejais tinka žinomos esterifikacijos reakcijos, katalizuojamos rūgštimi . Farmacinės kompozicijos pagal ši, išradimą gaminamos žinomu būdu, naudojant standartinius nešik-lius ir kitus žinomus adjuvantus. Nešikliais gali būti, pavyzdžiui, skysčiai, emulsijos arba suspensijos, arba kremai ir tepalai. Kompozicija gali būti taip pat suformuota kaip kieta farmacinė forma, skirta įterpti i, akį. Tinkama skyrimo forma yra, pavyzdžiui, akių lašų tirpalas, į kurio sudėtį įeina tinkamos koncentracijos šio išradimo junginys, pavyzdžiui, 0.1-4%, steriliame vandeniniame buferio tirpale, turinčiame tinkamą pH, arba tirpale, kurio pH pakoreguotas rūgštimi arba šarmu. Labiau tinka naudoti šio išradimo junginio vandenyje tirpią rūgšties druską. Akių lašų tirpalas, turintis aukščiau minėtą pageidaujamą koncentraciją, skiriamas lašinti į akį priklausomai nuo paciento būklės, dažniausiai 1-3 kartus per dieną.
[0055] Šio išradimo junginiai analizuojami pagal žemiau pa-teiktus testus. Pilokarpi.no diesteriai, žinomi iš EP-0 106 541, analizuojami atitinkamais testais, esant toms pačioms sąlygoms, ir lyginami su bispilokarpatais, aprašytais šiame išradime.
[0056] Analizuojamų junginių stabilumas buvo tiriamas hidro-lizuojant juos buferiuose. Joninė buferių jėga ( ji) buvo 0.5, pH reikšmės 4.2, 6.0,. 7.4 ir 9.0, temperatūra - 37°C, 50°C, 60°C ir 7ū°C.
[0057] Skilimo puslaikiai 1'1/2, apskaičiuoti remiantis skilimo konstanta k, kuri nustatoma kiekvienam tiriamam junginiui (T1/2 = 0.693/k; k - 2.303 x kk, kai yra kampinis koeficientas kreivės, iliustruojančios likusio esterio logaritmo priklausomybę nuo laiko) buferiniame tirpale, kurio pH apibrėžta aukščiau, pateikti I Lentelėje (pus-laikių reikšmės išmatuotos esant 37°C).
[0058] I Lentelės duomenys rodo, kad šio išradimo bispilokarpatai stabilesni rūgštiniame tirpale, lyginant su šarminiu, ir nėra mažiau stabilūs už diesterius, ap-rašytus EP paraiškoje 0 106 541.
[0059] Darinių stabilumas saugant juos įvairiomis sąlygomis, gali būti nustatytas išmatavus skilimo konstantas esant įvairioms temperatūroms, ir apskaičiavus skilimo kons-tantą k, esant pageidaujamai temperatūrai pagal kreivės lygti,, atitinkančią Areni jaus lygti, (1), kai log k yra [ l/T] funkci j a .
[0060] Pagal skilimo konstantą (k) , gautą esant norimai temperatūrai, gali būti apskaičiuotas "saugojimo ant lentynos" laikas t10% (t10% = 0.104/k), t.y. laikas, per kurį suskyla 10% vaisto. Pavyzdžiui, galima paminėti, kad 0,0' -dipropionil (1,4-ksililen) bispilokarpatui t10%, esant 4°C, yra beveik 500 dienų.
[0061] Junginių lipofiliškumas buvo nustatytas matuojant jun-ginių pasiskirstymo koeficientą (P), esant pH reikšmei 7.40. Matuojama mišinyje, kuris sudarytas iš 1-okta-nolio ir fosfatinio buferio, nustatant tiriamo junginio koncentraciją buferio fazėje HPLC metodu. Labai lipo-filiškų junginių pasiskirstymo koeficientai buvo matuo-jami skystinės chromatografijos būdu (HPLC) atvirkš-tinėje fazėje (RP) pagal išėjimo laikus (Beckmann 116 siurblys ir 166 UV detektorius; Marathon automatinis sampieris).
[0062] Tiriamų junginių, pilokarpino rūgšties ir išradime aprašytų bispilokarpatų log P reikšmės ir talpumo
[0063] faktoriai k1, esant 22°C, pateikti Lentelėje I. Iš duo-. menų matyti, kad išradime aprašyti junginiai yra žymiai lipofiliškesni lyginant su pilokarpinu. 3) Fermentinė hidrolizė
[0064] Šiame išradime aprašytų naujų bispilokarpatų ir žinomų pilokarpino rūgšties diesterių fermentinės hidrolizės puslaikis buvo nustatytas plazmos - buferio mišinyje (80% - 20%), esant 37°C. Tiriamų junginių skilimo kons-tantos (k), nustatytos iš kreivės, iliustruojančios
[0065] likusio diesterio koncentracijos logaritmo priklau-somybę nuo laiko, ir pusiaikio reikšmės T1/2 pateiktos II Lentelėje.
[0066] Iš duomenų matyti, kad tiriamas junginys, veikiamas fermento (esterazės) skyla buferiniame tirpale iki tarpinio 0,O"-dihidrcbispilokarpato, kuris spontaniškai suyra, esant pH 7. 4, iki pilokarpino. Galima daryti išvadą, kad 'Tarpinis bispilokarpatas turi didelę įtaką pilokarpino susidarymo greičiui. Susidaro beveik visas kiekis pi -L o a c* 2~ ]p i i i C) f n c? paisant tarpinio junginio gali-mybių epimeri zuotis.
[0067] Susidarančio izopilokarpino kiekis svyruoja nuo 0 iki 10%, taip • pat epimerizuoj asj. ir pilokarpinas, jei hid-rolizės laikas yra labai ilgas. 4) Skvarbumas per rageną
[0068] Pilokarpino hidcochlorido ir perspektyviausių (remiantis aukščiau pateiktais testais) vaistų pirmtakų skvarbumas per rageną buvo tiriamas difuzinėje kameroje stebint junginio migraciją iš pateikiančios fazės (epitelio pusės) per ragena i, difuzinės kameros priimančią fazę {endotelio pusę).
[0069] Difuzijos kameros akceptoriaus pusėje imami mėginiai., kuriuose KPLC metodu nustatomos vaisto pirmtako ir atpalaiduoto vaisto koncentracijos. Taip pat sužinomas vaisto pirmtako skilimo greitis ragenoje.
[0070] II Lentelėje pateikti skvarbumo koeficientai ( Papp, cm/s), kurie apskaičiuoti iš skvarbumo greičio (rnikromol/min) , jų santykinė standartinė paklaida bei analizių skai-čius .
[0071] Rezultatai rodo, kad, naudojant abiejų grupių junginius, galima žymiai pagerinti pilokarpino skvarbumą per rageną ( Papp = 2. 77 cm/s x 10 ).
[0072] Rezultatai rodo, kad pilokarpino esteriai skyla ragenoje ir susidaro pilokarpinas, ir kad įmanoma, pri-jungiant pakaitus prie pilokarpino rūgšties, reguliuoti vaisto pirmtako skvarbumą per rageną ir pilokarpino susidarymo greitį.
[0073]
[0074] Išradime aprašyti junginiai pasirodė esą stabilūs van-deniniuose tirpaluose ir todėl tinkami akių lašų gamybai. Taip pat parodyta, kad darinių lipofiliškumas, fermentinės hidrolizės greitis, skvarbumas per rageną ir cheminės tarpinių junginių, susidarančių iš šio išradimo junginių, hidrolizės greitis bei pilokarpino susidarymas akyje yra lengvai reguliuojami keičiant pilokarpino rūgšties pakaitus. Akies esteraziniai fer-mentai inicijuoja bispilokarpatų hidrolizę iki tarpinių junginių, kurie spontaniškai skyla i, pilokarpiną.
[0075] Lyginant junginius, aprašytus šiame išradime, su jun-giniais, aprašytais EP paraiškoje 0 106 541, konsta-tuota, kad šio išradimo junginiai visais atžvilgiais nėra blogesni už žinomus junginius. Didelis šiame iš-radime aprašytų junginių pranašumas yra tai, kad išradime aprašyti bispilokarpatai iš vienos bispi-lokarpato molekulės pateikia dvi pilokarpino molekules, dėl to iš vaisto pirmtako atsiranda santykinai mažiau metabolinių produktų, ypač monokarboksilinių rūgščių, aldehidų ir pan., skaičiuojant vienai pilokarpino mo-lekulei. Sumažinus metabolinių produktų kieki,, galima sumažinti akies dirginimą ir skausmą, susijusi, su vaisto naudojimu. .Naudojant šio išradimo junginius galima išvengti dau-gelio trūkumų, būdingų gydymui pilokarpinu (menkas biologinis įsisavinimas, šalutiniai sisteminiai efektai ir šalutiniai efektai akyje, dažnas vartojimas, kuri, sunkiai pakelia pacientai) . Pasižymėdami geresniu skvarbumu per rageną, šio išradimo junginiai gali būti skiriami gerokai mažesnėmis dozėmis ir mažiau kartų per dieną, todėl sumažėja šalutinis poveikis, pagerėja pa-cientų tolerancija ir glaukoma sergančių pacientų gydymas vaistais tampa efektyvesnis.
[0076] Tolesni pavyzdžiai .iliustruoja ši, išradimą, tačiau ne-apriboja jo apimties.
[0077] Lydymosi taško nustatymas: Reichert Thermovar aparatas; Lūžio rodiklio nustatymas: 7\tago Illuminator aparatas; pKa nustatymas: darinys titruojamas vandens/etanolio mišinyj e (50 %/5 0 %);
[0078] Testavimo sąlygos bombardavimo elektronais jonizato-riuj e: elektrono energija: 70 eV (jei nenurodyta kitaip) jonizacijos srovė: 500 mikroamperų
[0079] pavyzdžio laikiklio temperatūra nuo 30°C iki 150°C per 2-5 minutes
[0080] skiriamoji galia: 10000;
[0081] Mass-spektrometras su terminiu įpurškimu: VG terminis įpurškimą s/'plazmos įpurškimas
[0082] Testavimo sąlygos jonizuojant terminiu įpurškimu: optimizuojamos kasdien;
[0083] Distiliuotame vandenyje ( 4 ml) tirpinamas pilokarpino
[0084] hidrochloridas (3.92 g; 16.00 mmol) ir tirpalas atšal-domas iki maždaug 0°C. Į tirpalą per keturis kartus pridedama 18 ml atšaldyto 2M NaOH. Tirpalas paliekamas stovėti vienai valandai esant artimai 0°C temperatūrai. Neutralizavus natrio šarmo perteklių su 5 ml 1 M HC1, tirpalas nugarinamas esant sumažintam slėgiui. Liekana tirpinama 60 ml absoliutaus alkoholio ir maišoma 10 mi-nučių esant 60°C. Atšaldoma iki 4°C ir nufiltruojamas neištirpęs NaCl. Filtratas nugarinamas esant sumažintam slėgiui, gaunama 3.93 g natrio pilokarpato - baltos, labai higroskopiškos medžiagos.
[0085] X tirpalą, kuriame yra 8.00 mmol (1987 mg) pilokarpino
[0086] rūgšties natrio druskos ir 60 ml dimetilsulfoksido, per valandą sulašinama 3.00 mmol alfa,alfa'-dichlor-p-ksi-lolo (524 mg), ištirpinto dimetilsulfokside. Tirpalas maišomas kambario temperatūroje 48-72 valandas ir išpi-lamas i 100 ml distiliuoto vandens. Mišinys ekstrahuo-jamas chloroformu (2x100 ml). Sujungti chloroformo ekstraktai plaunami 100 ml distiliuoto vandens, 100 ml 2% natrio bikarbonato tirpalu ir 100 ml distiliuoto vandens. Chloroformo ekstraktai džiovinami virš magnio sulfato ir chloroformas nugarinamas esant sumažintam slėgiui, gautas bispilokarpatas kristalinamas iš chloroformo ir petrolio eterio mišinio, gaunama 770 mg (1.39 mmol) pavadinime nurodyto junginio.
[0087] L.t. = 170-171°C
[0088] k' = 0. 8101
[0089] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas) : [ M+'] piko nėra, 208 (19%), 207(6%), 96 (42%), 95 (100%).
[0090] HPLC-MS (terminis įpurškimas) : rn/e (santykinis intensyvumas) : 555 [ M-t 1] (12%), 417 (3%), 384 i4%), 347 (46%), 267 (10%), 250 (5%), 209 (100%).
[0091] BMR: 6: 7.47 pls 2H, 7.33 s 4H, 6.69 pls 2H, 5.09 s 4H, 3.51 m 4H, 3.48 s 6H, 2.65 m 2H, 2.53 m 2H, 2.42 m 2H,. 1.97 m 2H, 1.67 m 4H, 0.84 t 6H.
[0092] Junginys susintetintas iš pilokarpino natrio druskos (1287 mg; 5.18 mmol) ir alfa,alfa'-dibrom-m-ksilolo (342 mg; 1,30 mmol) pagal metodiką, apražytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas kristalinamas iš etilo acetato ir .eterio mišinio. Išeiga 380 mg (0.69 mmol).
[0093] L.t. = 116-117°C
[0094] k' = 0.8291
[0095] HR-MS spektras: in/e (santykinis intensyvumas): [M"'] piko nėra, 209 (11%), 208 (33%), 96 (44%), 95 (100%). HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 555 [M+l] (7%), 417 (7%), 385 (8%), 347 (46%), 267 (9%), 250 (10%), 209 (100%).
[0096] BMR: 8: 7.47 pls 2H, 7.44 pls 1H, 7.35 m 3H, 6.70 pls 2H, 5.09 pls 4H, 3.52 m 4H, 3.48 s 6H, 2.66 m 2H, 2.52 m 2H, 2.43 m 2H, 1.97 m 2H, 1.67 m 4H, 0.85 t 6H.
[0097] Junginys susintetintas iš pilokarpino natrio druskos (1166 mg; 4.70 mmol) ir alfa, alfa'-dibrom-o-ksilolo (310 mg; 1.18 mmol) pagal metodiką, aprašytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas kristalinamas iš etilo acetato ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 380 mg (0.69 mmol).
[0098] L.t. = 62-64°C
[0099] k' = 0.8291
[0100] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): [ M+'] piko nėra, 208 (12%), 96 (19%), 95 (100%).
[0101] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 555 [ M+l] (11%), 417 (7%), 385 (8%), 347 (46%), 267 (9%), 250 (14%), 209 (100%).
[0102] BMR: 8: 7.47 pls 2H, 7.34 m 4H, 6.70 pls 2H, 5.24 s 4H, 3.52 m 4H, 3.48 s 6H, 2.66 m 2H, 2.53 m 2H, 2,42 m 2H, 1.97 m 2H, 1.67 m 4H, 0.85 t 6H.
[0103] Junginys susintetintas iš pilokarpino natrio druskos (1994 mg; 8.03 mmoi)' ir 1,7-dibromheptano (518 mg; 2,01 ro.ir.ol) pagal metodiką, aprašytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas .tristalinainas iš chloroformo ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 1050 mg (1.S1 mir.ol) . L.t. = 117-120cC.
[0104] k' = 1.1266
[0105] HR-M5 spektras: in/e (santykinis intensyvumas): 203 (lb%), 96 (2%), 55 (100%).
[0106] HPLC-MS (terminis įpurškimas): ra/e (santykinis intensyvumas) : 549 [M+l] (4%), 341 (16%), 267 (7%), 250 (5%), 209 (100%).
[0107] BMR: S: 7.50 pls 2H, 6.73 pls 2H, 4.05 t 4H, 3.59 s 6H, 3.53 m 4K, 2.72 m 2H, 2.50 m 2H, 2.47 m 2H, 1.99 m 2H, 1.68 m 4H, 1.64 plm 8H, 1.37 m 2H, 0.88 t 6H.
[0108] Junginys susintetintas iš pilokarpino natrio druskos (1353 mg; 5.45 mmol) ir 1,6-dibromheksano (499 mg;
[0109] 2.04 mitiol) pagal metodiką, aprašytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas kristalinamas iš chloroformo ir petrolio eterio mišinio.
[0110] L.t. = 117-118°C
[0111] k' = 0.8924
[0112] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): [ M+'] piko nėra, 208 (16%), 96 (24%), 95 (100%).
[0113] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 535 [ M+l] (5%), 327 (26%), 267 (13%), 250 (7%), 209 (100%) .
[0114] BMR: 5: 7.49 pls 2H, 6.73 pls 2H, 4.05 t 4H, 3.60 s 6H, 3.53 m 4H, 2.72 m 2H, 2.51 m 2H, 2.47 m 2H, 1.99 m 2H, 1.67 m 4H, 1.65 plm 8H, 1.41 m 2H, 0.88 t 6H.
[0115] Junginys susintetintas iš pilokarpino natrio druskos (1051 mg; 4.23 mmol) ir 1, 5-dibrompentano (244 mg;
[0116] 1.06 mmol) pagal metodiką, aprašytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas kristalinamas iš etilo acetato ir petrolio eterio mišinio.
[0117] L. t. = 84- 87°C
[0118] k' = 0. 7532
[0119] 208 ( 9%), 96 ( 27%), 95 ( 100%).
[0120] HPLC- MS ( terminis įpurškimas) : m/ e ( santykinis intensyvumas) : 521 [ M+ l] ( 15%), 417 ( 6%), 351 ( 9%), 313 ( 73%),
[0121] 267 ( 11%), 250 ( 12%), 209 (. 1. 00%).
[0122] BMR: 8: 7. 50 pls 2H, 6. 73 pls 2Fi, 4. 07 t 4K, 3. 60 s 6H. 3. 55 m 4H, 2. 73 m 2H, 2. 52 m 2H, 2. 48 m 211, 1. 99 m 2H, 1. 68 m 4H, 1. 64 m 4H, 1. 52 m 2H, 0. 89 t 6H.
[0123] Junginys susintetintas . iš pilokarpino natrio druskos ( 1069 mg; 4. 31 mmoi) ir 1, 4- dibrombutano ( 233 mg; 1. 08 mmol) pagal metodiką, aprašytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas kristalinamas iš chloroformo, eterio ir etilo acetato mišinio. Išeiga 185 mg ( 0. 37 mmol).
[0124] L. t. = 127- 129°C
[0125] k1; = 0. 6582
[0126] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 299 (21%), 267 (11%), 209 (20%), 208 (7%), 139 (49%), 96 (39%), 95 (100%) .
[0127] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 507 [ M+l] (18%), 417 (6%), 337 (6%), 299 (66%), 267 (11%), 250 (11%), 209 (100%).
[0128] BMR: 8: 7.50 pls 2H, 6.73 pls 2H, 4.08 t 4H, 3.60 s 6H, 3.54 m 4H, 2.73 m 2H, 2.52 m 2H, 2,47 m 2H, 2.00 m 2H, 1.81 m 4H, 1.64 m 4H, 0.89 t 6H.
[0129] Junginys susintetintas iš pilokarpino natrio druskos (1021 mg; 4.11 mmol) ir 1,3-dibrombutano (208 mg; 1.03 mmol) pagal metodiką, aprašytą 1 pav. Gautas bispilokarpatas kristalinamas iš etilo acetato ir eterio mišinio. Išeiga 330 mg (0.70 mmol).
[0130] L.t. = 71-73°C
[0131] k' = 0.6139
[0132] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 303 (4%), 209 (46%), 208 (15%), 96 (27%), 95 (100%).
[0133] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 493 [M+l] (25%), 417 (7%), 323 (9%), 285 (73%), 267 (9%), 250 (10%), 209 (100%).
[0134] - BMR: 8:7. 50 pls 2H, 6. 72 pls 2I- I, 4. 19 t 4H, 3. 60 s 6H, 3. 54 m 4H, 2. 72 m 2H, 2. 53 m 2H, 2, 49 m 2H, 1. 99 m 2Hf 2. 08 kv 2H, 1. 68 m 4H, 0. 89 t 6h*.
[0135] ( Formulė I' : Y=Y' - acetilas; A =■ 1, 4 - ksililenas, fumaratas)
[0136] Į mišinį, kuriame yra 679 mg ( 1. 22 tjiioI) 0, 0'- dihidro ( 1, 4- ksili. len) bispilckarpato ( žr. 1 pav.) ir 2026 mg kalio karbonato ( 14. 66 mmol) toluole ( 150 ml), sulaši-nama 767 mg ( 9. 77 mmol) acet. ilo chlorido per 30- 40 va-landų. Mišinys maišomas 40- 72 valandas. Į reakcijos mišinį pridedama 2% natrio bikarbonato tirpalo ( 150 ml) ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 3 valandas. Sluoksniai atskiriami ir tolueno fazė au kartus plaunama vandeniu ( 2x150 ml), džiovinama virš kalcio sulfato ( 30 min) ir nugarinama esant sumažintam slėgiui, gaunamas 0, 0'- diacetil ( 1, 4- ksililen) bispilokarpatas ( laisva bazė, alyva, 780 mg, 1. 22 mmol). Alyva ištirpinama toluene ( 20 ml) ir pridedamas fumaro rūgšties ( 425 mg, 3. 65 mmol) tirpalas 2- propanolyje ( 10 ml). Druska išso-dinama petrolio eteriu.
[0137] Mi' šinys paliekamas per naktd,, po to 0, 0' - diacetil ( 1, 4-ksililen) bispilokarpatas nufiltruojamas, gaunama 750 mg ( 0. 76 nunol) fumarato.
[0138] 20
[0139] d
[0140] L. t. = 58- 60°C
[0141] kf = 1.3987
[0142] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 638 [ M+']
[0143] (5%), 565 (3%), 458 (22%), 443 (19%), 387 (24%), 208 (21%), 207 (45%), 96 (20%), 95 (100%).
[0144] HR-MS = molekulinė masė = 638.32739 (išmatuota)
[0145] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas): 677 (35%), 661 (21%), 639 f M+l] (100%), 469 (13%), 431 (50%), 389 (37%), 209 (55%).
[0146] BMR:5:8.46 pls 2H, 7.41 s 4H, 7.19 pls 2H, 6.71 (fum.), 5.15 m 4H, 4.06 m 4H, 3.71 s 6H. 2.71 m 4H, 2.56 m 2H, 2.36 m 2H, 2.00 s 6H, 1.69 m 4H, 0.86 t 6H.
[0147] 10 Pavyzdys
[0148] (Formulė I1: Y=Y'= propionilas; A = 1,4-ksililenas; fumaratas)
[0149] Junginys buvo susintetintas iš 0,0'-dihidro(1,4-ksililen) bispilokarpato (473 mg; 0.85 mmol) (žr. 1 pav.) ir 'propionilo chlorido (631 mg; 6.82 mmol) pagal metodiką, aprašytą pav. 9. Junginys kristalinamas iš 2-propanolio, tolueno ir petrolio eterio mišįnio. Išeiga 730 mg (0.72 mmol) .
[0150] 20
[0151] d
[0152] L.t. = 86-89°C
[0153] k' =■ 2.3038
[0154] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 666 [ M+']
[0155] (5%), 472 (53%), 457 (45%) ., 401 (58%) r 209 (14%), 208 (13%), 207 (34%), 96 (43%), 95 (100%).
[0156] HR-MS = molekulinė manė = 666.35667 (išmatuota)
[0157] 666.36296 (apskaičiuota)
[0158] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 705 (46%), 689 (22%), 667 [ M+l] (100%), 459 (18%), 404 (11%), 351 (41%), 209 (80%).
[0159] BMR: 8: 8.39 pls 2E, 7.41 s 4H, 7.15 pls 2H, 6.72 (fum), 5.15 m 4H, 4.07 m 4E, 3.69 s 6H, 2.71 m 4K, 2.55 m 2H, 2.36 m 2H, 2.30 kv 4H, 1.69 m 4H, 1.08 t 6H, 0.86 t 6H.
[0160] 11 Pavyzdys
[0161] (Formulė T': Y-Y'= butirilas; A = 1,4 -ksililenas; fumaratas)
[0162] Junginys buvo susintetintas iš 0,01-dihidro(1,4-ksililen)bispilokarpato (431 mg; 0.78 mmol) (žr. 1 pav.) ir butirilo chlorido (663 mg; 6.22 mmol) pagal metodiką, aprašytą pav. 9. Junginys kristalinamas iš 2-propanolio, toiuolo ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 800 mg (0.77 mmol).
[0163] 20
[0164] d
[0165] L.t. = 90-92°C
[0166] k' = 4.0127
[0167] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 694 [ M+']
[0168] (3%), 486 (26%), 471 (14%), 415 (17%), 209 (15%), 208 (20%), 207 (37%), 96 (26%), 95 (100%).
[0169] HR-MS = molekulinė masė = 694.39378 (išmatuota)
[0170] 694.39415 (apskaičiuota)
[0171] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) ; 732 (77%), 717 (36%), 695 [ M+l] (100%), 525 (9%), 487 (13%), 455 (7%), 417 (14%), 297 (7%), 209 (28%).
[0172] BMR: 6 :8.51 pls 2H, 7.41 s 4H, 7.21 pls 2H, 6.71 (fum.), 5.15 m 4H, 4.07 m 4H, 3.72 s 6H, 2.72 m 4H, 2.55 m 2H, 2.36 m 2H, 2.27 t 4H, 1.69 m 4H, 1.59 m 4H, 0.91 t 6H, 0.86 t 6H.
[0173] 12 Pavyzdys
[0174] (Formulė I': Y=Y'= valerilas; A = 1,4-ksililenas; fumaratas)
[0175] Junginys buvo susintetintas iš 0,0'-dihidro(1,4-ksi-. lilen) bispilokarpato (395 mg; 0.71 mrnol) (žr. 1 pav.) ir butirilo chlorido (685 mg; 5.68 mmol) pagal meto-diką, aprašytą 9 pav. Junginys kristalinamas iš 2-propanolio, tolueno ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 567 mg (0.53 mmol).
[0176] 20
[0177] d
[0178] L.t. = 84-86°C
[0179] k' = 7. 3861
[0180] HR- MS spektras: m/ e ( santykinis intensyvumas) : 722 [ M+']
[0181] ( 9%) , 500 ( 60%) , 485 ( 31%), 42. 9 ( 41%), 209 ( 14%), 208 ( 17%), 207 ( 34%), 96 ( 46%), 95 ( 100%).
[0182] HR- MS = molekulinė masė = 722. 42308 ( išmatuota)
[0183] 722. 42546 ( apskaičiuota)
[0184] HPLC- MC ( terminis įpurškimas) ; m/ e ( santykinis intensyvumas) : 761 ( 86%), 745 ( 33%), 723 [ M+ l] ( 100%), 431 ( 16%), 362 ( 9%), 2C9 ( 35%).
[0185] BMR:. 8 : 8. 35 pls 2H, 7. 41 s 4H, 7. 13 pls 2H, 6. 72 ( fum.), 5. 15 m 4H, 4. 07 m 4H, 3. 69 s 6H, 2. 70 m 4H, 2. 55 m 2H, 2. 36 m 2H, 2. 29 t 4H, 1. 69 m 4H, 1. 55 m 4H, 1. 33 m 4H, 0. 91 t 6H, 0. 86 t 6H. 13 Pavyzdys
[0186] 0, 0*- Diciklopropilkarbonil( 1, 4- ksililen) bispilokarpatas
[0187] ( Formulė I' : Y=Y' = ciklopropilkarbon. ilas; A = 1, 4- ksililenas; fumaratas)
[0188] Junginys buvo susintetintas iš 0, 01- dihiaro( 1, 4- ksililen) bispilokarpato ( 547 mg; 0. 99 mmol) ( žr. 1 pav.) ir ciklopropilkarbonilo chlorido ( 788 mg; 7. 92 mmol) pagal metodiką, aprašytą 9 pav. Junginys kristalinamas iš 2- propanolio, toluolo ir petrolic eterio mišinio. Išeiga 843 mg ( 0. 81 mmol).
[0189] 20
[0190] -d
[0191] L. t. = 73- 75°C
[0192] k' = 2.4684
[0193] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 690 [ M+']
[0194] (5%), 484 (36%), 469 (19%), 413 (30%), 2.09 (7%), 208 (16%), 207 (46%), 96 (30%), 95 (100%).
[0195] HR-MS = molekulinė masė = 690.36014 (išmatuota)
[0196] 690.36286 (apskaičiuota)
[0197] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 728 (89%), 713 (42%), 691 [ M+l] (100%), 623 (12%), 521 (23%), 480 (30%), 453 (32%), 415 (46%), 209 (73%) .
[0198] BMR: 5 : 8.55 pls 2H, 7.41 s 4H, 7.24 pls 2H, 6.71 (fum.), 5.16 m 4H, 4.08 m 4H, 3.73 s 6H, 2.74 m 4H, 2.57 m 2H, 2.38 m 2H, 1.70 m 4H, 1.69 m 2H, 0.87 t 6H, 0.86 ra 8H.
[0199] 14 Pavyzdys
[0200] (Formulė I1: Y=Y' = benzoilas; A = 1,4-ksililenas; fumaratas)
[0201] Junginys buvo susintetintas iš 0,0'-dihidro(1,4-ksililen) bispilokarpato (486 mg; 0.'88 mmol) (žr. 1 pav.) ir ciklopropilkarbonilo chlorido (990 mg; 7.04 mmol) pagal metodiką, aprašytą 9 pav. Junginys kristalinamas iš 2-propanolio, toluolo ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 464 mg (0.42 mmol).
[0202] 20
[0203] d
[0204] L. t. = 72- 75°C
[0205] k' = 5. 9304
[0206] HR- MS spektras: m/ e ( santykinis intensyvumas) : 762 [ M+"]
[0207] ( 1%), 243 ( 10%), 208 ( 15%), 207 ( 38%), 96 ( 26%), 95 ( 100%) .
[0208] HR- MS = molekulinė masė = 762. 36774 ( išmatuota)
[0209] 762. 36286 ( apskaičiuota)
[0210] HPLC- MS ( terminis įpurškimas) : m/ e ( santykinis intensyvumas) : 785 ( 28%), 763 [ M+ l] ( 100%), 593 ( 16%), 555
[0211] ( 21%), 489 ( 7%), 451 ( 8%), 209 ( 42%).
[0212] BMR: 8 : 8. 41 pls 2H, 7. 93 m 4H, 7. 60 m 2H, 7. 46 m- 4H, 7. 32 s 4H, 7. 20 pls 2H, 6. 71 ( fum.), 5. 07 m 4H, 4. 32 m
[0213] 4H, 3. 71 s 6H, 2. 82 m 4H, 2. 65 m 2H, 2. 53 m 2H, 1. 75 m 4H, 0. 89 t 6H.
[0214] ( Formulė I" : R=R' = benzilas; B = 1, 4- butilenas; fuma-
[0215] •
[0216] J, tirpalą, kuriame yra 7. 78 mmol ( 1932 mg) pilokarpino rūgšties natrio druskos, kurios sintezė aprašyta 1 pav., ir 60 ml dimetilsulfoksido, per vieną valandą pridedama 7. 78 mmol benzilo chlorido ( 985 mg). Mišinys maišomas kambario temperatūroje 48- 72 valandas ir iš-pilamas i, 100 ml distiliuoto vandens. Mišinys ekstra-huojamas etilo acetatu ( 2x100 ml). Sujungti etilo acetato ekstraktai plaunami 150 ml distiliuoto vandens,
[0217] 150 ml 2% natrio bikarbonato tirpalo ir 150 ml distiliuoto vandens. Etilo acetato ekstraktai džiovinami virš kalcio sulfato ir etilo acetatas nugarinamas esant sumažintam slėgiui. Gaunamas pilokarpino rūgšties benzilo esteris. Esteris perkristalinamas iš chloroformo ir petrolio eterio mišinio, gaunama 1125 mg (5.56 mmol) esterio.
[0218] L.t. = 101--104°C
[0219] k' = 0.7658
[0220] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 208 (15%) , 96 (45%), 95 (100%) .
[0221] HPLC-MC (terminis įpurškimas) : m/'e (santykinis intensyvumas) : 317 [ M+l] (51%), 209 (100%).
[0222] BMR: 5 : 7.47 pls 1H, 7.33 m 5H, 6.69 pls 1H, 5.10 s 2H, 3.52 m 2H, 3.47 s 3H, 2.70 m 1H, 2.52 m 1H, 2.45 m 1H, 1.98 m 1H, 1.70 m 2H, 0.86 t 3H.
[0223] Į mišinį, kuriame yra 406 mg (1.28 mmol) pilokarpino
[0224] . rūgšties benzilo esterio ir 553 mg kalio karbonato (3.00 mmol) toluole (40 ml), per maždaug 24 valandas sulašinama adipoilo chlorido (108 mg 0.59 mmol). Mišinys maišomas 48 valandas kambario temperatūroje. Į reakcijos mišini, pridedama 2% natrio bikarbonato tirpalo (40 ml) ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 3 valandas. Sluoksniai atskiriami ir toluolo fazė du
[0225] kartus plaunama vandeniu (2x50 ml) , džiovinama virš kalcio sulfato (30 min) ir nugarinama esant sumažintam slėgiui, gaunamas 0,0'-adipoil(dibenzil)bispilokarpatas
[0226] ( laisva bazė, alyva, 324 mg, 0. 44 mmol). Alyva ištir-pinama toluole ( 15 ml) ir pridedamas fumaro rūgšties ( 153 mg, 1. 32 mmol) tirpalas 2- propanolyje ( 5 ml) . Druska išsodinama petrolio eteriu. Mišinys paliekamas per naktį, gaunamas 0, 0'- adipoil( dibenzil) bispilokar-pato fumaratas ( 327 mg, 0. 30 mmol).
[0227] 20
[0228] d
[0229] L. t. = 98- 100°C
[0230] k' = 4. 4810
[0231] HR- MS spektras: m/ e ( santykinis intensyvumas) : 742 [ M+"]
[0232] ( 5%), 741 ( 8%), 629 ( 39%), 625 ( 52%), 536 ( 75%), 535 ( 100%), 459 ( 69%), 445 ( 43%), 357 ( 33%), 299 ( 45%), 209 ( 55%), 207 ( 64%), 95 ( 69%), 91 ( 56%).
[0233] HR- MS = molekulinė masė = 742. 390380 ( išmatuota)
[0234] 742. 394150 ( apskaičiuota) HPLC- MS ( terminis įpurškimas) : m/ e ( santykinis intensyvumas) : 780 ( 75%), 765 ( 28%), 743 [ M+ l] ( 100%), 480 ( 8%), 445 ( 10%), 317 ( 23%), 209 ( 26%).
[0235] BMR: 8 : 8. 36 pls 2H, 7. 35 m 10H, 7. 14 pls 2H, 6. 72 ( fum.), 5. 14 m 4H, 4. 07 m 4H, 3. 65 s 6H, 2. 68 m 4H, 2. 54 m 2H, 2. 34 m 2H, 2. 30 t 4H, 1. 69 m 4H, 1. 59 t 4H, 0. 87 t 6H.
[0236] ( Formulė I" : R=R' =benzilas; B = 1, 3- propilenas; fumaratas)
[0237] Junginys buvo susintetintas iš pilokarpino rūgšties benzilo esterio (633 mg; 2.00 mmol) ir glutarilo chlorido (135 mg; 0.80 mmol) pagal metodiką,- aprašytą 15 pav. Junginys kristalinamas iš 2.-propanolio, toluolo ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 477 mg (0.44 mmol).
[0238] 20
[0239] d
[0240] L.t. - 55-58°C
[0241] k' = 3.7658
[0242] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 728 [M''3 (0.15%) , 419 (8%>, 343 (16%), 209 (12%), 208 (14%), 20"?
[0243] (45%), 96 (31%), 95 (76%), 91 (100%).
[0244] HR-MS = molekulinė masė = 728.3734740 (išmatuota)
[0245] 728.3785152 (apskaičiuota)
[0246] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 729 [M+l] (36%), 431 (45%), 317 (35%), 209 (100%).
[0247] BMR: 5 : 8.47 pls 2H, 7.35 m 10H, 7.20 pls 2H, 6.71 (fum) , 5.14 m 4H, 4.07 m 4H, 3.67 s 6H, 2.68 m 4H, 2.54 m 2H, 2.34 t 4H, 2.32 iti 2H, 1.84 m 2H, 1.69 m 4H, 0.87 t 6H.
[0248] Junginys buvo susintetintas iš pilokarpino rūgšties benzilo esterio (633 mg; 2.00 mmol) ir sukcinilo chlorido (124 mg; 0.80 mmol) pagal metodiką, aprašytą 15 pav. Junginys kristalinamas iš 2- propanolio, toluolo ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 402 mg ( 0. 38 mmol).
[0249] 20
[0250] d
[0251] L. t. = 65- 67°C
[0252] k' = 3. 4557
[0253] HR- MS spektras: m/ e ( santykinis intensyvumas) : 714 [ M+"]
[0254] ( 1%), 537 ( 10%), 415 ( 9%), 329 ( 11%), 208 ( 10%), 207 ( 31%), 96 ( 23%), 95 ( 94%), 91 ( 100%).
[0255] HR- MS = molekulinė masė = 714. 3668980 ( išmatuota)
[0256] 714. 3628652 ( apskaičiuota)
[0257] HPLC- MS ( terminis įpurškimas) : m/ e ( santykinis intensyvumas) : 751 ( 10%), 715 [ M+ l] ( 47%), 417 ( 32%), 317 ( 57%), 209 ( 100%).
[0258] BMR: 8 : 8. 44 pls 2H, 7. 35 m 10H, 7. 17 pls 2H, 6. 71 ( fum.), 5. 14 m 4H, 4. 09 m 4H, 3. 65 s 6H, 2. 68 m 4H, 2. 58 s 4H, 2. 53 m 2H, 2. 32 m 2H, 1. 69 m 4H, 0. 86 t 6H.
[0259] ( Formulė I" : R=R' = benzilas; B = etenilenas; fumaratas)
[0260] Junginys buvo susintetintas iš pilokarpino rūgšties benzilo esterio ( 633 mg; 2. 00 mmol) ir fumaroilo chlorido ( 122 mg; 0. 80 mmol) pagal metodiką, aprašytą 15 pav. Junginys kristalinamas iš 2-propanoli.o, tolueno ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 112 mg (0.11 mmol).
[0261] 20
[0262] d
[0263] L. t. = 64-66°C
[0264] k' = 4.2785
[0265] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 712 [ M+*]
[0266] (0.4%), 411 (41%), 407 (34%), 318 (56%), 317 (96%), 299 (39%), 209 (67%), 207 (40%), 96 (47%), 95 (100%), 91 (62%).
[0267] HR-MS = molekulinė masė = 712.3462220 (išmatuota), 20 ev
[0268] 712.3472151 (apskaičiuota)
[0269] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 750 (40%), 733 (20%), 713 [ M+l] (100%), 450 (15%), 413 (32%), 317 (96%), 209 (42%).
[0270] (Formulė I": R=R'= benzilas; B = p-fenilenas; fuma-• ratas)
[0271] Junginys buvo susintetintas iš pilokarpino rūgšties benzilo esterio (633 mg; 2.00 mmol) ir tereftaloilo chlorido (162 mg; 0.80 mmol) pagal metodiką, aprašytą 15 pav. Junginys kristalinamas iš 2-propanolio, tolueno ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 370 mg (0.33 mmol).
[0272] 20
[0273] d
[0274] L.t. = 130-133°C
[0275] k' = 7.3354
[0276] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas); 762 [ M+']
[0277] (1%), 208 (46%), 96 (36%), 95 (100%), 91 (70%).
[0278] HR-MS = molekulinė masė = 762.3563840 (išmatuota)
[0279] 762.3628652 (apskaičiuota)
[0280] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas): 763 [ M+l] (82%), 465 (52%), 317 (97%), 267 23%), 209 (100%).
[0281] BMR: 8 : 8.46 pls 2H, 8.05 s 4H, 7.32 m 10H, 7.24 pls 2H, 6.72 (fum.), 5.10 m 4H, 4.37 m 4H, 3.70 s 6H, 2.83 m 4H, 2.66 m 2H, 2.54 m 2H, 1.75 m 4H, 0.91 t 6H.
[0282] 0, 0'- Diciklopropilkarbonil ( 1, 6- heksilen) bispilokarpatas
[0283] (Formulė I'; Y=Y'= ciklopropilkarbonilas; A = 1,6-heksilenas; fumaratas)
[0284] Junginys buvo susintetintas iš 0,0'-dihidro(1,6-heksilen) bispilokarpato (žr. 5 pav.) (600 mg; 1.12 mmol) ir ciklopropilkarbonilo chlorido (7 66 mg; 7.33 mmol) pagal metodiką, aprašytą 9 pav. Junginys kristalinamas iš 2-propanolio, tolueno ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 620 mg (0.61 mmol).
[0285] 20
[0286] d
[0287] HR- MS spektras; m/ e ( santykinis intensyvumas) : 670 [ M+']
[0288] ( 2 %) , 464 ( 13%), 449 ( 10%), 337 ( 10%), 209 ( 10%), 207 ( 21%), 96 ( 53%), 95 ( 100%) .
[0289] HPLC- MS ( terminis įpurškimas) : m/ e ( santykinis intensyvumas) : 671 [ M+ l] ( 100%) .
[0290] BMR: 5 :. 8. 53 pls 2H, 7. 24 pls 2H, 6. 72 ( fum.), 4. 12 plm 8H, 3. 81 s 6H, 2. 77 m 4H, 2. 52 m 2H, 2. 38 m 2H, 1. 70 m 8H, 1. 61 m 2H, 1. 45 m 4H, 0. 91 m 6H, 0. 90 m 8H.
[0291] Fermentinė hidrolizė 80% plazmoje ( pH 7. 40 ir 37°C) : t1/ 2 = 15 min
[0292] pH 6. 00: t1/ 2 = 3405 t pH 4. 20: t1/ 2 = 3221 t
[0293] 0, 0'- Diciklopropilkarbonil ( 1, 5- pentilen) bispilokarpatas
[0294] ( Formulė I' : Y=Y' = ciklopropilkarbonilas; A = 1, 5 - pentilenas; fumaratas)
[0295] Junginys buvo susintetintas iš 0, 0' - dihidro( 1, 5- pentilen) bispilokarpato ( žr. 6 pav.) ( 424 mg; 0. 82 mmol) ir ciklopropilkarbonilo chlorido ( 682 mg; 6, 52 mmol) pagal metodiką, aprašytą pav. 9. Junginys kristalinamas iš 2- propanoli. o, tolueno ir petrolio eterio mišinio. Išeiga 230 mg ( 0. 23 mmol).
[0296] HR-MS spektras: m/e (santykinis intensyvumas): 656 f M+']
[0297] (3%), 450 (39%), 435 (23%), 379 (13%), 363 (13%), 209 (15%), 207 (29%), 96 (50%), 95 (100%).
[0298] HPLC-MS (terminis įpurškimas): m/e (santykinis intensyvumas) : 657 [ M+1J (92%) .
[0299] BMR: 8 : 8.34 pls 2H, 7.15 pls 2H, 6.71 (fum.), 4.12 plm 8H, 3.77 s 6H, 2.77 m 4H, 2.51 m 2H, 2.38 m 2H, 1.71 m 8H, 1.61 m 2H, 1.48 m 4H, 0.91 m 6H, 0.88 m 8H.
[0300] Fermentinė hidrolizė 80% plazmoje (pH 7.40 ir 37°C) : t1/2 = 13 min
[0301] pH 6.00: t1/2 = 2368 t pH 4.20: tl/2 = 4624 t
[0302] Log (P) = 0.401 (pH -- 5.0)
1. Bispilokarpino rūgšties esterių dariniai, turintys bendrą formulę
2. Bispilokarpino darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad tai yra• (ksililen)bispilokarpatas, ypač (1,4-ksililen)bispilokarpatas.
• (ksililen)bispilokarpatas, ypač (1,4-ksililen)bispilokarpatas.3. Bispilokarpino darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad tai yra 0, 0'-dipropionil-, 0, 0'-dibutiril- arba 0, 0'-diciklopropilkarbonil (1,4-ksililen)bispilokarpatas.
4. Bispilokarpino darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad tai yra (dibenzil)bispilokarpatas. ypač 0,0'-glutaril-(dibenzil)bispilokarpatas.
5. Junginių, turinčių formulę I pagal 1 punktą, gavimo būdas, besiskiriantis tuo, kada) siekiant pagaminti jungini,, kurio formulė yra 1',
6. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad joje esanti veiklioji medžiaga turi (I) for-mulės junginį, apibrėžtą 1 punkte.