LT3375B

PEPTIDAI IR FARMACINĖ KOMPOZICIJA JŲ PAGRINDU

PEPTIDES AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING THEM

Referatas

[LT] Nauji veikiantys bradikinin-antagonistiniai peptidai pagal formulę@A-B-C-E-F-K-(D)-Tic-G-M-F'-I (I)@kurioje radikalai turi tekste aprašytas reikšmes, o taip pat fiziologiškai priimtinos druskos bei farmacinės kompozicijos jų pagrindu. Jų terapinis panaudojimas esant visoms patologinėms būsenoms, kurias iššaukia bradikinas ir giminingi bradikininui peptidai.

[EN]

Aprašymas

[0001] Išradimas priskiriamas naujiems bradikinin-antagonistinio veikimo peptidams, o taip pat farmakologinei kompozicijai, sudarytai jų pagrindu.

[0002] PCT paraiškoje Nr. 86/07263 aprašomi bradikinin-antagonistiniai peptidai, kuriuose, be kitko, pepti-dinio hormono bradikinino arba jo analogo L-Pro 7 pozicijoje pakeistas D-aminorūgštimi, kaip, pvz. D-Phe, D-Thi, D-Pal, CDP, MDY, D-Phg, D-His, D-Tp, D-Tyr,

[0003] Šio išradimo esmė buvo - surasti naujus bradikinin-antagonistėmis savybėmis pasižyminčius peptidus.

[0004] Šis uždavinys išsprendžiamas pagalba peptidų, kurių formulė:

[0005]

[0006] A reiškia vandenili,, (C_^-Cg) - alkanoilą arba ((_^-Cg) - alkanoilą, pakeistą karboksilo grupe, arba radikalą, kurio formulė II

[0007]

[0008] R¹ reiškia vandenilį, C_^-Cg - alkanoilą arba C_^-Cg - alkanoilą, pakeistą hidroksifenilpropionilu;

[0009] R reiškia C_^-Cg - alkilą, pakeistą amino, guanicido grupe, fenilu, pakeistu hidroksilo grupe.

[0010] B reiškia tiesioginę jungti, arba pagrindinę

[0011] aminorūgšti,, esančią L- arba D- konfigūracijoje, minėta aminorūgštis priklauso Arg, Lys ir Orn eilei, ir gali būti pakeistos šoninėje grandinėje benziloksikarbonilu,

[0012] nitrogrupe, tozilu, nikotinoilu, - CO- NH- C6H6 arba 2, 3,

[0013] 5- trimetil- 4- metoksifenilsulfonilu;

[0014]

[0015] kurioje G' yra nepriklausomas radikalas, kurio formulė

[0016] IV

[0017]

[0018] kurioje R⁴ ir R⁵ kartu su kitais atomais sudaro heterociklinę, monociklinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir keturius anglies atomus, sistemą, kuri gali būti pakeista hidroksigrupe arba grupe, turinčią 1

[0019] azoto atomą, 3 anglies atomus ir 1 deguonies atomą arba sudarančią heterociklinę, biciklinę žiedinę sistemą,

[0020] turinčią 1 azoto atomą ir 7 anglies atomus;

[0021] E reiškia L- arba D- konfigūracijos Phe, Trn arba Thia aromatinės aminorūgšties liekaną;

[0022] F reiškia L- arba D- konfigūracijos Ash, Cys, Gln, Orn,

[0023] Ser, Trp, Phe, Thia aminorūgšties radikalą arba tiesio-ginę jungti,.

[0024] K reiškia radikalą - NH-( CH2) X- C0, kur X=l- 2, arba reiškia tiesioginę jungti,.

[0025]

[0026] kurioje R⁴ ir R⁵ kartu su kitais atomais sudaro heterociklinę, monociklinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir keturius anglies atomus, arba sistemą, turinčią 1 azoto atomą, 3 anglies atomus ir 1 deguonies atomą arba sudarančią heterociklinę, biciklinę žiedinę sistemą, turinčią 1 azoto atomą ir 7-9 anglies atomus;

[0027] F' reiškia liekaną -NH-(CH₂)₄-, arba L- arba D- konfigū-racijos Arg arba Ser aminorūgšties radikalą, kuris gali būti pakeistas ramnozilu arba 2, 3, 5-trimetil-4-metoksifenilsulfonilu arba reiškia tiesioginę jungti,;

[0028] I reiškia amino arba hidroksigrupę, arba fiziologiškai priimtinas jų druskas.

[0029] Jeigu nieko kito nenurodyta, tai aminorūgšties radikalo pažymėjimas, be stereodeskriptoriaus reiškia, kad radikalas yra L-formoje (Šrioderis, Liubke, "Peptidai", 1 tomas, Niujorkas, 1965, psl. XXII-XXIII; Houben-Veil, "Organinės chemijos metodai", tomai XV/1 ir 2, Štutgartas 1974) kaip pavyzdžiui:

[0030] IV formulėje heterociklinės žiedinės sistemos radikalas gali būti sekančių grupių heterociklų radikalai: pirolidinas (A); piperidinas (B); tetrahidroizochinolinas (C) ; dekahidroizochinolinas (D) ; oktahidroindolas (E) ; oktahidrociklopenta (b)-pirolas (F) ; 2-azibiciklo(2.2.3)-oktanas (G); 3-azibiciklo (2.3.1)-heptanas (H); 2-azispiro(4.4)-nonanas(J); spiro (bi-ciklo(2.2.1)-heptan)-2,3-pirolidinas) (K); spiro ( (bi-ciklo(2.2.2)oktan)-2,3-pirolidinas) (L);2-azitriciklo (4 . 3 . 0 .16'9)-dekanas (M); dekahidrociklohepta (b) pirolas (N); oktahidroizoindolas (O); oktahidrociklopenta (c)pirolas (P); 2,3,3a,4,5,7a-heksahidroindolas (0); tetrahidrotiazolas (R); 2-azibiciklo(3.1.0)heksanas (S) ; izoksoazolinas (T) ; pirozolidinas (U) ; hidroksiprolinas (V); kurie esant reikalui gali būti pakeičiami.

[0031] Aukščiau minėtuose radikaluose esantys heterociklai psl.2a žinomi pagal JAV paraiškas Nr. 4344349, 4374847, 4350704, EP paraiškas Nr. 50800, 51741, 51080, 49658, 49605, 29488, 46958, 52870, 271865, VFR paraiškas Nr.

[0032] 3226768, 3151690, 3210496, 3211397, 3211676, 3227555, 3242151, 2346503 ir 3246757.

[0033]

[0034] Be to, kai kurie iš šių heterociklų pateikiami VFR

[0035] Jeigu specialiai nepažymėta, alkilas gali turėti tiesią ar besišakojančią atomų grandinę. Tai taip pat galioja ir tokiems radikalams, kaip, pvz. alkokcilas, arilalkilas arba alkanoilas. (C₆-C₁₂)-arilas dažniausiai reiškia fenilą, naftilą arba bifenilą. Atitinkamai galima sudaryti ir sudėtingesnius radikalus, kaip, pvz.

[0036] Halogenas reiškia fluorą, chlorą, bromą arba jodą, pirmenybę teikiant chlorui.

[0037] Iš druskų pageidautinos šarminių metalų druskos, arba žemės šarminių metalų druskos, druskos su fiziologiškai priimtinais aminais ir druskos, i, kurių sudėti, įeina liekanos organinių ir neorganinių rūgščių, kaip druskos rūgštis, bromo vandenilio rūgštis, sieros rūgštis, fumaro rūgštis, citrinos rūgštis, malono rūgštis, acto rūgštis ir kt.

[0038] B reiškia argininą, liziną, ornitiną, 2,4-diaminobutiroilą, arba L-homoarginino liekaną, kai atitinkamai aminogrupė arba guanidinogrupė, esanti šoninėje grandinėje gali būti pakeista A, kaip aprašyta punktuose a_r) arba a2) ;

[0039] E reiškia L- arba D- konfigūracijos aromatinės amino-rūgšties liekanos radikalą, kuris arilinėje dalyje gali būti pakeistas halogenu 2-oje, 3-oje arba 4-oje pozicijoje, tirozinas, O-metiltirozinas, 2-piridil-alaninas arba naftilalaninas;

[0040] F reiškia L- arba D- konfigūracijos pagrindinės aminorūgšties radikalą, pvz. argininą arba liziną, vienok guanidino grupė arba aminogrupė, esanti šoninėje grandinėje, gali būti pakeista A, kas aprašyta punkte a_t) arba a₂), arba reiškia radikalą - NH-( CH2) n- kur n=2-8;

[0041] K- reiškia radikalą - NH-( CH2) X- C0, kur X=2- 4, arba reiškia tiesioginę jungti,. Labiau pageidaujami yra junginiai, kurie atitinka formulę I, kurioje: B reiškia argininą, ornitiną arba liziną, kai guanidino grupė arba aminogrupė, esanti šoninėje grandinėje yra nepakeista arba pakeista ( C1- C8)- alkanoilu, ( C7- C10)-ariloilu, ( C3- C8)- heteroariloilu, ( C^- Cg) - alkisulfonilu arba ( C6- C12)- arilsulfonilu, kai arilo, heteroarilo, ariloilo, arilsulfonilo ir heteroariloilo radikalai, kaip aprašyta punkte a2) gali būti pakeisti 1, 2, 3 arba 4 vienodais ar skirtingais radikalais;

[0042] E reiškia fenilalaniną, 2- chlorfenilalaniną, 3- chlor-fenilalaniną, 4- chlorfenilalaniną, 2- fluorfenilalaniną, 3- fluorfenilalaniną, 4- fluorfenilalaniną, tiroziną, 0-metiltiroziną arba ( 3- tinil) alaniną;

[0043] A reiškia vandenilį, ( D)- arba ( L)- H- argininą, ( D)-arba ( L)- H- liziną, arba ( D)- arba ( L)- H- ornitiną;

[0044] B reiškia argininas, ornitinas arba lizinas, kai guanidino grupė arba aminogrupė, esanti šoninėje grandinėje gali būti pakeista vandeniliu, ( Cl- Cs) - alkanoilu, (C7-C13) -ariloilu, (C₈-C₉)-heteroaloilu, (Cj^-C₈)-alkilsulfonilu arba (C6-C12) -arilsulfonilu, kur arilo, heteroarilo, ariloilo, arilsulfonilo ir heteroariloilo radikalai, reikalui esant gali būti pakeisti 1, 2, 3 arba 4 vienodais ar skirtingais radikalais, pasirinktais iš metoksilo arba halogeno.

[0045] C reiškia Pro-Pro-Gly, Hyp-Pro-Gly arba Pro-Hyp-Gly;

[0046] E reiškia Phe arba Thi;

[0047] F reiškia Ser, Hser, Leu, Lys, Vai, Nle, Ile arba Thr;

[0048] K reiškia paprastą jungtį; M reiškia paprastą jungti,;

[0049] G reiškia IV formulės heterociklinės žiedinės sistemos radikalą, kur geriau tinka heterociklų radikalai,

[0050] kuriems priklauso pirolodinas (A); piperidinas (B); tetrahidroizochinolinas (C); eis- ir trans-dekahidroizochinolinas (D) ; cis-endo oktahidroindolas (E) ; cis-eksi-oktahidroindolas (E) ; trans-oktahidroindolas (E); cis-endo, cis-eski-, trans-oktahidrociklopen-tano(b)pirolas (F) arba hidroksiprolinas (V).

[0051] Labiausiai tinkamai I formulės peptidai yra: H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH

[0052] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH

[0053] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-PPhe-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH

[0054] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH

[0055] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser(D)-Tic-Oic-Arg-OH

[0056] Išradime kalbama apie I formulės peptidų gavybos būdą,

[0057] a) fragmentas su C-galine laisva karboksiline grupe arba jo aktyvuotas darinys sujungiamas su atitinkamu

[0058] b) laipsniškai sukuriama peptido struktūra, gautame atitinkamai pagal (a) arba (b) junginyje, reikalui

[0059] esant, atskeliama, viena ar kelios apsauginės grupės, kurios buvo prijungtos kitų funkcijų apsaugai, ir tokiu būdu gauti I formulės junginiai, reikalui esant, paverčiami i, fiziologiškai įsisavinamas druskas.

[0060] Šiame išradime pateikti peptidai buvo gauti, naudojant žinomus peptidų cheminius būdus, pvz. pagal Houbenweyl, Methoden der organischen Chemie, Band 15/3, B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 86, 2149 (1963) arba R. C. Shepard, Int. J. Peptide protein Res. 21, 118

[0061] (1983) . Kaip a-amino apsauganti grupė yra naudojama uretaninė apsauginė grupė, kaip, pvz. tretinė

[0062] butiloksikarbonilinė (Boc) apsauginė grupė arba fluoretilmetoksikarbonilinė (Fmac). Reikalui esant,

[0063] pvz. norint išvengti šalutinių reakcijų ar siekiant susintetinti specialius peptidus, funkcinės grupės,

[0064] esančios aminorūgščių šoninėse grandinėse gali būti apsaugotos atitinkamomis apsauginėmis grupėmis (T.W.Greene, "Protective Groups in organic Synthesis"), ir pirmiausia tam naudojama Arg(Tos), Arg(Mts), Arg(mir), Arg(PMC), Asp(OBzl), Asp(OBut), Cys(4-MeBlz), Cys(SBut), Glu(OBzl), Glu(OBut), His(Tos), His(fmoc), His(Dnp), His(Trt), Lys(Cl-z), Lys(Boc), Met(o), Ser(But), Ser(Bzl), Thi(Bzl), Thr(But), Trp(Mts), Trp(CHO), Tyr(Bzl) arba Tyr(But).

[0065] Kietos fazės sintezė prasideda peptido C-gale, susirišant apsaugotą amino rūgšti, su atitinkama derva. Tokios pradinės medžiagos gali būti gautos surišant apsaugomą aminorūgšti, su modifikuota chlormetilo, hidroksimetilo, benzhidrilamino (BHA) arba metilbenz-hidlamino (MBHA) grupės pagalba polistiroline arba poliakrilamidine derva esterine arba amidine jungtimi. Naudojamos kaip pagrindas dervos gali būti įsigytos komerciniais kanalais.

[0066] BHA- ir MBHA- dervos paprastai naudojamos tada, kai susintetintas peptidas C-gale turi turėti laisvą amido grupę. Jeigu peptidas C-gale turi turėti antrinę amido grupę, naudojamos chlormetilinė arba hidroksimetilinė derva ir atskėlimas vykdomas atitinkamų aminų pagalba. Jeigu, pavyzdžiui, norima gauti etilamidą, peptidas gali būti atskirtas nuo dervos etilamino pagalba, ir šoninės grandinės apsauginė grupė pašalinama vėliau atitinkamų reagentų pagalba. Jeigu peptido aminorūgšties tretinio butilo apsauginės grupės turi apsaugoti šoninę grandinę, tai sintezė vykdoma Fmoc-apsauginės grupės pagalba, siekiant laikinai užblokuoti aminorūgšties a-aminogrupę, naudojant aprašytą pavz. R.C. Sherpard. J. Chem. Soc., Chem. Comm. 1983, 587 metodiką, kai arginino guanidino grupė apsaugoma piridin-perchlorato pagalba, o kitos funkcinės grupės aminorūgščių šoninėje grandinėje apsaugomos apsauginių

[0067] benzilo grupių pagalba, kurios atskeliamos katalitiškai hidrinant (A. Felix et al. J. Org. Chem. 13, 4194

[0068] (1978)) arba natriu skystame amoniake (W. Robetrts. J. Am. Chem. Soc. 76, 6303 (1954).

[0069] Atskėlus sujungtos su derva amonorūgšties apsauginę aminogrupę, atitinkamo reagento, pvz. trifluoracto rūgšties metileno chloride Šesant Boc apsauginei grupei) arba 20 % piperidino dimetilformamide tirpalu

[0070] (esant Fmoc apsauginei grupei), aminorūgštys nuosekliai sujungiamos norima seka. Tarpiniame etape susidariusios peptidinės dervos prieš susirišimą su sekančiu aminorūgšties dariniu deblokuojamos aukščiau aprašytų reagentų pagalba.

[0071] Kaip reagentai gali būti naudojami visi aktyvuojantys reagentai, naudojami peptidų sintezėje, pvz. Houben-Weil "Organinės chemijos metodai", t.15/2, tokie kaip karbodiimidai, kaip N, N'-dicikloheksilkarbodimidas arba N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)karbodiimidas. Sujungimas su derva gali būti vykdomas aktyvuojančio reagento pagalba tiesiogiai prijungiant aminorūgšties darini,, bei, reikalui esant, su racemizaciją slopinančiu priedu, kaip 1-hidroksibenzotriazolu (HOBt)

[0072] (W. Konig, R. Geiger, Chem. Ber. 103, 708 (1970) arba 3-hidroksi-4-okso 3,4-dihidrobenzotriazinu (HOObt)

[0073] (W. Konig, R. Geiger, Chem. Ber. 103, 2054 (1970)) vienok pradinis aktyvavimas aminorūgšties kaip simetrinio anhidrido arba HOBt- arba HOObt-esterio gali būti vykdomas atskirai ir toks aktyvuotas tirpalas gali būti pridedamas prie peptinės dervos.

[0074] Aminorūgšties sujungimas arba aktyvavimas vienu iš aukščiau paminėtų aktyvuoj ančių reagentų gali būti vykdomas dimetilformamide, N^1-metilpirolidone, metileno chloride arba šių tirpiklių mišinyje. Aktyvus aminorūgšties darinys paprastai naudojamas 1,5-4 didesniame, negu reikalinga, kiekyje. Jeigu įvyksta nepilna sujungimo reakcija, ji yra kartojama, nevykdant peptidinės dervos aminogrupės deblokavimo.

[0075] Sėkminga reakcijos eiga gali būti kontroliuojama ninhidrino reakcijos pagalba, kaip aprašyta E. Kaiser et al. Anai. Biochem. 34, 595 (1970). Sintezė taip pat gali būti automatizuota, pvz. panaudojant firmos "Applied Biosystems" peptidų sintezės programas, tiek sudaryti naujas. Pastarosios reikalingos naudojant aminorūgštis, apsaugotas Fmoc- grupėmis.

[0076] Po to, kai aukščiau aprašytu būdu susintetinamas peptidas, jis gali būti atskeltas nuo dervos skysto fluoro vandenilio (peptidams, gautiems pagal Boc metodą) arba trifluoracto rūgšties (peptidams, gautiems pagal Fmoc metodą) pagalba. Šie reagentai atskelia ne tik peptidą nuo dervos, bet ir kitas apsaugines šonines grandinės grupes. Tokiu būdu, naudojant BHA- ir MBHA-dervas peptidas gaunamas rūgšties formoje. Naudojant BHA- ir MBHA- dervas, atskeliant fluoro vandeniliu ar trifluoracto rūgštimi, peptidas gaunamas rūgšties amido pavidale. Kiti peptido amido gavimo būdai aprašyti patentinėse VFR paraiškose nr. P37 11 866.8 ir P37 43 620.1. Čia peptido amidų atskyrimas nuo dervos vykdomas naudojant paprastai peptidų sintezėje naudojamas vidutinio stiprumo rūgštis (pvz. trifluoracto rūgšti,), o katijonams neutralizuoti naudojami tokie junginiai, kaip pvz., fenolas, krezolas, triokrezolas, anizolas, etanditiolas, dimetilsulfidas, etilmetilsulfidas ir kt. naudojami tokiais atvejais, atskirai arba mišinyje. Trifluoracto rūgštis gali būti naudojama ir praskiesta atitinkamais tirpikliais, kai pvz. metilo chloridu.

[0077] Jeigu turi būti išsaugotos peptidinių šoninių

[0078] grandininių tretinio butilo arba benzilo apsauginės grupės, susintetinto peptido atskyrimas vykdomas 1-procentinės praskiestos metilo chloride trifluoracto rūgšties pagalba (R. C. Shepard. J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1983, 587) . Jeigu turi būti išsaugotos tretinio butilo arba benzilo apsauginės grupės, naudojami atitinkami sintezės atskyrimo būdai.

[0079] Sintetinant peptidus C-galinės amidinės grupės,

[0080] ©-amino- arba oo-guanidinalkilinės grupės pagalba taip pat naudojama Šepardo aprašyta derva.

[0081] Po sintezės apsaugotos šoninėje grandinėje peptidas atskiriamas nuo dervos ir toliau atitinkamo amino, o-aminoalkilamino arba o-guanidinalkilamino pagalba yra perdaromas, ir reikalui esant kitos grupės gali būti laikinai apsaugotos žinomais metodais.

[0082] Kitas peptidų gavimo to-aminoalkilinės grupės pagalba būdas aprašytas VFR patentinėje paraiškoje Nr. 36 35 670.0.

[0083] Išradime pateikiami peptidai buvo sintetinami daugiausiai kietoje fazėje reakcijų pagalba, naudojant dvi apsauginių grupių taktikas.

[0084] Sintezė buvo vykdoma firmos "Applied Biosystems" peptidų sintezės automatiniu modeliu 430A, panaudojant Boc- ir Fmoc- apsauginių grupių metodą laikinam a-aminogrupės blokavimui.

[0085] Naudojant Boc-apsauginę grupę, panaudotos gamintojo sudarytos sintezės programos.

[0086] Peptidų su laisva karboksiline grupe C-gale sintezė buvo vykdoma apdorotoje su atitinkama Boc-aminorūgštimi 4-(hidroksimetil) fenilacetamidometilpolistirolo dervoje (R. B. Merrifield. J. Org. Chem. 43, 2845

[0087] (1978)), pateiktoje "Applied Biosystems" firmos. Peptidamidams gauti buvo panaudota tos pačios firmos MBHA-derva.

[0088] Kai aktyvuojantys reagentai naudojami N, N'-diciklo-heksilkarbodiimidas arba N, N'-diizopropilkarbodi-imidas. Aktyvavimas buvo vykdomas simetriniame anhid-ride, HOBt-eteryje arba NMP. Sujungimui buvo naudojama 2-4 aktyvuoto aminorūgšties darinio ekvivalentai. Jeigu susijungimo reakcija įvykdavo nepilnai, ji buvo kartoj ama.

[0089] Naudojant Fmoc- apsauginę grupę laikinam a- amino grupės apsaugojimui sintezės firmos " Applied Biosystems" modeliu 430A buvo sudarytos naujos sintezės programos. Sintezė vyko ant firmos " Bachem" p- benziloksibenzilalkoholio dervos ( S. Wang. J. Am. Chem. Soc.

[0090] 95, 1328 ( 1973)), kuri buvo esterinama pagal žinomą metodiką ( E. Atherton et al. J. C. S. Chem. Comm. 1981, 336) atitinkamos aminorūgšties pagalba. Aminorūgšties darinių HOBt- ir HOObt- esterių pavidale aktyvavimas buvo vykdomas gamintojo pateiktose kapsulėse su aminorūgštimi pridedant diizopropilkarbodiimido tirpalą dimetilformamide i, anksčiau gautą HOBt arba HOObt ir aminorūgšties darinio mišini,. Lygiai taip pat substancijoje gali būti naudojami gauti Fmoc-aminorūgšties- OObt- esteriai, kaip aprašyta EP paraiškoje Nr. 87107634. 5. Fmoc- apsauginės grupės atskėlimas buvo vykdomas 20 % piperidino dimetilforamide tirpalo pagalba reakcijos inde. Aminorūgšties darinio naudotas perteklius sudarė 1, 5-2, 5 ekvivalento. Jeigu susijungimas buvo nepilnas, jis, kaip ir Boc- metode, buvo kartojamas.

[0091] Išradime pateikti peptidai kiekvienas atskirai ar kartu pasižymi bradikinin- antagonistiniu poveikiu, kuri,

[0092] galima patikrinti įvairiais modeliais ( Handbook of Exp. Pharmacol., Vol 25, Springer Verlag, 1970, S. 53- 55),

[0093] kaip pvz. izoliuotoje žiurkės gimdoje, jūros kiaulytės žarnoje arba jūros kiaulytės izoliuotoje plaučių

[0094] Išbandant išradime pateiktus peptidus jūros kiaulytės izoliuotoje plaučių arterijoje ( Dunkin. Hartley) 400-450 g svorio jūros kiaulytės numarinamos smūgiu i,

[0095] Atidaroma krūtinės ląsta ir atsargiai išimama plaučių arterija. Supantys audiniai pašalinami ir arterija 45 ⁰ kampu spirališkai supjaustoma.

[0096] Gautą 2,5 ilgio ir 3-4 cm pločio arterijos juostą

[0097] fiksuoja 10 ml organinėje vonioje, užpildytoje tirpalu.

[0098] Tirpalo sudėtis mmol/1

[0099]

[0100] Per tirpalą praleidžiama 95 % 0₂ ir 5 % C0₂ mišinį ir pakaitina ji, iki 37 °C. Vandenilio rodiklis yra 7,4,

[0101] Izotoniniai susitraukimo pasikeitimai yra registruojami Hugo Zakso aukštadažnio modemo pagalba ir užrašomi kompensografu (BEC, Coerc Metrawatt SE4 60).

[0102] Po valandos nusistovėjus pusiausvyrai, pradedamas ban-dymas. Po to, kai juostos pasiekė didžiausią jautrumo laipsni, 2xl0~7 mol/1 bradikinino dozei (bradikininas iššaukia arterijų juostų susitraukimą) , 10 minučių veikia 5x10 ~ 8 -5x10 - 5 mol/1 peptidų dozė ir po naujos bradikinino dozės nustatomas jo veikimo efektyvumo sumažėjimas, lyginant su kontroliniu mėginiu.

[0103] Dalinio antagonistinio efekto nustatymui peptidai naudojami dozėse 1x10 ~ 5 -1x10 3 mol/1.

[0104] Apskaičiuotos pagal dozių poveikio grafikus IC₅₀ reikšmės išradime pateiktiems peptidams parodytos 1 lentelėj e.

[0105] Todėl išradimas priskiriamas ir I formulės petidų panaudojimui kaip farmacines gydymo priemones, įjun-giančias šiuos peptidus.

[0106] Farmaciniai preparatai turi efektyvų I formulės biolo-giškai aktyvios medžiagos kieki, - atskiras medžiagas ar jų mišinį - kartu su neorganiniu ar organiniu farmaciškai priimtinu vaistinių preparatų pagrindu.

[0107] Preparatai gali būti įvedami enteraliai, parenteraliai, pvz. įvedami po odą, į raumenis ar į veną po liežuviu, per nosį, per tiesiąją žarną, makštį, inhaliacijos būdu. Biologiškai aktyvaus preparato dozavimas priklauso nuo šiltakraujų gyvūnų rūšies, kūno svorio,

[0108] Farmakologiniai preparatai, aprašyti išradime, paruošiami pagal žinomas metodikas kaip tirpalai, mišiniai, granulės arba dražė.

[0109] įvedant aktyvius junginius per burną arba gleivinius dangalus, junginiai yra sumaišomi su tradicinėmis tam skirtomis medžiagomis, kaip medžiagomis-nešikliais,

[0110] stabilizatoriais arba inertiniais tirpikliais ir žinomų būdų pagalba realizuojami standartinėmis formomis kaip

[0111] tabletės, kapsulės, dražė, vandeniniai, spiritiniai arba riebaliniai tirpalai, arba suspencijos nešikliai gali būti naudojami gumiarabikas, magnezija, magnio karbonatas, kalio fosfatas, sacharozė, gliukozė arba krakmolas, pvz. kukurūzų krakmolas. Produktas gali būti tiek sausas tiek šlapias granuliatas. Kaip riebaliniai nešikliai arba tirpikliai gali būti naudojami augaliniai aliejai arba gyvuliniai riebalai, pvz. saulėgrąžų aliejus ir žuvies taukai.

[0112] Vietiniam naudojimui preparatas gali būti realizuotas kaip vandeninis arba riebalinis tirpalas, kremas,

[0113] emulsija, žele, tepalas, ir, jeigu galima, vandens - oro mišinio pavidalu, kada reikalui esant surišimas gali būti pagerintas pridedant polimerinių medžiagų.

[0114] Įvedimui per nosį junginiai sumaišomi su tam tikslui naudojamomis medžiagomis, kaip stabilizatoriais ir inertiniais tirpikliais, ir standartinių metodų pagalba paverčiami į atitinkamą pavidalą, kaip vandeninės, spiritinės, riebalinės suspensijos arba vandeniniai, spiritiniai, riebaliniai tirpalai. Į vandeninius preparatus, įvedamus per nosį, gali būti pridėta etillendiamin-N, N, N', N'-tetracto rūgšties, citrinos rūgšties ar jų druskų. Įvedimui per nosį gali būti naudojami dozatoriai-purkštuvai arba galimas realiza-vimas nosies laįų, nosies kremų pavidalu.

[0115] Inhaliacijai gali būti naudojami purkštuvai arba suspaustų inertinių dujų balionėliai. Įvedant biolo-giškai aktyvius preparatus ar jų fiziologiškai įsisavinamas druskas į veną, per odą, po oda ar į odą

[0116] Dėl to, kad kai kurių aprašytų vaistinių preparatų

[0117] skilimo pusperiodis organizame yra trumpas, yra tikslinga naudoti lėtinančias skilimo medžiagas.

[0118] Vaistinės preparatų formos gali būti pvz. riebalinės kristalinės suspensijos, mikrokapsulės, lazdelės arba impantantai, kurie gali būti padaryti iš jų biologiškai skaidomų polimerų, kaip polipieno ir poliglikolino rūgšties kopolimerų arba žmogaus albumino.

[0119] Tinkama lokalinio ir inhaliacinio preparatų įvedimo tirpalo koncentracija yra 0,01 - 5 mg/ml diapozone, sistemiškai naudojant preparatus tinkamos koncentracijos yra 0,01 - 10 mg/kg.

[0120] Sutrumpinimuose naudojami aminorūgščių pažymėjimai atitinka chemijoje naudojamų trijų simbolių kodavimą, aprašytą Europ. J. Biochem. 138, 9, (1984). Kiti naudojami sutrumpinimai pateikiami žemiau.

[0121] Aoc eis, endo-3-azabiciklo(3.3.0)oktan-3-S-karbonilas Hoc tretinis butiloksikarbonilas

[0122] Oic cis-endo-oktahidroindol-2-karbonilas Opr izoksazolidin-3-ilkarbonilas

[0123] Tie 1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-ilkarbonilas Trt tritilas

[0124] Žemiau pateikti pavyzdžiai paaiškina galimus peptidų sintezės kietoje fazėje metodus pagal išradimą, nesusiaurinant šio išradimo rėmų.

[0125] Buvo naudojami sekantys aminorūgščių dariniai: Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Boc(D)-Arg-OH, Fmoc-Arg (Pmc)-0H, Fmoc-Hyp-OH, Fmoc-Pro-OObt, Fmoc-Gly-OObt, Fmoc-Phe-OObt, Fmoc-Ser(tBu)-OObt, Fmoc-(D)-Tic-OH, Fmoc-Gln-OH, Fmoc-Aoc-OH, Fmoc-Thia-OH, Fmoc-Opr-OH, Fmoc-(D)-Asn-OH, Fmoc-p^-Ala-Oh, Fmoc-Oic-OH.

[0126] Junginys H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH buvo susintentintas firmos "Applied Biosystems" modelio 430A pagalba, naudojant Fmoc- metodą esterinio Fmoc-Arg(Mtr)-0H pagalba p-benziloksibenzilalkoholio dervoje iš firmos "Novabiochem" (įkrova 0,5 mmol/g dervos) . Buvo naudota 1 g dervos ir sintezė vyko pagal modifikuotą Fmoc- metodui sintezės programą.

[0127] Į sintezatoriaus patroną patalpino 1 mmol aminorūgšties darinio su laisva karboksiline grupe. Kartu buvo patalpinta 0,95 mmol HOCbt. Pradinis šių aminorūgščių aktyvavimas buvo atliekamas patrone, ištirpinant 4 ml dimetilforamido ir pridedant 2 ml 0,55 molinio diizopropilkarbodiimido tirpalo dimetilforamide.

[0128] Kitų aminorūgščių HOCbt-esteriai buvo ištirpinti 6 ml N-metilpirolidino ir poto, kaip altyvuotos amino-rūgštys, buvo sujungti reikiamoje vietoje su deblokuota 20 % piperidino tirpalu dimetilformamidine derva. Pasibaigus sintezei, peptidas, pašalinus šoninių grandinių apsaugines grupes trifluoracto rūgštimi, naudojant tionizolą ir etanditiolą, atskeltas nuo dervos. Gautas nupylus trifluoracto rūgšti, produktas daug kartų apdorotas acto rūgšties esterio pagalba ir centifuguojamas. Likęs produktas buvo chromatografuojamas Sefadex ZH₂0 kolonėlėje, eliuojant 10 % acto rūgštimi. Turinčios švarų peptidą frakcijos sujungtos ir išdžiovintos

[0129] Sekančių 2-24 pavyzdžių peptidai buvo pagaminti analogiškai kaip pavyzdyje 1.

[0130] Pavyzdys 2

[0131] H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Pro- (D) -Ser- (D) -Tic-Phe-Arg-OH MS (FAB): 1294 (M+H).

[0132] Pavyzdys 3

[0133] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH.

[0134] Pavyzdys 4

[0135] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH. MS (FAB): 1294(M+H).

[0136] Pavyzdys 5

[0137] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Gly-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

[0138] Pavyzdys €

[0139] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

[0140] Pavyzdys 7

[0141] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Trp-(D)-Tic-Phe-Arg-OH.

[0142] Pavyzdys 8

[0143] H- (D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

[0144] Pavyzdys 9

[0145] H-(D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-(D) -Arg-(D)-Tic-Thia-Arg-OH. MS (FAB): 1333 (M+H).

[0146] Pavyzdys 10

[0147] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Opr-(D)-Tic-Thia-Arg-OH. MS (FAB): 1301 (M+H).

[0148] Pavyzdys 11

[0149] H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia- (D) -Gln- (D) -Tic-Thia-Arg-OH.

[0150] Pavyzdys 12

[0151] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

[0152] Pavyzdys 13

[0153] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.

[0154] Pavyzdys 14

[0155] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH. MS (FAB): 1397 (M+H).

[0156] Pavyzdys 15

[0157] H-(D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-p-Ala-(D)-Tic-Pro-Arg-OH.

[0158] Pavyzdys 16

[0159] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-Oh. MS (FAB): 1230 (M+H).

[0160] Pavyzdys 17

[0161] Pavyzdys 18

[0162] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Aoc-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Thia-Arg-OH. MS (FAB): 1330 (M+H).

[0163] Pavyzdys 19

[0164] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1290 (M+H).

[0165] Pavyzdys 20

[0166] Pavyzdys 21

[0167] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Opr-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg-OH. MS (FAB): 1236 (M+H).

[0168] Pavyzdys 22

[0169] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Opr-Arg-OH. MS (FAB): 125 (M+H).

[0170] Pavyzdys 23

[0171] H-(D)-Arg-(D)-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

[0172] Pavyzdys 24

[0173] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB) : 1290 (M+H) .

[0174] Pavyzdžiai 25- 27

[0175] H-(D)-Arg-Arg-(Mtr)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg-OH ir

[0176] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-Arg(Mtr) -OH ir

[0177] H- ( D) - Arg- Arg ( Mtr) - Pro- Hyp- Gly- Phe- Ser- ( D) - Tic- Phe- Arg ( Mtr) - 0H

[0178] buvo gaminami analogiškai kaip ir 1, bet apsauginių grupių atskėlimas nuo peptido šoninių grandinių ir peptido atskėlimas nuo dervos trifluoracto rūgšties pagalba buvo apribotas 30 minučių, esant kambario temperatūrai. Esant tokioms sąlygoms, vyksta Mtr-apsauginės grupės arginine atskėlimas, į kuri, galima nekreipti dėmesio. Dalinai deblokuoti peptidai išskiriami chromatografijos pagalba išvalomi.

[0179] 25: H-( D)- Arg- Arg( Mtr)- Pro- Hyp- Gly- Phe- Ser-( D)- Tic- Phe- Arg- OH.

[0180] 27: H- ( D) - Arg- Arg- Pro- Hyp- Gly- Phe- Ser- ( D) - Tic- Phe- Arg ( Mtr) - OH.

[0181] Sekančių pavyzdžių 28 - 31 peptidai buvo pagaminti ir išvalyti, kaip pavyzdžiuose 25 - 27.

[0182] Pavyzdys 28

[0183] H-( D)- Arg- Arg( Mtr)- Hyp- Pro- Gly- Thia- Ser-( D)- Tic- Pro- Arg- OH.

[0184] Pavyzdys 29

[0185] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Arg(Mtr)-0H. MS (FAB): 1462 (M+H).

[0186] Pavyzdys 30

[0187] H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH.

[0188] Pavyzdys 31

[0189] H-(D)-Arg-Arg(Mtr)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1502 (M+H).

[0190] Pavyzdys 32

[0191] H-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-NH-(CH2) 4~NH2 •

[0192] Peptido sintezė buvo vykdoma 1 g aminometilinės dervos, kuri buvo modifikuota pagal EP paraiškoje Nr. 264802 aprašytą metodiką, grupe

[0193]

[0194] ir naudojant Fmoc-aminorūgšties-OOBt esterius automa-tinio peptidų sintezatoriaus (firmos "Applied Biosystems" modelis 430A) pagalba bei panaudojant nuosavas modifikuotas sintezės programas. Tam tikslui i sintezatoriaus patroną patalpinta 1 mmol atitinkamo aminorūgšties darinio kartu su 0,95 mmol Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Fmoc-Hyp-OH ir Fmoc-(D)-Tic-OH. Pradinis reika-

[0195] lingos vietos aktyvavimas buvo patrone ištirpinant aminorūgštį 4 ml dimetilforamido ir pridedant 2 ml 0,55-moliarinio diizopropilkarbodiimido tirpo dimetilformamide. Kitų aminorūgščių HOCbt-esteriai ištirpinti 6 ml N-metilpirolidino ir po to, kaip ir aktyvuotos reikiamoje vietoje aminorūgšties molekulės, buvo dukart sujungti. Po sintezės nuo dervos atskirtas peptid-4-amino-butilamidas, kartu pašalinant trifluoracto rūgšties pagalba šonines apsaugines grupes. Katijonams surišti naudojamas tioanizolas ir m-krezolas. Gautas nupylus trifluoracto rūgšti, produktas apdorotas acto rūgšties esterio pagalba ir centrifuguoj amas. Likęs produktas buvo chromatografuojamas Sefadex S25 kolonėlėj e, eliuojant viennormaline acto rūgštim.

[0196] Turinčios švarų peptidą frakcijos buvo sujungtos ir išdžiovintos.

[0197] Analogiška 32 pavyzdžio procedūra buvo panaudota ir pavyzdžiuose 33-35.

[0198] Pavyzdys 33

[0199] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Phe-NH-(CH2) <-NH2.

[0200] Pavyzdys 34

[0201] HOOC- (CH2) 2-CD-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Phe-NH- (CH2) 4-NH2.

[0202] HDOC- (Oį) 2<D - (D) -Arg-Hyp-Pro-dy-Rre-Ser- (D) -Tic-flre-NH- (Oį) ₄-NEį.

[0203] Pavyzdžiai 36-161 buvo sintetinami pagal pavyzdyje 1 aprašytą metodiką.

[0204] Pavyzdys 36

[0205] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH. MS (FAB): 1307 (M+H).

[0206] Pavyzdys 37

[0207] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-Gly-(D)-Tic-Pro-Arg-OH. MS (FAB): 1307 (M+H).

[0208] Pavyzdys 38

[0209] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-OH. MS (FAB): 1241 (M+H).

[0210] Pavyzdys 39

[0211] H- (D) -Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-p-Ala- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1361 (M+H).

[0212] Pavyzdys 40

[0213] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-p-Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB) : 1361 (M+H) .

[0214] Pavyzdys 41

[0215] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro)Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.

[0216] Pavyzdys 42

[0217] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Pro-Phe-Arg-OH.

[0218] Pavyzdys 43

[0219] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1260 (M+H).

[0220] Pavyzdys 44

[0221] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Gly-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

[0222] Pavyzdys 45

[0223] H-(D)-Arg-(D)-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

[0224] Pavyzdys 46

[0225] H-(D)-Arg-(D)-Arg-Phe-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 12 90 (M+H).

[0226] Pavyzdys 47

[0227] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH.

[0228] Pavyzdys 48

[0229] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Tic-Arg-OH. MS (FAB) : 1312 (M+H) .

[0230] Pavyzdys 49

[0231] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1274 (M+H).

[0232] Pavyzdys 50

[0233] Pavyzdys 51

[0234] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Aoc-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1274 (M+H).

[0235] Pavyzdys 52

[0236] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Thia-p-Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1274 (M+H).

[0237] Pavyzdys 53

[0238] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-p-Ala-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

[0239] Pavyzdys 54

[0240] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH.

[0241] Pavyzdys 55

[0242] H-(D) -Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Asp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1252 (M+H).

[0243] Pavyzdys 56

[0244] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Trp-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS FAB): 1323.7 (M+H).

[0245] Pavyzdys 57

[0246] H-(D)-Tyr-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1297.7 (M+H).

[0247] Pavyzdys 58

[0248] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tia-(D) -Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1304.6 (M+H).

[0249] Pavyzdys 59

[0250] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

[0251] Pavyzdys 60

[0252] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1289 (M+H).

[0253] Pavyzdys 61

[0254] H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Aoc-Arg-Oh.

[0255] Pavyzdys 62

[0256] H-(D)-Arg-Lys-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1276 (M+H).

[0257] Pavyzdys 63

[0258] H-(D)-Arg-Lys-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

[0259] Pavyzdys 64

[0260] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1298 (M+H).

[0261] Pavyzdys 65

[0262] H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH>

[0263] Pavyzdys 66

[0264] H-(D)-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH.

[0265] Pavyzdys 67

[0266] H- (D) -Arg-Arg- (N02) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Aoc-Arg-OH.

[0267] Pavyzdys 68

[0268] H- (D) -Arg-Arg- (N02) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1343 (M+H).

[0269] Pavyzdys 70

[0270] H- (D) -Arg-Arg- (N02) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH.

[0271] Pavyzdys 71

[0272] H- (D) -Arg-Arg (N02) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser- (D) -Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 13449 (M+H).

[0273] Pavyzdys 72

[0274] Pavyzdys 73

[0275] Pavyzdys 74

[0276] Pavyzdys 75

[0277] Pavyzdys 76

[0278] H-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1219 (M+H).

[0279] Pavyzdys 77

[0280] Pavyzdys 78

[0281] Ac-Arg-(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc—Arg-OH.

[0282] Pavyzdys 79

[0283] H- D- Arg- Arg( Tos)- Phe- Hyp- Gly- Phe- Ser- D- Tic- Aoc- Arg- OH.

[0284] Pavyzdys 80

[0285] Pavyzdys 81

[0286] Pavyzdys 82

[0287] H- Lys (- CO- NH- C6H5) - Hyp- Pro- Gly- Phe- Ser- D- Tic- Oic- Arg- OH. MS ( FAB) : 1233 ( M+ H).

[0288] Pavyzdys 83

[0289] Pavyzdys 84

[0290] H- Lys( nikotinoilas)- Hyp- Pro- Gly- Phe- Ser- D- Tic- Oic- Arg- OH. MS ( FAB) : 1219 ( M+ H).

[0291] Pavyzdys 85

[0292] Pavyzdys 86

[0293] Pavyzdys 87

[0294] H-D-Arg-Arg(Tos)-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH.

[0295] Pavyzdys 88

[0296] Pavyzdys 89

[0297] Pavyzdys 90

[0298] H-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB) : 1217 (M+H) .

[0299] Pavyzdys 91

[0300] Pavyzdys 92

[0301] H-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0302] Pavyzdys 93

[0303] Pavyzdys 94

[0304] Pavyzdys 95

[0305] H-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB) : 1422 (M+H) .

[0306] Pavyzdys 97

[0307] H-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Thia) Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB) : 1239 (M+H) .

[0308] Pavyzdys 98

[0309] H-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0310] Pavyzdys 99

[0311] Pavyzdys 100

[0312] Pavyzdys 101

[0313] H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB) : 1444 (M+H) .

[0314] Pavyzdys 103

[0315] H-Lys (-CO-NH-C6H5) -Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0316] Pavyzdys 104

[0317] H-Lys(nikotinoilas)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1225 (M+H).

[0318] Pavyzdys 105

[0319] Pavyzdys 106

[0320] Pavyzdys 107

[0321] H-D-Arg-Arg (Tos)-Hyp-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-OH. MS (FAB): 1440 (M+H).

[0322] Pavyzdys 108

[0323] H-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0324] Pavyzdys 109

[0325] H- Lys( nikotinoilas)- Pro- Pro- Gly- Thia- Ser- D- Oic- Arg- OH. MS ( FAB) : 1209 ( M+ H).

[0326] Pavyzdys 110

[0327] Pavyzdys 111

[0328] Pavyzdys 112

[0329] H- D- Arg- Arg( Tos)- Pro- Pro- Gly- Thia- Ser- D- Tic- Aoc- Arg- OH. MS ( FAB) : 1428 ( M+ H).

[0330] Pavyzdys 113

[0331] H- D- Arg- Lys( nikotinoilas)- Pro- Pro- Gly- Thia- Ser- D- Tic- Oic- Arg- OH. MS ( FAB) : 1365 ( M+ H).

[0332] Pavyzdys 114

[0333] H- D- Arg- Lys (- OO- NH- CsHį) - Pro- Pro- Gly- Thia- Ser-D- Tic- Oic- Arg- OH. MS ( FAB) : 137 9 ( M+ H).

[0334] Pavyzdys 115

[0335] H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0336] Pavyzdys 116

[0337] H-Lys-Lys- (nokotinoilas) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0338] Pavyzdys 117

[0339] H-Lys-Lys (-CO-NH-CgHj) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1351 (M+H).

[0340] Pavyzdys 118

[0341] H-Lys-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1414 (M+H).

[0342] Pavyzdys 119

[0343] H-D-Arg-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1381 (M+H).

[0344] Pavyzdys 120

[0345] H-D-Arg-Lys (-OO-NH-CgHs) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0346] Pavyzdys 121

[0347] H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB) : 1458 (M+H) .

[0348] Pavyzdys 122

[0349] H-Lys-Lys (-OO-NH-C^) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0350] Pavyzdys 123

[0351] H-Lys-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1353 (M+H).

[0352] Pavyzdys 124

[0353] H-Lys-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1420 (M+H).

[0354] Pavyzdys 125

[0355] H-D-Arg-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1359 (M+H).

[0356] Pavyzdys 126

[0357] H-D-Arg-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB) : 1373 (M+H) .

[0358] Pavyzdys 127

[0359] H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1436 (M+H).

[0360] Pavyzdys 128

[0361] H-Lys-Lys(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0362] Pavyzdys 129

[0363] H-Lys-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1345 (M+H).

[0364] Pavyzdys 130

[0365] Pavyzdys 131

[0366] H-D-Arg-Lys (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FABO: 1375 (M+H).

[0367] Pavyzdys 132

[0368] H-D-Arg-Lys (-00-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1389 (M+H).

[0369] Pavyzdys 133

[0370] H-D-Arg-Arg(Tos)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1452 (M+H).

[0371] Pavyzdys 134

[0372] H-Lys-Lys(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1347 (M+H).

[0373] Pavyzdys 135

[0374] H-Lys-Lys (-CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-S-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1361 (M+H).

[0375] Pavyzdys 136

[0376] Pavyzdys 137

[0377] H-D-Arg-Om(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg)OH. MS (FAB): 1351 (M+H).

[0378] Pavyzdys 138

[0379] H-D-Arg-Om (Tos) -CD-NH-CjJį) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0380] Pavyzdys 139

[0381] H-Lys-Orn(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0382] Pavyzdys 140

[0383] H-Lys-Orn (-OO-NH-CgHj) -Pro-Pro-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0384] Pavyzdys 141

[0385] H-D-Arg-Om(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0386] Pavyzdys 142

[0387] Pavyzdys 143

[0388] H-Lys-Orn(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH.

[0389] Pavyzdys 144

[0390] H-Lys-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Thia-Ser-D-Tic-Arg-OH.

[0391] Pavyzdys 145

[0392] H-D-Arg-Orn (nikotinoilas) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1345 (M+H).

[0393] Pavyzdys 146

[0394] H-D-Arg-Orn (OO-NH-C^) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1359 (M+H).

[0395] Pavyzdys 147

[0396] H-Lys-Orn(nikotinoilas)-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1317 (M+H).

[0397] Pavyzdys 148

[0398] H-Lys-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1331 (M+H).

[0399] Pavyzdys 149

[0400] H-D-Arg-Orn (nikotinoilas) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1361 (M+H).

[0401] Pavyzdys 150

[0402] H-D-Arg-Orn (CO-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1375 (M+H).

[0403] Pavyzdys 151

[0404] H-Lys-Orn(nikotinoilas)-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1333 (M+H).

[0405] Pavyzdys 152

[0406] H-Lys-Orn (00-NH-C6H5) -Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH. MS (FAB): 1347 (M+H).

[0407] Pavyzdys 153

[0408] Pavyzdys 154

[0409] Pavyzdys 155

[0410] Pavyzdys 156

[0411] Pavyzdys 157

[0412] Pavyzdys 158

[0413] Pavyzdys 159

[0414] Pavyzdys 160

[0415] Pavyzdys 161

[0416] 162 - 164 pavyzdžiai gauti pagal analogiją su 31 pavyzdžiu, naudojant aprašytą EP paraiškoje Nr. 322348 dervą, kurios struktūra

[0417]

[0418] Pavyzdys 162

[0419] H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-NH₂. MS (FAB): 1283 (M+H).

[0420] Pavyzdys 163

[0421] H-D-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-NH₂. MS (FAB): 1283 (M+H).

[0422] Pavyzdys 164

[0423] H-D-Arg-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-D-Tic-Aoc-Arg-NH₂. MS (FAB): 1267 (M+H).

Apibrėžtis

1. Peptidai pagal I formulę

2. I formulės peptidai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad juoseA reiškia vandenilį, acetilą, 3-karboksipropionilą, arba L- ar D-konfigūracijos aminorūgštį, kuri gali būti Arg, Lys, Tyr ir gali būti pakeista hidroksifenilpropionilu;B reiškia Arg, Arg(Mtr), Arg(N0₂), Arg(Tos), Lys, Lys(-OD-NH-C_^H_j), Lys (z), Lys (Nic), Orn (Nic) arba Orn (-OO-NH-CįHs), kai Arg, Lys ir Orn gali būti L- arba D-konfigūracijoje;C reiškia jungini, pagal Illa formulę

3. I formulės peptidai pagal apibrėžties 1 ir 2 punktus, besiskiriantys tuo, kad juoseA reiškia vandenilį, acetilą, 3-karboksipropionilą, Arg, (D)-Arg, (D)-Tyr, Lys, acetil-(D)-Arg arba 4-hidroksifenilpropionil-(D)-Arg;B reiškia Arg, D-Arg, Arg(Mtr), Arg(N0₂), Arg(Tos), Lys, Lys(z), Lys (Nic), Lys(PAC), Orn(Nic) arba Orn(PAC), arba reiškia tiesioginę jungtį;C reiškia Hyp-Pro-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Aoc-Gly, Opr-Pro-Gly, Pro-Opr-Gly, Pro-Pro-Gly, dehidro-Pro-Hyp-Gly arba D-Pro-Hyp-Gly;E reiškia Phe, Thia, (D)-Thia arba Trp;F reiškia (D)Asn, Cys, Gln, (D)-Gln, Opr, Ser, (D)-Ser, Trp, Phe arba Thia, arba reiškia tiesioginę jungtį; K reiškia Gly arba b- Ala arba reiškia tiesioginę jungtį;G reiškia Pro, Aoc, ( D)- Aoc, Opr, Tie, Oic, ( D)- Oic, ( D, L)- Oic, ( L)-( 3aR, 7aS) 0ic arba ( L)-( 3as, 7ar) 0ic arba reiškia tiesioginę jungtį;į reiškia amino arba hidroksigrupę,ir fiziologiškai priimtinos jų druskos.

4. I formulės peptidas pagal apibrėžties 1- 3 punktus, besiskiriantis tuo, kad jis gali būti: H-( D)- Arg- Arg- Pro- Hyp- Gly- Thia- Ser-( D)- Tic- Oic- Arg- OHH-( D)- Arg- Arg- Pro- Pro- Gly- Thia- Ser-( D)- Tic- Oic- Arg- OHH-( D)- Arg- Arg- Pro- Hyp- Gly- Thia- Ser-( D)- Tic- Oic- Arg- OHH-( D)- Arg- Arg- Hyp- Pro- Gly- Phe- Ser-( D)- Tic- Oic- Arg- OHH-( D)- Arg- Arg- Pro- Pro- Gly- Phe- Ser-( D)- Tic- Oic- Arg- OH ir jo fiziologiškai priimtina druska.

5. I formulės peptidas pagal apibrėžties 1- 4 punktus, besiskiriantis tuo, kad jis yra H-( D)- Arg-Arg- Pro- Hyp- Gly- Thia- Ser-( D)- Tic- Oic- Arg- OH ir jo fi-ziologiškai priimtina druska.

6. Peptidas pagal apibrėžties 1- 5 punktus, besiskiriantis tuo, kad jis gali būti H-( D)- Arg- Arg- Hyp- Pro- Gly- Aoc- Ser-( D)- Tic- Aoc- Arg- OHH-( D)- Arg- Arg- Hyp- Pro- Gly- Asp- Ser-( D)- Tic- Aoc- Arg- OH H-( D)- Arg- Arg- Pro- Hyp- Gly- Asp- Ser-( D)- Tic- Aoc- Arg- OHH-( D)- Arg- Ser-( Rha)- Pro- Hyp- Gly- Phe- Ser-( D)- Tic- Aoc- Arg- OH ( 4- benzoilfenoksiacetil)-( D)- Arg- Arg- Pro- Hyp- Gly- Thia-Ser-( D)- Tic- Aoc- Arg- OHLys( benzoil- benzoil)-( D)- Arg- Arg- Pro- Hyp- Gly- Thia- Ser-( D)- Tic- Aoc- Arg- OH.

7. I formulės peptidas pagal apibrėžties 1- 6 punktus, skirtas patologinėms būsenoms, kurias iššaukia bradikininas ir giminingi bradikininui peptidai, gydyti.

8. Farmacinė kompozicija, skirta patologinėms būsenoms, kurias iššaukia bradikininas ir giminingi bradikininui peptidai, gydyti, besiskirianti tuo, kad turi efektyvų I formulės peptidų pagal apibrėžties 1- 7 punktus kieki, atskirai arba kartu su neorganiniais ir organiniais farmacijoje naudojamais nešikliais.

Brėžiniai