[LT] Išradimas skirtas naujiems 2-amino-4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazinų dariniams, pasižymintiems cholinerginiu veikimu.
[EN]
[0001] Šis išradimas skirtas naujiems 2-amino-4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazinams ir jų netoksiškų rūgščių adityvinėms druskoms, pasižyminčioms cholinerginiu veikimu .
[0002] mi 2-amino-l, 3,5-triazinai, 4 padėtyje pakeisti, amino grupe, kurioje vienas arba du vandenilio atomai pakeisti alkilo, alkenilo, cikloalkilo, arilo, arilakilo arba azotiniu heterocikliniu radikalu, ir 6 padėtyje alkilo, arilo arba arilalkilc radikalu. Atskiru atveju ten aprašomas 2-amino-4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazino gavimas. Pagal šią paraišką, šie junginiai pasi-žymi antinksčių žievės hormonų, atskiru atveju, ant-inksčių žievės gliukohormonų sekrecijos padidinimo savybe. Be to, K. Wakabavashik.o ir kt. (Vuki Gosel Karagu Kuokaishi 28, (1970), 252-260, Chem, Abstr., 72,
[0003] (1970). 100653) susintetino 2-alkil-4,6-bis(alkilami-no)-1,3,5-triazinus, kuriuose radikalas 2 padėtyje turi 1-17 anglies atomų ir gali taip pat būti tri-chlormetilas, tribrommetilas, arba 2-chloretilas, tuo tarpu radikalai 4 ir 6 padėtyse yra vienodi ir gali būti pakeisti hidroksilo grupe, arba yra azotinis he-terociklas, toks kaip piperidino arba morfolino radikalas. Šios grupės atstovas yta 2-meti.l-4, 6-dimor-folino-1,3,5-triazinas. Buvo tiriamas šių junginių herbicidinis aktyvumas, o taip pat jų savybė sulėtinti amoniako pavertimą nitratu. Tačiau apie farmakologines savybes neužsimenama.
[0004] Dabar atrasti nauji 2-amino-4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazinai, kurie pasižymi vertingomis farmacinėmis sa-vybėmis ir, atskiru atveju, centrinių ir periferinių cholinerginiu efektų, sukeltų cholinomimetiniu agentu, tokiu kaip, pvz., oksotremorinas, potencialo padidinimo savybe, tuo tarpu patys nauji junginiai nepasižymi cholinerginiu veikimu. Be to, taip pat buvo rasta, kad šie junginiai pasižymi išskirtine poveikių, esant sumažintai cholinerginei veiklai, sukeltai cholinerginiu antagonistu, tokių kaip, pvz., skopolaminas, su-silpninimo savybe. Cholinerginė sistema labai susijusi su atminties ir apmokymo reiškiniais. Taip, pvz., anticholinerginio agento, tokio kaip skopolaminas, įvedimas jauniems pacientams sukelia atminties trūku-mus, kurie būdingi pavyvenusiems žmonėms. Priešingai, cholinerginiai agentai, tokie kaip fizostigminas, suge-ba kovoti su amnezija, sukelta anticholinerginių agentų
[0005] (S.D Glick ir kt. Bebav. Orai. Biology, 1_ (1972), 245-254, U.Schindler ir kt. Drug Develop.- Res., _4 (1984), 567-576). Be to, dabar nustatyta, kad dažniausiai su-tinkamas požymis, susijęs su silpnaprotyste, yra, būtent, cholinerginės sistemos sutrikimas (Celluar and mole-cular basis of cholinergic function. Ed. U.J.Dowdall and J.N. Hawthorne, 1987, Chapitre 99:art.A.Nordberg ir kt.). Štai kodėl nauji junginiai gali būti naudojami sąmonės ir elgesio pažeidimų, susijusių su amžiumi ir silpnaprotystės sindromu, gydymui. Atskiru atveju, jie gali būti naudojami gydyti pažeidimus, susijusius su Alzhaimerio liga, Alzaihaimerio tipo senatvės silpnaprotyste ir bet kokia besivystančia sąmonės pata-logija (C.G.G. Gottfries Psychopharmacology, 86,
[0006] (1985), 245-252, C.G.G. Gottfries Neurobiology of Ageing, 4, (1983), 261-271).
[0007] Konkrečiau, šis išradimas skirtas naujiems 2-amino-4-morfolimo-6-propil-l,3,5-triazinams, kurių struktūra atitinka bendrą formulę (I):
[0008] (
[0009] Rx yra vandenilio atomas, alkilo, arilalkilo arba acetilo radikalas; R2 yra hidroksilo grupė, hidroksialkilo, alkoksialkilo, dialkilamino, arilhiaroksi-alkilo, hidroksicikloalkilo, alkilo, alkanoiloksialkilo, benzoiloksialkilo, fenilacetiloksialkilo arba ara.inokarboniloksialkilo radikalas, grupė COR3, kurioje R3 yra alkilo, arilo, halogenarilo, alkilarilo, alkoksiarilo, arilalkilo arba ariloksilo radikalas, arba grupė CONR4R5, kurioje R,, ir R5 yra vandenilis arba alkilo radikalas, arba RT ir R2 kartu su azoto atomu, prie kurio jie yra prijungti, sudaro alkilenimino radi-kalą, pakeistą hidroksialkilo radikalu, ir tada alkilo, alkoksilo ir alkanoiloksilo radikalai turi 1-4 anglies atomus, o cikloalkilo ir alkenimino radikalai turi 4-6 anglies atomus su tuo apribojimu, ksd kai Rx yra acetilo radikalas, R2. yra acetoksialkilo radikalas, o taip pat jų netoksiškų farmaciškai priimtinų rūgščių adityvinėrns druskoms.
[0010] Kaip hidroksialkilo radikalo pavyzdžius galima paminėti 2-hidroksietilo, 3-hidroksipropilo, 2-hidroksipropilo, 2-hidroksibut.ilo, 1-(hidroksimetil)propilo, 2,3-dihi-droksipropilo, 2-hidroksi-l,1-bis(hidroksimetil)etilo ir t.c. radikalus.
[0011] Aril-hidroksialkilo radikalo pavyzdys yra 2-hidroksi-l-(hidroksimetil)-2-fenil-etilo radikalas ir t.t.
[0012] Kaip (hidroksi-cikloalkil) alkilo radikalo pavyzdi, galima nurodyti (1-hidroksicikloheksil) metilo radikalą ir t. t.
[0013] Kaip alkanoiloksialkilo radikalo pavyzdi, galima nurodyti 2-(acetoksi)etilo, 2-(izobutiriicksi)etilo radi-kalą ir t.t.
[0014] Kaip alkilenimino radikalo, pakeisto hidroksialkilu, pavyzdi, galima nurodyti 2- hid. roksimetil- pirodilino, 2-hidroksimetil piperidino radikalus ir t. t.
[0015] Tinkamesni šio išradimo junginiai yra 2- amino- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazinai, kurių struktūra atitinka ( I) bendrą formulę, kurioje: R: yra vandenilo atomas arba alkilo radikalas;
[0016] R2 yra hidroksilo grupė, hidroksialkilo, alkoksialkilo, dialkilamino, alkanoiloksialkilo radikalas arba grupė COR3, kurioje R3 yra arilo radikalas, pakeistas arba nepakeistas halogeno atomu arba alkilo ar alkoksi radikalu, ir tada alkilo, alkoksi ir alkanoiloksi radikalai turi 1- 4 anglies atomus; o taip pat jų netoksiškų farmaciškai priimtinų rūgščių adityvinės druskos.
[0017] Ypač tinkami junginiai yra: - 2-( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2- il) amino eta-nolis; - 2- ( hidroksiamino)- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazinas; - 2[ ( 2- metoksietil) amino] - 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5-triazinas; - ( S)- 3-[ ( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2- il)- amino] - 2- propanolis; -( R)- 3-[ ( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2- ilamino] - 2- propanolis; - 2-( 2, 2- dimetilhidrazino)- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5-triazinas; N- (4-morfoli no-6-propil-l, 3, 5-triazi.n-2-il.) benzamido chlorhidratas; -2-[ [ 2- (acetoksi)etilamino] -4-morfolino-6-propil-l, 3,5-triazinas.
[0018] Šis išradimas skirtas taip pat adityvinėms (I) formulės 2-(4-morfol.ino-6-propil-l, 3, 5-triazinų farmaciškai pri-imtinų rūgščių druskoms. Kaip farmaciškai priimtinų rūgščių pavyzdžiai gali būti paminėtos tekios mi-neralinės rūgšrys, kaip druskos rūgštis, bromo vandenilio rūgštis, sieros ir azoto rūgštys, fosforo rūgš-tis ir t.t., ir tokios organinės rūgštys, kaip acto, citrinos, vyno, benzoinė, salicilo, maleino ir t.t.
[0019] Kai mokelulėje yra vienas nesimetrinis anglies atomas, (I) formulės junginiai gali būti arba raceminio mišinio formos, arba vieno ar kito 'enantiomero fermos. Šios įvairios formos taip pat įeina i, ši, išradimą.
[0020] 2-(4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazinai pagal šį išra-dimą gali būti gauti vienu iš šių būdų:
[0021] (a) Kai (I) formulėje R: yra vandenilio atomas, alkilo arba arilalkilo radikalas, o R2 yra hidroksilo grupė, hidroksialkilo, alkoksialkilo, dialkilamino, aril-hidroksialkilo ar (hidroksicikloalkil) alkilo radikalas, arba Rx ir R2 kartu su azoto atomu, prie kurio jie yra prijungti, sudaro alkilenimino radikalą, pakeistą hidroksialkilo radikalu, vykdo 2-chlor-4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazino, kurio formulė yra (II), reakciją su formulės HNR1R2 (III) aminu pagal tokią lygtį:
[0022] (b) Kai (I) formulėje R: yra vandenilio atomas, alkilo arba arilalkilo radikalas, o R2 yra hidroksilo grupė, hidroksialkilo, alkoksialkilo, dialkilamino, aril-hidroksialkilo ar (hidroksicikloalkil) alkilo radikalas, arba R: ir R2 kartu su azoto atomu, prie kurio jie yra prijungti, sudaro alkilenimino radikalą, pakeistą hidroksialkilo radikalu, vykdo 2--amino-4-chlor-6-propil-1,3,5-triazino, kurio formulė yra (IV), reakciją su (V) formulės morfolinu pagal tokią lygtį:
[0023] kur R: ir R2 įgyja aukščiau nusakytas reikšmes, o Z yra vandenilio atomas arba metilo radikalas.
[0024] Reakcijos pagal būdus (a) ir (b) atliekamos padidintoje temperatūroje, paprastai naudojamo tirpiklio virimo temperatūroje ir dalyvaujant bazei. Tirpiklis, kuriame atliekama reakcija, yra arba pats aminas, naudojamas su perteklių, arba inertinis organinis tirpiklis, geriausiai dioksanas, ir šiuo paskutiniu atveju naudojama bazė yra mineralinė arba organinė bazė, besiskirianti nuo reakcijoje naudojamo amino, pvz., trietilaminas.
[0025] Jau žinomas 2-chlor-4-morfolino-6-propil-l, 3, 5-triazino (II) panaudojimas kaip pradinio produkto (T.T.Sujikawa ir kt., Vakugaku Zasshi, 9_5, (1975), 512-520).
[0026] Pradiniai (IV) formulės produktai yra gaunami įprastais būdais, vykdant 2,4-dichlo.r-6-propii-l, 3,5-triazino reakciją su formulės HNR- įR;, (III) aminu, kur PM ir R2 įgyja aukščiau nurodytas reikšmes, aminu.
[0027] (c) Kai (I) formulėje Rx yra vandenilio atomas, alkilo arba arilalkiio radikalas, o R2 yra COR3 grupė, kurioje R3 yra alkilo, arilo, halogenarilo, alkilarilo, alkoksiarilo, arilalkiio arba ariloksilo radikalas, ir alkilo radikalai turi 1-4 anglies atomus, vykdo (VI) for-mulės 2-amino-4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazino reak-ciją ekvimolinėmis proporcijomis su R3--karbonilo halogenidu (VII) pagal lygtį:
[0028] Šiose formulėse Rj ir P.2 įgyja aukščiau nurodytas reikšmes, Hal yra halogeno atomas, geriausiai chloro atomas. Ši pati savaime žinoma reakcija paprastai atliekama tokiame organiniame tirpiklyje, kaip pvz., dichlormetanas, dichloretanas arba piridinas, tempe-rarūrai esant tarp kambario temperatūros ir tirpiklio virimo temperatūros ir dalyvaujant rūgšties akcep-
[0029] toriui, kaip tretinė organinė bazė pvz., trietilaminas arba piridinas) arba mineralinė bazė.
[0030] Pradiniai (VI) formulės junginiai gali būti gauti vienu iš aukščiau nurodytų būdų (a) arba (b). (d) Kai (I) formulėje Rx yra vandenilio atomas, alkilo arba arilalkilo radikalas, o R2 yra alkanoiloksialkilo, benzoiloksialkilo arba fenilacetiloksialkilo radikalas, be to, alkilo ir alkanolio radikalai turi 1- 4 anglies atomus, vykdoma (VIII) formulės (-4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazin-2-il)amino alkanolio reakcija ekvimoli-nėmis proporcijomis su R6-karbonilo halogenidu (IX) pagal lygti,:
[0031] kurioje R4, R5 yra vandenilis arba alkilo radikalas, be to, alkilo radikalai turi i-4 anglies atomus, vykdoma (X) formulės (-4-morfolino-6-propil-l, 3, 5-triazin-2-il)--feniikarbainato reakcija su azotiniu formulės HNR4R5 (XI) junginiu pagal lygti,:
[0032]
[0033] Pradiniai XII formulės junginiai gali būti gauti aukščiau nurodytu būdu (d), vykdant reakciją (XII) formulės (4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il) ami-noalkanolo su (XIII) formulės fenilo halogenformiatu pagal lygti,:
[0034]
[0035] Šiose formulėse alk reiškia al'kileno radikalą su C^Cį, 0 Hal yra halogenas, geriau chloro atomas. Ši reakcija paprastai vykdoma inertiniame tirpiklyje, tokiame kaip dichlormetanas, temperatūrai esant tarp kambario temperatūros ir tirpiklio virimo su grįžtamu šaldytuvu temperatūros, dalyvaujant bazei, tokiai kaip trietilaminas.
[0036] Pradiniai (XIV) formulės junginiai gali būti gauti pagal vieną iš aukščiau aprašytų būdų (a) arba (b).
[0037] Farmaciškai priimtinų rūgščių adityvinės druskos gali būti gautos iš I formulės 2-amino-4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazinų žinomais būdais.
[0038] Žemiau pateikiami pavyzdžiai iliustruoja išradimą, neapribodami jo.
[0039] Gavimas būdu ( a)
[0040] 2-( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2 il) aminoetanolio gavimas būdu ( a) ( I junginys)
[0041] 145.5 g (0.6 mol) 2-chlor-4-morfolino-6-propil-l, 3,5-triazino ištirpinama 600 ml dioksano. Į šį tirpalą maždaug per 80 minučių smarkiai maišant sulašinama 444 g (7.28 mol) 2-aminoetanolio tirpalo 600 ml dioksano. Po to reakcijos mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 7 valandas. Susidaręs 2-aminoetanolio chlorhidratas at-šaldomas, dekantuoj amas ir sumažintame slėgyje paša-linamas dioksanas. Gautos nuosėdos ištirpinamos 5 lit-ruose dietilo eterio. Šis tirpalas perplaunamas vandeniu, ir gautas po perplovimo vanduo dar kartą ekstrahuojamas dichlormetanu. Organinės fazės apjun-giamos ir išdžiovinamos virš magnio sulfato. Tirpiklis
[0042] pašalinamas sumažintame slėgyje. Gautos kietos nuosėdos "perkristalinamos iš 50:50 (pagal tūri) etilo acetato petrolio eteriu. Gaunama 169.8 g 2-[ (4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazin-2-il)amino etanolio.
[0043] Ci2H21N502 %.
[0044] Paskaič.: C 53.91, H 7.92, N 26.20
[0045] Rasta: C 54.30, H 8.10, N 26.13.
[0046] 2-[ (4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il)amino eta-nolis gali būti dviejų skirtingų kristalinių formų, priklausomai nuo produkto perkristalinimo metanolyje (Lyd.t. 97-99°C) arba toluene (Lyd.t. 89-90°C) .
[0047] Taip gaunami (I) formulės junginiai pateikti I len-telėje.
[0048]
[0049] 2-chloro-4-morfolino-6-propil-l, 3, 5-triazinas, naudojamas kaip pradinis produktas šio pavyzdžio junginių sintezei, gaunamas būdu aprašytu T.Tsukijawa ir kt.
[0050] (Vakugaku Zasshi 9_5, (1975), 512-520) iš 2,4-dichlor-6-propil-1,3,5-triazino. Pastarasis junginys gaunamas R.Hirt ir kt. būdu (Helv. Chem. Actą, 33, (1950), 1365-69).
[0051] a) Pradinio 2-[( 4- chlor- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2- il) amino] etanolio gavimas būdu ( a) ( I junginys)
[0052] Į 38.4 g (0.2 mol) 2,4-dichlor-6-propil-l,3,5-triazino tirpalą 100 ml dioksano kambario temperatūroje įla-šinama 24.4 g (0.4 mol) 2-aminoetanolio, ištirpinto 100-e ml dioksano. Po įlašinimo tirpalas maišomas per naktį. Chlorhidratas filtruojamas, filtratas išga-rinamas sumažintame slėgyje. Gautos nuosėdos perkristalinamos iš etilacetato-heksano (50/50 pagal tūrį) mišinio. Gaunama 41.5 g 2-[ (4chlor-6-propil-l,3,5-triazin-2-il) amino)etanolio.
[0053] Paskaič.: C 44.34, H 6.00, N 25.88, C1 16.40
[0054] Rasta: C 44.42, H 6.17, N 25.69, C1 16.52
[0055] b) 2-[( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2- il) amino] etanolio gavimas
[0056] 10.83 g (0.05 mol) 2-[ (4-chlor-6-propil-l,3, 5-triazin-i 2-il)amino] etanolio ir 8.7 g (0.1 mol) sumaišoma 150 ml dioksano. Mišinio temperatūra pakeliama iki 41°C. Paskui susidaręs morfolino chlorhidratas virinamas su grįžtamu šaldytuvu 30 minučių, po to atšaldomas ir filtruojamas. Filtratas išgarinamas ir nuosėdos perkristalinamos iš etilo acetato/heksano mišinio (50/50 pagal tūtrį). Gaunama 11.8 g 2-[ (4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il)amino] etanolio.
[0057] Perkristalintas metanolio produktas lydosi 97-98°C tem-peratūroje ir yra,identiškas (I) junginiui, gautam 1 pa-vyzdy j e.
[0058] 10.83 g (0.05 mol) 2-[ (4-chlor-6-propil-l,3,5-triazin-2-il)amino] etanolio ir 15.15 g (0.15 mol) N-metil-morfolino sumaišoma 100 ml dioksano. Mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 20 valandų, po to atšaldomas, o dioksanas pašalinamas sumažintame slėgyje. Likutis iš-tirpinamas 200 ml etilo acetato. Tirpalas dukart perplaunamas 50 ml vandens, išdžiovinamas virš natrio sulfato ir koncentruojamas. Produktas kristalinamas išga-rinimo metu. Gaunama 9.23 g 2-[ (4-morfolino-6-propil-1, 3,5-triazin-2-il)amino] etanolio, identiško produk-tui, gautam aukščiau aprašytu būdu.
[0059] I. 2- amino- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazinas ( chlorhidratas)
[0060] Šis produktas yra aprašytas S.Murai ir kt. Japonijos patento paraiškoje Nr. 69688 (74 Chem. Abstr. 81
[0061] (1974), 136188) . Ji, galima gauti tokiu būdu. Sumaišoma 87 g (1 mol) morfolino ir 8.6 g (0.05 mol) 2-amino-chlor-6-propil-l,3,5-triazino. Mišinio temperatūra pakeliama iki 54°C. Paskui mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 5 valandas. Reakcijos mišinys išgarinamas sumažintame slėgyje, ir gautos nuosėdos pakartotinai ištirpinamos etilo acetate. Tirpalas tris kartus perplaunamas vandeniu, paskui išdžiovinamas virš natrio sulfato. Tirpiklis pašalinamas sumažintame slėgyje, o nuosėdos perkristalinamos iš heksano. Gaunama 9.1 g 2-amino-4-morfolino-6-propi1-1, 3, 5-triazino.
[0062] Lyd.t.:127-128°C .
[0063] Chlorhidratas; Lyd.t.:210-211°C (izopropilo alkoho-lis/eteris) .
[0064] Paskaič.: C 46.24, H 6.94, N 26.97, C1 13.68
[0065] Rasta: C 46.21, H 6.90, N 26.78, C1 13.61.
[0066] _2-amino-4-chlor-6-propil-l,3,5-triazinas, naudojamas šiame etape kaip pradinis produktas, gaunamas S.Murai ir kt. būdu (Japonijos patento paraiška Nr. 69688(74).
[0067] 2 . 2-( metilamino(- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin) chlorhidratas)
[0068] Į 5.6 g (0.03 mol) 2-chlor-4-(metilamino)-6-propil-l, 3, 5-triazino tirpalą 50-tyje ml pridedama 8.7 g (0.1 mol) morfolino tirpalo 50 ml dioksano. Mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 5 valandas. Susidaręs morfolino chlorhidratas atšaldomas ir filtruojamas. Skiediklis pašalinamas sumažintame slėgyje, o nuosėdos atskie-džiamos chloroformu, perplaunamos vandeniu ir organinė fazė išdžiovinama virš natrio sulfato. Skiediklis išgarinamas, o nuosėdos perkristalinamos iš etilo acetato. Gaunama 5.3 g 2-(metilamino)-4-morfolino-6-propil-1,3,5-triazino.
[0069] Gautas produktas ištirpinamas karštame izopropilo al-koholyje. Į ši, tirpalą pridedamas ekvivalentiškas druskos rūgšties tirpalo etilo eteryje kiekis. Chlorhidratas kristalinamas atšaldant, filtruojamas, perplaunamas etilo eteriu ir išdžiovinamas.
[0070] Lyd.t.:177-178°C.
[0071] Paskaič.: C 48.26, H 7.31, N 25.29, C1 12.97
[0072] Rasta: C 48.38, 47.40, N 25.57, C1 12.64.
[0073] 2-chlor-4-(metilamino)-5-propil-l, 3, 5-triazinas, naudojamas šiame etape kaip pradinis produktas, gaunamas T.Tsujikawa ir kt. būdu (Uakugaku Zasshi 9_5, (1975), 512-520) .
[0074] ( b) 2- amino- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazinų gavimas
[0075] I. N- amino-( 4- morfolino- 6- propil=l, 3, 5- triazin- 2 il) acetamidas ( 21 junginys)
[0076] Į 11.2 g (0.05 mol) 2-amino-4-morfolino-6-propil-l, 3, 5-triazino tirpalą 100-e ml bevandenio piridino įlašinama 4 g (0.05 mol) acetilchlorido. Mišinys maišomas 6 valandas, paskui paliekamas stovėti 48 valandas. Piridino chlorhidratas filtruojamas ir išgarinamas sumažintame slėgyje. Gautos nousėdos atskieažiamos toluenu, kuris vėl išgarinamas. Paskui nuosėdos atskiedžiamos dichlormetanu, tirpalas perplaunamas vandeniu ir išdžio-vinamas virš natrio sulfato. Gautos po tirpiklio išgarinimo nuosėdos gryninamos chromatografija per silicio oksidą (eliuentas : (90 :10 pagal tūri,) dichlormetanas/etanolis), o produktas galiausiai perkristalinamas iš etilo acetato. Gaunama 5.75 g N-(4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il) acetamido.
[0077] Chlorhidratas: Lyd.t.: 145-146°C (izopropilo alkoho-lis/eteris) (21b junginys).
[0078] Paskaič.: C 47.76, H 6.63, N 23.22, C1 11.77
[0079] Rasta: C 47.78, H 6,73, N 22.80, C1 11.62.
[0080] 2. N-( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2 il) benza-midas ( chlorhidratas) ( 22 junginys)
[0081] Į 11.2 g (0.05 mol) 2-amino-4-morfolino-6-propi1-1, 3, 5-triazino tirpalą 200 ml dichloretano kambario tempe-ratūroje pridedama iš eilės 7.7 g (0.055 mol) benzilchlorido tirpalo 50 ml dichloretano ir 5.5 g (0.055 mol) trietilamino 50 ml dichloretano. Mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 6 valandas, po to atšaldomas iki kambario temperatūros. Tada perplaunamas vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu, po to dar kartą vandeniu. Organinė fazė išdžiovinama virš natrio sulfato ir tirpiklis išgarinamas sumažintame slėgyje. Gautos nuosėdos chromatografuojamos per silicio dioksidą
[0082] (eliuentas: (95:5 pagal tūri,) dichlormetanas/etanolis) , galiausiai mišinys perkristalinamas iš eterio mišinio (50:50 pagal tūri,). Susidaro chlorhidratas eteryje. Taip gaunama 12.1 g N-(4-morfolino-6-propil-l, 3,5-triazin-2 il) benzamido.
[0083] Lyd.t.: 197-198°C.
[0084] Paskaič.: C 56.12, H 6.05, N 19.26, C1 9.77
[0085] Rasta: C 56.30, H 6.50, N 19.16, C1 9.54.
[0086] Junginiai, pateikti II lentelėje, gaunami, kaip nurodyta, arba 3b pavyzdžio I būdu arba 3b pavyzdžio 2 bū-du. (I)-chlorhidratas.
[0087] 1. [[ 2-( acetoksi) etil] amino]- 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazinas ( 37 junginys)
[0088] Į 13.4 g (0.05 mol) 2-[ (4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il)amino] -etanolio (I junginys, gautas pagal 1 pvz.) tirpalą 200 ml dichloretano vienu metu 0-5°C temperatūroje įdedama 4.3 g (0.055 mol) acetilchlorido, ištirpinto 50 ml dichlormetano, ir 5.5 g (0.055 mol) trietilamino 50 ml dichlormetano. Šių dviejų reagentų kieki, reguliuoja, kad reakcijos terpėje visada būtų chloranhidrido perteklius trietilamino atžvilgiu. Maišo 5°C temperatūroje vieną valandą, po to 12 valandų kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys iš eilės perplaunamas vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu bei vandeniu. Džiovinamas natrio sulfatu ir tirpiklis išga-rinamas sumažintame slėgyje. Nuosėdos kristalinamos iš tolueno/heksano mišinio 1:2. Gautas produktas iš pra-džių gryninamas per silicio dioksidą (eliuentas dichlormetanas/etanolis (95:5 pagal tūri,), paskui jis galiausiai perkristalinamas iš tolueno/heksano mišinio (1:1). Gaunama 9.3 g 2—[ [ 2—[ (acetoksi) etil] amino] -4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazino.
[0089] Paskaič.: C 54.37, H 7.44, N 22.65
[0090] Rasta: C 54.98, H 7.69, N 22.62.
[0091]
[0092] Gavimas būdu ( e)
[0093] NjN- dimetil- N'-( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazinas- 2-il) karbamidas ( 41 junginys)
[0094] 20°C temperatūroje tris valandas per 5 g (0.0145 mol)
[0095] (4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2 il)-fenilkarba-mato (28 junginio, gauto pagal 3 pvz.) tirpalą 100 ml bevandenio dichlormetano leidžiama dimetilamino dujų srovė. Po to mišinys paliekamas 12 valandų. Tada mi-šinys iš eilės perplaunamas atskiestu natrio hidroksido tirpalu bei vandeniu. Organinė fazė išdžiovinama virš natrio sulfato, ir tirpiklis išgarinamas sumažintame slėgyje. Gautos nuosėdos kristalinamos etilo acetato/heksano mišinio (50:50 pagal tūri,) . Gaunama 1,7 g
[0096] N,N-dimetil-N'-(4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il)-karbamido.
[0097] Lyd.t.: 110-111°C.
[0098] Paskaič.: C 53,06, H 7.48, N 28.57
[0099] Rasta: C 53.20, H 7.69, N 28.67.
[0100] Gavimas būdu ( f)
[0101] 2-[[ 2-[( aminokarbonil) oksi] etilamino]- 4- morfolino- 6-propil- 1, 3, 5- triazinas ( 42 junginys)
[0102] Į vieną litrą skysto amoniako pridedama 19.4 g (0.05 mol) 2-morfolino-4-[ [ 2- (fenoksikarbonil) oksietil] amino] -6-propil-1,3,5-triazino, ištirpinto 100 ml bevandenio dichlormetano. Maišoma 7 valandas -35 - 45°C temperatū-roje, Po to amoniakas išgarinamas, organinė fazė per-plaunama iš eilės vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu bei vandeniu, išdžiovinama virš natrio sulfato, ir tirpiklis išgarinamas sumažintame slėgyje. Gautos nuo-sėdos kristalinamos iš etilo acetato/heksano mišinio (50:50 pagal tūri,). Gaunama 1.51 g 2 —[ [ 2 —[ (aminokarbonil)oksi] etil] amino] -4-morf olino-6-1, 3, 5-triazino .
[0103] Lyd.t.: 139-140°C.
[0104] 2-morfolino-4-[ [ 2-[ (fenoksikarboniletil] amino] -6-propil-1,3,5-triazinas, naudojamas šiame pavyzdyje kaip pradinis produktas, gaunamas pagal 4 pvz. iš 2-[ (4-morfolino-6-propil-l, 3,5-triazin-2-il)amino] etanolio ir fenilchlorrniato.
[0105] Paskaič.:C 58.91, H 6.46, N 18.0
[0106] Rasta: C 58.99, H 6.60, N 18.1.
[0107] Gavimas būdu ( g)
[0108] N- 2-( acetoksi) etil- N-( 4- morfolino- 6- propil- l, 3, 5- triazin- 2- il) acetamidas ( 43 junginys)
[0109] Į 13.4 (0.05 mol) 2-[ (4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazin-2-il)amino] -etanolio (I junginys, gautas pagal 1 pvz.) suspensiją 250 ml dichloretano, išlaikytą maždaug 20°C temperatūroje, pridedama 11.8 g (0.15 mol) trietilamino 50 ml dichloretano. Šis pridėjimas atliekamas taip: iš pradžių pridedama pusė chloranhidrido ir paliekama reaguoti 15 minučių, po to pridedama pusė trietilamino bei likusi chloranhidrido dalis, ir vėl paliekama reaguoti 15 minučių, mišinys pašildomas iki 55°C, ir galiausiai pridedama likusi trietilamino da-
[0110] lis. Gautas mišinys virinamas su grįžtamu šaldytuvu 7 valandas. Po tc mišinį palieka vienai nakčiai įprastoje temperatūroje. Iš eilės mišinys perplaunamas vandeniniu natrio bikarbonato tirpiau bei vandeniu. Išdžiovinamas virš natrio sulfato ir filtruojamas, dalyvaujant noritui. Po tirpiklio išgarinimo suma-žintame slėgyje gautos nuosėdos gryninamos chromatografija per silicio dioksidą (eliuentas: dichlormetanas/etanolis (95:5 pagal tūrį)). Gautas produktas šaltas kristalinamas iš heksano. Gaunama 6.35 g N-[ 2-(acetoksi)etil]-N-(4-morfolino-6-propil-l,3,5-tiiazin-2-il) acetamido.
[0111] Paskaič.: C 54.70, H 7.12, N 19.94
[0112] Rasta: C 55.22, H 7.22, N 20.0.
[0113] Kaip buvo nurodyta aukščiau, (I) formulės 2-amino-4-morfolino-6-propil-l,3,5-triazinai, o taip pat jų adityvinės netoksiškų rūgščių druskos pasižymi cho-linerginės sistemos hipofunkcijos veikimo korekcijos savybe. Ši išskirtinė savybė išryškėjo kaip farma-kologinių bandymų serijos rezultatas ir paaiškėjo, kad junginiai pagal šį išradimą daro poveikį, panašų į cholinerginių junginių, tokių kaip oksotremorinas, arekolinas arba fizostigminas, poveikį arba veikia prieš cholinerginį antagonistą, tokį kaip skopolaminas.
[0114] Buvo atliekami šio išradimo junginių farmakologiniai bandymai, kurių rezultatai pateikiami žemiau.
[0115] 1. Oksotremorino cholinerginių poveikių potenciali-zacija.Šio bandymo tikslas (P.C.Pathbun ir kt. Psychopharmacologia, 4, (1963), 114-125) buvo įrodyti, kad junginiai pagal ši, išradimą sustiprina centrinius ir periferinius cholinerginius poveikius, sukeltus oksotremorino, kurio nedidelė dozė buvo įvesta pelei. Periferinės cholinerginės aktyvacijos laipsnis matuojamas pagal seilių išsiskyrimą, kiekybiškai nustatomą pagal tokią atskaitos sistemą: 0 taškų: seilių išsiskyrimas neviršija paprastos pelės seilių išsiskyrimo; 1 taškas: nedaug seilių yra apie dantis; 2 taškai: seilės sudaro nedidelę siaurą juostele aplink burną; 4 taškai: seilės sušlapina odą po smakru; 6 taškai: seilės teka iš burnos, pvz., ant priekinių galūnių.
[0116] Tarpiniai taškai nenaudojami ir seilės nuvalomos po kiekvieno stebėjimo.
[0117] Centrinės cholinerginės aktyvacijos laipsnis matuojamas pagal tremogenini, poveiki,, kiekybiškai įvertinamą pagal tokią atskaitos sistemą: 0 taškų: drebėjimo nėra; 1 taškas: atsitiktinis lengvas periodinis drebulys; 2 taškai: nestiprus dažnai, pasikartojantis drebulys; 4 taškai: stiprus drebulys su ramybės tarpais; 6 taškai: labai stiprus, beveik pastovus drebulys.
[0118] Pelių patinėliai NMRI (20-25 g) suskirstomi i, keturias grupes po penkis gyvūnėlius, o būtent: viena kontrolinė grupė ir trys apdorojamos grupės. Tiriamas junginys įvedamas intraperitonaliniu būdu (į pilvaplėvę) trijose apdorojamose grupėse lygiomis dozėmis 20 minučių prieš oksotremorino įvedimą. Oksotremorinas įvedamas intraperitonaliniu būdu kiekvienoje tiriamoje grupėje ir kontrolinėje grupėje (0.05 mg/kg 10 ml/kg fiziologinio serumo tirpale) . Ši dozė atitinka maždaug minimalią dozę oksotremorino, kuris sukelia drebuli, ir seilių išsiskyrimą.
[0119] Po oksotremorino įvedimo gyvulėliai patalpinami at-skirai j, nedidelius narvelius ir jie stebimi kas 5 mi-nutės iki visiško cholinerginių poveikių išnykimo. Kiekvienai grupei sumuojami individualūs taškai per duotą stebėjimo laiką, ir tai įgalina sudaryti kreivę, rodančią taškų sumos priklausomybę nuo laiko, būdingą kiekvienai grupei. Vidutinės paviršių po kreivėmis, gautomis kiekvienai iš apdorotų grupių, reikšmės ly-ginamos su vidutine paviršiaus po kreive, atitinkančia kontrolinę grupę, reikšme, ir statistinė analizė atliekama pagal Mann-Witney būdą. Kaip šio palyginimo rezultatas gali būti nustatyta "minimali aktyvi dozė". Ši "minimali aktyvi dozė" yra minimali junginio dozė, būtina sukelti seilių išsiskyrimo arba tremogeninio oksotremorino poveikio potencializaciją, arba kitaip sakant, gauti paviršių, didesnį negu paviršius po kreive, gauta kontrolinei grupei.
[0120] Rezultatai, gauti šiai grupei, įrodo, kad išradimo junginiai sustiprina oksotremorino poveikį seilių išsi-skyrimui vartojant minimalią 7.7 mg/kg dozę ir sustiprina tremogeninį poveiki, vartojant minimalią 8-112 mg/kg dozę. Be to, minimalios aktyvios dozės pačios nepasižymi cholinerginiu poveikiu ir yra toli nuo mirtnų dozių, nustratomų Irvino bandymu. Be to, šis bandymas parodė, kad kai kurie junginiai pagal ši, išradimą, įvesti minimalia aktyvia doze, pasižymi ilgesniu veikimu, negu 1,2,5,6-tetrahidro-l-metil-3-piridinkarboksirūgšties (arekolino) metilo esteris, kuris yra gerai žinomas cholinerginis junginys. Tuo būdu išradimo junginiai rodo seilių išsiskyrimo po-veikių ir tremogeninių oksotremorino poveikių poten-cializaciją, praėjus 20 minučių po jų įvedimo minimalia doze, tuo tarpu kai arekolinas tokiose pačiose sąlygose neparodo jokios potencializacijos. 2. Padidinto aktyvumo, sukelto skopolaminu, stabdymas. Gyvūnas, pirmąkart patalpintas i, naują supančią ap-linką, rodo intensyvų nuoseklų aktyvumą, tyrinėjant šią aplinką. Palaipsnis šio aktyvumo mažėjimas ir jo visiškas išnykimas, kitaip sakant, pripratimas prie naujos aplinkos gali būti laikomas elementaria apmokymo forma. Ši elementari apmokymo forma jautri medikamentų įtakai, kurie palengvina arba sulėtina apmokymą (A.Platel ir kt. Psychopharmocology 7_8, (1982), 346-352). Taip, pvz., skopolaminas, junginys, kuris skatina atminties sutrikimus, sukelia padidintą žiurkės, pa-talpintos i, naują aplinką, pažintini, aktyvumą, ir šis reiškinys susijęs su centriniu šio junginio anti-cholinerginiu aktyvumu. (W.J. Stewart ir kt. Psychopharmacologia _44, (1975), 291-295). Tuo tarpu cholinerginis antagonistas, toks kaip fizostigminas, veikia prieš padidintą aktyvumą.Žemiau aprašomame bandyme šio išradimo junginiai, priklausomai nuo jų tirpumo įvedami arba į fiziologinį serumą, arba į atitinkamą• nešiklį (paprastai buferinį tirpalą-citratą, kurio pH 5). Šis bandymas įgalina nustatyti, kad šio išradimo junginių aktyvumas paly-ginamas su fizostigmino aktyvumu. Jis remiasi, iš vienos pusės, originaliu būdu, aprašytu A.Platel (nuoroda aukščiau) ir, iš kitos pusės, matavimų regis-tracijos automatizacijos būdu, aprašytu H.J.Tauger ir kt. (J. Neuroscience Methods, 10, (1984), 237-245). Šiame bandyme naudoja žiurkių patinėlius Sprague-Dawly SPF (Specific Pathogens Free, 160-200 g). Savaitę prieš eksperimentą šie gyvūnėliai laikomi normaliose sąlygose grupėmis po 15 standartiniuose grotelėmis atskirtuose narveliuose su laisvu priėjimu prie maisto ir gėrimo. Eksperimento pradžioje žiurkės suskirstomos i, keturias vienarūšes grupes po 10 gyvūnėlių ir valandą pratinamos prie eksperimento aplinkos. Po to kiekviena grupė gyvūnėlių apdorojama tokiu būdu: -1 grupė gauna dvi intraperitonines fiziologinio serumo arba naudojamo nešiklio injekcijas vienu metu; -2 grupė gauna vieną intraperitoninę fiziologinio serumo arba naudojamo nešiklio injekciją su (0.5 mg/kg skopolamino tirpale); -3 grupė gauna vieną tiriamo junginio tirpalo ati-tinkamame nešiklyje intraperitoninę injekciją ir vieną fiziologinio serumo arba naudojamo nešiklio intrape-ritoninę injekciją;
[0121] ,-4 grupė gauna vieną tiriamo junginio intraperitoninę injekciją ir vieną 0.5 mg/kg skopolamino intraperi-toninę injekciją.
[0122] Po 30 minučių po tokio apdorojimo' vienu metu tiria visas keturias gyvūnų grupes. Tam kiekvieną grupę patalpina i, kvadratinę kamerą (100x100 cm) su grotelių grindimis ir viena 50 cm aukščio vertikalia sienele. Kiekviena iš šių kamerų turi 16 zonų, įskaitant 4 zonas kampuose, 4 centrines zonas ir 8 periferines zonas. Be to, kiekviena kamera aprūpinta 2 eilėmis infraraudonoj o spinduliavimo elementų, išdėstytų 2 cm virš grindų horizontaliems gyvūnėlių judėjimams registruoti ir 2 eilėmis infraraudonojo spinduliavimo elementų, išdės-tytų 10 cm aukštyje nuo grindų vertikaliems judėjimams registruoti. Šie infraraudonojo spinduliavimo elemen-tai sujungti su mikroprocesoriumi, kuris įgalina vienai gyvūnėlių grupei nustatyti vidutini, nueitą nuotoli, ( cm), nustatyti vidutini, atliktų išsitiesinimų skaičių, o taip pat horizontalių judėjimų įvairiose centrinėse, periferinėse ir kampinėse zonose, pasiskirstymą, iš-reikštą vidutiniu buvimo tose įvairiose zonose laiku. Kiekvieną nagrinėjamą junginį tiria, naudodami bent tris dozes, pagal kurias nustato minimalią aktyvią dozę, kuri stabdo per didelį aktyvumą, kurį sukelia intraperitoninis 0. 5 mg/ kg skopolamino įvedimas. Po to lygina arba reikšmes, gautas 2 grupėje, apdorotoje tik skopolaminu, su reikšmėmis, kurios gautos 4 grupėje, apdorotoje skopolaminu ir tiriamu junginiu, arba reikš-mes gautas 4 grupėje, su reikšmėmis, gautomis 3 gru-pėje, apdorotoje tik tiriamu junginiu. Kontrolinė grupė yra naudojama skopolamino, įvesto 2 grupei, veikimo kontrolei. Visais atvejais pastebėtus skirtumus sta-tistiškai įvertina Mann- Witney būdu. Gauti šiame bandyme rezultatai rodo, kad išradimo junginiai pasižymi geru stabdančiu aktyvumu padidinto aktyvumo, sukelto skopolaminu, atžvilgiu. Nustatytos šiems junginiams minimalios aktyvios dozės yra 1- 89 mg/ kg. Tačiau prie-šingai fizostigminui, kuris yra neaktyvus, kai įvedamas daugiau kaip 15 minučių prieš matavimus, junginiai pagal šį išradimą pasižymi stabdančiu aktyvumu, kai jie įvedami 30 minučių prieš matavimus. Taigi, jų veikimas tęsiasi ilgiau negu fizostigmino.
[0123] I
[0124] 3. Skopolamino poveikio stabdymas elektroencefalo-gramoje ( EEG).
[0125] Skopolamino įvedimas žmogui arba gyvuliui sukelia atminties sutrikimus, palyginamus su sutrikimais, kurie pasireiškia normalaus arba patologinio senėjimo metu. Pacientams, sergantiems Alzhaimerio tipo senatvės silpnaprotyste, susilpninami atminties sutrikimai, naudo-jant f izostigminą, jungini,, kuris stabdo acetil-cho-linesterazę. Skopolaminas, įvestas žiurkėms intraperi-toniu būdu 0.5 mg/kg dozėmis, sukelia EEG spektro pakitimus, kurie pasireiškia galingumo juostos padidė-jimu 8 Hz, galingumo juostų sumažėjimu 20.8-40 Hz, o taip pat bendru EEG spektro galingumo padidėjimu. Fizostigminas veikia prieš šiuos pakitimus.
[0126] Šio eksperimento tikslas yra patvirtinimas elektro-encefalogramos kiekybinės analizės būdu to fakto, kad šio išradimo junginiai pasižymi skopolamino poveikio EEG spektrui neutralizavimo savybe (P.Etevenon Elek-troencefalografij a su ESM. Kiekybinė analizė ir statistika. Copedith, Paryžius, 1987). Šiame bandyme naudojami žiurkių patinėliai Albinos Sprague-Daw.ly SPF (160-200 g) . Kai gyvūnėliai pasiekia 3 mėnesių amžių, jiems įaugina aseptiškai su bendra anestezija 5 kor-tikalinius elektrodus: vieną neutralų elektrodą, vieną kaktos kairįjį ir vieną kaktos dešinįjį, taip pat vieną sprando kairįjį ir vieną sprando dešinįjį (P.Etevenon, nuoroda aukščiau).
[0127] Bandymą atlieka, kai gyvūnėliai pasiekia maždaug 15 mė-nesių amžių. Gyvūnėliai laikomi individualiuose narveliuose, jie gauna vandenį ir maistą pagal poreikius ir jie gyvena reguliarų paros ciklą, į kurį įeina tamsos periodas nuo 18 valandos vakaro iki 6 valandos ryto. Kartu gyvūnėliai palaipsniui pripranta prie garso nepraleidžiančių kabinų narvelių, kurias jie paskui užims EEG registravimui, o taip pat prie eksperimento sąlygų, įvedant placebo intraperitoniniu būdu. Junginius įveda iš karto prieš EEG įrašą. Žiurkes su-skirsto grupėmis po 8 gyvulėlius ir užrašo 2 6 EEG spektro pavyzdžių per 5 sekundes (du EEG spektrai vienam gyvūnėliui). Po to gauti spektrai analizuojami ESM, ir tai įgalina kiekvienai grupei nustatyti vidurkį iš 16 gautų matavimų bei paskaičiuoti iš jo bendrą EEG spektro galingumą vienam gyvulėliui, o taip pat to galingumo (%) pasiskirstymą įvairiose dažnių juostose. Šią operaciją {spektro įrašus) kartoja 9 kartus (bendra trukmė 121 min.). Tiriamo junginio poveikis skai-čiuojamas iš rezultatų, gautų skirtingoms gyvūnėlių grupėms, kurioms buvo įvestas atitinkamai tiriamas junginys, skopolaminas ir placebo, statistinio palyginimo. Žemiau pateikiamoje IV lentelėje kai kuriems išradimo junginiams, įvestiems intraperitoniniu būdu ir nurodyta doze, pateiktas 6.4-9.6 Hz (vid. 8 Hz) galingumo juostos padidėjimo, sukelto intraperitoniniu 0.5 mg.kg skopolamino įvedimu, sumažinimo procentas.
[0128] Rezultatai rodo, kad .išradimo junginiai, kaip ir fizostigminas, slopina skopolamino poveikį elektroence-falogramai. Matyti, kad šis slopinimas siekia net 50% prie palyginus nedidelių dozių, labai tolimų nuo toksiškų dozių, ko negalima pasakyti apie fizostigminą.
[0129] Šio išradimo junginiai buvo tiriami, norint išnag-rinėti, iš vienos pusės, jų pagalbos apmokymui savybę, išreikštą bandymų, reikalingų iš anksto apibrėžto kri-terijaus pasiekimui, skaičiaus sumažinimu, ir iš kitos pusės, jų savybę priešintis amnezijai, sukeltai skopolamino įvedimo. Tam naudojo pasyvaus nukrypimo su daugkartiniais bandymais būdą. Šis būdas gerai žinomas poveikių, kuriuos daro produktai atminčiai ir apmokymui, įvertinimo srityje (A. Pine ir kt. Proc. Nat.1. Acad. Sci., USA, 82 (1985), 5227-5230).
[0130] Bandymas atliekamas su žiurkių Sprague-Dawley patinė-liais (160-200 g) , kurie eksperimento metu laikomi standartiniuose narveliuose. Naudojamas įrenginys yra kvadratinis skaidrus 35 cm pločio ir 25 cm aukščio narvelis su įrengtomis elektrifikuotomis grindimis. Ant grindų viename iš kampų įrengiamas guminis izoliacinis sluoksnis (10x17 cm).
[0131] Junginių sugebėjimo padėti apmokymui įvertinimas atliekamas tokiu bandymu. Kiekvieną gyvūną patalpina ant guminio sluoksnio ir pažymi laiką, kurį gyvūnėlis už-trunka iki sprendimo palikti šią vietą, kad ištirtų narvelį. Po 20 sekundžių tyrimo gyvūnėlis gauna smūgį elektros srove (trukmė 3 sekundės) į letenėles, kas priverčia bėgti. Žiurkę iš karto išima iš įrenginio ir patalpina įprastame narvelyje. Šį eksperimentą kartoja iki tol, kol gyvūnėlis bent 180 sekundžių pasilieka ant guminio sluoksnio, kad negautų elektros srovės smūgio. Apmokymas išreiškiamas vidutiniu bandymų skaičiumi, reikalingu kad gyvūnėlis užtruktų ant guminio sluoksnio 180 sekundžių. 180 sekundžių buvimo ant guminio sluoksnio laikas laikomas maksimalia pasiekiama cha-rakteristika, gyvūnėliui norint išvengti elektros sro-vės smūgio. Žiurkės, kurios išbūna ši, laiką ant sluoksnio, įgyja nukrypimo refleksą ir jas vėl patalpina į iprastą narveli be elektros srovės smūgio gavimo.
[0132] Junginio sugebėjimo padėti atminties išlaikymui laikui bėgant ištyrimui atliekamas toks eksperimentas. Su kiekvienu gyvūnėliu atliekami keturi 0, 4, 24 ir 28 va-landų bandymai. Pirmame bandyme (laikas 0) gyvūnėlis padedamas ant guminio sluoksnio ir pažymimas laikas iki to momento, kai gyvūnėlis nusprendžia palikti šią vietą ir ištirti narvelį. Po 20 sekundžių tyrimo gyvūnėlis gauna smūgį elektros srove (trukmė 3 sekundės) į letenėles, kas priverčia bėgti. Žiurkę iš karto išima iš įrenginio ir patalpina įprastame narvelyje. Per tris bandymus iš eilės (laikas 0, 4, 24 ir 48 valandos) gyvūnėlį vėl padeda ant guminio sluoksnio ir pažymi laiką iki to sluoksnio palikimo. Kai tik keturios gyvūnėlio letenėlės patenka ant grotelių, jis gauna elektros srovės smūgį ir nedelsiant išimamas iš įrenginio.
[0133] Eksperimento pradžioje žiurkės suskirstomos į 4 vie-narūšes grupes po 15 gyvūnėlių. 20 minučių prieš kiek-vieną eksperimentą kiekviena grupė yra apdorojama: 1 grupė gauna vieną intraperitoninę fiziologinio serumo injekciją; 2 grupė gauna vieną intraperitoninę tiriamo junginio injekciją; 3 grupė gauna vieną intraperitoninę 0.5 mg skopolamino injekciją; 4 grupė gauna vienu metu vieną intraperitoninę in-jekciją skopolamino ir vieną tiriamo junginio injek-ciją. 1 ir 2 grupės naudojamos pirmam eksperimente, o 3 ir 4 grupės naudojamos antram eksperimente. Rezultatai, gauti šiame eksperimente , pateikti V lentelėje. Šioje lentelėje nurodytas tiriamas junginys (I lentelė) ir intraperitoniniu būdu įvesta dozė, išreikšta mg/kg (2 stulpelis). 3 ir 4 stulpeliuose pateikti rezultatai, gauti apmokymo įvertinimo bandyme. Skaičiai rodo vidutini, bandymų skaičių, reikalingą, kad kontrolinis gy-vūnėlis (I grupė) arba apdorotas junginiu gyvūnėlis (2 grupė) išmoktų būti ant guminio sluoksnio 180 se-kundžių, taip išvengdamas elektros srovės smūgio. Rezultatai buvo analizuojami pagal Student'o testą. 5-12 stulpeliuose pateikti rezultatai, gauti atminties išlaikymo įvertinimo eksperimente. 5-8 stulpeliuose skaičiai rodo vidutini, buvimo laiką, pažymėtą atitinkamai 0, 4, 24 ir 28 valandų laiku gyvūnėlių 3 grupei, apdorotai tik skopolaminu, o stulpeliuose 9-12 pateikti skaičiai, atitinkantys 4 grupės gyvūnėlius, apdorotus vienu metu ir skopolaminu, ir tiriamu junginiu (doze, nurodyta antrame stulpelyje). Palanki junginio įtaka veikiant prieš amneziją, sukeltą skopolamino, įrodyta kiekviename eksperimente, padidėjusiu buvimo ant guminio sluoksnio laiku. Pastebėti skirtumai buvo statistiškai išanalizuoti Mann-Witney būdu.
[0134] šio išradimo junginiai padeda nukrypimo reflekso apmokymui: vidutinis skaičius bandymų, reikalingų pa-siekti iš anksto apibrėžtą kriterijų (maksimalus 180 sekundžių buvimo ant sluoksnio laikas), yra mažesnis apdorotiems gyvūnėliams (4 stulpelis) negu kontroliniams gyvūnėliams (3 stulpelis);
[0135] skopolamino amnezinis poveikis labai aiškiai iš-reikštas: matyti, kad 3 grupės gyvūnėlių (8 stulpelis) buvimo ant sluoksnio laikas aiškiai mažesnis negu 180 se-kundžių, gautų kontroliniams gyvūnėliams po vidutinio
[0136] bandymų skaičiaus (3 stulpelis), ir šiose sąlygose palankus išradimo junginių priešinimasis skopolamino sukeltai amnezijai yra labai aiškiai išreikštas: 4 gru-pės gyvūnėlių, kurie apdoroti kartu ir s kopdami nu, ir išradimo junginiu, buvimo ant guminio sluoksnio laikas kiekviename eksperimente žymiai didesnis negu 3 grupės gyvūnėlių, apdorotų tik skopolaminu (palyginkite 5 stulpelio rezultatus su 9 stulpelio rezultatais, 6 stulpelio rezultatus su 10 stulpelio rezultatais ir t.t.);
[0137] f izostigrninas palankiai veikia prieš skopolamino su-keltą amneziją, panašiai kaip šio išradimo junginiai, tačiau vartojant dozes, sukeliančias šalutinius poveikius ir labai artimas toksiškai, ko negalima pasakyti apie šio išradimo junginius.
[0138] Išradimo junginių toksiškumas nustatomas pelės NMRI patinėliams Irvino testu (S. Irwin, Psychopharmacologia 13, (1968), 222-257). Pelių grupėms po tris intraperitoniniu būdu buvo leidžiamos didėjančios tiriamo junginio dozės iki tol, kol buvo pasiekta mirtina dozė, sukelianti dviejų iš trijų gyvūnėlių mirti, per 48 valandas. Žemiau pateikiamoje lentelėje VI pateikiamos mirtinos dozės išradimo junginiams. Iš jos aišku, kad išradimo junginiai yra mažai toksiški, priešingai fizostigminui .
[0139] Farmacinės kompozicijos, kurių sudėtyje yra šio išradimo junginių, gali būti įvestos peroraliniu, parenteraliu ir rektaliniu būdu,. Farmacinės kompozicijos, kurios gali būti geriamos peroraliai, gali būti kietos arba skystos, pvz., tablečių, piliulių, dražė, želatininių kapsulių, tirpalų, sirupų ir 1.1, pavidalo. Taip pat kompozicijos, kurios gali būti naudojamos parenteraliai, gali būti žinomų farmacinių formų, kaip tirpalai, suspensijos, vandeninės arba aliejinės emulsijos. Farmacinės kompozicijos, skirtos rektaliniam įvedimui, paprastai yra žvakučių pavidalo. Farmacinės priemonės tokios kaip išvirškščiami tirpalai, išvirkščiamos suspensijos, tabletės, lašai, žva-kutės ir 1.1, gaunami įprastais farmacininkų naudo-jamais būdais. Farmacinės formos apima tokias kompo-zicijas, kurios įgalina palaipsniui atpalaiduoti aktyvų produktą. Išradimo junginiai sumaišomi su netoksišku farmaciškai priimtinu kietu arba skystu nešėju ir tam tikrais atvejais su dispergentu, dezintegratoriumi, stabilizatoriumi ir t.t. Jei reikia, ten galima pridėti saldinančių, dažančių medžiagų ir 1.1. Procentinė aktyvaus produkto dalis gali keistis labai plačiose ribose priklausomai nuo vaistų vartojimo dažnumo. Kai dėl kasdieninio dozavimo, ji gali keistis labai pla-čiame vienetinių dozių diapazone, pvz., 0.1-2 g aktyvaus produkto priklausomai nuo įvedimo būdo. Pvz., ši dozė gali būti 0.25-0.75 g, geriau 0.5 g tris kartus per dieną, kai junginys tablečių formos.
[0140] Kaip neapriboj antis kompozicijos, kurios sudėtyje yra (I) formulės junginio ir kuri skirta peroraliniam naudojimui, pavyzdys žemiau pateikiama tablečių su-dėtis:
2-amino-4-morfolino-6-prcpil-l, 3,5-triazinų dariniai,jų optiniai izomerai ir jų raceminės formos, kurių bendra formulė yra (I):