[LT] Išradimas priskiriamas sintetinės organinės chemijos sričiai, konkrečiai susijęs su 5-pakeistų sulfonilamino-1H-benzimidazol-2-il-karbamino rūgščių dariniais, turinčiais bendrą (I) formulę,@kurioje R- žemesnysis (C1-C4) alkilas, fenilas, arba fenilas, pakeistas o-, m-, p-padėtyse žemesniu (C1-C4) alkilu, bei halogenu; arba naftilas. @Šie junginiai gali būti pritaikyti medicinoje bei veterinarijoje gyvulių, paukščių ir žmonių parazitinių ligų gydymui.@Naujų junginių toksiškumas mažesnis nei 4000 mg/kg; preparato dozė 20 mg/kg apsaugo avis nuo strongiliatozės, užtikrindami efektyvumą nuo 45,7 iki 100 % .
[EN] The present invention provides certain 5-substituted derivatives of sulfonylamino-1H-benzimidazol-2-yl-carbamino acids, useful for medicine and veterinary for treatment of parasitism in animals, including human beings. The toxicity of new compounds are less than 4000 mg/kg; the dose of 20 mg/kg prevents sheep from strongyloidosis and provides efficiency 45,7 to 100 %.
[0001] Šis išradimas priskiriamas organinės chemijos sričiai ir yra susijęs su naujais benzimidazol-2-il-karbamino rūgščių dariniais, kurių bendra formulė I:
[0002]
[0003] Junginiai (I) gali būti pritaikyti medicinoje bei veterinarijoje parazitinėms ligoms gydyti, taip pat panaudoti kaip pesticidai arba antimitotiniai preparatai.
[0004] Yra žinoma, kad giminingos struktūros benzimidazol-2-il-karbamino rūgšties metilo esteris (BMK, medaminas) (II) turi antihelmintinių, pesticidinių ir antimitotinių savybių / fleMmiOB H.B. "AHTrejibMHHTHKH b BeiepHHapHH", M., "Kojioc", 1982, C. 295 - 298. C0Ji0HeHK0 H.r., fleMHAOB H. B. " Te3HCbi aoicn. 3- ero MeacayHapoflHoro CHMno3K>Ma. 12- 15 okth Sph 1976, BbicoKHe TaTpbi", HCCP. BeKHin O . JI, Eypaic H. H., KoJiocoBa M. O. " Mea. napa3nT0ji0rns", 1979, No 4, C. 32 - 36. O3epeuK0BCKaji H. H. h ap." HobuK coBeTCKHfi aHTrejrtMHHTHK MeaaMHH: pe3yjibTa™ KjiHHmecKHx HcntiTaHHH npH KHLue4HLix HeMaTo. iio3ax"- " Mea. napa3HTOii.", 1986, No 5, C. 7 - 10/.
[0005] Medaminas yra mažiau toksiškas už seniau veterinarijoje ir medicinoje naudojamą mebendazolą( 5-benzoil-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgšties metilo esterį)
[0006] / JIeSeaeBa M. H., rnaaKHX B. G>., JImhko H. fl., Mea. napa3HT0Ji.- 1974.- H0. 3,.- C. 296- 3043 /. Atlikti tyrimai rodo, kad jis praktiškai nepasižymi mutageniniu efektu/ opojibuoba A.E., JIhhko H. fl., JleSeaeBa M. H., Men. napa3HTo;i.- 1983.- Ho. 3.- 72- 75/.
[0007] Medaminas turi platų antihelmintinio veikimo spektrą,- jis efektyvus gydant trichocefaliozę, ankilostomidozę, strongiloidozę, askaridozę, enterobiozę, trichostrongiloidozę / O3epeuK0BCKaa H. H. h ap." HoBbm coBeTCKHH aHTHrejibMHHTHK MeaaMHH: pe3VTaTbi KJtHHHMecKnx HcnbiTaHHH npH KHiueHHbix HeMaT0zi03ax"- " Mea. napa3HTOJi.", 1986, No 5, C. 7 - 10/.
[0008] Pašaliniai reiškiniai gydant medaminu nėra dažni ir nelabai išreikšti,- paprastai jie pasireiškia tik tokiom alerginėm reakcijom, kaip dilgėlinė, odos niežėjimas, bei dispepsiniai reiškiniai. Nutraukus preparato naudojimąjie paprastai praeina savaime.
[0009] Pateikti duomenys rodo, kad veikimo spektro platumu medaminas pralenkia senesnį antihelmintiką mebendazolą ir sėkmingai taikomas gydymui nuo parazitų poliinvazijos.
[0010] Šio žinomo preparato (prototipo) trūkumas yra santykinai aukštos terapinės dozės, reikalingos antihelmintiniam efektui pasiekti ir padidintas toksiškumas (LDjo=724 mg/kg pelėms (peroraliai)).
[0011] Mūsų išradimo tikslas - naujų medžiagų, turinčių padidintą antihelmintinį aktyvumą ir sumažintą toksiškumą sukūrimas, o taip pat antihelmintinių priemonių arsenalo išplėtimas, nes parazitai tampa atsparesni senesniems vaistams, ir gydymas jais tampa nebeefektyvus / OencnoBa M.H. 3({)({) eKTHBH0CTb HeK0T0pbix npenapaTOB npH acKapmno3e h rerepaKHjcoe Kyp." "Ektt. Bcec. hh- Ta rejrbMHHTOJrorHH", 1977, Bbin. 20, C . 15 . 1 .
[0012] Siame išradime pateikiamos naujos cheminės struktūros medžiagos - 5-pakeisti sulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgščių metilo esteriai, kurių bendra formulė (I):
[0013] kurioje R - žemesnysis (Ci - C4) alkilas, fenilas, arba fenilas, pakeistas o-, m-, p- padėtyse žemesniuoju (Ci - C4) alkilu, bei halogenu; arba naftilas.
[0014] Išradime siūlomi junginiai yra žymiai mažiau toksiški už prototipą medaminą. Jie nesukelia neigiamų fiziologinių reiškinių net 4000 mg/kg dozėje, įvestoje peroraliai, o tai beveik 6 kartus viršija medamino letalinę dozę - LD50 (724 mg/kg). Nauji junginiai turi platų antihelmintinio veikimo spektrą. Jie pasižymi aukštu aktyvumu nipostrongiliozės, vištų askaridiozės bei avių strongiliatozės atvejais, be to, jų dozė vištų askaridiozės atveju net du kartus mažesnė negu medamino.
[0015] Junginiai, apibrėžti bendra formule (I) gaunami kondensuojant pakeistus 1,2-fenilendiaminus (III) su N-metoksikarbonil-S-metil-izo-tiokarbamidu (IV) arba su N,N-bis-(metoksikarbonil)-S-metil-izo-tiokarbamidu (V):
[0016] Kondensacijos agentu gali buti naudojamas ir pakeistas cianamidas, kurio formulė
[0017]
[0018] atliekant reakciją alifatinio (Ci - C4) alkoholio arba jo mišinio su vandeniu terpėje, dalyvaujant katalizatoriams.
[0019] Kondensacijos procesas gali būti vykdomas plačiame temperatūrų intervale, siekiančiame tirpiklio virimo temperatūrą.
[0020] I. SINTEZĖ
[0021] 1 Pavyzdys . 5-Metilsulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgšties metilo esterio (VBŠ -116 A) gavimas
[0022] 2,01 g (0,01 M) 4-Metilsulfonilamino-l,2-fenilendiamino, 2,28 g (0,11 M) N,N'-bis-(metoksikarbonil)-S-metil-izo-tiokarbamido, 0,03g (0,00016 M) para-metilbenzensulforūgšties ir 50 ml izo-propanolio mišinys virinamas vandens vonioje 5 valandas. Nutraukus šildymą leidžiama lėtai atvėsti iki 15 - 20 °C. Susidarę smulkūs produkto kristalai filtruojami, perplaunami izo-propanoliu, vandeniu ir džiovinami 40 °C temperatūroje iki pastovaus svorio. Gauta 2,31 g baltų miltelių su l.t.-l62-3 °C (su skilimu). Išeiga - 81,4 % nuo teorines.
[0023] 2 Pavyzdys . 5-Benzensulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgšties metilo e'sterio (VBŠ - 105) gavimas *
[0024] 5,26 g (0,02 M) 4-Benzensulfonilamino-l,2-fenilendiamino, 3,12 g (0,021M) N-metoksikarbonil-S-metil-izo-tiokarbamido, 1,5 ml ledinės acto rūgšties ir 100 ml 96 % etanolio mišinys virinamas 6 valandas vandens vonioje ir paliekamas stovėti 12 vai. 15° C temperatūroje. Iškritusios nuosėdos filtruojamos, perplaunamos šiltu (30 - 40 °C ) etanoliu, po to vandeniu ir džiovinamos 40 °C temperatūroje iki pastovaus svorio.
[0025] Gaunama 5,32 g baltų miltelių, kurių l.t.-258-260 °C (su skilimu). Išeiga-76,8 % nuo teorinės.
[0026] 3 Pavyzdys . 5-[para-metilbenzensulfonilamino)-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgšties metilo esterio (VBŠ -114) gavimas
[0027] Sumaišoma 10 g (0,1 M) techninio kalcio cianamido (~ 77 % ), 2,2 g kalcio oksido (0,04 M) ir 85 ml vandens. 35-40° C temperatūroje sulašinama 6 ml (0,078 M) chloroskruzdžių rūgšties metilo esterio. Pamaišius 1 valandą 40 °C temperatūroje, mišinys atšaldomas iki 5 - 10 °C, atsargiai neutralizuojamas druskos rūgštimi iki pH = 5 ir filtruojamas. Gautas vandeninis N-metoksikarbonilkarbamino rūgšties nitrilo (V) tirpalas sumaišomas su 18 g (0,065 M) 4-(para-metilbenzensulfonilamino)-l,2-fenilendiamino tirpalu 120ml metanolio, ir pridedama 10 ml acto rūgšties. Mišinys virinamas 8 valandas. Iškritusios šviesiai pilkos nuosėdos praplaunamos metanoliu, vandeniu ir džiovinamos iki pastovaus svorio 60 °C temperatūroje. Gautas baltos spalvos kristalinis produktas, kurio l.t. 263 - 265 °C ( su skilimu). Išeiga - 14, 29 g ( 61% nuo teorinės).
[0028] Sintezių duomenys, fizikines-cheminės savybės, IR ir PMR spektrų charakteristikos, bei elementinės analizės duomenys siūlomiems junginiams pateikti 1, 2, 3 ir 4 lentelėse.
[0029] Siūlomų junginių toksiškumas baltosioms žiurkėms, sveriančioms 50-100 g, buvo tiriamas pagal standartinę metodiką [Litchfield J. T., Wilsoxom F.J., Fharmacol. Exp. Therap. 1949, 96, p. 99-113] įvedant įvairias tiriamos medžiagos dozes baltosioms žiurkėms į skrandį. Vandeninės preparatų suspensijos buvo įvedamos individualiai, peroraliai, dozuojant 4000 mg/kg gyvo svorio. Gyvūnų būklė buvo stebima savaitę laiko.
[0030] Nurodyta siūlomų preparatų dozė nesukėlė bandomųų žiurkių žuvimo. Nebuvo pastebimų nukrypimų nuo normalios gyvūnų būklės, jie liko judrūs, gerai ėdė pašarą.
[0031] Gauti duomenys rodo, kad nauji junginiai, kurių šifrai VBŠ -105,114,115A, 130, 136 ir 154, pasižymi labai žemu toksiškumu ir 4000 mg/kg dozėje (peroraliai) nesukelia žymesnių nukrypimų nuo fiziologinės normos.
[0032] Naujų junginių antihelmintinis aktyvumas buvo ištirtas su žiurkėmis, vištomis ir avimis. Antihelmintinio aktyvumo tyrimams 50-60 g svorio baltosios žiurkės buvo eksperimentiškai užkrėstos helmintų Nippostrongylus braiiliensis lervomis, po 2000 vnt. kiekvienai (individualiai). Po 7 dienų užkrėstoms parazitais žiurkėms peroraliai įvesdavo tiriamųjų junginių vandenines suspensijas, stabilizuotas emulgatoriumi Twin-80, dozuojant po 500 mg/kg individualiai. Po 5 dienų gyvūnai buvo užmušti, o junginių efektyvumas įvertintas, lyginant likusių helmintų skaičių kontroliniuose ir bandomuosiuose gyvūnuose.
[0033] Bandymų su žiurkėmis rezultatai pateikti 6 lentelėje, iš kurios matyti, kad siūlomi junginiai turėjo antihelmintinį aktyvumą nuo 35,8 iki 100% , esant dozei 500 mg/kg gyvo svorio.
[0034] Antihelmintinis siūlomų junginių aktyvumas tirtas taip pat su viščiukais,
[0035] Invazinių askaridžių ( Ascaridia gaili) kiaušinėlių kultūra gauta pagal P.T.
[0036] Tverdochlebovo metodiką [ TBepnc»cjie6oB n. T. AB- rope^ epaT KaHa. flncc., M., 1966, c. 42]. Parazitais Ascaridia gaili užsikrėtusių vištų, atrinktų helmintoovoskopinių tyrimų metu, ekskrementus panaudojo išskirti invazinių kiaušinėlių kultūrai. Išskyrimas buvo atliekamas flotacijos būdu, išplakant surinktus ekskrementus sotaus cinko sulfato tirpalo terpėje ir centrifuguojant . Ascaridia gaili kiaušinėliai dėl mažesnio tankio flotacijos metu susirinkdavo mėginio viršuje ir būdavo atskiriami. Gauta invazinių kiaušinėlių suspensija būdavo standartizuojama mikroskopo MBR-2 su įtaisyta gardele pagalba, suskaičiuojant askaridžių kiaušinėlių kiekį 1 ml tūrio ir šviežia būdavo naudojama bandomųjų vištų užkrėtimui.
[0037] Kiekvienas eksperimentinis viščiukas gavo po 200 vnt. invazinių askaridžių kiaušinėlių. Helmintams pasiekus lytinio subrendimo stadiją (nustatomą pagal koprologinius tyrimus), bandomiesiems viščiukams įvesdavo individualiai per zondą į skilvį tiriamuosius junginius po 100 mg vienkartinę dozę 1 kg svorio. Po junginių įvedimo eksperimentinius viščiukus laikė po vieną atskirame narvelyje, jų ekskrementus surinkdavo ir perplaudavo ant tinklo vandeniu, tokiu būdu atskiriant žuvusius parazitus ir juos suskaičiuojant.
[0038] Bandomuosius paukščius užmušdavo praėjus 7 dienoms nuo tiriamųjų preparatų įvedimmo ir atlikdavo helmintologinį jų žarnų skrodimą. Anthelmintinių junginių aktyvumą nustatydavo lygindami žuvusių helmintų, išsiskyrusių po preparato davimo, skaičių su helmintų, rastų atlikus helmintologinį skrodimą, skaičiumi.
[0039] Duomenys pateikti 7 lentelėje, rodo, kad siūlomi nauji junginiai (VBŠ - 106 ir VBŠ - 114) yra aktyvūs prieš askaridžių invaziją viščiukams. Pažymėtina, kad šie preparatai parodė aukštą intens-efektyvumą vištų askaridiozės atveju, naudojant dozę 100 mg / kg, tuo tarpu, kai žinomas prototipas - BMK (medaminas) aukštu aktyvumu pasižymi tik du kartus didesneje dozėje - 200 mg/kg paukščio masės / OenotoBa M.H. 3<įxf >eKTHBHoc*ib HeicoTopbK npenapaTOB npH acKapiuncne h reTepaicnno3e Kyp." " Bkiji. Bcec. hh-Ta rejit>MHHTonorHH", 1977, Bbin. 20, C. 75 /.
[0040] Antihelmintinį siūlomų junginių aktyvumą tyrė taip pat ir su ėriukais, spontaniškai užsikrėtusių skrandžio-žarnyno strongiliatais ( Strongylata). Ėriukų, užsikrėtusių skrandžio-žarnyno trakto strongiliatais atrinkimą atliko avininkystės fermoje, pasižyminčioje aukštu strongiliatinės invazijos ekstensyvumu, pasinaudojant diagnostinių helmintoovoskopinių tyrimų rezultatais. Užkrėstus ėriukus laikė atskiruose narvuose. ' Preparatus įvesdavo individualiai, peroraliai 20 mg/kg gyvo svorio dozėje, vandeninės suspensijos pavidalu. Po jų įvedimo sekdavo gyvulių būklę. Antihelmintinio aktyvumo nustatymui, praėjus 7 ir 10 dienų po preparatų įvedimo, atlikdavo helmintoovoskopinius tyrimus.
[0041] Bandymų ant ėriukų, spontaniškai užkrėstų skrandžio-žarnyno trakto strongiliatais duomenys pateikiami 8 lentelėje.
[0042] Avių strongiliatozių atveju aukštas antihelmintinis aktyvumas išaiškintas trims preparatams - VBŠ - 114, VBŠ - 136, VBŠ - 130, naudojant juos dozėje 20 mg/kg gyvo svorio, tuo metu, kai prototipas BMK. ( medaminas) parodė aukštą aktyvumą, tik 300 mg/kg dozėje.
[0043] Po tiriamųjų preparatų įvedimo nebuvo pastebėta jokių nukrypimų nuo fiziologinės normos. Gyvuliai gerai ėdė pašarą ir gėrė vandenį.
[0044] Atlikti tyrimai rodo, kad 5-pakeisti sulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgščių metilo esteriai - yra netoksiški preparatai, turintys aukštą antihelmintinį aktyvumą.
[0045]
1. 5-Pakeistų sulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgšties metilo esterio dariniai, bendros struktūrinės (I) formulės:
2. 5-Pakeisti sulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgščių metilo esteriai pagal 1 punktą, skirti naudoti medicinoje ir veterinarijoje kaip antihelmintikai.
3. 5-Pakeisti sulfonilamino-lH-benzimidazol-2-il-karbamino rūgščių metilo esteriai pagal 1 ir 2 punktus, besiskiriantys tuo, kad nesukelia nukrypimų nuo fiziologinės normos dozėse iki 4000 mg/kg .