[LT] Išradimas apima biologiškai aktyvių medžiagų beta-endorfino ( -lipotropino 61-91) ir E1, E2, F2 , I2 prostaglandinų (arachidinės, linolinių polinesočiųjų lipidinių rūgščių darinių) panaudojimą pagaminti intravenines mikrolašelines infuzijas, kurios gali būti panaudojamos gyvybinių funkcijų sutrikimų kompensacijai anafilaksijos metu. Minėtos medžiagos ištirpinamos etilo alkoholyje santykiu 1:100, o po to, ruošiant infuziją, paėmus veiklią dozę, atskiedžiama izotononiu tirpalu santykiu 1:130. Lašinama sekančiai: beta-endorfinas intraveninių mikrolašelinių infuzijų būdu po 0,15 g/kg/min, E1, E2ir F2 prostaglandinai - po 10 g/kg/min, o I2 prostaglandinas - po 100 g/kg/min.
[EN] The present invention concerns using of beta-endorphin and prostaglandins E1, E2, F2alfa, I2 for the preparation of intravenous microinfusions, which can be useful to compensate vitaly important function disorders during anaphylactic shock. Said materials were dissolved in ethanol in ratio 1:100, resulted solution before preparation of infusion was dissolved in isotonic solution in ratio 1:130. The rate flow of infusions are: 0,15 g/kg/min/ for beta -endorphin, 10 g/kg/min for prostaglandins E1, E2, F2alfa, and 100 g/kg/min for prostaglandin I2.
[0001] Išradimas priklauso medicinai ir gali būti panaudotas anafilaksinio šoko (AŠ), kitų ekstremalių būklių prevencinėje terapijoje, šalinant širdies aritmijas, širdies raumens išemiją, hemokoaguliacijos ir kitus gyvybinių funkcijų sutrikimus. Be to jis gali būti panaudotas atliekant mokslinius eksperimentinius tyrimus.
[0002] P-endorfinas (P-lipotropinas 61-91) išskirtas iš kupranugarių hipofizės, žinomas kaip biologiškai aktyvus neuropeptidas, dalyvauja nervinių procesų reguliacijoje. Iš jo miltelių paruoštas tirpalas dažniausiai injekuojamas į smegenų skilvelius (Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 1990, 17,. 1, 33-37; Biomed. I'harmacother., 1993, 47, 8, 311-320; Neuropsyeliologia, 1993, 31, 7, 655-660).
[0003] El, E2, I72a> h prostaglandinai (arąchidinės, linolinių polinesoeiųjų lipidinių rūgščių derivatai), išskirti iš gyvulių prostatos ir kitų audinių, žinomi kaip biologiškai aktyvūs lipidai, reguliuojantys gyvybiškai svarbias širdies-kraujagyslių, kvėpavimo, hemokoaguliacijos ir kitas funkcijas. Jų tirpalai injekuojami intraveniniu būdu arba lokaliai j pažeistą vietą. Sušvirkšti į arteriją prostaglandinai veikia stipriau nei į veną, nes išvengiama juos suardančių plaučių ir kepenų fermentų (Ažgichin I., Prostaglandiny. - M., 1978 - 565, rus.). Nors sušvirkšti į arteriją P-endorfinas ir prostaglandinai lėčiau suyra ir dėl to veikia stipriau, bet taip jie gali būti panaudoti tik trumpą laiką, nes negali kompensuoti ilgalaikių AŠ padarinių, kadangi jų veikimas yra trumpesnis už AŠ metu vykstančius patologinius procesus. Be to, švirkščiant į arteriją P-endorfiną arba prostaglandinus jų veikimas būna santykinai lokalus ir todėl nepaveikia viso organizmo funkcijų, o ilgalaikės infuzijos į arterijas praktiškai netaikomos dėl didelio arterinio kraujospūdžio. Pastovios mikrolašelinės intraveninės P-endorfino bei prostaglandinų-infuzijos labai sumažina katastrofiškus (letališkus) AŠ padarinius. Jų veikimas nustatomas registruojant ir sekant nurodytų funkcinių sutrikimų parametrus.
[0004] Tiek P-endorfinas, tiek Elv E2, l?2a' ^2 prostaglandinai tai labai greitai (sekundžių bėgyje) organizme suirsiančios medžiagos. Todėl jas panaudojus stresinių būsenų (anafilaksinio šoko) metu, kada būna sunkūs ir ilgalaikiai funkcinių sistemų pažeidimai, gaunamas tik trampalaikis - mažai efektyvus veikimas.
[0005] Kad veikimas būtų pastovesnis, šiame išradime pateikti p-endorfino, E|, E2, l72a> ^2 prostaglandinų įvedimo į organizmą intraveninių mikrolašclinių infuzijų būdai ir dozės, o taip pat jų koncentracijos, gyvybinių funkcijų sutrikimų kompensacijai anafilaksijos metu.
[0006] P-endorfino ir E į E2, F2a, I2 prostaglandinų intraveninių mikrolašclinių infuzijų paruošimo pavyzdžiai.
[0007] Pirminis p-endorfino tirpalas gautas ištirpinus jo kristalinius miltelius (Heidelberg "Servą" firma) 98% etilo alkoholyje santykiu 1:100. Iš jo (pirminio tirpalo), paėmę veiklią dozę (125 Įig), ruošdami infuziją alskiedėme fiziologiniu (izotoniniu 0,9% natrio chlorido) tirpalu santykiu 1:130.
[0008] Ex E2, F2a arba I2 prostaglandinų tirpalai (kiekvieno atskirai) gauti ištirpinus jų miltelius (Talino gamybos) 98% etilo alkoholyje santykiu 1:100 ir iš jo paėmę Ex E2 ir F2a prostaglandinų veiklią dozę (8 mg) bei prostaglandino I2 veiklią dozę80 mg, ruošėme infuzijas juos atskiesdami fiziologiniu (izotoniniu 0,9% natrio chlorido) tirpalu santykiu 1:130.
[0009] Panaudojus intraveninių mikrolašelinių infuzijų būdu šias biologiškai aktyvias medžiagas, pasižyminčias adaptaciniu-kompensaciniu bei imunomoduliaciniu veikimu, atlikome bandymus, sukeldami AŠ ir registruodami funkcinius kraujospūdžio, širdies elektrokardiografinius (EKG), hemokoaguliografinius ir spirometrinius parametrus.
[0010] Šio tyrimo tikslas buvo nustatyti p-endorfino ir E^ E2, F2a, I2 prostaglandinų tirpalų sudėtį ir koncentracijas, paruošiant intravenines mikrolašelines infuzijas, įgalinančias dozuoti ir pastoviai kompensuoti sutrikusias organizmo gyvybines funkcijas (arterinį kraujospūdį, kvėpavimą, širdies veiklą, koronarinę kraujotaką ir hemokoaguliaciją) AŠ metu. Mes nustatėme, kad šis paruošimo ir panaudojimo būdas yra efektyvesnis nei vienkartinės intraveninės arba intraskilvelinės injekcijos, kadangi tai padeda pastoviai kompensuoti (sureguliuoti) minėtus funkcinius sutrikimus anafilaksijos metu. Pastovus intraveninių infuzijų veikimas nustatomas registruojant ir sekant nurodytų funkcinių sutrikimų parametrus.
[0011] Bandymai atlikti su 67 abiejų lyčių, 2,0-3,5 kg masės triušiais. Jie buvo suskirstyti į 6 eksperimentines grupes, gaunančias p-endorfiną arba Ei, E2, F2cx, I2 prostaglandinus intraveninių mikrolašelinių infuzijų būdu, ir negavusius jų, sukėlus anafilaksinį šoką ir registruojant funkcinius kraujospūdžio, širdies elektrokardiografinius, hemokoaguliografinius ir spirometrinius rodiklius. Triušius sensibilizavome natyvinio vištos kiaušinio baltymo, praskiesto iki 20% izotoniniu 0,9% natrio chlorido tirpalu, 1 ml poodinėmis injekcijomis 4 kartus kas 5 paros. Praėjus 25-30 dienų nuo pirmos sensibilizuojančios injekcijos, triušiams sukeldavome anafilaksinį šoką to paties antigeno intravenine (1 ml/kg) injekcija. Kraujo spaudimą miego arterijoje matavome gyvsidabriniu manometru, išorinį kvėpavimą - pneumografu, širdies veiklą - elektrokardiografu ir kraujo krešėjimą tyrėme hemokoaguliografu.
[0012] 1. Eksperimentų grupė
[0013] Panaudojus sensibilizuotiems triušiams 10 min bėgyje 0,5 (jg/min (0,2 įa g/kg/min, vidutiniškai 2,5 kg triušiui) p-endorfino intravenines mikrolašelines infuzijas nustatėme, kad tokia 6-endorfino dozė raiškiai mažina triušių arterinį kraujospūdį, blogina širdies intraskilvelinį laidumą ir apsunkina AŠ eigą (keli triušiai žuvo). 2. Eksperimentų grupė
[0014] Panaudojus sensibilizuotiems triušiams 10 min bėgyje po 0,15 ng/kg/min p-endorfino intravenines mikrolašelines infuzijas ir po to sukėlus anafilaksinį šoką nustatėme, kad šis [3-endorfino kiekis mažai paveikė arterinį sensibilizuotų triušių kraujo spaudimą, o anafilaksinio šoko metu sinusinis širdies ritmas pakito nuo 236,5 k/min iki 215,5 k/min (3 lentelė). Pirmomis AŠ minutėmis 50% triušių registravome pavienes skilvelines ir vienam triušiui prieširdinę ekstrasistoles, o praėjus 6-10 min jos išnyko arba perėjo į S-T segmento dislokaciją. Pirmosiomis AŠ minutėmis arterinis kraujospūdis padidėjo (nuo 117,6 mm Hg iki 121,0 mm Hg), o 2-3 min sumažėjo iki 87,1 mm Hg. 10-15 min arterinis kraujo spaudimas stabilizavosi (106,0 mm Hg) (2 lentelė). 3. Eksperimentų grupė
[0015] Sukėlus sensibilizuotiems triušiams įprastinį AŠ natyvinio vištos kiaušinio baltymo (specifinis antigenas) intravenine injekcija (1 ml/kg) ir nepanaudojus nei [3-endorfino, nei Eį, E2, F2a, h prostaglandinų registravome anafilaksiniam šokui tipišką kraujo spaudimo ir išorinio kvėpavimo kitimų dinamiką: pradinį trumpalaikį kraujospūdžio padidėjimą, vidutiniškai 3-čią AŠ minutę jo maksimalų sumažėjimą (p < 0,01), išorinio kvėpavimo padažnėjimą (p < 0,05) ir pagilėjimą (1-2 lentelės). Pasireikšdavo ekstrasistolija (30%), širdies laidumo sutrikimai (30%) ir miokardo išemijos požymiai (35%), kurie keliais atvejais baigėsi miokardo infarktu (3 lenetelė). Antrą-trečią anafilaksinio šoko minutę paimtas kraujas daugumai triušių per 10 min nepradėdavo krešėti (4 lentelė). Anafilaksinio šoko metu žuvo 50% triušių. 4. Eksperimentinė grupė Panaudojus po 10 Į.ig/kg/min Eį, E2, F2a prostaglandinų (kiekvieno atskirai) intravenines mikrolašelines infuzijas 10 min bėgyje iki triušiams sukeliant anafilaksinį šoką ir anafilaksinio šoko eigoje nustatėme, kad arterinis kraujo .spaudimas pirmą minutę po anafilaktizuojančios injekcijos vidutiniškai padidėjo 12,7%, 12,8% ir 20,1% atitinkamai veikiant nurodytiems atskiriems prostaglandinams, o išorinis kvėpavimas esminiai nesiskyrė nuo įprastino anafilaksinio šoko (1, 2 lentelės). Po anafilaktizuojančios injekcijos 30% triušių, gavŲsių Eį prostaglandino, 30% triušių; gavusių E2 prostaglandino ir 50% - F2a prostaglandino anafilaksinio šoko metu registravome ekstrasistoles ir skilvelių virpėjimą, dar kitiems (10%, 10% ir 15%) širdies laidžiosios sistemos sutrikimus bei išemijos požymius (po 10%) (3 lentelė). Ekstrasistoles (išskyrus du atvejus) ir skilvelių virpėjimas per 5-10 min išnyko. 5. Eksperimentų grupė
[0016] Panaudojus 100 (.ig/kg/min I2 prostaglandino mikrolašelines infuzijas iki anafilaksinio šoko ir anafilaksinio šoko metu nustatėme, jog gavusiems I2 prostaglandino AŠ metu dviems triušiams atsirado prieširdinės ekstrasistolės, dar dviems - išemijos reiškiniai (3 lentelė). Dėl I2 prostaglandino sensibilizuotų triušių tromboelastografiniai (kraujo krešėjimo) rodikliai pagal H.Hartertą (Klin. WschrM 1948, 26, 577-583) pakito: "r" (kraujo protrombino reakcijos laikas), "k" (krešulio susidarymo laikas) ir "t" (specifinė koaguliacijos trukmės konstanta) prailgėjo, o "ma" (maksimali amplitudė, atspindinti krešulio elastingumą) sumažėjo (p<0,01, p<0,05, p<0,05 ir p<0,05) (3 pav., 5 lentelė). Šių triušių kraujas AŠ metu, veikiant ^prostaglandinui per 10 min pradėjo krešėti (4 lentelė). Įprastinio AŠ metu kraujas nekreša dėl atsiradusios intravazalinės koaguliopatijos (Barkagan Z., Gemoragičeskije zabolevanija i sindromy. M. 1980, p. 5, rus.), susiformavus daugybiniams mikrotrombams kapiliaruose. Tai pažeidžia mikrocirkuliaciją ir sukelia audinių hipoksiją. Todėl svarbu neleisti išsivystyti pirminei hiperkoaguliacijai, sulėtinant kraujo krešėjimą prieš sukeliant anafilaksinį šoką infuzuojant I2 prostaglandiną arba p-endorfiną (1 pav., 5 lentelė). Dėl to nuo AŠ žuvo tik 6% triušių gavusių I2 prostaglandino, 8% - gavusių (3-endorfino, po 10% - gavusių E1? E2 prostaglandinų, 16% veikiant F2„ prostaglandinui ir 50% jų negavusių
[0017] 1. pav. Triušių hemokoaguliogramos: a - sensibilizuotų, b - antrą-trečią anafilaksinio šoko minutę, c - gavusių I2 prostaglandino antrą-trečią anafilaksinio šoko minutę. 2. pav. Triušių kraujospūdžio kitimo tendencija ir anafilaksinio šoko baigtis: gavusių p-endorfino (p-End.), Eb E>, F2a ir I2 prostaglandinų, K - be prostaglandinų ir p-endorfino, % - žuvusių procentas. 3.pav. Hemokoaguliogramos rodikliai (pagal H.Hartertą): r - kraujo protrombino reakcijos laikas (nuo registravimo pradžios iki 1 mm amplitudės); k - krešulio susidarymo laikas ( nuo 1 mm iki 20 mm amplitudės ); ma - maksimali amplitudė , atspindinti krešulio elastingumą ( trombocitų ir fibrinogeno krešėjimo aktyvumą ); t
[0018] Triušių kvėpavimo dažnumas (k/min) anafilaksinio šoko (AŠ) metu gavusių B-endorfino (P-End) ir E1( E2, ¥ia, I2 prostaglandinų(Pg)
[0019] Triušių arterinio kraujospūdžio (mmHg) kitimas anafilaksinio šoko (AS) metu ir gavusių p-endorfino (P-End) arba ^l, ^2, F2a ir h prostaglandinų (Pg)
[0020] Triušių širdies susitraukimų dažnis (k/min) ir EKG duomenys anafilaksinio šoko (AŠ) metu ir gavusių 6-endorfiną (13-End) arba El, E2, F2a, h prostaglandinų
[0021] ( Pg)
[0022]
[0023] Triušių hemokoaguliogramų duomenys anafilaksinio šoko (AŠ) metu ir gavusių B-endorfino (13-End) arba Ei, ^2, ^2a, h prostaglandinų (Pg)
[0024] Triušių, gavusių B-endorfino (B-End) arba E , E , F2a, 12 prostaglandinų (Pg) hemokoaguliogramų duomenys
[0025] 1. p-endorfino (0,15 ng/kg/min) mikrolašelinės intraveninės infuzijos stabilizavo anafilaksinio šoko kraujospūdžio kitimų dinamiką, sumažino širdies veiklos disfunkcijas ir letalinę anafilaksinio šoko baigtį. 2. Prieš pat anafilaktizuojančią injekciją sulašinus triušiams į veną E^, E2 arba F2a prostaglandinų (10 Įig/kg/min) anafilaksinio šoko metu arterinis kraujo spaudimas padidėjo nežymiai, bet vėliau kraujospūdžio kritimo ir išorinio kvėpavimo dinamika beveik nesiskyrė nuo palankesnės anafilaksinio šoko eigos. 3. Eį, E2, F2a ir I2 prostaglandinai anafilaksinio šoko metu veikė antiaritmiškai, o I2 ir antiišemiškai. 4. Anafilaksiniam šokui būdingam kraujo krešėjimo sulėtėjimui Ei, E2, F2a prostaglandinai įtakos neturėjo, o I2 prostaglandinas ir P-endorfinas kraujo krešėjimą stabilizavo ir matyt dėl to dauguma triušių liko gyvi.
[0026] Bandymais buvo įrodyta, kad biologiškai aktyvias medžiagas - p-endorfiną ir E1? E2, F2oc, I2 prostaglandinus - būtų tikslinga naudoti infuzijomis.
[0027] Siūlomo išradimo privalumas yra tas, kad panaudojus tokios koncentracijos tirpalus intraveninių mikrolašelinių infuzijų būdu galima susilpninti anafilaksinio šoko reiškinius ir kompensuoti sutrikusias funkcijas - sureguliuoti kraujospūdį, širdies veiklą, kraujo krešėjimą. Šiuo atveju P-endorfinas ir Eb E2, F2ct, I2 prostaglandinai veikia kaip antianafilaksinis (antistresinis) faktorius.
1.Biologiškai aktyvių medžiagų P - endorfino (P - lipotropino 61 - 91) ir Ei, E2, F2a,I:prostaglandinų (arachidinės , linolinių polinesočiųjų lipidinių rūgaų derivatų) panaudojimas intraveninių mikrolašelinių infuzijų , pasižyminčių gyvybinių funkcijų sutrikimų kompensacija anafilaksijos metu , paruošimui.
prostaglandinų (arachidinės , linolinių polinesočiųjų lipidinių rūgaų derivatų) panaudojimas intraveninių mikrolašelinių infuzijų , pasižyminčių gyvybinių funkcijų sutrikimų kompensacija anafilaksijos metu , paruošimui.2.Panaudojimas pagal 1 punktą , besiskiriantis tuo , kad naudojami p - endorfinas ir Ei, E2,F2a,l2 prostaglandinai intraveninių mikrolašelinių infuzijų pavidalais , gautais ištirpinus jų kristalinius miltelius 98% etilo alkoholyje santykiais 1:100 ir gautą tirpalą atskiedus izotoniniu tirpalu santykiu 1:130.3.1ntraveninė mikrolašelinė infuzija. besiskirianti tuo , kad joje aktyviu ingredienu yra p - endorfinas ir Ei, E2, F2a. I2 prostaglandinai, skirta panaudoti gyvybinių funkcijų sutrikimų kompensacijai anafilaksijos metu.4.1nfuzija pagal 3 punktą, besiskirianti tuo , kad aktyvus ingredientas naudojamas sekančiai: P- endorfinas tirpalo pavidalu intraveninių mikrolašelinių infuzijų būdu po 0,15 Įag/kg/min, Ei, E2, F2a prostaglandinai tirpalo pavidalu intraveninių mikrolašelinių infuzijų būdu po 10 ng/kg/min, o I2 prostaglandinas - po 100fig/kg/min.