LT3681B

N-ACIL-ALFA-AMINORŪGŠTIES DARINIAI, JŲ GAVIMO BŪDAS, FARMACINIAI PREPARATAI IR JŲ GAVIMO BŪDAS

N-ACYL-ALPHA-AMINO ACID DERIVATIVES, METHOD FOR PRODUCTING THEREOF,PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS AND PREPARING THEM

Referatas

[LT] N-Aroil- -aminokarboninės rūgšties, kurios bendra formulė@@@@@@@kur , R' - R''' ir Q reikšmės yra nurodytos aprašyme, dariniai gali būti naudojami ligų, kurias sukelia adhezyvinių proteinų susijungimas su trombocitais, o taip pat ir trombocitų agregacija bei lastelių-ląstelių susijungimas, gydymui ir profilaktikai. Šie dariniai gaunami atskeliant atitinkamų junginių apsaugines grupes arba pakeičiant atitinkamų nitrilų ciano grupę amidino grupe.

[EN]

Aprašymas

[0001] Šis išradimas skirtas naujiems N-acil-a-aminorūgšties dariniams, jų gavimo metodams, farmaciniams prepara-tams, kurių sudėtyje yra tokie junginiai, bei šių jun-ginių panaudojimui farmacinių preparatų gamybai.

[0002] Išradimas daugiausia skirtas N-acil-a-aminorūgšties dariniams, kurių bendra formulė

[0003]

[0004] R', R' ' ir R' ' ' - vandenilis arba įprasti a-amino-karboninių rūgščių pakaitai arba šoninės grandinės, be to, i, R1 , R'' ir R' ' ' sudėti, įeinančios hidroksilo arba karboksilo grupės gali būti eterifikuojamos, esterifikuojamos arba keičiamos amido grupe, o esančios aminogrupės gali būti C_į-Cg-alkanoilinamos arba aroilinamos,

[0005] formulės grupė

[0006]

[0007] T ir T' - vandenilis arba atskeliamas, esant fizio-loginėms sąlygoms, žemesnysis alkilas arba fenilas-že-mesnysis alkilas,

[0008] R² - R⁵ - vandenilis, žemesnysis alkilas, žemesnysis alkoksi, halogenas arba -OCH₂COO-T" grupė arba

[0009] R² - R³ - kartu su fenilo grupe, su kuria jie sujungti, sudaro 1-naftilgrupę,

[0010] o taip pat hidratams arba solvatams ir fiziologiškai naudojamoms jų druskoms.

[0011] Pareikšti nauji dariniai pasižymi efektyvesniu povei-kiu, palyginus su kitais junginiais, pvz., pagal EP-A-0381033, kuriuos galima laikyti jų struktūriniais analogais ir kurie yra žinomi kaip inhibitoriai, slopi-nantys kraujo plokštelių surišimą.

[0012] Šiame išradime Me yra metilas, Ac - acetilas, tBu - tret.-butilas, Boc - tret.-butoksikarbonilas, Z - ben-ziloksikarbonilas, Fmoc - 9-fluorenilmetoksikarbonilas, Vai - a-valilas, Phe - a-fenilalanilas, Ser - a-se-rilas, Gly - glicilas, Ala-a-alanilas, Asp - a-as-partilas, Leu - a-leucilas, Tyr - a-tirozilas, Sar - sarkozilas, Orn - a-ornitilas, Lys - a-lizilas, Phg - L - a-fenilglicilas, Pro a-prolilas, Glu - a-glutamilas, Trp -a-triptofanas.

[0013] Sąvoka "žemesnysis" reiškia grupes, turinčias 1-6 C-atomus, geriausia 1-4 C-atomus. Žemesniųjų alkilo gru-pių pavyzdžiais yra metilas, etilas, propilas, izo-propilas, n-, antrinis arba tret.-butilas ir heksilas. Atskeliamų, esant fiziologinėms sąlygoms, žemesniųjų alkilo grupių pavyzdžiais yra pirminės ir antrinės žemesniosios alkilo grupės.

[0014] Simboliai R', R¹' ir R' ' ' a-aminokarboninės rūgšties liekanoje -(R')C(R'', R''')CO yra vandenilis arba - a-aminokarboninėse rūgštyse su atvira grandine arba ciklinėse, gamtinėse arba sintetinėse - įprastiniai N-pakaitai arba šoninės grandinės. Tokių N-pakaitų R' ir šoninių grandinių R' ' ir R' ' ' pavyzdžiais yra pa-keisti tikriausiai per OH, COOH, NH₂ arba arilą, ypač per fenilą, hidroksifenilą, hidroksijodfenilą arba hid-roksidijodfenilą žemesnieji alkilai. Dvi pakeistos tokiu būdu, esant reikalui, žemesnės alkilo grupės R' ir R' ' kartu su N- arba C-atomu, su kuriuo jos sujungtos, gali sudaryti ciklą, turinti, nuo 4- iki 6-narių, ypač 5-narį. Pasitaikančios N-pakaituose R' ir šoninėse grandinėse R1 ' ir R' ' 1 hidroksi- arba karboksigrupės gali būti eterifikuojamos arba esterifikuojamos arba keičiamos amido grupe, o pasitaikančios amino grupės gali būti C_x_₆ alkanoilinamos arba aroilinamos. Tokių grupių - eterio, esterio arba amido - pavyzdžiais yra - 0-T°, -COO-T° arba -CON (V, V'), kur V ir V' turi aukščiau paminėtas reikšmes, o T° - žemesnysis alkilas, ypač metilas, heksilas ir tret. butilas arba aralkilas, ypač benzilas.

[0015] a-Aminokarboninių rūgščių su atviromis grandinėmis pavyzdžiai: H-Gly-OH, H-Ala-OH, H-Orn-OH ir H-Tyr-OH; ciklinių a-aminokarboninių rūgščių, t.y. tokių rūgščių, kur R' ir R' ' kartu su N arba C atomu, su kuriuo jie sujungti, sudaro žiedą, pavyzdžiai: H-Pro-OH, H-Pro(4-OH)-OH ir 2-piperidinkarboninė rūgštis.

[0016] Alkanoilo grupių u ir u' pavyzdžiai: formilas, acetilas ir propionilas. Arilas yra fenilas, turintis, esant reikalui, iki 3 pakaitų, tokių kaip alkilas, OH, žemesnysis alkoksi, halogenas arba halo-žemesnysis alkilas, ypač CF₃. Aroilas - atitinkamos benzoilo grupės.

[0017] b

[0018] Junginius, kurių bendra formulė I, galima solvatuoti, ypač hidratuoti. Hidratuoti galima gavimo metu arba šis procesas vyksta palaipsniui dėl higroskopinių junginio I, kuris prieš tai buvo bevandenis, savybių.

[0019] Junginių, kurių bendra formulė I, fiziologiškai pri-imtinų druskų pavyzdžiais yra fiziologiškai priimtinų mineralinių rūgščių, tokių kaip druskos arba fosforo rūgštis, druskos; arba organinių rūgščių, tokių kaip metansulforūgštis, acto rūgštis, trifluoracto rūgštis, citrinos rūgštis, fumaro rūgštis, maleino rūgštis, vyno rūgštis, gintaro rūgštis arba salicilo rūgštis druskos. Junginiai, kurių bendra formulė I, turintys laisvą kar-boksigrupę, gali sudaryti druskas taip pat ir su fi-ziologiškai priimtinomis bazėmis. Tokių druskų pavyz-džiais yra šarminių metalų, žemės šarminių metalų, amonio ir alkilamonio druskos, tokios kaip Na, K, Ca arba tetrametilamonio druskos. Junginiai, kurių bendra formulė I, gali egzistuoti taip pat ir amfoterinių jonų pavidale.

[0020] Junginiai, kurių bendra formulė I ir kurie turi vieną arba kelis asimetrinius C atomus, gali egzistuoti kaip enantiomerai, kaip diastereomerai arba kaip jų miši-niai, pavyzdžiui, kaip racematai.

[0021] Formulėje I R dažniausiai yra amidinas, X - CH, Y - CH arba N, o Q - O¹, Q², Q⁴, Q⁵ arba Q⁹ grupė.

[0022] Junginiuose, kurių bendra formulė I, kur Q = O¹, n dažniausiai 1, T - vandenilis arba metilas, ir -N(R')C(R'', R'_,^I)-CO - viena iš liekanų: Gly, Ala, D-Ala, Vai, Leu, Sar, Orn, Lys, Phg-2-metil-Pro, Phe, Tyr, 3-jod-Tyr, 3,5-dijod-Tyr, Ser(Ac), Ser, Asp, Glu, Pro, 4-benziloksi-Pro, 4-hidroksi-Pro, 2-piperidilenkarbonil, NHCH (CH2CH2NH2) CO, Trp, Tyr(Me), Tyr(heksil), Tyr (o-tBu) , ON(Me)₂-Tyr ir N (MeOCH2CH2) Gly .

[0023] Tinkamiausi junginiai, kur Q = Q², Q⁴ arba Q⁵ yra junginiai, turintys n = 1, T = H; u ir u' = H arba Ac; Ar = a,a,a-trifluor-m-tolilas, ir -N(R')C(R'', R''')CO- = Ala .

[0024] Jeigu Q-Q⁹, tai R^2-R⁵ dažniausiai H, arba R² - karbok-simetoksi arba metoksikarbonilmetoksi, T = H arba CH₃, ir -N(R')C(R 1 ', R''')CO- = Pro.

[0025] Tinkamiausių junginių pavyzdžiai: //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgštis,

[0026] //1-/N-/(5-amidino-2-piridil)karbonil/-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/-acto rūgštis,

[0027] //1-/N-(p-amidinobenzoil)-3- (4-hidroksi-3-jodfenil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgštis,

[0028] //l-/3-acetoksi-N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgštis,

[0029] /p-//l-(p-amidinobenzoil)-2-pirolidinil/karbonil/fenoksi/acto rūgštis,

[0030] //1-/N-(5-amidino-2-piridil)karbonil/-L-tirozil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgštis ir ypač

[0031] //l-/n-(p-amidinobenzoil)-L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgštis.

[0032] Kiti tinkami junginiai, kurių bendra formulė I, yra tokie junginiai, kur Q atitinka Q grupę, ypač kur n = 0 ir T - vandenilis, arba Q⁷ grupę, ypač kur T - vandenilis, o taip pat ir junginiai, kur Q atitinka Q g grupę, ypač kur V = 1, T - vandenilis arba butilas ir V'-V''' - vandenilis.

[0033] Tokių junginių pavyzdžiai: (S)-1-/2-(5-amidinopiridin-2-ilkarbonilamino)-3-(4-me-toksifenilpropionil/piperidin-4-iloksiacto rūgštis,

[0034] (S)-1-/2-(4-amidinobenzamido)-3-(4-metoksifenil)propio-nil/-piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esteris,

[0035] (S)-1-/2-(4-amidinobenzamido)-3 - (4-metoksifenil)propio-nil/-piperidin-4-iloksiacto rūgštis,

[0036] /1-/N-(4-amidinobenzoil)-4'-heksiloksi- a-fenilalanil/- piperidin-4-iloksiacto rūgštis.

[0037] Aukščiau minėtas N-acil-a-aminorūgštis, remiantis šiuo išradimu, galima gauti: a) junginyje, kurio bendra formulė

[0038] veikiamas rūgštimi, kurios bendra formulė a^-COOH arba

[0039] d) esant reikalui, junginys, kurio bendra formulė I, pakeičia reaktingą funkcinę grupę, ir e) esant reikalui, junginys, kurio bendra formulė I, pervedamas i fiziologiškai priimtiną druską arba junginio, kurio bendra formulė I, druska pervedama i lais-vą rūgšti, arba bazę. Karboninės rūgšties esterio atskeliamų grupių pavyz-džiai: benzil-OCO- ir žemesnysis alkilas-OCO, kaip, pavyzdžiui, t-Bu-OCO-. Atskeliamų apsaugotų amino, amidino ir guanidino grupių pavyzdžiai: -NH-Z, -NH-Boc ir N₃; -C(NH)NH-Z, -C(NH)H-Boc, C(N-Boc)N (Boc)2 ir -C(N-Boc)NH-Boc; -NHC(NH)NHN0₂ ir -NHC (N-Boc)NH-Boc. Atskeliamos eterio grupės pavyzdys - tBu-O-.

[0040] Esterio grupes galima hidrolizuoti žinomu būdu, pa-vyzdžiui, naudojant bazes, tokias kaip šarminio metalo hidroksidas, pavyzdžiui, natrio hidroksidas, ištir-pintas tirpiklyje, tokiame kaip metanolis arba vanduo; arba naudojant rūgšti, tokią kaip druskos rūgštis. Benzilo esteri, galima suskaidyti hidrinant, esant kata-lizatoriui tauraus metalo pagrindu, pavyzdžiui pala-džiui ant aktyvuotos anglies (Pd/C), tirpiklyje, tokiame kaip metanolis, etanolis, skruzdžių arba acto rūgštis, esant maždaug 40°C temperatūrai, geriausia kambario temperatūroje. Tuo pat metu atskeliama grupėje A esant apsauginė grupė, tokia kaip Z.

[0041] Esterio grupes, tokias kaip tBu-OCO, o taip pat apsaugines amino ara amidino grupes, tokias kaip Boc, ir esterio grupes, tokias kaip tBu-O-, galima atskelti panaudojant rūgštis, tokias kaip skruzdžių rūgštis arba trifluoracto rūgštis; galima tirpiklyje, tokiame kaip dichlormetanas, arba prisotintos HC1 acto rūgšties pagalba, esant iki 40°C temperatūrai, geriausia kambario temperatūroje.

[0042] Varijantas b) gali būti įgyvendinamas taip: nitrilas III sieros vandenilio ir trietilamino, ištirpinto piridine, pagalba paverčiamas tioamidu, kuris po to me-tilinamas metilo jodidu, ištirpintu acetone, o po to amonolize, veikiant amonio acetatu metanolyje, gaunamas I junginys.

[0043] Derinys c) - t. y. amino IV a¹ -COOH rūgštimi arba jos reaktingu dariniu, tokiu kaip rūgšties chloranhidri-das - gaunamas dalyvaujant bazei, tokiai kaip pikoli-nas, tirpiklyje, tokiame kaip dichlormetanas, esant temperatūrai iki 40°C, geriausia kambario temperatū-roje .

[0044] Kaip reaktingu grupių funkcinių modifikacijų pagal va-rijantą d) pavyzdžius galima paminėti žemesniojo alkoksikarbonilo -COO-T arba -COO-T' grupių, esančių grupėje Q, atskėlimą, arba C₁.₆ -alkanoiloksi arba aroiloksigrupių Q-u arba Q-u' atskėlimą, arba rūgšties I karboksigrupės esterifikavimą, ir arilo grupės, esančios šoninėje grandinėje R' ' arba R' ' ' halogeni-nimą, ypač jodinimą.

[0045] Grupėje Q esančias butoksikarbonil arba metoksikar-bonilo grupes galima hidrolizuoti rūgšties pagalba, pavyzdžiui, vandeniniu druskos arba acto rūgšties tirpalu, arba šarminėje terpėje, pavyzdžiui, vandeniniu natrio šarmo tirpalu metanolyje; acetoksigrupes - kalio karbonatu metanolyje. Karboksigrupės esterifikavimą atlieka, pavyzdžiui, reaguojant rūgščiai su atitinkamu alkoholiu, esant kataliziniam H₂S0₄ kiekiui.

[0046] Arilo grupės, ypač hidroksifenilgrupės, esančios šon-inėje grandinėje R'' arba R'¹¹, jodinimas gai būti at-liekamas reaguojant I junginiui su chloraminu T, esant natrio jodidui, ištirpintam vandenyje/dimetilformamide. Aminas 1, kur L - grupė H₂N(CH₂), paverčiamas atitinkamu guanidinu 1, kur a yra -HN=C (NH2) NH (CH2) t, be to, aminas reaguoja su 2-S-izotiokarbamido etansulfonatu, dalyvaujant bazei, tokiai kaip Na₂C0₃ arba NaOH, esant iki 40°C temperatūrai.

[0047] Junginiai, kurių bendra formulė II ir III, yra nauji ir taip pat yra šio išradimo objektas.

[0048] Junginys II, kur a° - arilo grupė a^o1, gaunamas reaguojant aminui, kurio formulė

[0049]

[0050] arba su jos reaktingais dariniais, pavyzdžiui, rūgšties chloranhidridu.

[0051] Šią reakciją galima įvykdyti, esant reikalui, pridedant tetra-n-butilamoniohidrogensulfato, tirpiklyje, tokiame kaip dichlormetanas, ir bazei, tokiai kaip natrio hidrokarbonato vandeninis tirpalas.

[0052] Aminas H-Q°, kur Q° - viena iš amino grupių Q^1-Q⁸, kurioje grupė -COO-T ir, esant reikalui, turima -COO-T' grupė egzistuoja kaip karboninės rūgšties esterio grupės, gali reaguoti su rūgštimi, kurios formulė

[0053] Šią reakciją galima įvykdyti esant 2-(lH-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3,-tetrametiluronio-heksafluorfosfatui (HBTU) ir organinei bazei, tokiai kaip N-metilmorfolinas, tirpiklyje, tokiame kaip dimetilformamidas.

[0054] Junginys II, kur A - amidinas, gali būti gaunamas iš atitinkamo junginio II nitrilo, keičiant jo ciano grupę amidino grupe. Nitrilas gali būti gaunamas reaguojant aminui, kurio bendra formulė V, su rūgštimi, kurios formulė

[0055]

[0056] arba su jos funkciniais dariniais, pavyzdžiui, rūgšties chloranhidridu.

[0057] Ši reakcija gali vykti dalyvaujant 2-chlor-4,6-di-metoksi-1, 3, 5-triazinui (CDMT) ir bazei, tokiai kaip N-metilmorfolinas, ištirpintas tirpiklyje, tokiame kaip dichlormetanas.

[0058] Junginys II, kur a° - grupė a°² su apsaugota amino arba guanidino grupe R⁰¹, gaunamas reaguojant aminui V su rūgštimi, kurios formulė R⁰¹ - (CH₂)_t - COOH, pavyz-džiui, esant HBTU ir N-metilmorfolinui.

[0059] Nitrilas III, kur Q - grupė Q⁹, gali būti gaunamas, pa-vyzdžiui, tokiu būdu:

[0060] Aminas, kurio bendra formulė

[0061] kur R' ir R' ' kartu su N ir C atomais sudaro ciklą ir W^x yra apsauginė grupė, reaguoja su rūgštimi VIII arba jos funkciniais dariniais, atskeliama apsauginė grupė ir gautas fenolis veikiamas bromacto rūgšties dariniais BrCH₂C00-T.

[0062] Amino IX reakcija su atitinkamos rūgšties VIII chloranhidridu gali vykti dalyvaujant bazei, tokiai kaip, trietilaminas, dimetilformamide. Apsaugines grupes W¹, pavyzdžiui, benzilo, galima atskelti hidrinant ant Pd/C etanolyje, o aukščiau minėto fenolio reakciją su bromacto rūgšties dariniais galima atlikti dimetilformamide, dalyvaujant kalio karbonatui.

[0063] Aminai IV ir V gali būti gaunami, pavyzdžiui, reaguojant - apsaugotai amino rūgščiai, kurios formulė

[0064]

[0065] ir pašalinant reakcijos produkto apsauginę amino grupę _W².

[0066] Naudojamus aminus HQ°, kur Q° - viena iš amino grupių Q^1-Q⁸, kur grupė -COO-T ir, esant reikalui, turima -COO-T¹ grupė egzistuoja kaip karboninės rūgšties esterio gru-pės, galima gauti kaip aprašyta toliau pateiktuose pavyzdžiuose: 1 a)b)c), 2a), 46a)b), 47a) ir 48a)b).

[0067] Junginiai, kurių bendra formulė I, jų solvatai ir jų druskos stabdo ne tik fibrinogeno, fibrinektino ir Villebrando faktoriaus surišimą su kraujo plokštelių fibrinogeniniu receptoriumi (glikoproteinas Ilb/IIIa), bet ir šių bei kitų adhezinių proteinų, tokių kaip vit-ronektinas, kolagenas ir lamininas surišimą su ati-tinkamais receptoriais, esančiais įvairių tipų ląstelių paviršiuje. Tokiu būdu, minėti junginiai turi įtakos sąveikai ląstelės-ląstelės ir ląstelės-matrica. Jie ypač stabdo trombocitų susidarymą ir gali būti pa-naudojami profilaktikai arba kovai su tokiomis ligomis, kaip trombozė, kraujo išsiliejimas i, smegenis, miokardo infarktas, uždegimas ir arteriosklerozė. Be to, šie junginiai turi įtakos auglių ląstelėms, t.y. stabdo metastazių susidarymą. Tokiu būdu, juos galima pa-naudoti taip pat ir kaip priešnavikines priemones. Šie junginiai pagreitina žaizdų gijimą. Juos galima panau-doti osteoporozės gydymui, kadangi jie stabdo kaulų audinių rezorbciją.

[0068] Fibrinogeno surišimo su fibrinogeniniu receptoriumi, glikoproteinu Ilb/IIIa, stabdymą galima nustatyti se-kančiai :

[0069] Glikoproteinas Ilb/IIIa gaunamas iš žmogaus kraujo plokštelių Triton-X-100 ekstraktų ir gryninamas giminingumo lektinui chromatografijos metodu (Analytical Biochemistry 151, 1985, 169-177) bei chromatografiškai ant giminingumo Arg-Gly-Asp-Ser-kolonėlės (Science 231, 1986, 1559-62). Gautas tokiu būdu receptorinis pro-teinas surišamas ant plokštelių su mikrotitru. Spe-cifinis fibrinogeno surišimas su imobilizuotu receptoriumi nustatomas EhISA-sistemos pagalba ("Enzyme-Linked immunosorbent assay"). Žemiau pateiktos IC₅₀-reikšmės atitinka tokią tiriamos medžiagos koncent-raciją, kuri reikalinga tam, kad 50 % sustabdyti fibrinogeno surišimą su imobilizuotu receptoriumi:

[0070] Šie junginiai pasižymi mažu toksiškumu, tačiau pa-vyzdžių 3 ir 14 produktų LD₅₀ yra 250, o 5 pavyzdžio - 500 mg/kg, leidžiant pelėms i veną.

[0071] Kaip jau buvo minėta pradžioje, vaistinės priemonės, 4 kurių sudėti, i,eina junginys I, jo solvatai arba jo druskos, taip pat yra šio išradimo objektas, be to, taip pat ir panašių vaistinių preparatų gavimo metodas, besiskiriantis tuo, kad vienas ar keli minėti junginiai ir, esant reikalui, viena arba keletas kitų terapiškai vertingų medžiagų yra perdirbamos i, galeninę formą. Vaistiniai preparatai gali būti įvedami per žarnyną, pavyzdžiui, tablečių pavidale pro burną, tablečių su lako paviršiumi, dražė, kapsulių kietame ir minkštame želatine, tirpalų, emulsijų arba suspensijų pavidale, arba rektališkai, pavyzdžiui žvakučių pavidale; arba naudojant purkštukus. Bet galima naudoti ir parente-raliai, pavyzdžiui, injekcijoms arba infuzijai skirtų tirpalų pavidale.

[0072] Tam, kad gauti tabletes, tabletes su lako paviršiumi, dražė ir kapsules kietame želatine, galima sumaišyti aktyvią medžiagą su farmaciškai inertiniais neorga-niniais arba organiniais užpildais. Tokie užpildai tabletėms, dražė ir kapsulėms kietame želatine gali būti, pavyzdžiui, laktozė, kukurūzų krakmolas arba jo dariniai, talkas, stearino rūgštis arba jos druskos. Užpildais kapsulėms minkštame želatine naudojami, pa-vyzdžiui, augaliniai aliejai, vaškai, riebalai, pusiau kieti ir skysti daugiaatomiai alkoholiai, tačiau, pri-klausomai nuo aktyvios medžiagos savybių, kapsulėms minkštame želatine užpildai yra visiškai nereikalingi. Tirpalų ir sirupų gamyboje užpildais naudojami, pa-vyzdžiui, vanduo, daugiaatomiai alkoholiai, sacharozė, invertuotas cukrus ir gliukozė; tirpaluose, skirtuose injekcijoms, naudojami, pavyzdžiui, vanduo, alkoholiai, daugiaatomiai alkoholiai, glicerinas ir augaliniai aliejai, o žvakutės užpildais naudojami natūralūs arba sukietinti aliejai, vaškai, riebalai ir pusiau kieti arba skysti daugiaatomiai alkoholiai. Kartu su šiais užpildais, farmaciniai preparatai dar gali turėti kon-servantų, tirpimo agentų, stabilizatorių, vilgalų, emulgatorių, saldinančių medžiagų, dažų, aromatinių me-džiagų, druskų, skirtų osmozinio slėgio pakeitimui, buferinių tirpalų, padengimo priemonių arba antiok-sidantų .

[0073] Kovojant su aukščiau paminėtomis ligomis, aktyvios me-džiagos gali keistis plačiose ribose ir, be abejo, bet kuriuo atskiru atveju turi būti pritaikytas prie indi-vidualių sąlygų. Šiaip jau, vartojant oraliniu būdu, reikėtų nustatyti dozę maždaug nuo 0,1 iki 20 mg/kg, geriausia maždaug nuo 0,5 iki 4 mg/kg per dieną su-augusiam, tačiau nurodyta viršutinė riba gali būti viršyta, jeigu bus nustatyta, kad taip pasielgti yra tikslinga.

[0074] Tirpalas, paruoštas iš 2,43 g//l-/N-(p-amidinobenzoil) - glicil/-4-piperidinil/oksiacto rūgšties tret.-butilo esterio ir 15 ml dichlormetano/trifluoracto rūgšties (1:1) laikomas 5 vai. kambario temperatūroje. Išgarinus tirpiklius ir atlikus chromatografiją (sililintas silikagelis LiChroprep RP-18, metanolio-vandens gradientas), gauna 0,46 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-glicil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato, lydimosi temperatūra 233-236°C. MS (PAB): 363 (M + H)⁺.

[0075] a) Į tirpalą, paruoštą iš 50 g 4-hidroksipiperidino, ištirpinto 500 ml dichlormetano, 0°C temperatūroje

[0076] eilės tvarka prideda 69,1 ml trietilamino ir 70,2 ml

[0077] chlorskruzdžių rūgšties benzilo esterio. Susidariusią suspensiją maišo per naktį kambario temperatūroje ir po to filtruoja. Liekaną, gautą sukoncentravus filtratą, tirpina etilo acetate, plauna vandeniniu ir 1 N druskos rūgštimi, džiovina ir koncentruoja. Gauna 73,6 g N-benziloksikarbonil-4-hidroksipiperidino, Rf = 0,56 (etilo acetatas/metanolis 9:1) . MS (EI) : 235 (M+) . b) Į tirpalą, paruoštą iš 30,1 g N-benziloksikarbonil-4-hidroksipiperidino, ištirpinto 300 ml toluolo,

[0078] prideda 28 ml bromacto rūgšties tret.-butilo esterio ir 1,4 g tetra-n-butilamoniohidrosulfato, ištirpinto 10 ml vandens. Po to sulašina 125 g natrio hidroksido tirpalo 125 ml vandens. Maišo per naktį, po to organinius ekstraktus atskiria, džiovina ir koncentruoja. Išdžio-vinus gauna 34,1 g N-benziloksikarbonil-4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/piperidino, Rf = 0,76 (etilo acetatas ) .

[0079] c) Į tirpalą, paruoštą iš 30 g produkto b) , ištirpinto 50 ml etanolio, prideda 1,5 g Pd/C (10 %) . Reakcijos

[0080] mišinį hidrina kambario temperatūroje. Po to katalizatorių nufiltruoja, plauna etanoliu, o filtratą koncentruoja. Gauna 17,4 g 4-piperidiniloksiacto rūgš-ties tret.-butilo esterio, Rf = 0,14 (etilo acetatas/metanolis 1:1) . MS (EI) : 125 (M+) .

[0081] d) Reaguojant 5,8 g (su 5,4 g aktyvuoto CDMT) Z-glicino su 6,0 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo

[0082] esterio ir 6,3 ml N-metilmorfolino, ištirpinto dichlormetane, gauna 10 g benzil-///4-(t-butoksikarbonil)metoksi/piperidinil/karbonil/metil/karbamato. MS (EI) : 406 (M+) . e) Hidrogenolizuojant 10 g produkto d) , ištirpinto 200 ml etanolio, esant 0,7 g Pd/C (10 %) ir 1,4 ml acto rūgš-ties, chromatografijos ant silikagelio metodu (etilo acetatas/metanolis 1:1) išskiria 4,1 g 1-/(l-glicil-4-piperidinil)oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS (EI): 273 (M + H) + . IR : 1746 cm"1. f) Į mišinį, paruoštą iš 4,1 g produkto e) ir 0,03 g tetra-n-butilamoniohidrosulfato, ištirpinto 210 ml dichlormetano/natrio hidrokarbonato sotaus tirpalo (4:3), kambario temperatūroje prideda 2,95 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido (gauto iš p-amidinobenzoinės rūgšties, jai reaguojant su tionilo chloridu tetrahidrofurane, esant dimetilformamidui) . Maišo per naktį, po to praskiedžia dichlormetanu ir vandeniu. Pridedant 1 N natrio šarmo, nustato pH 9-10, organinius ekstraktus atskiria, džiovina ir koncentruoja. Išdžiovinus gauna 2,43 g pageidaujamos pradinės medžiagos. MS (FAB) : 419 (M + H) +.

[0083] A). Tirpalas, paruoštas iš 1,5 g //1-/N-(p-cianben-zoil)-glicil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties metilo esterio, ištirpinto 215 ml piridino/trietilamino (40:3), prisotinamas sieros vandeniliu ir laikomas 24 valandas kambario temperatūroje. Pašalinus tirpiklį, liekana tirpinama etilo acetate ir plaunama prisotintu natrio chlorido tirpalu. Organiniai ekstraktai džio-vinami ir koncentruojami. Po to liekana gryninama chro-matografiškai ant silikagelio (nešėjas - etilo acetatas, vėliau - etilo acetatas/metanolis) ir išskiriama 1,34 g //l-/N-/p-(tiokarbamoil)benzoil/glicil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties metilo esterio. MS (FAB): 394 (M + H)⁺. B) . Reaguojant 1,25 g ankstesnės stadijos produkto su 7,5 ml metilo jodido 150 ml acetono reakcijos mišinio virimo temperatūroje, nufiltravus ir pašalinus tirpikli, gauna 1,65 g //l-/N-/p-/l-(tetiltio)formimi-doil/benzoil/glicil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties metilo esterio hidrojodido. MS (FAB) : 408 (M+H)^+. C). Amonolizuojant 1,5 g produkto B), esant 0,32 g amonio acetato, 100 ml metanolio reakcijos mišinio virimo temperatūroje gauna 0,76 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)glicil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties metilo esterio hidrojodido. Lydimosi temperatūra 103-105°C. MS (FAB): 377 (M+H) + .

[0084] a). Esterifikuojant 4-piperidiniloksiacto rūgšties tri-fluoracetatą (gautą pavyzdžio lc produktą paveikus trifluoracto rūgštimi dichlormetane) metanolyje, esant tionilo chloridui, gaunamas 4-piperidiniloksiacto rūgš-ties metilo esterio hidrochloridas. MS (EI):173 (M)^+. b) . Reaguojant 1,35 g produkto a) su 1,18 g N-(p-cianbenzoil)glicino (gauto veikiant gliciną p-cianbenzoilo chloridu prisotintame natrio hidrokarbonato tirpale), esant HBTU ir N-metilmorfolinui dimetilformamide, chromatografijos ant silikagelio metodu (etilo acetatas/metanolis 9:1 iki 1:1) gauna 1,66 g pageidaujamo pradinio nitrilo. MS (EI) : 359 (M)⁺.

[0085] Iš 13 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, veikiant ji, trifluoracto rūgštimi dichlormetane (kaip aprašyta 1 pavyzdyje), perkristalinus iš metanolio/dietilo eterio gauna 8,9 g //l-/N-/p-amidinobenzoil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 120°C (skyla). MS (FAB) : 377 (M+H)⁺. /a/p20 = + 24,7°C (0 = 0,7, vanduo).

[0086] a) Reaguojant 18 g Z-L-alanilo su 17,4 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio ir po to hidrogenolizuojant gautą produktą kaip pavyzdyje 1 d) ir e), gauna 15,8 g 1-/(l-L-alanil-4-piperidinil)oksiacto rūgšties tert.-butilo esterio acetato. Lydimosi temperatūra 93-96°C. /a/p²⁰ = + 2,0° (c = 1,0, metanolis) . b) Reaguojant 4,7 g produkto a) su 3,4 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido, kaip pavyzdyje 1 f) ,

[0087] gauna 4,2 g pageidaujamos pradinės medžiagos. MS(EI): 433 (M+H)⁺.

[0088] Iš 0,3 g //l-/N-/p-/N-(t-butoksikarbonil)amidinobenzoil/-D-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, analogiškai kaip 1 pavyzdyje, gauna 0,1 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-D-alanil/-4-piperidinil/oksiacto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi tem-peratūra 115°C (skyla). /a= 27,5° (c = 0,8, vanduo). MS (FAB) : 377 (M+H)⁺.

[0089] a) Reaguojant 3 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 2,43 g Z-D-alanilo, kaip aprašyta pavyzdyje 1 d), chromatografijos ant silikagelio metodu (nešėjas - etilo acetatas/heksanas 1:1) gauna 3,1 g benzil-/(R)-l-//4- / (t-butoksikarbonil)metoksi/piperidinil/karbonil/etil/karbamato. MS(EI): 420 (M)⁺. b) Hidrogenolizuoj ant 3,1 g produkto a), kaip aprašyta pavyzdyje le) , gauna 2,5 g 1-/(l-D-alanil-4-piperidinil)oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato. MS (EI) : 215 (M-C3H5NO) . c) Reaguojant ankstesnės stadijos 1 g produkto su 0,66 g amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido dimetilformamide, esant trietilaminui, ir vėliau veikiant di-t-butil-dikarbonatu, chromatografijos ant silikagelio metodu (nešėjas - dichlormetanas/metanolis 20:1) gauna 0,3 g pageidaujamos pradinės medžiagos. MS(FAB): 533

[0090] (M+H)^+.

[0091] Hidrolizuoj ant 1,6 g //1-/N-/(5-amidino-2-piridil)kar-bonil/-L-alanil/-4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio prisotintoje chloro vandeniliu ledinėje acto rūgštyje, chromatografija ant silikagelio grupes turinčio silikagelio RP-18 ir po to perkristalinus iš tetrahidrofurano/etilo acetato gauna 0,15 g //l-/N-/(5-amidino-2-piridi1)karbonil/-L-alanil/-4-piperidinil/oksiacto rūgšties. Lydimosi temperatūra: virš 200°C (skyla)> MS(FAB): 378 (M+H)⁺.

[0092] a) Reaguojant 2,4 g 1-/(l-L-alanil-4-piperidinil)oksi/- acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato (3a pavyzdys) su 1,0 g 5-cian-2-pikolino rūgšties pagal ld) pavyzdi, gauna 2,43 g //1-/N-/(5-cian-2-piridil)karbo-nil/-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 417 (M+_H)⁺. b) Toliau veikiant ankstesnės stadijos 2,4 g produkto, kaip aprašyta 2 A) B) C) pavyzdžiuose, gauna 2 g pageidaujamos pradinės medžiagos. Lydimosi temperatūra 142-145°C. MS(FAB): 434 (M+H)⁺.

[0093] Iš 1 g //1-/N-(p-amidinobenz-oil)-L-valil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato, analogiškai kaip 1 pavyzdyje, perkristalinus iš etilo acetato gauna 0,8 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-valil/- 4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 210-211°C. MS(FAB): 405 (M+H) + . /a/^® = + 32,6° (c = 0,8, vanduo).

[0094] a) Reaguojant 2,5 g Z-L-valino su 2 g 4-piperi-diniloksi-acto rūgšties tret.-butilo esterio, kaip

[0095] aprašyta pavyzdyje 2b), gauna 4 g //1-/N-/(benziloksi)karbonil/-L-valil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgš-ties tret.-butilo esterio. MS(EI): 449 (M+H)⁺.

[0096] b) Analogiškai, kaip pavyzdyje le, tačiau nepridedant acto rūgšties, iš 1,9 g produkto, gauto pagal pavyzdi, 6a), gauna 1,4 g l-/l-L-valil-4-piperidinil) oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio MS(EI): 315

[0097] (M+H)⁺.

[0098] c) Analogiškai kaip pavyzdyje lf) , iš 3,3 g produkto, gauto pagal pavyzdį 6b) ir 2,5 g p-amidinobenzoilo

[0099] chlorido hidrochlorido, chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis/acto rūgštis 95:4:1) ir perkristalinus iš dietilo eterio gauna 1,1 g pageidaujamo pradinio acetato. Lydimosi temperatūra 179-182°C. MS(FAB): 461 (M+H)⁺.

[0100] Iš 1,5 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-leucil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato analogiškai kaip 1 pavyzdyje, perkristalinus iš etilo acetato/dietilo eterio, gauna 1,1 g //1-/N-(p-amidinobenzoil) -L-leucil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgš-ties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 216-218°C. MS(FAB): 419 (M+H) + . /a/D20 = + 22,5° (c = 0,8, vanduo).

[0101] a) Reaguojant 2,6 g Z-L-leucino su 2 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio, kaip aprašyta

[0102] pavyzdyje 1 d), gauna 4,1 g //1-/N-/(benziloksi)kar-bonil/-L-leucil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 463 (M-H)".

[0103] b) Analogiškai kaip pavyzdžiuose 6b) ir lf) , iš 4,1 g produkto, gauto pagal pavyzdi, 7a) , chromatografija

[0104] (silikagelis; dichlormetanas/metanolis/acto rūgštis 95:4:1) ir perkristalinus iš dietilo eterio gauna 1,5 g pageidaujamo acetato. Lydimosi temperatūra 120-129°C (skyla). MS(FAB): 475 (M+H)⁺.

[0105] Iš 1,4 g //1 — / (p-amidino-N-metilbenzamido)acetil/-4-piperidinil/oksiacto rūgšties tret.-butilo esterio acetato analogiškai kaip 1 pavyzdyje, perkristalinus iš dietilo eterio, gauna 0,9 g //1—/(p-amidino-N-metil-benzamido) acetil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 134 - 135°C. MS(FAB) : 377 (M+H) + .

[0106] a) Reaguojant 2,0 g Z-sarkozin-N-hidroksisukcinimido eterio su 1,3 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio, esant trietilaminui, tetrahidrofurane, gauna 2,1 g benzil/-4-///(t-butoksikarbonil)metoksi/piperidino/karbamoil/metil/metilkarbamato. MS(FAB): 421

[0107] (M+H)⁺.

[0108] b) Analogiškai kaip pavyzdžiuose 6 b) ir 1 f) , iš 4 g produkto, gauto pagal pavyzdį 8 a) , chromatografija

[0109] (silikagelis; dichlormetanas/metanolis/acto rūgštis 93:5:2) ir perkristalinus iš dietilo eterio gauna 1,5 g pageidaujamo acetato. Lydimosi temperatūra 188-189°C. MS(FAB): 432 (M+H)⁺.

[0110] Iš 5,4 g //1-/N^2-(p-amidinobenzoil)-N^5-(t-butoksikarbonil) -L-ornitil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, analogiškai kaip pavyzdyje 1, gauna 4,9 g //1-/N^2-(p-amidinobenzoil)-L-ornitil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. MS (FAB) : 420 (M+H) + . /a/p²⁰ = + 4,5°(c = 0,8, MeOH) .

[0111] a) Reaguojant 6 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 10,2 g N^2-Z-N^5-Boc-L-ornitino, kaip aprašyta pavyzdyje 1 d), chromatografija ant silikagelio (nešėjas - etilo acetatas/heksanas 1:1) gauna 11 g //1-/N 2 -(benziloksikarbonil)-N ^-(t-butoksikarbonil )-L-ornitil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 564 (M+_H)⁺. b) Hidrogenolizuoj ant 11 g produkto a) , kaip aprašyta pavyzdyje 1 e), gauna 9 g //1-/N^5-(t-butoksikarbonil)-L-ornitil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato. MS(FAB): 430 (M+H)⁺. c) Reaguojant 9 g produkto b) su 4,4 g p-amidinobenzilo chlorido hidrochlorido, kaip aprašyta 1 f) pavyzdyje,

[0112] gauna 5,7 g pageidaujamos pradinės medžiagos. MS(FAB): 576 (M+H) + .

[0113] Iš 0,54 g //1-/N -/p-N-(t-butoksikarbonil)amidinobenzoil/-N6- (t-butoksikarbonil) /-L-lizil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, analo-giškai kaip pavyzdyje 1, gauna 0,35 g //1-/N - (p-amidinobenzoil)/-L-lizil/-4-piperidiniloksi/-acto rūgš-ties trifluoracetato. MS (FAB) : 434 (M+H) + . /a/D^=12,4°

[0114] a) Reaguojant 2 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 2, 8 g N 2 -Z-N 6-Boc-L-lizino, kaip ap-rašyta pavyzdyje 1 d), chromatografija ant silikagelio (nešėjas - etilo acetatas/heksanas 1:1) gauna 2,6 g //1-/N2- (benziloksikarbonil)-N6-(t-butoksikarbonil)-L-lizil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 578 (M+_H)⁺. b) Hidrogenolizuojant 2,6 g gauto produkto, kaip apra-šyta pavyzdyje 1 e), gauna 2 g //1-/N^6-(t-butoksikarbonil)-L-lizil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato. MS(FAB): 444 (M+H)". c) Reaguojant 2 g ankstesnės stadijos produkto su 1 g pamidinobenzoilo chlorido hidrochlorido, kaip aprašyta

[0115] pavyzdyje 4 c), chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis 20:1) gauna 1,95 g pageidaujamos pradinės medžiagos. MS(FAB): 690 (M+H)⁺.

[0116] Iš 0,4 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-2-fenilglicil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato, analogiškai kaip pavyzdyje 1, gauna 0,25 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-fenilglicil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi tem-peratūra virš 250°C (etilo acetatas/dietilo eteris 1:1). MS(FAB): 439 (M+H) + . /a/p²⁰ = + 6,5° (c = 0,6 MeOH) .

[0117] a) Reaguojant 1,85 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 3,5 g Z-a-fenilglicil-N-hidroksisukcinimido eterio, kaip aprašyta pavyzdyje 8 a) , chromatografija ant silikagelio (nešėjas - petrolio eteris.dietilo eteris 1:1) gauna 3,8 g //1—(N-benziloksikarbonil-a-fenilglicil)-4-piperidinil/oksi/-acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 483 (M+H)⁺. b) Hidrogenolizuojant 4,7 g gauto produkto, kaip ap-rašyta pavyzdyje 6 b), gauna 3,2 g //l-(a-fenilglicil)-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 349 (M+H)⁺. c) Reaguojant 3,2 g ankstesnės stadijos produkto su 2,2 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido, kaip aprašyta

[0118] pavyzdyje 1 f) , chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis/acto rūgštis 95:5:2), gauna 0,4 g pageidaujamo acetato. Lydimosi temperatūra 207-220°C (etilo acetatas, skyla). MS(FAB): 495 (M+H)⁺.

[0119] Iš 0,5 g //1-/1-(p-amidinobenzoil)-2-metil-a-prolil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato, analogiškai kaip pavyzdyje 1, gauna 0,14 g //1 — /1 —(p-amidinobenzoil)-2-metil-a-prolil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi tem-peratūra 219-220°C (acetonitrilas). MS(FAB): 417 (M+H)^+. /a/_D²⁰ = + 17,1° (c = 0,9, MeOH) .

[0120] a) Reaguojant 2-metil-a-prolino hidrobromidui su p-cianbenzoilo chloridu, analogiškai kaip pavyzdyje 2 b) ,

[0121] gauna 1-(p-cianbenzoil)-2-metil-a-proliną. MS(EI): 213

[0122] b) Reaguojant 1,67 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 0,8 g 1-(p-cianbenzoil)-2-metil-a-prolino rūgšties chloranhidrido (gauto anks-tesnės stadijos produktą veikiant tionilo chloridu) gauna 0,89 g //1 — /1— (p-cianbenzoil)-2-metil-a-prolil/- 4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. Lydimosi temperatūra 180-182°C (etilo acetatas). c) Toliau veikiant 0,89 g produkto b), kaip aprašyta pavyzdžiuose 2 A) B) C), chromatografija (sililines

[0123] grupes turintis silikagelis RP-18; vanduo/metanolis 9:1) gauna 0,59 g pageidaujamo acetato. Lydimosi tem-peratūra 191-192°C (etilo acetatas, skyla). MS(FAB): 473 (M+H) + .

[0124] Iš 2,5 g //1-/N- (p-amidinobenzoil)-3-fenil-oc-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato, analogiškai kaip pavyzdyje 1, gauna 1,9 g //1 — /N-(p-amidinobenzoil)-3-fenil-a-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi tem-peratūra 234-235°C (etilo acetatas) . /a/ = + 17,9°

[0125] a) Reaguojant 2,15 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 3,0 g Z-a-fenilalanino, kaip

[0126] aprašyta pavyzdyje 2 b), gauna 4,8 g //1— (N-benziloksikarbonil-3-fenil-a-alanil)-4-piperidinil/oksi/acto

[0127] b) Hidrogenolizuojant 4,8 g gauto produkto, kaip ap-rašyta pavyzdyje 6 b) ir po to veikiant 2,0 g p-amidino

[0128] benzoilo chlorido hidrochlorido, kaip aprašyta pavyzdyje 1 f) , chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis/acto rūgštis 22:2:1) gauna 2,5 g pageidaujamo acetato. Lydimosi temperatūra 176-178°C (dietilo eteris). MS(FAB): 509 (M+H)⁺.

[0129] Iš 2,5 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-3-(p—t-butoksife-nil)-a-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato, analogiškai kaip pavyzdyje 1, chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18, vandens/metanolio gradientas) gauna 1,0 g / /1 — /N-(p-amidinobenzoil)-a-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 125-130°C (etilo acetatas, skyla). MS(FAB): 469 (M+H)⁺.

[0130] a) Reaguojant 2,15 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 3,71 g N-Z-(OtBU)-a-tirozino,

[0131] kaip aprašyta pavyzdyje 2 b), chromatografija (silikagelis; dietilo eteris/petrolio eteris 1:1) gauna 4,8 g //1-/N-(benziloksikarbonil)-3-/p-(t-butoksifenil)/-a-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. Lydimosi temperatūra 96°C (dietilo eteris). MS (EI) : 417 (M-C₇H₇-C₄H₈)⁺, /a/_D²⁰ = + 5,4° (c=0,8, CH3OH) .

[0132] b) Hidrogenolizuojant 4,8 g ankstesnės stadijos produkto, kaip aprašyta pavyzdyje 6 b), ir po to veikiant

[0133] 1,5 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido, kaip pavyzdyje 1 f), chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis/acto rūgštis 22:2:1) gauna 2,6 g pageidaujamo acetato. Lydimosi temperatūra 170-172°C (dietilo eteris). MS(FAB): 581 (M+H)^+.

[0134] Kaip šalutini, 14 pavyzdyje aprašytos chromatografijos produktą išskiria 0,09 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-a-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties metilo esterio trifluoracetatą. Lydimosi temperatūra 189-190°C (etilo acetatas). MS(FAB): 483 (M+H)⁺.

[0135] Reaguojant 0,58 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)- a-tirozil/- 4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato (14 pavyzdys) su chloraminu T, esant natrio jodido, iš-tirpinto vandenyje/dimetilformamide 8:1, chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18; vandens/acetonitrilo gradientas) gauna 0,04 g //1-/N-(p-amidinobenzoil/-3-(4-hidroksi-3-jodfenil)-a-alanil/- 4-piperidinil/oksi/acto rūgšties. Lydimosi temperatūra 230°C (vanduo, skyla). MS(FAB): 595 (M+H)^+.

[0136] Iš 16 pavyzdyje aprašyto reakcijos mišinio papildomai išskiria 0,09 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-3-(4-hidroksi-3,5-dijodfenil)- a-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties. Lydimosi temperatūra 220-221°C (vanduo, skyla) . MS(FAB): 720 (M+H)⁺.

[0137] Iš 1,3 g //l-/3-t-butoksi-N-/p-/N-(t-butoksikarbonil)amidino/benzoil/-a-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, paveikus chloro vandeniliu ledinėje acto rūgštyje, chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18; metanolio/vandens gradientas) gauna 0,45 g //l-/3-acetoksi-N-(p-amidinobenzoil)-a-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties hidrochlorido. /a- + 0,9° (c=l,0, MeOH) . MS(FAB) : 435 (M+H)^+.

[0138] a) Reaguojant 7,5 g Z-L-Ser(tBu)-OH su 7,0 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio ir po to hidrogenolizuojant gautą produktą, kaip aprašyta pa-vyzdžiuose 1 d) e), gauna 10,6 g //1—(3-t-butoksi-L-alanil)-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio acetato. Lydimosi temperatūra 76-78°C. MS(FAB): 359 (M+H)⁺. b) Reaguojant 9,9 g ankstesnės stadijos produkto su 5,2 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido dimetilformamide, esant trietilaminui, ir po to veikiant di-t-butil-dikarbonatu, chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis 20:1, vėliau etilo acetatas/heksanas 3:1) gauna 4,3 g //l-/3-t-butoksi-N-/p-/N-(t-butoksikarbonil)amidino/benzoil/-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. Lydimosi temperatūra 162-165°C. MS(FAB): 605 (M+H)⁺.

[0139] Iš 1,0 g //l-/3-t-butoksi-N-/p-/N-(t-butoksikarbonil)amidino/benzoil/-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio (18 pavyzdys), analo-giškai kaip pavyzdyje 1, chromatografija (siiilines grupes turintis silikagelis RP-18; vanduo) gauna 0,58 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-seril/-4-piperidinil/oksi/ acto rūgšties trifluoracetato. /WD 20 = +17,6° o (c=l,0, vanduo). MS(FAB): 393 (M+H)^+.

[0140] Iš 5 g L-N-(p-amidinobenzoil)—3 — //4 — /(t-butoksikarbonil)-metoksi/piperidinil/karbonil/- p-alanino tret.-butilo esterio, analogiškai kaip pavyzdyje 1, perkristalinus iš etilo acetato/tetrahidrofurano, gauna 2,0 g L-N-(p-amidinobenzoil)-3-//4-(karboksimetoksi)piperidino/karbonil/- p-alanino trifluoracetato, lydimosi temperatūra 145-150°C. MS (FAB) : 421(M+H)\

[0141] a) Reaguojant 11 g Z-L-Asp (O-tBu) -OH su 7,0 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio, kaip aprašyta pavyzdyje 2 b), gauna 16 g L-N-(benziloksikarbonil)-3-//4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/piperidi-no/karbonil/-p-alanino tret.-butilo esterio. MS(FAB): 521 (M+H) +. b) Hidrogenolizavus 17 g ankstesnės stadijos produkto, kaip aprašyta pavyzdyje 6 b), išskiria 11 g L-3-//4-(t-butoksikarbonil)metoksi.piperidino/karbonil/- p-alanino tret.-butilo esterio. MS(FAB): 387 (M+H)⁺. c) Reaguojant 11 g ankstesnės stadijos produkto su 6,9 g p-amidinobenzoilo hidrochlorido, kaip aprašyta pavyzdyje 1, chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis 9:1) išskiria 10,2 g pageidaujamos pra-dinės medžiagos. MS(FAB):533 (M+H)^+.

[0142] Iš 0,5 g //1-/N- (p-amidinobenzoil)-4-t-butoksi-L-glu-atamoil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, analogiškai kaip pavyzdyje 1, perkristalinus iš etilo acetato gauna 0,25 g //1-/N-(p-amidinobenzoil) -L-a-glutamoil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgš-ties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 105-108°C. /a/_D²⁰ = +6,9° (c=0,8, metanolis). MS(FAB): 435 (M+H)\

[0143] a) Reaguojant 11 g Z-L-Glu (Ot-Bu) -OH su 7,0 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio, kaip aprašyta pavyzdyje 1 d), gauna 15,4 g //l-/N-(benziloksikarbonil)-4-t-butoksi-L-glutamoil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 535 (M+H) +. b) Hidrogenolizavus 15,4 g ankstesnės stadijos produkto, kaip aprašyta pavyzdyje 6 b), gauna 7,5 g //1 —

[0144] (4-t-butoksi-L-glutamoil/-4-piperidinil/oksiacto rūgš-ties tret.-butilo esterio acetato. MS(FAB): 401 (M+H)⁺.

[0145] c) Reaguojant 7,5 g ankstesnės stadijos produkto su 3,9 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochlorido, kaip aprašyta

[0146] pavyzdyje 1 f), gauna 6,9 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-4-t-butoksi-L-glutamoil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgš-ties tret.-butilo esterio. MS(FAB): 547 (M+H)⁺.

[0147] Iš 2 g //(R/S)-1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-3-piperidinil/metoksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, analogiškai kaip pavyzdyje 1, gauna 0,6 g //(R/S)-l-/N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-3-piperidinil/metoksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 87- 90°C ( etilo acetatas). MS( FAB) : 391( M+ H)+.

[0148] a) Iš rac^X) - 3-( hidroksimetil) piperidino, analogiškai kaip pavyzdyje 1 a) , gauna rac- N- benziloksikarbonil- 3-( hidroksimetil)- piperidiną. MS( EI) : 249 ( M)+. b) Iš produkto a) , analogiškai kaip pavyzdyje 1 b) , gauna benzil- rac- 3-// ( t- butoksikarbonil) metoksi/ metil/-

[0149] c) Produktas b), analogiškai kaip pavyzdyje 1 c), hidrinamas iki rac-( 3- piperidinilmetoksi) acto rūgšties

[0150] d) Reaguojant produktui c) su Z- L- alaninu, kaip pavyzdyje 1 d), gaunamas benzil- ( }— 1 — // ( R/ S)- 3-/( t-butoksikarbonil)- metoksi/ piperidino/ etil/ karbamatas. MS ( EI) : 434 ( M) + . e) Hidrinant produktą d), kaip pavyzdyje 1 e), gaunamas //( R/ S)- l- L- alanil- 3- piperidinil/ metoksi/ acto rūgšties

[0151] f) Reaguojant produktai e) su p- amidinobenzoilo chlorido hidrochloridu, kaip pavyzdyje 1 f) , chromatografija ( sililines grupes turintis silikagelis RP- 18) gaunama pageidaujama pradinė medžiaga. MS( FAB) : 447

[0152] Iš 2, 7 g // 1-/ N-( p- amidinobenzoil)- L- alanil/- 4-( a, a, a-trifluor- m- tolil)- 4- piperidinil/ oksi/ acto rūgšties ^x) rac - racematas (Vert. pastaba) tret.-butilo esterio, analogiškai kaip pavyzdyje 1, gauna 0,7 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil-4-( a, a, a-trifluor-m-tolil)-4-piperidinil/oksi/acto rūgš-ties. Lydimosi temperatūra virš 280°C (vanduo/metanolis). MS(FAB): 521 (M+H)⁺.

[0153] a) Iš 4 -(3-trifluormetil)fenil)piperidin-4-olio, analo-giškai kaip pavyzdyje 1 a), gaunamas benzil-4-hidroksi-4-( a, a, a-trifluor-m-tolil)-1-piperidin-karboksilatas. MS(EI): 379 (M)⁺. b) Iš produkto a) analogiškai kaip pavyzdyje 1 b), gaunamas benzil-4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/-4-( a, a, a-trifluor-m-tolil)-1-piperidinkarboksilatas . MS(FAB) : 494

[0154] (M+H)⁺.

[0155] c) Hidrinant produktą b), kaip pavyzdyje 1 e), gaunamas / / 4 —( a, a, a-trifluor-m-tolil-4-piperidinil/oksi/acto rūgš-ties tret.-butilo esterio acetatas. MS(EI): 227 (M-^C6^H_I2⁰3)^+. d) Reaguojant produktai c) su Z-L-alaninu, kaip pavyzdyje 1 a), gaunamas benzil-/(S)-1-//4-/(t-butoksikarbonil )metoksi/-4-( a, a, a-trifluor-m-tolil)-1-piperidinil/karbonil/etil/karbamatas. MS(FAB): 565 (M+H)⁺. e) Hidrinant produktą d) , kaip pavyzdyje 1 e), gaunamas l-//L-alanil-4-( a, a, a-trifluor-m-tolil) -4-piperidinil/ oksi/-acto rūgšties tret.-butilo esterio acetatas. MS(EI): 415 (M-CH3) + . f) Reaguojant produktui e) su p-amidinobenzoilchlorido hidrochloridu, kaip pavyzdyje 1 f) , gaunama pageidaujama pradinė medžiaga. MS(EI): 577 (M+H)⁺.

[0156] Tirpalas, paruoštas iš 150 mg tret.-butil-//l-/l-(p-amidinobenzoil)-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acetato, ištirpinto 10 ml dichlormetano, ir 10 ml trifluoracto rūgšties, maišomas 2 vai. kambario temperatūroje ir iš-garinamas. Liekana suspenduojama eteryje ir filtruojama per siurbiamąjį, piltuvą. Gauna 141 mg //l —/l— ( p— amidinobenzoil)-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgš-ties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 234-236°C.

[0157] a) Mišinys, paruoštas iš 4,97 g cianobenzoinės rūgšties chloranhidrido, 3,45 g L-prolino, 0,73 g tetrametilamonio sulfato, 300 ml dichlormetano ir 150 ml 5 %-nio natrio bikarbonato tirpalo maišomas 48 valandas. Vandeninė fazė parūgštinama 3 g sieros rūgšties ir esktrahuojama etilo acetatu. Etilo acetato fazė pra-plaunama prisotintu natrio chlorido tirpalu, džiovinama ir išgarinama. Chromatografija ant silikagelio (RP-18), nešėju naudojant vandenį, gauna 3,70 g 1-(p-cia-nobenzoil)-L-prolino. Lydimosi temperatūra 80-85°C. b) Reaguojant 250 mg 1-(p-cianobenzoil)-L-prolino su 215 mg 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo

[0158] esterio, chromatografija ant silikagelio (nešėjas etilo acetatas/metanolis 98:2) gauna 300 mg t-butil//1-/1-(p-cianobenzoil)-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/

[0159] c) Reaguojant 1 g ankstesnės stadijos produkto, kaip pavyzdyje 2 A)B)C), iš pradžių susidaro t-butil-//l-/l-(p-(tiokarbamoil)benzoil/-L-prolil/-4-piperidinil/ok-si/acetatas, kurio lydimosi temperatūra 108-110°C, po to - t-butil-//l-/l-/p-/1-metiltio/formimidoil/ben-zoil/-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acetatas, kurio lydimosi temperatūra 132-133°C, ir pagaliau 72 mg pageidaujamo acetato, lydimosi temperatūra 100°C (skyla).

[0160] Analogiškai, kaip 24 pavyzdyje, iš 150 mg t-butil-//-l-/(4R)-1-(p-amidinobenzoil)-4-benziloksi-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/-acetato hidrochlorido chromatografija ant silikagelio (RP-18; nešėjas - vanduo/tetrahid-rofuranas 95:5) gauna 72 mg / /1 — /(4R)-1-(p-amidinobenzoil )-4-benziloksi-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/-acto

[0161] a) Į tirpalą, paruoštą iš 905 mg (4R)-hidroksi-L-prolino metilo esterio ir 828 mg 4-cianobenzoilo chlorido 50 ml dichlormetano, prideda 1,46 ml trietilamino, Sumaišius tirpalus plaunamas prisotintu natrio chlorido tirpalu, džiovinamas ir išgarinamas. Liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio (etilo acetatas/ heksanas 5:1), gauna 810 mg (4R)-1-(p-cianobenzoil)-4-hidroksi-L-prolino. Lydimosi temperatūra 101-102°C. b) Į tirpalą, paruoštą iš 730 mg ankstesnės stadijos - produkto ir 600 1 benziltrichloracetimidato 5 ml cik-loheksano ir 5 ml dichlormetano, sulašina 40 1 tri-fluormetansulforūgšties. Susidariusios nuosėdos filt-ruojamos per siurbiamąjį piltuvą, filtratas plaunamas 5 % natrio bikarbonato tirpalu, džiovinamas ir išgari-namas. Liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio (etilo acetatas), gauna 940 mg (4R)-4-benziloksi-1-(p-cianobenzoil)-L-prolino metilo esterio. MS: 305 (M-59). c) 880 mg ankstesnės stadijos produkto ir 1,2 ml 2 N ličio hidroksido tirpalo maišo 10 ml metanolio. Pa-šalinus metanoli,, vandeninė liekana parūgštinama 2,4 ml 1N druskos rūgštimi ir ekstrahuojama etilo acetatu. Organinė fazė džiovinama ir išgarinama, gauna 470 mg (4R)-4-benziloksi-l-(p-cianobenzoil)-L-prolino. Lydimosi temperatūra 58-60°C. d) 450 mg produkto c) reaguoja, esant HBTU, su 280 mg 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio.

[0162] Liekana ištirpinama etilo acetato ir etilo acetato fazė plaunama 5 % natrio bikarbonato, 1N kalio bisulfato ir prisotintu natrio chlorido tirpalais, džiovinama ir iš-garinama. Liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio (dichlormetanas/metanolis 98:2), gauna 500 mg t-butil-//l-/ (4R)-4-benziloksi-l-(p-cianobenzoil)-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acetato. MS: 548 (M-H) . e) Veikiant 400 mg ankstesnės stadijos produkto, kaip pavyzdyje 2 A)B)C), gauna 177 mg pageidaujamo acetato.

[0163] Tirpalas, paruoštas iš 1,60 g t-butil-//1-/(4R)-1-(p-amidinobenzoil)-4-hidroksi-L-prolil/-4-piperidinil/ok-si/acetato, 20 ml dichlormetano ir 20 ml trifluoracto rūgšties, maišomas 2 valandas kambario temperatūroje ir išgarinamas. Liekaną ištirpina etanolyje ir sumaišo su eteriu. Filtruoja per siurbiamąjį piltuvą, nuosėdas džiovina. Gauna 1,25 g //1 — /(4R)-1-(p-amidinobenzoil)-4-hidroksi-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. Lydimosi temperatūra 220°C (skyla).

[0164] a) Reaguojant 14,78 g (4R)-1-(benziloksikarbonil)-4-hidroksi-L-prolino su 12,0 g 4-piperidiniloksiacto

[0165] rūgšties tret.-butilo esterio, chromatografija ant si-

[0166] likagelio (etilo acetatas/metanolis 95:5) gauna 17,83 g t-butil-//l-(4R)-1- (benziloksikarbonil)-4-hidroksi-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acetato. MS: 463(M-H) . b) Hidrinant 17,0 g ankstesnės stadijos produkto etanolyje, esant 2,0 g Pd/C (10 %) , nufiltravus katali-zatorių ir sukoncentravus gauna 11,06 g t-butil-//l-/(4R)-4-hidroksi-L-prolil/-4-piperidinil/oksi/acetato.

[0167] c) Reaguojant 2,0 g ankstesnės stadijos produkto su 1,34 g p-amidinobenzoilo chlorido, analogiškai kaip pavyzdyje 1 f), gauna 1,95 g pageidaujamo acetato.

[0168] Tirpalas, paruoštas iš 700 mg t-butil-//l-//l-(p-amidinobenzoil)-2-piperidinil/karbonil/-4-piperidinil/ok-si/acetato, 20 ml dichlormetano ir 20 ml trifluoracto rūgšties, maišomas 3 valandas kambario temperatūroje ir po to išgarinamas. Liekana ištirpinama etanolyje ir sumaišoma su eteriu. Filtruojama per siurbiamąjį pil-tuvą, nuosėdos džiovinamos ir gryninamos chromato-grafiškai ant silikagelio (RP-18, vanduo/tetrahidro-furanas 9:1), gauna 111 mg //1-//1-(p-amidinobenzoil)-2-piperidinil/-karbonil/-4-piperidinil/oksi/acto

[0169] a) Reaguojant 5,26 g 1-(benziloksikarbonil)-2-pipe-ridinkarboninės rūgšties su 4,30 4-piperidiniloksiacto

[0170] rūgšties tret.-butilo esterio, chromatografija ant silikagelio (etilo acetatas/heksanas 2:1) gauna 7,33 g 2-//4-/(-butoksikarbonil)metoksi/-piperidino/karbonil/- 1-piperidinkarboninės rūgšties benzilo esterio. MS: 461

[0171] b) Hidrinant 4,6 g ankstesnės stadijos produkto etanolyje, esant 0,4 g Pd/C (10 %) , nufiltravus kata-lizatorių ir sukoncentravus tirpikli, gauna 3,2 g t-butil-//l-(2-piperidinil-karbonil)-4-piperidinil/ok-si/acetato. MS: 327 (M+H)⁺. c) Reaguojant 3,26 g ankstesnės stadijos produkto su 2,49 g p-amidinobenzoilo chlorido, kaip pavyzdyje 1 f),

[0172] gauna 1,56 g pageidaujamo acetato, lydymosi temperatūra 93-95°C.

[0173] Tirpalas, paruoštas iš 130 mg t-butil-//(IRS, 2RS, 3RS, 4RS)-4-//N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/amino/-2,3-di-acetoksiciklo-heksil/oksi/acetato hidrochlorido, 5 ml dichlormetano ir 5 ml trifluoracto rūgšties, maišomas 2 valandas kambario temperatūroje ir koncentruojamas. Liekana suspenduojama eteryje ir filtruojama per siur-biamąjį piltuvą. Gauna 126 mg //(IRS, 2RS, 3RS, 4RS)-4-//N-(amidinobenzoil)-L-alanil/amino/-2,3-diacetoksicik-loheksil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato. MS: 507

[0174] (M+H)⁺.

[0175] a) Tirpalas, paruoštas iš 4,64 g cis-4-amino-2-cik-loheksen-l-olo, 10,2 g N-(benziloksikarboniloksi/suk-cinimido ir 5,7 ml trietilamino dimetilformamide, mai-šomas ir praskiedžiamas eteriu, plaunamas sočiu natrio chlorido tirpalu, džiovinamas ir koncentruojamas. Chromatografija ant silikagelio (etilo acetatas/heksanas 2:1) gauna 5,62 g benzil-(lRS, 4SP)-4-hidroksi-2-cikloheksen-1-karbamato. M: 156 (M-91)⁺. b) Fazinio virsmo sąlygomis (30 ml toluolo, 30 ml 50 % natrio hidroksido tirpalo, 100 mg tetrabutilamonio-hidrosulfato) 2,1 g ankstesnės stadijos produkto reaguoja su 1,76 ml bromacto rūgšties tret.-butilo esterio. Maišoma, po to organinė fazė atskiriama, plaunama prisotintu natrio chlorido tirpalu, džiovinama ir koncentruojama. Liekana gryninama chromatografiškai (silikagelis; heksanas/etilo acetatas 3:1), gauna 1,91 g benzil (IRS, 4SP)-4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/-2-cik-loheksen-l-karbamato. MS: 333 (M-28)⁺.

[0176] c) Tirpalas, paruoštas iš 722 mg ankstesnės stadijos produkto, 280 mg N-metilmorfolino-N-oksido ir 26 mg

[0177] osmio tetraoksido, 20 ml acetono ir 10 ml vandens, maišomas ir po to, esant sumažintam slėgiui, pašali-namas acetonas, o vandeninė fazė ekstrahuojama eteriu. Organinė fazė plaunama prisotintu natrio chlorido tirpalu, džiovinama ir koncentruojama. Chromatogra-fiškai išgryninus ant silikagelio (etilo acetatas/heksanas 2:1), gauna 476 mg benzil-(IRS, 2SP, 3SP, 4SP)-4-/ (t-butoksikarbonil)metoksi-2,3-dihidroksiciklo-heksankarbamato. MS: 396 (M+H)⁺.

[0178] d) Tirpalas, paruoštas iš 728 mg ankstesnės stadijos produkto 10 ml etanolio, hidrinamas, esant 100 mg 20 %

[0179] Pd/C. Po to katalizatorius nufiltruojamas, o filtratas išgarinamas ir vykdoma liekanos, ištirpintos 30 ml tetrahidrofurano, reakcija su 410 mg N-benziloksikarbonil-L-alanino, esant 697 mg HBTU ir 200 įj.1 trietilamino. Reakcijos mišinys praskiedžiamas eteriu, plaunamas prisotintu natrio hidrokarbonatu, po to prisotintu natrio chlorido tirpalu ir koncentruojamas. Chromatografija ant silikagelio (etilo acetatas/metanolis 95:5), gauna 521 mg benzil-/(S)-1-//(IRS, 2SP, 3SP, 4SP)-4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/-2,3-dihidroksicik-loheksil/karbamoil/etil/karbamato. MS: 467 (M+H)⁺. e) 800 mg ankstesnės stadijos reakcijos produkto ace-tilina 10 ml acto rūgšties anhidrido ir 10 ml piridino, po to reakcijos produktą koncentruoja ir grynina chro-matografiškai ant silikagelio (etilo acetatas/heksanas 2:1), gauna 670 mg benzil-/(S)-1-//(IRS, 2SP, 3SP, 4SP)-4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/-2,3-acetoksiciklo-heksil/karbamoil/etil/karbamato. MS: 551(M+H)^+.

[0180] f) 670 mg ankstesnės stadijos reakcijos produkto hidrina 10 ml etanolio, esant 100 mg 10 % Pd/C. Po to

[0181] katalizatorių nufiltruoja, o tirpalą išgarina. Veikiant (analogiškai kaip pavyzdyje 1 f) , 329 mg p-amidinobenzoilo chlorido ir išgryninus chromatografiškai ant silikagelio (RP-18, vanduo/metanolis 9:1) gauna 230 mg pageidaujamos pradinės medžiagos. MS: 563 (M+H)⁺.

[0182] Kambario temperatūroje sumaišo 220 mg 28 pavyzdžio produkto, 300 mg kalio karbonato ir 10 ml metanolio, po to metanolis išgarinamas. Chromatografija ant silikagelio (RP-18, vanduo/acetonitrilas 95:5) gauna 110 mg // (1 RS, 2 RS, 3 RS, 4 SR)-4-//N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/amino/-2,3-dihidroksicikloheksil/oksi/-acto

[0183] Reaguojant 1,3 g rac-p-//l-(p-cianbenzoil)-2-piroli-dinil/-karbonil/fenoksi/acto rūgšties metilo esterio, kaip aprašyta pavyzdyje 2 A)B)C), chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18, vandens/metanolio gradientas) ir perkristalinus iš etanolio gauna 0,45 g rac-/p-//l-(p-amidinobenzoil)-2-pirolidinil/karbonil/fenoksi/acto rūgšties metilo esterio acetato. Lydimosi temperatūra 210-211°C. MS(FAB): 410 (M+H)⁺.

[0184] a) Iš 8,3 g p-benziloksibrombenzolo ir 0,8 g magnio drožlių gautas Grinjaro reagentas reaguoja su 9,34 g Z-L-prolin-N-metoksimetilamido tetrahidrofurane. Chromatografija (silikagelis; dietilo eteris/petrolio eteris 1:1) gauna 4,3 rac-1-(benziloksikarbonil)-2-(p-benzil-oksibenzoil) pirolidino. MS(EI): 211 (C₁4_Hu₀₂)⁺, 204 (C12H14N02) + . b) Hidrinant 3,3 g ankstesnės stadijos produkto, kaip pavyzdyje 6b), ir po to veikiant 1,32 g p-cianbenzoilo chlorido dimetilformamide, esant trietilaminui, gauna 2,8 g rac-1-(p-cianbenzoil)-2-(p-hidroksibenzoil)piro-lidino. Lydimosi temperatūra 194-196°C (etilo acetatas) . MS(EI) : 320 (M) +. c) Reaguojant 2,8 g ankstesnės stadijos produkto su 1,53 g bromacto rūgšties metilo esterio dimetilformamide, esant kalio karbonatui, chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis 99:1) gauna 1,3 g pageidaujamo pradinio junginio. MS(EI): 392 (M)^+.

[0185] Šildoma 0,30 g 30 pavyzdžio produkto vandeniniame acto rūgšties tirpale, chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18, vandens/acetonitrilo gradientas) gauna 0,11 g rac-/p-//l-(p-amidinobenzoil)-2-pirolidinil/karbonil/fenoksiacto rūgšties. Lydimosi temperatūra virš 250°C. MS(FAB): 396 (M+H)^+.

[0186] Reaguojant 0,85 g //4-/1-(p-cianbenzoil)-DL-prolil/-m-fenilen/dioksi/diacto rūgšties dimetilo esterio, kaip aprašyta pavyzdyje 2 A)B)C), chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18, vandens/metanolio gradientas) ir perkristalinus iš dietilo eterio gauna 0.09 g //4-/1-(p-amidinobenzoil)-DL-prolil/-m-fenilen/ dioksi/diacto rūgšties dimetilo esterio acetato. Lydimosi temperatūra 93-95°C. MS(FAB): 498 (M+H)^+.

[0187] a) Reaguojant 4 g 3-hidroksi-fenoksiacto rūgšties metilo esterio magnio druskos su 5,8 g Z-L-prolinalo ir veikiant produktą 3,8 g bromacto rūgšties metilo esterio, kaip aprašyta pavyzdyje 30 c), chromatografija (silikagelis; dietilo eteris/petrolio eteris 4:1) gauna 7,6 g //4 — /(RS)-1-benziloksikarbonil)-DL-pirolil/hidroksimetil/-m-fenilen/dioksi/diacto rūgšties dimetilo esterio. MS(FAB): 488 (M+H)⁺. b) Oksiduojant 5,3 g ankstesnės stadijos produkto 7,5 ml Džonso reagento dietilo eteryje, chromatografija (silikagelis; dichlormetanas/metanolis 99:1) gauna 2,2 g //4 — /1-benziloksikarbonil)-DL-prolil-m-fenilen/dioksi/diacto rūgšties dimetilo esterio. MS(EI): 485 (M)⁺. c) Hidrinant 2,2 g ankstesnės stadijos produkto, kaip aprašyta pavyzdyje 6 b) ir po to veikiant 1,0 g p-cianbenzoilo chlorido chloroforme, esant trietilaminui, chormatografij a (silikagelis: dichlormetanas/metanolis 99:1) gauna 0,85 g pageidaujamos pradinės medžiagos. MS (EI) : 480 (M) +.

[0188] Iš 0,09 g 32 pavyzdžio produkto, hidrolizuojant ji, vandeniniu natrio šarmo tirpalu metanolyje, 50°C tem-peratūroje ir po to neutralizuojant acto rūgštimi, chromatografija (sililines grupes turintis silikagelis RP-18, vandens/acetonitrilo gradientas) ir kristalinimu iš etanolio, gauna 0,09 g //4 — /1— (p-amidinobenzoil) -DL-prolil/-m-fenilen/dioksi/diacto rūgšties mono-natrio druskos. Lydimosi temperatūra 241-242°C. MS(FAB): 492 (M+Na)⁺, 470 (M+H)⁺.

[0189] Esterifikuoj ant etanolyje 0,47 g //1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties (14 pavyzdys) , esant kataliziniam koncentruotos sieros rūgš-ties kiekiui, chromatografija (Lichroprep RP-18, vandens/etanolio gradientas) gauna 0,3 g //l-/N-(p-amidinobenzoil)-L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties etilo esterio pusiau-sulfato, lydimosi tem-peratūra 182-184°C (etanolis). MS(IS0=jonų išbars-tymas) : 497 (M+H)⁺.

[0190] Iš 0,48 g //1-/N-/5-(1-t-butoksiformamido)pentanoil/-3-(p-t-butoksifenil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto

[0191] rūgšties tret.-butilo esterio, analogiškai kaip apra-šyta pavyzdyje 1, perkristalinus iš dietilo eterio gauna 0,2 g //1-/N-(5-aminopentanoil)-L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties trifluoracetato druskos, lydimosi temperatūra 78-88°C (skyla), = +11,6°

[0192] Reaguojant 0,7 g //1 — /3 — (p-butoksifenil/-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio (gauto hidrogenolizuojant pavyzdžio 14 a) produktą) su 0,35 g N-Boc-5-aminopentano rūgšties, esant HBTU ir N-metilmorfolino (kaip aprašyta pavyzdyje 2 b) ) gauna 0,55 g pradinio esterio. /a/D 9 n = +1,2° (c=0,4, metanolis) . MS(FAB): 634 (M+H)⁺.

[0193] Iš 0,6 g /(S)-3-(p-amidinobenzamido)—3 — //4 — /(t-butoksikarbonil)metoksi/piperidino/karbonil/propil/-t-butil-karbamato, analogiškai kaip aprašyta pavyzdyje 1, chromatografija (Lichroper RP-18, vandens/metanolio gradientas) ir pamaišius tetrahidrofurane gauna 0,26 g //1 — /(S)-2-(p-amidinobenzamido)-4-aminobutanoil) /-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tri fluoracetato druskos. Lydimosi temperatūra virš 170°C (skyla), /a/^ = +5,8 (c=0_r5, vanduo). MS(EI): 406 (M+H)⁺.

[0194] a) Reaguojant 1,0 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio su 2,0 g N^2-Fmoc-N^4-Boc(S)-2,4-diaminosviesto rūgšties, esant HBTU ir Chiunigo bazei, kaip aprašyta pavyzdyje 2 b) , chromatografija (silikagelis; EtOAc/heksanas 1:1,5) gauna 2,2 g 3-t-butil-l-(fluoren-9-ilmetil)-(S)-1-//4-/ (t-butoksikarbonil)metok-si/piperidino/karbonil/trimetilen-dikarbamato. MS (FAB): 638 (M+H)+ . b) Reaguojant 2,3 g produkto a) su piperidinu (20 % dimetilformamide), chromatografija (silikagelis; etilo

[0195] acetatas/metanolis 4:1) gauna 0,65 g t-butil-/(S)-3-amino-3-//4-/(t-butoksikarbonil)metoksi/piperidino/kar-bonil.propil/karbamato. MS: 416 (M+H)⁺.

[0196] c) Reaguojant 0,65 g produkto b) su 0,38 g p-amidinobenzoilo chlorido hidrochloridu (kaip aprašyta

[0197] pavyzdyje lf), gauna 0,6 g pradinio karbamato. MS(FAB): 562 (M+H) +.

[0198] Iš 0,25 g //1-/N-/(5-amidino-2-piridil)karbonil/-3-(p-t-butoksifenil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgš-ties tret.-butilo esterio acetato druskos (kaip apra-šyta pavyzdyje 1) chromatografija (Lichroprep RP-18, vandens, metanolio gradientas) ir maišant su etilo acetatu gauna 0,12 g //1-/N-/(5-amidino-2-piridil) karbonil/L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties, lydimosi temperatūra 198-200°C (skyla). MS(FAB): 470

[0199] a) Reaguojant 2,5 g //1 —/3 —(p-t-butoksifenil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo

[0200] esterio su 0,85 g 5-cian-2-pikolino rūgšties (kaip aprašyta pavyzdyje 1 d), gauna 1,55 g //l-/3-(p-t-butoksifenil)-N-//5-ciano-2-piridil/karbonil/-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. Lydimosi temperatūra 122-123°C (dietilo eteris/petrolio eteris 4:1). MS(FAB): 565 (M+H)⁺.

[0201] b) Toliau apdorojant 1,43 g ankstesnės stadijos reakcijos produkto, kaip aprašyta pavyzdyje 2 A)B)C), gauna

[0202] 0,98 g pageidaujamos pradinės medžiagos. Lydimosi tem-peratūra 183-186°C. MS(EI): 582 (M+H)⁺.

[0203] Reaguojant 0,7 g (S)-1-/2-(5-cianopiridin-2-ilkarboni1-amino)-3- (4-metoksifenil)propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esterio, kaip aprašyta pavyzdyje 2 A)B)C), ir po to kristalinant iš vandens gauna 0,1 g (S)-1-/2-(5-amidinopiridin-2-ilkarbonilamino)-3-(4-me-toksifenil) propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esterio acetato druskos. Lydimosi temperatūra 180-181°C (skyla). MS(ISP): 512 (M+H)⁺.

[0204] a) Reaguojant 7 g N-Z-L-tirozin-dihidrato su 4,5 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties etilo esterio (gauto reaguojant atitinkamam tret.-butilo esteriui, pavyzdys 1 c) su trifluoracto rūgštimi, esant druskos rūgšties etanoliniam tirpalui, kaip pavyzdyje 1 d)) gauna 6,5 g //1-/N-(benziloksikarbonil)-L-tirozil-4-piperidinil/oksi/acto rūgšties etilo esterio. Šis produktas veikiamas metilo jodidu dimetilformamide, esant kalio karbonatui. Chromatografija (silikagelis; metileno chloridas.metanolis 99:1) gauna 4,2 g (S)-1-/2-(benziloksi-karbonilamino-3- (4-metoksifenil)-propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esterio. /«/q 9 n = 1,9° (_c=0,8, metanolis). MS(ISP): 499 (M+H)⁺. b) Iš 4 g produkto a) , analogiškai kaip aprašyta pavyzdyje 1 e), gauna 3,5 g (S)-2-/2-amino-3-(4-metoksi-fenil) propionil/-piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esterio. MS(EI): 365 (M+H)⁺. c) Reaguojant 1,46 g produkto b) su 0,74 g 5-cian-2-pikolino rūgšties, pagal pavyzdi, 1 d), chromatografija

[0205] ant silikagelio (metileno chloridas/metanolis 40:1) gauna 0,72 g pradinio nitrilo. MS(ISP): 495,5 (M+H)⁺.

[0206] Hidrolizuojant (S)-1-/2-(5-amidinopiridin-2-ilkarbonil-amino)- 3-(4-metoksifeni1)propioni1/piperidin/-4 -iloksiacto rūgšties etilo esterio (39 pavyzdys), esant pH=12, chromatografija (Lichroprep RP-18; vandens/metanolio gradientas) ir maišant su etanoliu gauna (S)-1-/2-(5-amidinopiridin-2-ilkarbonilamino)-3-(4-metoksifenil) propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšti,. Lydimosi tem-peratūra virš 250°C. MS(ISP): 484,4 (M+H)^+.

[0207] Reaguojant 1,2 g (S)-l-/2-amino-3-(4-metoksifenil)pro-pionil/-piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esterio (pavyzdys 38 b)) su 0,77 g 4-amidinobenzoinės rūgšties chloranhidrido hidrochloridu 3-pikoline (analogiškai kaip aprašyta pavyzdyje 1 f)), chromatografija (Lichroprep RP-18; vandens/etanolio gradientas) ir maišant su etilo acetatu gauna 0,25 g (S)-1-/2-(4-ami-dinobenzamido)-3- (4-metoksifenil)propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esterio hidrochlorido, lydimosi temperatūra 105-107°C. M(ISP): 511,3 (M+H)⁺.

[0208] Hidrolizuoj ant 0,35 g (S)-1-/2-(4-amidinobenzamido)-3-(4-metoksifenil)propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgš-ties etilo esterio hidrochlorido (40 pavyzdyje), esant pH=12, chromatografija (Lichroprep RP-18; vandens/metanolio gradientas) ir kristalinant iš etanolio/vandens gauna 0,05 g (S)-1-/2-(4-amidinobenzamido)-3-(4-metok-sifenil ) propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties, lydimosi temperatūra 191-192°C. MS(ISP): 483,3 (M+H)⁺.

[0209] Iš 1,6 g /1-/N-(4-amidinobenzoil)-L-triptofanil/pipe-ridin-4-iloksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio, analogiškai kaip aprašyta pavyzdyje 1, chromatografija (Lichroprep RP-18; vandens/metanolio gradientas) ir maišant su tetrahidrofuranu ir acetonitrilu, gauna 0, 7 g/l-/N-(4-amidinobenzoil)-L-triptofanil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties, lydimosi temperatūra 210°C (skyla). MS(ISP): 492,2 (M+H)⁺.

[0210] a) Reaguojant 5,1 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio (pavyzdys 1 c) su 8,0 g Z-Tzp-OH,

[0211] esant HBTU ir N-metilmorfolinui, kaip aprašyta pavyzdyje 2 b), chromatografija (silikagelis; metileno chloridas/metanolis 20:1) gauna 11,5 g /l-(N-benziloksikarbonil-L-triptofanil)piperidin-4-iloksi/acto

[0212] b) Tirpalas, paruoštas iš 6,6 g produkto a), ištirpinto metanolyje, kaitinamas, esant 10 % Pd-C ir amonio

[0213] formiatui, iki virimo. Nufiltravus ir chromatografiškai išgryninus (silikagelis; metileno chloridas/metanolis 9:1) gauna 4,3 g (1-L-triptofanil-piperidin-4-iloksi) acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(EI): 384 (M-NH)⁺.

[0214] c) Reaguojant 1,9 g produkto b) su 1,15 g benzoinės rūgšties chloranhidrido hidrochloridu piridine, kaip

[0215] aprašyta pavyzdyje 1 f), chromatografija (silikagelis; metileno chloridas/metanolis 7:1) gauna 1,6 g pradinio esterio. MS(ISP): 548,3 (M+H)⁺.

[0216] Tirpalas, paruoštas iš 3,2 g/l-/N-(4-amidinobenzoil)-4'-heksiloksi-L-fenilalanil/piperidin-4-iloksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio skruzdžių rūgštyje, paliekamas nakščiai kambario temperatūroje. Sukoncentravus, chromatografija (Lichroprep RP-18, vandens/metanolio gradientas) ir maišant su dietilo eteriu išskiria 0,45 g /1-/N-(4-amidinobenzoil)-4'-heksiloksi-L-fenil-alanil/piperidin-4-iloksi/acto rūgšties, lydimosi tem-peratūra 160°C (skyla) . /a/ = _3,2° (c=0,5, metanolis) . MS(ISP): 553,2 (M+H)⁺.

[0217] a) Analogiškai, kaip aprašyta pavyzdyje 38a), reaguojant 5, 6 g //1-/N-(benziloksikarbonil)-L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/-acto rūgšties tret.-butilo esterio su 1-jodheksanu 80°C temperatūroje, chromatografija (silikagelis; heksanas/etilo acetatas 2,5:1) gauna 3,9 /l-(N-benziloksikarbonil-4^1-heksiloksi-L-fenilalanil) pi-peridin-4-iloksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS (EI) : 445 (M-Z-NH2) +. b) Hidrinant 3,9 g produkto a) metanolyje (analogiškai, kaip aprašyta pavyzdyje -lc) ) , gauna 2,85 g /l-(4'-hek-siloksi-L-fenilalanil)piperidin-4-iloksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(EI): 462 (M)⁺, 445 (M-NH₃)⁺. c) Reaguojant 0,5 g produkto b) su 0,3 g 4-ami-dinobenzoinės rūgšties chloranhidrido hidrochloridu piridine (analogiškai, kaip aprašyta pavyzdyje lf), chromatografija (silikagelis; metileno chloridas/metanolis 5:1) gauna 0,7 g pradinio esterio. MS(ISP): 609,4

[0218] (M+H)⁺.

[0219] Tirpalas, paruoštas iš 0,65 g (R, S)-1-/2-(4-aminoiminometil-N-metilbenzoilamino)-3-(4-metoksifenil) propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio skruzdžių rūgštyje, paliekamas nakščiai kambario temperatūroje. Sukoncentravus, chromatografija

[0220] išskiria 0,13 g (R, S)-1-/2-(4-aminoiminometil-N-metil-benzoilamino)-3-(4-metoksifenil)propionil/piperidin-4-iloksi/acto rūgšties, lydimosi temperatūra 181-182°C. MS(ISP) : 497, 1 (M+H) + .

[0221] a) Reaguojant 1,37 g Z-N-Me-Tyr (Me) -0H (J.A.C.S., 112, 1990, 7663) su 0,86 g 4-piperidiniloksiacto rūgšties

[0222] tret.-butilo esterio (pavyzdys lc) , kaip aprašyta pavyzdyje 2b), chromatografija (silikagelis; dietilo esteris/heksanas 5:1) gauna 1,6 g (R,S)-1-/2-(N-benziloksikarbonil-N-metilamino)-3-(4-metoksifenil)pro-pionil-piperidin-4-iloksi/acto rūgšties tret.-butilo esterio. MS(EI): 541,0 (M+H)⁺.

[0223] b) Hidrinant 1,5 g produkto a) metanolyje, kaip ap-rašyta pavyzdyje le), gauna 1,05 g alyvos, kuri toliau

[0224] reaguoja su 0,58 g 4-amidinobenzoinės rūgšties chloranhidrido hidrochloridu piridine, kaip aprašyta pavyzdyje lf) . Chromatografija (silikagelis; metileno chloridas/metanolis 9:1) gauna 0,7 g pradinio esterio, lydimosi temperatūra 109-111°C. MS(ISP): 553,2 (M+H)⁺.

[0225] Esterifikuojama 0,07 g (R,S)-1-/2-(4-aminoiminometil-N-metilbenzoilamino)-3-(4-metoksifenil)propionil/piperi-din-4-iloksiacto rūgšties etanolyje, kaip aprašyta 34 pavyzdyje. Chromatografija (Lichroprep RP-18; vandens/etanolio gradientas) ir maišant su dietilo eteriu gauna 0, 056 g (R, S)-1-/2-(4-aminoiminometil-N-metil-benzoilamino)-3- (4-metoksifenil)propionil/piperidin-4-il-oksiacto rūgšties etilo esterio, lydimosi tempe-ratūra 126-128°C. MS(ISP): 525,5 (M+H) + .

[0226] Į 100 mg (S)-cis-l-/2-(4-amidinobenzoilamino)propio-nil/-4-t-butoksikarbonilmetoksipirolidin-3-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio, ištirpinto 5 ml metileno chlorido, prideda 5 ml trifluoracto rūgšties. Maišo kambario temperatūroje, po to tirpiklis nugarinamas, o liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio RP-18

[0227] (nešėjas - vanduo/tetrahidrofuranas (0-50 %) . Gauna 73 mg (S)-cis-l-/2-(4-amidinobenzoilamino)propionil-4-karboksimetoksipirolidin-3-iloksiacto rūgšties. MS: 437

[0228] a) Fazinio virsmo sąlygomis maišo 237 mg cis-N-ben-ziloksikarbonilpirolidin-3,4-diolo, 1 ml bromacto rūgš-ties tret.-butilo esterio ir 100 ml tetrabutil-amoniohidrosulfato 10-je ml 50 % natrio šarmo. Organinę fazę plauna vandeniu ir išgarina. Liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio (nešėjas - etilo acetatas/heksanas 1:3), gauna 354 mg cis-3,4-bis--butoksikarbonilmetoksipirolidin-l-karboninės rūgšties benzilo esterio. MS: 354 (M-III). b) Hidrina 320 mg ankstesnės stadijos produkto 10-je ml EtOH, esant 100 mg 10 % Pd/C, po 2 valandų katalizatorius nufiltruojamas, o liekaną, ištirpintą 10 ml tetrahidrofurano, sumaišo su 224 mg N-benziloksikarbonil-L-alanin-N-hidroksisukcinimido eterio, esant 100 įiI trietilamino. Reakcijos mišinys praskiedžiamas eteriu, organinė fazė plaunama 1 M KHS0₄ tirpalu, džio-vinama ir išgarinama. Liekana gryninama chromato-grafiškai ant silikagelio (nešėjas - heksanas/etilo acetatas 1:1), gauna 260 mg (S)-cis-1-(2-benzilok-sikarbonilaminopropionil)-4-t-butoksikarbonilmetoksi-pirolidin-3-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio. MS: 537 (M+H)⁺. c) Hidrina 250 mg ankstesnės stadijos reakcijos produkto 10-je ml etanolio, esant 100 mg 10 % Pd/C, po 4 valandų katalizatorius nufiltruojamas ir liekaną, iš-tirpintą 10 ml piridino, maišo su 102 mg p-amidinobenzoilo chlorido hidrochloridu. Tirpalas išgarina-mas, o liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio RP-18 (nešėjas - vanduo/tetrahidrofuranas 5-30 %) , gauna 143 mg pradinio esterio, lydimosi temperatūra 127°C (d) .

[0229] Tirpalas, paruoštas iš 150 mg (S)-8-/2-(4-amino-iminometilbenzoilamino)-3-(4-t-butoksifenil)propionil/- 8-azabiciklo/3.2.l/-oktan-endo-3-iloksiacto rūgšties etilo esterio hidrochlorido, 5 ml CH₂C1₂ ir 2,5 ml trifluoracto rūgšties maišomas kambario temperatūroje, po to tirpiklis išgarinamas. Užpylus liekaną eteriu, iškrenta kristalai, kurie nufiltruojami siurbiamuoju piltuvu ir ištirpinami 5 ml EtOH. Į tirpalą prideda 40 mg NaOH, ištirpinto 1 ml vandens, ir maišo kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys neutralizuojamas 1 N druskos rūgštimi ir išgarinamas. Liekana gryninama chromatografiškai ant silikagelio RP-18, gauna 75 mg (S) -8-/2-(4-aminoiminometil-benzoilamino)-3-(4-hidrok-sifenil)propionil/-8-azabiciklo/3.2.1/oktan-endo-3-il-oksiacto rūgšties. MS: 495 (M+H)⁺.

[0230] a) Į tirpalą, paruoštą iš 1 g N-benziloksikarbonilnor-tropino ir 20 mg rodžio (II) acetato 3 ml toluolo, 80°C

[0231] temperatūroje prideda 2 ml diazoacto rūgšties etilo esterio, ištirpinto 2 ml toluolo. Po 3,5 valandos tirpiklis išgarinamas, o liekana gryninama chro-matograf iškai ant silikagelio (nešėjas - heksanas/etilo acetatas 20-50 %. Gauna 555 mg endo-3-etoksikarbo-nilmetoks i-8-azabiciklo/3.2.1/oktan-8-karboninės rūgš-ties benzilo esterio. M: 348 (M+H)⁺.

[0232] b) Tirpalas, paruoštas iš 500 mg ankstesnės stadijos reakcijos produkto 20 ml etanolio, hidrinamas, esant

[0233] 100 mg 10 % Pd/C. Po 3 valandų katalizatorius nufil-

[0234] truojamas, o filtratas išgarinamas. Liekaną ištirpina 10 ml tetrahidrofurano ir prideda i, tirpalą, paruoštą iš 828 mg N- Z- L- Tyr ( tBu) - OH, 140 jxl N- metilmorfolino ir 569 mg HBTU 10- je ml tetrahidrofurano, kuris buvo maišomas 1 valandą 0°C temperatūroje. Pamaišius, reakcijos mišinys išgarinamas, o liekana gryninama chro-matografiškai ( nešėjas - heksanas/ etilo acetatas 1:1) ant silikagelio. Gauna 650 mg ( S)- 8-/ 2- benziloksi-karbonilamino- 3-( 4- t- butoksifenil) propionil/- 8- azabi-ciklo-/ 3. 2. l/ oktan- endo- 3- iloksiacto rūgšties etilo esterio. MS: 567 ( M+ H)+.

[0235] c) Hidrina 600 mg ankstesnės stadijos reakcijos produkto 20 ml etanolio, esant 100 mg 10 % Pd/ C. Po

[0236] 16 valandų katalizatorių nufiltruoja, o liekaną ištir-pina 10 ml piridino, maišo su 262 mg p- amidinobenzoilo chlorido hidrochloridu kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas, o liekaną grynina chromatografiškai ant silikagelio RP- 18 ( nešėjas - vanduo/ tetrahidro-furanas 0- 50 %) , gauna 198 mg pradinio esterio. MS: 579

[0237] 706 mg ( E)- arba ( Z)-( S)-/ 3-/ 2-/ 4-( t- butoksikarbonil-iminodi- t- butoksikarbonilaminometil) benzoilamino/ pro-pionilamino/ propoksi/ acto rūgšties butilo esterio maišo su 1, 5 ml metileno chlorido ir 1, 5 ml trifluoracto rūgšties 20°C temperatūroje. Išgarinus tirpikli, va-kuume, virinant su toluolu ir kristalinant iš aceto-nitrilo gauna 407 mg ( S)—/ 3 — / 4 —( aminoiminometil) ben-zoilamino/ propionilamino/ propoksi/ acto rūgšties butilo esterio trifluoracetato ( 1:1), lydimosi temperatūra 163- 165°C. / a/ D^ = + 19° ( c=0, 5 metanolyje).

[0238] a) Akrilonitrilo, glikolio rūgšties butilo esterio ir kalio karbonato mišinys pašildomas iki 60°C. Apdorojus

[0239] etilo acetatu ir vandeniu, 2-cianetoksiacto rūgšties butilo esteris nudistiliuojamas. Virimo temperatūra 100-120°C/0, 3 mm gyvsidabrio stulpelio (vamzdelis su rutuliniu praplatėjimu).

[0240] b) Pastarasis reakcijos produktas hidrinamas acto rūgštyje ant Pd/C ir gautas tokiu būdu aminas veikiamas

[0241] N-benziloksikarbonil-L-alaninu. Susidaro (S)-/3-(2-ben-ziloksikarbonilamino-propionilamino)propoksi/acto rūgš-ties butilo esteris, lydimosi temperatūra 54-55°C, /a/D^ = - 11,0° (c=0,5 metanolyje). c) Hidrinant ant Pd/C acto rūgštyje, gauna /3-(2-ami-nopropionilamino) propoksi/acto rūgšties butilo esteri,, kuris veikiamas p-/E/Z/-tri(t-butoksikarbonil)amidino-benzoine rūgštimi. Susidaro pradinė medžiaga. MS: 707 (27 M+H) , /a/D^ = + 21,4° (c=0, 5 metanolyje) .

[0242] 416 mg (S)-/3-/2-/4-(aminoiminometil)benzoilamino/pro-pionilamino/propoksi/acto rūgšties butilo esterio 20°C temperatūroje maišo su 8,3 ml 25 % druskos rūgštimi. Tirpalas išgarinamas, o liekana virinama su vandeniu. Iš tetrahidrofurano gauna 211 mg (S)/3-/2-/4-(aminoiminometil ) benzoilamino/propionilamino/propoksi/acto

[0243] rūgšties hidrochlorido hidrato (1:1), lydimosi tempe-ratūra 89-90°C. /a/_į-^ = + 23,4° (c=0,5 metanolyje).

[0244] Mišinį, paruoštą iš 1 g 1-/N-/4-(t-butoksikarbonil imino-di-t-butoksikarbonilamino-metil)-benzoil/-N-(2-metoksietil)glicil/-piperidin-4-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esterio, 3,8 ml metileno chlorido ir 3,8 ml trifluoracto rūgšties maišo 20°C temperatūroje. Tir-piklių mišinį, išgarina, o liekaną virina su vandeniu, ištirpina etanolyje ir metanolinio amoniako tirpalo pagalba nustato pH 8, po to iškristalina 1-/N-/4-(ami-noiminomotil)-benzoil/-N-(2-metoksietil)glicil/piperi-din-4-iloksiacto rūgšties hidratą (2:1). Lydimosi tem-peratūra virš 250°C. MS: 421 (100, M+H) .

[0245] a) N-(2-metoksietil)glicino tret.-butilo esteris eteryje ir prisotintame natrio hidrokarbonato vandeniniame tirpale reaguoja su chlorskruzdžių rūgšties benzilo esteriu iki N-benziloksikarbonil-N-(2-metoksietil) glicino tret.-butilo esterio. MS: 324 (82, M+H). b) Pastarasis reakcijos produktas metileno chlo-ride/trifluoracto rūgštyje skaidomas iki N-benziloksikarbonil-N-(2-metoksietil)glicino. MS: 267 (1, M). c) Reaguojant pastarajam reakcijos produktui su pipe-ridin-4-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esteriu, susidaro l-/N-benziloksikarbonil-N-(2-metoksietil)glicil/ piperidin-4-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esteris. MS: 465 (100, M+H)⁺. d) Katalizinio hidrinimo ant Pd/C etanolyje metu iš jo gaunamas 1-/N-(2-metoksietil)glicil/piperidin-4-iloksiacto rūgšties tret.-butilo esteris. MS: 331 (100, M+H). e) Pastarasis produktas reaguoja su 4-(t-butoksi-karbonilimino-di-t-butoksikarbonilaminometil)benzoine

[0246] rūgštimi iki pradinio esterio. MS: 777 (70, M+H).

[0247] Jungini, I galima naudoti žinomu būdu kaip aktyvią medžiagą, gaminant tabletes, kurių sudėtis:

[0248] Jungini, I galima naudoti žinomu būdu kaip aktyvią medžiagą, gaminant kapsules, kurių sudėtis:

Apibrėžtis

1. N-acil- a-aminorugšties dariniai, kurių bendra formulė

2. Junginiai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad a yra grupė a¹; R', R' 1 ir R'" yra vandenilis arba įprasti a-aminokarboksirūgščių pakaitai arba šo-ninės grandinės, be to, į R¹, R' ' ir R' 1 ' sudėti, įeinančios hidroksilo arba karboksilo grupės gali būti eterifikuotos, esterifikuotos arba pakeistos amido grupe, ir T - grupėje Q esantis vandenilis arba atskeliamas, esant fiziologinėms sąlygoms, žemesnysis alkilas.

3. Junginiai pagal 1 arba 2 punktą, besiskiriantys tuo, kad a yra grupė a¹; R yra amidino, X - CH, V - CH arba N, ir Q yra O¹, Q², Q⁴, Q⁵ arba Q⁹ grupė.

4. Junginiai pagal 1, 2 arba 3 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q:, ypač kai n=l ir T yra vandenilis arba metilas, ir -N(R')C(R 1 ',R' ' ')CO - viena iš šių liekanų: Gly, Ala, D-Ala, Vai, Leu, Sar, Orn, Lys, Phy, 2-metil-Pro, Phe, Tyr, 3-jod-Tyr, 3,5-dijod-Tyr, Ser(Ac), Ser, Asp, Glu, Pro, 4-benziloksi-Pro, 4-hidroksi-Pro, 2-piperidilenkarbonil, NHCH (CH2CH2NH2) CO, Trp, Tyr(Me), Tyr(heksil) ir ON(Me)₂-Tyr .

5. Junginiai pagal 1, 2 arba 3 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q 2, ypač kai n=l, T - vandenilis ir -N(R')C(R¹¹,R''')CO - Ala liekana.

6. Junginiai pagal 1, 2 arba 3 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q⁴, ypač tokie junginiai, kur n=l, T yra vandenilis; U ir U' yra vandenilis arba Ac ir -N (R')C(R1 1,R' '')CO yra Ala liekana.

7. Junginiai pagal 1, 2 arba 3 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q⁵, ypač jeigu n=l, T yra vandenilis, Ar - a,a,a- trifluor-m-tolil ir-N(R')C(R'',R'¹¹)CO yra Ala liekana.

8. Junginiai pagal 1, 2 arba 3 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q⁹, ypač kai R^2-R⁵ yra vandenilis arba R² yra -OCH2COO (H arba metilas) grupė, T - vandenilis arba metilas ir -N(R')C(R'',R''')CO yra Pro liekana.

9. Junginiai pagal 1 arba 3 punktą, besiskiriantys tuo, kad yra parinkti iš grupės://1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgštis,//1-/N-/(5-amidino-2-piridil)karbonil/-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgštis,//1-/N-(p-amidinobenzoil)-3- (4-hidroksi-3-3-jodfenil)-L-alanil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgštis,//l-/3-acetoksi-N-(p-amidinobenzoil)-L-alanil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgštis,/p-//l-(p-amidinobenzoil)-2-pirolidinil/karbonil/fenoksi/acto rūgštis,//1-/N-/(5-amidino-2-piridil)karbonil/-L-tirozil/-4-piperidinil/-oksi/acto rūgštis ir ypač//1-/N-(p-amidinobenzoil)-L-tirozil/-4-piperidinil/oksi/acto rūgštis.

10. Junginiai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q³, ypač kai n=0 ir T - vandenilis, arba grupė Q⁷, ypač kai T - vandenilis.

11. Junginiai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad Q yra grupė Q g, ypač kai V=l, T - vandenilis arba butilas ir v'-V¹'' - vandenilis.

12. Junginiai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad -N (R1 ) C (R' ' , R' ' ' ) CO yra N (metoksietil) Gly liekana .

13. Junginiai pagal 1 punktą, besiskiriantys tuo, kad jie priklauso grupei:(S)-1-/2-(5-amidinopiridin-2-ilkarbonilamino)-3-(4-me-toksifenil)-propionil/piperidin-4-iloksiacto rūgštis, (S)-1-/2- (4-amidinobenzamido)-3-(4-metoksifenil)propio-nil/-piperidin-4-iloksiacto rūgšties etilo esteris,

(S)-1-/2- (4-amidinobenzamido)-3-(4-metoksifenil)propio-nil/-piperidin-4-iloksiacto rūgštis,/1-/N-(4-amidinobenzoil)-4'-heksiloksi-L-fenilalanil/ piperidin-4-iloksiacto rūgštis.

14. Junginiai, kurių bendra formulė

E'¹' ir G turi mažiausiai vieną karboksirūgšties esterio grupę ir/arba eterio grupę ir/arba apsaugotą amino grupę.

15. Farmaciniai preparatai, besiskiriantys tuo, kad i, jų sudėti, kaip aktyvus ingredientas įeina junginys pagal vieną iš 1-13 punktų, ypač tinkami ligų, kurias sukelia adhezyvinių proteinų susijungimas su trombocitais, o taip pat ir trombocitų agregacija ir ląstelių-ląstelių susijungimas, gydymui ir profilaktikai .

16. Junginio pagal vieną iš 1-13 punktų panaudojimas gamyboje vaistinių preparatų, skirtų ligų, kurias sukelia adhezyvinių proteinų susijungimas su trombocitais, o taip pat ir trombocitų agregacija bei ląstelių-ląstelių susijungimas, ypač trombozių, trombų susidarymo, kraujo išsiliejimo i, smegenis, miokardo infarkto, uždegimų, arteriosklerozės arba osteoporozės gydymui ir profilaktikai, o taip pat ir kaip prieš-navikinė priemonė, arba kaip priemonė žaizdų gydymui.

Brėžiniai