[LT] Peptidų dariniai, turintys vieną arba daugiau pakaitalų, atskirai prijungtų amido, amino arba sulfonamido jungtimi prie biologiškai veiklios peptidinės dalies N-terminalinio galo arba jos šoninės grandinės. Peptidų dariniai pasižymi didesniu biologiniu veiklumu negu atitinkami paprasti peptidai.
[EN] Peptide derivatives containing one or more substituents separately linked by an amide, amino or sulfonamide bond to an amino `group` on either the N-terminal end or side chain of a biologically active peptide moiety. The peptide derivatives have relatively enhanced biological activity when compared to the corresponding peptide alone.
[0001] Jau anksčiau buvo bandoma prailginti biologiškai veiklių peptidų veikimą. Pavyzdžiui, kad pailgėtų peptidų veikimo laikas, juos modifikuodavo chemiškai, sintezės metu įvesdami cukraus dalis [Sandoz, WO 88/02756; Sandoz, WO 89/09786; DE 3910667 Al, EPO 0 374 089 A2 (1990); ir Breipohl, US patentas Nr. 4.861.755 (1989)]. Stengiantis padidinti peptido gyvavimo laiką, taip pat buvo įvedami katįjoniniai inkarai [EPO 0 363 589 A2
[0002] (1990)] ir lipidinės dalys [Whittaker, WO 91/09837; Jung, US patentas Nr. 4.837.303 (1989)].
[0003] Apskritai, pagal mūsų išradimą yra gaunami biologiškai veiklių peptidų dariniai, turintys vieną arba daugiau pakaitalų, atskirai prijungtų prie aminogrupės N-terminaliniame gale arba prie šoninės grandinės peptidinėje dalyje. Taip modidikuoti dariniai pasižymi stipresniu ir ilgesniu biologiniu veikimu nei atitinkami nemodifikuoti peptidai.
[0004] Peptidų dariniai yra patrauklūs tuo, kad jie nebrangūs, pasižymi aukšto laipsnio biologiniu suderinamumu, neturi žalingo pašalinio poveikio ir yra suderinami su įvairiais terapinio gydymo būdais. Daugelis darinių, kurių peptindinę dalį sudaro somatostatinas, ypač sustiprina poveikį ir atrankumą, lyginant su nemodifikuotu somatostatinu.
[0005] Vienu požiūriu, išradimas yra susijęs su peptidų dariniu, turinčiu biologiškai veiklią peptidinę dalį ir prie jos prijungtą mažiausia vieną pakaitalą; pakaitalas pasirenkamas iš grupės, sudarytos iš I, II ir III junginio, kur I junginys yra apibūdinamas formule
[0006]
[0007] R0 yra O, S arba NR5, kur R5 yra H arba (C,-C6)alkilas;
[0008] kiekvienas iš R į ir R2, nepriklausomai, yra H, (CH2 )mOR6 arba CH(OR7)CH2OR8, kur R6 yra H arba (C2-C7)acilas, ir kiekvienas iš R7 ir Rs, nepriklausomai, yra H, (C2-C7)acilas arba C(R9)(R|0), kur kiekvienas iš R9 ir R10, nepriklausomai, yra H arba (CrC6)alkilas;
[0009] arba
[0010] bet kuris iš Rį ir R2 yra =CHCH2ORį į , kur kiekviename iš Rt ir R2,
[0011] nepriklausomai, Rj j yra H arba (C2-C7)acilas ir m yra natūrinis skaičius nuo 1 iki 5 imtinai; ir
[0012] vienas iš R3 arba R4 yra (CH2 )nR12 arba (CH2 )nCH(OH)RI2, kuriuose R12 yra CO, CH2 arba S02, ir n yra natūrinis skaičius nuo 1 iki 5 imtinai; ir likęs R3 arba R4 yra H, (C1-C6)hidroksialkilas arba (C2-C7)acilas; ir
[0013]
[0014] bet kuris iš R13, R14 ir R15, nepriklausomai, yra H arba (C2-C24)acilas;
[0015] R16 yra NH arba jo nėra;
[0016] R17 yra CO, O arba jo nėra;
[0017]
[0018] R!9 yra H, NH2, aromatinė funkcinė grupė, OH, (CpC^hidroksialkilas, H(R27)(R28), S03H arba jo nėra, kur bet kuris iš R27 ir R28, nepriklausomai, yra H arba (CrC6)alkilas; R20 yra O arba jo nėra; R21 yra (CrC6)alkilas arba j o nėra; R22 yra N, CH, O arba C; -R23- yra (CrC6)alkilas arba jo nėra;
[0019] R-24 yra N, CH arba C;
[0020] R25 yra NH, O arba jo nėra;
[0021] R26 yra S02, CO, CH2 arba jo nėra;
[0022] m yra natūrinis skaičius nuo 0 iki 5 imtinai;
[0023] n yra natūrinis skaičius nuo 0 iki 5 imtinai;
[0024] I, II ir III junginiuose peptidinė dalis yra prijungta prie pakaitalo CO-N, CH2-N arba S02-N jungtimis, būtent tarp pakaitalo ir minėtosios peptidinės dalies azoto atomo N-terminaliniame gale arba šoninės grandinės.
[0025] Pagal geresnius išradimo atvejus -R23- yra (CrC6)alkilas; R22 yra N, C arba CH; ir R24 yra C. Pasirenkant kitaip, R22 yra O; o R19, R20, R21 ir -R23- nėra; bei m ir n suma yra 3, 4 arba 5.
[0026] Pagal kitus geresnius išradimo atvejus pakaitalas yra junginys I; šiuo atveju geriau, kai R12 yra CH2 arba S02. Pasirenkant kitaip, pakaitalu gali būti junginys II, ir tuo atveju geriau, kai R]8 yra CH2 arba S02; R13, R14 ir R15 yra H; ir R17 nėra. Pagal ypatingai gerus atvejus pakaitalas yra (H0CH2)3C-NH-(CH)2-S02 arba (HOCH2)3C-CH2.
[0027] Pagal dar kitus išradimo atvejus pakaitalas yra junginys III; ir šiuo atveju geriau, kai
[0028]
[0029] Geriau, kai peptidinė dalis yra pasirenkama iš grupės, kurią sudaro somatostatinas, bombezinas, kalcitoninas, su kalcitonino genu susijęs peptidas (CGRP), amilinas, paratiroidinis hormonas (PTH), gastriną atpalaiduojantis peptidas (GRP), melanocitą stimuliuojantis hormonas (MSH), adrenokortikotropinis hormonas (ACTH), su paratiroidu susietas peptidas (PTHrP), geltonkūnio susidarymo hormoną atpalaiduojantis hormonas (LHRH), augimo hormoną atpalaiduojantis faktorius (GHRF), augimo hormoną atpalaiduojantis peptidas (GHRP), cholecistokininas (CCK), gliukagonas, bradikininas, gliukagono tipo peptidas (GLP), gastrinas, enkefalinas, neuromedinai, endotelinas, medžiaga P, neuropeptidas Y (NPY), peptidas YY (PYY), vazoaktyvus žarnyno peptidas (VIP), guanilinas, hipofizės adenilatciklazę aktyvuojantis polipeptidas (PACAP), beta-Iąstelių tropinas, adrenomedulinas ir jų dariniai, fragmentai bei analogai.
[0030] Geriau, kai peptidinė dalis yra somatostatinas arba jo darinys, fragmentas arba analogas. Geriausia, jei somatostatino analogas yra vienas iš šių junginių: H-D-Phe-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2, H-D-Phe-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-Nal-NH2 ir H-D-Nal-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2. Pasirenkant kitaip, peptidine dalimi gali būti bombezinas arba jo darinys, fragmentas arba analogas.
[0031]
[0032] Kitu požiūriu, pagal išradimą yra gaunamas dimerinis peptidų darinys, turintis dvi biologiškai veiklias peptidines dalis, ir bent vieną pakaitalą, prijungtą prie kiekvienos peptidinės dalies. Pakaitalas yra pasirenkamas iš grupės, susidedančios iš IV ir V junginių, kur IV junginio bendroji sandara yra tapati I junginio sandarai, o V junginio bendroji sandara - tapati III junginio sandarai. Kiekviena dimero peptide dalis yra prijungta prie pakaitalų CO-N, CH2-N arba SO2-N jungtimi tarp pakaitalo ir azoto atomo N-terminaliniame gale arba vienos iš peptidės dalies šoninių grandinių.
[0033] Dar kitu požiūriu, išradime kalbama apie ligos, pavyzdžiui, vėžio, gydymo būdą; būdas apima čia aprašytų peptidų darinių skyrimą pacientui terapinėmis dozėmis. Geriau, kai gydymui vartojama peptidinė dalis yra somatostatinas.
[0034] Išradime vartojama sąvoka "biologiškai veiklus" reiškia natūralų, rekombinantinį ir sintetinį peptidą, pasižymintį fiziologiniu arba terapiniu aktyvumu. Apskritai, ši sąvoka jungia visus biologiškai veiklius peptidų darinius, fragmentus ir analogus, kurie pasižymi kiekybiškai panašiu arba priešingu veikimu, lyginant su nemodifikuotų peptidų poveikiu.
[0035] Prie aprašymo pridedamoje figūroje yra pavaizduotas ląstelių AR42J dviejų augimo kreivių, esant skirtingiems somatostatino dariniams, grafikas.
[0036] Apskritai, išradimo peptidų dariniai susideda iš dviejų komponentų: 1) biologiškai veiklaus peptido; ir 2) bent vieno pakaitalo, turinčio I, II ir III junginių sandarą. Peptidų dariniuose, gaunamuose pagal išradimą, yra junginių, kurie aprašyti toliau.
[0037] kuriuose R)9, R2o, R21, R22> R-23> R24, R25, R26> m> n> P ir NH-P' yra apibrėžti aukščiau.
[0038] Papildomai aukščiau pateiktiems, pagal išradimą gaunami junginiai yra peptidų dariniai, kurie turi du arba daugiau pakaitalų, prijungtų vienoje peptidinėje dalyje. Šie išradimo atvejai apima biologiškai veiklių peptidų darinius, turinčius daugiau nei vieną laisvą amino grupę, pvz., lizino liekaną.
[0039] Pagal išradimą taip pat yra gaunami dimeriniai peptidų dariniai, sudaryti iš dviejų peptidinių dalių, prijungtų prie vieno pakaitalo, pvz., du bradikinino analogai, prijungti prie V junginio pakaitalo.
[0040] Išradimo peptidų dariniai yra biologiškai veiklių peptidų dariniai, pasirenkami iš grupės, kurią sudaro: somatostatinas, bombezinas, kalcitoninas, su kalcitonino genu susietas peptidas (CGRP), amilinas, paratiroidinis hormonas (PTH), gastriną atpalaiduojantis peptidas (GRP), melanocitą stimuliuojantis hormonas (MSH), adrenokortikotropininis hormonas (ACTH), su paratiroidu susietas peptidas (PTHrP), geltonkūnio susidarymo hormoną atpalaiduojantis hormonas (LHRH), augimo hormoną atpalaiduojantis faktorius (GRF), augimo hormoną atpalaiduojantis peptidas (GHRP), cholecistokininas (CCK), gliukagonas, bradikininas, gliukagono tipo peptidas (GLP), gastrinas, enkefalinas, neuromedinai, endotelinas, medžiaga P, neuropeptidas Y (NPY), peptidas YY (PYY), vazoaktyvus žarnyno peptidas (VIP), guanilinas, hipofizės adenilatciklazę aktyvuojantis polipeptidas (PACAP), beta-ląstelių tropinas, adrenomedulinas ir bet kurio jų dariniai, fragmentai bei analogai.
[0041] Ypač geri išradimo atvejai yra tie, kai peptidinę dalį sudaro somatostatinas arba jo darinys, fragmentas arba analogas. Somatostatino analogai, kurie gali būti panaudojami pagal šį išradimą, jungia, nors jais ir neapsiriboja, žemiau išvardintus junginius:
[0042]
[0043] Aukščiau išvardinti peptidų junginiai yra aprašyti žemiau pateikiamame literatūros sąraše, kuriame kiekvienas jų turi atitinkamą nuorodą: EP paraiška Nr. P5 164 EU; Van Binst G. et al. Peptide Research 5:8 (1992); Horvath A. et al. Tezės, "Somatostatino analogų, pasižyminčių priešaugliniu aktyvumu, konformacijos", 22-asis Europos peptidų simpoziumas, Rugsėjo 13-19, 1992, Interlaken, Šveicarija; PCT paraiška W0 91/09056 (1991); EP paraiška 0 363 589 A2 (1990); EP paraiška 0 203 031 A2 (1986); US patentai Nr.
[0044] 4.904.642; 4.871.717; 4.853.371; 4.725.577; 4.684.620; 4.650.787; 4.603.120; 4.585.755; 4.522.813; 4.486.415; 4.485.101; 4.435.385; 4.395.403; 4.369.179; 4.360.516; 4.358.439; 4.328.214; 4.316.890; 4.310.518; 4.291.022; 4.238.481; 4.235.886; 4.224.190; 4.211.693; 4.190.648; 4.146.612 ir 4.133.782.
[0045] Aukščiau išvardintuose somatostatino analoguose kiekvieno aminorūgšties likučio struktūrinė formulė yra NH-C(R)H-CO-, kurioje R reiškia šoninę grandinę; brūkšneliai tarp aminorūgščių grupių atitinka peptidinę jungtį, jungiančią aminorūgštis. Jei aminorūgštis yra optiškai aktyvi, tai laikoma, kad ji L-tipo simetrijos; specialiai pažymima, jei esama D-tipo simetrijos. Kai peptidas turi du Cys likučius, tuomet tarp dviejų dalių susidaro disulfidiniai tilteliai. Beje, pastaroji jungtis nėra parodyta aukščiau išvardintuose likučiuose.
[0046]
[0047] kurioje Ai yra p-Nal D- arba L-izomeras, Trp, P-piridil - Ala, Phe, pakeistas Phe, arba ji pašalinta; kiekviena iš A2 ir A7 grupių, nepriklausomai, yra Cys, Asp arba Lys. Šios dalys viena su kita yra kovalentiškai surištos disulfidiniais arba amidiniais tilteliais. Be to, A3 yra |3-Nal, Phe, arba o-, m-, arba p-pakeistas X-Phe, kur X yra halogenas, OH, NH2, N02 arba C^alkilas; A6 yra Vai, Thr, Ser, Ala, Phe, P-Nal, Abu, Ile, Nle arba Nva; ir A8 yra Phe, Thr, Tyr, Trp, Ser, P-Nal, alkoholio grupė, arba ji pašalinta; kiekvienas iš R į ir R2, nepriklausomai, yra H, žemesnysis acilas arba žemesnysis alkilas; ir R3 yra OH, NH2 arba pašalintas. Geriau, kai viena iš A2 ir A7 grupių yra Cys, kita taip pat yra Cys; kai A8 yra a-aminoalkoholis, R3 pašalintas; ir kai nei A2, nei A7 nėra Cys, A2 skiriasi nuo A7.
[0048]
[0049] Kitais atvejais išradimo linijiniai somatostatino analogai apibudinami tokia struktūrine formule:
[0050] A1 yra Ala D- arba L-izomeras, Leu, Ile, Vai, Nle, Thr, Ser, P-Nal, [3-piridil-Ala, Trp, Phe, 2,4-dichlor-Phe, pentafluor-Phe, p-X-Phe arba o-X-Phe, kur X yra CH3, Cl, Br, F, OH, OCH3 arba N02;
[0051] A2 yra Ala, Leu, Ile, Vai, Nle, Phe, [3-Nal, piridil-Ala, Trp, 2,4-dichlor-Phe, pentafluor-Phe, o-X-Phe arba p-X-Phe, kur X yra CH3, Cl, Br, F, OH, OCH3 arba NO2;
[0052] A yra piridil-Ala, Trp, Phe, P-Nal, 2,4-dichlor-Phe, pentafluor-Phe, o-X-Phe, arba p-X-Phe, kur X yra CH3, Cl, Br, F, OH, OCH3 arbaN02;
[0053] A6 yra Vai, Ala, Leu, Ile, Nle, Thr, Abu arba Ser;
[0054] A7 yra Ala, Leu, Ile, Vai, Nle, Phe, P-Nal, piridil-Ala, Trp, 2,4-dichlor-Phe, pentafluor-Phe, o-X-Phe arba p-X-Phe, kur X yra CH3, Cl, Br, F, OH, OCH3 arba N02;
[0055] A8 yra Ala D- arba L-izomeras, Leu, Ile, Vai, Nle, Thr, Ser, Phe, P-Nal, piridil-Ala, Trp, 2,4-dichlor-Phe, pentafluor-Phe, p-X-Phe arba o-X-Phe, kur X yra CH3, Cl, Br, F, OH, OCH3 arba N02, arba jų alkoholis; ir
[0056] kiekvienas iš R] ir R2, nepriklausomai, yra H, žemesnysis acilas arba žemesnysis alkilas; ir R3 yra OH, NH2 arba pašalintas. Geriau, kai bent viena iš A1 ir A8 ir viena iš A2 ir A 7 grupių tikrai yra aromatinė aminorūgštis; ir kai A 8 yra alkoholis, R3 yra pašalintas. Be to,
[0057] 1278 * * •• •• ••
[0058] A , A , A ir A negali visos būti aromatinėmis aminorugštimis. Ypatingai geri šiuo požiūriu išradimo analogai yra:
[0059] Dar kituose geresniuose atvejuose peptidinę dalį sudaro bombezinas arba jo darinys, fragmentas arba analogas. Bombezino analogai, kuriuos pagal šį išradimą galima naudoti, neribojant ir kitų panaudojimo, yra neuromedinas C, neuromedinas B, litorinas bei gastriną atpalaiduojantis peptidas (GRP), turintys šią aminorūgščių seką:
[0060] Kiti bombezino analogai, kuriuos galima butų panaudoti pagal šį išradimą, yra aprašyti literatūroje; ši medžiaga yra pateikta žemiau išvardintose nuorodose: Coy et al., Peptides. Proceedings of the Eleventh Amer. Peptide Symposium, Ed. by Rivier et al. ESCOM, pp. 65-67 (1990); Wang et al., J. Biol. Chem. 265:15695 (1990); Mahmoud et al., Cancer Researh 51:1798 (1991); Wang et al., Biochemistiy 29:616 (1990); Heimbrook et al., "Synthetic Peptides: Approaches to Biological Problems (Sintetiniai peptidai: įvadas į biologines problemas)", UCLA Symposium on Mol. and Cell. Biol. Nevv Series, 86, ed. Tam & Kaiser; Martinez et al., J. Med. Chem. 28:1874 (1985); Gargosky et al., Biochem. J. 247:427 (1987); Dubreuil et al., Drug Design and Delivery, 2:49, Harvvood Academic Publishers, GB (1987); Heikkila et al., J. Biol. Chem. 262:16456 (1987); Caranikas et al., J. Med. Chem. 25:1313 (1982); Saeed et al., Peptides 10:597 (1989); Rosell et al., Trends in Pharmacological Sciences 3:211 (1982); Lundberg et al., Proc. Nat. Aca. Sci. 80:1120 (1983); Engberg et al., Nature 293:222 (1984); Mizrahi et al., Euro. J. Pharma. 82:101 (1982); Leander et al., Nature 294:467 (1981); Woll et al., Biochem. Biophys. Res. Comm. 155:359 (1988); Rivier et al., Biochem. 17:1766 (1978); Cuttitta et al., Cancer Surveys 4:707 (1985); Aumelas et al., Int. J. Peptide Res. 30:596 (1987); Szepeshazi et al., Cancer Research 51:5980 (1991); Jensen et al. Trends Pharmacol. Sci. 12:13 (1991); JAV patentų Nr.Nr. 5.028.692; 4.943.561; 4.207.311; 5.068.222; 5.081.107; 5.084.555; EP paraiškų Nr.Nr. 0 315 367 A2 (1989); 0 434 979 Al (1991); 0 468 497 A2 (1992); 0 313 158 A2 (1989); 0 339 193 Al (1989); PCT paraiškų Nr.Nr. W090/01037 (1990); 90/02545 (1992); ir GB paraiška 1 231 051 A (1990).
[0061] Išradimo peptidai gali būti gaunami farmacijai tinkamu druskų pavidalu. Geresnių druskų pavyzdžiai yra tie, kurie gaunami panaudojant tinkamas terapijai organines rūgštis, kaip antai, acto, pieno, maleino, citrinos, obuolių, askorbino, gintaro, benzoinės, salicilo, metansulfoninę, toluensulforūgštį, arba palmitino, o taip pat polimerines rūgštis, pvz., tanino rūgštį arba karboksimetilceliuliozę, neorganinių rūgščių, kaip antai, vandenilio halogenidų, tame tarpe vandenilio chlorido, sieros ir fosforo rūgščių, druskas.
[0062] Junginiu sintezė
[0063] BOP: benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamin)fosfonio
[0064] HBTU: 0-benzoptriazol-l-il,N,N,N',N'- tetrametiluronio
[0065] Pradinės ir tarpinės medžiagos I, II, ir III junginių, sintezei yra gaunamos prekybos tinkle. Jei kurių pradinių medžiagų nėra, jos gali būti nesunkiai pagaminamos, taikant gerai žinomas ir literatūroje aprašytas metodikas. Pavyzdžiui, su askorbino rūgštimi susijusių darinių cheminius duomenis galima rasti šiuose leidiniuose: J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1:1220 (1974); Carbohyd. Res., 67:127 (1978); Yakugaku Zasshi, 86:376 (1966); JAV patente Nr. 4.552.888; J. Med. Chem., 31:793 (1988); ten pat 34:2152 (1991) ir 35:1618 (1992), kurie yra įtraukti į pateiktųjų nuorodų sąrašą. Panašiai, tris-darinių cheminius duomenis galima rasti leidiniuose: Arch. Biochem. Biophy. 96:653 (1962), Biochem., 5:467 (1966), kurie taip pat yra įtraukti į pateiktųjų nuorodų sąrašą.
[0066] Peptidu dariniu sintezė
[0067] Bendrai kalbant, I, II ir III junginių prijungimas prie atitinkamos laisvos aminogrupės apsaugą turinčioje aminorūgštyje arba peptido gali būti atliktas, taikant gerai žinomus peptidų
[0068] (pvz., DCC, DCC-HOBT, DIC-HOBT PPA, EDC-HOBT, DEPT, BOP, HBTU) sintezės būdus, kai naudojama bazė (pvz., DIEA) inertiniame tirpiklyje (pvz., DMF, THF arba CH2CI2 etilacetatas arba jų derinys). Apsaugos pašalinimą nuo saugomų grupių taip pat galima atlikti gerai žinomų metodikų pagalba (pvz., grupės pašalinimas pridedant rūgšties arba bazės, TFA, dioksano-HCl, amonio, NaOMe, piperidino). Daugelyje atvejų reakcijos temperatūra turėtų būti nuo -30°C iki kambario.
[0069] Apskritai, pirmajame sintezės etape yra vykdoma reakcija tarp epoksido ir laisvosios aminogrupės, esančios apsaugotoje aminorūgštyje arba peptide; komplekso sudarymas ir apsaugos pašalinimas gali būti atliekamas gerai žinomų metodikų pagalba, aprašytų, pavyzdžiui, McManus et al., Synth. Communications 3:177 (1973) straipsnyje, kurio turinys čia įtraukiamas, jį cituojant. Tęsiant sintezę, tarpinių junginių ir produktų gryninimas atliekamas įprastais metodais, kaip antai, chromatografijos ir aukštos skiriamosios gebos skystinės chromatografijos (HPLC). Junginiai identifikuojami taikant įprastas metodikas, kaip antai, branduolių magnetinio rezonanso, aminorūgščių analizės ir masių spektrometrijos.
[0070] 1 pavyzdys. Somatostatino dariniu sintezė
[0071] Pagal išradimą buvo sintezuojamas šis somatostatino darinys, čia taip pat turintis pavadinimą BIM-23118:
[0072]
[0073] Acetilchlorido (0,67 ml) pridedama į greitai maišomą askorbino rūgšties (8,0 g), ištirpintos acetone (80 ml), tirpalą ir gautas mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Surinkus nuosėdas filtruojant, praplovus etilacetatu ir išdžiovinus sumažintame slėgyje yra gaunama 8,29 g bespalvės kietos medžiagos pavidalo 5,6-0-izopropilidenaskorbino rūgšties. TLC - silikagelis: CHCl3/MeOH/HOAC [3:1:0,1], Rf=0,54. 1. 4 pavyzdys. 3- 0-( etoksikarbonilpropil)- 5, 6- izopropilidenaskorbino rūgštis 5,6-izopropilidenaskorbino rūgšties (2,0 g), ištirpintos 10 ml DMF, tirpalo sulašinama į NaH (0,44 g 50% mineralinės alyvos NaH dispersija, praplauta kelis kartus heksanu), ištirpinto 5 ml DMF, suspensiją. Pasibaigus dujų išsiskyrimui sulašinama 1,43 ml etil-4-brombutirato, ištirpinto 5 ml DMF tirpalo, ir mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tirpiklis išgarinamas sumažintame slėgyje ir gautos nuosėdos chromatografuojamos silikagelyje (55 g), naudojant CHCl3/MeOH (19:1) eliuentą. Atskyrus atitinkamas frakcijas ir pašalinus tirpiklius gaunamos klampios nuosėdos, turinčios 3-0-(etoksikarbonilpropil)-5,6-izopropilidenaskorbino rūgšties (1,1 g). 1. 5 pavyzdys. 3- 0-( karboksipropil)- 5, 6- izopropilidenaskorbino rūgštis Į 3-0-(etoksikarbonilpropil)-5,6-izopropilidenaskorbino rūgšties (1,02 g), ištirpintos 15 ml EtOH, tirpalą pridedama 4,6 ml 2N NaOH. Po valandos didesnioji etanolio dalis yra pašalinama sumažintame slėgyje, nuosėdos praskiedžiamos vandeniu (10 ml) ir parūgštinamos praskiestu HC1 (pH 3) tirpalu. Tuomet tirpalas prisotinamas NaCl ir kelis kartus ekstrahuojamas etilacetatu; gauti ekstraktai džiovinami, naudojant MgS04. Išgarinus tirpiklį sumažintame slėgyje gaunamos klampios nuosėdos, turinčios 3-0-(karboksipropil)-5,6-izopropilidenaskorbino rūgšties (0,84 g). TLC - silikagelis: CHCl3/MeOH/HOAC [5:1:0,1], Rf=0,55. 1. 6 pavyzdys. D- Nal- c[ Cvs- Tvr- D- Trp- LvsfBOCVVal- Cysl- Thr- NH?
[0074] Ditretbutildikarbonato (0,36 g), ištirpinto 10 ml DMF tirpalo, sulašinama į D-Nal-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2 acetato (2 g, BIM-23014), ištirpinto 45 ml DMF, tirpalą. Išlaikius dvi valandas kambario temperatūroje, sumažintame slėgyje yra pašalinamas tirpiklis ir gaunamos nuosėdos, kurios chromatografuoj amo s silikagelyje (150 g), naudojant CHCVMeOH (9:1) eliuentą. Atskyrus atitinkamas frakcijas ir pašalinus tirpiklius gaunamos nuosėdos, turinčios D-Nal-c[Cys-Tyr-D-Trp- Lys(BOC)-Val-Cys]-Thr-NH2 (1,45 g). TLC - silikagelis: CHCl3/MeOH [3:1], Rf=0,52.
[0075]
[0076] 0,2 ml diizopropiletilamino pridedama į D-Nal-ciklo-[Cys-Tyr-D-Trp-Lys(BOC)-Val-Cys]-Thr-NH2 (300 mg), 3-0-(karboksipropil)-5,6-izopropilidenaskorbino rūgšties (56 mg) ir HBTU (113 mg), ištirpintų 5 ml DMF, tirpalą. Mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį, po to sumažintame slėgyje pašalinamas tirpiklis. Nuosėdos paskirstommos tarp etilacetato/MeOH mišinio ir sočiojo vandeninio NaCl tirpalo, etilacetato sluoksnis plaunamas sočiuoju vandeniniu NaCl tirpalu, sočiuoju vandeniniu NaHC03 tirpalu ir tuomet išdžiovinamos (MgS04). Tirpiklis išgarinamas sumažintame slėgyje ir nuosėdos apdorojamos preparatyvinės TLC būdu, naudojant išskiriančiuoju tirpikliu CHCl3/MeOH (8:1) mišinį. Atitinkama UV spinduliams jautri zona atskiriama ir ekstrahuojama naudojant CHCl3/MeOH. Sumažintame slėgyje pašalinus tirpiklį yra gaunamas skyrelio pavadinime minimas produktas (0,20 g). TLC - silikagelis: CHCl3/MeOH [5:1], Rf=0,54.
[0077] Askorbino rūgšties darinys, turintis D-Nal-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys(BOC)-Val-Cys]-Thr-NH2 (95 mg) ir parodytas aukščiau, yra veikiamas 45 min. kambario temperatūroje 25% TFA, ištirpintos CHC13, tirpalu. Pašalinus lakiąsias medžiagas sumažintame slėgyje yra gaunamos sausos nuosėdos, kurios gryninamos, naudojant Vydac C)8 HPLC ir CHCN/0,1 % vandeninį TFA tirpalą. Galutinė išeiga - 90 mg (FAB-MS (m/e) 1341).
[0078]
[0079] Pagal išradimą yra sintezuojamas žemiau parodytas somatostatino darinys, taip pat vadinamas BIM-23107:
[0080]
[0081] 30 mg aukščiau gauto junginio yra veikiama 45 min. kambario temperatūroje 50% TFA, ištirpinto CHC13, tirpalu; sumažintame slėgyje pašalinus lakiąsias medžiagas, susidaro nuosėdos. Likę TFA pėdsakai šalinami kelis kartus garinant kartu su etanoliu, nuosėdos ištrinamos su eteriu, po to džiovinamos ir gaunama 30 mg produkto. TLC - silikagelis: CHCl3/MeOH/HOAc [3:1:1], Rf=0,24.
[0082]
[0083] Pagal išradimą yra sintezuojamas žemiau parodytas somatostatino darinys, taip pat vadinamas BIM-23201:
[0084] Du gramai prasijoto pro 3A molekulinį sietą ir NaCNBH3 (36 mg) pridedama dalimis kas 15 min. į ištirpintų metanolyje (10 ml), kuriame yra 10% acto rūgšties, D-Phe-c[Cys-Tyr(OBt)-D-Trp-Lys(BOC)-Thr(OBt)-Cys]-Nal-NH2 (250 mg) ir tris-(acetoksimetil)acetaldehido (120 mg), gautų oksiduojant triacetilpentaeritritolį piridino dichromatu arba DMSO/oksalilchloridu/trietilaminu, tirpalą. Tuomet mišinys maišomas kambario temperatūroje 30 min. ir šildomas 4 vai. Nufiltravus, nuosėdos paskirstommos tarp etilacetato ir vandens. Etilacetato sluoksnis praplaunamas vandeniu, vandeniniu NaHC03 tirpalu ir po to išdžiovinamas (MgS04). Išgarinus tirpiklį sumažintame slėgyje gaunamos nuosėdos (0,4 g), kurios ištirpinamos metanolyje (5 ml), paveikiamos NaOMe/MeOH tirpalu (pH 10), maišomos 1 vai. ir galiausiai nustatomas tirpalo pH 5-6, pridedant 1 N HC1. Išgarinus tirpiklį, nuosėdos ištirpinamos 90% vandeniniame TFA tirpale (5 ml) ir maišoma 30 min. Lakiosios medžiagos pašalinamos sumažintame slėgyje, o TFA bei vandens pėdsakai - garinant kartu su alkoholiu (2 x). Nuosėdos išdžiovinamos, tuomet ištrinamos su eteriu, ir galiausiai gryninamos chromatografiškai (HPLC) panašiose į anksčiau aprašytąsias sąlygose. Taip gaunama 41 mg bespalvės kieto pavidalo medžiagos - (HO-CH2)3-C-CH2-D-Phe-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-Nal-NH2. MS (m/e) 1262,8.
[0085] Pagal išradimą yra sintezuojamas žemiau parodytas somatostatino darinys, taip pat vadinamas BIM-23195:
[0086] Pagal išradimą yra sintezuojamas žemiau parodytas somatostatino darinys, taip pat vadinamas BIM-23197:
[0087] Ledo vonioje natrio 2-brometansulfonatas (4,0 g) paveikiamas PC15 (11,8 g). Susidarius skystąjai fazei, tirpalas kaitinamas aliejuje 1,5 vai. 90-120°C, po to atvėsinamas iki kambario temperatūros, užpilamas ant 50 g sugrūsto ledo ir maišomas 15min. Mišinys ekstrahuojamas CH2C12 tirpalu (3 x 30 ml), gauti ekstraktai sujungiami ir plaunami vandeniu (2 x), 5% NaHC03 (2 x) ir vėl du kartus vandeniu. Po džiovinimo bevandeniu MgS04 ir distiliacijos sumažintame slėgyje gaunamas bespalvis skystis - 2-brometansulfonilchloridas (1,95 g, 42-44 °C/1 mm Hg).
[0088] 4. 2 pavyzdys. Br- CCH^- SO^- D- Phe- crCvs- Tyr- ftBul- D- Trp- LysCBoeVAbu-Cvs1- Thr( tBu)- NH( 1 - ciklopropil- 1 - metiDetilas
[0089] 2- brometansulfonilchlorido (30 mg), ištirpinto DMF (1 ml), tirpalas sulašinamas į. H-D-Phe-c[Cys-Tyr-(tBu)-D-Trp-Lys(Boc)-Abu-Cys]-Thr(tBu)-(l-ciklopropil-l-metil)etilo (150 mg) ir DIEA (55 mg), ištirpintų DMF (2 ml), tirpalą N2 atmosferoje 0°C temperatūroje. Reakcijos tirpalas maišomas 0-5°C temperatūroje 3 vai., po to tirpiklis pašalinamas sumažintame slėgyje. Nuosėdos ištirpinamos etilacetate ir praplaunamos 5% citrinos rūgštimi (2 x), 5% NaHC03 (2 x) ir sūrymu (2 x). Tuomet tirpalas džiovinamas bevandeniu MgS04, filtruojamas ir kondensuojamas iki sausumo sumažintame slėgyje. Toliau produktas gryninamas trumpoje silikagelio kolonėlėje, naudojant etilacetato eliuentą. Turinčios produkto frakcijos surenkamos sumažintame slėgyje ir taip gaunama 105 mg gelsvos spalvos kieto pavidalo medžiaga -Br-(CH2)2-S02-D-Phe-c[Cys-Tyr-(tBu)-D-Trp-Lys(Boc)-Abu-Cys]-Thr(tBu)-NH(l-ciklopropil-l-metil)etilas. TLC - silikagelis: CHCl3/MeOH/HOAc [9:1:0,1], Rf=0,36.
[0090]
[0091] Br-(CH2)2-S02-D-Phe-c[Cys-Tyr(tBu)-D-Trp-Lys(Boc)-Abu-Cys]-Thr(tBu)-NH(l-ciklopropil-l-metil)etilo (100 mg) ir 2-hidroksietilpiperazino (55 mg), ištirpintų 2 ml 1-propanolio, tirpalas virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu N2 atmosferoje 2,5 vai. Tuomet tirpalas atšaldomas iki kambario temperatūros ir sumažintame slėgyje pašalinamas tirpiklis. Nuosėdos ištirpinamos etilacetate, turinčiame 5% MeOH, ir praplaunamos sūrymu (3 x). Galiausiai, tirpalas išdžiovinamas bevandeniu MgS04, filtruojamas ir visiškai išdžiovinamas kondensuojant sumažintame slėgyje. Taip gaunama 110 mg reikiamos kieto pavidalo medžiagos. Šis junginys, daugiau jo negryninant, naudojamas sekančiame etape.
[0092] 4. 4 pavyzdys.
[0093]
[0094] Panašiai, kaip aprašyta aukščiau, yra sintezuojamas bombezino darinys, taip pat vadinamas BIM-26333:
[0095] Kiti išradimo peptidų dariniai gali būti sintezuojami panašiai, naudojant žinomus šioje srityje sintetinius pakaitalus.
[0096] Siekiant parodyti somatostatino analogų (SRIF) surišimo cheminį giminingumą somatostatino receptoriui, buvo tiriami aukščiau minėti gryninti junginiai. Somatostatino surišimo mėginių atlikimo metu yra matuojamas in vitro [l25I-Tyrll]SRIF-14 surišimo slopinimas žiurkių AR42J kasos membranose. Šio išradimo gryninti somatostatino analogai pasižymėjo dideliu surišimo cheminiu giminingumu minimiems receptoriams (žr. I lent.). Be to, lentelėje pateikta kiekvieno somatostatino darinio molekulinė masė, nustatyta masių spektrometrijos pagalba (MMtest) ir apskaičiuota pagal molekulinę formulę (MMapsk).
[0097] Panašiai, aukščiau aprašytas grynintas bombezino analogas buvo testuojamas atliekant bombezino surišimo mėginį. Siame mėginyje buvo matuojamas in vitro [125I-Tyrn]bombezino surišimo slopinimas žiurkių AR42J kasos membranose. Atlikus mėginį nustatyta, kad bombezino analogo cheminis giminingumas GRP receptoriui yra maždaug 21 nM.
[0098] Grupėms iš penkių Sprague Dawley žiurkių patinų (kiekvieno svoris 250-300 g) sušvirkščiama į poodį ( s. c.) somatostatino darinio arba fiziologinio tirpalo. Prieš 30 min., iki prasidedant atitinkamam vaistų veikimo periodui, nurodytam II lent. (2, 4, 6 ir 8 vai.), žiurkės anestezuojamos nembutaliu Ų. p. ; 50 mg/kg). Praėjus 15 min. po nejautros sukėlimo yra atliekama širdies punkcija, paimtuose kraujo bandiniuose nustatomas heparino kiekis ir įvertinamas bazinis GH kiekis. Be to, į poodį (s\c.) įšvirkščiama D-Ala2-GRF (10 jag/kg). Po 15 min. paimamas kraujas ir nustatomas sužadinto GH kiekis (matuojama kraujo plazmoje atliekant radioimunomėginį, turintį NIADDKD). Iš bazinio ir sužadinto GH kiekių skirtumo apskaičiuojamas procentinis GH slopinimas.
[0099] II lent. pateikti duomenys apie įvairių grynintų somatostatino analogų poveikio kitimą. D-Phe-c-[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-Nal-NH2 (BIM-23060) efektyvumas slopinant žiurkių augimo hormoną yra panašus, kaip ir kitų išradimo somatostatino darinių (BIM-23167, BIM-23179 ir BIM-23181). Visi dariniai pasižymi netikėtai ilga poveikio, kuris mažėja laikui bėgant, trukme.
[0100] Siekiant nustatyti ED50 (t.y. kiekvieno junginio koncentraciją, reikalingą, kad per pasirinktą laiko tarpą augimo hormono atpalaidavimas sumažėtų 50 %), papildomai buvo ištirti somatostatino analogas D-Phe-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 ir BIM-23190, BIM-23195 ir BIM-23197. Bandymai buvo atliekami koncentracijų intervale nuo 25 (ig/kg iki 0,25 Įig/kg. Iš III lent. pateiktų duomenų aišku, kad skirtingais laiko momentais somatostatino dariniai yra žymiai veiklesni už nemodifikuotus peptidus. Tas rodo priklausantį nuo laiko sužadintų augimo hormonų atpalaidavimo slopinimą išradimo junginiais.
[0101] Taip pat buvo tiriama aukščiau aprašytų grynintų somatostatino analogų geba slopinti greitai proliferuojančias ląsteles. IV lentelėje pateikti šių peptidų poveikio žiurkių AR42J kasos auglio ląstelių augimui duomenys. Priešingai natūraliam somatostatinui, išradimo dariniai rodo žymų antiproliferacinį aktyvumą. Pažvelgę į figūrą, pridėtą prie išradimo aprašymo, matome, kad tiek BIM-23014 (somatostatino analogas), tiek BIM-23118 (BIM-23014 darinys) slopina žiurkių AR42J kasos auglio ląstelių augimą priklausomai nuo koncentracijos, tačiau iš dviejų junginių efektyviau veikia BIM-23118. Abu junginiai, esant toms pačioms koncentracijoms, slopina kasos auglio ląstelių augimą stipriau nei nemodifikuoto somatostatino analogai.
[0102] Šio mėginio pagrindinė kultūra, Swiss 3T3 ląstelės, yra auginama Dulbecco modifikuotoje Eagles terpėje (DMEM), papildytoje 10% apvaisintos karvės serumu, drėgnoje 10% C02 ir 90% oro atmosferoje, 37°C temperatūroje. Ląstelės persėjamos į 24-indelių mikroplokšteles; mėginys atliekamas praėjus keturioms dienoms po paskutinio terpės pakeitimo. Kad atliekant mėginį ląstelės tikrai būtų ląstelės ciklo G1/G0 fazėje, beseruminė DMEM terpė naudojama 24 vai. prieš timidino mėginio pradžią; po to ląstelės du kartus praplaunamos vienodu 1 ml DMEM terpės (be serumo, 0,5 į.iM) ir [metil-3H]timidino (20 Ci/mmole, New England Nuclear) kiekiu. Buvo tiriamos tokios bombezino darinių koncentracijos: 0,001; 0,01; 0,1; 1; 10 ir 100 nM. Po 28 vai. išlaikymo 37°C temperatūroje [metil-3H]timidino įjungimas rūgštyje netirpiuose indeliuose nustatomas taip. Pirmiausia, ląstelės du kartus praplaunamos ledu, atšaldytu 0,9% NaCl tirpalu (1 ml kiekiais); rūgštyje tirpi radioaktyvumo frakcija pašalinama 5% trichloracto rūgštimi (TCA), išlaikius 30 min. 40°C temperatūroje. Tuomet ląstelės praplaunamos vieną kartą (1 ml) 95% etanolio ir padaromos tirpiomis išlaikius 30 min. 1 ml 0,1 N NaOH tirpale. Taip ištirpinta medžiaga perkeliama į indus, kuriuose yra 10 ml ScintA (Packard), ir skystiniu scintiliaciniu skaitikliu išmatuojamas radioaktyvumas. Sis mėginys parodo bombezino darinių gebą skatinti timidino patekimą į ląsteles. Apskaičiuota efektyvioji koncentracija EC50, lygi 0,48 nM. akivaizdžiai rodo, kad išradimo bombezino dariniai labai stipriai skatina timidino sugėrimą.
[0103] Išradimo peptidų dariniai gali būti skiriami žinduoliams, ypatingai žmonėms, vartojant juos vienu iš įprastų būdų (pvz., per burną, parenteraliai, per odą arba per gleivinę); laipsniško vaistų atpalaidavimo receptūrose, kai naudojami biologiškai skaidomi, biologiškai suderinami polimerai; arba vartojant kaip vadinamuosius "pristatymo į vietą" vaistus (pvz., priešvėžinių bombezino arba somatostatino darinių į plaučius atveju), kai naudojamos micelės, geliai ir liposomos. Dozės paprastai nesiskiria nuo šiuo metu skiriamų žmonėms peptidų terapijos metu.
[0104] Be to, išradimo peptidų darinius galima panaudoti efektyvesniam gydymui ligų, kurios yra jautrios atitinkamų nemodifikuotų peptidų poveikiui. Aukščiau aprašyti somatostatino dariniai ypač tinka gydyti vėžį, akromegaliją, kasos uždegimą, traumos sukeltą proliferaciją, cukraligę, diabetinę retinopatiją, po angioplastijos atsiradusią restenozę, AIDS, nervų uždegimą, artritą bei skrandžio ir virškinamojo trakto sutrikimus, tame tarpe ir viduriavimą.
[0105]
1. Peptidų darinys, turintis biologiškai veiklią peptidinę dalį ir bent vieną, prijungtą prie minėtos peptidinės dalies, pakaitalą, kuris yra pasirenkamas iš grupės, susidedančios iš junginių I, II ir III, kurI junginys apibūdinamas formule:
2. Peptidų darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas pakaitalas yra I junginys.
3. Peptidų darinys pagal 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad R12 yra CH2 arba S02.
4. Peptidų darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas pakaitalas yra II junginys.
5. Peptidų darinys pagal 4 punktą, besiskiriantis tuo, kad RI8 yra CH2 arba S02.
6. Peptidų darinys pagal 5 punktą, besiskiriantis tuo, kad R13, R14 ir R15 yra H, ir R!7 nėra.
7. Peptidų darinys pagal 6 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas pakaitalas yra (H0CH2)3C-NH-(CH)2-S02 arba (HOCH2)3C-CH2.
8. Peptidų darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas pakaitalas yra III junginys.
9. Peptidų darinys pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad -R23- yra (Cr C6)alkilas; R22 yra N, C arba CH; ir R24 yra C.
10. Peptidų darinys pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad R22 yra O; R19, R20, R2į ir -R23- nėra; bei m ir n suma yra 3, 4 arba 5.
11. Peptidų darinys pagal 8 punktą, besiskiriantis tuo, kad -R23- nėra.
12. Peptidų darinys pagal 11 punktą, besiskiriantis tuo, kad bent vienas iš R^ ir R24 yra N.
13. Peptidų darinys pagal 12 punktą, besiskiriantis tuo, kad abu R22 ir R24 yra N.
14. Peptidų darinys pagal 13 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas pakaitalas yra vienas iš:
15. Peptidų darinys pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėta peptidinė dalis yra pasirenkama iš grupės, kurią sudaro somatostatinas, bombezinas, kalcitoninas, su kalcitonino genu susijęs peptidas (CGRP), amilinas, paratiroidinis hormonas (PTH), gastriną atpalaiduojantis peptidas (GRP), melanocitą stimuliuojantis hormonas (MSH), adrenokortikotropinis hormonas (ACTH), su paratiroidu susietas peptidas (PTHrP), geltonkūnio susidarymo hormoną atpalaiduojantis hormonas (LHRH), augimo hormoną atpalaiduojantis faktorius (GHRF), augimo hormoną atpalaiduojantis peptidas (GHRP), cholecistokininas (CCK), gliukagonas, bradikininas, gliukagono tipo peptidas (GLP), gastrinas, enkefalinas, neuromedinai, endotelinas, medžiaga P, neuropeptidas Y (NPY), peptidas YY (PYY), vazoaktyvus žarnyno peptidas (VIP), guanilinas, hipofizės adenilatciklazę aktyvuojantis polipeptidas (PACAP), beta-ląstelių tropinas, adrenomedulinas ir jų dariniai, fragmentai bei analogai.
16. Peptidų darinys pagal 15 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėta peptidinė dalis yra somatostatinas arba jo darinys, fragmentas arba analogas.
17. Peptidų darinys pagal 16 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas somatostatino analogas yra vienas iš: H-D-Phe-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2, H-D-Phe-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys]-Nal-NH2 ir H-D-Nal-c[Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2.
18. Peptidų darinys pagal 15 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėta peptidinė dalis yra bombezinas arba jo darinys, fragmentas arba analogas.
19. Peptidų darinys pagal 15 punktą, besiskiriantis tuo, kad minėtas peptidų, darinys yra vienas iš:
20. Dimerinis peptidų darinys, turintis dvi biologiškai veiklias peptidines dalis ir bent vieną, prijungtą prie minėtų peptidinių dalių, pakaitalą, kuriuo yra vienas iš IV ir V junginių, kurIV junginys apibūdinamas formule:
R,9 yra S02, CO arba CH2;R20 yra O arba jo nėra;R21 yra (CĮ-C6)alkilas arba jo nėra;R22 yra N, CH, O arba C;-R23- yra (CrC6)alkilas arba jo nėra;R24 yra N, CH arba C;R25 yra NH, O arba jo nėra;R26 yra S02, CO, CH2 arba jo nėra;m yra natūrinis skaičius nuo 0 iki 5 imtinai;n yra natūrinis skaičius nuo 0 iki 5 imtinai;p yra natūrinis skaičius nuo 0 iki 5 imtinai; irq yra natūrinis skaičius nuo 0 iki 5 imtinai; irkurio bent viena iš minėtų peptidinių dalių yra prijungta prie kiekvieno iš minėtų pakaitalų CO-N, CH2-N arba S02-N jungtimis tarp minėto pakaitalo ir N-terminalinio azoto atomo arba šoninės grandinės vienoje iš minėtų peptidinių dalių.
-R23- yra (CrC6)alkilas arba jo nėra;21. Dimerinis peptidų darinys pagal 20 punktą, besiskiriantis tuo, kad-R23- yra (CrC6)alkilas, R22 yra N, C arba CH; ir R24 yra C.
-R23- yra (CrC6)alkilas, R22 yra N, C arba CH; ir R24 yra C.22. Dimerinis peptidų darinys pagal 20 punktą, besiskiriantis tuo, kad R22 yra O; R,9, R20, R21 ir -R23" nėra' bei m ir n suma Yra 3' 4 arba 5"