[LT] Išradimas priskiriamas sintetinės organinės chemijos sričiai, konkrečiai, susijęs su 5-pakeistais arilalkiloksibenzimidazol-2-ilkarbamino rūgščių metilo esteriais.@Bendra formule (I) apibrėžti junginiai gali būti pritaikyti medicinoje bei veterinarijoje gyvulių, paukščių ir žmonių parazitinių ligų gydymui.@Siekiant išaiškinti šios klasės medžiagų antihelmintinį aktyvumą, susintetinti nauji junginiai, kurie buvo gaunami kondensuojant atitinkamus pakeistus 1,2-fenilendiaminus su N-monometoksikarbonil- arba N,N'-di(metoksikarbonil)-S-metilizotiokarbamidu arba su N-monometoksikarbonilcianamidu organinio tirpiklio terpėje.
[EN] The present invention is related to preparative organic chemistry, particularly to methyl esters of 5-substituted arylalkyloxybenzimidazole-2-ylcarbamine acids. The compounds having general formula (I) are useful in medicine and veterinary for treating animals, poultry and humans parasitic diseases. New compounds were obtained by condensing appropriate substituted 1,2-phenylenediamines with N-monomethoxycarbonyl- or N,N'-di(methoxycarbonyl)-S-methylisothiocarbamide or N-monomethoxycarbonylcyanamide in organic solvent.
[0001] Šis išradimas priskiriamas benzimidazol-2-ilkarbamatų dariniams, konkrečiau apima 5-pakeistų arilaIkiloksibenzimidazol-2-ilkarbamino rūgščių metilo esterius, apibrėžiamus bendra formule (I):
[0002] H H
[0003] XJ R
[0004] Junginiai pasižymi antihelmintiniu aktyvumu, ir gali būti panaudoti medicinoje ir veterinarijoje parazitinėms ligoms gydyti.
[0005] Yra žinomi panašios struktūros benzimidazol-2-ilkarbamatai, pasižymintys antihelmintiniu aktyvumu, pavyzdžiui, benzimidazol-2-ilkarbamino rūgšties metilo esteris ( II) (BMK, medaminas, karbendazinas) /CbepeuKOBCKaa H. H. n ffp." Hobsik coBeicKHft aHTrenb.MHHTHK MeaaMHH: pe3y.ibTan>i KJiHHHqecKHX Hcm>rraHHft npn KiimeqHbix He.\iaT0J03ax"- "Mea. napa3nmi.", 1986, No 5, C. 7 - 10/.
[0006] CęiNVcHj <»>
[0007] i i
[0008] H H
[0009] bei l-fenoksiacetil-benzimidazol-2-ilkarbamino rūgšties metilo esteris (benacilas)
[0010] (m)
[0011] Minėtų junginiu pagrindinis trūkumas yra per aukštos jų terapinės dozės kai kurių rūšių gyvuliams / TSRS autor. liud. Nr.660683 (1973)/.
[0012] Artimiausias siūlomiems paraiškoje junginiams pagal stuktūrą yra antihelmintikas mebendazolas (mebenvetas) - 5-benzoil-benzimidazol-2-ilkarbamino rūgšties metilo esteris, kurio struktūrinė formulė ( IV) pateikiama žemiau: iT^i—N 0
[0013] Junginys (IV), pasirinktas prototipu, pasižymi nemažu toksiškumu ir žemu aktyvumu prieš kai kurių rūšių apvaliasias parazitines kirmėles, nematodas- Ascaridia gaili bei Ascaris suum. / "H B HeMfUOB ''Autre ji e>m h ht h kh b BeTepHHapHH" M., "Konoc", 1982, c.289-296. '7
[0014] Mūsų išradimo tikslas yra surasti naujas medžiagas, pasižyminčias padidintu antihelmintiniu aktyvumu ir žemu toksiškumu, o taip pat išplėsti antihelmintinių priemonių arsenalą, nes seniems preparatams parazitai įgyja rezistentiškumą ir pastarųjų terapinis poveikis susilpnėja./ Biochemistry of benzimidazole resistance./Lacey E, Gili JH. //Actą Trop 1994 Mar Vol.56,Nr.2-3,P.245-62 ./
[0015] Siame išradime pateikiamos naujos cheminės struktūros medžiagos - 5-pakeisti benziloksibenzimidazol-2-ilkarbamino rūf gščiu «. metilo
[0016] x<\ x N °
[0017] H H
[0018] X3 R
[0019] 1) Xi= 2-F ; X2=X3 - H; 2)X,=X3= -H ; X2 = 3-F; 4)Xi=2-C1;X2=X3-H; 5)Xi=X3=-H;X:=3-C1; 6) X!=X2= -H ; X3= 4-C1; 7) Xi = 2-Br; X2=X3 - H; 8) Xi=X3= -H ; X2= 3-Br; 9) Xi=X2= -H ; X3 = 4-Br; 10) 1) X,= 2-1; X2=X3 - H; 11) X]=X3= -H ; X2= 3-1; 12) Xį=X2= -H ; X3= 4-1; 13) X|= 2-C1; X2 = H, X3=4-C1; 14) X,=H, X2=3-C1; X3= 4-C1; 15))X,= 2-CH3;X2=X3-H; 16) Xi=X3= -H ; X2= 3-CH3; 17) X)=X2= -H ; X3= 4-CH3; 18) Xi = H, X2=3-CH3; X3=5-CH3; 19) X|=2-CH3, X2=4-CH3; X3=6-CH3;
[0020] 20) X,=X2=X3=H;
[0021] 21) Xi=X2=X3=H;
[0022] 22) Xi = X2=X3=H;
[0023] 23) X,=H, X2=3-OCH3, X3=4-OCH3; 24)X,=H, X2=3-0CH:0-4; 25) X,=H, X2=3-0CH2CH20-4; 26) X, =H. X2 = 3-0CH2CH2CH20-4; 27) Xj=H, X2=3-OCH(CH3)CH2-4;
[0024] Išradime siūlomi junginiai keletą kartų mažiau toksiški už prototipą mebendazolą (IV). Jie nesukelia neigiamų reiškinių >4000 mg'kg dozėse, o tai keturis kartus viršija mebendazolo letalinę dozę LD 50 (1280 mg/kg). Nauji junginiai turi antihelmintinio veikimo spektrą. Jie pasižymi aukštu aktyvumu prieš Nyppostrongylus braziliensis helmintus, avių strongiliatozę. Preparatai parodė aukštą intens-efektyvumą vištų askaridiozės atveju, naudojant 100 mg/kg dozę,tuo tarpu, kai žinomas prototipas - mebendazolas aukštu aktyvumu pasižymi tik 10 kartų didesniai dozei (1000 mg/kg). Šių medžiagų sintezę vykdo kondensuojant atitinkamus pakeistus 1,2-fenilendiaminus su N-monometoksikarbonil- arba N,N'-di-(metoksikarbonil)-S-metilizotiokarbamidu, arba su N-monometoksikarbonilcianamidu organinio tirpiklio terpėje.
[0025] I. SINTEZĖ 1 Pavyzdys . 5 -( 3 '- fluorobenziloksi )- lH - benzirnidazol - 2 - ilkarbamino rūgšties metilo esteris ( VBŠ - 67 ). 2,3 g (0,01 M) 4-(3'-fluorobenziloksi)-l,2-fenilendiamino, 2,27 g (0,011 M) N,N- dimetoksikarbonil-S-metil-izotiokarbamido, 0,03 g (0,00016 M) para-metilbenzenosulfoninės rūgšties ir 50 ml 2-propanolio mišinį virina 4 vai., atšaldo iki 15 - 20° C, filtruoja susidariusias smulkiakristalines nuosėdas, praplauna 2-propanoliu, vandeniu irdžiovina. Gauna 2,86 g miltelių su lyd. temp. 237 - 238° C (sk.). Išeiga 84,5 % nuo teorinės. 2 Pavyzdys . 5 -( 2 '- chlorobenziloksi )- lH - benzimidazoI - 2 - ilkarbamino rūgšties metilo esteris ( VBŠ - 39 ). 4,95 g (0,02 M) 4-(2'- chlorobenziloksi)-l,2-fenilendiamino, 3,11 g (0,021 M) N-monometoksikarbonil-S-metil-izotiokarbamido, 1,5 g (0,025 M) acto rūgšties bei 100 ml etanolio virina 6 vai. ir palieka stovėti kambario temperatūroje 20 vai.Iškri-tusias kristalines nuosėdas filtruoja, perplauna ant filtro šiltu etanoliu (30-40° C), vandeniu ir džiovina. Gauna 4,1 g smulkiakristalinių miltelių su lyd temp. 242-243" C (sk.). Išeiga - 61,8 %. 3 Pavyzdys . 5 -( 3 ', 5 '- dimetilhenziloksi )- lH - benzimidazol - 2 - ilkarbamino rūgšties metilo esteris ( VBŠ - 126 ).
[0026] Sumaišo 10 g (0,1M) techninio kalcio cianamido (— 77 9c ), 2,2 g kalcio oksido
[0027] (0.04 M) ir 85 ml vandens. 35-40° C temperatūroje pridedama lašais 6 ml (0,078 M) chloroskruzdžių rūgšties metilo esterio. Pamaišius 1 valandą 40 °C temperatūroje, mišinys atšaldomas iki 5 -10 °C, atsargiai neutralizuojamas druskos rūgštimi iki pH = 5 ir filtruoja. Gautą vandenini N-metoksikarbonilkarbamino rūgšties nitrilo (V) tirpalą sumaišo su 15,7 g (0,065 M) 4-(3',5'-dimetilbenziloksi)-l,2-fenilendiamino tirpalu lOOml
[0028] 2-propanolio, ir prideda 10 m! acto rūgšties. Mišinį virina 8 valandas. Iškritusias šviesiai pilkas nuosėdas praplauna 2-propanoliu, vandeniu ir džiovina iki pastovaus svorio 60 °C temperatūroje. Gauna baltos spalvos kristalini produktą, kurio l.t. 224 - 225 °C (su skilimu). Išeiga -18, 3 g ( 86 %).
[0029] Sintezių duomenys, fizikines-cheminės savybės, IR ir PMR spektrų charakteristikos, bei elementinės analizės duomenys siūlomiems junginiams pateikti 1, 2,3 ir 4 lentelėse.
[0030]
[0031] Siūlomų junginių toksiškumas baltosioms žiurkėms, sveriančioms 50-100 g, buvo tiriamas pagal standartinę metodiką / Litchfield J. T., Wilsoxom F.J., Fharmacol. Exp. Therap. 1949, 96, p. 99-113 / Įvedant įvairias tiriamos medžiagos dozes baltosioms žiurkėms į skrandį. Vandeninės preparatų suspensijos buvo įvedamos individualiai, peroraliai, dozuojant 4000 mg/kg gyvo svorio. Gyvūnų būklė buvo stebima savaitę laiko.
[0032] Nurodyta siūlomų preparatų dozė nesukėlė bandomųjų žiurkių žuvimo. Nebuvo pastebimų nukrypimų nuo normalios gyvūnų būklės, jie liko judrūs, gerai ėdė pašarą.
[0033] Gauti duomenys rodo, kad nauji junginiai, pasižymi labai žemu toksiškumu ir 4000 mg/kg dozėje (peroraliai) nesukelia žymesnių nukrypimų nuo fiziologinės normos.
[0034] Naujų junginių antihelmintinis aktyvumas buvo ištirtas su žiurkėmis, vištomis ir avimis. Antihelmintinio aktyvumo tyrimams 50-60 g svorio baltosios žiurkės buvo eksperimentiškai užkrėstos helmintų Nippostrongyhis braziliensis lervomis, po 2000 vnt. kiekvienai (individualiai). Po 7 dienų užkrėstoms parazitais žiurkėms peroraliai įvesdavo tiriamųjų junginių vandenines suspensijas,stabilizuotas emulgatoriumi Twin-80, dozuojant po 500 mg/kg individualiai. Po 5 dienų gyvūnai buvo užmušti, o junginių efektyvumas įvertintas, lyginant likusių helmintų skaičių kontroliniuose ir bandomuosiuose gyvūnuose.
[0035] Bandymų su žiurkėmis rezultatai pateikti 6 lentelėje, iš kurios matyti, kad siūlomi junginiai turėjo antihelmintinį aktyvumą, nuo 35,8 iki 100% , esant dozei 500 mg/kg gyvo svorio.
[0036] Antihelmintinis siūlomų junginių aktyvumas tirtas taip pat su viščiukais, eksperimentiškai apkrėstais helmintais Ascaridia gaili.
[0037] Invazinių askaridžių ( Ascaridia gaili) kiaušinėlių kultūra gauta pagal P.T. Tverdochlebovo (1965) metodiką/''iMaiepHaibi k HayMHoii KOHcjDepeHUHH
[0038] bcecofoshoro o6mecTBa re.abmhhto.iorob" M.,1965,h.1,c.206-210.) Kiekvienas eksperimentinis viščiukas gavo po 200 vnt. invazinių askaridžių kiaušinėlių. Helmintams pasiekus lytinio subrendimo stadiją (nustatomą pagal koprologinius tyrimus), bandomiesiems viščiukams įvesdavo individualiai per zondą į skilvį tiriamuosius junginius po 100 mg vienkartinę dozę 1 kg svorio. Po junginių įvedimo
[0039] eksperimentinius viščiukus laikė po vieną atskirame narvelyje, jų ekskrementus surinkdavo ir perplaudavo ant tinklo vandeniu, tokiu būdu atskiriant žuvusius parazitus ir juos suskaičiuojant.
[0040] Bandomuosius paukščius užmušdavo praėjus 7 dienoms nuo tiriamųjų preparatų įvedimmo ir atlikdavo helmintologinį jų žarnų skrodimą. Antihelmintinių junginių aktyvumą nustatydavo lygindami žuvusių helmintų, išsiskyrusių po preparato davimo, skaičių su helmintų, rastų atlikus helmintologinį skrodimą, skaičiumi.
[0041] Duomenys pateikti 7 lentelėje, rodo, kad siūlomi nauji junginiai yra aktyvūs prieš askaridžių invaziją viščiukams. Pažymėtina, kad šie preparatai parodė aukštą intens-efektyvumą vištų askaridiozės atveju, naudojant dozę 100 mg / kg, tuo tarpu, kai žinomas prototipas -mebendazolas- aukštu aktyvumu nepasižymi. Antihelmintinį siūlomų junginių aktyvumą tyrė taip pat ir ant ėriukų, spontaniškai užsikrėtusių skrandžio-žarnyno strongiliatais ( Strongylata). Ėriukų, užsikrėtusių skrandžio-žarnyno trakto strongiliatais atrinkimą atliko avininkystės fermoje, pasižyminčioje aukštu strongiliatinės invazijos ekstensyvumu, pasinaudojant diagnostinių helmintoovoskopinių tyrimų rezultatais. Užkrėstus ėriukus laikė atskiruose narvuose. Preparatus įvesdavo individualiai, peroraliai 20 mg/kg gyvo svorio dozėje, vandeninės suspensijos pavidalu. Po jų įvedimo sekdavo gyvulių būklę. Antihelmintinio aktyvumo nustatymui, praėjus 7 ir 10 dienų po preparatų įvedimo, atlikdavo helmintoovoskopinius tyrimus.
[0042] Naujų junginių aktyvumo tyrimus atliko ir su paršeliais, užsikrėtusiais askaridėmis ( Ascaris suum). Paršelius eksperimentui parinko kiaulių firmoje su aukštu askaridozinės invazijos ekstens-efektyvumu. Tuo tikslu buvo atlikti helmintoovoskopinės diagnostikos tyrimai. Parinkti 2.5-3.5 mėn. amžiaus paršeliai, spontaniškai užsikrėtę askaridėmis buvo atskirti ir laikomi specialiai įrengtame vivariume, narveliuose po vieną. Tiriamuosius preparatus įvesdavo individualiai peroraliai dozėmis po 5; 25 arba 50 mg/kg gyvulio masės ir po jų įvedimo kasdien tyrinėjo fekalijas ir skaičiavo išsiskyrusias žuvusias askarides.
[0043] Po tiriamųjų preparatų įvedimo nebuvo pastebėta jokių nukrypimų nuo fiziologinės normos. Gyvuliai gerai ėdė pašarą ir gėrė vandenį.
[0044] Atlikti tyrimai rodo, kad 5-arilalkiloksibenzimidazol-2-il-karbamino rūgščių metilo esteriai - yra netoksiški preparatai, turintys aukštą antihelmintinį aktyvumą. Šios grupės naujų junginių tyrimai pateikti žemiau 5- 10 lentelėse.
[0045] 5 Lentelė. ( I) Formulės junginių toksiškumo tyrimų rezultatai
[0046]
1. 5-Pakeisti arilaIkiloksibenzimidazol-2-ilkarbamino rūgščių metilo esteriai, bendros struktūrinės (I) formulės:
2. 5-Pakeisti arilalkiloksibenzimidazol-2-ilkarbamino rūgščių metilo esteriai pagal 1 punktą, skirti naudoti medicinoje ir veterinarijoje kaip antihelmintikai.
3. 5-Pakeisti arilalkiloksibenzimidazol-2-ilkarbamino rūgščių metilo esteriai pagal 1 ir 2 punktus, besiskiriantys tuo, kad nesukelia nukrypimų nuo fiziologinės normos dozėse iki 4000 mg/kg .