[LT] Aprašomi 1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[2,3-b]indolo tetrahidroizochinolinilkarbamatai, turintys (I) formulę, kurioje R yra vandenilis ar žemesnis alkilas, X yra vandenilis, žemesnis alkilas, halogenas, žemesnis alkoksilas ar hidroksilas, kurie gali palengvinti atminties disfunkcijas, charakterizuojamas cholinerginiu deficitu.
[EN]
[0001] Ši paraiška yra dalinis tęsinys ankstesnės paraiškos, serijos numeris 247826, užregistruotos 1888 metais rug-
[0002] sėjo 22 d., kuri yra dalinis tęsinys ankstesnės pa-raiškos, serijos numeris 049894, užregistruotos 1987 metais kovo 15 d., dabar tai JAV patentas 4791107,
[0003] kuris yra dalinis tęsinys ankstesnės paraiškos, serijos numeris 885991, užregistruotos 1986 metais liepos 16 d.,
[0004] Dabartinis išradimas susijęs su 1, 2, 3, 3a, 8, 8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-6] indolo tetra-hidroizochinolinilkarbamatais turinčiais formulę (I),
[0005]
[0006] kurioje R yra vandenilis ar žemesnis alkilas; X-vandenilis, žemesnis alkilas, halogenas, žemesnis alkok-
[0007] silas ar hidroksilas, kurie gali palengvinti atminties disfunkcijas, charakterizuojamas cholinerginiu defici-
[0008] Nežiūrint kitų priimtų nuostatų ar pažymėjimų, toliau išvardinti apibrėžimai bus naudojami šioje speci-fikacijoje ir pateiktoje išradimo formulėje.
[0009] Terminas žemesnis alkilas reiškia nešakotą arba šakotą alkilo grupę su 1-6 anglies atomais. Žemesnio alkilo pavyzdžiai tai metilas, etilas, n-propilas, izo-propilas, n-butilas, izo-butilas, antr.-butilas, tret.-butilas ir nešakotas arba šakotas grandies pentilas ir heksilas.
[0010] Terminas halogenas reiškia florą, chlorą, bromą ir jodą.
[0011] Šio išradimo junginiai gaunami panaudojant žemiau ap-rašytas sintezės stadijas. Aprašant sintezės stadijas, pažymėjimai X
[0012] ir R turės anksčiau duotas reikšmes iki atskiro nu-rodymo .
[0013] Struktūrinėse formulėse šio išradimo junginiai pavaizduoti storom linijom, išeinančiom iš 3a-anglies ir 8a-anglies atomų 1, 2, 3, 3a, 8, 8a,-heksahidropiro-lo[ 2,3-b] indolo žiedo sistemoje, kurios žymi, kad du pakaitai yra virš trijų žiedų sistemos vidurinės plokštumos. Punktyrinės linijos žymi, kad du pakaitai yra žemiau trijų žiedų sistemos vidurinės plokštumos, ir vingiuotos linijos žymi, kad du pakaitai yra abu virš minėtos vidurinės plokštumos arba žemiau jos.
[0014] Dėl konformacinių apribojimų du pakaitai 3a- ir 8a-pozicijose turi būti abu virš minėtos vidurinės plokš-tumos arba žemiau vidurinės plokštumos. Taigi, formu-lėje (I), pakaitai prie 3a- ir 8a-anglies atomų yra eis padėtyje, kadangi jie yra vienoje trijų žiedų sistemos pusėje. Kai minėti pakaitai yra abu virš trijų žiedų sistemos vidurinės plokštumos, tai konfigūracija bus priskirta 3aS-cis, o kai abu pakaitai yra žemiau žiedo vidurinės plokštumos, tai konfigūracija bus vadinama 3aR-cis. Šie du konfigūracijų tipai yra pavaizduoti žemiau.
[0015] Šio išradimo tikslas yra paskelbti abu minėtus eis izomerus, būtent, 3aS-cis izomerą ir 3aR-cis izomerą, kiekvienam duotam junginiui ar struktūrinei formulei, turintiems anksčiau paminėtas vingiuotas linijas. Taip pat šio išradimo tikslas yra paskelbti visus 3aS-cis ir 3aR-cis izomerų mišinius, įskaitant ir raceminį mišinį
[0016] Panaudojus sintezės schemą pateiktą darbe Julian et al., J. Chem. Soc., 1935, 563-566 ir 755-757 iš II formulės junginio galima gauti IV ir V formulių junginius. Sintezės schema pateikta žemiau, bet detales skai-tytojas gali sužinoti originaliuose straipsniuose. Detales kitos optinio atskyrimo procedūros, neaprašytos Julian et al., galima rasti darbuose Schonenberger et
[0017] al., J. Med. Chem., 1986, 29, 2268-2273;
[0018] ir Schonenberger et al., Helv. Chim. Actą, 1986, 69, 283-287 ir 1486-1497.
[0019]
[0020] Jei aukščiau pavaizduotoje sintezės schemoje junginio III virtimas junginiu IV vyksta be optinio atskyrimo stadijos, tai gaunamas raceminis junginys. Minėtas raceminis junginys yra mišinys 50:50 junginio IV ir jo 3aR-cis izomero, ir gali būti panaudotas ruošiant raceminį mišinį, turinti, junginį V.
[0021] Junginiui Va, STADIJOJE A, leidžiama reaguoti su 1,1'-karbonildiimidazolu, ir gautas produktas reaguoja su VI formulės aminu, kad gautume I junginį.
[0022] Minėta reakcija tarp Va junginio ir l,l'-karbo-nildiimidazolo yra paprastai atliekama ruošiant de-gazuotą junginio Va tirpalą tinkamame tirpiklyje, to-kiame kaip dichlormetanas, pridedant l,l'-karbo-nildiimidazolą i, tirpalą ir maišant tirpalą kambario temperatūroje tam tikrą laiką, apie vieną valandą. Minėta karbamacijos reakcija paprastai atliekama pridedant aminą į tirpalą, gautą aukščiau ir maišant tirpalą kambario temperatūroje kelias valandas.
[0023] Šio išradimo I formulės junginiai yra naudingi gydant įvairias atminties disfunkcijas, chrakterizuojamas cho-
[0024] linerginės funkcijos sumažėjimu, tokias kaip Alzheimerio liga.
[0025] Šių junginių naudingumas pasireiškia jų sugebėjimu slo-pinti fermentą acetilcholinestezazę ir to pasekoje didinti acetilchlorido lygi, smegenyse.
[0026] Nors f i zost.igm.ina s yra galingas acetilcholinesterazės inhibitorius, jo terapinis naudingumas yra apribotas, nes jis yra nestabilus, netinkamas oraliniam naudojimui, trumpos veikimo trukmės ir labai toksiškas. Mes pasirinkome (3aS-cis)1, 2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a, 8-trimetilpirolo[ 2, 3[ b] indol-5-olo (1,2, 3, 4-tetra-hidroizochinolinil)karbamatą (vėliau Junginys A) kaip reprezentacini, šio išradimo junginių pavyzdį ir pa-lyginome jo veikimą su fizostigminu įvairiuose in vitro ir in vivo testuose. Testavimo rezultatai parodė, kad Junginys A turi kelis terapinius pranašumus prieš fizostigminą.
[0027] Junginys A buvo žymiai stabilesnis už fizostigminą, kai inkubuojamas žmogaus plazmoje 37°C temperatūroje. Po 4 valandų, išliko maždaug 70% junginio A, o fizostigminas šiose sąlygose pilnai suiro. Junginys A buvo maždaug 34 kartus silpnesnis butirilchlolinesterazės inhibitorius negu fizostigminas. Sumažėjęs giminiškumas šiam fermentui gali apspręsti junginio A stabilumą plazmoje.
[0028] Junginio A biotinkamumo tyrimai parodė, kad jie greitai absorbuojasi burnoje (Cmax per 30 min.) ir neblogai per hemato-encefalini, barjerą (santykis smegenys:plazma prie Cmax buvo 4.55:1). Priešingai jam, fizostigminas buvo tiek blogai tinkamas oraliniam naudojimui, kad farmakokinetiniai duomenys nebuvo gauti. Santykis smegenys:plazma fizostigminui po intraveninės dozės įve-dimo buvo maždaug 1.5:1 (Somani ir Khaliąue, Drug Meta-bolism and Disposition, 15, 627-633, 1987). Oralinis biotinkamumas ir aktyvumas buvo taip pat demonstruoti ex vivo acetilcholinesterazės (AChE) slopinimo testuose, kur buvo parodytas žymus žiurkės smegenų AChE slopinimas po Junginio A oralinio pateikimo (žemiau žiūrėkit test metodo, naudoto žiurkės smegenų AChE slopinimo nustatymui, detales).
[0029] Junginio A veikimo trukmė lyginta su trukme fizostigmino veikimo AChE teste ex vivo. Junginys A (20 mg/kg) stipriai slopino žiurkės smegenų AChE po 4 ir 5 valandų po oralinio įvedimo,kai jo veikimas po 24 valandų nebuvo statiškai reikšmingas. Fizostigminas nerodė žy-maus slopinimo jau po 2 valandų po intraperitoninio įvedimo. Žiurkėms 4 dienas kartotas 20 mg/kg Junginio A įvedimas nerodė jokio akumuliatoriaus efekto.
[0030] Junginys A ir fizostigminas abu yra vienodai stipriai veikiantys AChE inhibitoriai in vitro. Šiame tyrime Junginiui A IK50 vertė buvo 0.036 jiM ir f izostigminui IK50 vertė buvo 0.034 įiM. Tačiau šie du junginiai labai skiriasi toksiškumu. Fizostogmino dozių nuo 1.0 iki 2.5 mg/kg intraperitoninis įvedimas sukeldavo letalumą 50% testuotų gyvių, kai Junginio A dozė,iššaukianti 50% letalumą buvo tarp 40 ir 80 mg/kg. Taip pat stebėti žymūs skirtumai tarp Junginio A ir fizostigmino poveikio į širdies-kraujagyslių sistemą, kurie, matyt, buvo susiję su Junginio A noradrenerginiu poveikiu. Junginys A (100 p.M) stimuliavo [ 3H] norepinefrino (no-nadrenalino) išskyrimą in vitro, kai fizostigminas neturėjo tokio poveikio (žiūrėkit žemiau šio test metodo, naudoto [ 3H] norepinefino išskyrimo nustatymui, detales).
[0031] Cholinesterazė aptinkama visur kūne, smegenyse ir se-rume. Tačiau tik smegenų acetilcholinesterazės (AChE) pasiskirstymas yra koreliuotas su centrine cholinergine inervacija. Ta pati inervacija, manoma, yra susilpninta pas Alzheimerio ligonius. Mes nustatėme acetilcho-linesterazės aktyvumo slopinimą žiurkės striatume in vitro.
[0032] Acetilcholinesterazė (AChE), kuri kartais vadinama tikrąja ar specifine cholinesteraze, aptinkama neuro-nuose, skeleto raumenyse, lygiuosiuose raumenyse, įvai-riose liaukose ir eritrocituose. AChE gali būti at-skirta nuo kitų cholinesterazių pagal substrato ir inhibitoriaus specifiškumą ir pasiskirstymo sritį. Jos pasiskirstymas maždaug koreliuoja su cholinergine inervacija, o aukščiausio lygio subfrakcionavimas rastas nervinėse galūnėlėse.
[0033] Įprasta manyti, kad fiziologinis vaidmuo AChE yra greita hidrolizė ir acetilcholino inaktyvacija. AChE inhibitoriai rodo žymų cholinominetini, poveiki, cho-linergiškai inervuotuose efektoriniuose organuose ir naudojami terapijoje, gydant glaukomą, sunkias mioste-nijos formas ir paralini, žarnyno nepraeinamumą. Be to, neseni tyrimai parodė, kad AChE inhibitoriai gali taip pat būti naudingi, gydant Alzheimerio silpnaprotystę.
[0034] Žemiau aprašytas metodas buvo naudotas šiame išradime, nustatant cholinesterazės aktyvumą. Tai yra Ellman et al., Biochem. Pharmacol. 7,98 (1961) metodo modifika-cija .
[0035] i
[0036] (b) pripilti iki 100 ml 0.05 M fosfatinio buferio, pH
[0037] (a) 19.8 mg 5,5-ditiobisnitrobenzoinės rūgšties (DTNB)
[0038] (b) pripilti iki 100 ml 0.05 M fosfatinio buferio, pH
[0039] 4. Paimti 2 mM pradinio tirpalo testuojamų vaistų tinkamame tirpiklyje ir praskiesti iki tam tikro tūrio 0.5 mM DTNB tirpalu (3 reagentas) . Vaistus nuosekliai praskiesti (1:10), taip kad galinė koncentracija (kiuve-tėje) būtų 10~4 M, ir patikrinti aktyvumą. Jei aktyvi, tai IK50 vertės yra nustatomos iš inhibitorinio aktyvumo nuoseklios koncentracijų eilės.
[0040] Wistar žiurkių patinas, nupjovus galvą, greit išimami smegenys, išpjaunamas dryžuotas kūnas (striatum), pa-sveriamas ir homogenizuoj amas 19 tūrių (maždaug 7 mg proteino/ml) 0.05 M fosfatinio buferio, pH 7.2, naudojant PotterElvehjemo homogenizatorių. 25 mikrolitrus homogenato pridėti prie 1.0 mililitro tirpiklio arba prie įvairių koncentracijų testuojamų vaistų, ir pra-dinė inkubacija vykdoma 10 min. 37°C temperatūroje. C. Analaizė
[0041] Fermento aktyvumas matuojamas Beckmano DU-50 spektro-fotometru. Šis metodas gali būti naudojamas IK50 nustatymui ir konstantų išmatavimui.
[0042] Programų paketas Kinetics Soft-Pac Module # 598273 (10)
[0043] Kiuvetės - 2 ml kiuvetės, prie auto 6-pavyzdžių
[0044] Atskaita (tuščia kiuvetė) - 1 kiekvienai substrato koncentracijai
[0045] Laiko intervalas - 15 sekundžių (15 ar 30 sek kinetikai)
[0046] Braižyti - taip
[0047] Intervalas - autoskalė
[0048] Reagentus sudeda i, atskaitos ir pavyzdžių kiuvetes sekoj e:
[0049] Vaistai: 0.8 ml Fosfatinis buferis/DTNB/Vaistai/Fermentas
[0050] 0.8 ml Fosfatinis buferis/Substratas
[0051] Atskaitos vertės nustatomos kiekvienai prabai, kad kontroliuoti nefermentinę substrato hidrolizę, ir šios reikšmės yra automatiškai atimamos, naudojant kinetinį duomenų programos moduli, iš programų paketo. Ši programa taip pat išskaičiuoja kiekvienai kiuvetei absorb-cijos pakitimo greitį.
[0052] Substrato koncentracija yra 10 mM, analizės metu ją praskiedžia 1:2, kad gauti galinę koncentraciją 5 mM. DTNB pradinė koncentracija yra 0.5 mM, o galutinė - gauta 0.25 mM.
[0053] kontrolės atsilenkimas - vaistų atsilenkimas Slopinimo % = x 100
[0054] IK50 vertės išskaičiuotos iš logaritminės-tikimybinės priklausomybės.
[0055] 3h-norepinefrino įsavinimas žiurkės smegenyse arhipo-talamuso sinaptosomose.
[0056] Šie tyrimai naudoti kaip biocheminė atranka junginių, kurie blokuoja norepinefrino įsiurbimą. Neuroninis norepinefrino (NE) pakartotinio susiurbimo mechanizmas turi svarbią fiziologinę prasmę inaktyvuoj ant NE, kai transmiteris pašalinamas iš sinaptinio plyšio. NE su-siurbimą vykdo įsotinama, stereospecifinė, aukšto gimi-niškumo (Ka=lCT - 10~6 M), nuo natrio-priklausoma aktyvi transporto sistema, kuri egzistuoja tiek periferinės tiek ir centrinės nervų sistemos audiniuose, kaip pa-rodyta naudojant pjūvius, homogenatą ir grynintų si-naptosomų preparatus. NE susiurbimą stipriai slopina kokainas, fenetilaminas ir tricikliniai antidepre-santai. Be to ji, slopina ouabainas, metaboliniai inhibitoriai ir fenoksibenzaminas. NE įsiurbimo slopinimas, kuri, vykdo kliniškai efektyvus triciklis antide-presantas, yra svarbi grandis emocinių sutrikimų ka-techolamine j e hipotezėje.
[0057] Yra didelės regionalinės variacijos NE įsiurbimo, kurios koreliuoja su NE endogeniniais lygiais. Didžiau-sias NE lygis ir didžiausias jo įsiurbimas stebimas hipotalamuse (pagumburis). Šis regionas naudojamas to-lesniam aktyvių junginių testavimui smegenų prepara-tuose .
[0058] Sinaptosominis 3h-ne įsiurbimas yra naudingas kaip markeris noradrenerginių neuronų integralumui nustatyti po pažeidimo eksperimentų ir kaip testas junginiams, kurie stiprina ne veikimą, blokuodami pakartotinio įsiurbimo mechanizmą.
[0059] 1. Krebs-Henseleito Bikarbonato buferis, pH 7.4 (KHBB)
[0060]
[0061] 2. 0.32 M Sacharozės: 21.9 sacharozės, praskiesti iki 200 ml 3. L (-)-Norepinefrino bitartratas gaunamas iš komer-cinių šaltinių.. Pradinis tirpalas 0.1 mM gaminamas 0.01 N HC1. Jis reikalingas, kad praskiesti radiožymėto NE specifinį aktyvumą. 4. Levo-[ Žiedas-2,5,6-3H]-Norepinefrinas (40-50 kiu-ri/mmol) gautas iš komercinių šaltinių. Galinė H-NE koncentracija, reikalinga bandymui yra 50 nM. Praskie-i dimo faktorius yra 0.8; todėl KHBB padaromas taip, kad [ 3H] -NE sudarytų iki 62.5 nM.
[0062]
[0063] Wistar žiurkėms nupjovus galvas, greitai išimamos smegenys. Smegenys be smegenėlių ir hipotaiamuso yra pa-svertos ir homogenizuotos i, 9 tūrius ledinės 0.32 M sa-charozės, naudojant Potter-Elvej hemo homogenizatorių. Homogenizacija atliekama 4-5 judesiais aukštyn ir žemyn prie vidutinių greičių, kad minimalizuoti sinaptosomų sunaikinimą. Homogenatas centrifuguojamas prie 1000 g 10 min 0-4°C temperatūros. Paviršinė skysčio dalis, vadinamas supernatantas (Sx) , yra dekantuoj amas ir naudojamas įsiurbimo eksperimentams. D. Analizė
[0064] 20 mikrolitrų Tirpiklio ar atitinkamos vaistų koncentracijos
[0065] Mėgintuvėliai inkubuoti 37°C temperatūroje ir 95% 02/5%C02 atmosferoje 5 minutes. Kiekvienam bandymui 3 mė-gintuvėliai inkubuoti su 20 mikrolitrų tirpiklio 0°C temperatūroje ledo vonioje. Po inkubacijos visi mė-gintuvėliai nedelsiant centrifuguojami prie 4000 g - 10 minučių. Paviršinis skysčio sluoksnis nusiurbimas, o nuosėdos ištirpinamos , pridėjus 1 ml tirpinančio skys-čio. Mėgintuvėliai energingai kratomi, po to nufilt-ruojami i, scintiliacines ampules su 10 ml skysčių scinciliacijų skaičiavimo kokteilio ir skaičiuojami impulsai. Aktyvus įsiurbimas tai - skirtumas tarp impulsų min. 37°C ir 0°C temperatūroje. Kiekvienos vaistų koncentracijos procentinis slopinimas tai trijų matavimų vidurkis. IK50 vertės nustatomos iš logaritminės-tikimybinės analizės.
[0066] Tikslas: Aprašymų žemiau tyrimų tikslas buvo charak-terizuoti Junginio A kardiovaskulini, profili, ir paly-ginti su fizostigmino, standartinio acetilcholineste-razės inhibitoriaus, profiliu. (Detalės test metodų, naudotų nustatant aštrius kardiovaskulinius hemodinaminius efektus, pateiktos Išvadų sekcijoje) .
[0067] Sumariniai rezultatai: Junginys A įvestas intraveniškai (0.01 mg/min) anestezuotiems šunims neiššaukia pa-stebimos kardiovaskulinės depresijos, kuri stebima prie fizostigmino infuzijos, atliekamos ekvivalentiniu greičiu (žiūrėti 1 LENTELĘ). Faktiškai, Junginio A aukštesnės dozės (0.1 mg/kg/min, i, veną)' žymiai pa-didindavo širdies ir periferinių kraujagyslių matuotus parametrus (1 LENTELĖ). Šis hemodinaminis profilis yra kokybiškai artimas stebėtam, esant intarveniniam endo-geninių katecholaminų, norepinefrino injekcijoms. Taigi, kardiovaskuliniai atsakai i, Jungini, A taipogi ati-tinka rezultatus in vitro, rodančius, kad Junginys A didina spontanini, norepinef rino išmetimą iš simpatinių nervų galūnėlių.
[0068] Atlikti anestezuotų šunų atitinkami tyrimai, lyginant kardiovaskulinius efektus sukeltus Junginio A (0.1 mg/kg/min, intraveniškai) ir fizostigmino (0.01 mg/kg/min, intra-veniškai) laike alfa ir beta adrenerginių receptorių kombinuotos blokados. Fizostigmino infuzijos metu alfa ir beta receptorių blokados rezultate gauta stipri kardiovaskulinė depresija ir mirtis per 17-24 minutes 3 iš 3 šunų. Nebuvo stebima mirtis prie šių fizostigmino dozių, esant intaktiniams alfa ir beta adrenerginiams receptoriams.
[0069] Priešingai, alfa ir beta adrenerginė blokada sumažina pozityvius širdies ir hemodinaminius efektus, sukeltus Junginio A, dėl to vidutiniškai sumažėja kraujo spaudimas ir širdies minutinis išmetimas.
[0070] Aukštesnės fizostigmino dozės naudotos šiame tyrime sukeldavo veikimo potencialo paleidimo iš prieširdžio i skilveli, blokadą (A-V blokas) (1 LENTELĖ) . Nebuvo pastebėta su vaistais susijusių pakitimų elektrokar-diogramoje (EKG) prie 0.01-1.0 mg/kg/min intraveniškai įvedamų dozių junginio. A. Spaudimo padidėjimas dešiniajame prieširdyje (RAP) ir kairiame skilvelyje diastolės pabaigoje (LVEDP) stebėtas laike fizostigmino infuzijos (indikuoj antis širdies susitraukimo jėgos depresiją) nebuvo stebimas Junginio A infuzijos metu.
[0071] Išvados: Sumuoti aukščiau rezultatai leidžia manyti, kad nors Junginys A yra acetilceliuliozės inhibitorius šunims, jis turi unikalią savybę mažinti kardio-vaskulinę depresiją, stebėtą su standartiniu fizostog-minu. Be to, duomenys rodo funkcinių adrenerginių kompensacinių mechanizmų svarbą, mažinant ryškią kar-diovaskulinę depresiją, kurią iššaukia acetilcholi-nesterazės slopinimas.
[0072] METODAI NAUDOTI AŠTRIAM KARDIOVASKULINĖS DINAMIKOS ĮVERTINIMUI.
[0073] i
[0074] Skalikai abiejų lyčių buvo anestezuoti su Natrio tio-pentalu 15 mg/kg + Natrio barbitalas 200 mg/kg + 60 mg Natrio pentobarbitalas intraveniškai. Trachėja intu-buota su endotrachėjiniu vamzdeliu su manžete ir pri-jungta prie Harvardo kvėpavimo aparato su įkvėpimu 20 ml/į impulsą ir 10 impulsų/minutę. Dešinioji šlau-ninė arterija ir vena buvo atpreparuotos ir kanuliuotos su polietileno vamzdeliais, kad būtų galima matuoti arterini, kraujo spaudimą ir atlikti intravenines vaistų injekcijas, atitinkamai. Šie eksperimentai trunka 2 valandas po intraveninio vaistų įvedimo ir 3 valandas kai vaistai įvedami po oda.
[0075] Arterinė kaniulė buvo sujungra su Statham P23Gb da-vikliu. Kairio širdies skilvelio kateterizacija papil-doma įvedant Millerio spaudimo daviklį į kairiąją karotidinę arteriją ir perstumiant jį į kairį skilvelį. Kaniulė sujungta su Millerio TC-100 daviklio kontrolės vienetu, kuris prijungtas prie Beckmano įtam-pos/spaudimo impulsinio įrenginio. Spaudimas skilvelyje ir jo pirma išvestinė dP/dt matuojami simultaniškai, perduodant išėjimo signalą iš kairio skilvelio spaudimo fiksatoriaus į diferencijatorių. Širdies tūris (CO) nustatomas iš termoskiedimo technikos, naudojant ketur-angį srovės kateterį 7F Swap-Ganzo, kuris įvedamas į dešiniąją išorinę jungo veną, po to nustumiamas per viršutinę tuščiąją veną, dešinį prieširdį, per dešinį skilvelį į plaučių arteriją. Kateterio proksimalinė anga yra dešiniame prieširdyje, kai distalinė anga ir termistorius įkišti į plaučių arteriją. Signalai iš proksimalinės ir distalinės angų patenka į Statham P23
[0076] t
[0077] BB davikli,, kad matuotų spaudimą dešiniame prieširdyje (PAP). Širdies tūris nustatomas injekuojant 5 mi ledi-nės 5% gliukozės vandens tirpalo i, proksimalinę dalį
[0078] (dešinis prieširdis) ir po to išmatavus temperatūros pasikeitimą plaučių arterijoje. Naudojant Stewart-Hamiltono lygti,, širdies tūris gali būti nustatomas integruojant plotą po termopraskiedimo kreive su Edwards Cardiac Output Kornpjuteriu (modelis 9520). Širdies dažnis yra nustatomas su Beckmano kardiotachu, kuris iš arterinio spaudimo pulso spaudimo kreivės sumuoja spaudimo bangas. Registruojama EKG II deriva-cija. Visi šių signalų išėjimai yra pateikiami Beckmano R-611 registratoriuje. Šių parametrų matavimai duoda informaciją, todėl žemiau išvardinti tie, kurie gali būti tiesiogiai išmatuoti arba išskaičiuoti:
[0079] 8. Centrinis veninis spaudimas - CVP išmatuotas kaip spaudimas dešiniame prieširdyje (RAP) mmHg ar cm H20 9. Spaudimas kairiame skilvelyje diastolės pabaigoje -
[0080] Šis parametras yra geresnis miokardo susitraukimo būvio įvertinimas negu vienas dP/dt, nes jis yra santykinai nepriklausomas nuo širdies apkrovimo sąlygų (sec"1) .
[0081] Aštraus kardiovaskulinės hemodinamikos įvertinimo rezultatai Junginiui A ir fizostigminui yra pateikti 1 Len-telėje.
[0082] Šio išradimo junginių efektyvūs kiekiai gali būti pateikti pacientui bet kuriuo būdu, pavyzdžiui, per burną kaip kapsulė ar tabletė, parenterialiai kaip sterilūs tirpalai ar suspensijos, ir atskirais atvejais įvedami intarveniškai formoje sterilių tirpalų. Galutiniai pro-duktai kaip laisvos bazės, būdami patys savaime efek-tyvūs, gali būti suformuoti ir pateikti formoje far-
[0083] maciškai prieinamų rūgščių prijungimo druskų, stabilumo padidinimui, kristalizacijos patogumui, kad padidinti tirpstamumą ir panašiai.
[0084] Ruošiant farmaciškai prieinamas rūgščių prisijungimo druskas šiame išradime, naudojamos neorganinės rūgštys, tokios kaip vandenilio chlorido, vandenilio bromido, sieros, azoto, fosforo ir perchloro rūgštys, taip pat naudojamos organinės rūgštys, tokios kaip vyno, cit-rinos, acto, gintaro, maleino, fumaro ir oksalo rūgš-tys .
[0085] Šio išradimo aktyvūs junginiai gali būti oraliai įves-ti, su inertiniu tirpikliu ar su valgomu nešikliu, arba jie gali būti įterpti į želatinos kapsules, ar gali būti suspausti i, tabletes. Oraliniam terapiniam pa-teikimui, šio išradimo aktyvūs komponentai gali būti apjungti su užpildu ir panaudoti kaip tabletės, kap-sulės, eleksyrai, suspensijos, sirupai, pastilės, kram-toma guma ir panašiai. Šie parametrai turi sudaryti mažiausiai 0.5% aktyvaus junginio, bet kiekis gali varijuoti priklausomai nuo specifinės formos ir gali tradiciškai siekti nuo 4% iki 70% vieneto svorio. Kiekis aktyvaus junginio šiose kompozicijose yra toks, kad galima gauti tinkamą dozavimą. Pagal ši, išradimą palankiausios kompozicijos ir preparatai paruošti taip, kad" oralinis dozavimo vienetas sudaro nuo 1.0 iki 300 mi-ligramų aktyvaus junginio.
[0086] Tabletės, milteliai, kapsulės, pastelės ir kitos vaistų formos gali turėti įvairius ingredientus: surišiklį toki, kaip mikrokristalinė celiuliozė, tragakanto derva ar želatina, užpildą, toki, kaip krakmolas ar laktozė, dezintegratorinį agentą, tokį kaip algino rūgštis, Pri-mogėlis, kukurūzų krakmolas ir panašiai: tepalą tokį kaip magnio stearatas ar steroteksas; slidžių medžiagų kaip koloidinis silicio dioksidas ir saldų agentą, tokį
[0087] kaip sacharozė ar sacharinas, gali būti pridėtas skonio agentas toks kaip pipirmėtė, mentolo salicilatas ar apelsinų skonio medžiaga. Kai dozavimo vieneto forma yra kapsulė; be anksčiau aprašytų medžiagų dar gali būti skystas nešiklis toks kaip riebus aliejus. Kitos dozavimo vieneto formos gali turėti kitas įvairias me-džiagas, kurios modifikuoja fizinę dozavimo vieneto for-mą, kaip apvalkalas. Taigi, tabletės ar piliulės gali būti padengtos cukraus ar kitais vidinio apvalkalo agen-tais. Sirupas be aktyvių junginių dar gali turėti sa-charozę ar saldų agentą ir tam tikrus konservantus, da-žus, pigmentus ir kvapias medžiagas. Medžiagos, naudotos paruošiant šiuos įvairius dedamuosius, turi būti farmakologiškai švarios ir netoksiškos naudotais kiekiais.
[0088] Šio išradimo aktyvūs junginiai parenterialiniam terapiniam įvedimui gali būti inkorporuoti į tirpalą ar suspensiją. Šie preparatai gali turėti mažiausiai 0.1% aktyvaus junginio, bet tas kiekis gali varijuoti nuo 0.5 iki 30% svorio. Aktyvaus junginio kiekis tokioje kompozicijoje yra toks, kad būtų gautas tinkamas do-zavimas. Palankiausios kompozicijos ir preparatai pagal dabartinį išradimą paruošiami taip, kad parentalinis dozavimo vienetas sudarytų nuo 0.5 iki 100 miligramų aktyvaus junginio.
[0089] Tirpalai ar suspensijos gali taip pat turėti tokius komponentus: sterilų skiediklį, tokį kaip vanduo injekcijoms, fiziologinį tirpalą, kietas alyvas, polieti-lenglikolį, gliceriną, propilenglikolį ar. kitus sinte-tinius tirpiklius; antibakterinius agentus tokius kaip benziloalkoholis ar metilo parabenzas; antioksidantus tokius kaip askorbino rūgštis ar natrio bisulfitas; kompleksuojančius agentus tokius kaip etilendiami-notetraacto rūgštis; buferius tokius kaip acetatai, citratai ar fosfatai, ir toniškumo palaikymo agentas, tokius kaip natrio chloridas ar gliukozė. Parentaliniai preparatai gali būti pateikti švirkštu ar daugkartinio dozavimo ampulėmis, pagamintais iš stiklo ar plast-masės .
[0090] Žemiau pateikti šio išradimo junginių pavyzdžiai, įskai-tant kaip 3aR-cis izomerus, taip ir mišinius 3aS-cis ir 3aR izomerų, tame tarpe raceminius mišinius: (3aS-cis)-1, 2, 3,3a,8,8a-heksahidro-l,3s,8-trimetilpi-rolo [ 2,3-b] indol-5-olo (1,2,3,4,-tetrahidroizochinoli-nil)karbamatas;
[0091] (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2, 3-b] indol-5-olo (1, 2, 3, 4-tetrahidroizoc'ninoli-nil)karbamatas;
[0092] (3aS-cis)-1, 2, 3, 3a, 8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2, 3-b] indol-5-olo (1-etil-l,2,3,4-tetrahidroizo-chinolinil)karbamatas;
[0093] (3aS-cis)-l,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (1-propil-l,2,3,4-tetrahidroizo-chinolinil)karbamatas;
[0094] (3aS-cis) -1, 2, 3, 3a, 8, 8a-heksahi.dro-l, 3a, 8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (1-butil-l,2,3,4-tetrahidroizo-chinolinil)karbamatas;
[0095] (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (6-chloro-l,2,3,4-tetrahidroizo-chinolinil)karbamatas;
[0096] (3aS-cis)-l,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2, 3-b] indol-5-olo (7-chloro-l,2,3,4-tetrahidroizo-chinolinil)karbamatas;
[0097] (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (6-chloro-l-meti1-1,2,3, 4,-tet-rahidroizochinolinil)karbamatas;
[0098] (3aS-cis)-l,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (7-chloro-l-metil-l, 2, 3, 4-tet-rahidroizochinolinil)karbamatas;
[0099] (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (6-hidroksi-1, 2, 3, 4-tetrahidro-izochinolinil)karbamatas;
[0100] (3aS-cis)-l,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (7-hidroksi-l, 2, 3, 4-tetrahidro-izochinolinil)karbamatas;
[0101] (3aS-cis)-l,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3,8-trimetilpi-rolo[ 2, 4-b] indol-5-olo (6-hidroksi-l-metil-l, 2, 3, 4-tet-rahidroizochinolinil)karbamatas;
[0102] ir
[0103] (3aS-cis)-1,2,3,3ar 8,8a-heksahidro-l,3a,8-teimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (7-hidroksi-l-metil-l, 2, 3, 4-tet-rahidroi zochinolinil)karbamatas.
[0104] Toliau esantys pavyzdžiai pateikti šio išradimo ilius-tracijai .
[0105] 1 PAVYZDYS
[0106] (3aS-cis-l,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (1,2,3,4-tetrahidroizochinoli-nil)karbamatas
[0107] Degazuotas ezerolino (3.0 g) tirpalas 80 ml sauso dichlormetano veikiamas vienos porcijos l,l'-karbo-nildiimidazolo (2.7 g), maišant kambario temperatūroje. Po vienos valandos tirpalas buvo veikiamas su 1,2,3,4-tetrahidroizochinolinu (4.0 g) ir maišomas per naktį. Tirpalas sukoncentruotas ir nuosėdos išgrynintos su momentine chromatografija, gauta 2.8 g blyškios alyvos, kuri perkristalinus iš eterio davė 2.4 g baltų kristalų, lyd.t. 83-85°C.
[0108]
[0109] 2 PAVYZDYS
[0110] (3aS-cis)-1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-l,3a,8-trimetilpi-rolo[ 2,3-b] indol-5-olo (1-met.il-l, 2, 3, 4-tetrahidroizo-chinolinil)karbamatas
[0111] Degazuotas ezerolino (2,3 g) ir 1,11-karbonildi-imidazolo (2.1 g) tirpalas 60 ml sauso dichlormetano vieną valandą maišomas kambario temperatūroje. Šis tirpalas buvo veikiamas su 1-metil-l, 2,3,4-tetrahid-roizochinolinu (1.5 g) ir maišomas 40°C temperatūroje dvi valandas ir po to tas pat kiekis vadinamo izochi-nolino darinio buvo pridėtas ir tirpalas buvo maišomas virinant su grįžtamu šaldytuvu tris valandas. Tirpalas buvo sukoncentruotas, nuosėdos išgrynintos aliuminio oksidu chromatografinėj e kolonėlėje, gauta 2.0 g blyš-kios alyvos. Ši alyva buvo perkristalinta iš 50 ml 10:1 mišinio pentanas/eteris ir davė 1.6 g baltų kristalų, lyd.t. 105-108°C.
[0112]
1. Junginiai pagal (I) formulę,
2. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad R yra vandenilis ar metilas.
3. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad X yra vandenilis ar halogenas.
4. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad R yra vandenilis ar metilas, ir X yra vandenilis ar halogenas.
5. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(1,2,3,4-tetra-hidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis)izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
6. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetil-pirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(1-metil-l,2,3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
7. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetil-pirolo[ 2,3—b] indol-5-olo(1-etil-i,2,3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
8. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(1-propil-l,2,3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
9. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1, 3a, 8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo (1-butil-l, 2, 3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
10. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-beksahidro-1, 3a, 8-trimetilpirolo[ 2, 3—b] indol-5-olo (6-chloro-i, 2, 3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
11. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1, 3a, 8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo (7-chlo.ro-l, 2, 3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
12. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(6-chloro-l-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis)izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
13. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(7-chloro-l-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis)izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
14. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(6-hidroksi-l,2, 3,4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
15. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(7-hidroksi-l,2, 3, 4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis) izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
16. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(6-hidroksi-l-me-til-1,2,3,4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis)izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.
17. Junginys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad jis yra (3aS-cis)1,2,3,3a,8,8a-heksahidro-1,3a,8-trimetilpirolo[ 2,3-b] indol-5-olo(7-hidroksi-l-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolinil)karbamatas ar jo (3aR-cis)izomeras, ar dviejų izomerų mišinys.I