[LT] Šis išradimas yra susijęs su 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių panaudojimu gamyboje vaisto, skirto reguliuoti azoto oksido (NO) sintezę ir/arba EDHF (endotelio kilmės hiperpoliarizuojančiam faktoriui) reguliuoti diabetu sergančių pacientų endotelyje, kur šis vaistas yra skiriamas vartoti I formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių dienos doze, mažesne negu 500 mg.
[EN] The present invention relates to use of 2,5-dihydroxybenzenesulfonic compounds for the manufacture of a medicament for the regulation of nitric oxide (NO) synthesis and/or the regulation of EDHF (Endotelium-Derived-Hyperpolarizing factor) in the endothelium of diabetic patients, whereby the medicament is administered in a daily dose of the 2,5-dihydroxybenzenesulfonic compounds of formula (I) of less than 500 mg.
[0001] Šis išradimas yra susijęs su 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių panaudojimu gamyboje vaisto, skirto reguliuoti azoto oksido (NO) sintezę ir (arba) EDHF (endotelio kilmės hiperpoliarizuojančiam faktoriui) reguliuoti diabetinių pacientų endotelyje, kur šis vaistas yra skiriamas vartoti <500 mg 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių, kurių bendroji formulė I, dienos doze.
[0002] Azoto oksidas (NO) turi ypatingai svarbias ir įvairias funkcijas širdies kraujagyslių sistemoje. NO gaminimosi ir (arba) funkcijos susilpnėjimas vaidina pagrindinį vaidmenį daugelyje širdies ir kraujagyslių sutrikimų ir su diabetu arba impotencija susijusių sutrikimų (Nitric Oxide: A New Paradigm for Second Messengers), James F. Kenwin Jr. et al., Journal of Medicinai Chemistry, 1995, Volume 38, Number 22, 4343-4362; "Consequencies of reduced production of NO on vascular reactivity of percine coronary arteries atter angioplasty: importance of EDHFn, Thollon et al., British Journal of Pharmacology, 2002,136,1153-1161).
[0003] W097/37647 aprašomas 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių panaudojimas vaistų, skirtų endotelio funkcijai normalizuoti, lytinės funkcijos sutrikimui gydyti, diabeto sukeltų kraujagyslių komplikacijoms ir endotelinės kilmės kraujagyslių sutrikimams gydyti. Tačiau pagal ankstesnius pasiekimus, norint gauti norimą naudingą poveikį tokio gydymo reikalingam pacientui 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių reikia skirti palyginus dideles dienos dozes, t.y. iki 2000 mg per dieną.
[0004] Vaisto, turinčio 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių vartojimas didelėmis dozėmis yra pavojingas dėl daugelio priežasčių. Nors ir retais atvejais, yra žinomi šių junginių šalutiniai poveikiai. tokie kaip žarnyno deformacijos, odos reakcijos, karščiavimas, sąnarių skausmai arba kraujo vaizdo pokyčiai.
[0005] Be to, daugumai pacientų poreikis gerti didelį vaisto kiekį yra rimta psichologinė problema. Taigi, bendra tokio vaisto dozė yra paprastai suskaidoma į keletą mažesnių dozių, kurios sugirdomos pacientui per keletą kartų per dieną. Tačiau tai reikalauja, kad pacientas laikytųsi tikslios vaisto priėmimo schemos, dažnai lydimos paciento nepasitenkinimo.
[0006] Todėl šio išradimo tikslas yra pateikti vaistą azoto oksido (NO) sintezės reguliavimui diabetinių pacientų endotelyje, kuris leistų išvengti žinomų šioje srityje vaistų trūkumų. Pageidautina, kad vaistas taip pat galėtų būti naudojamas EDHF (endotelio kilmės hiperpoliarizuojančio faktoriaus) -svarbiausio faktoriaus nuo endotelio priklausančios kraujagyslių relaksacijos -reguliavimui, kas aprašyta, pvz., "Human coronary arteriolar dilation to arachidonic acid dependes on cytochrome P-450 monooxygenase and Ca2+. activated K+ chaneis ", H. Miura, DO. Guterman, Cir. Res., 83, 501-507, 1998; "Endothelium-derived hyperpolarizing factor. Identification and mechanisms of action in human subcutaneous resistance arteries", Coats et al., Circulation, 103, 1702-1708, 2001; "Characterization of endothelium-derived hyperpolarizing factor in the human forearm microcirculation", Halcox et al., Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol., 280, H2470-H2477, 2001; "Endotheliumdependent hyperpolarization as aremote anti-atherogenic mechanism", S. Salemidis, Thomas M. Cocks, Trends in Pharmacological Science Vo1.23, NO.5, 213. 2002). Minėti literatūros šaltiniai yra pridedami kaip nuorodos ir yra šio aprašymo dalis.
[0007] Dabar netikėtai buvo rasta, kad mažesnė nei 500 mg vieno arba daugiau 2,5-dihidroksibenzensulfoniniųjunginių, kurių žemiau duota bendroji formulė I, dienos dozė yra pakankama azoto oksido (NO) sintezei reguliuoti diabetinių pacientų endotelyje.
[0008] Be to, buvo rasta, kad žemiau duotos I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoniniai junginiai taip pat tinka EDHF (endotelinės kilmės hiperpoliarizuojančiam faktoriui) reguliuoti, kai jie yra vartojami mažesne nei 500 mg dienos doze
[0009] Taigi, vienas šio išradimo aspektas yra bent vieno iš 2,5-dihidroksibenzensulfoniniųjunginių, kurių bendroji formulė I,
[0010]
[0011] I,
[0012] kurioje
[0013] R reiškia H arba S03,
[0014] B reiškia bent vieną katijoną,
[0015] n reiškia 1 arba 2,
[0016] m reiškia 1 arba 2,
[0017] kuris gali būti farmaciniu požiūriu priimtino solvato formos,
[0018] panaudojimas gamyboje vaisto, skirto diabetinių pacientų azoto oksido (NO) sintezės reguliavimui ir (arba) EDHF (endotelio kilmės hiperpoliarizuojančio faktoriaus) reguliavimui diabetinių pacientų endotelyje, kur šis vaistas yra skiriamas vartoti kasdien, įvedant <500 mg 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių, kurių bendroji formulė I, dozę.
[0019] Katijonas B I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoniniuose junginiuose gali būti bet koks fiziologiniu požiūriu priimtinas katijonas, žinomas šios srities specialistams, pvz. iš P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Editors), "Handbook of Pharmaceutical Salts - Properties, Selections and Use", Verlag Helvetica Chimica Acta, Zūrich, Switzerland, Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002, kuris pridedamas kaip nuoroda ir yra šio aprašymo dalis. Specialistai supras, kad katijonas B turi būti pasirinktas tokiu būdu, kad bendras I formulės 2,5-dihidroksibenzensulfonių junginių krūvis turi būti neutralus.
[0020] Šis išradimas apima mažiausiai dviejų aukščiau minėtų I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių mišinio panaudojimą, o taip pat šių junginių mišriųjų druskų, t.y. junginius su skirtingais katijonais B ir (arba) skirtingomis 2,5-dihidroksibenzensulfoninėmis liekanomis.
[0021] Geriau, kai I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių katijonas(-ai) yra parinkti iš grupės, susidedančios iš Ca2+, Mg2+, Na+, K+ ir [NH4-xRx ]+ kur x yra 0, 1,2, 3 arba 4, o R reiškia šakotąjį arba nešakotąjį C1-4- alkilo radikalą. Jeigu x yra didesnis už 1, t.y. jeigu du arba daugiau alkilo radikalų yra [NH4-xRx ]+ katijone, jie gali būti vienodi arba skirtingi, bet tinkamesni yra vienodi alkilo radikalai.
[0022] Pageidautina, kad vaiste būtų vienas arba daugiau junginių, pasirinktų iš grupės, susidedančios iš kalcio 2,5-dihidroksibenzensulfonato (kalcio dobesilato), dietilamino 2,5-dihidroksibenzensulfonato (etamsilato) ir bis(dietilamino)-2,5-dihidroksibenzen-1,4-disulfonato (persilato). Pagal šį išradimą vaisto gamyboje ypatingai tinka naudoti kalcio 2,5-dihidroksibenzensulfonatą (kalcio dobesilatą.
[0023] Išradime naudojami bendrosios formulės 2,5- dihidroksibenzensulfonatiniai junginiai taip pat gali būti solvatų, ypatingai hidratų formos. I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfonatinius junginius bei jų solvatus galima pagaminti naudojant šios srities specialistams žinomus reagentus ir metodus.
[0024] Kalcio 2,5-dihidroksibenzensulfonato (kalcio dobesilato) ir dietilamino 2,5-dihidroksibenzensulfonato (etamsilato) gamyba yra žinoma, pavyzdžiui, iš "The Merck Index"-13th edition, Merck and Co., R. Rahway, N.J., USA. 2001. Minėtas literatūros aprašymas yra čia pridėtas kaip literatūros šaltinis ir yra išradimo aprašymo dalis. Bis(dietilamino)-2,5-dihidroksibenzen-1,40 - disulfonato (persilato) gamyba yra žinoma, pavyzdžiui, iš Prancūzijos patento FR 73/17709 (Publication NO.2,201,888). Atitinkamas aprašymas čia pridėtas kaip literatūros šaltinis ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0025] Buvo rasta, kad I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoniniai junginiai reguliuoja azoto oksido (NO) sintezę, o taip pat EDHF (endotelinės kilmės hiperpoliarizuojančio faktoriaus) funkciją diabetinių pacientų endotelyje, naudojant bendrą <500 mg dienos dozę.
[0026] Šie I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoniniai junginiai taip pat gali būti skiriami pacientams mažesnėmis dienos dozėmis, pvz., nuo 100 iki <500 mg, geriau nuo 150 iki 450 mg, geriausia nuo 200 iki 400 mg.
[0027] Vartojant šiuos I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninius junginius bendra <500 mg dienos doze nepageidaujamų šalutinių poveikių dažnis ir laipsnis taip pat gali būti sumažintas. Vaisto priėmimo dažnis gali būti sumažintas iki dviejų kartų per dieną. geriau vieną kartą per dieną, tuo pačiu sumažinant paciento nepasitenkinimą.
[0028] Kadangi I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoniniai junginiai reguliuoja azoto oksido (NO) sintezę, o taip pat EDHF funkciją diabetinių pacientų endotelyje, jie tinka gaminti vaistui, skirtam sutrikimų, susijusių su azoto oksido (NO) gaminimosi pablogėjimu ir (arba) EDHF funkcijos susilpnėjimu, profilaktikai ir (arba) gydymui ("Calcium Dobesilate: Pharmacologyand Future Approaches", T. Tejerina, E. Ruiz, Gen. Pharmac. Vol.31 , No.3, 357-360,1988).
[0029] Geriausiai aukščiau minėti bendrosios formulės 2,5- dihidroksibenzensulfoniniai junginiai gali būti naudojami gamyboje vaisto, skirto mikrocirkuliacinių sutrikimų, labiausiai diabetinės retinopatijos, lytinės funkcijos sutrikimo, ypatingai erekcijos sutrikimo "Pharmacological Aspects of Erectile Dysfunction", John A. Thomas, Jpn. J. Pharmacol. 89, 101-112, 2002), inkstų sutrikimų, vainikinių mikrocirkuliacinių sutrikimų ir (arba) periferinių arterijų mikrocirkuliacijos sutrikimų profilaktikai ir (arba) gydymui.
[0030] Priklausomai nuo konkretaus įgyvendinimo varianto, šio išradimo vaistas, kaip papildomas sudedamąsias dalis, taip pat gali turėti įprastų šios srities specialistams žinomų papildomų medžiagų.
[0031] Vaistai pagal šį išradimą gali būti gaminami panaudojant standartines šios srities specialistams žinomas metodikas, pvz. iš "Pharmaceutics: the Science of Dosage Forms", Second Edition, Aulton, M.E. (Ed.) Ghurchil Livingstone, Edinburgh (2002) turinyje esančių lentelių; "Encyclopedia of Pharmaceutical Technology", Second Edition, Swarbrick, J. and Boylan J.G. (Eds.), Marcel Dekker, Inc. New York (2002);"Modern Pharmaceutics", Fourth Edition, Banker G.S. and Rhodes G.T. (Eds.) Marcel Dekker, Inc. New York 2002 ir "The Theory and Practice of Industriai Pharmacy", Lachman L., Lieberman H. and Kanig J. (Eds.), Lea and Febiger, Philadelphia (1986). Atitinkami aprašymai čia pridėti kaip literatūros šaltiniai ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0032] Geriausiame šio išradimo įgyvendinimo variante vaistas yra tinkamas peroraliniam vartojimui.
[0033] Jeigu vaistas yra tinkamas peroraliniam vartojimui, geriausia, kai jis yra tabletės, kapsulės arba suspensijos formos.
[0034] Šio išradimo vaistas taip pat gali būti multidalelių formos, ypatingai plokštelių arba granulių, esant reikalui supresuotų į tabletę, supiltų į kapsulę arba suspenduotų tinkamame skystyje. Tinkami skysčiai yra žinomi šios srities specialistams.
[0035] Tinkamiausiame šio išradimo įgyvendinimo variante vaistas turi bent vieno I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninio junginio, kuris gali būti solvato formos ir bent dalinai yra prolonguoto išsiskyrimo formos.
[0036] Įdėjus vieną arba daugiau bendrosios formulės 2,5- dihidroksibenzensulfoninių junginių, kurie gali būti solvato formos, bent dalinai arba pilnai į prolonguoto išsiskyrimo formą, galima pratęsti jo poveikio trukmę, leidžiant pasireikšti tokios prolonguotos formos naudingiems efektams, pvz., palaikant optimalią terapinę koncentraciją plazmoje arba audinyje.
[0037] Tinkamos prolonguoto išsiskyrimo formos bei medžiagos ir jų pagaminimo būdai yra žinomi šios srities specialistams, pvz. iš "Modified-Release Drug Delivery Technology", Rathbone, M.J .. Hadgraft, J. and Roberts, M.S. (Eds.), Marcel Dekker, Inc., New York (2002) turinyje esančių lentelių; "Handbook of Pharmaceutical Controlled Release Technology", Wise, D.L. (Ed.), Marcel Dekker, Inc. New York (2002);"Controlled Drug Delivery", Vol.1, Basic Concepts, Bruck, 5.0. (Ed.) CRC Press Inc., Boca Raton (1983) ir iš Taakada, K. and Yoshikawa, H., "Orai Drug Delivery", Encyclopedia of Controlled Drug Delivery, Mathiowitz, E. (Ed.), John Wiley and Sons, Inc., New York (1999), Vo1.2, 728-742; Fix, J., "Orai drug delivery, small intestine and colon", Encyclopedia of Controlled Drug Delivery, Mathiowitz, E. (Ed.), John Wiley and Sons, Inc., New York (1999), Vol.2, 698-728. Atitinkami aprašymai čia pridėti kaip literatūros šaltiniai ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0038] Jeigu šio išradimo vaiste yra bent vienas I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninis junginys, bent dalinai esantis prolonguoto išsiskyrimo formoje, geriausia ši prolanguotą išsiskyrimą pasiekti naudojant bent vieną dangą arba paruošiant matricą, turinčią bent vieną uždelsto išskyrimo medžiagą. Atitinkami aprašymai čia pridėti kaip literatūros šaltiniai ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0039] Geriau, kai uždelsto išskyrimo medžiaga yra galimai modifikuotas, natūralus, pusiau sintetinis polimeras arba gamtinis, pusiau sintetinis arba sintetinis vaškas arba riebalų alkoholis arba riebalų rūgštis, arba bent jau dviejų aukščiau minėtų komponentų mišinys.
[0040] Geriausi vandenyje netirpūs polimerai, naudojami prolonguoto išskyrimo medžiagai gauti, yra polimerai akrilo dervos pagrindu, kurią geriausia parinkti iš poli(met)akrilatų; ypatingai geri yra poli(C1-4)alkil(met)akrilatai, poli(C1-4)dialkilamino(C1-4)alkil(met)akrilatai ir (arba) kopolimerai arba jų mišiniai, o ypatingai pageidautini etilakrilato ir metilakrilato kopolimerai, kuriuose monomerų santykis 2:1 (Eudragit NE30D®), etilakrilato, metilmetakrilato ir trimetilamonio etilmetakrilato chlorido kopolimerai, kurio monomerų santykis yra 1 :2:0,1 (Eudragit RS®), etilakrilato, metilmetakrilato ir trimetilamonio etilmetakrilato chlorido kopolimerai, kurių monomerų santykis 1 :2:0,2 (Eudragit RL®) arba mišinys bent dviejų iš aukščiau minėtų kopolimerų. Šios padengimo medžiagos yra gaunamos iš prekybininkų kaip 30 masės % vandeninio latekso dispersijos, t.y. kaip Eudragit RS30D®, Eudragit NE30D® arba Eudragit RL30D® ir taip pat gali būti naudojamos kaip medžiagos padengimo tikslams.
[0041] Kitame įgyvendinimo variante prolonguoto išskyrimo medžiaga yra paremta vandenyje netirpiais celiuliozės dariniais, geriausia alkilceliuliozėmis, ypatingai gerai tinka etilceliuliozė, arba celiuliozės esteriai, pvz. celiuliozės acetatas. Vandeninės etilceliuliozės dispersijos yra prekyboje, pavyzdžiui, jos turi Aquacoat" arba Surelease'" prekių ženklus.
[0042] Kaip gamtiniai, pusiau sintetiniai arba sintetiniai vaškai, riebalai arba riebalų alkoholiai, prolonguoto išskyrimo medžiagos gali būti paremtos karnaubo vašku, bičių vašku, glicerolio monostearatu, glicerolio monobehenatu, glicerolio ditripalmitostearatu, mikrokristaliniu vašku, cetilo alkoholiu, cetilstearilalkoholiu arba mažiausiai dviejų šių komponentų mišiniu.
[0043] Į aukščiau minėtų prolinguoto išskyrimo polimerų mišinius taip pat gali įeiti įprasti, fiziologiniu požiūriu priimtini plastifikatoriai šios srities specialistams žinomais kiekiais.
[0044] Tinkamų plastifikatorių pavyzdžiais yra C6-C40 alifatinių arba aromatinių dikarboksirūgščių ir C1-C4 alifatinių alkoholių diesteriai, pvz., dibutilftalatas, dietilftalatas, dibutilsebacatas arba dietilsebacatas, hidrofiliniai arba lipofiliniai citrinų rūgšties esteriai, pvz., trietilcitratas, tributilcitratas, acetiltributilcitratas arba acetiltrietilcitratas, polietilenglikoliai, propilenglikoliai, glicerolio esteriai, pvz., triacetinas, Myvacet® (acetilinti mono- ir digliceridai, nuo C23H440 05 iki C25H4707), vidutinio grandinės ilgio trigliceridai (Migliol®), oleino rūgštis arba bent jau dviejų minėtų plastifikatorių mišiniai. Geriau, kai vandeninėse Eudragit RS® arba esant reikalui Eudragit RL ® dispersijose yra trietilcitrato. Prolonguoto išskyrimo medžiaga gali turėti vieną arba daugiau plastifikatorių, kurių kiekiai yra, pavyzdžiui, 5-50 %, skaičiuojant nuo naudojamo polimero(ų) kiekio.
[0045] Prolonguoto išskyrimo medžiaga taip pat gali turėti šios srities specialistams žinomų kitų įprastų pagalbinių medžiagų, pvz. tepalų, spalvotų pigmentų arba paviršinio aktyvumo medžiagų.
[0046] Šio išradimo vaistas taip pat gali turėti bent vieną enterinę dangą, kuri ištirpsta priklausomai nuo pH. Dėl šios dangos vaistas gali pereiti per skrandį neištirpęs ir I bendrosios formulės junginiai išsiskiria tik virškinimo trakte. Pageidautina, kad enterinė danga ištirptų esant pH tarp 5 ir 7,5.
[0047] Enterinė danga gali būti bet kokios specialistams žinomos medžiagos pagrindu, pvz., metakrilo rūgšties/metilmetakrilato kopolimerai, kurių monomerų molių santykis yra 1:1 (Eudragit L ®), metakrilo rūgšties/metilmetakrilato kopolimerai, kurių monomerų molių santykis yra 1:2 (Eudragit S®), metakrilo rūgšties/etilakrilato kopolimerai, kurių monomerų molių santykis yra 1:1 (Eudragit L300-55®), metakrilo rūgšties/metilakrilato/metilmetakrilato kopolimerai, kurių monomerų molių santykis yra 7:3: 1 (Eudragit FS®), šelakas, hidroksipropilmetilceliuliozės acetato sukeinatai, celiuliozės acetato ftalatai arba bent jau dviejų iš šių komponentų mišiniai, kurie, esant reikalui, gali būti naudojami derinyje su aukščiau minetais vandenyje netirpiais pOIi(met)akrilatais, geriausia derinyje su Eudragit NE300® ir (arba) Eudragit RL ®, ir (arba) Eudra~it RS®.
[0048] Šio išradimo vaisto dangos gali būti uždedamos panaudojant įprastus specialistams žinomus būdus, pvz., iš Johnson, J.L., "Pharmaceutical tablet coating", Coatings Technology Handbook (Second Edition), Satas, O. and Tracton, A.A. (Eds), Marcel Dekker, Inc. New York, (2001). 863-866; Carstensen, T., "Coating Tablets in Advanced Pharmaceutical Solids", Swarbrick, J. (Ed.), Marcel Dekker, Inc. New York, (2001), 455-468; Leopold, C.S., "Coated dosage forms for colon-specific drug delivery", Pharmaceutical Science and Technology Today, 2(5), 197-204 (1999), Rhodes, C.T. and Porter, S.C., Coatings, in Encyclopedia of Controlled Drug Delivery. Mathiowitz, E. (Ed.), John Wiley and Sons, Inc., New York (1999), Vol.1, 299-311. Atitinkami aprašymai yra pridedami kaip literatūros šaltiniai ir yra šio aprašymo dalis.
[0049] Kitame įgyvendinimo variante šio išradimo vaistas turi vieną arba daugiau I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių ne tik prolonguoto išsiskyrimo formoje, bet taip pat ir neuždelstoje formoje. Derinant su betarpiško išsiskyrimo forma, gali būti pasiekta didelė pradinė dozė, kad būtų pasiektas greitas naudingas poveikis. Tada lėtas išsiskyrimas iš uždelsto išsiskyrimo formos apsaugos nuo naudingo poveikio mažėjimo.
[0050] Tai gali būti pasiekiama, pavyzdžiui, panaudojant vaistą, turintį bent vieną betarpiško išskyrimo dangą, kurioje yra bent vienas iš I bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių, kad būtų galima gauti greitą naudingo poveikio pasireiškimą, kai tik jis įvedamas pacientui.
[0051] Farmakologiniai metodai:
[0052] NO sintezės reguliavimas 2,5-dihidroksibenzensulfoniniais junginiais gali būti įvertintas specialistams žinomais būdais, pvz., iš "Effects of calcium dobesilate on the synthesis of endothelium-dependent relaxing factors in rabbit isolated aorta", T. Tejerina et al., British Journal of Pharmacology (1997), 121, 711-716, "In vitro Effects of Calcium Dobesiiate on the Responsiveness of Spontaneously Diabetic Rat Aorta", T. Tejerina et al., Jpn. J. Pharmacol., 78, 391-394 (1998) ir "Dobesiiate enhances endothelial nitric oxide synthase-activity in macro- and microvascular endothelial cells", Christoph Suschek et al., British Journal of Pharmacology (1997), 122, 1502-1508. Atitinkami aprašymai čia pridėti kaip literatūros šaltiniai ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0053] Toliau duodamuose metoduose EDHF (endotelinės kilmės hiperpoliarizuojančio faktoriaus) įnašui į žmogaus varpos lygiojo raumens sugebėjimo susitraukti reguliavimą, bendrosios formulės 2,5- dihidroksibenzensulfoninių junginių poveikiui į nuo endotelio priklausomai varpos lygiojo raumens relaksacijai nustatyti, o taip pat šių junginių poveikiui į erekcijos atsakus, yra aprašomas modelis in vivo bandyme su žiurkėmis.
[0054] Rezistentiškų varpos arterijų vaskuliarinis reaktyvumas
[0055] Kruopščiai pašalinus įsiskverbusius trabekulės audinius, buvo atskirtos varpos mažosios arterijos, spiralinės arterijos (kraujagyslės spindis 150-400 μm), kurios yra giliųjų varpos arterijų galinės šakos, ir po to arterijų žiedinės atkarpos (2 mm ilgio) buvo taisytos ant dviejų 40 μm vielų prie mikrovaskuliarinių dvigubų Halpern-Mulvany miografų (J.P. Trading, Aarhus, Denmark) izometrinio tempimo registravimams. Kraujagyslių segmentai buvo laikomi 30 min., kad pasiektų pusiausvyrą, fiziologiniame druskos tirpale (PSS), kurio sudėtis (kiekvienas komponentas nurodytas mM): 119 NaCI, 4,6 KCI, 1,5 CaCI2, 1,2 MgCI2, 24,9 NaHC03, 11 gliukozės, 1,2 KH2P04, 0,027 EDTA 37 oC temperatūros vandenyje, per kurį nepertraukiamai burbuliukais leidžiamas 95 %02 ir 5 % CO2 mišinys, palaikant pH 7,4. Buvo nustatytas kraujagyslių segmentų pasyvus tempimas ir vidinis perimetras, kai atpalaiduojama in situ, esant 100 mm Hg (L1oo) slėgiui per sienelę. Po to buvo nureguliuoti kraujagyslių segmentų vidiniai perimetrai, atitinkamai 90 % L 100, kai jėgos išaugimas yra artimas maksimaliam, kaip aprašyta Mulvany MJ, Halpern W., "Contractile properties of small resistance arteries in spontaneously hypertensive and normotensive rats", Circ. Res., 41, 19-26, 1977. Atitinkamas aprašymas yra pridedamas kaip literatūros šaltinis ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0056] Tada šie preparatai buvo sudėti Į 125 mM K+ (KPSS, ekvimolinis NaCI pakeitimui kiekis KCI PSS buferyje) ir matuojamas susitraukiamumo atsakas. Arterijos buvo sutraukiamos 1 μM norepinefrinu (apytikriai 80 % KPSS sukelto susitraukimo), o relaksaciniai atsakai buvo įvertinti panaudojant junginių kaupiamąjį pridėjimą į kameras. Arteriniai segmentai, laikomi kaip neturintys funkcinio endotelio, neatsipalaiduoja iki 10 μM acetilcholino.
[0057] Tyrimai organų kameroje
[0058] Siauros akytkūnio audinio juostelės (3 x 3 x 7 mm) buvo įmerktos į 8 ml organų kameroje esančio PSS, laikoma 37 oC temperatūroje ir aeruojama 95 % O2 ir 5 % CO2 mišiniu, palaikant pH 7,4. Kiekviena audinio juostelė buvo tempiama palaipsniui didinant tempimą iki optimalaus izometrinio įtempimo, kaip nustatyta pagal maksimalų susitraukiamumo atsaką iki 1 μM fenilefrino, kaip aprašyta Saenz de Tejada et al., "A Nitric Oxide-like factor mediates nonadrenergenic-noncholinergic neurogenic relaxation of penile corpus cavernosum smooth musele", J. Clin. Invest. 88,112-118. Atitinkamas aprašymas yra pridedamas kaip literatūros šaltinis ir yra išradimo aprašymo dalis.
[0059] Audiniai buvo sutraukti panaudojant 0,5-3 μm fenilefrino (80 % KPSS sukelti susitraukimo ir atsipalaidavimo atsakai buvo įvertinti panaudojant kaupiamąjį junginių pridėjimą į kameras.
[0060] Erekcijos atsakai į akytkūnio nervo stimuliaciją bandyme su anestezuotomis žiurkėmis
[0061] Genetiškai diabetinių žiurkių patinėliai (BB/wor žiurkės, Molegaard Breeding and Research, Swensved, Denmark) buvo anestezuoti ketaminu (60 mg/kg). Chirurginė procedūra susidėjo iš atskyrimo ir dešiniojo akytkūnio nervo izoliavimo, padarius pjūvį per pilvo vidurinę liniją ir išėmus į paviršių varpos kojytę per skersinį tarpvietės įpjovimą. Intraakytkūninis slėgis (ICP) buvo matuojamas įvedant į dešiniąją kojytę 23 dydžio adatą, sujungtą su vienkartiniu slėgio perdavikliu (Abbott, Sligo, Ireland) ir duomenų surinkimo sistema (ADinstruments, castle Hill, Australia). Į kairiąją miego arteriją ir dešiniąją išorinę jungo veną buvo įstatyti kateteriai atitinkamai pastoviam kraujospūdžio matavimui ir fiziologinio tirpalo arba vaisto infuzijai. Elektrinis stimuliavimas buvo daromas mažyčiu platinos bipoliniu kabliuko pavidalo elektrodu, sujungtu su stimuliatoriumi ir srovės stiprintuvu (Cibertec, Madrid, Spain). Elektrinio stimuliavimo parametrai susidėjo iš 1 ms trukmės ir 1,5 mA srovės stiprumo impulsų 1 min. Dažnio-atsako kreivės buvo gautos naudojant 1, 3 ir 10 Hz stimuliavimą 3 min. intervalais.
[0062] Norint įvertinti ūmius bendrosios formulės 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių poveikius į erekcijos atsakus, buvo atliktas kontrolinis stimuliavimas, esant 1, 3 ir 10 Hz, ir po stabilizacijos laikotarpio buvo suleista į veną atitinkamo junginio (10 mg/kg), ištirpinto 20 % hidrokslprcpll-β-ciklodekstrtne (HPβCD), arba vien tik tirpiklis. Stimuliavimas buvo pakartotas praėjus 60 min. po atitinkamo junginio arba tirpiklio suleidimo.
[0063] Toliau šis išradimas yra iliustruojamas pavyzdžiais. Šios iliustracijos yra duotos vien tik kaip pavyzdžiai ir neriboja šio išradimo pagrindinės prasmės.
[0064] 1 pavyzdys
[0065] Kieta želatinos kapsulė, turinti kalcio dobesilato
[0066]
[0067] Aukščiau minėti kiekiai kalcio dobesilato, celiuliozės, magnio stearato ir koloidinio silicio dioksido kruopščiai sumaišomi įprastu maišikliu ir po to supilstomi į įprastas kietas želatinos kapsules.
[0068] 2 pavyzdys
[0069] Tabletė, turinti kalcio dobesilato Kalcio dobesilatas
[0070]
[0071] Aukščiau minėti kiekiai kalcio dobesilato, kukurūzų krakmolo, laktozės, povidono K-30, citrinų rūgšties monohidrato, magnio stearato ir natrio rūgščiojo sulfito kruopščiai su maišomi įprastu maišikliu ir po to presuojami tabletėmis įprastu tabletavimo presu.
[0072] Farmakologiniai metodai:
[0073] Vaistai ir medžiagos:
[0074] Fenilefrinas, norepinefrinas (arterenolis), acetilcholinaas, indometacinas, NG-nitro-L-argininas (L-NNA), apaminas, charybdotoksinas ir hidroksipropil-β-ciklodekstrinas (HPβCD) buvo gauti iš Sigma Chemical Co. (Sto Louis, MO, USA). Mikonazolis buvo gautas iš RBI (Natic, MA, USA). Kalcio dobesilatas (kalcio dihidroksi-2,5-benzensulfonatas, Doxium®) buvo gautas iš Dr. Esteve Laboratories (Barcelona, Spain).
[0075] Duomenų analizė:
[0076] Relaksacijos atsakai yra išreikšti procentais nuo bendros relaksacijos (tonuso praradimo), sukeltos, pridėjus 0,1 M papaverino HCI į kamerą eksperimento gale. Visi duomenys išreikšti kaip vidurkis ± standartinė paklaida. Buvo gautos pilnos koncentracija-atsakas arba dažnis-atsakas kreivės ir palygintos panaudojant dvifaktorinės variacinės analizės (ANOVA) statistinį testą, naudojant StatView programą Apple kompiuteriui. Erekcijos atsakai buvo nustatyti matuojant intraakytkūninio slėgio ploto po kreive (AUC) padidėjimus į žiurkių akytkOnio nervo stimuliavimą, normalizuotą pagal vidurkines arterinio slėgio reikšmes. Pilnos dažnio-atsako kreivės buvo lyginamos pagal dvifaktoriniANOVA testą.
[0077] EDHF vaidmuo nuo endotelio priklausančioje žmogaus akytkūnio trabekulinių juostelių relaksacijoje ir žmogaus varpos rezistentinėms arterijoms (HPRA):
[0078] Trabekulinio audinio juostelėse acetilcholinas (ACh; nuo 1 μM iki 10 μM) davė nuo koncentracijos priklausančią relaksaciją, kuri buvo beveik panaikinta, paveikiant NO sintetazės (NOS) inhibitoriaus - NG-nitro-L-arginino (L-NNA; 100 μM) - ir ciklooksigenazės (COX) inhibitoriaus - indometacino (5 μM) - deriniu. Atvirkščiai, varpos arterijų atveju, nors veikimas L-NNA (100 μM) ir indometacinu (5 μM) žymiai sumažino ACh sukeltą relaksaciją, svarbus šių arterijų relaksacijos komponentas išliko. Šios ACh sukeltos relaksacijos, esant NOS ir COX inhibicijai, buvo panaikintos, sutraukiant HPRA didele ekstra ląstelinio K+ koncentracija (35 mM) arba veikiant šias arterijas nuo Ca2+ priklausančiais K+-kanalų blokatorių, apamino (APA; 100 nM) ir charibdotoksino (CTX; 100 nM) deriniu.
[0079] Kalcio dobesilato poveikiai į nuo endotelio priklausančią žmogaus varpos lygiųjų raumenų relaksaciją:
[0080] Kalcio dobesilatas (10 μM) labai stiprina ACh sukeltą HPRA relaksaciją.
[0081] Šio stiprinimo kalcio dobesilatu (10 μM) žymiai neveikia NOS ir COX suderintas inhibavimas, bet jis yra panaikinamas, jeigu arterijos yra pamerktos į didelę kalio koncentraciją (35 mM).
[0082] HPRA buvimas APA (100 nM) ir CTX (100 nM) derinyje, kuris blokuoja ACh sukeltą relaksaciją, rezistentišką NOS ir COX inhibicijai, panaikina stiprinančius kalcio dobesilato poveikius. Pagaliau, mikonazolas (0,3 mM) žymiai sumažina kalcio dobesilato rezistentiškos NOS ir COX inhibicijai HPRA ACh sukeltos relaksacijos stiprinančius efektus.
[0083] Kalcio dobesilato poveikiai į anestezuotų diabetinių žiurkių erekcinius atsakus:
[0084] Akytkūnio nervo elektrinis stimuliavimas anestezuotoms žiurkėms davė . nuo dažnio priklausomą intraakytkūninio slėgio (ICP) padidėjimus, kurie nebuvo pakeisti veikiant tirpikliu (20 % HPβCD). Suleidus į veną kalcio dobesilato (10 mgl/g), žymiai padidėjo erektilūs atsakai į akytkūnio nervo stimuliaciją.
[0085] Aukščiau minėti rezultatai rodo, kad EDHF dalyvauja nuo endotelio priklausančioje žmogaus varpos rezistentiškų arterijų relaksacijoje. Parodytas EDHF reguliavimas kalcio dobesilatu.
[0086] Šiuose aukščiau aprašytuose in vitro eksperimentuose kalcio dobesilato koncentracija yra koncentracijos plazmoje ribose, pasiekiamose vartojant <500 mg peroralinę dozę. Net ir ši maža kalcio dobesilato dozė duoda padidintus erekcijos atsakus.
1. Bent vieno iš 2,5-dihidroksibenzensulfoninių junginių, kurių bendroji formulė I,
1. I,
kurioje
R reiškia H arba SO3-,
B reiškia bent vieną katijoną,
n reiškia 1 arba 2,
m reiškia 1 arba 2,
kuris gali būti farmaciniu požiūriu priimtino solvato formos,
panaudojimas gamyboje vaisto, skirto azoto oksido (NO) sintezės reguliavimui ir (arba) EDHF (endotelio kilmės hiperpoliarizuojančio faktoriaus) reguliavimui diabetinių pacientų endotelyje, kur šis vaistas yra skiriamas vartoti, imant aukščiau minėtų I formulės junginių <500 mg dienos dozę.
2. Panaudojimas pagal 1 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad katijonas(ai) B yra pasirinktas(i) iš grupės, susidedančios iš Ca2+, Mg2+, Na+, K+ ir [NH4-xR,t]+, kur x yra 0, 1, 2, 3 arba 4, o R reiškia šakotąjį arba nešakotąjį C1-4-alkilo radikalą, kuris gali būti toks pats arba skirtingas, jei x>1.
3. Panaudojimas pagal 1 arba 2 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad I bendrosios formulės junginys yra kalcio 2,5-dihidroksibenzensulfonatas (kalcio dobesilatas).
4. Panaudojimas pagal 1 arba 2 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad I bendrosios formulės junginys yra dietilamino 2,5- dihidroksibenzensulfonatas (etamsilatas).
5. Panaudojimas pagal 1 arba 2 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad I bendrosios formulės junginys yra bis(dietilamino)-2,5-dihidroksibenzen-1 ,4-disulfonatas (persilatas).
6. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-5 punktų, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad skiriamo vaisto dienos dozėje yra I bendrosios formulės junginių nuo 100 iki <500 mg, geriau nuo 150 iki 450 mg, ir ypatingai gerai nuo 200 iki 400 mg.
7. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-6 punktų sutrikimų, paremtų azoto oksido (NO) gaminimosi susilpnėjimu ir (arba) EDHF funkcijos reguliavimo susilpnėjimu, profilaktikai ir/arba gydymui.
8. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-7 punktų mikrocirkuliacijos sutrikimų profilaktikai ir/arba gydymui.
9. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-8 punktų retinopatijos sutrikimų profilaktikai ir/arba gydymui.
10. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-8 punktų lytinės disfunkcijos, ypatingai erekcijos disfunkcijos, sutrikimų profilaktikai ir/arba gydymui.
11. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-8 punktų inkstų sutrikimų profilaktikai ir/arba gydymui.
12. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-8 punktų vainikinės mikrocirkuliacijos sutrikimų profilaktikai ir/arba gydymui.
13. Panaudojimas pagal bet kuri iš 1-8 punktų periferinių arterijų mikrocirkuliacijos sutrikimų profilaktikai ir/arba gydymui.
14. Panaudojimas pagal bet kuri iš 1 -13 punktų, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas yra tinkamas peroraliniam vartojimui.
15. Panaudojimas pagal 14 punktą. b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas yra tabletės, kapsulės arba suspensijos formos.
16. Panaudojimas pagal 14 punktą. b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas yra multidalelių, geriausia plokštelių arba granulių, esant reikalui, supresuotų i tabletę, supiltų į kapsulę arba suspenduotų tinkamame skystyje, formos.
17. Panaudojimas pagal bet kuri iš 1-16 punktų, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas turi bent vieno I bendrosios formulės junginio bent dalinai prolonguoto išsiskyrimo formoje.
18. Panaudojimas pagal 17 punktą. b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas turi bent vieną dangą arba matricą. kurioje yra bent vienos prolonquoto išskyrimo medžiagos.
19. Panaudojimas pagal 18 punktą. b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad ši prolonguoto išskyrimo medžiaga yra paremta, esant reikalui, modifikuotu, vandenyje netirpiu, gamtiniu, pusiau sintetiniu arba sintetiniu polimeru arba gamtiniu, pusiau sintetiniu arba sintetiniu vašku, arba riebalu, arba riebaliniu alkoholiu, arba riebalų rūgštimi, arba bent jau dviejų iš šių aukščiau minėtų komponentų mišiniu.
20. Panaudojimas pagal 19 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vandenyje netirpus polimeras yra paremtas akrilo derva, kurią pageidautina pasirinkti iš poli(met)akrilatų, poli(C1-4)dialkilamino(C1-4)alkil(met)akrilatų ir (arba) jų kopolimerų grupės, arba bent jau dviejų iš aukščiau minėtų polimerų mišinio.
21. Panaudojimas pagal 19 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šie vandenyje netirpūs polimerai yra celiuliozės dariniai, geriau alkilceliuliozė ir ypatingai gerai etilceliuliozė arba celiuliozės esteriai.
22. Panaudojimas pagal 19 punktą, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaškas yra karnaubo vaškas, bičių vaškas, glicerolio monostearatas, glicerolio monobehenatas, glicerolio ditripalmitostearatas, mikrokristalinis vaškas arba bent jau dviejų šių komponentų mišinys.
23. Panaudojimas pagal 19-22 punktus, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad polimerai yra naudojami derinyje su vienu arba daugiau plastifikatorių.
24. Panaudojimas pagal bet kurį iš 14-23 punktų, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas turi enterinę dangą.
25. Panaudojimas pagal bet kurį iš 1-24 punktų, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad šis vaistas turi bent vieną staigaus išsiskyrimo dangų, kurioje yra bent vieno iš I bendrosios formulės junginių.